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TT(人(ren)甲(jia)狀(zhuang)腺(xian)導(dao)管癌(ai)細(xi)胞(bao))
細(xi)胞(bao)名(ming)稱(cheng):TT 人(ren)甲(jia)狀(zhuang)腺(xian)導(dao)管癌(ai)細(xi)胞(bao)
組(zu)織(zhi)來(lai)源:甲(jia)狀(zhuang)腺(xian);髓(sui)質(zhi);癌(ai)
培(pei)養(yang)條件:F-12K +10% FBS
形(xing) 態(tai):貼壁;上皮(pi)細胞(bao)樣
背 景:TT細(xi)胞由Leong SS等自(zi)77歲女(nv)性(xing)甲(jia)狀(zhuang)腺(xian)髓(sui)質(zhi)癌(ai)患(huan)者的穿(chuan)刺(ci)活(huo)檢樣本中建立。TT細(xi)胞持續(xu)產(chan)生(sheng)高水(shui)平(ping)的(de)降(jiang)血(xue)鈣素和CEA。在更換(huan)培(pei)養基(ji)後(hou)24小(xiao)時(shi)和72小(xiao)時(shi)在培養(yang)基(ji)中檢測到(dao)的**活(huo)性(xing)的(de)降(jiang)血(xue)鈣素濃度分(fen)別為3900 pg/百(bai)萬細胞(bao)和7700 pg/百萬細胞(bao)。72小(xiao)時(shi)後CEA積累(lei)濃度超(chao)過(guo)27ng/百萬細胞(bao)。
TT(人(ren)甲(jia)狀(zhuang)腺(xian)導(dao)管癌(ai)細(xi)胞(bao))操(cao)作說(shuo)明:
1)對(dui)於(yu)常溫(wen)運輸的細胞,收(shou)到(dao)細胞(bao)後(hou),檢查是(shi)否有(you)運輸問題(ti),即(ji)細胞(bao)培養瓶(ping)或(huo)管是(shi)否破(po)損,細(xi)胞培養液是(shi)否溢(yi)出。若(ruo)沒有(you)運輸問題(ti),請(qing)75%酒(jiu)精**後,保(bao)留(liu)封口膜(mo),放(fang)入(ru)細(xi)胞培養箱(xiang)中靜(jing)置(zhi)。嚴(yan)格(ge)檢查培(pei)養(yang)箱(xiang)的參數(shu):溫(wen)度,濕(shi)度和(he)CO2濃度。細(xi)胞(bao)靜(jing)置(zhi)時(shi)間(jian)壹(yi)般(ban)為6-12小(xiao)時(shi)後,細胞狀(zhuang)態(tai)穩(wen)定後,即可開(kai)始後續(xu)操(cao)作。選(xuan)用正確(que)的細胞培養體系(xi),TT(人(ren)甲(jia)狀(zhuang)腺(xian)導(dao)管癌(ai)細(xi)胞(bao))嚴(yan)格(ge)按照說(shuo)明書(shu)的培養條件進行培(pei)養。條件允(yun)許(xu),培養的前(qian)三(san)天內做(zuo)細胞拍照記(ji)錄,通(tong)過(guo)郵件(jian)發(fa)送給(gei)我(wo)們(men)做(zuo)及時狀(zhuang)態(tai)跟蹤。
2)對(dui)於(yu)幹冰(bing)運輸的細胞,請取出(chu)冷(leng)凍管後(hou),須立即(ji)放入(ru)37C水(shui)槽中快(kuai)速(su)解(jie)凍,輕搖冷(leng)凍管使其在1分鐘內全(quan)部(bu)融化(hua),並(bing)註(zhu)意水(shui)面(mian)不可(ke)超(chao)過(guo)冷(leng)凍管蓋(gai)沿,否(fou)則(ze)易(yi)發(fa)生(sheng)汙染(ran)情形(xing)。然後(hou)將(jiang)其(qi)復(fu)蘇培養(yang),次日(ri)更(geng)換(huan)培(pei)養液(ye)。
TT(人(ren)甲(jia)狀(zhuang)腺(xian)導(dao)管癌(ai)細(xi)胞(bao))註(zhu)意事項:
1)細胞(bao)漂(piao)浮(fu):培(pei)養(yang)瓶(ping)不開封(feng),瓶(ping)口酒(jiu)精擦拭後(hou)平(ping)躺(tang)放(fang)置(zhi)在培養(yang)箱(xiang)。次日(ri)觀(guan)察,如(ru)細(xi)胞大(da)部分又貼回瓶(ping)底,表明細胞(bao)活(huo)力正常,剩(sheng)余(yu)漂(piao)浮(fu)的(de)細(xi)胞(bao)可以離心(xin)去掉,留(liu)10ml培養(yang)液(ye)培(pei)養觀(guan)察,細(xi)胞(bao)生(sheng)長至(zhi)匯合度80%,進行消化(hua)傳代(dai);如細胞還(hai)是(shi)不貼壁,將(jiang)細(xi)胞(bao)離心(xin)收(shou)集(ji)轉(zhuan)到(dao)新培(pei)養瓶(ping),原培養(yang)瓶(ping)加部分(fen)培(pei)養液繼續(xu)培(pei)養(yang),中間(jian)註(zhu)意觀(guan)察,我(wo)們(men)的技術(shu)人(ren)員(yuan)會壹(yi)直跟蹤指導(dao),直到(dao)問題(ti)解(jie)決。
2)對(dui)於(yu)生(sheng)長緩(huan)慢的貼壁細胞:可采(cai)用適(shi)當的(de)提(ti)高培(pei)養(yang)基(ji)中血(xue)清濃度,或(huo)隔(ge)日(ri)換(huan)液(ye)的方(fang)法來保(bao)證(zheng)細(xi)胞(bao)的(de)狀(zhuang)態(tai)和生(sheng)長速(su)度。
3)對(dui)於(yu)生(sheng)長不(bu)均的(de)貼壁細胞:在培養(yang)過(guo)程中若(ruo)出(chu)現(xian)細胞(bao)分布(bu)明顯不均時(shi)(即(ji)某壹(yi)區(qu)域細(xi)胞(bao)已(yi)重疊(die)生(sheng)長,而(er)旁邊(bian)則(ze)為壹(yi)塊(kuai)空白(bai)),此(ci)時可將(jiang)細(xi)胞(bao)進行消化(hua),重(zhong)新打(da)散(san),貼壁,加入(ru)新培(pei)養基(ji)進行培(pei)養。
TT(人(ren)甲(jia)狀(zhuang)腺(xian)導(dao)管癌(ai)細(xi)胞(bao))下(xia)面(mian)介紹幾(ji)種(zhong)細胞培養(yang)過(guo)程中常見(jian)的(de)汙染(ran):
壹(yi))桿(gan)菌(jun)汙染(ran):培養(yang)基(ji)中加(jia)入(ru)***可(ke)以減(jian)少此(ci)種汙染(ran),但(dan)也(ye)不是(shi)**的。
二)支原體汙(wu)染(ran):傳說(shuo)中的(de)黑(hei)焦蟲(chong),長得(de)暴(bao)快(kuai)。24小(xiao)時(shi)就滿視(shi)野(ye)都是(shi)了(le)。汙染(ran)源大多數(shu)情況(kuang)下(xia)是(shi)培養(yang)用血(xue)清。
三)***汙染(ran):似(si)乎(hu)無處不(bu)在,而(er)且頑(wan)固(gu)得(de)很。長(chang)得(de)暴(bao)快(kuai)(12h就能(neng)在細胞(bao)上面(mian)密(mi)布(bu))。培養(yang)液(ye)澄清(qing)。低倍(bei)顯微鏡(jing)下(xia)像黑色的沙子鋪在細胞(bao)上,高倍(bei)鏡(jing)下(xia)呈(cheng)樹(shu)枝狀(zhuang)或(huo)葡萄狀(zhuang)。
四(si))黴菌(jun)汙(wu)染(ran)、比較常見(jian)的(de)壹(yi)種(zhong)汙(wu)染(ran),常常來(lai)源於(yu)汙染(ran)的空氣、水(shui)和器(qi)械。



