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      1. <dl id="Ht0T0p"></dl>

        1. 產(chan)品詳情
          • 產(chan)品(pin)名稱:猴(hou)神(shen)經(jing)生(sheng)長(chang)因(yin)子(NGF)ELISA試劑(ji)盒

          • 產(chan)品型(xing)號:NGF
          • 產品廠(chang)商(shang):KALANG
          • 產品(pin)文(wen)檔(dang):
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          猴(hou)神(shen)經(jing)生(sheng)長(chang)因(yin)子(NGF)ELISA試劑(ji)盒運(yun)用雙(shuang)抗(kang)體(ti)夾(jia)心ELISA法定量(liang)測定猴(hou)血清、血漿(jiang)、組(zu)織勻漿(jiang)、細(xi)胞裂(lie)解液、細(xi)胞培(pei)養(yang)上清液和其(qi)他(ta)生(sheng)物(wu)液體(ti)中猴(hou)神(shen)經(jing)生(sheng)長(chang)因(yin)子(NGF)ELISA試劑(ji)盒含量(liang)。
          詳情(qing)介(jie)紹(shao):


                                                                 96T       僅(jin)供(gong)體(ti)外(wai)研究(jiu)使用,不(bu)用於(yu)臨床診(zhen)斷(duan)!

          猴(hou)神(shen)經(jing)生(sheng)長(chang)因(yin)子(NGF)ELISA試劑(ji)盒

          本(ben)試劑(ji)盒運(yun)用雙(shuang)抗(kang)體(ti)夾(jia)心ELISA法定量(liang)測定猴(hou)血清、血漿(jiang)、組(zu)織勻漿(jiang)、細(xi)胞裂(lie)解液、細(xi)胞培(pei)養(yang)上清液和其(qi)他(ta)生(sheng)物(wu)液體(ti)中猴(hou)神(shen)經(jing)生(sheng)長(chang)因(yin)子(NGF)含量(liang)。

           檢(jian)測範(fan)圍

          15.625-1000pg/mL

           *低檢(jian)測限(xian)

          6.2pg/mL

           實驗(yan)原(yuan)理(li)

          猴(hou)神(shen)經(jing)生(sheng)長(chang)因(yin)子(NGF)抗(kang)體(ti)包(bao)被於(yu)96孔微孔板中(zhong),制(zhi)成固相載(zai)體(ti),向微(wei)孔中分別(bie)加(jia)入(ru)標(biao)準(zhun)品(pin)或(huo)標(biao)本(ben),其(qi)中(zhong)的(de)猴(hou)神(shen)經(jing)生(sheng)長(chang)因(yin)子(NGF)與(yu)連(lian)接(jie)於(yu)固相(xiang)載(zai)體(ti)上的抗(kang)體(ti)結(jie)合(he),然後(hou)加(jia)入(ru)生(sheng)物(wu)素化(hua)的(de)猴(hou)神(shen)經(jing)生(sheng)長(chang)因(yin)子(NGF)抗(kang)體(ti),將未結(jie)合(he)的生(sheng)物(wu)素化(hua)抗(kang)體(ti)洗凈(jing)後(hou),加(jia)入(ru)HRP標(biao)記的親和素(su),再(zai)次(ci)徹(che)底(di)洗滌(di)後(hou)加(jia)入(ru)TMB底(di)物(wu)顯(xian)色(se)。TMB在(zai)過氧化(hua)物(wu)酶的(de)催(cui)化(hua)下(xia)轉化(hua)成藍(lan)色(se),並(bing)在(zai)酸的作(zuo)用下(xia)轉化(hua)成*終的黃色(se)。顏色(se)的深淺(qian)和樣品中(zhong)的(de)猴(hou)神(shen)經(jing)生(sheng)長(chang)因(yin)子(NGF)呈(cheng)正(zheng)相(xiang)關(guan)。用酶標(biao)儀(yi)在(zai)450nm波(bo)長下(xia)測定吸(xi)光度(du)(O.D.),計(ji)算樣品濃度。

           試劑(ji)盒內(nei)容

          試劑(ji)名稱

          數量(liang)

          試劑(ji)名稱

          數量(liang)

          96孔板(預(yu)包(bao)被)

          1

          96孔板覆(fu)膜

          2

          標(biao)準(zhun)品(pin)

          0.5ml×1

          標(biao)準(zhun)品(pin)稀釋液

          1.5ml×1

          顯(xian)色(se)劑(ji)A

          6ml×1

          樣品稀釋液

          6ml×1

          顯(xian)色(se)劑(ji)B

          6ml×1

          終止液

          6ml×1

          酶標(biao)試劑(ji)

          6ml×1

          密封(feng)袋

          1

          濃洗滌液(30×)

          1×20mL

          使用說明(ming)書(shu)

          1

          猴(hou)神(shen)經(jing)生(sheng)長(chang)因(yin)子(NGF)ELISA試劑(ji)盒需(xu)自(zi)備(bei)的(de)設備(bei)及(ji)試劑(ji)

          1.         450±10nm濾光(guang)片的酶標(biao)儀(yi)(建議儀(yi)器(qi)使用前提(ti)前預(yu)熱)

          2.         單道(dao)或(huo)多(duo)道(dao)微量(liang)加(jia)液器(qi)及(ji)吸頭(tou)

          3.         稀釋樣品的(de)EP

          4.         蒸餾水(shui)或去離子水(shui)

          5.         吸水(shui)紙(zhi)

          6.         盛放洗液的(de)容(rong)器

           試劑(ji)盒的(de)儲存(cun)及(ji)有效(xiao)期

          1.         未開封的試劑(ji)盒:所(suo)有試劑(ji)均(jun)按(an)試劑(ji)瓶標(biao)簽上所示(shi)保存。請註(zhu)意(yi),收(shou)到(dao)試劑(ji)盒後(hou)請盡(jin)快(kuai)將(jiang)TMB 洗(xi)滌液,終(zhong)止液保存於(yu)4℃,其他(ta)試劑(ji)保存於(yu)-20℃。

          2.         使用後(hou)的試劑(ji)盒:剩余試劑(ji)仍需(xu)按(an)照(zhao)試劑(ji)瓶標(biao)簽所(suo)示(shi)的(de)溫(wen)度保存,開封後(hou)的酶標(biao)板(ban)要(yao)加(jia)幹燥劑(ji)後(hou)密封(feng)保存於(yu)-20℃,避免(mian)潮濕。

          註(zhu)意(yi):

          試劑(ji)盒內(nei)酶標(biao)條(tiao)可拆(chai)卸(xie),按(an)實驗(yan)需(xu)求可(ke)分多(duo)次(ci)使用;使用後(hou)的剩余試劑(ji)盒建議在(zai)**實驗(yan)後(hou) 1個月內使用完(wan)畢。產(chan)品過期時間(jian)以(yi)盒(he)子上的標(biao)簽為(wei)準(zhun),保質期內所(suo)有(you)組(zu)分都(dou)確保是(shi)穩定的(de)。

          猴(hou)神(shen)經(jing)生(sheng)長(chang)因(yin)子(NGF)ELISA試劑(ji)盒標(biao)本(ben)的(de)采(cai)集與(yu)保存

          1.         血清

          將收(shou)集(ji)於(yu)血清分離管的全血標(biao)本(ben)在(zai)室溫(wen)放置 2 小(xiao)時或(huo) 4oC 過夜,然後(hou) 1000×g 離心 20 分鐘(zhong),取(qu)上清即(ji)可(ke),或將上清置於(yu)-20oC -80oC 保存,但(dan)應(ying)避免(mian)反(fan)復凍融(rong)。

          2.         血漿(jiang):

          EDTA 或(huo)肝素作(zuo)為抗(kang)凝(ning)劑(ji)采(cai)集標(biao)本(ben),並(bing)將(jiang)標(biao)本(ben)在(zai)采(cai)集後(hou)的 30 分鐘(zhong)內於(yu) 2-8oC 1000×g 離心 15 分鐘(zhong),取(qu)上清即(ji)可(ke)檢(jian)測,或(huo)將上清置於(yu)-20oC -80oC 保存,但(dan)應(ying)避免(mian)反(fan)復凍融(rong)。

          3. 組(zu)織勻漿(jiang):

          1) 取(qu)適(shi)量(liang)組(zu)織塊,於(yu)預(yu)冷PBS0.01mol/L, pH 7.0-7.2)中(zhong)清洗(xi)去除血液,稱重(zhong)後(hou)備(bei)用(組(zu)織塊較(jiao)大需(xu)先(xian)剪碎後(hou)再勻(yun)漿(jiang));

          2) 可同(tong)時選用多(duo)種勻漿(jiang)方法達(da)到(dao)較(jiao)好(hao)的破碎效(xiao)果:首(shou)先(xian)將組(zu)織塊移入(ru)玻璃(li)勻漿(jiang)器,加(jia)入(ru)5-10mL 預(yu)冷PBS 進(jin)行(xing)充分研磨,該(gai)過程需(xu)在(zai)冰(bing)上進(jin)行(xing)(有條(tiao)件(jian)實驗(yan)室可(ke)選用機(ji)器(qi)勻漿(jiang));得到(dao)的(de)勻(yun)漿(jiang)液可(ke)再(zai)利用超(chao)聲破碎或(huo)反(fan)復凍融(rong) 進(jin)壹(yi)步(bu)處理(li)(超(chao)聲破碎過程中(zhong)註(zhu)意(yi)冰(bing)浴(yu)降溫(wen);反(fan)復凍融(rong)法(fa)可(ke)重(zhong)復(fu)2 次(ci))。

          3) 將制(zhi)備(bei)好(hao)的勻(yun)漿(jiang)液於(yu)5000×g 離心5 分鐘(zhong),留取(qu)上清即(ji)可(ke)檢(jian)測。

          4. 細(xi)胞裂(lie)解液:

          1)貼壁(bi)細(xi)胞需(xu)要(yao)先(xian)用胰酶消(xiao)化(hua),離(li)心收(shou)集(ji)細(xi)胞(懸浮(fu)細(xi)胞可直(zhi)接離(li)心收(shou)集(ji));

          2)將收(shou)集(ji)到(dao)的(de)細(xi)胞用冷(leng)PBS 3 次(ci);

          3)物(wu)理方法裂(lie)解細(xi)胞(可先(xian)超(chao)聲破碎細(xi)胞,再反(fan)復凍融(rong)):

          i 超(chao)聲破碎:取(qu)適(shi)量(liang)PBS 重懸(xuan)細(xi)胞,用壹(yi)定功率(lv)的(de)超(chao)聲波(bo)處理(li)細(xi)胞懸液,使細(xi)胞急劇震(zhen)蕩(dang)破裂(lie)。

          ii 反(fan)復凍融(rong):將(jiang)待(dai)破碎的(de)細(xi)胞在(zai)-20 oC 以(yi)下(xia)冰凍,室溫(wen)融(rong)解(jie),反(fan)復3 次(ci),使細(xi)胞溶脹(zhang)破碎。

          4)將標(biao)本(ben)於(yu)2-8 oC 1500×g 離心10 分鐘(zhong),收(shou)集(ji)上清備(bei)用。

          5. 細(xi)胞培(pei)養(yang)上清或(huo)其(qi)它(ta)生(sheng)物(wu)標(biao)本(ben):

          1000×g 離(li)心 20 分鐘(zhong),取(qu)上清即(ji)可(ke)檢(jian)測,或(huo)將上清置於(yu)-20oC -80oC 保存,但(dan)應(ying)避免(mian)反(fan)復凍融(rong)。

          註(zhu)意(yi):

          1.         以(yi)上標(biao)本(ben)均(jun)需(xu)密(mi)封保存4oC保存應(ying)小於(yu)1周,-20oC不應超(chao)過1個月,-80oC不應超(chao)過2個月。

          2.         標(biao)本(ben)使用前應緩慢均(jun)衡(heng)至室溫(wen),不應(ying)加(jia)熱使之融(rong)解(jie)。

          3.         實驗(yan)前紅細(xi)胞裂(lie)解液必須(xu)用標(biao)準(zhun)品(pin)稀釋液稀釋。

          猴(hou)神(shen)經(jing)生(sheng)長(chang)因(yin)子(NGF)ELISA試劑(ji)盒試劑(ji)準(zhun)備(bei)

          1.         使用前將所(suo)有的(de)試劑(ji)和標(biao)本(ben)緩慢均(jun)衡(heng)至室溫(wen)(18-25oC),試劑(ji)不能(neng)直接(jie)在(zai)37oC溶(rong)解。

          2.         標(biao)準(zhun)品(pin)(凍幹品):每(mei)瓶標(biao)準(zhun)品(pin)加(jia)入(ru)標(biao)準(zhun)品(pin)稀釋液1mL,蓋(gai)好(hao)後(hou)室溫(wen)靜(jing)置大約10分鐘(zhong),同(tong)時反(fan)復顛(dian)倒(dao)/搓動(dong)以(yi)助(zhu)溶解,其濃度為1000pg/mL。準(zhun)備(bei)7個稀釋標(biao)準(zhun)品(pin)的(de)EP管,每個EP管中加(jia)入(ru)150μL的(de)標(biao)準(zhun)品(pin)稀釋液,如(ru)圖所(suo)示(shi)依(yi)次(ci)倍(bei)比稀釋成不同(tong)的梯(ti)度, 標(biao)準(zhun)品(pin)稀釋液(0pg/mL)直(zhi)接(jie)作為(wei)空白孔。為保證(zheng)實驗(yan)結(jie)果有(you)效(xiao)性,每(mei)次(ci)實驗(yan)請使用新(xin)的標(biao)準(zhun)品(pin)溶(rong)液。

           

           

           

          3.         濃洗滌液:用580mL蒸餾水(shui)或去離子水(shui)將20mL濃洗滌液稀釋至600mL,進(jin)行(xing)30倍稀釋。

          標(biao)本(ben)處(chu)理(li)

          1.         本(ben)公司只(zhi)對(dui)試劑(ji)盒本(ben)身負責,不對(dui)因(yin)使用該(gai)試劑(ji)盒所(suo)造成的樣本(ben)消(xiao)耗(hao)負(fu)責(ze),請使用者(zhe)使用前充分考(kao)慮到樣本(ben)的(de)可(ke)能(neng)使用量(liang),預(yu)留充足的樣本(ben)。

          2.         實驗(yan)前應預(yu)測標(biao)本(ben)含量(liang),如果標(biao)本(ben)濃度過高(gao),應對(dui)標(biao)本(ben)進(jin)行(xing)稀釋,使稀釋後(hou)的標(biao)本(ben)符合(he)試劑(ji)盒的(de)檢(jian)測範(fan)圍,計(ji)算時(shi)再乘(cheng)以(yi)相(xiang)應的稀釋倍數。

          3.         若(ruo)所(suo)檢(jian)樣本(ben)不(bu)包(bao)含在(zai)說明(ming)書(shu)所列(lie)樣本(ben)之中,建議進(jin)行(xing)預(yu)實驗(yan)驗證(zheng)其有(you)效(xiao)性,並(bing)註(zhu)意(yi)留(liu)存樣本(ben)。

          4.         使用化(hua)學裂(lie)解液制(zhi)備(bei)的(de)組(zu)織勻漿(jiang)或細(xi)胞提(ti)取(qu)液可(ke)能(neng)會由於(yu)某些化(hua)學物(wu)質的引入(ru)導(dao)致(zhi)  ELISA實驗(yan)結(jie)果偏(pian)差(cha)。

          5.         若(ruo)樣本(ben)為(wei)細(xi)胞培(pei)養(yang)上清,因(yin)該(gai)類樣本(ben)幹擾因(yin)素(su) 較(jiao)多(duo),如(ru):細(xi)胞狀(zhuang)態、細(xi)胞數量(liang)、采(cai)樣時間(jian)等(deng),所以(yi)可(ke)能存在(zai)檢(jian)測不(bu)出的(de)情況(kuang)。

          6.         某些天然蛋(dan)白或(huo)重(zhong)組(zu)蛋(dan)白,包(bao)括(kuo)原(yuan)核(he)及(ji)真(zhen)核(he)重(zhong)組(zu)蛋(dan)白,可(ke)能(neng)因(yin)為(wei)與(yu)本(ben)產(chan)品(pin)所(suo)使用的(de)檢(jian)測抗(kang)體(ti)及捕(bu)獲(huo)抗(kang)體(ti)不匹配,而(er)不(bu)被檢(jian)測出(chu)。

          7.         建議使用新(xin)鮮樣本(ben),保存時(shi)間過長可(ke)能會存在(zai)蛋(dan)白降(jiang)解(jie)或變性導(dao)致(zhi)實驗(yan)結(jie)果偏(pian)差(cha)。

          猴(hou)神(shen)經(jing)生(sheng)長(chang)因(yin)子(NGF)ELISA試劑(ji)盒操(cao)作步(bu)驟

          1.         加(jia)樣:分別(bie)設空(kong)白孔(空白對(dui)照孔不加(jia)樣品及(ji)酶標(biao)試劑(ji),其余(yu)各(ge)步(bu)操作(zuo)相(xiang)同(tong))、標(biao)準(zhun)孔、待測(ce)樣品孔。在(zai)酶標(biao)包(bao)被板(ban)上標(biao)準(zhun)品(pin)準(zhun)確(que)加(jia)樣50μl,待測(ce)樣品孔中先(xian)加(jia)樣品稀釋液40μl,然後(hou)再加(jia)待測(ce)樣品10μl(樣品*終(zhong)稀釋度為5倍)。加(jia)樣將樣品加(jia)於(yu)酶標(biao)板(ban)孔底(di)部(bu),盡(jin)量(liang)不觸(chu)及(ji)孔壁(bi),輕輕(qing)晃(huang)動(dong)混(hun)勻(yun)。

          2.         溫(wen)育:用封(feng)板膜封(feng)板後(hou)置37℃溫(wen)育30分鐘(zhong)。  

          3.         配液:將(jiang)20倍(bei)濃縮(suo)洗滌(di)液用蒸(zheng)餾水(shui)20倍稀釋後(hou)備(bei)用

          4.         洗滌(di):小(xiao)心揭掉(diao)封板膜,棄(qi)去液體(ti),甩(shuai)幹,每孔加(jia)滿洗(xi)滌液,靜(jing)置30秒(miao)後(hou)棄(qi)去,如此(ci)重復(fu)5次(ci),拍(pai)幹。

          5.         加(jia)酶:每(mei)孔加(jia)入(ru)酶標(biao)試劑(ji)50μl,空白孔除外(wai)。

          6.         溫(wen)育:操(cao)作同(tong)3

          7.         洗滌(di):操(cao)作同(tong)5

          8.         顯(xian)色(se):每孔先(xian)加(jia)入(ru)顯(xian)色(se)劑(ji)A50μl,再加(jia)入(ru)顯(xian)色(se)劑(ji)B50μl,輕輕(qing)震蕩(dang)混(hun)勻(yun),37℃避光(guang)顯(xian)色(se)15分鐘(zhong).

          9.         終止:每(mei)孔加(jia)終止液50μl,終(zhong)止反(fan)應(此(ci)時(shi)藍(lan)色(se)立(li)轉黃(huang)色(se))。

          10.     測定:以(yi)空(kong)白空(kong)調(tiao)零,450nm波(bo)長依(yi)序(xu)測量(liang)各(ge)孔的吸(xi)光(guang)度(OD值(zhi))。 測(ce)定應(ying)在(zai)加(jia)終止液後(hou)15分鐘(zhong)以(yi)內(nei)進(jin)行(xing)。

          註(zhu)意(yi):

          1.         試劑(ji)準(zhun)備(bei)準(zhun)備(bei)壹(yi)次(ci)實驗(yan)所需(xu)要(yao)的酶標(biao)條(tiao),其它(ta)的可從(cong)微(wei)孔板上拆(chai)下(xia),密封,按(an)照(zhao)說明(ming)書(shu)要(yao)求保存,以(yi)備(bei)下(xia)次(ci)使用。

          2.         加(jia)樣實驗(yan)操作中(zhong)請使用壹(yi)次(ci)性的(de)吸(xi)頭,避免(mian)交(jiao)叉汙染(ran)。加(jia)樣時註(zhu)意(yi)不(bu)要(yao)有氣(qi)泡(pao),將樣品加(jia)於(yu)酶標(biao)板(ban)底(di)部(bu),盡(jin)量(liang)不觸(chu)及(ji)孔壁(bi),輕輕(qing)晃(huang)動(dong)混(hun)勻(yun)。加(jia)樣或加(jia)試劑(ji)時,**個孔與(yu)*後(hou)壹個孔加(jia)樣之間的(de)時(shi)間間(jian)隔如果太(tai)大,將會導致(zhi)不(bu)同(tong)的“預(yu)溫(wen)育”時(shi)間,從而(er)明(ming)顯(xian)地影(ying)響(xiang)到(dao)測量(liang)值的(de)準(zhun)確(que)性及(ji)重(zhong)復性。因(yin)此(ci),壹(yi)次(ci)加(jia)樣時間(jian)(包(bao)括(kuo)標(biao)準(zhun)品(pin)及(ji)所(suo)有(you)樣品)*好(hao)控制(zhi)在(zai)10分鐘(zhong)內。推(tui)薦設置復(fu)孔進(jin)行(xing)實驗(yan)。

          3.          溫(wen)育為防(fang)止樣品蒸(zheng)發,實驗(yan)時請將(jiang)加(jia)上蓋或(huo)覆(fu)膜的(de)酶標(biao)板(ban)置於(yu)濕盒(he)內(nei),以(yi)避免(mian)液體(ti)蒸發,洗(xi)板(ban)後(hou)應盡(jin)快(kuai)進(jin)行(xing)下(xia)步(bu)操作(zuo),任何時侯(hou)都(dou)應避免(mian)酶標(biao)板(ban)處於(yu)幹燥狀(zhuang)態,同(tong)時應(ying)嚴格(ge)遵守給定的(de)溫(wen)育時(shi)間和溫(wen)度。

          4.         洗滌(di):充分的洗滌非常重要(yao),在(zai)每(mei)次(ci)洗(xi)滌(di)過程中(zhong),都(dou)要(yao)將洗(xi)滌(di)液完(wan)全甩(shuai)幹。洗滌(di)過程中(zhong)反(fan)應孔中殘(can)留的(de)洗滌液應(ying)在(zai)濾(lv)紙(zhi)上拍幹,勿將(jiang)濾紙(zhi)直接放入(ru)反(fan)應孔中吸(xi)水(shui),同(tong)時要(yao)消(xiao)除(chu)板(ban)底(di)殘(can)留的(de)液體(ti)和手指印(yin),避免(mian)影(ying)響*後(hou)的酶標(biao)儀(yi)讀(du)數(shu)。如(ru)果有(you)自(zi)動(dong)洗板(ban)機(ji),應(ying)在(zai)熟(shu)練使用後(hou)再用到(dao)正式(shi)實 驗(yan)過程中(zhong)。

          5.         反(fan)應時(shi)間(jian)的(de)控制加(jia)入(ru)底(di)物(wu)後(hou)請定時(shi)觀(guan)察反(fan)應孔的顏(yan)色(se)變化(hua)(比如,每隔10分鐘(zhong)觀(guan)察壹(yi)次(ci)),如(ru)顏(yan)色(se)較(jiao)深(shen),請提(ti)前加(jia)入(ru)終(zhong)止液終(zhong)止反(fan)應,避免(mian)反(fan)應過強從(cong)而(er)影(ying)響酶標(biao)儀(yi)光密度讀(du)數(shu)。

          6.         底(di)物(wu)底(di)物(wu)請避光(guang)保存,在(zai)儲存(cun)和溫(wen)育時(shi)避免(mian)強(qiang)光直接照(zhao)射。

          7.         如果實驗(yan)室內(nei)濕度(du)低於(yu)60%,推薦(jian)使用加(jia)濕器(qi)提(ti)高(gao)濕度(du)水(shui)平(ping)。

           實驗(yan)流程

          1.         實驗(yan)前標(biao)準(zhun)品(pin)、試劑(ji)及樣本(ben)的(de)準(zhun)備(bei);

          2.         加(jia)樣(標(biao)準(zhun)品(pin)及(ji)樣本(ben))50μL37孵育(yu)30分鐘(zhong);

          3.         洗板(ban)5次(ci),加(jia)酶標(biao)試劑(ji)50ul37孵育(yu)半(ban)小時;

          4.         洗板(ban)5次(ci);加(jia)入(ru)顯(xian)色(se)液AB各(ge)50ul,37孵育(yu)顯(xian)色(se)15分鐘(zhong)

          5.         加(jia)終止液50μL,立(li)即450nm讀(du)數(shu)。

          6.    計算

          猴(hou)神(shen)經(jing)生(sheng)長(chang)因(yin)子(NGF)ELISA試劑(ji)盒計(ji)算

          各(ge)標(biao)準(zhun)品(pin)及(ji)樣本(ben)O.D.值(zhi)扣(kou)除空(kong)白孔O.D.值後(hou)作圖(七(qi)點(dian)圖),如(ru)設(she)置復(fu)孔,則(ze)應(ying)取(qu)其平(ping)均(jun)值(zhi)計(ji)算。以(yi)標(biao)準(zhun)品(pin)的(de)濃度為縱坐標(biao)(或(huo)對(dui)數坐標(biao))O.D.值(zhi)為橫坐標(biao)(或(huo)對(dui)數坐標(biao)),繪(hui)出(chu)標(biao)準(zhun)曲(qu)線(xian)(*佳(jia)方程式(shi)應(ying)依回(hui)歸(gui)方程計(ji)算的(de)R2值來(lai)定,以(yi)R2值(zhi)越(yue)趨近於(yu)1為好(hao))。推薦(jian)使用專(zhuan)業制作(zuo)曲(qu)線軟件(jian)進(jin)行(xing)分析,如curve expert 1.30,根(gen)據樣品O.D.值(zhi),由(you)標(biao)準(zhun)曲(qu)線(xian)查出(chu)相應(ying)的(de)濃度,乘(cheng)以(yi)稀釋倍數;或用標(biao)準(zhun)物(wu)的濃度與(yu)O.D.值(zhi)計算出(chu)標(biao)準(zhun)曲(qu)線(xian)的(de)回(hui)歸(gui)方程式(shi),將(jiang)樣品的(de)O.D.值(zhi)代(dai)入(ru)方程式(shi),計(ji)算出(chu)樣品濃度,再乘(cheng)以(yi)稀釋倍數,即為樣品的(de)實際濃度。

           特異(yi)性

          本(ben)試劑(ji)盒用於(yu)檢(jian)測猴(hou)神(shen)經(jing)生(sheng)長(chang)因(yin)子(NGF),經(jing)檢(jian)測與(yu)其(qi)它(ta)相似物(wu)質無(wu)明(ming)顯(xian)交叉(cha)反(fan)應。

          由於(yu)受到技(ji)術及(ji)樣本(ben)來(lai)源(yuan)的限(xian)制(zhi),不可能(neng)完(wan)成對(dui)所有相關(guan)或(huo)相(xiang)似物(wu)質交叉反(fan)應檢(jian)測,因(yin)此(ci)本(ben)試劑(ji)盒有(you)可能(neng)與(yu)未經(jing)檢(jian)測的(de)其它(ta)物(wu)質有交叉(cha)反(fan)應。

           精(jing)密度(du)

          精(jing)密度(du)用樣品測(ce)定值(zhi)的變(bian)異(yi)系數CV表(biao)示(shi)。CV(%) = SD/mean×100

          批內(nei)差(cha):取(qu)同(tong)批次(ci)試劑(ji)盒對(dui)低、中、高(gao)值定值(zhi)樣本(ben)進(jin)行(xing)定量(liang)檢(jian)測,每(mei)份樣本(ben)連(lian)續(xu)測(ce)定20 次(ci),分別(bie)計算不(bu)同(tong)濃度樣本(ben)的(de)平(ping)均(jun)值(zhi)及(ji)SD值。

          批間(jian)差(cha):選取(qu)3個不同(tong)批次(ci)的(de)試劑(ji)盒分別(bie)對(dui)低、中、高(gao)值定值(zhi)樣本(ben)進(jin)行(xing)定量(liang)測定,每(mei)個樣本(ben)使用同(tong)壹試劑(ji)盒重(zhong)復測(ce)定8次(ci),分別(bie)計算不(bu)同(tong)濃度樣本(ben)的(de)平(ping)均(jun)值(zhi)及(ji)SD值。

          批內(nei)差(cha): CV<10%

          批間(jian)差(cha): CV<12%

          猴(hou)神(shen)經(jing)生(sheng)長(chang)因(yin)子(NGF)ELISA試劑(ji)盒穩定性

          經(jing)測(ce)定,試劑(ji)盒在(zai)有(you)效(xiao)期內按(an)推(tui)薦(jian)溫(wen)度保存,其(qi)活(huo)性降(jiang)低率(lv)小(xiao)於(yu)5%

          為減(jian)小(xiao)外(wai)部(bu)因(yin)素(su)對(dui)試劑(ji)盒破壞前後(hou)檢(jian)測值(zhi)的影(ying)響,實驗(yan)室的(de)環境條(tiao)件(jian)需(xu)盡(jin)量(liang)保持壹(yi)致(zhi),尤其是(shi)實驗(yan)室內(nei)溫(wen)度、濕度(du)及(ji)溫(wen)育條(tiao)件(jian)。其次(ci)由(you)同(tong)壹實驗(yan)員(yuan)來(lai)進(jin)行(xing)操作可減少人為(wei)誤差(cha)。


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