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96T 僅供(gong)體外研究(jiu)使用,不(bu)用於臨(lin)床(chuang)診(zhen)斷(duan)!
猴CD40配體(ti)(CD40L)ELISA試(shi)劑盒(he)
本試(shi)劑盒(he)運用雙(shuang)抗(kang)體夾心ELISA法(fa)定(ding)量測(ce)定(ding)猴血(xue)清、血(xue)漿、組織勻漿、細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液、細(xi)胞(bao)培養上清(qing)液(ye)和其(qi)他(ta)生(sheng)物(wu)液體中猴CD40配體(ti)(CD40L)含(han)量。
檢(jian)測(ce)範圍
0.156-10 ng/mL
*低(di)檢(jian)測(ce)限(xian)
0.034 ng/mL
實驗原(yuan)理
將(jiang)猴CD40配體(ti)(CD40L)抗(kang)體包(bao)被於96孔微(wei)孔板(ban)中(zhong),制成(cheng)固相載(zai)體,向微孔中(zhong)分別加入(ru)標(biao)準品或標(biao)本,其(qi)中(zhong)的猴CD40配體(ti)(CD40L)與(yu)連(lian)接(jie)於固相載(zai)體上的(de)抗(kang)體結(jie)合,然(ran)後加(jia)入(ru)生(sheng)物(wu)素化的(de)猴CD40配體(ti)(CD40L)抗(kang)體,將(jiang)未結(jie)合的(de)生(sheng)物(wu)素化抗(kang)體洗凈後,加(jia)入(ru)HRP標(biao)記(ji)的親(qin)和素,再次(ci)徹(che)底(di)洗滌(di)後加(jia)入(ru)TMB底(di)物顯(xian)色。TMB在(zai)過(guo)氧化物(wu)酶(mei)的(de)催(cui)化下轉化成(cheng)藍(lan)色,並(bing)在(zai)酸的作(zuo)用下轉化成(cheng)*終(zhong)的(de)黃(huang)色。顏色的深淺(qian)和樣(yang)品中的(de)猴CD40配體(ti)(CD40L)呈正相(xiang)關。用酶(mei)標(biao)儀在(zai)450nm波(bo)長(chang)下測定(ding)吸光(guang)度(O.D.值),計(ji)算樣(yang)品濃度。
試(shi)劑盒(he)內容(rong)
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試(shi)劑名稱(cheng) |
數(shu)量 |
試(shi)劑名稱(cheng) |
數(shu)量 |
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96孔板(ban)(預(yu)包(bao)被) |
1 |
96孔板(ban)覆(fu)膜 |
2 |
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標(biao)準品 |
0.5ml×1 |
標(biao)準品稀(xi)釋(shi)液 |
1.5ml×1瓶(ping) |
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顯(xian)色劑A液(ye) |
6ml×1瓶(ping) |
樣(yang)品稀(xi)釋(shi)液 |
6ml×1瓶(ping) |
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顯(xian)色劑B液(ye) |
6ml×1瓶(ping) |
終(zhong)止液(ye) |
6ml×1瓶(ping) |
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酶(mei)標(biao)試(shi)劑 |
6ml×1瓶(ping) |
密封(feng)袋(dai) |
1 |
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濃洗滌(di)液(30×) |
1×20mL |
使用說(shuo)明書(shu) |
1 |
猴CD40配體(ti)(CD40L)ELISA試(shi)劑盒(he)需自(zi)備的設備及試(shi)劑
1. 450±10nm濾光片的酶(mei)標(biao)儀(建(jian)議儀器(qi)使用前(qian)提前(qian)預熱)
2. 單(dan)道(dao)或(huo)多(duo)道微量加(jia)液(ye)器及吸頭
3. 稀(xi)釋(shi)樣(yang)品的EP管(guan)
4. 蒸(zheng)餾(liu)水或去(qu)離子(zi)水(shui)
5. 吸水(shui)紙(zhi)
6. 盛(sheng)放洗(xi)液(ye)的(de)容(rong)器
試(shi)劑盒(he)的儲(chu)存及有(you)效期(qi)
1. 未(wei)開封的試(shi)劑盒(he):所(suo)有(you)試(shi)劑均按(an)試(shi)劑瓶(ping)標(biao)簽(qian)上所(suo)示(shi)保存(cun)。請(qing)註(zhu)意(yi),收到(dao)試(shi)劑盒(he)後請(qing)盡快將(jiang)TMB 洗滌(di)液,終(zhong)止液(ye)保(bao)存於(yu)4℃,其(qi)他(ta)試(shi)劑保(bao)存於(yu)-20℃。
2. 使用後的(de)試(shi)劑盒(he):剩(sheng)余試(shi)劑仍(reng)需按照試(shi)劑瓶(ping)標(biao)簽(qian)所(suo)示(shi)的溫度保存,開封後的酶(mei)標(biao)板(ban)要(yao)加幹燥劑後密封(feng)保存(cun)於-20℃,避(bi)免潮(chao)濕(shi)。
註意(yi):
試(shi)劑盒(he)內酶(mei)標(biao)條(tiao)可(ke)拆卸(xie),按(an)實驗需求(qiu)可(ke)分多(duo)次(ci)使(shi)用;使用後的(de)剩(sheng)余試(shi)劑盒(he)建(jian)議在(zai)**實驗後(hou) 1個月內使用完(wan)畢。產(chan)品過期(qi)時間(jian)以(yi)盒(he)子(zi)上的(de)標(biao)簽為(wei)準,保質(zhi)期內所(suo)有(you)組分都(dou)確(que)保是穩(wen)定(ding)的。
猴CD40配體(ti)(CD40L)ELISA試(shi)劑盒(he)標本(ben)的采(cai)集與(yu)保(bao)存
1. 血(xue)清:
將(jiang)收集於(yu)血(xue)清分離管(guan)的全血(xue)標本(ben)在(zai)室溫放置 2 小時(shi)或(huo) 4oC 過夜(ye),然後(hou) 1000×g 離心(xin) 20 分鐘(zhong),取(qu)上清(qing)即(ji)可(ke),或(huo)將(jiang)上清(qing)置於-20oC 或(huo)-80oC 保(bao)存,但(dan)應避(bi)免反(fan)復(fu)凍融(rong)。
2. 血(xue)漿:
用 EDTA 或肝(gan)素(su)作(zuo)為(wei)抗(kang)凝(ning)劑采(cai)集標(biao)本(ben),並(bing)將(jiang)標本在(zai)采(cai)集後(hou)的(de) 30 分鐘(zhong)內(nei)於(yu) 2-8oC 1000×g 離心(xin) 15 分鐘(zhong),取(qu)上清(qing)即(ji)可(ke)檢(jian)測(ce),或將(jiang)上清(qing)置於-20oC 或(huo)-80oC 保(bao)存,但(dan)應避(bi)免反(fan)復(fu)凍融(rong)。
3. 組織勻漿:
1) 取(qu)適量組(zu)織塊(kuai),於預冷PBS(0.01mol/L, pH 7.0-7.2)中清洗去(qu)除(chu)血(xue)液,稱(cheng)重後(hou)備用(組織塊(kuai)較大(da)需先(xian)剪碎(sui)後再勻漿);
2) 可(ke)同(tong)時選用多(duo)種勻漿方法(fa)達到較好的破碎(sui)效(xiao)果(guo):首先(xian)將(jiang)組織塊(kuai)移入(ru)玻(bo)璃勻漿器,加(jia)入(ru)5-10mL 預(yu)冷PBS 進行充(chong)分研磨,該(gai)過(guo)程(cheng)需在(zai)冰上進(jin)行(xing)(有(you)條(tiao)件實驗室可(ke)選(xuan)用機器勻漿);得(de)到(dao)的勻漿液可(ke)再利用超聲(sheng)破碎(sui)或(huo)反(fan)復(fu)凍融(rong) 進壹(yi)步處理(超聲(sheng)破碎(sui)過(guo)程(cheng)中註(zhu)意(yi)冰浴(yu)降(jiang)溫;反復凍融(rong)法(fa)可(ke)重(zhong)復2 次(ci))。
3) 將(jiang)制備好的(de)勻漿液於(yu)5000×g 離心(xin)5 分鐘(zhong),留(liu)取(qu)上清(qing)即(ji)可(ke)檢(jian)測(ce)。
4. 細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液:
1)貼(tie)壁(bi)細(xi)胞(bao)需要(yao)先(xian)用胰酶(mei)消化,離心(xin)收(shou)集細(xi)胞(bao)(懸浮(fu)細(xi)胞(bao)可(ke)直接(jie)離心(xin)收(shou)集);
2)將(jiang)收集到(dao)的(de)細(xi)胞(bao)用冷PBS 洗(xi)3 次(ci);
3)物理方法(fa)裂(lie)解(jie)細(xi)胞(bao)(可(ke)先(xian)超聲(sheng)破碎(sui)細(xi)胞(bao),再反(fan)復凍融(rong)):
i 超聲(sheng)破碎(sui):取(qu)適量PBS 重(zhong)懸細(xi)胞(bao),用壹定(ding)功率(lv)的(de)超聲(sheng)波處理細(xi)胞(bao)懸液,使細(xi)胞(bao)急(ji)劇震(zhen)蕩(dang)破裂(lie)。
ii 反復凍融(rong):將(jiang)待破碎(sui)的(de)細(xi)胞(bao)在(zai)-20 oC 以下冰凍,室溫融(rong)解(jie),反復(fu)3 次(ci),使(shi)細(xi)胞(bao)溶(rong)脹(zhang)破碎(sui)。
4)將(jiang)標本於(yu)2-8 oC 1500×g 離心(xin)10 分鐘(zhong),收(shou)集上清(qing)備用。
5. 細(xi)胞(bao)培養上清(qing)或(huo)其(qi)它(ta)生(sheng)物(wu)標本:
請 1000×g 離心(xin) 20 分鐘(zhong),取(qu)上清(qing)即(ji)可(ke)檢(jian)測(ce),或將(jiang)上清(qing)置於-20oC 或(huo)-80oC 保(bao)存,但(dan)應避(bi)免反(fan)復(fu)凍融(rong)。
註意(yi):
1. 以上標(biao)本(ben)均需密封(feng)保存(cun),4oC保存(cun)應(ying)小於1周(zhou),-20oC不(bu)應(ying)超(chao)過(guo)1個月,-80oC不(bu)應(ying)超(chao)過(guo)2個月。
2. 標(biao)本(ben)使(shi)用前(qian)應緩(huan)慢均衡(heng)至室溫,不(bu)應(ying)加(jia)熱使之融(rong)解(jie)。
3. 實驗前(qian)紅(hong)細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液必(bi)須(xu)用標準品稀(xi)釋(shi)液稀(xi)釋(shi)。
猴CD40配體(ti)(CD40L)ELISA試(shi)劑盒(he)試(shi)劑準備
1. 使(shi)用前(qian)將(jiang)所(suo)有(you)的試(shi)劑和標本緩(huan)慢均衡(heng)至室溫(18-25oC),試(shi)劑不(bu)能(neng)直接(jie)在(zai)37oC溶(rong)解(jie)。
2. 標準品(凍幹品):每(mei)瓶(ping)標(biao)準品加入(ru)標(biao)準品稀(xi)釋(shi)液1mL,蓋(gai)好後(hou)室溫靜置大(da)約(yue)10分鐘(zhong),同(tong)時(shi)反(fan)復顛倒/搓(cuo)動(dong)以(yi)助(zhu)溶(rong)解(jie),其(qi)濃度為(wei)10ng/mL。準備7個稀(xi)釋(shi)標準品的EP管(guan),每(mei)個EP管(guan)中加(jia)入(ru)150μL的(de)標準品稀(xi)釋(shi)液,如(ru)圖(tu)所(suo)示(shi)依(yi)次(ci)倍比稀(xi)釋(shi)成(cheng)不(bu)同(tong)的(de)梯(ti)度, 標準品稀(xi)釋(shi)液(0pg/mL)直接(jie)作(zuo)為(wei)空白(bai)孔。為(wei)保(bao)證實驗結(jie)果(guo)有(you)效性(xing),每(mei)次(ci)實驗請(qing)使用新的(de)標(biao)準品溶液(ye)。
3. 濃洗滌(di)液:用580mL蒸(zheng)餾水或去(qu)離子(zi)水(shui)將(jiang)20mL濃洗滌(di)液稀(xi)釋(shi)至600mL,進(jin)行(xing)30倍稀(xi)釋(shi)。
標(biao)本(ben)處理
1. 本公(gong)司只(zhi)對(dui)試(shi)劑盒(he)本身(shen)負責,不(bu)對(dui)因使用該(gai)試(shi)劑盒(he)所(suo)造(zao)成(cheng)的(de)樣(yang)本(ben)消耗負責,請使用者使(shi)用前(qian)充分考(kao)慮到樣(yang)本(ben)的(de)可(ke)能(neng)使用量,預(yu)留(liu)充足(zu)的(de)樣(yang)本(ben)。
2. 實驗前(qian)應預(yu)測(ce)標本(ben)含量,如(ru)果(guo)標本(ben)濃度過高,應(ying)對標本(ben)進行稀(xi)釋(shi),使稀(xi)釋(shi)後的(de)標(biao)本(ben)符合試(shi)劑盒(he)的檢(jian)測(ce)範圍,計(ji)算時再乘(cheng)以(yi)相應的(de)稀(xi)釋(shi)倍數(shu)。
3. 若(ruo)所(suo)檢(jian)樣(yang)本(ben)不(bu)包(bao)含(han)在(zai)說(shuo)明書(shu)所(suo)列(lie)樣(yang)本(ben)之(zhi)中(zhong),建(jian)議進(jin)行預實驗驗證(zheng)其(qi)有(you)效性(xing),並(bing)註意(yi)留存(cun)樣(yang)本(ben)。
4. 使(shi)用化學(xue)裂(lie)解(jie)液制備的組(zu)織勻漿或細(xi)胞(bao)提取(qu)液(ye)可(ke)能(neng)會由於某些化學(xue)物(wu)質(zhi)的引入(ru)導(dao)致 ELISA實驗結(jie)果(guo)偏差(cha)。
5. 若(ruo)樣(yang)本(ben)為(wei)細(xi)胞(bao)培養上清(qing),因該(gai)類(lei)樣(yang)本(ben)幹(gan)擾因素 較多(duo),如:細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態(tai)、細(xi)胞(bao)數(shu)量、采(cai)樣(yang)時(shi)間(jian)等(deng),所(suo)以(yi)可(ke)能(neng)存在(zai)檢(jian)測(ce)不(bu)出(chu)的(de)情(qing)況(kuang)。
6. 某些天然(ran)蛋(dan)白或(huo)重組蛋白,包(bao)括(kuo)原(yuan)核(he)及真(zhen)核(he)重組蛋白,可(ke)能(neng)因為(wei)與(yu)本(ben)產品所(suo)使(shi)用的檢(jian)測(ce)抗(kang)體及捕獲(huo)抗(kang)體不(bu)匹(pi)配,而(er)不(bu)被檢(jian)測(ce)出。
7. 建(jian)議使(shi)用新鮮(xian)樣(yang)本(ben),保(bao)存(cun)時(shi)間過長(chang)可(ke)能(neng)會存在(zai)蛋(dan)白降(jiang)解(jie)或變(bian)性(xing)導致實驗結(jie)果(guo)偏差(cha)。
猴CD40配體(ti)(CD40L)ELISA試(shi)劑盒(he)操作(zuo)步驟
1. 加(jia)樣(yang):分別設空白(bai)孔(空白(bai)對(dui)照孔不(bu)加(jia)樣(yang)品及酶(mei)標(biao)試(shi)劑,其(qi)余各步(bu)操作(zuo)相同)、標(biao)準孔、待(dai)測(ce)樣(yang)品孔。在(zai)酶(mei)標(biao)包(bao)被板(ban)上標(biao)準品準確(que)加樣(yang)50μl,待(dai)測(ce)樣(yang)品孔中(zhong)先(xian)加樣(yang)品稀(xi)釋(shi)液40μl,然(ran)後(hou)再加(jia)待測(ce)樣(yang)品10μl(樣(yang)品*終稀(xi)釋(shi)度為(wei)5倍)。加樣(yang)將(jiang)樣(yang)品加於(yu)酶(mei)標(biao)板(ban)孔底(di)部,盡(jin)量不(bu)觸(chu)及孔壁(bi),輕輕晃(huang)動(dong)混(hun)勻。
2. 溫育:用封板(ban)膜封(feng)板(ban)後(hou)置37℃溫育30分鐘(zhong)。
3. 配液(ye):將(jiang)20倍濃縮(suo)洗滌(di)液用蒸餾(liu)水(shui)20倍稀(xi)釋(shi)後備用
4. 洗(xi)滌(di):小心(xin)揭(jie)掉(diao)封(feng)板(ban)膜,棄(qi)去(qu)液(ye)體(ti),甩(shuai)幹(gan),每(mei)孔加(jia)滿洗(xi)滌(di)液,靜(jing)置30秒後棄去(qu),如(ru)此(ci)重(zhong)復(fu)5次(ci),拍(pai)幹。
5. 加酶(mei):每(mei)孔加(jia)入(ru)酶(mei)標(biao)試(shi)劑50μl,空白(bai)孔除(chu)外。
6. 溫育:操(cao)作(zuo)同3。
7. 洗(xi)滌(di):操作(zuo)同5。
8. 顯(xian)色:每(mei)孔先(xian)加入(ru)顯(xian)色劑A50μl,再加(jia)入(ru)顯(xian)色劑B50μl,輕(qing)輕震(zhen)蕩(dang)混(hun)勻,37℃避(bi)光顯(xian)色15分鐘(zhong).
9. 終(zhong)止:每(mei)孔加(jia)終(zhong)止液(ye)50μl,終(zhong)止反(fan)應(ying)(此(ci)時(shi)藍(lan)色立轉黃(huang)色)。
10. 測定(ding):以空白(bai)空調零,450nm波長(chang)依(yi)序測(ce)量各孔的(de)吸光(guang)度(OD值)。 測定(ding)應在(zai)加(jia)終止液(ye)後(hou)15分鐘(zhong)以(yi)內(nei)進(jin)行。
註意(yi):
1. 試(shi)劑準備:準備壹次(ci)實驗所(suo)需要(yao)的酶(mei)標(biao)條(tiao),其(qi)它(ta)的可(ke)從微孔板(ban)上拆下,密封(feng),按照說(shuo)明書(shu)要(yao)求(qiu)保(bao)存,以(yi)備下次(ci)使(shi)用。
2. 加(jia)樣(yang):實驗操(cao)作(zuo)中請使(shi)用壹次(ci)性(xing)的(de)吸頭,避(bi)免交(jiao)叉汙染。加(jia)樣(yang)時(shi)註(zhu)意(yi)不(bu)要(yao)有(you)氣泡(pao),將(jiang)樣(yang)品加於(yu)酶(mei)標(biao)板(ban)底(di)部,盡(jin)量不(bu)觸(chu)及孔壁(bi),輕輕晃(huang)動(dong)混(hun)勻。加樣(yang)或(huo)加(jia)試(shi)劑時(shi),**個孔與(yu)*後(hou)壹個孔加(jia)樣(yang)之(zhi)間(jian)的(de)時(shi)間間隔如(ru)果(guo)太大(da),將(jiang)會導致不(bu)同(tong)的(de)“預(yu)溫育”時(shi)間,從而(er)明(ming)顯地影(ying)響(xiang)到測量值(zhi)的(de)準確(que)性及重復(fu)性。因此(ci),壹(yi)次(ci)加(jia)樣(yang)時(shi)間(jian)(包(bao)括(kuo)標(biao)準品及所(suo)有(you)樣(yang)品)*好控(kong)制在(zai)10分鐘(zhong)內(nei)。推薦設置復孔進(jin)行(xing)實驗。
3. 溫育:為(wei)防止樣(yang)品蒸發(fa),實驗時(shi)請將(jiang)加上蓋(gai)或覆(fu)膜的(de)酶(mei)標(biao)板(ban)置於濕(shi)盒(he)內,以避(bi)免液(ye)體(ti)蒸(zheng)發(fa),洗板(ban)後(hou)應盡快進行下步操(cao)作(zuo),任(ren)何時(shi)侯都(dou)應避(bi)免酶(mei)標(biao)板(ban)處於(yu)幹(gan)燥狀態,同(tong)時應(ying)嚴(yan)格(ge)遵守(shou)給(gei)定(ding)的溫育時(shi)間和溫度。
4. 洗(xi)滌(di):充(chong)分的(de)洗滌(di)非常(chang)重(zhong)要(yao),在(zai)每(mei)次(ci)洗(xi)滌(di)過程(cheng)中,都(dou)要(yao)將(jiang)洗滌(di)液完(wan)全甩(shuai)幹(gan)。洗(xi)滌(di)過程(cheng)中反(fan)應(ying)孔中(zhong)殘留的(de)洗滌(di)液應(ying)在(zai)濾(lv)紙(zhi)上拍(pai)幹,勿(wu)將(jiang)濾紙(zhi)直接(jie)放入(ru)反(fan)應孔中(zhong)吸水(shui),同時(shi)要(yao)消除板(ban)底(di)殘留的(de)液體和手指(zhi)印(yin),避(bi)免影(ying)響(xiang)*後(hou)的酶(mei)標(biao)儀讀(du)數(shu)。如果(guo)有(you)自(zi)動(dong)洗(xi)板(ban)機,應在(zai)熟(shu)練使(shi)用後再用到正式(shi)實 驗過(guo)程(cheng)中。
5. 反應時(shi)間的(de)控(kong)制:加入(ru)底(di)物後(hou)請(qing)定(ding)時觀察(cha)反應孔的(de)顏色變(bian)化(比(bi)如(ru),每(mei)隔10分鐘(zhong)觀(guan)察(cha)壹次(ci)),如(ru)顏色較深,請(qing)提前(qian)加入(ru)終(zhong)止液(ye)終(zhong)止反(fan)應(ying),避(bi)免反(fan)應(ying)過(guo)強從而(er)影(ying)響酶(mei)標(biao)儀光(guang)密度讀(du)數(shu)。
6. 底(di)物:底(di)物請(qing)避(bi)光保(bao)存(cun),在(zai)儲(chu)存和溫育時(shi)避(bi)免強(qiang)光(guang)直接(jie)照射(she)。
7. 如果(guo)實驗室內濕度低(di)於(yu)60%,推薦使(shi)用加濕(shi)器(qi)提高濕(shi)度水平(ping)。
實驗流(liu)程(cheng)
1. 實驗前(qian)標準品、試(shi)劑及樣(yang)本(ben)的(de)準備;
2. 加(jia)樣(yang)(標(biao)準品及樣(yang)本(ben))50μL,37℃孵育30分鐘(zhong);
3. 洗(xi)板(ban)5次(ci),加(jia)酶(mei)標(biao)試(shi)劑50ul,37℃孵育半(ban)小時;
4. 洗板(ban)5次(ci);加(jia)入(ru)顯(xian)色液A,B各50ul,37℃孵(fu)育顯(xian)色15分鐘(zhong)
5. 加(jia)終止液(ye)50μL,立即(ji)450nm讀(du)數(shu)。
6. 計(ji)算
猴CD40配體(ti)(CD40L)ELISA試(shi)劑盒(he)計(ji)算
各標(biao)準品及樣(yang)本(ben)O.D.值(zhi)扣(kou)除(chu)空白(bai)孔O.D.值(zhi)後(hou)作(zuo)圖(tu)(七(qi)點圖(tu)),如(ru)設置復孔,則應取(qu)其(qi)平(ping)均值(zhi)計(ji)算。以標(biao)準品的濃度為(wei)縱(zong)坐標(或對數(shu)坐標),O.D.值為(wei)橫坐標(或對數(shu)坐標),繪出(chu)標準曲線(xian)(*佳方(fang)程(cheng)式(shi)應依(yi)回(hui)歸(gui)方程(cheng)計(ji)算的R2值(zhi)來定(ding),以R2值越(yue)趨近(jin)於1為(wei)好(hao))。推薦使(shi)用專業(ye)制作(zuo)曲線(xian)軟件進(jin)行(xing)分析,如(ru)curve expert 1.30,根據樣(yang)品O.D.值,由(you)標準曲線(xian)查出(chu)相應(ying)的濃度,乘(cheng)以(yi)稀(xi)釋(shi)倍數(shu);或用標準物的濃度與(yu)O.D.值(zhi)計(ji)算出標(biao)準曲線(xian)的回(hui)歸(gui)方程(cheng)式(shi),將(jiang)樣(yang)品的O.D.值(zhi)代入(ru)方(fang)程(cheng)式(shi),計(ji)算出樣(yang)品濃度,再乘(cheng)以(yi)稀(xi)釋(shi)倍數(shu),即(ji)為(wei)樣(yang)品的實際(ji)濃度。
特異性
本(ben)試(shi)劑盒(he)用於檢(jian)測(ce)猴CD40配體(ti)(CD40L),經(jing)檢(jian)測(ce)與(yu)其(qi)它(ta)相似(si)物質(zhi)無明顯(xian)交(jiao)叉反應。
由(you)於受(shou)到(dao)技術(shu)及樣(yang)本(ben)來源(yuan)的(de)限(xian)制,不(bu)可(ke)能(neng)完(wan)成(cheng)對(dui)所(suo)有(you)相關或相似(si)物質(zhi)交叉反應檢(jian)測(ce),因此(ci)本(ben)試(shi)劑盒(he)有(you)可(ke)能(neng)與(yu)未(wei)經(jing)檢(jian)測(ce)的其(qi)它(ta)物質(zhi)有(you)交叉反應。
精(jing)密度
精密度用樣(yang)品測定(ding)值的變(bian)異系(xi)數(shu)CV表示(shi)。CV(%) = SD/mean×100
批(pi)內差(cha):取(qu)同(tong)批(pi)次(ci)試(shi)劑盒(he)對低(di)、中(zhong)、高值(zhi)定(ding)值樣(yang)本(ben)進(jin)行(xing)定(ding)量檢(jian)測(ce),每(mei)份(fen)樣(yang)本(ben)連(lian)續(xu)測(ce)定(ding)20 次(ci),分別計(ji)算不(bu)同(tong)濃度樣(yang)本(ben)的(de)平(ping)均值(zhi)及SD值。
批(pi)間差(cha):選(xuan)取(qu)3個(ge)不(bu)同(tong)批(pi)次(ci)的(de)試(shi)劑盒(he)分別對低(di)、中(zhong)、高值(zhi)定(ding)值樣(yang)本(ben)進(jin)行(xing)定(ding)量測(ce)定(ding),每(mei)個樣(yang)本(ben)使(shi)用同壹(yi)試(shi)劑盒(he)重復(fu)測定(ding)8次(ci),分別計(ji)算不(bu)同(tong)濃度樣(yang)本(ben)的(de)平(ping)均值(zhi)及SD值。
批(pi)內差(cha): CV<10%
批(pi)間差(cha): CV<12%
猴CD40配體(ti)(CD40L)ELISA試(shi)劑盒(he)穩(wen)定(ding)性
經(jing)測定(ding),試(shi)劑盒(he)在(zai)有(you)效期(qi)內(nei)按推薦溫度保存,其(qi)活(huo)性降(jiang)低(di)率(lv)小(xiao)於5%。
為(wei)減小(xiao)外部(bu)因素對(dui)試(shi)劑盒(he)破壞前(qian)後檢(jian)測(ce)值的影響(xiang),實驗室的環(huan)境條(tiao)件需盡量保(bao)持壹(yi)致,尤(you)其(qi)是實驗室內溫度、濕度及溫育條(tiao)件。其(qi)次(ci)由(you)同(tong)壹(yi)實驗員(yuan)來進(jin)行(xing)操作(zuo)可(ke)減少(shao)人為(wei)誤差。



