產品名稱(cheng)：BV2(小(xiao)鼠(shu)小(xiao)膠(jiao)質(zhi)細(xi)胞(bao))

BV2(小(xiao)鼠(shu)小(xiao)膠(jiao)質(zhi)細(xi)胞(bao))

細胞(bao)名稱(cheng)：BV2     小(xiao)鼠(shu)小(xiao)膠(jiao)質(zhi)細(xi)胞(bao)

培養條(tiao)件：MEM +10% FBS

形       態：貼(tie)壁(bi)；上(shang)皮(pi)細胞(bao)樣(yang)

背(bei)       景(jing)：BV-2由E.Blasi年(nian)建(jian)立(li)於1990年(nian)。該細胞(bao)由小(xiao)鼠(shu)小(xiao)神(shen)經(jing)膠(jiao)質細胞(bao)經(jing)逆(ni)轉錄病(bing)毒(du)介導(dao)轉染(ran)v-raf/v-myc獲永(yong)生化(hua)。該細胞(bao)系保留(liu)有(you)小(xiao)神(shen)經(jing)膠(jiao)質細胞(bao)多種形態，表征，和功(gong)能特(te)征(zheng)。**組化結果顯(xian)示(shi)細(xi)胞(bao)為MAC1,MAC2陽(yang)性(xing)，而(er)MAC3，膠(jiao)質(zhi)細(xi)胞(bao)原纖維(wei)酸(suan)性(xing)蛋白，半乳(ru)糖腦(nao)苷(gan)脂為陰性

BV2(小(xiao)鼠(shu)小(xiao)膠(jiao)質(zhi)細(xi)胞(bao))操作說(shuo)明(ming)：

1)對(dui)於常(chang)溫運(yun)輸的(de)細胞(bao)，收(shou)到(dao)細(xi)胞(bao)後(hou)，檢(jian)查(zha)是(shi)否有(you)運(yun)輸問題，即(ji)細胞(bao)培養瓶(ping)或管是(shi)否破損，細(xi)胞(bao)培養液(ye)是(shi)否溢出(chu)。若沒(mei)有(you)運(yun)輸問題，請(qing)75%酒精(jing)**後(hou)，保留(liu)封口膜(mo)，放入細胞(bao)培養箱(xiang)中靜(jing)置(zhi)。嚴格檢(jian)查(zha)培養箱(xiang)的(de)參數(shu)：溫度(du)，濕(shi)度(du)和(he)CO2濃度(du)。細(xi)胞(bao)靜(jing)置(zhi)時間(jian)壹般(ban)為(wei)6-12小(xiao)時後(hou)，細胞(bao)狀態穩(wen)定(ding)後(hou)，即(ji)可開(kai)始後(hou)續(xu)操作(zuo)。選用正確(que)的(de)細胞(bao)培養體(ti)系，BV2(小(xiao)鼠(shu)小(xiao)膠(jiao)質(zhi)細(xi)胞(bao))嚴格按(an)照說(shuo)明(ming)書的(de)培養條(tiao)件進行(xing)培養。條(tiao)件允許(xu)，培養的(de)前(qian)三天內(nei)做(zuo)細胞(bao)拍照記(ji)錄，通(tong)過(guo)郵件發送給(gei)我(wo)們(men)做(zuo)及(ji)時狀態(tai)跟蹤(zong)。

2)對(dui)於幹(gan)冰(bing)運(yun)輸的(de)細胞(bao)，請(qing)取(qu)出(chu)冷(leng)凍管後(hou)，須(xu)立(li)即(ji)放入(ru)37C水(shui)槽(cao)中快速(su)解(jie)凍，輕(qing)搖(yao)冷凍(dong)管使其(qi)在1分鐘(zhong)內全(quan)部(bu)融(rong)化，並(bing)註意(yi)水(shui)面(mian)不可超(chao)過(guo)冷(leng)凍(dong)管蓋(gai)沿，否則易(yi)發生汙(wu)染(ran)情形。然後(hou)將其(qi)復蘇(su)培養，次(ci)日更換(huan)培養液(ye)。

BV2(小(xiao)鼠(shu)小(xiao)膠(jiao)質(zhi)細(xi)胞(bao))註意(yi)事(shi)項：

1)細胞(bao)漂(piao)浮(fu)：培養瓶(ping)不開(kai)封，瓶口酒精(jing)擦拭(shi)後(hou)平躺(tang)放置在培養箱(xiang)。次日(ri)觀(guan)察(cha)，如細(xi)胞(bao)大部分又貼(tie)回(hui)瓶(ping)底，表明細胞(bao)活力(li)正常(chang)，剩余(yu)漂(piao)浮(fu)的(de)細胞(bao)可以(yi)離心(xin)去(qu)掉(diao)，留(liu)10ml培養液(ye)培養觀(guan)察(cha)，細胞(bao)生長至(zhi)匯合(he)度(du)80%，進(jin)行(xing)消化(hua)傳代；如細胞(bao)還是(shi)不(bu)貼(tie)壁(bi)，將(jiang)細(xi)胞(bao)離心(xin)收(shou)集轉到(dao)新(xin)培養瓶(ping)，原培養瓶(ping)加部(bu)分培養液(ye)繼續(xu)培養，中(zhong)間(jian)註意(yi)觀(guan)察(cha)，我們(men)的(de)技術人(ren)員會壹(yi)直跟(gen)蹤(zong)指導(dao)，直到(dao)問題解(jie)決。

2)對(dui)於生(sheng)長(chang)緩慢的(de)貼(tie)壁(bi)細(xi)胞(bao)：可采用(yong)適(shi)當(dang)的(de)提(ti)高(gao)培養基(ji)中(zhong)血清濃(nong)度(du)，或(huo)隔(ge)日換(huan)液(ye)的(de)方法(fa)來(lai)保證(zheng)細(xi)胞(bao)的(de)狀態和生長速(su)度(du)。

3)對(dui)於生(sheng)長(chang)不均的(de)貼(tie)壁(bi)細(xi)胞(bao)：在培養過(guo)程中若出(chu)現(xian)細胞(bao)分布(bu)明顯(xian)不均時（即(ji)某壹(yi)區(qu)域(yu)細胞(bao)已重(zhong)疊生(sheng)長，而旁邊則為壹(yi)塊空(kong)白(bai)），此時可將(jiang)細胞(bao)進行(xing)消化(hua)，重(zhong)新(xin)打散，貼(tie)壁(bi)，加(jia)入(ru)新(xin)培養基(ji)進(jin)行(xing)培養。 

BV2(小(xiao)鼠(shu)小(xiao)膠(jiao)質(zhi)細(xi)胞(bao))下面介(jie)紹(shao)幾(ji)種細(xi)胞(bao)培養過(guo)程中常(chang)見的(de)汙(wu)染(ran)：

壹(yi))桿菌汙(wu)染(ran)：培養基(ji)中(zhong)加入***可(ke)以(yi)減(jian)少此(ci)種(zhong)汙(wu)染(ran)，但(dan)也(ye)不(bu)是(shi)**的(de)。

二)支(zhi)原體汙(wu)染(ran)：傳說(shuo)中(zhong)的(de)黑焦蟲(chong)，長(chang)得暴(bao)快。24小(xiao)時就滿(man)視野(ye)都(dou)是(shi)了(le)。汙(wu)染(ran)源(yuan)大(da)多數(shu)情況下(xia)是(shi)培養用(yong)血清(qing)。

三)***汙(wu)染(ran)：似(si)乎無(wu)處不(bu)在，而(er)且(qie)頑固(gu)得很(hen)。長得暴(bao)快(12h就能在細(xi)胞(bao)上面密(mi)布(bu))。培養液(ye)澄清。低(di)倍顯(xian)微鏡(jing)下(xia)像黑色(se)的(de)沙子鋪(pu)在細(xi)胞(bao)上，高(gao)倍鏡(jing)下呈(cheng)樹(shu)枝(zhi)狀或(huo)葡(pu)萄狀(zhuang)。

四)黴(mei)菌汙(wu)染(ran)、比(bi)較(jiao)常(chang)見的(de)壹種汙(wu)染(ran)，常(chang)常(chang)來源(yuan)於汙(wu)染(ran)的(de)空氣(qi)、水(shui)和(he)器(qi)械。