產品(pin)名稱：PC-12(高分(fen)化(hua))(大(da)鼠(shu)腎上腺嗜鉻(ge)細胞(bao)瘤細(xi)胞(bao)(高分(fen)化(hua)))

PC-12(高分(fen)化(hua))(大(da)鼠(shu)腎上腺嗜鉻(ge)細胞(bao)瘤細(xi)胞(bao)(高分(fen)化(hua)))

細(xi)胞(bao)名稱(cheng)：PC-12(高分(fen)化(hua))    大(da)鼠(shu)腎上腺嗜鉻(ge)細胞(bao)瘤細(xi)胞(bao)(高分(fen)化(hua))

組(zu)織(zhi)來(lai)源(yuan)：腎上腺嗜鉻(ge)細胞(bao)瘤

培(pei)養條件(jian)：RPMI-1640 +10% FBS

形       態(tai)：貼(tie)壁(bi)；多角形

背       景：該(gai)細(xi)胞(bao)系來自(zi)能移(yi)植的雄性大(da)鼠(shu)腎上腺嗜鉻(ge)細胞(bao)瘤。這些(xie)細(xi)胞表(biao)達神(shen)經生長因(yin)子(NGF)受體。NGF可(ke)誘導(dao)產生神經(jing)表(biao)型。這些(xie)細(xi)胞不合(he)成腎上腺素。

PC-12(高分(fen)化(hua))(大(da)鼠(shu)腎上腺嗜鉻(ge)細胞(bao)瘤細(xi)胞(bao)(高分(fen)化(hua)))操(cao)作(zuo)說(shuo)明：

1)對(dui)於常(chang)溫(wen)運(yun)輸的細(xi)胞(bao)，收到(dao)細胞(bao)後，檢(jian)查(zha)是否(fou)有(you)運輸(shu)問(wen)題，即(ji)細(xi)胞培(pei)養瓶或管是否(fou)破損(sun)，細(xi)胞(bao)培(pei)養液(ye)是否(fou)溢(yi)出。若(ruo)沒有(you)運輸(shu)問(wen)題，請(qing)75%酒(jiu)精(jing)**後，保(bao)留(liu)封口膜(mo)，放入(ru)細胞培(pei)養箱中靜(jing)置(zhi)。嚴格(ge)檢查(zha)培(pei)養箱的參(can)數：溫度(du)，濕度(du)和CO2濃(nong)度(du)。細胞靜(jing)置(zhi)時間(jian)壹(yi)般(ban)為6-12小(xiao)時後(hou)，細(xi)胞(bao)狀態(tai)穩(wen)定後，即可(ke)開始(shi)後(hou)續操作。選用(yong)正(zheng)確(que)的細(xi)胞(bao)培(pei)養體系，PC-12(高分(fen)化(hua))(大(da)鼠(shu)腎上腺嗜鉻(ge)細胞(bao)瘤細(xi)胞(bao)(高分(fen)化(hua)))嚴(yan)格(ge)按照(zhao)說(shuo)明書的培(pei)養條件(jian)進行培(pei)養。條件(jian)允許(xu)，培(pei)養的前三天內做細(xi)胞拍照記錄，通過郵(you)件(jian)發(fa)送(song)給(gei)我們(men)做(zuo)及時狀(zhuang)態(tai)跟(gen)蹤。

2)對(dui)於幹冰運(yun)輸的細(xi)胞(bao)，請(qing)取(qu)出冷凍(dong)管後，須立即放入(ru)37C水槽中快(kuai)速(su)解凍(dong)，輕搖冷凍(dong)管使(shi)其(qi)在(zai)1分(fen)鐘內全(quan)部融化(hua)，並(bing)註意(yi)水面(mian)不可(ke)超(chao)過冷凍(dong)管蓋沿(yan)，否(fou)則(ze)易(yi)發(fa)生汙(wu)染情(qing)形。然(ran)後(hou)將其(qi)復(fu)蘇培(pei)養，次日(ri)更(geng)換(huan)培(pei)養液(ye)。

PC-12(高分(fen)化(hua))(大(da)鼠(shu)腎上腺嗜鉻(ge)細胞(bao)瘤細(xi)胞(bao)(高分(fen)化(hua)))註意(yi)事項：

1)細(xi)胞(bao)漂(piao)浮：培(pei)養瓶不開(kai)封，瓶口酒精(jing)擦拭(shi)後(hou)平(ping)躺放置(zhi)在(zai)培(pei)養箱。次日(ri)觀(guan)察，如細胞大(da)部分(fen)又貼(tie)回(hui)瓶底(di)，表(biao)明細胞(bao)活(huo)力(li)正常，剩余漂(piao)浮的細(xi)胞(bao)可(ke)以(yi)離心去(qu)掉(diao)，留(liu)10ml培(pei)養液(ye)培(pei)養觀(guan)察，細(xi)胞生長至匯合(he)度(du)80%，進行消(xiao)化(hua)傳(chuan)代(dai)；如細胞還是(shi)不貼(tie)壁(bi)，將細胞(bao)離心收集(ji)轉到(dao)新培(pei)養瓶，原(yuan)培(pei)養瓶加(jia)部分(fen)培(pei)養液(ye)繼續培(pei)養，中間(jian)註意(yi)觀(guan)察，我(wo)們的技(ji)術(shu)人(ren)員(yuan)會(hui)壹(yi)直(zhi)跟蹤指導(dao)，直(zhi)到(dao)問題解(jie)決。

2)對(dui)於生長緩(huan)慢的貼(tie)壁(bi)細胞(bao)：可(ke)采用(yong)適(shi)當(dang)的提(ti)高培(pei)養基(ji)中血清(qing)濃度(du)，或隔日(ri)換(huan)液(ye)的方(fang)法(fa)來保(bao)證細胞的狀(zhuang)態(tai)和生長速(su)度(du)。

3)對(dui)於生長不均(jun)的貼(tie)壁(bi)細胞(bao)：在(zai)培(pei)養過程中(zhong)若(ruo)出現(xian)細胞分(fen)布明顯不均(jun)時（即(ji)某(mou)壹(yi)區域(yu)細(xi)胞已(yi)重疊(die)生長，而旁(pang)邊則(ze)為壹(yi)塊(kuai)空白(bai)），此(ci)時可(ke)將細胞(bao)進行消(xiao)化(hua)，重(zhong)新(xin)打散(san)，貼(tie)壁(bi)，加(jia)入(ru)新培(pei)養基(ji)進行培(pei)養。 

PC-12(高分(fen)化(hua))(大(da)鼠(shu)腎上腺嗜鉻(ge)細胞(bao)瘤細(xi)胞(bao)(高分(fen)化(hua)))下(xia)面(mian)介紹幾種(zhong)細(xi)胞(bao)培(pei)養過程中(zhong)常見(jian)的汙(wu)染：

壹(yi))桿(gan)菌(jun)汙(wu)染：培(pei)養基(ji)中加(jia)入(ru)***可(ke)以(yi)減(jian)少此種(zhong)汙(wu)染，但也(ye)不是(shi)**的。

二(er))支原(yuan)體汙(wu)染：傳(chuan)說(shuo)中(zhong)的黑焦(jiao)蟲(chong)，長(chang)得(de)暴(bao)快(kuai)。24小(xiao)時就滿(man)視野都(dou)是了(le)。汙(wu)染源(yuan)大(da)多數情(qing)況(kuang)下(xia)是(shi)培(pei)養用(yong)血清(qing)。

三)***汙(wu)染：似乎(hu)無處(chu)不在(zai)，而且(qie)頑固得(de)很。長得暴(bao)快(kuai)(12h就能(neng)在(zai)細(xi)胞上面(mian)密(mi)布)。培(pei)養液(ye)澄清(qing)。低倍(bei)顯微鏡(jing)下(xia)像(xiang)黑色(se)的沙(sha)子鋪在(zai)細(xi)胞上，高倍(bei)鏡(jing)下(xia)呈(cheng)樹(shu)枝狀(zhuang)或(huo)葡萄狀(zhuang)。

四(si))黴(mei)菌(jun)汙(wu)染、比較(jiao)常見(jian)的壹(yi)種(zhong)汙(wu)染，常(chang)常來(lai)源(yuan)於(yu)汙(wu)染的空氣(qi)、水和器(qi)械。