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MA-104(羅(luo)猴(hou)胎(tai)腎(shen)細胞(bao))
細(xi)胞(bao)名(ming)稱(cheng):MA-104 羅(luo)猴(hou)胎(tai)腎(shen)細胞(bao)
培養條件:MEM +10% FBS
形 態:貼壁(bi);上皮(pi)細(xi)胞(bao)樣
MA-104(羅(luo)猴(hou)胎(tai)腎(shen)細胞(bao))操(cao)作說(shuo)明(ming):
1)對(dui)於(yu)常溫運(yun)輸(shu)的(de)細胞(bao),收(shou)到細胞(bao)後(hou),檢(jian)查(zha)是否有(you)運(yun)輸(shu)問(wen)題(ti),即細(xi)胞(bao)培養瓶(ping)或管(guan)是否破(po)損(sun),細(xi)胞(bao)培養液(ye)是否溢(yi)出(chu)。若(ruo)沒有(you)運(yun)輸(shu)問(wen)題(ti),請(qing)75%酒(jiu)精**後(hou),保(bao)留封(feng)口膜,放(fang)入(ru)細(xi)胞(bao)培養箱(xiang)中靜(jing)置。嚴格檢(jian)查(zha)培養箱(xiang)的(de)參(can)數(shu):溫度(du),濕(shi)度(du)和(he)CO2濃(nong)度(du)。細(xi)胞(bao)靜(jing)置時間(jian)壹般為(wei)6-12小(xiao)時後(hou),細(xi)胞(bao)狀態穩(wen)定(ding)後(hou),即可(ke)開(kai)始後(hou)續(xu)操(cao)作。選(xuan)用(yong)正確(que)的(de)細胞(bao)培養體系(xi),MA-104(羅(luo)猴(hou)胎(tai)腎(shen)細胞(bao))嚴格按(an)照說明(ming)書的(de)培養條件進(jin)行(xing)培養。條件允(yun)許,培養的(de)前(qian)三天內做細胞(bao)拍照記錄,通過郵件發(fa)送(song)給我(wo)們(men)做(zuo)及時狀態跟蹤。
2)對(dui)於(yu)幹冰運(yun)輸(shu)的(de)細胞(bao),請(qing)取(qu)出(chu)冷(leng)凍管(guan)後(hou),須立(li)即放(fang)入(ru)37C水(shui)槽(cao)中(zhong)快(kuai)速(su)解(jie)凍,輕搖(yao)冷(leng)凍管(guan)使(shi)其(qi)在(zai)1分(fen)鐘(zhong)內全部融化(hua),並(bing)註(zhu)意(yi)水面不(bu)可(ke)超(chao)過冷(leng)凍管(guan)蓋(gai)沿,否(fou)則易(yi)發(fa)生(sheng)汙(wu)染情形(xing)。然後(hou)將(jiang)其(qi)復(fu)蘇(su)培養,次(ci)日(ri)更(geng)換培養液(ye)。
MA-104(羅(luo)猴(hou)胎(tai)腎(shen)細胞(bao))註(zhu)意(yi)事項:
1)細(xi)胞(bao)漂(piao)浮(fu):培養瓶(ping)不(bu)開(kai)封(feng),瓶(ping)口酒(jiu)精擦(ca)拭後(hou)平(ping)躺放(fang)置在(zai)培養箱(xiang)。次(ci)日(ri)觀察,如(ru)細(xi)胞(bao)大(da)部分又(you)貼回瓶(ping)底,表明(ming)細(xi)胞(bao)活(huo)力(li)正常,剩(sheng)余(yu)漂浮(fu)的(de)細胞(bao)可(ke)以離心(xin)去掉(diao),留10ml培養液(ye)培養觀(guan)察,細(xi)胞(bao)生(sheng)長至(zhi)匯合度(du)80%,進(jin)行(xing)消(xiao)化(hua)傳(chuan)代(dai);如細(xi)胞(bao)還(hai)是不(bu)貼壁(bi),將細(xi)胞(bao)離(li)心(xin)收(shou)集轉到(dao)新(xin)培養瓶(ping),原培養瓶(ping)加(jia)部分培養液(ye)繼(ji)續培養,中(zhong)間(jian)註(zhu)意(yi)觀察,我(wo)們(men)的(de)技術(shu)人(ren)員(yuan)會(hui)壹直(zhi)跟蹤指(zhi)導,直(zhi)到(dao)問(wen)題(ti)解決(jue)。
2)對(dui)於(yu)生(sheng)長緩(huan)慢的(de)貼壁(bi)細胞(bao):可(ke)采(cai)用(yong)適當(dang)的(de)提高培養基中血(xue)清(qing)濃(nong)度(du),或隔(ge)日(ri)換液的(de)方法(fa)來保證(zheng)細(xi)胞(bao)的(de)狀態和(he)生(sheng)長速(su)度(du)。
3)對(dui)於(yu)生(sheng)長不(bu)均(jun)的(de)貼壁(bi)細胞(bao):在(zai)培養過(guo)程中若(ruo)出(chu)現(xian)細胞(bao)分(fen)布明顯不(bu)均(jun)時(即某(mou)壹區(qu)域(yu)細(xi)胞(bao)已(yi)重疊(die)生(sheng)長,而(er)旁(pang)邊(bian)則為(wei)壹塊(kuai)空(kong)白(bai)),此時可(ke)將細胞(bao)進(jin)行(xing)消(xiao)化(hua),重(zhong)新(xin)打散(san),貼壁(bi),加(jia)入(ru)新(xin)培養基進(jin)行(xing)培養。
MA-104(羅(luo)猴(hou)胎(tai)腎(shen)細胞(bao))下面(mian)介(jie)紹(shao)幾種(zhong)細(xi)胞(bao)培養過(guo)程中常見的(de)汙(wu)染:
壹)桿(gan)菌(jun)汙(wu)染:培養基中加(jia)入(ru)***可(ke)以減少(shao)此種(zhong)汙(wu)染,但也(ye)不(bu)是**的(de)。
二)支原體汙(wu)染:傳說中的(de)黑焦蟲,長得暴(bao)快。24小(xiao)時就(jiu)滿視野(ye)都(dou)是了(le)。汙(wu)染源大多(duo)數(shu)情況下是培養用(yong)血(xue)清(qing)。
三)***汙(wu)染:似乎無處不(bu)在(zai),而且頑固得(de)很(hen)。長得(de)暴快(kuai)(12h就(jiu)能在細胞(bao)上面(mian)密(mi)布)。培養液(ye)澄(cheng)清(qing)。低(di)倍(bei)顯微鏡下像(xiang)黑(hei)色(se)的(de)沙(sha)子鋪在(zai)細(xi)胞(bao)上,高倍(bei)鏡下呈(cheng)樹(shu)枝(zhi)狀或葡萄狀。
四(si))黴(mei)菌(jun)汙(wu)染、比較(jiao)常見的(de)壹種(zhong)汙(wu)染,常常來源於(yu)汙(wu)染的(de)空氣、水和器(qi)械(xie)。



