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      <dd id="Ht0T0p"></dd>

      <small id="Ht0T0p"><tt id="Ht0T0p"></tt></small>

      1. <dl id="Ht0T0p"></dl>

        1. 產(chan)品(pin)詳(xiang)情(qing)
          • 產(chan)品(pin)名(ming)稱(cheng):猴(hou)轉化生(sheng)長因(yin)子α(TGFα)ELISA試劑(ji)盒

          • 產(chan)品(pin)型號(hao):TGFα
          • 產(chan)品(pin)廠(chang)商:KALANG
          • 產(chan)品(pin)文檔:
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          簡(jian)單(dan)介紹:
          猴(hou)轉化生(sheng)長因(yin)子α(TGFα)ELISA試劑(ji)盒運用雙(shuang)抗體夾心ELISA法定(ding)量(liang)測(ce)定猴(hou)血清(qing)、血漿(jiang)、組織(zhi)勻漿(jiang)、細胞裂解(jie)液、細胞培養上清(qing)液和其他生(sheng)物(wu)液體中猴(hou)轉化生(sheng)長因(yin)子α(TGFα)ELISA試劑(ji)盒含(han)量。
          詳(xiang)情介紹:


                                                                 96T       僅(jin)供體(ti)外研究使用,不(bu)用於(yu)臨(lin)床診斷(duan)!

          猴(hou)轉化生(sheng)長因(yin)子α(TGFα)ELISA試劑(ji)盒

          本(ben)試(shi)劑(ji)盒運用雙(shuang)抗體夾心ELISA法定(ding)量(liang)測(ce)定猴(hou)血清(qing)、血漿(jiang)、組織(zhi)勻漿(jiang)、細胞裂解(jie)液、細胞培養上清(qing)液和其他生(sheng)物(wu)液體中猴(hou)轉化生(sheng)長因(yin)子α(TGFα)含量(liang)。

           檢(jian)測(ce)範圍(wei)

          31.25-2000 pg/mL

           *低檢(jian)測(ce)限

          8.4 pg/mL

           實(shi)驗原(yuan)理(li)

          猴(hou)轉化生(sheng)長因(yin)子α(TGFα)抗體包(bao)被(bei)於(yu)96孔(kong)微(wei)孔板(ban)中,制(zhi)成(cheng)固(gu)相(xiang)載體(ti),向微(wei)孔中分別加(jia)入(ru)標準(zhun)品(pin)或(huo)標本(ben),其(qi)中的(de)猴(hou)轉化生(sheng)長因(yin)子α(TGFα)與(yu)連(lian)接(jie)於(yu)固(gu)相(xiang)載體(ti)上的(de)抗體結(jie)合,然(ran)後加(jia)入(ru)生物(wu)素(su)化的(de)猴(hou)轉化生(sheng)長因(yin)子α(TGFα)抗體,將未(wei)結(jie)合的(de)生物素(su)化抗體洗(xi)凈(jing)後,加(jia)入(ru)HRP標記的親和素(su),再(zai)次徹(che)底(di)洗(xi)滌後加(jia)入(ru)TMB底(di)物(wu)顯色。TMB在(zai)過(guo)氧(yang)化物(wu)酶(mei)的催(cui)化下轉化成(cheng)藍(lan)色,並(bing)在(zai)酸(suan)的作(zuo)用下轉化成(cheng)*終的(de)黃色(se)。顏色的(de)深(shen)淺(qian)和(he)樣品中的(de)猴(hou)轉化生(sheng)長因(yin)子α(TGFα)呈正相(xiang)關。用酶(mei)標儀(yi)在(zai)450nm波(bo)長下測(ce)定吸(xi)光度(du)(O.D.值(zhi)),計算樣品(pin)濃(nong)度(du)。

           試(shi)劑(ji)盒內(nei)容

          試(shi)劑(ji)名(ming)稱(cheng)

          數(shu)量

          試(shi)劑(ji)名(ming)稱(cheng)

          數(shu)量

          96孔(kong)板(ban)(預包(bao)被(bei))

          1

          96孔(kong)板(ban)覆膜

          2

          標(biao)準品(pin)

          0.5ml×1

          標(biao)準品(pin)稀釋液

          1.5ml×1瓶(ping)

          顯(xian)色劑(ji)A

          6ml×1瓶(ping)

          樣(yang)品稀(xi)釋液

          6ml×1瓶(ping)

          顯(xian)色劑(ji)B

          6ml×1瓶(ping)

          終止(zhi)液

          6ml×1瓶(ping)

          酶(mei)標試(shi)劑(ji)

          6ml×1瓶(ping)

          密(mi)封(feng)袋

          1

          濃(nong)洗滌液(30×)

          1×20mL

          使(shi)用說(shuo)明(ming)書

          1

          猴(hou)轉化生(sheng)長因(yin)子α(TGFα)ELISA試劑(ji)盒需自備(bei)的(de)設備及(ji)試(shi)劑(ji)

          1.         450±10nm濾光片的(de)酶(mei)標儀(yi)(建(jian)議(yi)儀器(qi)使用前(qian)提(ti)前(qian)預熱(re))

          2.         單(dan)道(dao)或多(duo)道(dao)微(wei)量加(jia)液器及(ji)吸(xi)頭

          3.         稀(xi)釋樣品的(de)EP管(guan)

          4.         蒸(zheng)餾(liu)水或去(qu)離(li)子水

          5.         吸(xi)水紙

          6.         盛(sheng)放洗液的容器

           試(shi)劑(ji)盒的(de)儲存(cun)及(ji)有效(xiao)期

          1.         未(wei)開封(feng)的試(shi)劑(ji)盒:所(suo)有試劑(ji)均按(an)試劑(ji)瓶標(biao)簽(qian)上所(suo)示保(bao)存(cun)。請註(zhu)意,收到試(shi)劑(ji)盒後請盡(jin)快(kuai)將TMB 洗(xi)滌(di)液,終止(zhi)液保(bao)存(cun)於4℃,其(qi)他試劑(ji)保(bao)存(cun)於-20℃。

          2.         使(shi)用後的試(shi)劑(ji)盒:剩(sheng)余試劑(ji)仍需按照(zhao)試劑(ji)瓶標(biao)簽(qian)所(suo)示的(de)溫(wen)度(du)保(bao)存(cun),開封(feng)後的酶(mei)標板(ban)要加(jia)幹燥(zao)劑(ji)後密(mi)封(feng)保(bao)存(cun)於-20℃,避(bi)免潮(chao)濕。

          註(zhu)意:

          試(shi)劑(ji)盒內(nei)酶(mei)標條(tiao)可(ke)拆(chai)卸,按實驗需求(qiu)可(ke)分多(duo)次使(shi)用;使(shi)用後的剩(sheng)余試劑(ji)盒建(jian)議(yi)在(zai)**實(shi)驗後 1個月(yue)內使(shi)用完(wan)畢(bi)。產(chan)品(pin)過(guo)期時(shi)間以(yi)盒子上的(de)標(biao)簽(qian)為(wei)準(zhun),保(bao)質(zhi)期內所(suo)有組分都確保(bao)是(shi)穩定(ding)的(de)。

          猴(hou)轉化生(sheng)長因(yin)子α(TGFα)ELISA試劑(ji)盒標(biao)本(ben)的(de)采集與(yu)保(bao)存(cun)

          1.         血(xue)清(qing)

          將收集於(yu)血清(qing)分離管(guan)的全血標(biao)本(ben)在(zai)室溫(wen)放置 2 小(xiao)時(shi)或 4oC 過(guo)夜(ye),然後 1000×g 離心 20 分鐘,取(qu)上(shang)清(qing)即(ji)可(ke),或將上(shang)清(qing)置於(yu)-20oC 或(huo)-80oC 保(bao)存(cun),但應(ying)避(bi)免反(fan)復凍(dong)融(rong)。

          2.         血(xue)漿(jiang):

          EDTA 或(huo)肝(gan)素(su)作(zuo)為(wei)抗凝劑(ji)采集標(biao)本(ben),並(bing)將標(biao)本(ben)在(zai)采集後的 30 分鐘內於 2-8oC 1000×g 離(li)心 15 分鐘,取(qu)上(shang)清(qing)即(ji)可(ke)檢(jian)測(ce),或將上(shang)清(qing)置於(yu)-20oC 或(huo)-80oC 保(bao)存(cun),但應(ying)避(bi)免反(fan)復凍(dong)融(rong)。

          3. 組織(zhi)勻漿(jiang):

          1) 取(qu)適量組織(zhi)塊(kuai),於預冷PBS0.01mol/L, pH 7.0-7.2)中清(qing)洗去(qu)除(chu)血液,稱(cheng)重(zhong)後備用(組織(zhi)塊(kuai)較(jiao)大需先剪(jian)碎後再勻(yun)漿(jiang));

          2) 可(ke)同時(shi)選用多(duo)種勻漿(jiang)方法達(da)到較(jiao)好(hao)的(de)破碎效(xiao)果:首(shou)先(xian)將組織(zhi)塊(kuai)移入(ru)玻(bo)璃(li)勻漿(jiang)器,加(jia)入(ru)5-10mL 預冷PBS 進行(xing)充分研磨,該(gai)過(guo)程(cheng)需在(zai)冰(bing)上進行(xing)(有條(tiao)件實(shi)驗室可(ke)選用機器勻漿(jiang));得到的(de)勻漿(jiang)液可(ke)再利(li)用超(chao)聲(sheng)破碎或(huo)反(fan)復凍(dong)融(rong) 進壹(yi)步(bu)處理(li)(超聲(sheng)破碎過(guo)程(cheng)中註(zhu)意冰(bing)浴降溫;反(fan)復凍(dong)融(rong)法可(ke)重(zhong)復2 次(ci))。

          3) 將制(zhi)備(bei)好(hao)的(de)勻(yun)漿(jiang)液於5000×g 離心5 分鐘,留取(qu)上(shang)清(qing)即(ji)可(ke)檢(jian)測(ce)。

          4. 細(xi)胞裂解(jie)液:

          1)貼壁細胞需要先(xian)用胰(yi)酶(mei)消(xiao)化,離(li)心收集細(xi)胞(懸浮細胞可(ke)直接離心收集);

          2)將收集到(dao)的細(xi)胞用冷PBS 3 次;

          3)物(wu)理(li)方法裂解(jie)細(xi)胞(可(ke)先超(chao)聲(sheng)破碎細(xi)胞,再反(fan)復凍(dong)融(rong)):

          i 超(chao)聲(sheng)破碎:取(qu)適量PBS 重(zhong)懸細胞,用壹(yi)定(ding)功(gong)率的超聲(sheng)波(bo)處理(li)細胞懸液,使細胞急劇(ju)震(zhen)蕩破裂。

          ii 反(fan)復凍(dong)融(rong):將待(dai)破碎的(de)細(xi)胞在(zai)-20 oC 以(yi)下冰(bing)凍(dong),室溫(wen)融(rong)解(jie),反(fan)復3 次(ci),使細(xi)胞溶(rong)脹破碎。

          4)將標(biao)本(ben)於(yu)2-8 oC 1500×g 離(li)心10 分鐘,收集上(shang)清(qing)備用。

          5. 細(xi)胞培養上清(qing)或其(qi)它(ta)生(sheng)物標(biao)本(ben):

          請(qing) 1000×g 離心 20 分鐘,取(qu)上(shang)清(qing)即(ji)可(ke)檢(jian)測(ce),或將上(shang)清(qing)置於(yu)-20oC 或(huo)-80oC 保(bao)存(cun),但應(ying)避(bi)免反(fan)復凍(dong)融(rong)。

          註(zhu)意:

          1.         以(yi)上標(biao)本(ben)均(jun)需密(mi)封(feng)保(bao)存(cun)4oC保(bao)存(cun)應(ying)小(xiao)於1周(zhou),-20oC不應(ying)超(chao)過(guo)1個(ge)月,-80oC不(bu)應(ying)超(chao)過(guo)2個(ge)月。

          2.         標(biao)本(ben)使(shi)用前(qian)應(ying)緩慢均(jun)衡至(zhi)室溫(wen),不(bu)應(ying)加(jia)熱(re)使之(zhi)融解(jie)。

          3.         實(shi)驗前(qian)紅細(xi)胞裂解(jie)液必須用標(biao)準(zhun)品稀釋液稀釋。

          猴(hou)轉化生(sheng)長因(yin)子α(TGFα)ELISA試劑(ji)盒試(shi)劑(ji)準備(bei)

          1.         使(shi)用前(qian)將所(suo)有的試劑(ji)和標(biao)本(ben)緩慢均(jun)衡至(zhi)室溫(wen)(18-25oC),試(shi)劑(ji)不能直接在(zai)37oC溶(rong)解。

          2.         標(biao)準品(pin)(凍(dong)幹(gan)品):每(mei)瓶(ping)標準品加(jia)入(ru)標準(zhun)品(pin)稀(xi)釋液1mL,蓋好後室溫(wen)靜(jing)置(zhi)大約(yue)10分鐘,同時(shi)反(fan)復顛倒/搓動以(yi)助(zhu)溶(rong)解,其濃(nong)度(du)為(wei)2000 pg/mL。準(zhun)備7個稀(xi)釋標準品(pin)的(de)EP管(guan),每(mei)個(ge)EP管(guan)中加(jia)入(ru)150μL的標(biao)準(zhun)品(pin)稀釋液,如圖所(suo)示依(yi)次(ci)倍(bei)比稀(xi)釋成不同(tong)的(de)梯(ti)度(du), 標(biao)準品稀釋液(0pg/mL)直接作為(wei)空(kong)白孔。為(wei)保(bao)證(zheng)實驗結(jie)果有效(xiao)性,每(mei)次(ci)實驗請(qing)使(shi)用新(xin)的(de)標準品溶(rong)液。

           

           

           

          3.         濃(nong)洗滌液:用580mL蒸(zheng)餾(liu)水或去(qu)離(li)子水將20mL濃(nong)洗滌液稀釋至600mL,進行(xing)30倍(bei)稀(xi)釋。

          標(biao)本(ben)處理(li)

          1.         本(ben)公(gong)司只對試劑(ji)盒本(ben)身負(fu)責,不(bu)對因使(shi)用該(gai)試(shi)劑(ji)盒所(suo)造(zao)成的(de)樣本(ben)消(xiao)耗負責,請(qing)使用者(zhe)使用前(qian)充分考慮到樣(yang)本(ben)的(de)可(ke)能使(shi)用量(liang),預(yu)留充足的(de)樣本(ben)。

          2.         實(shi)驗前(qian)應(ying)預(yu)測(ce)標本(ben)含(han)量,如果標本(ben)濃(nong)度(du)過(guo)高(gao),應(ying)對標本(ben)進行(xing)稀釋,使稀釋後的標(biao)本(ben)符合試(shi)劑(ji)盒的(de)檢(jian)測(ce)範圍(wei),計算(suan)時(shi)再乘(cheng)以(yi)相(xiang)應(ying)的(de)稀釋倍(bei)數(shu)。

          3.         若所(suo)檢(jian)樣本(ben)不(bu)包(bao)含在(zai)說(shuo)明(ming)書所(suo)列(lie)樣(yang)本(ben)之(zhi)中,建(jian)議(yi)進行(xing)預實(shi)驗驗證(zheng)其(qi)有效(xiao)性,並(bing)註意留存(cun)樣本(ben)。

          4.         使(shi)用化學(xue)裂解(jie)液制備的組織(zhi)勻漿(jiang)或細胞提(ti)取(qu)液可(ke)能會(hui)由(you)於某(mou)些化學(xue)物質(zhi)的引入(ru)導致(zhi)  ELISA實驗結(jie)果偏差。

          5.         若樣本(ben)為(wei)細(xi)胞培養上清(qing),因該(gai)類(lei)樣(yang)本(ben)幹(gan)擾因素(su) 較(jiao)多(duo),如:細(xi)胞狀態、細(xi)胞數量(liang)、采樣時(shi)間等(deng),所(suo)以可(ke)能存(cun)在(zai)檢(jian)測(ce)不出(chu)的(de)情(qing)況。

          6.         某(mou)些天然(ran)蛋(dan)白或重(zhong)組蛋(dan)白,包(bao)括原(yuan)核(he)及(ji)真(zhen)核(he)重(zhong)組蛋(dan)白,可(ke)能因(yin)為(wei)與(yu)本(ben)產(chan)品(pin)所(suo)使用的(de)檢(jian)測(ce)抗體及(ji)捕(bu)獲(huo)抗體不(bu)匹配(pei),而(er)不被(bei)檢(jian)測(ce)出。

          7.         建(jian)議(yi)使用新(xin)鮮樣(yang)本(ben),保(bao)存(cun)時(shi)間過(guo)長(chang)可(ke)能會(hui)存(cun)在(zai)蛋(dan)白降解或(huo)變性導(dao)致(zhi)實驗結(jie)果偏差。

          猴(hou)轉化生(sheng)長因(yin)子α(TGFα)ELISA試劑(ji)盒操(cao)作步(bu)驟(zhou)

          1.         加(jia)樣:分別設空白孔(空白對照孔(kong)不(bu)加(jia)樣品(pin)及(ji)酶(mei)標試(shi)劑(ji),其余各(ge)步(bu)操作(zuo)相(xiang)同)、標(biao)準孔(kong)、待測(ce)樣品(pin)孔(kong)。在(zai)酶(mei)標包(bao)被(bei)板(ban)上標(biao)準品(pin)準確加(jia)樣50μl,待(dai)測(ce)樣品(pin)孔(kong)中先(xian)加(jia)樣品(pin)稀釋液40μl,然後再加(jia)待測(ce)樣品(pin)10μl(樣(yang)品(pin)*終稀(xi)釋度(du)為(wei)5倍(bei))。加(jia)樣將樣(yang)品(pin)加(jia)於酶(mei)標板(ban)孔底(di)部,盡(jin)量不(bu)觸及(ji)孔(kong)壁,輕輕晃(huang)動混(hun)勻(yun)。

          2.         溫(wen)育:用封(feng)板(ban)膜封(feng)板(ban)後置37℃溫(wen)育30分鐘。  

          3.         配(pei)液:將20倍(bei)濃(nong)縮洗滌液用蒸(zheng)餾(liu)水20倍(bei)稀(xi)釋後備用

          4.         洗(xi)滌:小(xiao)心揭掉(diao)封(feng)板(ban)膜,棄去(qu)液體,甩幹,每(mei)孔(kong)加(jia)滿洗(xi)滌液,靜置30秒(miao)後棄去(qu),如(ru)此(ci)重(zhong)復5次(ci),拍幹(gan)。

          5.         加(jia)酶(mei):每(mei)孔(kong)加(jia)入(ru)酶(mei)標試(shi)劑(ji)50μl,空白孔除外。

          6.         溫(wen)育:操(cao)作(zuo)同(tong)3

          7.         洗(xi)滌:操(cao)作同5

          8.         顯(xian)色:每(mei)孔(kong)先加(jia)入(ru)顯色(se)劑(ji)A50μl,再加(jia)入(ru)顯色(se)劑(ji)B50μl,輕輕震(zhen)蕩混(hun)勻,37℃避光顯色15分鐘.

          9.         終止(zhi):每(mei)孔(kong)加(jia)終止(zhi)液50μl,終止(zhi)反(fan)應(ying)(此(ci)時(shi)藍(lan)色立轉黃色(se))。

          10.     測(ce)定:以(yi)空(kong)白空調零,450nm波長(chang)依序(xu)測(ce)量各(ge)孔(kong)的吸(xi)光度(du)(OD值(zhi))。 測(ce)定應(ying)在(zai)加(jia)終止(zhi)液後15分鐘以內進行(xing)。

          註(zhu)意:

          1.         試(shi)劑(ji)準備(bei)準(zhun)備壹(yi)次實驗所(suo)需要的(de)酶(mei)標條(tiao),其它(ta)的(de)可(ke)從微(wei)孔板(ban)上拆(chai)下,密(mi)封(feng),按照(zhao)說(shuo)明(ming)書要求(qiu)保(bao)存(cun),以備(bei)下次使用。

          2.         加(jia)樣實(shi)驗操(cao)作(zuo)中請(qing)使(shi)用壹(yi)次(ci)性的(de)吸(xi)頭,避免交叉(cha)汙染(ran)。加(jia)樣時(shi)註意不要(yao)有氣泡,將樣(yang)品(pin)加(jia)於酶(mei)標板(ban)底(di)部,盡(jin)量不(bu)觸及(ji)孔(kong)壁,輕輕晃(huang)動混(hun)勻(yun)。加(jia)樣或(huo)加(jia)試劑(ji)時(shi),**個孔(kong)與(yu)*後壹個(ge)孔加(jia)樣之(zhi)間的(de)時(shi)間間(jian)隔如(ru)果太大,將會(hui)導(dao)致(zhi)不同的“預溫(wen)育”時(shi)間,從(cong)而(er)明(ming)顯地影響(xiang)到(dao)測(ce)量值(zhi)的(de)準(zhun)確性及(ji)重(zhong)復性。因(yin)此(ci),壹次加(jia)樣時(shi)間(包(bao)括標(biao)準品及(ji)所(suo)有樣品)*好(hao)控制(zhi)在(zai)10分鐘內。推(tui)薦設置復孔(kong)進行(xing)實驗。

          3.          溫(wen)育為(wei)防(fang)止(zhi)樣(yang)品(pin)蒸(zheng)發(fa),實驗時(shi)請將加(jia)上蓋或覆膜的(de)酶(mei)標板(ban)置於(yu)濕盒(he)內(nei),以(yi)避(bi)免液體蒸(zheng)發(fa),洗板(ban)後應(ying)盡(jin)快(kuai)進行(xing)下步(bu)操作(zuo),任(ren)何時(shi)侯(hou)都應(ying)避(bi)免酶(mei)標板(ban)處於幹(gan)燥(zao)狀態,同(tong)時(shi)應(ying)嚴格遵守給(gei)定(ding)的(de)溫育時(shi)間和(he)溫度(du)。

          4.         洗(xi)滌:充分的洗滌非(fei)常(chang)重(zhong)要,在(zai)每(mei)次(ci)洗滌過(guo)程(cheng)中,都要將洗(xi)滌(di)液完全甩幹(gan)。洗(xi)滌(di)過(guo)程(cheng)中反(fan)應(ying)孔(kong)中殘(can)留(liu)的(de)洗滌液應(ying)在(zai)濾紙(zhi)上拍(pai)幹,勿(wu)將濾紙(zhi)直接放入(ru)反(fan)應(ying)孔(kong)中吸(xi)水,同時(shi)要消(xiao)除板(ban)底(di)殘(can)留的液體和手指(zhi)印(yin),避免影響(xiang)*後的酶(mei)標儀(yi)讀數。如果有自動洗(xi)板(ban)機,應(ying)在(zai)熟(shu)練使用後再用到(dao)正式實 驗過(guo)程(cheng)中。

          5.         反(fan)應(ying)時(shi)間的(de)控制(zhi)加(jia)入(ru)底(di)物(wu)後請定(ding)時(shi)觀察(cha)反(fan)應(ying)孔(kong)的顏色變化(比如(ru),每(mei)隔10分鐘觀察(cha)壹(yi)次(ci)),如(ru)顏色較(jiao)深(shen),請(qing)提(ti)前(qian)加(jia)入(ru)終止(zhi)液終止(zhi)反(fan)應(ying),避(bi)免反(fan)應(ying)過(guo)強(qiang)從而(er)影響(xiang)酶(mei)標儀(yi)光密(mi)度(du)讀數。

          6.         底(di)物(wu)底(di)物(wu)請避光保(bao)存(cun),在(zai)儲存(cun)和溫(wen)育時(shi)避免強光直接照射。

          7.         如(ru)果實驗室內(nei)濕度(du)低於(yu)60%,推(tui)薦使用加(jia)濕器(qi)提(ti)高(gao)濕度(du)水平。

           實(shi)驗流(liu)程

          1.         實(shi)驗前(qian)標準(zhun)品、試劑(ji)及(ji)樣(yang)本(ben)的(de)準備;

          2.         加(jia)樣(標(biao)準品(pin)及(ji)樣(yang)本(ben))50μL37孵(fu)育30分鐘;

          3.         洗(xi)板(ban)5次,加(jia)酶(mei)標試(shi)劑(ji)50ul37孵(fu)育半(ban)小(xiao)時(shi);

          4.         洗(xi)板(ban)5次;加(jia)入(ru)顯色(se)液AB各(ge)50ul,37孵(fu)育顯(xian)色(se)15分鐘

          5.         加(jia)終止(zhi)液50μL,立即(ji)450nm讀數。

          6.    計(ji)算

          猴(hou)轉化生(sheng)長因(yin)子α(TGFα)ELISA試劑(ji)盒計(ji)算

          各(ge)標(biao)準品及(ji)樣(yang)本(ben)O.D.值(zhi)扣(kou)除空(kong)白孔O.D.值後作圖(tu)(七點(dian)圖),如(ru)設置復孔(kong),則應(ying)取(qu)其(qi)平均(jun)值(zhi)計算(suan)。以標準品的(de)濃(nong)度(du)為(wei)縱(zong)坐(zuo)標(或對數坐(zuo)標)O.D.值為(wei)橫(heng)坐(zuo)標(或對數坐(zuo)標),繪出標準曲線(xian)(*佳(jia)方程式應(ying)依(yi)回歸方程計算的(de)R2值(zhi)來(lai)定,以(yi)R2值越(yue)趨(qu)近(jin)於1為(wei)好(hao))。推(tui)薦使用專業制(zhi)作曲(qu)線(xian)軟(ruan)件(jian)進行(xing)分析,如curve expert 1.30,根據(ju)樣品(pin)O.D.值,由(you)標準曲(qu)線(xian)查(zha)出相(xiang)應(ying)的(de)濃(nong)度(du),乘(cheng)以(yi)稀釋倍(bei)數(shu);或用標(biao)準(zhun)物的濃(nong)度(du)與(yu)O.D.值計(ji)算出標準曲線(xian)的(de)回(hui)歸方程式,將樣(yang)品(pin)的(de)O.D.值(zhi)代(dai)入(ru)方程式,計算(suan)出(chu)樣(yang)品濃(nong)度(du),再(zai)乘(cheng)以(yi)稀釋倍(bei)數(shu),即(ji)為(wei)樣(yang)品的實(shi)際(ji)濃(nong)度(du)。

           特異性

          本(ben)試(shi)劑(ji)盒用於(yu)檢(jian)測(ce)猴(hou)轉化生(sheng)長因(yin)子α(TGFα),經檢(jian)測(ce)與(yu)其它(ta)相(xiang)似物(wu)質(zhi)無明(ming)顯交叉反(fan)應(ying)。

          由(you)於受到(dao)技(ji)術(shu)及(ji)樣(yang)本(ben)來(lai)源(yuan)的限制,不(bu)可(ke)能完(wan)成對所(suo)有相(xiang)關或(huo)相(xiang)似物(wu)質(zhi)交叉(cha)反(fan)應(ying)檢(jian)測(ce),因此(ci)本(ben)試(shi)劑(ji)盒有可(ke)能與(yu)未經(jing)檢(jian)測(ce)的其(qi)它(ta)物(wu)質(zhi)有交叉反(fan)應(ying)。

           精(jing)密(mi)度(du)

          精(jing)密(mi)度(du)用樣(yang)品(pin)測(ce)定值(zhi)的(de)變異系數CV表(biao)示。CV(%) = SD/mean×100

          批(pi)內差:取(qu)同(tong)批(pi)次試(shi)劑(ji)盒對低、中、高(gao)值(zhi)定(ding)值樣本(ben)進行(xing)定量(liang)檢(jian)測(ce),每(mei)份(fen)樣本(ben)連(lian)續測(ce)定20 次(ci),分別計算不(bu)同(tong)濃(nong)度(du)樣(yang)本(ben)的(de)平均(jun)值(zhi)及(ji)SD值(zhi)。

          批(pi)間差:選取(qu)3個(ge)不(bu)同批(pi)次的(de)試(shi)劑(ji)盒分別對低、中、高(gao)值(zhi)定(ding)值樣本(ben)進行(xing)定量(liang)測(ce)定,每(mei)個(ge)樣本(ben)使(shi)用同(tong)壹(yi)試劑(ji)盒重(zhong)復測(ce)定8次(ci),分別計算不(bu)同(tong)濃(nong)度(du)樣(yang)本(ben)的(de)平均(jun)值(zhi)及(ji)SD值(zhi)。

          批(pi)內差: CV<10%

          批(pi)間差: CV<12%

          猴(hou)轉化生(sheng)長因(yin)子α(TGFα)ELISA試劑(ji)盒穩定(ding)性

          經(jing)測(ce)定,試(shi)劑(ji)盒在(zai)有效(xiao)期內按(an)推(tui)薦溫度(du)保(bao)存(cun),其活(huo)性降低率(lv)小(xiao)於5%

          為(wei)減(jian)小(xiao)外部因素(su)對試劑(ji)盒破壞前(qian)後檢(jian)測(ce)值的(de)影(ying)響(xiang),實驗室的(de)環(huan)境(jing)條(tiao)件需盡(jin)量保(bao)持(chi)壹致(zhi),尤其是(shi)實(shi)驗室內(nei)溫(wen)度(du)、濕度(du)及(ji)溫(wen)育條(tiao)件。其(qi)次由(you)同壹實(shi)驗員(yuan)來(lai)進行(xing)操作(zuo)可(ke)減(jian)少(shao)人為(wei)誤差。


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