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      <dd id="Ht0T0p"></dd>

      <small id="Ht0T0p"><tt id="Ht0T0p"></tt></small>

      1. <dl id="Ht0T0p"></dl>

        1. 產(chan)品(pin)詳(xiang)情(qing)
          • 產(chan)品(pin)名稱(cheng):雞(ji)CD30配(pei)體(ti)(CD30L)ELISA試(shi)劑(ji)盒

          • 產(chan)品(pin)型號(hao):CD30L
          • 產(chan)品(pin)廠商(shang):KALANG
          • 產(chan)品(pin)文(wen)檔(dang):
          妳添(tian)加了(le)1件(jian)商(shang)品(pin) 查看(kan)購(gou)物(wu)車(che)
          簡(jian)單介紹(shao):
          雞(ji)CD30配(pei)體(ti)(CD30L)ELISA試(shi)劑(ji)盒運(yun)用(yong)雙抗(kang)體(ti)夾(jia)心ELISA法(fa)定(ding)量(liang)測定(ding)雞(ji)血(xue)清(qing)、血(xue)漿(jiang)、組(zu)織(zhi)勻(yun)漿(jiang)、細胞裂解液(ye)、細胞培養(yang)上(shang)清(qing)液(ye)和(he)其他生(sheng)物(wu)液(ye)體(ti)中(zhong)雞(ji)CD30配(pei)體(ti)(CD30L)ELISA試(shi)劑(ji)盒含(han)量(liang)。
          詳(xiang)情(qing)介紹(shao):


                                                                 96T       僅(jin)供(gong)體(ti)外(wai)研究使(shi)用(yong),不(bu)用(yong)於臨(lin)床診斷(duan)!

          雞(ji)CD30配(pei)體(ti)(CD30L)ELISA試(shi)劑(ji)盒

          本試(shi)劑(ji)盒運(yun)用(yong)雙抗(kang)體(ti)夾(jia)心ELISA法(fa)定(ding)量(liang)測定(ding)雞(ji)血(xue)清(qing)、血(xue)漿(jiang)、組(zu)織(zhi)勻(yun)漿(jiang)、細胞裂解液(ye)、細胞培養(yang)上(shang)清(qing)液(ye)和(he)其他生(sheng)物(wu)液(ye)體(ti)中(zhong)雞(ji)CD30配(pei)體(ti)(CD30L)含(han)量(liang)。

           檢(jian)測範圍(wei)

          0.156-10 ng/m

           *低(di)檢(jian)測限

          0.034 ng/m

           實驗原理(li)

          將(jiang)雞(ji)CD30配(pei)體(ti)(CD30L)抗(kang)體(ti)包(bao)被於96孔(kong)微孔板(ban)中(zhong),制(zhi)成固相載體(ti),向(xiang)微孔中(zhong)分別加入標(biao)準品(pin)或標本,其中(zhong)的雞(ji)CD30配(pei)體(ti)(CD30L)與連接(jie)於(yu)固相載體(ti)上(shang)的抗體(ti)結合(he),然後(hou)加入生(sheng)物(wu)素(su)化的雞(ji)CD30配(pei)體(ti)(CD30L)抗(kang)體(ti),將(jiang)未(wei)結合(he)的生物(wu)素(su)化抗(kang)體(ti)洗凈(jing)後(hou),加入HRP標(biao)記(ji)的親和(he)素(su),再次(ci)徹底(di)洗滌後(hou)加入TMB底(di)物(wu)顯(xian)色。TMB在(zai)過(guo)氧化(hua)物(wu)酶(mei)的催(cui)化(hua)下轉化(hua)成藍(lan)色(se),並在(zai)酸(suan)的作用(yong)下轉化(hua)成*終(zhong)的黃色(se)。顏(yan)色的深(shen)淺和(he)樣品(pin)中(zhong)的雞(ji)CD30配(pei)體(ti)(CD30L)呈(cheng)正相關。用(yong)酶(mei)標(biao)儀(yi)在(zai)450nm波(bo)長下測定(ding)吸(xi)光(guang)度(O.D.值(zhi)),計算(suan)樣(yang)品(pin)濃(nong)度。

           試(shi)劑(ji)盒內(nei)容(rong)

          試(shi)劑(ji)名稱(cheng)

          數(shu)量(liang)

          試(shi)劑(ji)名稱(cheng)

          數(shu)量(liang)

          96孔(kong)板(ban)(預包(bao)被)

          1

          96孔(kong)板(ban)覆(fu)膜(mo)

          2

          標(biao)準品(pin)

          0.5ml×1

          標(biao)準品(pin)稀釋液(ye)

          1.5ml×1瓶(ping)

          顯(xian)色劑(ji)A液(ye)

          6ml×1瓶(ping)

          樣(yang)品(pin)稀釋液(ye)

          6ml×1瓶(ping)

          顯(xian)色劑(ji)B液(ye)

          6ml×1瓶(ping)

          終(zhong)止液(ye)

          6ml×1瓶(ping)

          酶(mei)標(biao)試(shi)劑(ji)

          6ml×1瓶(ping)

          密(mi)封(feng)袋(dai)

          1

          濃(nong)洗滌液(ye)(30×)

          1×20mL

          使(shi)用(yong)說明書

          1

          雞(ji)CD30配(pei)體(ti)(CD30L)ELISA試(shi)劑(ji)盒需自(zi)備(bei)的設(she)備及(ji)試(shi)劑(ji)

          1.         450±10nm濾(lv)光片的酶(mei)標(biao)儀(yi)(建議(yi)儀(yi)器(qi)使用(yong)前提(ti)前預熱)

          2.         單(dan)道(dao)或多道(dao)微量(liang)加液(ye)器及吸(xi)頭(tou)

          3.         稀釋樣品(pin)的EP

          4.         蒸(zheng)餾水(shui)或去離(li)子(zi)水

          5.         吸(xi)水(shui)紙

          6.         盛(sheng)放洗液(ye)的容(rong)器(qi)

           試(shi)劑(ji)盒的儲存(cun)及(ji)有效期(qi)

          1.         未(wei)開(kai)封(feng)的試(shi)劑(ji)盒:所有試(shi)劑(ji)均按試(shi)劑(ji)瓶(ping)標簽上所示(shi)保存(cun)。請(qing)註(zhu)意,收到(dao)試(shi)劑(ji)盒後(hou)請盡(jin)快(kuai)將(jiang)TMB 洗滌液(ye),終(zhong)止液(ye)保存於4℃,其他試(shi)劑(ji)保(bao)存於-20℃。

          2.         使(shi)用(yong)後(hou)的試(shi)劑(ji)盒:剩余試(shi)劑(ji)仍(reng)需按(an)照(zhao)試(shi)劑(ji)瓶(ping)標簽所示(shi)的溫度保(bao)存,開(kai)封(feng)後(hou)的酶(mei)標(biao)板(ban)要加(jia)幹燥(zao)劑(ji)後(hou)密(mi)封(feng)保(bao)存於(yu)-20℃,避免潮濕。

          註(zhu)意:

          試(shi)劑(ji)盒內(nei)酶(mei)標(biao)條(tiao)可(ke)拆(chai)卸,按實驗需求可分多次使用(yong);使用(yong)後(hou)的剩余試(shi)劑(ji)盒建議(yi)在(zai)**實驗後(hou) 1個月(yue)內(nei)使(shi)用(yong)完畢。產(chan)品(pin)過(guo)期時(shi)間(jian)以盒子(zi)上(shang)的標簽(qian)為準,保質(zhi)期內(nei)所有組(zu)分都確(que)保(bao)是(shi)穩定的。

          雞(ji)CD30配(pei)體(ti)(CD30L)ELISA試(shi)劑(ji)盒標(biao)本的采(cai)集(ji)與保存(cun)

          1.         血(xue)清(qing)

          將(jiang)收集(ji)於血(xue)清(qing)分離(li)管的全(quan)血(xue)標(biao)本在(zai)室(shi)溫放置 2 小時(shi)或(huo) 4oC 過(guo)夜,然(ran)後(hou) 1000×g 離(li)心 20 分鐘,取上清(qing)即可(ke),或將(jiang)上(shang)清(qing)置於(yu)-20oC 或(huo)-80oC 保存,但應(ying)避免反復(fu)凍融(rong)。

          2.         血(xue)漿(jiang):

          用(yong) EDTA 或肝(gan)素(su)作為抗(kang)凝(ning)劑(ji)采(cai)集(ji)標(biao)本,並將(jiang)標(biao)本在(zai)采(cai)集(ji)後(hou)的 30 分鐘內於(yu) 2-8oC 1000×g 離(li)心 15 分鐘,取上清(qing)即可(ke)檢(jian)測,或將(jiang)上(shang)清(qing)置於(yu)-20oC 或(huo)-80oC 保存,但應(ying)避免反復(fu)凍融(rong)。

          3. 組(zu)織(zhi)勻(yun)漿(jiang):

          1) 取適量(liang)組織(zhi)塊(kuai),於預冷(leng)PBS0.01mol/L, pH 7.0-7.2)中(zhong)清(qing)洗去除(chu)血(xue)液(ye),稱(cheng)重後(hou)備用(yong)(組織(zhi)塊(kuai)較大需先(xian)剪(jian)碎(sui)後(hou)再勻(yun)漿(jiang));

          2) 可(ke)同時(shi)選用(yong)多種勻(yun)漿(jiang)方(fang)法(fa)達(da)到(dao)較(jiao)好(hao)的破(po)碎(sui)效果(guo):首(shou)先(xian)將(jiang)組(zu)織(zhi)塊(kuai)移入玻(bo)璃(li)勻(yun)漿(jiang)器(qi),加(jia)入5-10mL 預冷(leng)PBS 進(jin)行(xing)充(chong)分研磨,該(gai)過(guo)程需在(zai)冰(bing)上進(jin)行(xing)(有條(tiao)件(jian)實驗室(shi)可(ke)選用(yong)機器(qi)勻(yun)漿(jiang));得(de)到(dao)的勻(yun)漿(jiang)液(ye)可再利用(yong)超聲破(po)碎(sui)或反復(fu)凍融(rong) 進(jin)壹步處理(li)(超聲破(po)碎(sui)過(guo)程中(zhong)註意(yi)冰浴(yu)降(jiang)溫;反復(fu)凍融(rong)法(fa)可(ke)重復2 次)。

          3) 將(jiang)制(zhi)備好(hao)的勻(yun)漿(jiang)液(ye)於5000×g 離(li)心5 分鐘,留(liu)取上清(qing)即可(ke)檢(jian)測。

          4. 細胞裂解液(ye):

          1)貼壁細胞需要先(xian)用(yong)胰酶(mei)消化,離(li)心收集(ji)細胞(懸浮細胞可直接離(li)心收集(ji));

          2)將(jiang)收集(ji)到(dao)的細胞用(yong)冷(leng)PBS 3 次;

          3)物(wu)理(li)方(fang)法(fa)裂(lie)解細胞(可先(xian)超聲破(po)碎(sui)細胞,再反復(fu)凍融(rong)):

          i 超聲破(po)碎(sui):取適量(liang)PBS 重懸(xuan)細胞,用(yong)壹定(ding)功(gong)率的超聲波處(chu)理(li)細胞懸液(ye),使細胞急劇震蕩(dang)破(po)裂(lie)。

          ii 反復(fu)凍融(rong):將(jiang)待(dai)破(po)碎(sui)的細胞在(zai)-20 oC 以(yi)下冰凍,室溫(wen)融(rong)解,反復(fu)3 次(ci),使細胞溶脹(zhang)破(po)碎(sui)。

          4)將(jiang)標(biao)本於(yu)2-8 oC 1500×g 離(li)心10 分鐘,收集(ji)上清(qing)備用(yong)。

          5. 細胞培養(yang)上(shang)清(qing)或其它生(sheng)物(wu)標(biao)本:

          請(qing) 1000×g 離(li)心 20 分鐘,取上清(qing)即可(ke)檢(jian)測,或將(jiang)上(shang)清(qing)置於(yu)-20oC 或(huo)-80oC 保存,但應(ying)避免反復(fu)凍融(rong)。

          註(zhu)意:

          1.         以(yi)上標本均需密(mi)封(feng)保(bao)存4oC保(bao)存應小於(yu)1周,-20oC不(bu)應(ying)超過(guo)1個月(yue),-80oC不(bu)應(ying)超過(guo)2個月(yue)。

          2.         標(biao)本使(shi)用(yong)前應緩(huan)慢均衡至室(shi)溫(wen),不(bu)應(ying)加(jia)熱使之融(rong)解。

          3.         實驗前紅(hong)細胞裂解液(ye)必(bi)須(xu)用(yong)標準品(pin)稀釋液(ye)稀釋。

          雞(ji)CD30配(pei)體(ti)(CD30L)ELISA試(shi)劑(ji)盒試(shi)劑(ji)準備

          1.         使(shi)用(yong)前將(jiang)所有的試(shi)劑(ji)和(he)標本緩(huan)慢均衡至室(shi)溫(wen)(18-25oC),試(shi)劑(ji)不(bu)能(neng)直接在(zai)37oC溶解。

          2.         標(biao)準品(pin)(凍幹品(pin)):每瓶(ping)標準品(pin)加入標(biao)準品(pin)稀釋液(ye)1mL,蓋好後(hou)室溫(wen)靜置大約10分鐘,同時(shi)反復(fu)顛(dian)倒(dao)/搓(cuo)動(dong)以助(zhu)溶解,其濃(nong)度為10ng/mL。準備7個(ge)稀釋標準品(pin)的EP管,每個EP管中(zhong)加入150μL的標準品(pin)稀釋液(ye),如(ru)圖(tu)所示(shi)依(yi)次(ci)倍比稀釋成不(bu)同的梯度, 標(biao)準品(pin)稀釋液(ye)(0pg/mL)直接作為空(kong)白孔。為保(bao)證(zheng)實驗結果有效性(xing),每次實驗請(qing)使(shi)用(yong)新的標準品(pin)溶液(ye)。

           

           

           

          3.         濃(nong)洗滌液(ye):用(yong)580mL蒸(zheng)餾水(shui)或去離(li)子(zi)水將(jiang)20mL濃(nong)洗滌液(ye)稀釋至600mL,進(jin)行(xing)30倍(bei)稀釋。

          標(biao)本處(chu)理(li)

          1.         本公(gong)司(si)只(zhi)對試(shi)劑(ji)盒本身(shen)負(fu)責(ze),不(bu)對因(yin)使(shi)用(yong)該(gai)試(shi)劑(ji)盒所造成的樣本消耗(hao)負(fu)責(ze),請(qing)使用(yong)者使(shi)用(yong)前充分考慮(lv)到(dao)樣(yang)本的可能(neng)使(shi)用(yong)量(liang),預留(liu)充(chong)足的樣本。

          2.         實驗前應預測標(biao)本含(han)量(liang),如(ru)果(guo)標(biao)本濃(nong)度過(guo)高,應(ying)對標本進(jin)行(xing)稀釋,使稀釋後(hou)的標本符合(he)試(shi)劑(ji)盒的檢(jian)測範圍(wei),計算(suan)時(shi)再(zai)乘以相應的稀釋倍數(shu)。

          3.         若(ruo)所檢(jian)樣本不(bu)包(bao)含(han)在(zai)說明書所列樣本之(zhi)中(zhong),建議(yi)進(jin)行(xing)預實驗驗證(zheng)其有效性(xing),並註(zhu)意留(liu)存(cun)樣(yang)本。

          4.         使(shi)用(yong)化學(xue)裂解(jie)液(ye)制(zhi)備的組織(zhi)勻(yun)漿(jiang)或(huo)細胞提(ti)取液(ye)可能會由(you)於某些化(hua)學(xue)物(wu)質(zhi)的引入導(dao)致  ELISA實驗結果偏差(cha)。

          5.         若(ruo)樣本為細胞培養(yang)上(shang)清(qing),因(yin)該(gai)類(lei)樣本幹(gan)擾(rao)因(yin)素(su) 較多,如(ru):細胞狀(zhuang)態、細胞數(shu)量(liang)、采(cai)樣(yang)時(shi)間(jian)等,所以可(ke)能(neng)存在(zai)檢(jian)測不(bu)出(chu)的情況(kuang)。

          6.         某(mou)些天(tian)然蛋(dan)白或重(zhong)組蛋(dan)白,包(bao)括(kuo)原核(he)及真(zhen)核(he)重組蛋白,可能(neng)因(yin)為與本產(chan)品(pin)所使用(yong)的檢(jian)測抗體(ti)及(ji)捕獲(huo)抗(kang)體(ti)不(bu)匹(pi)配(pei),而(er)不(bu)被檢(jian)測出。

          7.         建議(yi)使(shi)用(yong)新鮮樣本,保(bao)存(cun)時(shi)間(jian)過(guo)長可(ke)能(neng)會(hui)存在(zai)蛋(dan)白降(jiang)解或(huo)變性(xing)導致實驗結果偏差(cha)。

          雞(ji)CD30配(pei)體(ti)(CD30L)ELISA試(shi)劑(ji)盒操(cao)作步驟

          1.         加(jia)樣:分別設(she)空(kong)白孔(空(kong)白對照(zhao)孔不(bu)加(jia)樣(yang)品(pin)及酶(mei)標(biao)試(shi)劑(ji),其余各步操作相同)、標(biao)準孔、待(dai)測(ce)樣(yang)品(pin)孔。在(zai)酶(mei)標(biao)包(bao)被板(ban)上(shang)標(biao)準品(pin)準確加(jia)樣(yang)50μl,待(dai)測樣品(pin)孔中(zhong)先(xian)加樣(yang)品(pin)稀釋液(ye)40μl,然後(hou)再加(jia)待(dai)測(ce)樣品(pin)10μl(樣品(pin)*終(zhong)稀釋度為5倍(bei))。加(jia)樣(yang)將(jiang)樣(yang)品(pin)加於酶(mei)標(biao)板(ban)孔(kong)底(di)部(bu),盡(jin)量(liang)不(bu)觸(chu)及(ji)孔(kong)壁(bi),輕輕晃(huang)動(dong)混(hun)勻(yun)。

          2.         溫(wen)育:用(yong)封(feng)板(ban)膜(mo)封(feng)板(ban)後(hou)置37℃溫(wen)育(yu)30分鐘。  

          3.         配(pei)液(ye):將(jiang)20倍(bei)濃(nong)縮(suo)洗滌液(ye)用(yong)蒸餾水(shui)20倍稀釋後(hou)備用(yong)

          4.         洗滌:小心揭掉封(feng)板(ban)膜(mo),棄去液(ye)體(ti),甩(shuai)幹,每孔加(jia)滿(man)洗滌液(ye),靜置30秒(miao)後(hou)棄去,如(ru)此重(zhong)復(fu)5次(ci),拍幹。

          5.         加(jia)酶(mei):每(mei)孔(kong)加(jia)入酶(mei)標(biao)試(shi)劑(ji)50μl,空(kong)白孔除(chu)外(wai)。

          6.         溫(wen)育:操作同3

          7.         洗滌:操(cao)作同5

          8.         顯(xian)色:每(mei)孔先(xian)加入顯(xian)色劑(ji)A50μl,再加入顯(xian)色劑(ji)B50μl,輕輕震蕩(dang)混(hun)勻(yun),37℃避光(guang)顯(xian)色15分鐘.

          9.         終(zhong)止:每(mei)孔加(jia)終(zhong)止液(ye)50μl,終(zhong)止反應(ying)(此時(shi)藍(lan)色(se)立轉黃色(se))。

          10.     測(ce)定:以空(kong)白空(kong)調零(ling),450nm波長依(yi)序(xu)測量(liang)各孔的吸(xi)光(guang)度(OD值(zhi))。 測定應在(zai)加(jia)終(zhong)止液(ye)後(hou)15分鐘以內(nei)進(jin)行(xing)。

          註(zhu)意:

          1.         試(shi)劑(ji)準備準備壹(yi)次(ci)實驗所需要的酶(mei)標(biao)條(tiao),其它的可從(cong)微孔板(ban)上(shang)拆(chai)下,密(mi)封(feng),按(an)照(zhao)說明書要求保存,以(yi)備(bei)下次使(shi)用(yong)。

          2.         加(jia)樣實驗操(cao)作中(zhong)請使(shi)用(yong)壹次(ci)性(xing)的吸(xi)頭(tou),避免交(jiao)叉汙染(ran)。加樣(yang)時(shi)註(zhu)意不(bu)要有氣(qi)泡(pao),將(jiang)樣(yang)品(pin)加於酶(mei)標(biao)板(ban)底(di)部(bu),盡(jin)量(liang)不(bu)觸(chu)及(ji)孔(kong)壁(bi),輕輕晃(huang)動(dong)混(hun)勻(yun)。加樣(yang)或(huo)加(jia)試(shi)劑(ji)時(shi),**個(ge)孔與*後(hou)壹個(ge)孔(kong)加(jia)樣之間(jian)的時(shi)間(jian)間隔如(ru)果(guo)太(tai)大,將(jiang)會(hui)導(dao)致不(bu)同的“預溫育(yu)”時(shi)間(jian),從而明顯(xian)地影(ying)響到(dao)測(ce)量(liang)值(zhi)的準確性(xing)及重復(fu)性(xing)。因(yin)此,壹(yi)次(ci)加(jia)樣時(shi)間(jian)(包(bao)括(kuo)標準品(pin)及所有樣(yang)品(pin))*好控制(zhi)在(zai)10分鐘內。推(tui)薦(jian)設(she)置復(fu)孔(kong)進(jin)行(xing)實驗。

          3.          溫(wen)育為防(fang)止(zhi)樣(yang)品(pin)蒸發,實驗時(shi)請(qing)將(jiang)加(jia)上(shang)蓋(gai)或(huo)覆(fu)膜(mo)的酶(mei)標(biao)板(ban)置於(yu)濕盒內(nei),以(yi)避(bi)免液(ye)體(ti)蒸(zheng)發,洗板(ban)後(hou)應盡(jin)快(kuai)進(jin)行(xing)下步操作,任何(he)時(shi)侯都應(ying)避(bi)免酶(mei)標(biao)板(ban)處(chu)於(yu)幹燥(zao)狀(zhuang)態,同時(shi)應(ying)嚴格遵(zun)守(shou)給定(ding)的溫育(yu)時(shi)間(jian)和(he)溫度。

          4.         洗滌:充(chong)分的洗滌非常(chang)重(zhong)要,在(zai)每(mei)次洗滌過(guo)程中(zhong),都要將(jiang)洗滌液(ye)完全(quan)甩(shuai)幹(gan)。洗滌過(guo)程中(zhong)反應(ying)孔(kong)中(zhong)殘留(liu)的洗滌液(ye)應在(zai)濾(lv)紙上(shang)拍幹,勿(wu)將(jiang)濾(lv)紙直接放入反應(ying)孔(kong)中(zhong)吸(xi)水(shui),同時(shi)要消除(chu)板(ban)底(di)殘留(liu)的液(ye)體(ti)和(he)手(shou)指(zhi)印(yin),避免影響*後(hou)的酶(mei)標(biao)儀(yi)讀(du)數(shu)。如(ru)果(guo)有自(zi)動(dong)洗板(ban)機(ji),應(ying)在(zai)熟練使用(yong)後(hou)再用(yong)到(dao)正(zheng)式(shi)實 驗過(guo)程中(zhong)。

          5.         反應(ying)時(shi)間(jian)的控制(zhi)加(jia)入底(di)物(wu)後(hou)請定(ding)時(shi)觀(guan)察反應(ying)孔(kong)的顏(yan)色變(bian)化(hua)(比如(ru),每(mei)隔(ge)10分鐘觀(guan)察壹(yi)次(ci)),如(ru)顏(yan)色較(jiao)深(shen),請提(ti)前加入終(zhong)止液(ye)終(zhong)止反應(ying),避(bi)免反應(ying)過(guo)強從而影(ying)響酶(mei)標(biao)儀(yi)光(guang)密(mi)度讀(du)數(shu)。

          6.         底(di)物(wu)底(di)物(wu)請(qing)避(bi)光(guang)保(bao)存,在(zai)儲(chu)存和(he)溫育(yu)時(shi)避(bi)免強光直接照(zhao)射(she)。

          7.         如(ru)果(guo)實驗室(shi)內(nei)濕度低(di)於60%,推(tui)薦(jian)使(shi)用(yong)加濕器提(ti)高濕度水(shui)平。

           實驗流程

          1.         實驗前標準品(pin)、試(shi)劑(ji)及(ji)樣本的準備;

          2.         加(jia)樣(標準品(pin)及樣本)50μL37孵(fu)育30分鐘;

          3.         洗板(ban)5次(ci),加(jia)酶(mei)標(biao)試(shi)劑(ji)50ul37孵(fu)育半小時(shi);

          4.         洗板(ban)5次(ci);加(jia)入顯(xian)色液(ye)AB50ul,37孵(fu)育顯(xian)色15分鐘

          5.         加(jia)終(zhong)止液(ye)50μL,立即450nm讀(du)數(shu)。

          6.    計(ji)算(suan)

          雞(ji)CD30配(pei)體(ti)(CD30L)ELISA試(shi)劑(ji)盒計(ji)算(suan)

          各標準品(pin)及樣本O.D.值(zhi)扣除(chu)空(kong)白孔O.D.值(zhi)後(hou)作圖(tu)(七(qi)點圖(tu)),如(ru)設(she)置復(fu)孔(kong),則應取其平均值(zhi)計算(suan)。以(yi)標準品(pin)的濃(nong)度為縱坐(zuo)標(或(huo)對數(shu)坐(zuo)標)O.D.值(zhi)為橫(heng)坐(zuo)標(或(huo)對數(shu)坐(zuo)標),繪(hui)出標準曲線(xian)(*佳(jia)方(fang)程式應(ying)依(yi)回歸(gui)方(fang)程計算(suan)的R2值(zhi)來定,以R2值(zhi)越趨(qu)近於(yu)1為好(hao))。推(tui)薦(jian)使(shi)用(yong)專業制(zhi)作曲(qu)線(xian)軟(ruan)件(jian)進(jin)行(xing)分析,如(ru)curve expert 1.30,根(gen)據樣品(pin)O.D.值(zhi),由(you)標準曲線(xian)查(zha)出(chu)相應的濃(nong)度,乘以稀釋倍數(shu);或用(yong)標準物(wu)的濃(nong)度與O.D.值(zhi)計算(suan)出(chu)標準曲線(xian)的回歸(gui)方(fang)程式,將(jiang)樣(yang)品(pin)的O.D.值(zhi)代入方(fang)程(cheng)式,計(ji)算(suan)出(chu)樣品(pin)濃(nong)度,再(zai)乘以稀釋倍數(shu),即為樣(yang)品(pin)的實際濃(nong)度。

           特(te)異性(xing)

          本試(shi)劑(ji)盒用(yong)於檢(jian)測雞(ji)CD30配(pei)體(ti)(CD30L),經(jing)檢(jian)測與其它相似物(wu)質(zhi)無明(ming)顯(xian)交(jiao)叉反應(ying)。

          由(you)於受到(dao)技術(shu)及樣(yang)本來(lai)源(yuan)的限制(zhi),不(bu)可(ke)能(neng)完成對所有相關或相似物(wu)質(zhi)交(jiao)叉反應(ying)檢(jian)測,因(yin)此本試(shi)劑(ji)盒有可(ke)能與未(wei)經(jing)檢(jian)測的其它物(wu)質(zhi)有交(jiao)叉反應(ying)。

           精密(mi)度

          精密(mi)度用(yong)樣品(pin)測定值(zhi)的變異系(xi)數(shu)CV表示(shi)。CV(%) = SD/mean×100

          批(pi)內差(cha):取同批(pi)次試(shi)劑(ji)盒對低、中(zhong)、高值(zhi)定值(zhi)樣本進(jin)行(xing)定(ding)量(liang)檢(jian)測,每份樣本連(lian)續測(ce)定(ding)20 次,分別計算(suan)不(bu)同濃(nong)度樣(yang)本的平均值(zhi)及SD值(zhi)。

          批(pi)間差(cha):選取3個不(bu)同批(pi)次的試(shi)劑(ji)盒分別對低、中(zhong)、高值(zhi)定值(zhi)樣本進(jin)行(xing)定(ding)量(liang)測定(ding),每個樣本使(shi)用(yong)同壹(yi)試(shi)劑(ji)盒重(zhong)復(fu)測(ce)定(ding)8次(ci),分別計算(suan)不(bu)同濃(nong)度樣(yang)本的平均值(zhi)及SD值(zhi)。

          批(pi)內差(cha): CV<10%

          批(pi)間差(cha): CV<12%

          雞(ji)CD30配(pei)體(ti)(CD30L)ELISA試(shi)劑(ji)盒穩(wen)定(ding)性(xing)

          經(jing)測定(ding),試(shi)劑(ji)盒在(zai)有效期(qi)內(nei)按推(tui)薦(jian)溫(wen)度保(bao)存,其活性(xing)降(jiang)低率(lv)小於(yu)5%

          為減(jian)小外(wai)部(bu)因(yin)素(su)對試(shi)劑(ji)盒破(po)壞(huai)前後(hou)檢(jian)測值(zhi)的影響,實驗室(shi)的環境(jing)條件(jian)需盡(jin)量(liang)保持(chi)壹致,尤(you)其是(shi)實驗室(shi)內(nei)溫度、濕度及(ji)溫育(yu)條(tiao)件(jian)。其次由(you)同壹(yi)實驗員來進(jin)行(xing)操(cao)作可(ke)減(jian)少人為誤(wu)差(cha)。


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