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授(shou)權代(dai)理(li)品(pin)牌(pai)
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ELISA試劑盒(he)
- 農殘(can)檢(jian)測(ce)試劑盒(he)
- 馬ELISA試劑盒(he)
- 牛(niu)ELISA試劑盒(he)
- 魚(yu)ELISA試劑盒(he)
- 人ELISA試劑盒(he)/Human
- 小(xiao)鼠(shu)ELISA試劑盒(he)/Mouse
- 大鼠(shu)ELISA試劑盒(he)/Rat
- 羊(yang)ELISA試劑盒(he)/Sheep
- 兔ELISA試劑盒(he)/ Rabbi...
- 豬ELISA試劑盒(he)/Porcin...
- 豚鼠(shu)ELISA試劑盒(he)/Guine...
- 狗ELISA試劑盒(he)/ Canin...
- 雞(ji)ELISA試劑盒(he)/Chicke...
- 鴨ELISA試劑盒(he)
- 植(zhi)物ELISA試劑盒(he)
- 猴ELISA試劑盒(he)/ Monke...
- 其他ELISA試劑盒(he)
- 抗(kang)體
- 蛋白(bai)
- CLIA試劑盒(he)
- 細(xi)胞生物學(xue)
- 分子(zi)生(sheng)物學(xue)/常用試劑
96T 僅供(gong)體外(wai)研究使(shi)用,不(bu)用於(yu)臨床(chuang)診斷!
猴血管(guan)細(xi)胞粘(zhan)附分(fen)子(zi)1(VCAM1)ELISA試劑盒(he)
本(ben)試劑盒(he)運(yun)用雙(shuang)抗(kang)體夾心(xin)ELISA法定量測(ce)定(ding)猴血清(qing)、血漿(jiang)、組織勻漿、細(xi)胞裂解(jie)液、細(xi)胞培養(yang)上(shang)清(qing)液和(he)其他生物液體中猴血管(guan)細(xi)胞粘(zhan)附分(fen)子(zi)1(VCAM1)含量。
檢測(ce)範(fan)圍
0.781-50ng/mL
*低檢(jian)測(ce)限(xian)
0.36ng/mL
實(shi)驗原理(li)
將猴血管(guan)細(xi)胞粘(zhan)附分(fen)子(zi)1(VCAM1)抗(kang)體包被(bei)於96孔微孔板中,制成固(gu)相載體,向微(wei)孔中分別加入標準品(pin)或(huo)標(biao)本(ben),其中的猴血管(guan)細(xi)胞粘(zhan)附分(fen)子(zi)1(VCAM1)與(yu)連接於(yu)固(gu)相載體上(shang)的抗(kang)體結(jie)合,然(ran)後加(jia)入(ru)生(sheng)物素化的猴血管(guan)細(xi)胞粘(zhan)附分(fen)子(zi)1(VCAM1)抗(kang)體,將未(wei)結(jie)合的生(sheng)物素化抗(kang)體洗凈(jing)後,加(jia)入HRP標(biao)記(ji)的親(qin)和(he)素,再次徹(che)底(di)洗滌(di)後(hou)加入(ru)TMB底(di)物顯色(se)。TMB在(zai)過(guo)氧化物酶的催(cui)化下轉(zhuan)化成藍(lan)色,並(bing)在酸(suan)的作(zuo)用下轉(zhuan)化成*終(zhong)的黃(huang)色(se)。顏(yan)色的深淺(qian)和(he)樣(yang)品(pin)中(zhong)的猴血管(guan)細(xi)胞粘(zhan)附分(fen)子(zi)1(VCAM1)呈(cheng)正相(xiang)關。用酶(mei)標儀(yi)在450nm波(bo)長下測(ce)定(ding)吸(xi)光度(O.D.值),計算(suan)樣(yang)品(pin)濃度。
試劑盒(he)內(nei)容(rong)
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試劑名稱 |
數量 |
試劑名稱 |
數量 |
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96孔板(預(yu)包(bao)被(bei)) |
1 |
96孔板覆(fu)膜(mo) |
2 |
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標準品(pin) |
0.5ml×1 |
標準品(pin)稀釋(shi)液 |
1.5ml×1瓶 |
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顯色(se)劑(ji)A液 |
6ml×1瓶 |
樣(yang)品(pin)稀釋(shi)液 |
6ml×1瓶 |
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顯色(se)劑(ji)B液 |
6ml×1瓶 |
終止(zhi)液(ye) |
6ml×1瓶 |
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酶標(biao)試劑 |
6ml×1瓶 |
密封袋(dai) |
1 |
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濃洗滌(di)液(ye)(30×) |
1×20mL |
使用說(shuo)明書(shu) |
1 |
猴血管(guan)細(xi)胞粘(zhan)附分(fen)子(zi)1(VCAM1)ELISA試劑盒(he)需自(zi)備的設備及(ji)試劑
1. 450±10nm濾光片的酶(mei)標(biao)儀(yi)(建(jian)議儀(yi)器(qi)使(shi)用前提(ti)前預(yu)熱(re))
2. 單道或多道微量加(jia)液器(qi)及(ji)吸(xi)頭(tou)
3. 稀釋(shi)樣(yang)品(pin)的EP管(guan)
4. 蒸(zheng)餾水或(huo)去(qu)離子(zi)水
5. 吸(xi)水紙(zhi)
6. 盛(sheng)放(fang)洗(xi)液的容(rong)器(qi)
試劑盒(he)的儲(chu)存及有(you)效(xiao)期(qi)
1. 未(wei)開(kai)封(feng)的試劑盒(he):所有(you)試劑均(jun)按試劑瓶(ping)標簽上(shang)所(suo)示保存。請註意,收(shou)到(dao)試劑盒(he)後請盡快將TMB 洗(xi)滌(di)液(ye),終止(zhi)液保(bao)存(cun)於(yu)4℃,其他試劑保(bao)存於-20℃。
2. 使用後(hou)的試劑盒(he):剩(sheng)余試劑仍(reng)需按照(zhao)試劑瓶(ping)標簽所(suo)示的溫(wen)度保存(cun),開封(feng)後(hou)的酶(mei)標(biao)板(ban)要(yao)加幹(gan)燥劑後(hou)密封保存於(yu)-20℃,避免潮濕(shi)。
註意:
試劑盒(he)內(nei)酶標(biao)條(tiao)可拆卸(xie),按實(shi)驗需求(qiu)可分多次使(shi)用;使(shi)用後(hou)的剩(sheng)余試劑盒(he)建(jian)議在**實(shi)驗後 1個(ge)月內(nei)使用完(wan)畢。產(chan)品(pin)過(guo)期(qi)時(shi)間(jian)以盒(he)子上(shang)的標(biao)簽為(wei)準,保質期(qi)內(nei)所有(you)組(zu)分(fen)都(dou)確(que)保是(shi)穩定的。
猴血管(guan)細(xi)胞粘(zhan)附分(fen)子(zi)1(VCAM1)ELISA試劑盒(he)標本(ben)的采集與(yu)保存
1. 血清(qing):
將收(shou)集於血清(qing)分(fen)離管(guan)的全(quan)血(xue)標(biao)本(ben)在室溫放(fang)置(zhi) 2 小(xiao)時(shi)或 4oC 過(guo)夜(ye),然(ran)後 1000×g 離心(xin) 20 分(fen)鐘,取上(shang)清(qing)即(ji)可,或將(jiang)上(shang)清(qing)置(zhi)於-20oC 或(huo)-80oC 保存,但應(ying)避免反復凍(dong)融(rong)。
2. 血漿(jiang):
用 EDTA 或(huo)肝素(su)作為抗(kang)凝(ning)劑采集標本(ben),並將標本(ben)在采集後的 30 分(fen)鐘內(nei)於 2-8oC 1000×g 離心(xin) 15 分(fen)鐘,取上(shang)清(qing)即(ji)可檢測(ce),或(huo)將上(shang)清(qing)置(zhi)於-20oC 或(huo)-80oC 保存,但應(ying)避免反復凍(dong)融(rong)。
3. 組織(zhi)勻(yun)漿:
1) 取適(shi)量組(zu)織塊,於(yu)預(yu)冷(leng)PBS(0.01mol/L, pH 7.0-7.2)中清(qing)洗(xi)去(qu)除血液(ye),稱重(zhong)後備(bei)用(組(zu)織塊較(jiao)大需(xu)先(xian)剪碎(sui)後再勻漿(jiang));
2) 可同時(shi)選用多種勻(yun)漿方法達(da)到較(jiao)好(hao)的破碎效果(guo):首(shou)先(xian)將組(zu)織(zhi)塊移(yi)入(ru)玻璃勻(yun)漿(jiang)器(qi),加(jia)入5-10mL 預(yu)冷(leng)PBS 進行(xing)充(chong)分(fen)研磨(mo),該(gai)過(guo)程需(xu)在冰(bing)上(shang)進(jin)行(xing)(有(you)條(tiao)件實(shi)驗室可選用機器(qi)勻(yun)漿);得(de)到(dao)的勻(yun)漿(jiang)液(ye)可再利(li)用超(chao)聲破碎或反復凍(dong)融(rong) 進壹(yi)步處(chu)理(li)(超(chao)聲破碎過(guo)程中(zhong)註意冰(bing)浴降(jiang)溫(wen);反復凍(dong)融(rong)法可重(zhong)復2 次(ci))。
3) 將制備好(hao)的勻(yun)漿(jiang)液(ye)於5000×g 離心(xin)5 分(fen)鐘,留(liu)取(qu)上(shang)清(qing)即(ji)可檢測(ce)。
4. 細(xi)胞裂解(jie)液:
1)貼壁(bi)細(xi)胞需要(yao)先(xian)用胰(yi)酶(mei)消(xiao)化,離心(xin)收(shou)集細(xi)胞(懸浮(fu)細(xi)胞可直(zhi)接離心(xin)收(shou)集);
2)將收(shou)集到的細(xi)胞用冷(leng)PBS 洗3 次(ci);
3)物理(li)方法裂解(jie)細(xi)胞(可先(xian)超聲破碎細(xi)胞,再反復凍(dong)融(rong)):
i 超聲破碎:取適(shi)量PBS 重(zhong)懸細(xi)胞,用壹(yi)定功率(lv)的超(chao)聲波(bo)處理(li)細(xi)胞懸液(ye),使(shi)細(xi)胞急劇震(zhen)蕩破裂。
ii 反復凍(dong)融(rong):將待(dai)破碎的細(xi)胞在-20 oC 以下冰(bing)凍(dong),室溫(wen)融(rong)解(jie),反復3 次(ci),使(shi)細(xi)胞溶(rong)脹(zhang)破碎。
4)將標(biao)本(ben)於2-8 oC 1500×g 離心(xin)10 分(fen)鐘,收集上(shang)清(qing)備用。
5. 細(xi)胞培養(yang)上(shang)清(qing)或其它(ta)生(sheng)物標本(ben):
請 1000×g 離心(xin) 20 分(fen)鐘,取上(shang)清(qing)即(ji)可檢測(ce),或(huo)將上(shang)清(qing)置(zhi)於-20oC 或(huo)-80oC 保存,但應(ying)避免反復凍(dong)融(rong)。
註意:
1. 以上(shang)標(biao)本(ben)均需密封保存,4oC保存(cun)應(ying)小(xiao)於(yu)1周,-20oC不(bu)應(ying)超過(guo)1個月(yue),-80oC不應(ying)超過(guo)2個月(yue)。
2. 標本(ben)使用前應(ying)緩慢(man)均(jun)衡(heng)至室(shi)溫,不應(ying)加熱(re)使(shi)之融解(jie)。
3. 實(shi)驗前紅(hong)細(xi)胞裂解(jie)液必(bi)須(xu)用標(biao)準品(pin)稀釋(shi)液稀釋(shi)。
猴血管(guan)細(xi)胞粘(zhan)附分(fen)子(zi)1(VCAM1)ELISA試劑盒(he)試劑準備
1. 使用前將(jiang)所(suo)有(you)的試劑和(he)標本(ben)緩慢(man)均(jun)衡(heng)至室(shi)溫(18-25oC),試劑不(bu)能直(zhi)接在(zai)37oC溶(rong)解(jie)。
2. 標準品(pin)(凍幹(gan)品(pin)):每(mei)瓶(ping)標(biao)準品(pin)加(jia)入(ru)標(biao)準品(pin)稀釋(shi)液1mL,蓋好(hao)後(hou)室溫(wen)靜置(zhi)大約(yue)10分鐘,同時(shi)反復顛倒/搓(cuo)動(dong)以助溶(rong)解(jie),其濃度為50ng/mL。準備7個(ge)稀釋(shi)標準品(pin)的EP管(guan),每(mei)個(ge)EP管中(zhong)加入(ru)150μL的標(biao)準品(pin)稀釋(shi)液,如(ru)圖(tu)所(suo)示依(yi)次(ci)倍比稀釋(shi)成不(bu)同的梯(ti)度, 標準品(pin)稀釋(shi)液(0pg/mL)直(zhi)接作(zuo)為(wei)空白(bai)孔。為保證實(shi)驗結(jie)果(guo)有(you)效(xiao)性(xing),每次(ci)實(shi)驗請使用新(xin)的標(biao)準品(pin)溶(rong)液(ye)。
3. 濃洗滌(di)液(ye):用580mL蒸(zheng)餾水或(huo)去(qu)離子(zi)水將(jiang)20mL濃洗滌(di)液(ye)稀釋(shi)至600mL,進行(xing)30倍稀釋(shi)。
標本(ben)處理(li)
1. 本(ben)公司(si)只(zhi)對(dui)試劑盒(he)本(ben)身(shen)負責(ze),不對(dui)因使(shi)用該(gai)試劑盒(he)所造成的樣(yang)本(ben)消(xiao)耗負(fu)責(ze),請使用者使用前充(chong)分(fen)考慮到樣(yang)本(ben)的可能使用量,預(yu)留(liu)充(chong)足(zu)的樣(yang)本(ben)。
2. 實(shi)驗前應(ying)預(yu)測(ce)標(biao)本(ben)含量,如(ru)果(guo)標(biao)本(ben)濃度過(guo)高(gao),應(ying)對標本(ben)進行(xing)稀釋(shi),使稀釋(shi)後的標(biao)本(ben)符合試劑盒(he)的檢(jian)測(ce)範(fan)圍,計算(suan)時(shi)再乘(cheng)以相應(ying)的稀釋(shi)倍數(shu)。
3. 若所(suo)檢樣(yang)本(ben)不包含在說明書(shu)所(suo)列樣(yang)本(ben)之中,建(jian)議進行(xing)預(yu)實(shi)驗驗證其(qi)有(you)效(xiao)性(xing),並註(zhu)意留(liu)存(cun)樣(yang)本(ben)。
4. 使用化學(xue)裂解(jie)液制備的組(zu)織(zhi)勻(yun)漿或(huo)細(xi)胞提取(qu)液(ye)可能會(hui)由於某(mou)些化學(xue)物質的引(yin)入(ru)導(dao)致(zhi) ELISA實(shi)驗結(jie)果(guo)偏(pian)差(cha)。
5. 若樣(yang)本(ben)為細(xi)胞培養(yang)上(shang)清(qing),因該(gai)類樣(yang)本(ben)幹擾因素(su) 較(jiao)多,如:細(xi)胞狀(zhuang)態(tai)、細(xi)胞數量、采樣(yang)時(shi)間(jian)等,所(suo)以可能存在(zai)檢(jian)測(ce)不(bu)出的情(qing)況(kuang)。
6. 某(mou)些天(tian)然(ran)蛋白(bai)或(huo)重(zhong)組蛋(dan)白(bai),包(bao)括(kuo)原核及真核重(zhong)組蛋(dan)白(bai),可能因為(wei)與(yu)本(ben)產(chan)品(pin)所(suo)使(shi)用的檢(jian)測(ce)抗(kang)體及捕(bu)獲(huo)抗(kang)體不匹(pi)配(pei),而不(bu)被(bei)檢測(ce)出(chu)。
7. 建(jian)議使用新(xin)鮮(xian)樣(yang)本(ben),保存時(shi)間(jian)過(guo)長可能會(hui)存在(zai)蛋白降(jiang)解(jie)或變(bian)性(xing)導(dao)致(zhi)實(shi)驗結(jie)果(guo)偏(pian)差(cha)。
猴血管(guan)細(xi)胞粘(zhan)附分(fen)子(zi)1(VCAM1)ELISA試劑盒(he)操作步(bu)驟(zhou)
1. 加樣(yang):分別設空白(bai)孔(空白(bai)對(dui)照(zhao)孔不加樣(yang)品(pin)及(ji)酶(mei)標(biao)試劑,其(qi)余各(ge)步(bu)操作相(xiang)同)、標(biao)準孔、待測(ce)樣(yang)品(pin)孔。在酶標包(bao)被(bei)板上(shang)標(biao)準品(pin)準確(que)加樣(yang)50μl,待測(ce)樣(yang)品(pin)孔中先(xian)加樣(yang)品(pin)稀釋(shi)液40μl,然(ran)後再加待(dai)測(ce)樣(yang)品(pin)10μl(樣(yang)品(pin)*終(zhong)稀釋(shi)度為5倍)。加(jia)樣(yang)將樣(yang)品(pin)加(jia)於(yu)酶(mei)標板孔底(di)部,盡量不(bu)觸(chu)及孔壁,輕(qing)輕(qing)晃動混勻。
2. 溫育(yu):用封(feng)板膜(mo)封板後(hou)置(zhi)37℃溫育(yu)30分鐘。
3. 配(pei)液(ye):將(jiang)20倍濃縮洗(xi)滌(di)液(ye)用蒸(zheng)餾水20倍稀釋(shi)後備(bei)用
4. 洗滌(di):小(xiao)心(xin)揭(jie)掉封板(ban)膜(mo),棄去(qu)液體,甩(shuai)幹,每孔加滿洗滌(di)液(ye),靜置(zhi)30秒(miao)後棄去(qu),如此(ci)重(zhong)復5次(ci),拍(pai)幹(gan)。
5. 加酶(mei):每(mei)孔加入酶標(biao)試劑50μl,空白(bai)孔除外(wai)。
6. 溫育(yu):操作同3。
7. 洗滌(di):操作同5。
8. 顯色(se):每(mei)孔先(xian)加入(ru)顯色(se)劑(ji)A50μl,再加入(ru)顯色(se)劑(ji)B50μl,輕(qing)輕(qing)震(zhen)蕩混(hun)勻,37℃避光顯色(se)15分(fen)鐘.
9. 終止(zhi):每(mei)孔加終止液(ye)50μl,終(zhong)止(zhi)反應(ying)(此(ci)時(shi)藍色(se)立轉(zhuan)黃色)。
10. 測(ce)定(ding):以空白(bai)空調(tiao)零(ling),450nm波(bo)長依序(xu)測(ce)量各(ge)孔的吸(xi)光度(OD值)。 測(ce)定(ding)應(ying)在加終(zhong)止液後(hou)15分(fen)鐘以內(nei)進行(xing)。
註意:
1. 試劑準備:準備壹(yi)次實(shi)驗所需(xu)要(yao)的酶(mei)標(biao)條(tiao),其它(ta)的可從(cong)微(wei)孔板上(shang)拆下,密封,按照(zhao)說明書(shu)要(yao)求(qiu)保存(cun),以備下次(ci)使(shi)用。
2. 加樣(yang):實(shi)驗操作中(zhong)請使用壹(yi)次性(xing)的吸(xi)頭(tou),避免交叉汙染。加樣(yang)時(shi)註意不(bu)要(yao)有(you)氣泡(pao),將樣(yang)品(pin)加(jia)於(yu)酶(mei)標板底(di)部,盡量不(bu)觸(chu)及孔壁,輕(qing)輕(qing)晃動混勻。加樣(yang)或加(jia)試劑時(shi),**個孔與(yu)*後壹(yi)個孔加樣(yang)之間(jian)的時(shi)間(jian)間(jian)隔如果(guo)太大,將(jiang)會(hui)導(dao)致(zhi)不同的“預(yu)溫(wen)育(yu)”時(shi)間(jian),從(cong)而明顯地(di)影(ying)響(xiang)到(dao)測(ce)量值(zhi)的準確(que)性(xing)及重(zhong)復性(xing)。因此(ci),壹(yi)次加(jia)樣(yang)時(shi)間(jian)(包括(kuo)標準品(pin)及(ji)所(suo)有(you)樣(yang)品(pin))*好(hao)控(kong)制在10分(fen)鐘內(nei)。推薦(jian)設置(zhi)復孔進行(xing)實(shi)驗。
3. 溫育(yu):為防(fang)止(zhi)樣(yang)品(pin)蒸(zheng)發,實(shi)驗時(shi)請將加(jia)上(shang)蓋或覆(fu)膜(mo)的酶(mei)標(biao)板(ban)置(zhi)於濕(shi)盒(he)內(nei),以避免液體蒸(zheng)發,洗板(ban)後(hou)應(ying)盡快進行(xing)下步(bu)操作,任(ren)何時(shi)侯都(dou)應(ying)避免酶標板(ban)處(chu)於(yu)幹(gan)燥狀(zhuang)態(tai),同時(shi)應(ying)嚴(yan)格遵(zun)守給定的溫(wen)育(yu)時(shi)間(jian)和(he)溫度。
4. 洗滌(di):充分(fen)的洗(xi)滌(di)非(fei)常重(zhong)要(yao),在每(mei)次洗(xi)滌(di)過(guo)程中(zhong),都(dou)要(yao)將洗(xi)滌(di)液(ye)完全(quan)甩(shuai)幹。洗滌(di)過(guo)程中(zhong)反應(ying)孔中殘留(liu)的洗(xi)滌(di)液(ye)應(ying)在濾紙上(shang)拍(pai)幹(gan),勿(wu)將濾紙直(zhi)接放(fang)入(ru)反應(ying)孔中吸(xi)水,同時(shi)要(yao)消(xiao)除板底(di)殘留(liu)的液(ye)體和(he)手指(zhi)印,避免影響*後(hou)的酶(mei)標(biao)儀(yi)讀數(shu)。如果(guo)有(you)自(zi)動洗板(ban)機,應(ying)在熟練(lian)使用後(hou)再用到(dao)正式(shi)實(shi) 驗過(guo)程中(zhong)。
5. 反應(ying)時(shi)間(jian)的控(kong)制:加入(ru)底(di)物後請定時(shi)觀(guan)察(cha)反應(ying)孔的顏(yan)色(se)變(bian)化(比如,每隔10分鐘觀(guan)察(cha)壹(yi)次),如(ru)顏(yan)色(se)較(jiao)深,請提前加(jia)入(ru)終止(zhi)液(ye)終(zhong)止(zhi)反應(ying),避免反應(ying)過(guo)強從(cong)而影(ying)響(xiang)酶標(biao)儀(yi)光密度讀數(shu)。
6. 底(di)物:底(di)物請避光保(bao)存(cun),在儲(chu)存和(he)溫育時(shi)避免強光直(zhi)接照(zhao)射。
7. 如果(guo)實(shi)驗室內(nei)濕(shi)度低於(yu)60%,推薦(jian)使(shi)用加(jia)濕(shi)器(qi)提(ti)高(gao)濕(shi)度水平(ping)。
實(shi)驗流(liu)程
1. 實(shi)驗前標(biao)準品(pin)、試劑及(ji)樣(yang)本(ben)的準備;
2. 加樣(yang)(標準品(pin)及(ji)樣(yang)本(ben))50μL,37℃孵育30分(fen)鐘;
3. 洗板(ban)5次(ci),加酶標(biao)試劑50ul,37℃孵育半(ban)小(xiao)時(shi);
4. 洗板(ban)5次(ci);加入顯色(se)液(ye)A,B各(ge)50ul,37℃孵育顯色(se)15分(fen)鐘
5. 加終(zhong)止(zhi)液50μL,立即(ji)450nm讀數(shu)。
6. 計算(suan)
猴血管(guan)細(xi)胞粘(zhan)附分(fen)子(zi)1(VCAM1)ELISA試劑盒(he)計算(suan)
各(ge)標(biao)準品(pin)及(ji)樣(yang)本(ben)O.D.值扣(kou)除空白(bai)孔O.D.值後作圖(tu)(七(qi)點(dian)圖),如(ru)設置(zhi)復孔,則(ze)應(ying)取其平(ping)均值(zhi)計算(suan)。以標準品(pin)的濃度為縱(zong)坐標(biao)(或對(dui)數坐標(biao)),O.D.值為(wei)橫坐標(biao)(或對(dui)數坐標(biao)),繪出(chu)標準曲(qu)線(xian)(*佳(jia)方程(cheng)式(shi)應(ying)依回歸(gui)方程(cheng)計算(suan)的R2值(zhi)來定(ding),以R2值越趨近於1為(wei)好(hao))。推(tui)薦使(shi)用專業制作曲(qu)線(xian)軟件進(jin)行(xing)分(fen)析(xi),如(ru)curve expert 1.30,根據樣(yang)品(pin)O.D.值(zhi),由標準曲(qu)線(xian)查(zha)出相(xiang)應(ying)的濃度,乘(cheng)以稀釋(shi)倍數(shu);或(huo)用標(biao)準物的濃度與(yu)O.D.值計算(suan)出標(biao)準曲(qu)線(xian)的回(hui)歸(gui)方程(cheng)式(shi),將(jiang)樣(yang)品(pin)的O.D.值(zhi)代(dai)入(ru)方程(cheng)式(shi),計算(suan)出樣(yang)品(pin)濃度,再乘(cheng)以稀釋(shi)倍數(shu),即(ji)為樣(yang)品(pin)的實(shi)際濃度。
特(te)異性(xing)
本(ben)試劑盒(he)用於(yu)檢測(ce)猴血管(guan)細(xi)胞粘(zhan)附分(fen)子(zi)1(VCAM1),經檢測(ce)與(yu)其它(ta)相(xiang)似物質無明顯交叉反應(ying)。
由於受(shou)到(dao)技術及(ji)樣(yang)本(ben)來源(yuan)的限(xian)制,不可能完成對(dui)所有(you)相(xiang)關或相似物質交叉反應(ying)檢測(ce),因此(ci)本(ben)試劑盒(he)有(you)可能與(yu)未(wei)經檢測(ce)的其(qi)它(ta)物質有(you)交叉反應(ying)。
精密度
精密度用樣(yang)品(pin)測(ce)定(ding)值的變(bian)異系(xi)數(shu)CV表示(shi)。CV(%) = SD/mean×100
批內(nei)差:取(qu)同批(pi)次(ci)試劑盒(he)對低(di)、中、高(gao)值定(ding)值樣(yang)本(ben)進行(xing)定(ding)量檢(jian)測(ce),每(mei)份(fen)樣(yang)本(ben)連續(xu)測(ce)定(ding)20 次,分別計算(suan)不同濃度樣(yang)本(ben)的平(ping)均值(zhi)及(ji)SD值(zhi)。
批間(jian)差:選(xuan)取3個(ge)不同批(pi)次(ci)的試劑盒(he)分別對低、中、高(gao)值定(ding)值樣(yang)本(ben)進行(xing)定(ding)量測(ce)定(ding),每個樣(yang)本(ben)使用同壹(yi)試劑盒(he)重(zhong)復測(ce)定(ding)8次,分別計算(suan)不同濃度樣(yang)本(ben)的平(ping)均值(zhi)及(ji)SD值(zhi)。
批內(nei)差: CV<10%
批間(jian)差: CV<12%
猴血管(guan)細(xi)胞粘(zhan)附分(fen)子(zi)1(VCAM1)ELISA試劑盒(he)穩定(ding)性(xing)
經測(ce)定(ding),試劑盒(he)在有(you)效(xiao)期(qi)內(nei)按推(tui)薦(jian)溫度保存(cun),其活(huo)性(xing)降(jiang)低(di)率(lv)小(xiao)於(yu)5%。
為減(jian)小(xiao)外(wai)部因素(su)對試劑盒(he)破壞前後(hou)檢(jian)測(ce)值(zhi)的影(ying)響(xiang),實(shi)驗室的環境條(tiao)件需(xu)盡量保(bao)持壹(yi)致(zhi),尤其(qi)是(shi)實(shi)驗室內(nei)溫度、濕(shi)度及溫(wen)育條(tiao)件。其(qi)次由同壹(yi)實(shi)驗員來進(jin)行(xing)操作可減少人(ren)為誤(wu)差(cha)。



