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授(shou)權代(dai)理(li)品(pin)牌(pai)
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ELISA試(shi)劑盒
- 農(nong)殘檢(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)盒(he)
- 馬(ma)ELISA試劑盒
- 牛(niu)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)
- 魚ELISA試劑(ji)盒(he)
- 人(ren)ELISA試劑盒(he)/Human
- 小(xiao)鼠ELISA試劑(ji)盒(he)/Mouse
- 大鼠ELISA試劑盒(he)/Rat
- 羊(yang)ELISA試(shi)劑(ji)盒/Sheep
- 兔ELISA試劑(ji)盒/ Rabbi...
- 豬(zhu)ELISA試劑(ji)盒/Porcin...
- 豚鼠ELISA試(shi)劑盒/Guine...
- 狗ELISA試劑盒/ Canin...
- 雞(ji)ELISA試劑(ji)盒(he)/Chicke...
- 鴨(ya)ELISA試劑盒(he)
- 植物ELISA試劑盒
- 猴(hou)ELISA試劑盒(he)/ Monke...
- 其他ELISA試劑(ji)盒
- 抗體
- 蛋白(bai)
- CLIA試(shi)劑盒
- 細胞(bao)生物學(xue)
- 分(fen)子生(sheng)物學(xue)/常(chang)用(yong)試(shi)劑
96T 僅(jin)供體(ti)外(wai)研究(jiu)使用,不(bu)用於(yu)臨(lin)床診斷(duan)!
猴(hou)載(zai)脂蛋白(bai)A1(APOA1)ELISA試(shi)劑盒
本試(shi)劑(ji)盒運(yun)用雙(shuang)抗體夾(jia)心ELISA法定量(liang)測(ce)定(ding)猴(hou)血清、血漿、組(zu)織勻漿、細胞(bao)裂(lie)解(jie)液、細胞(bao)培養上(shang)清(qing)液和其他生物液體中猴(hou)載(zai)脂蛋白(bai)A1(APOA1)含(han)量(liang)。
檢(jian)測(ce)範圍(wei)
1.563-100ng/mL
*低檢(jian)測(ce)限
0.62ng/mL
實(shi)驗原理(li)
將(jiang)猴(hou)載(zai)脂蛋白(bai)A1(APOA1)抗體包被(bei)於(yu)96孔(kong)微孔(kong)板中,制(zhi)成固(gu)相載(zai)體,向(xiang)微孔(kong)中分(fen)別加(jia)入標(biao)準(zhun)品或標(biao)本(ben),其中的猴(hou)載(zai)脂蛋白(bai)A1(APOA1)與連接於固(gu)相載(zai)體上(shang)的抗體結合,然後加(jia)入生物素化的猴(hou)載(zai)脂蛋白(bai)A1(APOA1)抗體,將(jiang)未結合的生物素化抗體洗(xi)凈後,加(jia)入HRP標(biao)記(ji)的親和(he)素,再次徹(che)底(di)洗(xi)滌(di)後(hou)加(jia)入TMB底物顯色。TMB在(zai)過氧(yang)化(hua)物酶的催化下(xia)轉化(hua)成藍(lan)色,並在(zai)酸的作用(yong)下(xia)轉化(hua)成*終(zhong)的黃色。顏(yan)色的深淺和樣品(pin)中的猴(hou)載(zai)脂蛋白(bai)A1(APOA1)呈正(zheng)相關。用酶(mei)標(biao)儀(yi)在(zai)450nm波長下(xia)測(ce)定(ding)吸(xi)光(guang)度(du)(O.D.值(zhi)),計算(suan)樣品(pin)濃度(du)。
試(shi)劑盒(he)內(nei)容(rong)
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試劑(ji)名稱(cheng) |
數量(liang) |
試(shi)劑(ji)名稱(cheng) |
數量(liang) |
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96孔(kong)板(預包被(bei)) |
1 |
96孔(kong)板覆(fu)膜(mo) |
2 |
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標(biao)準(zhun)品 |
0.5ml×1 |
標(biao)準(zhun)品稀釋液 |
1.5ml×1瓶(ping) |
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顯色劑(ji)A液 |
6ml×1瓶(ping) |
樣品(pin)稀釋液 |
6ml×1瓶(ping) |
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顯色劑(ji)B液 |
6ml×1瓶(ping) |
終(zhong)止液 |
6ml×1瓶(ping) |
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酶標(biao)試(shi)劑 |
6ml×1瓶(ping) |
密封袋 |
1 |
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濃洗滌液(30×) |
1×20mL |
使用說明(ming)書(shu) |
1 |
猴(hou)載(zai)脂蛋白(bai)A1(APOA1)ELISA試(shi)劑盒需(xu)自(zi)備的設備及(ji)試(shi)劑(ji)
1. 450±10nm濾(lv)光片的酶標(biao)儀(yi)(建(jian)議儀器使用前提前預(yu)熱(re))
2. 單道(dao)或多(duo)道(dao)微量(liang)加(jia)液器及(ji)吸(xi)頭
3. 稀釋樣品(pin)的EP管(guan)
4. 蒸(zheng)餾(liu)水或去(qu)離(li)子水(shui)
5. 吸(xi)水紙
6. 盛放洗液的容(rong)器
試劑(ji)盒的儲存(cun)及(ji)有效期(qi)
1. 未(wei)開(kai)封的試劑(ji)盒:所(suo)有試(shi)劑(ji)均(jun)按(an)試(shi)劑瓶(ping)標(biao)簽(qian)上(shang)所(suo)示(shi)保(bao)存(cun)。請註(zhu)意,收(shou)到(dao)試劑(ji)盒(he)後(hou)請(qing)盡快(kuai)將(jiang)TMB 洗滌(di)液,終(zhong)止液保存(cun)於4℃,其(qi)他試劑(ji)保存(cun)於-20℃。
2. 使用後(hou)的試劑(ji)盒:剩(sheng)余試(shi)劑仍需(xu)按(an)照(zhao)試劑瓶(ping)標(biao)簽(qian)所示(shi)的溫(wen)度(du)保(bao)存(cun),開(kai)封後的酶標(biao)板要(yao)加(jia)幹燥劑(ji)後(hou)密封保存(cun)於-20℃,避(bi)免(mian)潮濕(shi)。
註(zhu)意:
試(shi)劑盒內(nei)酶標(biao)條(tiao)可拆卸(xie),按(an)實(shi)驗需(xu)求(qiu)可分(fen)多次使用;使用後(hou)的剩余試(shi)劑盒(he)建(jian)議在(zai)**實驗後 1個月內(nei)使用完畢(bi)。產(chan)品過期(qi)時(shi)間以(yi)盒(he)子上(shang)的標(biao)簽(qian)為準(zhun),保質(zhi)期(qi)內(nei)所有組(zu)分(fen)都確(que)保是穩定(ding)的。
猴(hou)載(zai)脂蛋白(bai)A1(APOA1)ELISA試(shi)劑盒標(biao)本(ben)的采集(ji)與保存(cun)
1. 血清:
將(jiang)收(shou)集(ji)於血清分(fen)離管(guan)的全(quan)血標(biao)本(ben)在(zai)室溫(wen)放(fang)置(zhi) 2 小時(shi)或 4oC 過夜(ye),然後 1000×g 離(li)心 20 分(fen)鐘(zhong),取(qu)上(shang)清(qing)即可,或將(jiang)上(shang)清(qing)置於-20oC 或-80oC 保(bao)存(cun),但應(ying)避(bi)免(mian)反復(fu)凍(dong)融(rong)。
2. 血漿:
用 EDTA 或肝(gan)素作為(wei)抗凝(ning)劑采(cai)集(ji)標(biao)本(ben),並將(jiang)標(biao)本(ben)在(zai)采集(ji)後(hou)的 30 分(fen)鐘(zhong)內(nei)於 2-8oC 1000×g 離(li)心 15 分(fen)鐘(zhong),取(qu)上(shang)清(qing)即可檢(jian)測(ce),或(huo)將(jiang)上(shang)清(qing)置於-20oC 或-80oC 保(bao)存(cun),但應(ying)避(bi)免(mian)反復(fu)凍(dong)融(rong)。
3. 組織勻漿:
1) 取(qu)適量(liang)組(zu)織塊,於預(yu)冷(leng)PBS(0.01mol/L, pH 7.0-7.2)中清(qing)洗(xi)去(qu)除(chu)血液,稱(cheng)重後備用(組(zu)織塊較大需(xu)先(xian)剪(jian)碎後再勻漿);
2) 可同時(shi)選用(yong)多(duo)種(zhong)勻漿方法達到(dao)較(jiao)好的破碎效果:首(shou)先(xian)將(jiang)組織塊移入玻璃勻漿器,加(jia)入5-10mL 預冷(leng)PBS 進(jin)行充(chong)分(fen)研磨(mo),該(gai)過程(cheng)需(xu)在(zai)冰上(shang)進(jin)行(有條(tiao)件實(shi)驗室可選用(yong)機(ji)器勻漿);得(de)到(dao)的勻漿液可再利(li)用(yong)超聲破碎或反復(fu)凍(dong)融(rong) 進壹(yi)步處理(超聲破(po)碎過程(cheng)中註(zhu)意冰浴降(jiang)溫(wen);反復(fu)凍(dong)融(rong)法可重復2 次)。
3) 將(jiang)制(zhi)備好的勻漿液於5000×g 離心5 分(fen)鐘(zhong),留取上(shang)清(qing)即可檢(jian)測(ce)。
4. 細胞(bao)裂(lie)解(jie)液:
1)貼(tie)壁(bi)細胞(bao)需(xu)要(yao)先(xian)用胰(yi)酶消化(hua),離(li)心收(shou)集(ji)細胞(bao)(懸浮細胞(bao)可直(zhi)接離心收(shou)集(ji));
2)將(jiang)收(shou)集(ji)到的細胞(bao)用冷(leng)PBS 洗(xi)3 次;
3)物理方法裂(lie)解(jie)細胞(bao)(可先(xian)超聲(sheng)破(po)碎細胞(bao),再反復(fu)凍(dong)融(rong)):
i 超聲破(po)碎:取適量(liang)PBS 重懸細胞(bao),用壹(yi)定功(gong)率的超聲(sheng)波處(chu)理(li)細胞(bao)懸液,使細胞(bao)急劇震蕩破裂(lie)。
ii 反復(fu)凍(dong)融(rong):將(jiang)待破(po)碎的細胞(bao)在(zai)-20 oC 以(yi)下(xia)冰凍(dong),室溫(wen)融(rong)解(jie),反復(fu)3 次,使細胞(bao)溶脹(zhang)破(po)碎。
4)將(jiang)標(biao)本(ben)於2-8 oC 1500×g 離(li)心10 分(fen)鐘(zhong),收(shou)集(ji)上(shang)清(qing)備用。
5. 細胞(bao)培養上(shang)清(qing)或其它生物標(biao)本(ben):
請 1000×g 離(li)心 20 分(fen)鐘(zhong),取(qu)上(shang)清(qing)即可檢(jian)測(ce),或(huo)將(jiang)上(shang)清(qing)置於-20oC 或-80oC 保(bao)存(cun),但應(ying)避(bi)免(mian)反復(fu)凍(dong)融(rong)。
註(zhu)意:
1. 以(yi)上(shang)標(biao)本(ben)均需(xu)密(mi)封保存(cun),4oC保存(cun)應小(xiao)於1周(zhou),-20oC不(bu)應(ying)超(chao)過1個月,-80oC不(bu)應(ying)超過2個月。
2. 標(biao)本(ben)使用前應(ying)緩慢(man)均衡(heng)至室溫(wen),不(bu)應(ying)加(jia)熱(re)使之融(rong)解(jie)。
3. 實驗前紅(hong)細胞(bao)裂(lie)解(jie)液必須用標(biao)準(zhun)品稀釋液稀釋。
猴(hou)載(zai)脂蛋白(bai)A1(APOA1)ELISA試(shi)劑盒試(shi)劑(ji)準(zhun)備
1. 使用前將(jiang)所有的試劑(ji)和標(biao)本(ben)緩慢(man)均衡(heng)至室溫(wen)(18-25oC),試(shi)劑(ji)不能(neng)直(zhi)接在(zai)37oC溶解(jie)。
2. 標(biao)準(zhun)品(凍(dong)幹品(pin)):每(mei)瓶(ping)標(biao)準(zhun)品加(jia)入標(biao)準(zhun)品稀釋液1mL,蓋好後(hou)室溫(wen)靜(jing)置(zhi)大約10分(fen)鐘(zhong),同(tong)時(shi)反復(fu)顛(dian)倒(dao)/搓(cuo)動以助(zhu)溶解(jie),其濃度(du)為(wei)100ng/mL。準(zhun)備7個稀釋標(biao)準(zhun)品的EP管(guan),每(mei)個EP管(guan)中加(jia)入150μL的標(biao)準(zhun)品稀釋液,如圖(tu)所示(shi)依次倍(bei)比稀釋成(cheng)不(bu)同的梯度(du), 標(biao)準(zhun)品稀釋液(0pg/mL)直(zhi)接作為(wei)空(kong)白(bai)孔(kong)。為(wei)保(bao)證(zheng)實驗結果有效性(xing),每(mei)次實驗請使用新(xin)的標(biao)準(zhun)品溶液。
3. 濃洗滌液:用580mL蒸(zheng)餾(liu)水或去(qu)離(li)子水(shui)將(jiang)20mL濃洗滌液稀釋至(zhi)600mL,進行30倍(bei)稀釋。
標(biao)本(ben)處理(li)
1. 本公(gong)司(si)只(zhi)對(dui)試劑盒本(ben)身(shen)負(fu)責(ze),不對(dui)因使用該(gai)試(shi)劑盒所(suo)造成的樣本(ben)消耗負(fu)責(ze),請使用者(zhe)使用前充(chong)分(fen)考慮(lv)到(dao)樣本(ben)的可能(neng)使用量(liang),預(yu)留充足的樣本(ben)。
2. 實驗前應(ying)預(yu)測(ce)標(biao)本(ben)含(han)量(liang),如果標(biao)本(ben)濃度(du)過高(gao),應(ying)對標(biao)本(ben)進行稀釋,使稀釋後(hou)的標(biao)本(ben)符合試劑盒的檢(jian)測(ce)範圍(wei),計算(suan)時(shi)再乘(cheng)以(yi)相應的稀釋倍(bei)數(shu)。
3. 若(ruo)所(suo)檢(jian)樣本(ben)不包含(han)在(zai)說明(ming)書(shu)所(suo)列(lie)樣本(ben)之中,建(jian)議進行預(yu)實驗驗證(zheng)其有效性(xing),並註(zhu)意留存(cun)樣本(ben)。
4. 使用化(hua)學(xue)裂(lie)解(jie)液制(zhi)備的組織勻漿或(huo)細胞(bao)提取(qu)液可能(neng)會由於(yu)某(mou)些化學(xue)物質(zhi)的引入(ru)導(dao)致 ELISA實(shi)驗結果偏(pian)差。
5. 若(ruo)樣本(ben)為細胞(bao)培養上(shang)清(qing),因該(gai)類樣本(ben)幹擾因素(su) 較(jiao)多,如:細胞(bao)狀態、細胞(bao)數量(liang)、采(cai)樣時(shi)間等(deng),所(suo)以(yi)可能(neng)存(cun)在(zai)檢(jian)測(ce)不(bu)出(chu)的情況(kuang)。
6. 某(mou)些天(tian)然蛋白(bai)或(huo)重組蛋白(bai),包括原核(he)及(ji)真(zhen)核(he)重組蛋白(bai),可能(neng)因為(wei)與本產(chan)品所(suo)使用的檢(jian)測(ce)抗體及(ji)捕(bu)獲(huo)抗體不(bu)匹(pi)配,而不被檢(jian)測(ce)出(chu)。
7. 建(jian)議使用新(xin)鮮樣本(ben),保存(cun)時(shi)間過長可能(neng)會存(cun)在(zai)蛋白(bai)降(jiang)解(jie)或變性(xing)導(dao)致實(shi)驗結果偏(pian)差。
猴(hou)載(zai)脂蛋白(bai)A1(APOA1)ELISA試(shi)劑盒操作步(bu)驟(zhou)
1. 加(jia)樣:分(fen)別設(she)空(kong)白(bai)孔(kong)(空(kong)白(bai)對(dui)照孔(kong)不(bu)加(jia)樣品(pin)及(ji)酶(mei)標(biao)試(shi)劑,其(qi)余各(ge)步操作相同)、標(biao)準(zhun)孔(kong)、待(dai)測(ce)樣品(pin)孔(kong)。在(zai)酶標(biao)包被(bei)板上(shang)標(biao)準(zhun)品準(zhun)確(que)加(jia)樣50μl,待(dai)測(ce)樣品(pin)孔(kong)中先(xian)加(jia)樣品(pin)稀釋液40μl,然後再加(jia)待測(ce)樣品(pin)10μl(樣品(pin)*終(zhong)稀釋度(du)為(wei)5倍(bei))。加(jia)樣將(jiang)樣品(pin)加(jia)於酶標(biao)板孔(kong)底(di)部(bu),盡量(liang)不(bu)觸及(ji)孔(kong)壁(bi),輕(qing)輕(qing)晃(huang)動混勻。
2. 溫(wen)育:用(yong)封板膜(mo)封板後置37℃溫(wen)育30分(fen)鐘(zhong)。
3. 配液:將(jiang)20倍(bei)濃縮洗滌液用蒸(zheng)餾(liu)水20倍(bei)稀釋後(hou)備用
4. 洗(xi)滌(di):小心揭掉(diao)封板膜(mo),棄(qi)去(qu)液體,甩幹,每(mei)孔(kong)加(jia)滿(man)洗滌(di)液,靜(jing)置(zhi)30秒(miao)後(hou)棄(qi)去(qu),如此(ci)重復5次,拍幹。
5. 加(jia)酶:每(mei)孔(kong)加(jia)入酶標(biao)試(shi)劑50μl,空(kong)白(bai)孔(kong)除(chu)外(wai)。
6. 溫(wen)育:操作同(tong)3。
7. 洗滌(di):操作同(tong)5。
8. 顯色:每(mei)孔(kong)先(xian)加(jia)入顯色劑(ji)A50μl,再加(jia)入顯色劑(ji)B50μl,輕輕(qing)震蕩混勻,37℃避(bi)光(guang)顯色15分(fen)鐘(zhong).
9. 終(zhong)止:每(mei)孔(kong)加(jia)終(zhong)止液50μl,終(zhong)止反應(ying)(此(ci)時(shi)藍(lan)色立(li)轉黃(huang)色)。
10. 測(ce)定(ding):以(yi)空(kong)白(bai)空(kong)調(tiao)零,450nm波長依序(xu)測(ce)量(liang)各(ge)孔(kong)的吸光(guang)度(du)(OD值(zhi))。 測(ce)定(ding)應(ying)在(zai)加(jia)終(zhong)止液後15分(fen)鐘(zhong)以(yi)內(nei)進行。
註(zhu)意:
1. 試劑準(zhun)備:準(zhun)備壹(yi)次實驗所需(xu)要(yao)的酶標(biao)條(tiao),其它的可從(cong)微孔(kong)板上(shang)拆(chai)下(xia),密封,按(an)照(zhao)說明(ming)書(shu)要(yao)求保存(cun),以備下(xia)次使用。
2. 加(jia)樣:實(shi)驗操作中請(qing)使用壹(yi)次性(xing)的吸頭,避(bi)免(mian)交叉(cha)汙(wu)染(ran)。加(jia)樣時(shi)註(zhu)意不要(yao)有氣泡(pao),將(jiang)樣品(pin)加(jia)於酶標(biao)板底部,盡量(liang)不(bu)觸及(ji)孔(kong)壁(bi),輕(qing)輕(qing)晃(huang)動混勻。加(jia)樣或(huo)加(jia)試劑時(shi),**個孔(kong)與*後壹(yi)個孔(kong)加(jia)樣之(zhi)間的時(shi)間間(jian)隔(ge)如果太(tai)大,將(jiang)會導(dao)致不(bu)同(tong)的“預溫(wen)育”時(shi)間,從(cong)而明(ming)顯地影響到(dao)測(ce)量(liang)值(zhi)的準(zhun)確(que)性(xing)及(ji)重復性(xing)。因此(ci),壹(yi)次加(jia)樣時(shi)間(包括標(biao)準(zhun)品及(ji)所(suo)有樣品(pin))*好控(kong)制(zhi)在(zai)10分(fen)鐘(zhong)內(nei)。推薦(jian)設置(zhi)復孔(kong)進(jin)行實(shi)驗。
3. 溫(wen)育:為防(fang)止(zhi)樣品(pin)蒸(zheng)發,實(shi)驗時(shi)請將(jiang)加(jia)上(shang)蓋(gai)或覆(fu)膜(mo)的酶標(biao)板置於濕(shi)盒(he)內(nei),以避(bi)免(mian)液體蒸(zheng)發,洗(xi)板後應盡快(kuai)進(jin)行下(xia)步操作,任何(he)時(shi)侯都(dou)應(ying)避(bi)免(mian)酶標(biao)板處於幹燥狀(zhuang)態(tai),同時(shi)應嚴(yan)格遵(zun)守給(gei)定的溫(wen)育時(shi)間和(he)溫(wen)度(du)。
4. 洗(xi)滌(di):充(chong)分(fen)的洗滌(di)非(fei)常(chang)重要(yao),在(zai)每(mei)次洗滌過程(cheng)中,都(dou)要(yao)將(jiang)洗滌(di)液完全(quan)甩幹(gan)。洗滌(di)過程(cheng)中反應(ying)孔(kong)中殘留的洗滌(di)液應在(zai)濾紙(zhi)上(shang)拍(pai)幹,勿(wu)將(jiang)濾紙(zhi)直(zhi)接放入(ru)反應(ying)孔(kong)中吸(xi)水(shui),同(tong)時(shi)要(yao)消除(chu)板底殘留的液體和手指(zhi)印(yin),避(bi)免(mian)影響*後(hou)的酶標(biao)儀(yi)讀(du)數。如果有自(zi)動(dong)洗(xi)板機(ji),應在(zai)熟練(lian)使用後(hou)再用到(dao)正(zheng)式實 驗過程(cheng)中。
5. 反應(ying)時(shi)間的控(kong)制(zhi):加(jia)入底物後請定時(shi)觀察(cha)反應(ying)孔(kong)的顏(yan)色變(bian)化(比如,每(mei)隔(ge)10分(fen)鐘(zhong)觀察(cha)壹(yi)次),如顏(yan)色較(jiao)深,請提前加(jia)入終(zhong)止液終(zhong)止反應(ying),避(bi)免(mian)反應(ying)過強(qiang)從(cong)而影響酶(mei)標(biao)儀(yi)光密(mi)度(du)讀(du)數。
6. 底(di)物:底(di)物請避(bi)光(guang)保存(cun),在(zai)儲存(cun)和溫(wen)育時(shi)避(bi)免(mian)強光直(zhi)接照射(she)。
7. 如果實(shi)驗室內(nei)濕(shi)度(du)低(di)於60%,推薦(jian)使用加(jia)濕(shi)器提高(gao)濕(shi)度(du)水(shui)平。
實(shi)驗流程(cheng)
1. 實(shi)驗前標(biao)準(zhun)品、試劑(ji)及(ji)樣本(ben)的準(zhun)備;
2. 加(jia)樣(標(biao)準(zhun)品及(ji)樣本(ben))50μL,37℃孵育30分(fen)鐘(zhong);
3. 洗板5次,加(jia)酶標(biao)試(shi)劑50ul,37℃孵(fu)育半(ban)小(xiao)時(shi);
4. 洗(xi)板5次;加(jia)入顯色液A,B各50ul,37℃孵育顯(xian)色15分(fen)鐘(zhong)
5. 加(jia)終(zhong)止液50μL,立即450nm讀(du)數。
6. 計算(suan)
猴(hou)載(zai)脂蛋白(bai)A1(APOA1)ELISA試(shi)劑盒計算(suan)
各(ge)標(biao)準(zhun)品及(ji)樣本(ben)O.D.值扣除空(kong)白(bai)孔(kong)O.D.值(zhi)後(hou)作圖(tu)(七(qi)點圖(tu)),如設(she)置復(fu)孔(kong),則(ze)應(ying)取(qu)其(qi)平均值計算(suan)。以(yi)標(biao)準(zhun)品的濃度(du)為(wei)縱坐標(biao)(或(huo)對數(shu)坐標(biao)),O.D.值(zhi)為橫(heng)坐標(biao)(或(huo)對數(shu)坐標(biao)),繪(hui)出(chu)標(biao)準(zhun)曲線(xian)(*佳(jia)方程式(shi)應依回歸(gui)方程計算(suan)的R2值來定(ding),以R2值(zhi)越(yue)趨近(jin)於1為(wei)好)。推(tui)薦(jian)使用專(zhuan)業制(zhi)作曲線(xian)軟(ruan)件進(jin)行分(fen)析,如curve expert 1.30,根(gen)據(ju)樣品(pin)O.D.值,由標(biao)準(zhun)曲線(xian)查出(chu)相應的濃度(du),乘(cheng)以(yi)稀釋倍(bei)數(shu);或(huo)用標(biao)準(zhun)物的濃度(du)與O.D.值計算(suan)出(chu)標(biao)準(zhun)曲線(xian)的回歸(gui)方程式(shi),將(jiang)樣品(pin)的O.D.值代(dai)入(ru)方程式(shi),計算(suan)出(chu)樣品(pin)濃度(du),再乘(cheng)以(yi)稀釋倍(bei)數(shu),即(ji)為樣品(pin)的實際濃度(du)。
特(te)異性(xing)
本試(shi)劑盒用於(yu)檢(jian)測(ce)猴(hou)載(zai)脂蛋白(bai)A1(APOA1),經檢(jian)測(ce)與其它相似(si)物質(zhi)無明(ming)顯交叉(cha)反應(ying)。
由(you)於受(shou)到(dao)技術及(ji)樣本(ben)來源(yuan)的限制(zhi),不可能(neng)完成(cheng)對(dui)所(suo)有相關或相似(si)物質(zhi)交叉(cha)反應(ying)檢(jian)測(ce),因此(ci)本(ben)試劑(ji)盒有可能(neng)與未經檢(jian)測(ce)的其它物質(zhi)有交(jiao)叉(cha)反應(ying)。
精(jing)密(mi)度(du)
精密度(du)用(yong)樣品(pin)測(ce)定(ding)值(zhi)的變異(yi)系數(shu)CV表(biao)示(shi)。CV(%) = SD/mean×100
批內(nei)差:取同批次試劑盒(he)對(dui)低(di)、中、高(gao)值(zhi)定(ding)值樣本(ben)進行定(ding)量(liang)檢(jian)測(ce),每(mei)份(fen)樣本(ben)連續測(ce)定(ding)20 次,分(fen)別計算(suan)不(bu)同濃度(du)樣本(ben)的平均(jun)值及(ji)SD值(zhi)。
批間差:選取3個不(bu)同(tong)批次的試劑(ji)盒分(fen)別對(dui)低(di)、中、高(gao)值(zhi)定(ding)值樣本(ben)進行定(ding)量(liang)測(ce)定(ding),每(mei)個樣本(ben)使用同(tong)壹(yi)試劑盒重復測(ce)定(ding)8次,分(fen)別計算(suan)不(bu)同濃度(du)樣本(ben)的平均(jun)值及(ji)SD值(zhi)。
批內(nei)差: CV<10%
批間差: CV<12%
猴(hou)載(zai)脂蛋白(bai)A1(APOA1)ELISA試(shi)劑盒穩(wen)定(ding)性(xing)
經測(ce)定(ding),試(shi)劑(ji)盒(he)在(zai)有效期(qi)內(nei)按(an)推(tui)薦(jian)溫(wen)度(du)保(bao)存(cun),其活(huo)性(xing)降(jiang)低(di)率小(xiao)於(yu)5%。
為減(jian)小(xiao)外(wai)部(bu)因素(su)對(dui)試劑(ji)盒破壞前後(hou)檢(jian)測(ce)值(zhi)的影響,實(shi)驗室的環境條(tiao)件需(xu)盡量(liang)保(bao)持壹(yi)致,尤(you)其(qi)是實驗室內(nei)溫(wen)度(du)、濕(shi)度(du)及(ji)溫(wen)育條(tiao)件。其(qi)次由同壹(yi)實驗員來進(jin)行操作可減少(shao)人(ren)為(wei)誤(wu)差。



