產(chan)品名(ming)稱(cheng)：TE671 subline No.2(人(ren)橫(heng)紋(wen)肌(ji)肉(rou)瘤細(xi)胞(bao))

TE671 subline No.2(人橫(heng)紋肌(ji)肉(rou)瘤細(xi)胞(bao))

細(xi)胞(bao)名(ming)稱(cheng)：TE671 subline No.2     人(ren)橫(heng)紋(wen)肌(ji)肉(rou)瘤細(xi)胞(bao)

培(pei)養(yang)條件(jian)：DMEM +10% FBS

形(xing)       態：貼(tie)壁(bi)；上(shang)皮細(xi)胞(bao)樣(yang)

TE671 subline No.2(人橫(heng)紋肌(ji)肉(rou)瘤細(xi)胞(bao))操(cao)作說(shuo)明：

1)對於常(chang)溫(wen)運輸的細(xi)胞(bao)，收(shou)到細(xi)胞(bao)後(hou)，檢(jian)查是否(fou)有(you)運(yun)輸問題，即(ji)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)瓶(ping)或管(guan)是否(fou)破(po)損(sun)，細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)液是否(fou)溢(yi)出。若沒有(you)運(yun)輸問題，請75%酒精(jing)**後(hou)，保留(liu)封(feng)口膜(mo)，放入細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)箱中(zhong)靜置。嚴(yan)格檢(jian)查培(pei)養(yang)箱的參(can)數：溫(wen)度(du)，濕(shi)度(du)和(he)CO2濃度(du)。細(xi)胞(bao)靜置時間壹般為6-12小時後(hou)，細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態穩(wen)定後(hou)，即(ji)可(ke)開始後(hou)續(xu)操作(zuo)。選用正(zheng)確(que)的細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)體系(xi)，TE671 subline No.2(人(ren)橫(heng)紋肌(ji)肉(rou)瘤細(xi)胞(bao))嚴(yan)格按(an)照說明(ming)書(shu)的培養(yang)條件(jian)進行培養(yang)。條件(jian)允(yun)許(xu)，培(pei)養(yang)的前三(san)天內(nei)做(zuo)細(xi)胞(bao)拍(pai)照記(ji)錄，通過(guo)郵(you)件發送給(gei)我(wo)們(men)做(zuo)及時狀(zhuang)態跟(gen)蹤。

2)對(dui)於幹(gan)冰(bing)運(yun)輸的細(xi)胞(bao)，請(qing)取出(chu)冷凍管(guan)後(hou)，須(xu)立(li)即(ji)放(fang)入37C水(shui)槽中(zhong)快(kuai)速(su)解凍，輕搖冷凍管(guan)使(shi)其(qi)在1分(fen)鐘內(nei)全部(bu)融(rong)化，並(bing)註意(yi)水(shui)面(mian)不(bu)可(ke)超(chao)過(guo)冷凍管(guan)蓋(gai)沿，否(fou)則(ze)易發(fa)生汙染情(qing)形(xing)。然後(hou)將其(qi)復(fu)蘇(su)培(pei)養(yang)，次日(ri)更(geng)換(huan)培養(yang)液。

TE671 subline No.2(人(ren)橫紋肌(ji)肉(rou)瘤細(xi)胞(bao))註意(yi)事(shi)項(xiang)：

1)細(xi)胞(bao)漂(piao)浮：培(pei)養(yang)瓶(ping)不開封(feng)，瓶(ping)口酒精(jing)擦(ca)拭後(hou)平躺(tang)放置在培養(yang)箱。次(ci)日(ri)觀(guan)察(cha)，如(ru)細(xi)胞(bao)大(da)部(bu)分(fen)又(you)貼(tie)回瓶(ping)底，表明細(xi)胞(bao)活(huo)力(li)正常(chang)，剩余漂浮的細(xi)胞(bao)可(ke)以離(li)心去(qu)掉(diao)，留(liu)10ml培(pei)養(yang)液培(pei)養(yang)觀察(cha)，細(xi)胞(bao)生長(chang)至匯合(he)度(du)80%，進行消(xiao)化(hua)傳代(dai)；如(ru)細(xi)胞(bao)還(hai)是不貼(tie)壁(bi)，將(jiang)細(xi)胞(bao)離(li)心收(shou)集(ji)轉到新培養(yang)瓶(ping)，原(yuan)培(pei)養(yang)瓶(ping)加部(bu)分(fen)培養(yang)液繼(ji)續(xu)培養(yang)，中(zhong)間註意(yi)觀(guan)察(cha)，我們(men)的技術人員(yuan)會(hui)壹直跟(gen)蹤指(zhi)導(dao)，直到問題解決。

2)對於(yu)生長(chang)緩(huan)慢(man)的貼(tie)壁(bi)細(xi)胞(bao)：可(ke)采用(yong)適(shi)當的提高(gao)培養(yang)基中(zhong)血(xue)清(qing)濃度(du)，或(huo)隔日(ri)換(huan)液的方法(fa)來保(bao)證(zheng)細(xi)胞(bao)的狀(zhuang)態和生長(chang)速(su)度(du)。

3)對(dui)於生長(chang)不(bu)均的貼(tie)壁(bi)細(xi)胞(bao)：在(zai)培養(yang)過(guo)程中(zhong)若出(chu)現細(xi)胞(bao)分(fen)布(bu)明顯(xian)不均時（即(ji)某壹區(qu)域細(xi)胞(bao)已重(zhong)疊生長(chang)，而(er)旁(pang)邊(bian)則(ze)為壹塊(kuai)空(kong)白(bai)），此時可將細(xi)胞(bao)進行消(xiao)化(hua)，重(zhong)新打散(san)，貼(tie)壁(bi)，加(jia)入(ru)新培養(yang)基進行培養(yang)。 

TE671 subline No.2(人(ren)橫(heng)紋肌(ji)肉(rou)瘤細(xi)胞(bao))下面(mian)介紹幾(ji)種(zhong)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)過(guo)程中(zhong)常(chang)見(jian)的汙染：

壹)桿菌汙染：培養(yang)基中(zhong)加(jia)入(ru)***可(ke)以減(jian)少此種(zhong)汙染，但也不(bu)是**的。

二)支原(yuan)體(ti)汙染：傳說(shuo)中(zhong)的黑焦蟲(chong)，長(chang)得(de)暴(bao)快。24小時就(jiu)滿視野(ye)都(dou)是了(le)。汙染源大(da)多(duo)數情(qing)況(kuang)下是培養(yang)用血(xue)清(qing)。

三)***汙染：似乎(hu)無(wu)處(chu)不在(zai)，而(er)且(qie)頑(wan)固(gu)得很。長(chang)得(de)暴(bao)快(12h就(jiu)能在(zai)細(xi)胞(bao)上(shang)面(mian)密(mi)布(bu))。培(pei)養(yang)液澄(cheng)清(qing)。低(di)倍顯(xian)微(wei)鏡(jing)下像黑色的沙(sha)子鋪在(zai)細(xi)胞(bao)上(shang)，高(gao)倍(bei)鏡(jing)下呈(cheng)樹枝(zhi)狀(zhuang)或葡(pu)萄(tao)狀(zhuang)。

四)黴菌汙染、比較(jiao)常見(jian)的壹種(zhong)汙染，常常(chang)來源(yuan)於汙染的空氣(qi)、水(shui)和(he)器械。