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      1. <dl id="Ht0T0p"></dl>

        1. 產品(pin)詳(xiang)情
          • 產品(pin)名(ming)稱:猴碳(tan)酸(suan)酐(gan)酶(mei)Ⅱ(CA2)ELISA試(shi)劑盒(he)

          • 產品(pin)型號(hao):CA2
          • 產品(pin)廠(chang)商(shang):KALANG
          • 產品(pin)文檔:
          妳添加了(le)1件商(shang)品(pin) 查(zha)看購物(wu)車(che)
          簡(jian)單(dan)介(jie)紹:
          猴(hou)碳(tan)酸(suan)酐(gan)酶(mei)Ⅱ(CA2)ELISA試(shi)劑盒(he)運(yun)用(yong)雙抗體(ti)夾心(xin)ELISA法(fa)定量測(ce)定猴血(xue)清、血(xue)漿、組(zu)織(zhi)勻漿、細(xi)胞裂(lie)解液、細(xi)胞培(pei)養(yang)上(shang)清液和(he)其(qi)他(ta)生(sheng)物(wu)液體(ti)中猴(hou)碳(tan)酸(suan)酐(gan)酶(mei)Ⅱ(CA2)ELISA試(shi)劑盒(he)含(han)量(liang)。
          詳(xiang)情介紹:


                                                                 96T       僅供(gong)體(ti)外研(yan)究使(shi)用,不(bu)用於臨床診斷!

          猴碳(tan)酸(suan)酐(gan)酶(mei)Ⅱ(CA2)ELISA試(shi)劑盒(he)

          本試劑盒(he)運(yun)用(yong)雙抗體(ti)夾心(xin)ELISA法(fa)定量測(ce)定猴血(xue)清、血(xue)漿、組(zu)織(zhi)勻漿、細(xi)胞裂(lie)解液、細(xi)胞培(pei)養(yang)上(shang)清液和(he)其(qi)他(ta)生(sheng)物(wu)液體(ti)中猴(hou)碳(tan)酸(suan)酐(gan)酶(mei)Ⅱ(CA2)含(han)量。

           檢測範圍

          3.125-200ng/mL

           *低檢測限

          1.22ng/mL

           實驗原(yuan)理(li)

          將(jiang)猴碳(tan)酸(suan)酐(gan)酶(mei)Ⅱ(CA2)抗體(ti)包被(bei)於(yu)96孔(kong)微(wei)孔(kong)板中,制(zhi)成(cheng)固相(xiang)載(zai)體(ti),向微(wei)孔(kong)中分別加(jia)入(ru)標(biao)準品(pin)或(huo)標(biao)本,其(qi)中的猴碳(tan)酸(suan)酐(gan)酶(mei)Ⅱ(CA2)與連接(jie)於固相(xiang)載(zai)體(ti)上的抗體(ti)結(jie)合,然後(hou)加入(ru)生(sheng)物(wu)素(su)化(hua)的猴碳(tan)酸(suan)酐(gan)酶(mei)Ⅱ(CA2)抗體(ti),將(jiang)未(wei)結(jie)合的生物(wu)素(su)化(hua)抗體(ti)洗凈(jing)後(hou),加入(ru)HRP標(biao)記的親(qin)和(he)素(su),再(zai)次徹底洗(xi)滌(di)後(hou)加入(ru)TMB底物(wu)顯(xian)色。TMB在(zai)過氧(yang)化(hua)物(wu)酶(mei)的催化(hua)下(xia)轉(zhuan)化(hua)成(cheng)藍色,並(bing)在(zai)酸(suan)的作用下(xia)轉(zhuan)化(hua)成(cheng)*終(zhong)的黃(huang)色。顏(yan)色的深淺(qian)和(he)樣(yang)品(pin)中的猴碳(tan)酸(suan)酐(gan)酶(mei)Ⅱ(CA2)呈正(zheng)相(xiang)關(guan)。用酶(mei)標(biao)儀在450nm波(bo)長下(xia)測定吸光(guang)度(du)(O.D.),計算樣品(pin)濃(nong)度(du)。

           試劑(ji)盒(he)內(nei)容

          試劑(ji)名(ming)稱(cheng)

          數量(liang)

          試劑(ji)名(ming)稱(cheng)

          數量(liang)

          96孔(kong)板(預(yu)包被(bei))

          1

          96孔(kong)板覆膜

          2

          標(biao)準品(pin)

          0.5ml×1

          標(biao)準品(pin)稀釋(shi)液

          1.5ml×1

          顯(xian)色劑(ji)A

          6ml×1

          樣品(pin)稀釋(shi)液

          6ml×1

          顯(xian)色劑(ji)B

          6ml×1

          終(zhong)止液

          6ml×1

          酶(mei)標(biao)試劑

          6ml×1

          密(mi)封袋(dai)

          1

          濃洗(xi)滌(di)液(30×)

          1×20mL

          使(shi)用說(shuo)明書

          1

          猴碳(tan)酸(suan)酐(gan)酶(mei)Ⅱ(CA2)ELISA試(shi)劑盒(he)需(xu)自(zi)備(bei)的設備及試(shi)劑(ji)

          1.         450±10nm濾(lv)光(guang)片的酶(mei)標(biao)儀(建(jian)議儀器使(shi)用前(qian)提前(qian)預熱)

          2.         單道或(huo)多道微(wei)量加(jia)液器及(ji)吸(xi)頭(tou)

          3.         稀釋(shi)樣品(pin)的EP管(guan)

          4.         蒸餾水或(huo)去離(li)子水(shui)

          5.         吸水(shui)紙(zhi)

          6.         盛放洗(xi)液的容器

           試劑(ji)盒(he)的儲存及有(you)效期

          1.         未(wei)開封的試劑盒(he):所(suo)有(you)試(shi)劑(ji)均(jun)按(an)試劑瓶標(biao)簽上所(suo)示保存(cun)。請註(zhu)意(yi),收(shou)到試(shi)劑盒(he)後(hou)請盡(jin)快(kuai)將(jiang)TMB 洗(xi)滌液,終(zhong)止液保(bao)存於(yu)4℃,其(qi)他(ta)試(shi)劑(ji)保(bao)存(cun)於-20℃。

          2.         使(shi)用後(hou)的試劑盒(he):剩余(yu)試劑(ji)仍(reng)需(xu)按照試劑(ji)瓶標(biao)簽所(suo)示的溫度(du)保存(cun),開(kai)封後(hou)的酶(mei)標(biao)板要(yao)加(jia)幹(gan)燥劑後(hou)密(mi)封保存於(yu)-20℃,避免(mian)潮(chao)濕(shi)。

          註(zhu)意(yi):

          試劑(ji)盒(he)內(nei)酶(mei)標(biao)條可(ke)拆卸(xie),按實驗需(xu)求可分多(duo)次使(shi)用;使(shi)用後(hou)的剩余(yu)試劑(ji)盒(he)建(jian)議在(zai)**實(shi)驗後(hou) 1個月(yue)內(nei)使(shi)用完(wan)畢(bi)。產品(pin)過期時間(jian)以(yi)盒(he)子(zi)上(shang)的標(biao)簽為準(zhun),保質(zhi)期內所(suo)有(you)組(zu)分都(dou)確保(bao)是穩定的。

          猴碳(tan)酸(suan)酐(gan)酶(mei)Ⅱ(CA2)ELISA試(shi)劑盒(he)標(biao)本的采集(ji)與保存

          1.         血清

          將(jiang)收(shou)集(ji)於血(xue)清分離(li)管(guan)的全血標(biao)本在室(shi)溫放置(zhi) 2 小時或(huo) 4oC 過夜(ye),然後(hou) 1000×g 離(li)心(xin) 20 分鐘(zhong),取(qu)上(shang)清即(ji)可,或(huo)將(jiang)上(shang)清置(zhi)於-20oC 或(huo)-80oC 保存,但應(ying)避(bi)免(mian)反復凍(dong)融。

          2.         血漿:

          EDTA 或(huo)肝素(su)作(zuo)為(wei)抗凝劑采(cai)集(ji)標(biao)本,並將(jiang)標(biao)本在采集(ji)後(hou)的 30 分鐘(zhong)內(nei)於(yu) 2-8oC 1000×g 離(li)心(xin) 15 分鐘(zhong),取(qu)上(shang)清即(ji)可檢測,或(huo)將(jiang)上(shang)清置(zhi)於-20oC 或(huo)-80oC 保存,但應(ying)避(bi)免(mian)反復凍(dong)融。

          3. 組(zu)織(zhi)勻漿:

          1) 取適(shi)量組(zu)織(zhi)塊,於(yu)預(yu)冷(leng)PBS0.01mol/L, pH 7.0-7.2)中清洗(xi)去除(chu)血(xue)液,稱(cheng)重後(hou)備用(yong)(組(zu)織(zhi)塊較(jiao)大需(xu)先剪碎後(hou)再(zai)勻漿);

          2) 可同(tong)時選用(yong)多(duo)種勻漿方(fang)法達(da)到較(jiao)好的破(po)碎效果:首先將(jiang)組(zu)織(zhi)塊移(yi)入(ru)玻璃(li)勻漿器,加(jia)入(ru)5-10mL 預冷(leng)PBS 進(jin)行(xing)充(chong)分研(yan)磨(mo),該過程(cheng)需(xu)在冰(bing)上(shang)進(jin)行(xing)(有條件實驗室(shi)可選用(yong)機器勻漿);得(de)到(dao)的勻漿液可(ke)再(zai)利(li)用超聲破(po)碎或(huo)反復凍(dong)融 進(jin)壹步處(chu)理(li)(超聲破(po)碎過程(cheng)中註(zhu)意(yi)冰(bing)浴(yu)降(jiang)溫;反復凍(dong)融法可(ke)重復2 次)。

          3) 將(jiang)制(zhi)備好的勻漿液於(yu)5000×g 離(li)心(xin)5 分鐘(zhong),留取上清即(ji)可檢測。

          4. 細(xi)胞裂(lie)解液:

          1)貼(tie)壁(bi)細(xi)胞需(xu)要(yao)先(xian)用(yong)胰(yi)酶(mei)消(xiao)化(hua),離(li)心(xin)收(shou)集(ji)細(xi)胞(懸浮細(xi)胞可(ke)直(zhi)接(jie)離(li)心(xin)收(shou)集(ji));

          2)將(jiang)收(shou)集(ji)到的細(xi)胞用(yong)冷(leng)PBS 3 次;

          3)物(wu)理(li)方(fang)法裂(lie)解細(xi)胞(可(ke)先超聲破(po)碎細(xi)胞,再(zai)反復凍(dong)融):

          i 超聲破(po)碎:取(qu)適(shi)量PBS 重懸細(xi)胞,用(yong)壹定功率(lv)的超聲波(bo)處(chu)理(li)細(xi)胞懸液,使(shi)細(xi)胞急劇震蕩(dang)破(po)裂。

          ii 反復凍(dong)融:將(jiang)待(dai)破(po)碎的細(xi)胞在(zai)-20 oC 以(yi)下(xia)冰(bing)凍(dong),室(shi)溫融解,反復3 次,使(shi)細(xi)胞溶(rong)脹破(po)碎。

          4)將(jiang)標(biao)本於2-8 oC 1500×g 離(li)心(xin)10 分鐘(zhong),收(shou)集(ji)上清備(bei)用(yong)。

          5. 細(xi)胞培(pei)養(yang)上(shang)清或(huo)其(qi)它(ta)生(sheng)物(wu)標(biao)本:

          1000×g 離(li)心(xin) 20 分鐘(zhong),取(qu)上(shang)清即(ji)可檢測,或(huo)將(jiang)上(shang)清置(zhi)於-20oC 或(huo)-80oC 保存,但應(ying)避(bi)免(mian)反復凍(dong)融。

          註(zhu)意(yi):

          1.         以(yi)上標(biao)本均(jun)需(xu)密(mi)封保存4oC保存(cun)應(ying)小於(yu)1周(zhou),-20oC不(bu)應超過1個(ge)月,-80oC不(bu)應超過2個(ge)月。

          2.         標(biao)本使(shi)用前(qian)應緩(huan)慢均(jun)衡(heng)至室(shi)溫,不(bu)應加熱使(shi)之融解。

          3.         實驗前(qian)紅(hong)細(xi)胞裂(lie)解液必(bi)須(xu)用(yong)標(biao)準品(pin)稀釋(shi)液稀釋(shi)。

          猴碳(tan)酸(suan)酐(gan)酶(mei)Ⅱ(CA2)ELISA試(shi)劑盒(he)試(shi)劑(ji)準(zhun)備

          1.         使(shi)用前(qian)將(jiang)所(suo)有(you)的試劑和(he)標(biao)本緩慢均(jun)衡(heng)至室(shi)溫(18-25oC),試劑(ji)不(bu)能(neng)直(zhi)接(jie)在37oC溶解(jie)。

          2.         標(biao)準品(pin)(凍(dong)幹(gan)品(pin)):每瓶標(biao)準品(pin)加(jia)入標(biao)準品(pin)稀釋(shi)液1mL,蓋(gai)好後(hou)室(shi)溫靜置(zhi)大約10分鐘(zhong),同(tong)時反復顛倒(dao)/搓(cuo)動(dong)以(yi)助溶(rong)解(jie),其(qi)濃(nong)度(du)為200ng/mL。準(zhun)備(bei)7個(ge)稀釋(shi)標(biao)準品(pin)的EP管(guan),每個EP管(guan)中加(jia)入(ru)150μL的標(biao)準品(pin)稀釋(shi)液,如(ru)圖所(suo)示依次倍比稀釋(shi)成(cheng)不(bu)同的梯度(du), 標(biao)準品(pin)稀釋(shi)液(0pg/mL)直(zhi)接(jie)作為空(kong)白(bai)孔(kong)。為保(bao)證(zheng)實驗結(jie)果有效性,每次實驗請使(shi)用新(xin)的標(biao)準品(pin)溶(rong)液。

           

           

           

          3.         濃洗(xi)滌(di)液:用580mL蒸餾水或(huo)去離(li)子水(shui)將(jiang)20mL濃洗(xi)滌(di)液稀釋(shi)至600mL,進(jin)行(xing)30倍稀釋(shi)。

          標(biao)本處(chu)理(li)

          1.         本公(gong)司只對試(shi)劑盒(he)本身負責,不(bu)對因使(shi)用該試劑(ji)盒(he)所(suo)造(zao)成(cheng)的樣本消耗(hao)負責,請使(shi)用者使(shi)用前(qian)充(chong)分考(kao)慮(lv)到(dao)樣本的可能(neng)使(shi)用量(liang),預留充(chong)足的樣本。

          2.         實驗前(qian)應(ying)預測(ce)標(biao)本含量,如(ru)果標(biao)本濃度(du)過高(gao),應(ying)對(dui)標(biao)本進(jin)行(xing)稀釋(shi),使(shi)稀釋(shi)後(hou)的標(biao)本符合(he)試劑(ji)盒(he)的檢測範圍,計算時再(zai)乘(cheng)以(yi)相(xiang)應(ying)的稀釋(shi)倍數(shu)。

          3.         若所(suo)檢樣本不(bu)包含在說明書所(suo)列樣本之中,建(jian)議進(jin)行(xing)預實驗驗證(zheng)其(qi)有(you)效性,並(bing)註(zhu)意(yi)留存樣本。

          4.         使(shi)用化(hua)學裂解(jie)液制(zhi)備的組(zu)織(zhi)勻漿或(huo)細(xi)胞提(ti)取液可(ke)能(neng)會(hui)由(you)於某些(xie)化(hua)學物(wu)質(zhi)的引入導(dao)致  ELISA實驗結(jie)果偏(pian)差。

          5.         若樣(yang)本為細(xi)胞培(pei)養(yang)上(shang)清,因(yin)該類樣(yang)本幹(gan)擾(rao)因(yin)素(su) 較(jiao)多,如(ru):細(xi)胞狀(zhuang)態(tai)、細(xi)胞數(shu)量、采樣時間(jian)等(deng),所(suo)以(yi)可能(neng)存在(zai)檢測不(bu)出的情況。

          6.         某些(xie)天然蛋白或(huo)重組(zu)蛋白,包括原(yuan)核(he)及真(zhen)核(he)重組(zu)蛋白,可能(neng)因為(wei)與本產品(pin)所(suo)使(shi)用的檢測抗體(ti)及捕(bu)獲(huo)抗體(ti)不(bu)匹配,而(er)不(bu)被(bei)檢測出。

          7.         建(jian)議使(shi)用新(xin)鮮(xian)樣本,保存時間(jian)過長可(ke)能(neng)會(hui)存(cun)在蛋白降解或(huo)變性導(dao)致實(shi)驗結(jie)果偏(pian)差。

          猴碳(tan)酸(suan)酐(gan)酶(mei)Ⅱ(CA2)ELISA試(shi)劑盒(he)操(cao)作(zuo)步驟(zhou)

          1.         加樣(yang):分別設(she)空(kong)白孔(kong)(空白(bai)對(dui)照孔(kong)不(bu)加樣品(pin)及(ji)酶(mei)標(biao)試劑,其(qi)余(yu)各步操作相(xiang)同(tong))、標(biao)準孔(kong)、待(dai)測(ce)樣(yang)品(pin)孔(kong)。在酶(mei)標(biao)包被(bei)板(ban)上(shang)標(biao)準品(pin)準(zhun)確加(jia)樣(yang)50μl,待(dai)測(ce)樣(yang)品(pin)孔(kong)中先(xian)加(jia)樣品(pin)稀釋(shi)液40μl,然後(hou)再(zai)加待(dai)測(ce)樣(yang)品(pin)10μl(樣(yang)品(pin)*終(zhong)稀釋(shi)度(du)為5倍(bei))。加(jia)樣(yang)將(jiang)樣(yang)品(pin)加(jia)於酶(mei)標(biao)板孔(kong)底部(bu),盡(jin)量(liang)不(bu)觸及孔(kong)壁(bi),輕(qing)輕(qing)晃(huang)動(dong)混(hun)勻。

          2.         溫育(yu):用(yong)封板膜封板後(hou)置(zhi)37℃溫育(yu)30分鐘(zhong)。  

          3.         配液:將(jiang)20倍(bei)濃縮洗滌(di)液用(yong)蒸餾水20倍稀釋(shi)後(hou)備用(yong)

          4.         洗滌(di):小心(xin)揭掉(diao)封板膜,棄(qi)去液體(ti),甩幹(gan),每孔(kong)加滿洗滌液,靜(jing)置(zhi)30秒後(hou)棄去,如此(ci)重復5次,拍幹(gan)。

          5.         加酶(mei):每孔(kong)加入(ru)酶(mei)標(biao)試劑50μl,空(kong)白孔(kong)除(chu)外(wai)。

          6.         溫育(yu):操(cao)作(zuo)同3

          7.         洗滌(di):操(cao)作(zuo)同5

          8.         顯(xian)色:每孔(kong)先加(jia)入(ru)顯(xian)色劑(ji)A50μl,再(zai)加入(ru)顯(xian)色劑(ji)B50μl,輕(qing)輕震蕩(dang)混(hun)勻,37℃避光顯(xian)色15分鐘(zhong).

          9.         終(zhong)止:每孔(kong)加終(zhong)止液50μl,終(zhong)止反應(此(ci)時藍(lan)色立(li)轉(zhuan)黃(huang)色)。

          10.     測定:以(yi)空白(bai)空(kong)調(tiao)零(ling),450nm波(bo)長依序測(ce)量(liang)各孔(kong)的吸光度(du)(OD值)。 測(ce)定應在(zai)加終(zhong)止液後(hou)15分鐘(zhong)以(yi)內進(jin)行(xing)。

          註(zhu)意(yi):

          1.         試劑(ji)準(zhun)備(bei)準備(bei)壹(yi)次實驗所(suo)需(xu)要(yao)的酶(mei)標(biao)條,其(qi)它(ta)的可從微(wei)孔(kong)板上(shang)拆(chai)下(xia),密(mi)封,按照說明書要(yao)求保存,以(yi)備下(xia)次使(shi)用。

          2.         加樣(yang)實驗操(cao)作(zuo)中請使(shi)用壹(yi)次性的吸頭(tou),避(bi)免交(jiao)叉汙(wu)染。加樣時註(zhu)意(yi)不(bu)要(yao)有(you)氣(qi)泡,將(jiang)樣(yang)品(pin)加(jia)於酶(mei)標(biao)板底部(bu),盡(jin)量(liang)不(bu)觸及孔(kong)壁(bi),輕(qing)輕(qing)晃(huang)動(dong)混(hun)勻。加樣或(huo)加試劑(ji)時,**個(ge)孔(kong)與*後(hou)壹個(ge)孔(kong)加樣(yang)之間的時間(jian)間(jian)隔(ge)如果太大,將(jiang)會(hui)導(dao)致不(bu)同的“預溫育(yu)”時間(jian),從(cong)而(er)明顯(xian)地影響到測量(liang)值的準確性(xing)及(ji)重復性。因此(ci),壹(yi)次加樣時間(jian)(包括標(biao)準品(pin)及(ji)所(suo)有(you)樣(yang)品(pin))*好(hao)控制在10分鐘(zhong)內(nei)。推(tui)薦設(she)置(zhi)復孔(kong)進(jin)行(xing)實驗。

          3.          溫育(yu)為防(fang)止(zhi)樣(yang)品(pin)蒸發(fa),實驗時請將(jiang)加(jia)上蓋或(huo)覆膜的酶(mei)標(biao)板置(zhi)於濕(shi)盒(he)內(nei),以(yi)避免(mian)液體(ti)蒸發(fa),洗板(ban)後(hou)應盡(jin)快(kuai)進(jin)行(xing)下(xia)步操作,任(ren)何(he)時侯(hou)都(dou)應(ying)避免酶(mei)標(biao)板處(chu)於幹(gan)燥狀(zhuang)態(tai),同(tong)時應(ying)嚴(yan)格遵(zun)守(shou)給(gei)定的溫育(yu)時間(jian)和(he)溫(wen)度(du)。

          4.         洗滌(di):充(chong)分的洗滌非常重要(yao),在(zai)每次洗滌過程(cheng)中,都(dou)要(yao)將(jiang)洗(xi)滌液完(wan)全甩幹(gan)。洗(xi)滌(di)過程(cheng)中反應孔(kong)中殘(can)留的洗滌液應(ying)在濾(lv)紙(zhi)上拍(pai)幹(gan),勿(wu)將(jiang)濾(lv)紙(zhi)直(zhi)接(jie)放入(ru)反應孔(kong)中吸(xi)水(shui),同時要(yao)消(xiao)除(chu)板(ban)底殘(can)留的液體(ti)和(he)手(shou)指印(yin),避免影(ying)響*後(hou)的酶(mei)標(biao)儀讀數(shu)。如果有自(zi)動(dong)洗(xi)板機,應(ying)在熟練使(shi)用後(hou)再(zai)用到(dao)正(zheng)式(shi)實 驗過程(cheng)中。

          5.         反應時間(jian)的控制加入(ru)底物(wu)後(hou)請定時觀察(cha)反應孔(kong)的顏(yan)色變(bian)化(hua)(比如,每隔(ge)10分鐘(zhong)觀察(cha)壹(yi)次),如顏(yan)色較(jiao)深,請提(ti)前(qian)加入終(zhong)止液終(zhong)止反應,避(bi)免(mian)反應過強(qiang)從而(er)影(ying)響酶(mei)標(biao)儀光密(mi)度(du)讀數(shu)。

          6.         底物(wu)底物(wu)請避(bi)光(guang)保存,在(zai)儲存和(he)溫(wen)育(yu)時避(bi)免(mian)強光直(zhi)接(jie)照射(she)。

          7.         如果實驗室(shi)內濕(shi)度(du)低於60%,推薦(jian)使(shi)用加(jia)濕(shi)器提(ti)高(gao)濕(shi)度(du)水平(ping)。

           實驗流(liu)程(cheng)

          1.         實驗前(qian)標(biao)準品(pin)、試(shi)劑及樣本的準備;

          2.         加樣(yang)(標(biao)準品(pin)及(ji)樣本)50μL37孵育(yu)30分鐘(zhong);

          3.         洗板(ban)5次,加酶(mei)標(biao)試劑50ul37孵育(yu)半(ban)小時;

          4.         洗板(ban)5次;加入顯(xian)色液AB各(ge)50ul,37孵育(yu)顯(xian)色15分鐘(zhong)

          5.         加終(zhong)止液50μL,立(li)即(ji)450nm讀數(shu)。

          6.    計算

          猴碳(tan)酸(suan)酐(gan)酶(mei)Ⅱ(CA2)ELISA試(shi)劑盒(he)計算

          各標(biao)準品(pin)及(ji)樣本O.D.值扣除(chu)空(kong)白(bai)孔(kong)O.D.值後(hou)作圖(tu)(七(qi)點圖(tu)),如設(she)置(zhi)復孔(kong),則應(ying)取(qu)其(qi)平(ping)均(jun)值(zhi)計算。以(yi)標(biao)準品(pin)的濃度(du)為縱(zong)坐標(biao)(或(huo)對數坐(zuo)標(biao))O.D.值為橫(heng)坐標(biao)(或(huo)對數坐(zuo)標(biao)),繪(hui)出標(biao)準曲線(xian)(*佳(jia)方(fang)程式(shi)應依回(hui)歸(gui)方(fang)程計算的R2值來(lai)定,以(yi)R2值越(yue)趨近(jin)於1為(wei)好(hao))。推(tui)薦使(shi)用專業(ye)制(zhi)作曲線(xian)軟件進(jin)行(xing)分析(xi),如curve expert 1.30,根據(ju)樣(yang)品(pin)O.D.值(zhi),由標(biao)準曲線(xian)查(zha)出相(xiang)應(ying)的濃度(du),乘(cheng)以(yi)稀釋(shi)倍數(shu);或(huo)用標(biao)準物(wu)的濃度(du)與O.D.值計算出標(biao)準曲線(xian)的回歸(gui)方(fang)程式(shi),將(jiang)樣(yang)品(pin)的O.D.值代入(ru)方(fang)程式(shi),計算出樣(yang)品(pin)濃(nong)度(du),再(zai)乘(cheng)以(yi)稀釋(shi)倍數(shu),即(ji)為樣(yang)品(pin)的實際濃度(du)。

           特異(yi)性

          本試劑盒(he)用(yong)於(yu)檢測猴碳(tan)酸(suan)酐(gan)酶(mei)Ⅱ(CA2),經(jing)檢測與其(qi)它(ta)相(xiang)似(si)物(wu)質(zhi)無明顯(xian)交(jiao)叉反應。

          由於(yu)受(shou)到(dao)技術(shu)及(ji)樣(yang)本來(lai)源的限制,不(bu)可能(neng)完(wan)成(cheng)對所(suo)有(you)相(xiang)關(guan)或(huo)相(xiang)似(si)物(wu)質(zhi)交(jiao)叉反應檢測,因此本試劑盒(he)有(you)可(ke)能(neng)與未(wei)經檢測的其(qi)它(ta)物(wu)質(zhi)有交(jiao)叉反應。

           精密(mi)度(du)

          精密(mi)度(du)用樣(yang)品(pin)測(ce)定值的變異系(xi)數CV表(biao)示。CV(%) = SD/mean×100

          批內(nei)差:取(qu)同批次試劑盒(he)對(dui)低、中、高(gao)值(zhi)定值樣(yang)本進(jin)行(xing)定量檢測,每份樣本連續測定20 次,分別計算不(bu)同濃度(du)樣本的平(ping)均(jun)值(zhi)及SD值。

          批間(jian)差:選取(qu)3個(ge)不(bu)同批次的試劑盒(he)分別對(dui)低、中、高(gao)值(zhi)定值樣(yang)本進(jin)行(xing)定量測(ce)定,每個樣(yang)本使(shi)用同(tong)壹試(shi)劑盒(he)重復測定8次,分別計算不(bu)同濃度(du)樣本的平(ping)均(jun)值(zhi)及SD值。

          批內(nei)差: CV<10%

          批間(jian)差: CV<12%

          猴碳(tan)酸(suan)酐(gan)酶(mei)Ⅱ(CA2)ELISA試(shi)劑盒(he)穩定性

          經測(ce)定,試劑(ji)盒(he)在(zai)有(you)效期內按(an)推薦溫度(du)保存(cun),其(qi)活(huo)性(xing)降(jiang)低率(lv)小於(yu)5%

          為減小外(wai)部(bu)因(yin)素(su)對(dui)試(shi)劑盒(he)破(po)壞(huai)前後(hou)檢測值的影響,實驗室(shi)的環境(jing)條件需(xu)盡量保(bao)持壹致(zhi),尤(you)其(qi)是實驗室(shi)內溫度(du)、濕(shi)度(du)及溫(wen)育(yu)條件。其(qi)次由同壹實驗員(yuan)來(lai)進(jin)行(xing)操作可減少人為誤差。


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