產品(pin)名稱(cheng)：單克隆(long)抗體制備

單克隆(long)抗體制備是(shi)針(zhen)專(zhuan)壹的(de)抗原決定簇產生的抗體，單克隆(long)技(ji)術(shu)又(you)名雜交(jiao)瘤(liu)技(ji)術(shu)起(qi)源(yuan)於1975年，由(you)G.KÖhler和(he)Milstein創(chuang)立。主(zhu)要原理(li)是(shi)利(li)用(yong)產生抗體的B細(xi)胞(bao)與(yu)腫(zhong)瘤(liu)細(xi)胞(bao)雜交(jiao)融合(he)成雜交(jiao)瘤(liu)細胞(bao)，生產抗體。

雜交(jiao)瘤(liu)技(ji)術(shu)制備單克隆(long)抗是(shi)針(zhen)對體的主(zhu)要步驟包(bao)括(kuo)：

(1)抗原制備;

(2)**動物(wu);

(3)**脾(pi)細胞和(he)骨(gu)髓瘤細胞的(de)制備;

(4)細(xi)胞(bao)融合(he);

(5)雜交(jiao)瘤(liu)細胞(bao)的選擇(ze)培養(yang);

(6)雜交(jiao)瘤(liu)細胞(bao)的篩(shai)選(xuan);

(7)雜交(jiao)瘤(liu)細胞(bao)的克隆(long)化(hua);

(8)單克隆(long)抗體的檢定;

(9)分泌(mi)單克隆(long)抗體雜交(jiao)瘤(liu)細胞(bao)系的建(jian)立;

(10)單克隆(long)抗體的大(da)量制備。

下(xia)面(mian)簡要介紹(shao)單克隆(long)抗體制備過(guo)程：

1、**動物(wu) **動物(wu)是(shi)用(yong)目的(de)抗原**小鼠(shu)，使小鼠(shu)產生致敏B**細(xi)胞的 過程。 壹般(ban)選用6-8周齡雌性(xing)Balb/c小鼠(shu)，按照(zhao)預先(xian)制定的**方(fang)案進行(xing)**註射(she)。 抗原通過(guo)血液(ye)循(xun)環或(huo)**循(xun)環進(jin)入(ru)外周(zhou)**器(qi)官(guan)，刺激相(xiang)應B**細(xi)胞克隆(long)，使其活化、增(zeng)殖(zhi)，並分(fen)化(hua)成為(wei)致敏B**細(xi)胞。

2、細胞融合(he) 采(cai)用(yong)眼球(qiu)摘(zhai)除放(fang)血法(fa)處(chu)死(si)小鼠(shu)，無菌(jun)操(cao)作(zuo)取出脾(pi)臟，在平皿(min)內(nei)擠(ji)壓研磨，制備脾(pi)細胞懸(xuan)液(ye)。 將準(zhun)備(bei)好的(de)同(tong)系骨髓瘤細胞與(yu)小鼠(shu)脾(pi)細胞按壹定比(bi)例混合(he)，並加入促融合(he)劑聚(ju)乙(yi)二(er)醇。在聚乙(yi)二(er)醇作用(yong)下，各種**細(xi)胞(bao)可與(yu)骨(gu)髓瘤細胞發(fa)生融合(he)，形成雜交(jiao)瘤(liu)細胞(bao)。

3、選擇(ze)性培養(yang) 選(xuan)擇(ze)性培養(yang)的(de)目的(de)是(shi)篩(shai)選(xuan)融合(he)的雜交(jiao)瘤(liu)細胞(bao)，單克隆(long)抗體制備壹般(ban)采(cai)用(yong)HAT選擇(ze)性培養(yang)基。在HAT培養(yang)基中(zhong)，未(wei)融合(he)的骨(gu)髓瘤細胞因(yin)缺乏(fa)次(ci)黃嘌(piao)呤-鳥(niao)嘌(piao)呤-磷酸(suan)核(he)糖轉(zhuan)移酶(mei)，不(bu)能(neng)利用(yong)補(bu)救(jiu)途徑合(he)成DNA而死(si)亡(wang)。 未融合(he)的**細(xi)胞雖(sui)具有(you)次(ci)黃嘌(piao)呤-鳥(niao)嘌(piao)呤-磷酸(suan)核(he)糖轉(zhuan)移酶(mei)，但(dan)其本(ben)身不能(neng)在體外長(chang)期(qi)存活也逐(zhu)漸(jian)死(si)亡(wang)。 只有(you)融合(he)的雜交(jiao)瘤(liu)細胞(bao)由(you)於從脾(pi)細胞獲(huo)得(de)了次(ci)黃嘌(piao)呤鳥(niao)嘌(piao)呤磷酸(suan)核(he)糖轉(zhuan)移酶(mei)，並(bing)具有(you)骨髓瘤細胞能(neng)無限增(zeng)殖(zhi)的特性，因(yin)此(ci)能(neng)在HAT培養(yang)基中(zhong)存(cun)活和(he)增(zeng)殖(zhi)。

4、雜交(jiao)瘤(liu)陽(yang)性(xing)克隆(long)的(de)篩(shai)選(xuan)與(yu)克(ke)隆(long)化(hua) 在HAT培養(yang)基中(zhong)生長的雜交(jiao)瘤(liu)細胞(bao)，單克隆(long)抗體制備只(zhi)有(you)少(shao)數(shu)是(shi)分(fen)泌(mi)預(yu)定特異性(xing)單克隆(long)抗體的細(xi)胞(bao)，因(yin)此(ci)，必須(xu)進(jin)行(xing)篩(shai)選(xuan)和(he)克(ke)隆(long)化(hua)。通常(chang)采(cai)用(yong)有限稀(xi)釋法(fa)進(jin)行(xing)雜交(jiao)瘤(liu)細胞(bao)的克隆(long)化(hua)培養(yang)。采(cai)用(yong)靈(ling)敏、快速、特異的(de)**學(xue)方(fang)法，篩(shai)選(xuan)出(chu)能(neng)產生所(suo)需單克隆(long)抗體的陽(yang)性(xing)雜交(jiao)瘤(liu)細胞(bao)，並進行(xing)克隆(long)擴(kuo)增。經(jing)過**鑒(jian)定其所(suo)分(fen)泌(mi)單克隆(long)抗體的**球(qiu)蛋(dan)白類(lei)型、亞(ya)類(lei)、特異性(xing)、親(qin)和(he)力(li)、識別(bie)抗原的表位(wei)及(ji)其(qi)分(fen)子量(liang)後，及(ji)時(shi)進(jin)行(xing)凍存(cun)。

5、單克隆(long)抗體的大(da)量制備 單克隆(long)抗體的大(da)量制備重要采(cai)用(yong)動物(wu)體內(nei)誘(you)生法和(he)體(ti)外培(pei)養(yang)法(fa)。

豬(zhu)末(mo)端(duan)補(bu)體(ti)復合(he)體C5b-9(C5b-9)ELISA試(shi)劑盒 porcine Terminal Complement Complex C5b-9 (C5b-9) ELISA Kit 0.781-50ng/mL 0.32ng/mL 試劑應從靈(ling)敏度(du)、特異性(xing)、精(jing)密(mi)度(du)、穩(wen)定性、簡便性(xing)、**性及(ji)經(jing)濟(ji)性**評(ping)價。
豬(zhu)**球(qiu)蛋(dan)白G(IgG)ELISA試劑盒(he) porcine Immunoglobulin G (IgG) ELISA Kit 1.23-100ug/mL 0.53ug/mL 試(shi)劑(ji)應從靈(ling)敏度(du)、特異性(xing)、精(jing)密(mi)度(du)、穩(wen)定性、簡便性(xing)、**性及(ji)經(jing)濟(ji)性**評(ping)價。
豬(zhu)**球(qiu)蛋(dan)白E(IgE)ELISA試劑盒(he) porcine Immunoglobulin E (IgE) ELISA Kit 0.156-10ng/mL 0.066ng/mL 試(shi)劑(ji)應從靈(ling)敏度(du)、特異性(xing)、精(jing)密(mi)度(du)、穩(wen)定性、簡便性(xing)、**性及(ji)經(jing)濟(ji)性**評(ping)價。
豬(zhu)**球(qiu)蛋(dan)白A(IgA)ELISA試劑盒(he) porcine Immunoglobulin A (IgA) ELISA Kit 31.25-2000pg/mL 13.2pg/mL 試(shi)劑(ji)應從靈(ling)敏度(du)、特異性(xing)、精(jing)密(mi)度(du)、穩(wen)定性、簡便性(xing)、**性及(ji)經(jing)濟(ji)性**評(ping)價。
豬(zhu)類(lei)胰蛋(dan)白酶(TPS)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) porcine Tryptase (TPS) ELISA Kit 0.313-20ng/mL 0.123ng/mL 試(shi)劑(ji)應(ying)從靈(ling)敏度(du)、特異性(xing)、精(jing)密(mi)度(du)、穩(wen)定性、簡便性(xing)、**性及(ji)經(jing)濟(ji)性**評(ping)價。
豬(zhu)顆粒酶(mei)M(GZMM)ELISA試(shi)劑盒(he) porcine Granzyme M (GZMM) ELISA Kit 15.625-1000 pg/mL 8.9 pg/mL 試劑應從靈(ling)敏度(du)、特異性(xing)、精(jing)密(mi)度(du)、穩(wen)定性、單克隆(long)抗體制備簡便性(xing)、**性及(ji)經(jing)濟(ji)性**評(ping)價。
豬(zhu)抗神經(jing)節苷脂M1抗體(Anti-GM1)ELISA試劑(ji)盒(he) porcine Anti-Ganglioside M1 Antibody (Anti-GM1) ELISA Kit 3.125-200 U/L 1.3 U/L 試(shi)劑(ji)應從靈(ling)敏度(du)、特異性(xing)、精(jing)密(mi)度(du)、穩(wen)定性、簡便性(xing)、**性及(ji)經(jing)濟(ji)性**評(ping)價。
豬(zhu)抗繆勒管(guan)**(AMH)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) porcine Anti-Mullerian Hormone (AMH) ELISA Kit 0.156-10 ng/mL 0.041 ng/mL 試(shi)劑應從靈(ling)敏度(du)、特異性(xing)、精(jing)密(mi)度(du)、穩(wen)定性、簡便性(xing)、**性及(ji)經(jing)濟(ji)性**評(ping)價。
豬(zhu)巨(ju)噬細胞炎(yan)性蛋(dan)白3β(MIP3β)ELISA試(shi)劑盒 porcine Macrophage Inflammatory Protein 3 Beta (MIP3b) ELISA Kit 15.625-1000 pg/mL 7.4 pg/mL 試劑(ji)應(ying)從靈(ling)敏度(du)、特異性(xing)、精(jing)密(mi)度(du)、穩(wen)定性、簡便性(xing)、**性及(ji)經(jing)濟(ji)性**評(ping)價。
豬(zhu)巨(ju)噬細胞炎(yan)性蛋(dan)白3α(MIP3α)ELISA試(shi)劑盒 porcine Macrophage Inflammatory Protein 3 Alpha (MIP3a) ELISA Kit 15.625-1000 pg/mL 4.9 pg/mL 試劑(ji)應(ying)從靈(ling)敏度(du)、特異性(xing)、精(jing)密(mi)度(du)、穩(wen)定性、簡便性(xing)、**性及(ji)經(jing)濟(ji)性**評(ping)價。
豬(zhu)巨(ju)噬細胞炎(yan)性蛋(dan)白1β(MIP1β)ELISA試(shi)劑盒 porcine Macrophage Inflammatory Protein 1 Beta (MIP1b) ELISA Kit 31.25-2000 pg/mL 12.7 pg/mL 試劑(ji)應(ying)從靈(ling)敏度(du)、特異性(xing)、精(jing)密(mi)度(du)、穩(wen)定性、簡便性(xing)、**性及(ji)經(jing)濟(ji)性**評(ping)價。
豬(zhu)睫狀神(shen)經(jing)營養(yang)因(yin)子(CNTF)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) porcine Ciliary Neurotrophic Factor (CNTF) ELISA Kit 62.5-4000pg/mL 22.4pg/mL 試劑(ji)應從靈(ling)敏度(du)、特異性(xing)、精(jing)密(mi)度(du)、穩(wen)定性、簡便性(xing)、**性及(ji)經(jing)濟(ji)性**評(ping)價。
豬(zhu)結(jie)合(he)珠蛋白(bai)(Hpt)ELISA試劑盒 porcine Haptoglobin (Hpt) ELISA Kit 78.125-5000ng/mL 25.5ng/mL 試劑(ji)應從靈(ling)敏度(du)、特異性(xing)、精(jing)密(mi)度(du)、穩(wen)定性、簡便性(xing)、**性及(ji)經(jing)濟(ji)性**評(ping)價。
豬(zhu)結(jie)締(di)組織(zhi)生長因子(CTGF)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) porcine Connective Tissue Growth Factor (CTGF) ELISA Kit 0.625-40ng/mL 0.242ng/mL 試劑(ji)應從靈(ling)敏度(du)、特異性(xing)、精(jing)密(mi)度(du)、穩(wen)定性、簡便性(xing)、**性及(ji)經(jing)濟(ji)性**評(ping)價。