產品(pin)名(ming)稱(cheng)：B95-8(EB病毒轉化(hua)的絨(rong)猴(hou)**細胞(bao))

B95-8(EB病毒轉(zhuan)化(hua)的絨(rong)猴(hou)**細胞(bao))

細胞(bao)名(ming)稱(cheng)：B95-8    EB病毒轉化(hua)的絨(rong)猴(hou)**細胞(bao)

組織來源(yuan)：外周血**細胞(bao)

培(pei)養(yang)條(tiao)件：RPMI-1640+10% FBS

形       態(tai)：懸(xuan)浮；**母細胞(bao)

背(bei)       景：B95-8細胞(bao)株(zhu)源自(zi)暴露(lu)於人白(bai)血球(qiu)中抽(chou)提(ti)的(de)EB病毒的絨(rong)猴白(bai)血球(qiu)。B95-8是壹個連續株(zhu)並釋放高(gao)滴度(du)的轉染(ran)EB病(bing)毒。 此(ci)細胞(bao)株(zhu)提(ti)供(gong)EB病毒用於建立人的連續(xu)**細胞(bao)株(zhu)。

B95-8(EB病(bing)毒轉化(hua)的絨(rong)猴(hou)**細胞(bao))操(cao)作(zuo)說明：

1)對(dui)於常(chang)溫(wen)運(yun)輸(shu)的(de)細胞(bao)，收到細胞(bao)後，檢查是否有運(yun)輸(shu)問(wen)題(ti)，即(ji)細胞(bao)培(pei)養(yang)瓶(ping)或管(guan)是(shi)否破(po)損(sun)，細胞(bao)培(pei)養(yang)液是(shi)否溢出。若沒(mei)有運(yun)輸(shu)問(wen)題(ti)，請(qing)75%酒(jiu)精**後，保留封(feng)口膜(mo)，放入細胞(bao)培(pei)養(yang)箱(xiang)中靜置(zhi)。嚴格(ge)檢查培養(yang)箱(xiang)的參數(shu)：溫度(du)，濕度(du)和CO2濃(nong)度(du)。細胞(bao)靜置(zhi)時間壹般(ban)為6-12小(xiao)時後，細胞(bao)狀(zhuang)態(tai)穩(wen)定(ding)後，即可(ke)開(kai)始(shi)後續操作(zuo)。選用正(zheng)確(que)的細胞(bao)培(pei)養(yang)體系，B95-8(EB病(bing)毒轉化(hua)的絨(rong)猴(hou)**細胞(bao))嚴(yan)格(ge)按(an)照(zhao)說明書(shu)的(de)培養(yang)條(tiao)件進行(xing)培(pei)養(yang)。條(tiao)件允(yun)許，培養(yang)的(de)前(qian)三(san)天(tian)內做細胞(bao)拍(pai)照(zhao)記(ji)錄，通過(guo)郵件(jian)發(fa)送(song)給(gei)我(wo)們(men)做及(ji)時狀(zhuang)態(tai)跟(gen)蹤(zong)。

2)對(dui)於幹冰運(yun)輸(shu)的(de)細胞(bao)，請(qing)取(qu)出冷(leng)凍(dong)管後，須立即放入37C水(shui)槽(cao)中快(kuai)速解凍(dong)，輕搖冷(leng)凍(dong)管使其(qi)在1分(fen)鐘內全部融(rong)化(hua)，並註(zhu)意(yi)水(shui)面(mian)不(bu)可(ke)超(chao)過冷(leng)凍(dong)管蓋沿，否則易發(fa)生(sheng)汙(wu)染(ran)情形(xing)。然(ran)後將其復蘇培養(yang)，次日(ri)更換(huan)培(pei)養(yang)液。

B95-8(EB病(bing)毒轉化(hua)的絨(rong)猴(hou)**細胞(bao))註(zhu)意(yi)事(shi)項(xiang)：

1)細胞(bao)漂浮：培養(yang)瓶(ping)不(bu)開封(feng)，瓶(ping)口酒(jiu)精(jing)擦(ca)拭(shi)後平(ping)躺(tang)放置(zhi)在培(pei)養(yang)箱(xiang)。次日(ri)觀(guan)察(cha)，如(ru)細胞(bao)大部分又貼回(hui)瓶(ping)底，表(biao)明細胞(bao)活(huo)力正(zheng)常(chang)，剩余(yu)漂浮的細胞(bao)可(ke)以(yi)離(li)心(xin)去掉(diao)，留(liu)10ml培(pei)養(yang)液培(pei)養(yang)觀(guan)察(cha)，細胞(bao)生(sheng)長(chang)至(zhi)匯合度(du)80%，進(jin)行(xing)消(xiao)化(hua)傳(chuan)代；如(ru)細胞(bao)還(hai)是不(bu)貼壁(bi)，將細胞(bao)離(li)心(xin)收集(ji)轉(zhuan)到(dao)新(xin)培養(yang)瓶(ping)，原培(pei)養(yang)瓶(ping)加部(bu)分(fen)培養(yang)液繼(ji)續培(pei)養(yang)，中間註(zhu)意(yi)觀(guan)察(cha)，我們的技術人員會(hui)壹直跟蹤(zong)指導，直到問(wen)題(ti)解決。

2)對(dui)於生長緩(huan)慢的(de)貼壁(bi)細胞(bao)：可(ke)采(cai)用(yong)適當(dang)的(de)提(ti)高(gao)培養(yang)基(ji)中血清(qing)濃(nong)度(du)，或隔日(ri)換(huan)液的(de)方法(fa)來保(bao)證細胞(bao)的(de)狀(zhuang)態(tai)和(he)生(sheng)長(chang)速度(du)。

3)對(dui)於生長不(bu)均的(de)貼壁(bi)細胞(bao)：在(zai)培(pei)養(yang)過(guo)程中若出(chu)現細胞(bao)分(fen)布明顯(xian)不(bu)均時（即(ji)某壹區域細胞(bao)已(yi)重疊(die)生(sheng)長(chang)，而旁(pang)邊則(ze)為(wei)壹塊空(kong)白(bai)），此時可(ke)將細胞(bao)進(jin)行(xing)消(xiao)化(hua)，重新(xin)打散，貼壁(bi)，加入新(xin)培養(yang)基(ji)進(jin)行(xing)培(pei)養(yang)。 

B95-8(EB病(bing)毒轉化(hua)的絨(rong)猴(hou)**細胞(bao))下(xia)面介紹幾種(zhong)細胞(bao)培(pei)養(yang)過(guo)程中常(chang)見的(de)汙(wu)染：

壹)桿(gan)菌(jun)汙(wu)染：培養(yang)基(ji)中加入***可(ke)以(yi)減(jian)少(shao)此種(zhong)汙(wu)染，但(dan)也不(bu)是**的(de)。

二(er))支(zhi)原體汙(wu)染：傳(chuan)說中的(de)黑(hei)焦蟲(chong)，長(chang)得暴快(kuai)。24小(xiao)時就(jiu)滿(man)視野都(dou)是(shi)了(le)。汙染源大多數(shu)情況(kuang)下(xia)是培養(yang)用(yong)血清(qing)。

三(san))***汙(wu)染：似(si)乎無(wu)處(chu)不(bu)在，而(er)且頑固(gu)得很。長得暴快(kuai)(12h就(jiu)能在細胞(bao)上(shang)面(mian)密(mi)布)。培(pei)養(yang)液澄(cheng)清(qing)。低倍顯(xian)微鏡(jing)下(xia)像(xiang)黑(hei)色(se)的(de)沙(sha)子鋪在細胞(bao)上(shang)，高(gao)倍鏡(jing)下(xia)呈(cheng)樹枝狀(zhuang)或葡(pu)萄狀(zhuang)。

四(si))黴(mei)菌汙染、比較常(chang)見的(de)壹種(zhong)汙(wu)染，常(chang)常(chang)來源(yuan)於汙染的空(kong)氣、水(shui)和(he)器械。