產品(pin)名稱(cheng)：MCF 10A (人(ren)正(zheng)常(chang)乳腺(xian)上(shang)皮細胞）

MCF 10A (人(ren)正(zheng)常(chang)乳腺(xian)上(shang)皮細胞）

細(xi)胞名稱(cheng)：MCF 10A    人(ren)正(zheng)常(chang)乳腺(xian)上(shang)皮細胞

培(pei)養條件：DMEM/F12 +5% HS+20ng/ml EGF+0.5ug/ml氫化(hua)可(ke)的(de)松(song)+10ug/ml胰島(dao)素+1%NEAA+1%P/S

形(xing)　　態(tai)：貼壁(bi)；上皮細胞樣(yang)

MCF 10A (人(ren)正(zheng)常(chang)乳腺(xian)上(shang)皮細胞）操(cao)作說明(ming)：

1)對於(yu)常(chang)溫(wen)運(yun)輸的(de)細(xi)胞，收(shou)到細胞後(hou)，檢(jian)查是否(fou)有運(yun)輸問(wen)題(ti)，即細胞培(pei)養瓶或管是(shi)否(fou)破損(sun)，細胞培(pei)養液是否溢出(chu)。若沒(mei)有運(yun)輸問(wen)題(ti)，請(qing)75%酒(jiu)精**後，保留封(feng)口(kou)膜，放入(ru)細(xi)胞培(pei)養箱中(zhong)靜置。嚴格檢(jian)查培養(yang)箱的(de)參(can)數：溫(wen)度(du)，濕度和(he)CO2濃(nong)度。細(xi)胞靜置時(shi)間(jian)壹般為(wei)6-12小時(shi)後(hou)，細胞狀(zhuang)態(tai)穩定(ding)後，即可開始後續(xu)操(cao)作(zuo)。選(xuan)用正(zheng)確的(de)細(xi)胞培(pei)養體(ti)系，MCF 10A (人(ren)正(zheng)常(chang)乳腺(xian)上(shang)皮細胞）嚴格按(an)照說明(ming)書的(de)培(pei)養條件進(jin)行(xing)培養。條件(jian)允(yun)許(xu)，培(pei)養的(de)前(qian)三(san)天(tian)內(nei)做(zuo)細胞拍照記(ji)錄，通過郵件(jian)發送給我(wo)們(men)做(zuo)及(ji)時(shi)狀(zhuang)態(tai)跟(gen)蹤。

2)對於(yu)幹冰(bing)運(yun)輸的(de)細(xi)胞，請(qing)取(qu)出(chu)冷凍管後(hou)，須(xu)立(li)即放入(ru)37C水槽(cao)中快(kuai)速解凍，輕搖(yao)冷凍管使(shi)其在1分(fen)鐘內(nei)全部融化，並(bing)註(zhu)意(yi)水面(mian)不可超過冷凍管蓋(gai)沿(yan)，否(fou)則易發生汙染(ran)情形。然(ran)後將(jiang)其復蘇(su)培養(yang)，次日(ri)更換(huan)培養(yang)液。

MCF 10A (人(ren)正(zheng)常(chang)乳腺(xian)上(shang)皮細胞）註(zhu)意(yi)事(shi)項：

1)細胞漂(piao)浮：培養(yang)瓶不(bu)開封，瓶口酒(jiu)精擦拭(shi)後(hou)平(ping)躺(tang)放置在(zai)培(pei)養箱。次(ci)日(ri)觀察(cha)，如細胞大(da)部分(fen)又貼回(hui)瓶(ping)底(di)，表明細(xi)胞活力正(zheng)常(chang)，剩(sheng)余(yu)漂(piao)浮的(de)細(xi)胞可(ke)以(yi)離心去掉，留10ml培養(yang)液培養觀察(cha)，細胞生(sheng)長至(zhi)匯合度80%，進行(xing)消化(hua)傳(chuan)代；如細胞還(hai)是不貼壁(bi)，將(jiang)細(xi)胞離(li)心收集(ji)轉到新(xin)培(pei)養瓶(ping)，原培(pei)養瓶(ping)加部分(fen)培養(yang)液繼續(xu)培(pei)養(yang)，中(zhong)間註意(yi)觀察(cha)，我(wo)們(men)的(de)技(ji)術人(ren)員(yuan)會(hui)壹(yi)直跟(gen)蹤指導(dao)，直到(dao)問題解決(jue)。

2)對於(yu)生長緩(huan)慢(man)的(de)貼壁(bi)細胞：可(ke)采用適(shi)當(dang)的(de)提(ti)高(gao)培養(yang)基中血清濃(nong)度，或(huo)隔日(ri)換(huan)液的(de)方(fang)法來保證細(xi)胞的(de)狀(zhuang)態(tai)和(he)生(sheng)長速(su)度。

3)對於(yu)生長不(bu)均的(de)貼壁(bi)細胞：在(zai)培養過程(cheng)中若(ruo)出(chu)現細(xi)胞分(fen)布明(ming)顯(xian)不均(jun)時(shi)（即某壹區(qu)域細(xi)胞已重疊生(sheng)長，而(er)旁邊則為(wei)壹塊(kuai)空白(bai)），此(ci)時(shi)可(ke)將(jiang)細(xi)胞進(jin)行消化，重新打(da)散，貼壁(bi)，加入(ru)新(xin)培養(yang)基(ji)進行培(pei)養。 

MCF 10A (人(ren)正(zheng)常(chang)乳腺(xian)上(shang)皮細胞）下面介(jie)紹幾(ji)種(zhong)細胞培(pei)養過程(cheng)中常(chang)見(jian)的(de)汙染(ran)：

壹)桿菌汙染(ran)：培(pei)養(yang)基(ji)中(zhong)加入(ru)***可(ke)以(yi)減少(shao)此(ci)種(zhong)汙染(ran)，但(dan)也不(bu)是(shi)**的(de)。

二)支原(yuan)體(ti)汙染(ran)：傳(chuan)說中(zhong)的(de)黑(hei)焦(jiao)蟲，長得(de)暴(bao)快。24小時(shi)就(jiu)滿(man)視(shi)野(ye)都是了(le)。汙染(ran)源(yuan)大(da)多數情況下是培養(yang)用(yong)血清(qing)。

三(san))***汙染(ran)：似(si)乎無處(chu)不(bu)在，而(er)且頑(wan)固(gu)得很(hen)。長得(de)暴(bao)快(12h就(jiu)能在(zai)細(xi)胞上(shang)面密布)。培養(yang)液澄清。低(di)倍(bei)顯(xian)微(wei)鏡(jing)下像黑(hei)色的(de)沙(sha)子鋪在細胞上(shang)，高(gao)倍(bei)鏡(jing)下呈樹枝(zhi)狀(zhuang)或葡萄狀。

四)黴菌汙染(ran)、比(bi)較(jiao)常(chang)見(jian)的(de)壹(yi)種汙染(ran)，常(chang)常(chang)來源(yuan)於(yu)汙染(ran)的(de)空(kong)氣、水和(he)器(qi)械(xie)。