產(chan)品(pin)名稱：RWPE-2(人前(qian)列腺(xian)正(zheng)常(chang)細胞(bao))

RWPE-2(人前(qian)列腺(xian)正(zheng)常(chang)細胞(bao))

細胞(bao)名(ming)稱(cheng)：RWPE-2    人前(qian)列腺(xian)正(zheng)常(chang)細胞(bao)

培養條件：DMEM +10% FBS

形(xing)　　態(tai)：貼壁(bi)；上(shang)皮細胞(bao)樣(yang)

背(bei)　　景：該(gai)細胞(bao)1996年由Webber MM建立。

RWPE-2(人前(qian)列腺(xian)正(zheng)常(chang)細胞(bao))操(cao)作(zuo)說(shuo)明(ming)：

1)對(dui)於常(chang)溫(wen)運(yun)輸(shu)的細胞(bao)，收(shou)到(dao)細胞(bao)後，檢查(zha)是否(fou)有(you)運(yun)輸(shu)問(wen)題，即(ji)細胞(bao)培養瓶或(huo)管是否(fou)破損(sun)，細胞(bao)培養液是否(fou)溢出。若沒(mei)有(you)運(yun)輸(shu)問(wen)題，請(qing)75%酒(jiu)精(jing)**後，保(bao)留(liu)封(feng)口(kou)膜(mo)，放(fang)入細胞(bao)培養箱中靜置。嚴格檢查(zha)培養箱的參數：溫(wen)度，濕度和(he)CO2濃度。細胞(bao)靜置時(shi)間(jian)壹(yi)般(ban)為(wei)6-12小(xiao)時後，細胞(bao)狀態(tai)穩定(ding)後，即可(ke)開(kai)始(shi)後續操(cao)作(zuo)。選(xuan)用正(zheng)確的細胞(bao)培養體系(xi)，RWPE-2(人前(qian)列腺(xian)正(zheng)常(chang)細胞(bao))嚴格按(an)照說明(ming)書(shu)的培養條件進行培養。條件允許(xu)，培養的前三天內(nei)做細胞(bao)拍(pai)照記錄(lu)，通過郵件發(fa)送給(gei)我(wo)們做及(ji)時狀態(tai)跟蹤(zong)。

2)對(dui)於幹(gan)冰(bing)運(yun)輸(shu)的細胞(bao)，請(qing)取(qu)出冷(leng)凍(dong)管(guan)後，須立即(ji)放(fang)入37C水(shui)槽中快速解凍，輕(qing)搖冷(leng)凍(dong)管使(shi)其在(zai)1分(fen)鐘內(nei)全(quan)部融(rong)化(hua)，並註(zhu)意(yi)水(shui)面不可(ke)超(chao)過冷凍(dong)管蓋沿(yan)，否則易(yi)發(fa)生(sheng)汙染(ran)情(qing)形(xing)。然後將其復蘇(su)培養，次日更(geng)換(huan)培養液。

RWPE-2(人前(qian)列腺(xian)正(zheng)常(chang)細胞(bao))註(zhu)意(yi)事(shi)項(xiang)：

1)細胞(bao)漂(piao)浮：培養瓶不開(kai)封(feng)，瓶口酒(jiu)精(jing)擦拭(shi)後平(ping)躺(tang)放(fang)置在(zai)培養箱。次日觀察(cha)，如細胞(bao)大(da)部分又(you)貼回(hui)瓶底，表(biao)明(ming)細胞(bao)活力正(zheng)常(chang)，剩余(yu)漂浮的細胞(bao)可(ke)以離(li)心(xin)去(qu)掉，留(liu)10ml培養液培養觀察(cha)，細胞(bao)生(sheng)長至(zhi)匯(hui)合度80%，進(jin)行消化(hua)傳代(dai)；如(ru)細胞(bao)還(hai)是不貼壁(bi)，將(jiang)細胞(bao)離(li)心(xin)收(shou)集(ji)轉到(dao)新(xin)培養瓶，原培養瓶加部分培養液繼(ji)續(xu)培養，中間註(zhu)意(yi)觀(guan)察(cha)，我(wo)們的技術(shu)人員(yuan)會壹(yi)直(zhi)跟(gen)蹤(zong)指導(dao)，直(zhi)到(dao)問題解(jie)決。

2)對(dui)於生(sheng)長緩慢的貼壁(bi)細胞(bao)：可(ke)采用適(shi)當(dang)的提高(gao)培養基中血清濃度，或(huo)隔日換液(ye)的方(fang)法(fa)來保(bao)證(zheng)細胞(bao)的狀態(tai)和(he)生(sheng)長速度。

3)對(dui)於生(sheng)長不均(jun)的貼壁(bi)細胞(bao)：在(zai)培養過程(cheng)中若出現(xian)細胞(bao)分(fen)布(bu)明(ming)顯不均(jun)時（即(ji)某(mou)壹(yi)區(qu)域(yu)細胞(bao)已重疊生(sheng)長，而旁(pang)邊則為(wei)壹(yi)塊空(kong)白(bai)），此(ci)時(shi)可(ke)將(jiang)細胞(bao)進(jin)行消化(hua)，重(zhong)新(xin)打散，貼壁(bi)，加入新(xin)培養基進(jin)行培養。 

RWPE-2(人前(qian)列腺(xian)正(zheng)常(chang)細胞(bao))下(xia)面(mian)介紹幾(ji)種細胞(bao)培養過程(cheng)中常見(jian)的汙染：

壹(yi))桿(gan)菌汙(wu)染：培養基中加入***可(ke)以減少此(ci)種(zhong)汙(wu)染(ran)，但(dan)也不是**的。

二(er))支(zhi)原體(ti)汙染：傳說(shuo)中的黑(hei)焦蟲(chong)，長得暴(bao)快。24小(xiao)時就滿(man)視野(ye)都(dou)是了(le)。汙染(ran)源(yuan)大(da)多(duo)數情(qing)況(kuang)下是培養用血(xue)清。

三)***汙(wu)染：似乎無處(chu)不在(zai)，而(er)且頑固得很(hen)。長得暴(bao)快(12h就能(neng)在(zai)細胞(bao)上(shang)面(mian)密布(bu))。培養液澄(cheng)清。低倍顯微(wei)鏡(jing)下(xia)像(xiang)黑(hei)色的沙子(zi)鋪(pu)在(zai)細胞(bao)上(shang)，高(gao)倍(bei)鏡(jing)下(xia)呈樹枝(zhi)狀或(huo)葡萄狀。

四)黴菌汙(wu)染、比(bi)較(jiao)常見(jian)的壹(yi)種(zhong)汙(wu)染(ran)，常常來源(yuan)於汙(wu)染(ran)的空氣、水(shui)和(he)器械(xie)。