產(chan)品名(ming)稱(cheng)：雞白(bai)介(jie)素10(IL10)ELISA試劑盒(he)

                                                       96T       僅供體(ti)外(wai)研(yan)究使(shi)用，不(bu)用於臨(lin)床診斷!

雞白(bai)介(jie)素10(IL10)ELISA試劑盒(he)

本(ben)試(shi)劑盒(he)運用雙抗(kang)體(ti)夾(jia)心(xin)ELISA法定量(liang)測定雞血(xue)清、血(xue)漿、組織(zhi)勻(yun)漿、細(xi)胞(bao)裂解液(ye)、細(xi)胞(bao)培養(yang)上(shang)清(qing)液(ye)和(he)其(qi)他生物液(ye)體(ti)中(zhong)雞白(bai)介(jie)素10(IL10)含量(liang)。

 檢(jian)測範圍(wei)

7.813-500pg/mL

 *低檢(jian)測限(xian)

3.2pg/mL

 實(shi)驗(yan)原理

將(jiang)雞白(bai)介(jie)素10(IL10)抗(kang)體(ti)包被於96孔(kong)微(wei)孔(kong)板中(zhong)，制成固相載體(ti)，向(xiang)微(wei)孔(kong)中分(fen)別加入(ru)標準(zhun)品或(huo)標本，其(qi)中(zhong)的(de)雞白(bai)介(jie)素10(IL10)與(yu)連接於固(gu)相載體(ti)上(shang)的(de)抗(kang)體(ti)結(jie)合，然(ran)後加入(ru)生物素化的雞白(bai)介(jie)素10(IL10)抗(kang)體(ti)，將(jiang)未(wei)結合的(de)生物素化抗體(ti)洗(xi)凈(jing)後，加入(ru)HRP標記(ji)的親(qin)和(he)素，再次(ci)徹(che)底(di)洗(xi)滌(di)後加入(ru)TMB底(di)物顯色(se)。TMB在(zai)過(guo)氧化物酶(mei)的(de)催(cui)化下轉(zhuan)化(hua)成(cheng)藍(lan)色，並在(zai)酸(suan)的作(zuo)用(yong)下轉(zhuan)化(hua)成(cheng)*終(zhong)的(de)黃(huang)色(se)。顏(yan)色的(de)深淺(qian)和(he)樣(yang)品中(zhong)的(de)雞白(bai)介(jie)素10(IL10)呈(cheng)正(zheng)相關。用(yong)酶標儀在(zai)450nm波(bo)長(chang)下測定吸(xi)光度(du)(O.D.值(zhi))，計算樣(yang)品濃(nong)度(du)。

 試(shi)劑(ji)盒(he)內容

雞白(bai)介(jie)素10(IL10)ELISA試劑盒(he)需自備(bei)的(de)設(she)備及試(shi)劑(ji)

1.         450±10nm濾(lv)光(guang)片的(de)酶標儀(建議(yi)儀器使(shi)用前提(ti)前預(yu)熱(re))

2.         單道或(huo)多(duo)道(dao)微(wei)量(liang)加液(ye)器(qi)及吸(xi)頭

3.         稀(xi)釋(shi)樣(yang)品的(de)EP管(guan)

4.         蒸(zheng)餾(liu)水或(huo)去(qu)離(li)子(zi)水

5.         吸(xi)水紙

6.         盛(sheng)放洗液(ye)的(de)容器

 試(shi)劑(ji)盒(he)的儲存及有(you)效(xiao)期(qi)

1.         未(wei)開封(feng)的(de)試劑(ji)盒(he)：所有試(shi)劑(ji)均(jun)按(an)試劑(ji)瓶(ping)標簽上(shang)所(suo)示保存。請註(zhu)意(yi)，收(shou)到試(shi)劑(ji)盒(he)後請盡快將(jiang)TMB 洗(xi)滌(di)液(ye)，終(zhong)止液(ye)保(bao)存於4℃，其(qi)他試劑(ji)保存於-20℃。

2.         使(shi)用(yong)後的試劑盒(he)：剩余(yu)試(shi)劑仍需(xu)按(an)照試(shi)劑(ji)瓶標簽所(suo)示的溫度(du)保存，開封(feng)後的酶標板要加幹燥劑後密(mi)封保(bao)存於-20℃，避(bi)免潮濕。

註(zhu)意(yi)：

試(shi)劑(ji)盒(he)內酶標條可(ke)拆(chai)卸(xie)，按(an)實(shi)驗(yan)需(xu)求(qiu)可(ke)分(fen)多(duo)次(ci)使用；使(shi)用後的剩余(yu)試(shi)劑盒(he)建議在(zai)**實(shi)驗(yan)後 1個(ge)月(yue)內(nei)使用(yong)完(wan)畢(bi)。產(chan)品過(guo)期(qi)時(shi)間(jian)以(yi)盒(he)子上(shang)的(de)標簽為(wei)準(zhun)，保質(zhi)期內(nei)所有(you)組分都(dou)確保(bao)是穩(wen)定的。

雞白(bai)介(jie)素10(IL10)ELISA試劑盒(he)標本的(de)采集(ji)與保(bao)存

1.         血(xue)清(qing)：

將(jiang)收(shou)集(ji)於血(xue)清分離(li)管(guan)的(de)全(quan)血(xue)標本在(zai)室(shi)溫放置 2 小時(shi)或(huo) 4^oC 過(guo)夜(ye)，然後 1000×g 離(li)心(xin) 20 分鐘(zhong)，取(qu)上(shang)清(qing)即(ji)可(ke)，或(huo)將(jiang)上(shang)清(qing)置(zhi)於-20^oC 或(huo)-80^oC 保(bao)存，但應避(bi)免(mian)反復(fu)凍融(rong)。

2.         血(xue)漿：

用(yong) EDTA 或(huo)肝(gan)素作為抗凝劑(ji)采集(ji)標本，並將(jiang)標本在(zai)采集(ji)後的 30 分鐘內(nei)於 2-8^oC 1000×g 離(li)心(xin) 15 分鐘(zhong)，取(qu)上(shang)清(qing)即(ji)可(ke)檢(jian)測，或(huo)將(jiang)上(shang)清(qing)置(zhi)於-20^oC 或(huo)-80^oC 保(bao)存，但應避(bi)免(mian)反復(fu)凍融(rong)。

3. 組(zu)織(zhi)勻(yun)漿：

1） 取(qu)適量(liang)組織(zhi)塊(kuai)，於預(yu)冷PBS（0.01mol/L, pH 7.0-7.2）中清(qing)洗(xi)去除(chu)血液(ye)，稱(cheng)重(zhong)後備用（組織(zhi)塊(kuai)較(jiao)大(da)需(xu)先(xian)剪(jian)碎(sui)後再勻(yun)漿）；

2） 可(ke)同(tong)時(shi)選(xuan)用多(duo)種勻(yun)漿方法達(da)到較(jiao)好的(de)破碎(sui)效(xiao)果(guo)：首先(xian)將組(zu)織(zhi)塊(kuai)移入(ru)玻(bo)璃勻(yun)漿器，加入(ru)5-10mL 預(yu)冷PBS 進(jin)行(xing)充(chong)分(fen)研(yan)磨，該(gai)過程(cheng)需在(zai)冰(bing)上(shang)進(jin)行(xing)（有(you)條件(jian)實(shi)驗(yan)室(shi)可(ke)選(xuan)用機器(qi)勻(yun)漿）；得到的(de)勻(yun)漿液(ye)可(ke)再利(li)用(yong)超聲(sheng)破碎(sui)或(huo)反復(fu)凍融(rong) 進(jin)壹(yi)步處理(li)（超聲(sheng)破碎(sui)過程(cheng)中註(zhu)意(yi)冰(bing)浴(yu)降(jiang)溫；反復(fu)凍融(rong)法可(ke)重(zhong)復2 次）。

3） 將(jiang)制(zhi)備好的(de)勻(yun)漿液(ye)於5000×g 離(li)心(xin)5 分鐘(zhong)，留取(qu)上(shang)清(qing)即(ji)可(ke)檢(jian)測。

4. 細(xi)胞(bao)裂解液(ye)：

1）貼壁(bi)細(xi)胞(bao)需(xu)要先(xian)用胰(yi)酶消(xiao)化，離(li)心(xin)收(shou)集(ji)細(xi)胞(bao)（懸浮(fu)細(xi)胞(bao)可(ke)直(zhi)接(jie)離(li)心(xin)收(shou)集(ji)）；

2）將(jiang)收(shou)集(ji)到的(de)細(xi)胞(bao)用(yong)冷PBS 洗3 次(ci)；

3）物理(li)方(fang)法裂解細(xi)胞(bao)（可(ke)先(xian)超聲(sheng)破碎(sui)細(xi)胞(bao)，再反復(fu)凍融(rong)）：

i 超聲(sheng)破碎(sui)：取(qu)適量(liang)PBS 重懸細(xi)胞(bao)，用(yong)壹(yi)定功(gong)率(lv)的(de)超聲(sheng)波處理細(xi)胞(bao)懸液(ye)，使(shi)細(xi)胞(bao)急劇(ju)震蕩破裂。

ii 反復(fu)凍融(rong)：將待破碎(sui)的細(xi)胞(bao)在(zai)-20 ^oC 以(yi)下冰(bing)凍，室溫融(rong)解，反復(fu)3 次(ci)，使細(xi)胞(bao)溶(rong)脹(zhang)破碎(sui)。

4）將(jiang)標本於2-8 ^oC 1500×g 離(li)心(xin)10 分鐘(zhong)，收(shou)集(ji)上(shang)清(qing)備(bei)用(yong)。

5. 細(xi)胞(bao)培養(yang)上(shang)清(qing)或(huo)其(qi)它(ta)生(sheng)物標本：

請 1000×g 離(li)心(xin) 20 分鐘(zhong)，取(qu)上(shang)清(qing)即(ji)可(ke)檢(jian)測，或(huo)將(jiang)上(shang)清(qing)置(zhi)於-20^oC 或(huo)-80^oC 保(bao)存，但應避(bi)免(mian)反復(fu)凍融(rong)。

註(zhu)意(yi)：

1.         以(yi)上(shang)標本均(jun)需密(mi)封保(bao)存，4^oC保(bao)存應小(xiao)於1周(zhou)，-20^oC不(bu)應超過1個(ge)月(yue)，-80^oC不(bu)應超過2個(ge)月(yue)。

2.         標本使(shi)用前應緩慢均(jun)衡至室溫，不應加熱使之(zhi)融(rong)解。

3.         實(shi)驗(yan)前紅細(xi)胞(bao)裂解液(ye)必(bi)須用標準(zhun)品稀(xi)釋(shi)液(ye)稀(xi)釋(shi)。

雞白(bai)介(jie)素10(IL10)ELISA試劑盒(he)試劑準(zhun)備

1.         使(shi)用(yong)前將所(suo)有的(de)試(shi)劑(ji)和(he)標本緩慢均(jun)衡至室溫(18-25oC)，試劑不能(neng)直(zhi)接(jie)在(zai)37oC溶(rong)解。

2.         標準(zhun)品(凍幹品)：每(mei)瓶(ping)標準(zhun)品加入(ru)標準(zhun)品稀(xi)釋(shi)液(ye)1mL，蓋(gai)好後室溫靜置大約(yue)10分(fen)鐘(zhong)，同時(shi)反復(fu)顛(dian)倒(dao)/搓動以(yi)助(zhu)溶解，其(qi)濃(nong)度(du)為500pg/mL。準(zhun)備7個(ge)稀(xi)釋(shi)標準(zhun)品的(de)EP管(guan)，每(mei)個(ge)EP管(guan)中(zhong)加入(ru)150μL的標準(zhun)品稀(xi)釋(shi)液(ye)，如(ru)圖(tu)所(suo)示依(yi)次倍比稀釋成(cheng)不同(tong)的(de)梯度(du)， 標準(zhun)品稀(xi)釋(shi)液(ye)(0pg/mL)直(zhi)接(jie)作為(wei)空白(bai)孔(kong)。為保(bao)證實(shi)驗(yan)結(jie)果(guo)有(you)效(xiao)性(xing)，每次實(shi)驗(yan)請使用(yong)新(xin)的(de)標準(zhun)品溶(rong)液(ye)。

3.         濃(nong)洗(xi)滌液(ye)：用(yong)580mL蒸(zheng)餾(liu)水或(huo)去(qu)離(li)子(zi)水將20mL濃(nong)洗(xi)滌液(ye)稀(xi)釋(shi)至600mL，進(jin)行(xing)30倍(bei)稀(xi)釋。

標本處(chu)理

1.         本(ben)公(gong)司只(zhi)對試(shi)劑盒(he)本身(shen)負(fu)責(ze)，不(bu)對(dui)因(yin)使用該試(shi)劑盒(he)所造成(cheng)的(de)樣(yang)本消(xiao)耗(hao)負責(ze)，請使用(yong)者(zhe)使用(yong)前充分(fen)考(kao)慮到樣(yang)本的(de)可(ke)能(neng)使用量(liang)，預(yu)留充(chong)足(zu)的(de)樣(yang)本。

2.         實(shi)驗(yan)前應預(yu)測標本含(han)量(liang)，如(ru)果(guo)標本濃(nong)度(du)過高，應對(dui)標本進(jin)行(xing)稀(xi)釋(shi)，使稀釋(shi)後的標本符合試(shi)劑盒(he)的檢測範圍(wei)，計算時(shi)再乘以(yi)相應的(de)稀(xi)釋倍(bei)數(shu)。

3.         若(ruo)所(suo)檢樣(yang)本不(bu)包含在(zai)說明書所(suo)列樣(yang)本之(zhi)中(zhong)，建議(yi)進(jin)行(xing)預(yu)實(shi)驗(yan)驗(yan)證(zheng)其(qi)有(you)效(xiao)性(xing)，並註(zhu)意(yi)留存樣(yang)本。

4.         使(shi)用(yong)化學裂解液(ye)制(zhi)備(bei)的(de)組(zu)織(zhi)勻(yun)漿或(huo)細(xi)胞(bao)提(ti)取(qu)液(ye)可(ke)能(neng)會(hui)由(you)於某(mou)些化學物質(zhi)的引(yin)入(ru)導致(zhi)  ELISA實(shi)驗(yan)結(jie)果(guo)偏(pian)差(cha)。

5.         若(ruo)樣(yang)本為(wei)細(xi)胞(bao)培養(yang)上(shang)清(qing)，因(yin)該(gai)類樣(yang)本幹(gan)擾(rao)因(yin)素 較(jiao)多(duo)，如(ru)：細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態(tai)、細(xi)胞(bao)數(shu)量(liang)、采樣(yang)時(shi)間(jian)等(deng)，所(suo)以(yi)可(ke)能(neng)存在(zai)檢(jian)測不(bu)出的(de)情(qing)況。

6.         某(mou)些(xie)天然(ran)蛋白(bai)或(huo)重(zhong)組(zu)蛋白(bai)，包括原核及真(zhen)核重(zhong)組(zu)蛋白(bai)，可(ke)能(neng)因為與本(ben)產(chan)品所(suo)使(shi)用的(de)檢(jian)測抗(kang)體(ti)及捕(bu)獲(huo)抗體(ti)不(bu)匹(pi)配，而不被檢(jian)測出。

7.         建(jian)議(yi)使用(yong)新(xin)鮮樣(yang)本，保(bao)存時(shi)間(jian)過(guo)長(chang)可(ke)能(neng)會(hui)存在(zai)蛋(dan)白(bai)降(jiang)解或(huo)變性(xing)導致(zhi)實(shi)驗(yan)結(jie)果(guo)偏(pian)差(cha)。

雞白(bai)介(jie)素10(IL10)ELISA試劑盒(he)操(cao)作(zuo)步驟(zhou)

1.         加樣(yang)：分別設(she)空白(bai)孔(kong)（空白(bai)對(dui)照(zhao)孔(kong)不加樣(yang)品及酶(mei)標試劑(ji)，其(qi)余(yu)各(ge)步操(cao)作(zuo)相同）、標準(zhun)孔(kong)、待測樣(yang)品孔(kong)。在(zai)酶(mei)標包被板(ban)上(shang)標準(zhun)品準(zhun)確加樣(yang)50μl，待測樣(yang)品孔(kong)中先(xian)加樣(yang)品稀(xi)釋(shi)液(ye)40μl，然(ran)後再加待測樣(yang)品10μl（樣(yang)品*終(zhong)稀(xi)釋度(du)為5倍(bei)）。加樣(yang)將樣(yang)品加於酶(mei)標板孔(kong)底(di)部(bu)，盡量(liang)不觸及孔(kong)壁(bi)，輕(qing)輕(qing)晃動混勻(yun)。

2.         溫育：用封板(ban)膜(mo)封(feng)板後置37℃溫育30分鐘。  

3.         配液(ye)：將(jiang)20倍(bei)濃(nong)縮洗滌液(ye)用(yong)蒸(zheng)餾(liu)水20倍(bei)稀(xi)釋(shi)後備用

4.         洗(xi)滌(di)：小心(xin)揭掉封(feng)板膜(mo)，棄(qi)去(qu)液(ye)體(ti)，甩(shuai)幹(gan)，每孔(kong)加滿(man)洗(xi)滌(di)液(ye)，靜(jing)置(zhi)30秒(miao)後棄(qi)去(qu)，如(ru)此(ci)重復(fu)5次，拍(pai)幹(gan)。

5.         加酶：每孔(kong)加入(ru)酶標試劑(ji)50μl，空白(bai)孔(kong)除外(wai)。

6.         溫育：操(cao)作(zuo)同(tong)3。

7.         洗(xi)滌(di)：操(cao)作(zuo)同(tong)5。

8.         顯色(se)：每孔(kong)先(xian)加入(ru)顯色(se)劑A50μl，再加入(ru)顯色(se)劑B50μl，輕(qing)輕(qing)震蕩混勻(yun)，37℃避光(guang)顯色(se)15分鐘(zhong).

9.         終(zhong)止：每(mei)孔(kong)加終止液(ye)50μl，終(zhong)止反應（此(ci)時(shi)藍(lan)色立(li)轉(zhuan)黃(huang)色）。

10.     測定：以(yi)空白(bai)空調零(ling)，450nm波長(chang)依(yi)序測量(liang)各(ge)孔(kong)的吸(xi)光度(du)（OD值(zhi)）。 測定應在(zai)加終止液(ye)後15分鐘以(yi)內(nei)進(jin)行(xing)。

註(zhu)意(yi)：

1.         試(shi)劑(ji)準(zhun)備：準(zhun)備壹(yi)次(ci)實(shi)驗(yan)所(suo)需(xu)要的(de)酶標條，其(qi)它(ta)的(de)可(ke)從(cong)微(wei)孔(kong)板上(shang)拆(chai)下，密(mi)封，按(an)照說明書要求(qiu)保(bao)存，以(yi)備(bei)下次(ci)使(shi)用(yong)。

2.         加樣(yang)：實(shi)驗(yan)操(cao)作(zuo)中(zhong)請使用(yong)壹(yi)次(ci)性的吸(xi)頭，避(bi)免(mian)交叉汙(wu)染。加樣(yang)時(shi)註(zhu)意(yi)不要有(you)氣泡，將樣(yang)品加於酶(mei)標板底(di)部(bu)，盡量(liang)不觸及孔(kong)壁(bi)，輕(qing)輕(qing)晃動混勻(yun)。加樣(yang)或(huo)加試劑時(shi)，**個(ge)孔(kong)與*後壹(yi)個(ge)孔(kong)加樣(yang)之(zhi)間(jian)的時(shi)間(jian)間(jian)隔(ge)如(ru)果(guo)太(tai)大(da)，將會(hui)導致(zhi)不同(tong)的“預(yu)溫育”時(shi)間(jian)，從(cong)而明顯地(di)影(ying)響(xiang)到測量(liang)值(zhi)的(de)準(zhun)確性(xing)及重(zhong)復(fu)性。因此(ci)，壹(yi)次(ci)加樣(yang)時(shi)間(jian)(包括標準(zhun)品及所(suo)有(you)樣(yang)品)*好控(kong)制在(zai)10分(fen)鐘內(nei)。推(tui)薦(jian)設(she)置復孔(kong)進(jin)行(xing)實(shi)驗(yan)。

3.          溫育：為(wei)防(fang)止樣(yang)品蒸(zheng)發(fa)，實(shi)驗(yan)時(shi)請將加上(shang)蓋(gai)或(huo)覆(fu)膜(mo)的酶(mei)標板置(zhi)於濕盒(he)內，以(yi)避(bi)免(mian)液(ye)體(ti)蒸(zheng)發(fa)，洗(xi)板(ban)後應盡(jin)快進(jin)行(xing)下步操(cao)作(zuo)，任(ren)何時(shi)侯(hou)都(dou)應避(bi)免(mian)酶標板處(chu)於幹(gan)燥狀(zhuang)態(tai)，同(tong)時(shi)應嚴(yan)格(ge)遵守(shou)給(gei)定的溫育時(shi)間(jian)和(he)溫度(du)。

4.         洗(xi)滌(di)：充(chong)分(fen)的洗(xi)滌非(fei)常重(zhong)要，在(zai)每(mei)次洗(xi)滌(di)過(guo)程(cheng)中，都要將(jiang)洗滌液(ye)完(wan)全(quan)甩(shuai)幹(gan)。洗滌(di)過(guo)程(cheng)中(zhong)反應孔(kong)中殘留的(de)洗滌液(ye)應在(zai)濾(lv)紙上(shang)拍(pai)幹(gan)，勿(wu)將濾紙直(zhi)接(jie)放入(ru)反應孔(kong)中吸(xi)水，同(tong)時(shi)要消(xiao)除板底(di)殘留的(de)液(ye)體(ti)和(he)手(shou)指印，避(bi)免(mian)影(ying)響(xiang)*後的酶標儀讀(du)數(shu)。如(ru)果(guo)有自(zi)動洗(xi)板(ban)機，應在(zai)熟(shu)練(lian)使(shi)用後再用(yong)到正(zheng)式實(shi) 驗(yan)過(guo)程(cheng)中(zhong)。

5.         反應時(shi)間(jian)的(de)控(kong)制(zhi)：加入(ru)底(di)物後請定時(shi)觀察反應孔(kong)的顏(yan)色變化(hua)(比(bi)如(ru)，每(mei)隔10分(fen)鐘觀察壹(yi)次(ci))，如(ru)顏(yan)色較(jiao)深，請提(ti)前加入(ru)終止液(ye)終(zhong)止反應，避(bi)免(mian)反應過(guo)強從(cong)而影(ying)響(xiang)酶(mei)標儀光密(mi)度(du)讀(du)數(shu)。

6.         底(di)物：底(di)物請避光(guang)保存，在(zai)儲存和溫育時(shi)避(bi)免(mian)強光直(zhi)接(jie)照射(she)。

7.         如(ru)果(guo)實(shi)驗(yan)室(shi)內(nei)濕度(du)低於60%，推(tui)薦(jian)使用加濕器(qi)提(ti)高濕度(du)水平。

 實(shi)驗(yan)流程(cheng)

1.         實(shi)驗(yan)前標準(zhun)品、試(shi)劑(ji)及樣(yang)本的(de)準(zhun)備；

2.         加樣(yang)（標準(zhun)品及樣(yang)本）50μL，37℃孵(fu)育(yu)30分鐘(zhong)；

3.         洗(xi)板(ban)5次，加酶標試劑(ji)50ul，37℃孵(fu)育(yu)半(ban)小時(shi)；

4.         洗(xi)板(ban)5次；加入(ru)顯色(se)液(ye)A，B各(ge)50ul,37℃孵(fu)育(yu)顯色(se)15分鐘(zhong)

5.         加終止液(ye)50μL，立(li)即(ji)450nm讀(du)數(shu)。

6.    計算

雞白(bai)介(jie)素10(IL10)ELISA試劑盒(he)計算

各(ge)標準(zhun)品及樣(yang)本O.D.值(zhi)扣除空白(bai)孔(kong)O.D.值(zhi)後作圖(tu)(七(qi)點(dian)圖(tu))，如(ru)設(she)置復孔(kong)，則應取(qu)其(qi)平均值(zhi)計算。以(yi)標準(zhun)品的(de)濃(nong)度(du)為縱(zong)坐(zuo)標(或(huo)對(dui)數(shu)坐(zuo)標)，O.D.值(zhi)為(wei)橫(heng)坐標(或(huo)對(dui)數(shu)坐(zuo)標），繪(hui)出標準(zhun)曲線(*佳(jia)方程(cheng)式應依(yi)回(hui)歸方(fang)程計算的(de)R2值(zhi)來(lai)定，以(yi)R2值(zhi)越(yue)趨近於1為(wei)好)。推(tui)薦(jian)使用專(zhuan)業制作曲(qu)線(xian)軟(ruan)件(jian)進(jin)行(xing)分(fen)析(xi)，如(ru)curve expert 1.30，根據(ju)樣(yang)品O.D.值(zhi)，由(you)標準(zhun)曲線查(zha)出相應的(de)濃(nong)度(du)，乘以(yi)稀(xi)釋(shi)倍數(shu)；或(huo)用(yong)標準(zhun)物的(de)濃(nong)度(du)與O.D.值(zhi)計算出標準(zhun)曲線的(de)回(hui)歸方(fang)程式，將(jiang)樣(yang)品的(de)O.D.值(zhi)代入(ru)方程(cheng)式，計算出樣(yang)品濃(nong)度(du)，再乘以(yi)稀(xi)釋(shi)倍數(shu)，即(ji)為樣(yang)品的(de)實(shi)際(ji)濃度(du)。

 特(te)異性

本(ben)試(shi)劑盒(he)用於檢(jian)測雞白(bai)介(jie)素10(IL10)，經(jing)檢測與(yu)其(qi)它(ta)相似物質(zhi)無明顯交叉反應。

由(you)於受(shou)到技(ji)術及樣(yang)本來(lai)源的(de)限(xian)制，不可(ke)能(neng)完成對所(suo)有(you)相關或(huo)相似物質(zhi)交叉反應檢(jian)測，因(yin)此(ci)本試(shi)劑盒(he)有可(ke)能(neng)與未經(jing)檢測的(de)其(qi)它(ta)物質(zhi)有交叉反應。

 精(jing)密(mi)度(du)

精(jing)密(mi)度(du)用樣(yang)品測定值(zhi)的(de)變異(yi)系(xi)數(shu)CV表示。CV(%) = SD/mean×100

批(pi)內(nei)差(cha)：取(qu)同(tong)批(pi)次(ci)試(shi)劑盒(he)對低、中(zhong)、高值(zhi)定值(zhi)樣(yang)本進(jin)行(xing)定量(liang)檢測,每(mei)份樣(yang)本連續(xu)測定20 次，分別計算不(bu)同(tong)濃度(du)樣(yang)本的(de)平均值(zhi)及SD值(zhi)。

批(pi)間(jian)差(cha)：選(xuan)取(qu)3個(ge)不(bu)同(tong)批(pi)次(ci)的(de)試劑盒(he)分別對低、中(zhong)、高值(zhi)定值(zhi)樣(yang)本進(jin)行(xing)定量(liang)測定，每個(ge)樣(yang)本使(shi)用(yong)同(tong)壹(yi)試(shi)劑盒(he)重復測定8次，分別計算不(bu)同(tong)濃度(du)樣(yang)本的(de)平均值(zhi)及SD值(zhi)。

批(pi)內(nei)差(cha)： CV<10%

批(pi)間(jian)差(cha)： CV<12%

雞白(bai)介(jie)素10(IL10)ELISA試劑盒(he)穩(wen)定性

經(jing)測定，試劑盒(he)在(zai)有(you)效(xiao)期(qi)內按(an)推(tui)薦(jian)溫度(du)保存，其(qi)活性(xing)降低率(lv)小(xiao)於5%。

為(wei)減小外(wai)部(bu)因素對試劑盒(he)破壞(huai)前後檢測值(zhi)的(de)影(ying)響(xiang)，實(shi)驗(yan)室(shi)的(de)環(huan)境(jing)條件(jian)需(xu)盡(jin)量(liang)保持壹(yi)致(zhi)，尤(you)其(qi)是實(shi)驗(yan)室(shi)內(nei)溫度(du)、濕度(du)及溫育條件(jian)。其(qi)次(ci)由(you)同壹(yi)實(shi)驗(yan)員(yuan)來(lai)進(jin)行(xing)操(cao)作(zuo)可(ke)減少(shao)人為(wei)誤差(cha)。