產(chan)品名稱：雞白細胞(bao)激活黏(nian)附(fu)因(yin)子(zi)(ALCAM)ELISA試劑(ji)盒

                                                       96T       僅(jin)供(gong)體(ti)外(wai)研究使(shi)用(yong)，不用於(yu)臨(lin)床診(zhen)斷(duan)!

雞白細胞(bao)激活黏(nian)附(fu)因(yin)子(zi)(ALCAM)ELISA試劑(ji)盒

本(ben)試劑(ji)盒運(yun)用雙(shuang)抗(kang)體(ti)夾心ELISA法定(ding)量測定(ding)雞血(xue)清、血(xue)漿、組織(zhi)勻漿(jiang)、細胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye)、細胞(bao)培養(yang)上(shang)清液(ye)和其(qi)他(ta)生(sheng)物(wu)液(ye)體(ti)中(zhong)雞白細胞(bao)激活黏(nian)附(fu)因(yin)子(zi)(ALCAM)含量。

 檢(jian)測範圍

6.25-400 ng/mL

 *低(di)檢測(ce)限

1.25 ng/mL

 實(shi)驗(yan)原理(li)

將(jiang)雞白細胞(bao)激活黏(nian)附(fu)因(yin)子(zi)(ALCAM)抗(kang)體(ti)包被於(yu)96孔微孔板中(zhong)，制(zhi)成(cheng)固相載體，向微孔中(zhong)分(fen)別(bie)加(jia)入標(biao)準(zhun)品(pin)或(huo)標(biao)本(ben)，其中(zhong)的雞白細胞(bao)激活黏(nian)附(fu)因(yin)子(zi)(ALCAM)與連接於(yu)固相載體上(shang)的抗(kang)體(ti)結合，然(ran)後(hou)加(jia)入生(sheng)物(wu)素(su)化(hua)的雞白細胞(bao)激活黏(nian)附(fu)因(yin)子(zi)(ALCAM)抗(kang)體(ti)，將未(wei)結合的生(sheng)物(wu)素(su)化(hua)抗(kang)體(ti)洗(xi)凈後(hou)，加(jia)入HRP標(biao)記的親(qin)和(he)素(su)，再次(ci)徹(che)底洗(xi)滌(di)後(hou)加(jia)入TMB底(di)物(wu)顯(xian)色。TMB在(zai)過(guo)氧(yang)化(hua)物(wu)酶的催化(hua)下轉化(hua)成(cheng)藍色，並(bing)在(zai)酸的作用(yong)下(xia)轉(zhuan)化(hua)成(cheng)*終的黃色。顏(yan)色的深淺和(he)樣(yang)品(pin)中(zhong)的雞白細胞(bao)激活黏(nian)附(fu)因(yin)子(zi)(ALCAM)呈正(zheng)相關(guan)。用酶標(biao)儀(yi)在(zai)450nm波(bo)長(chang)下(xia)測定(ding)吸(xi)光度(O.D.值)，計(ji)算(suan)樣(yang)品(pin)濃(nong)度。

 試(shi)劑(ji)盒內(nei)容(rong)

雞白細胞(bao)激活黏(nian)附(fu)因(yin)子(zi)(ALCAM)ELISA試劑(ji)盒需(xu)自(zi)備(bei)的設(she)備(bei)及試劑(ji)

1.         450±10nm濾(lv)光片(pian)的酶標(biao)儀(yi)(建議(yi)儀(yi)器(qi)使(shi)用(yong)前(qian)提前(qian)預熱(re))

2.         單道(dao)或多(duo)道(dao)微量加液(ye)器(qi)及吸(xi)頭(tou)

3.         稀(xi)釋(shi)樣(yang)品(pin)的EP管(guan)

4.         蒸(zheng)餾(liu)水(shui)或(huo)去(qu)離子(zi)水

5.         吸(xi)水紙(zhi)

6.         盛放(fang)洗(xi)液的容(rong)器(qi)

 試(shi)劑(ji)盒的儲(chu)存及有效(xiao)期

1.         未(wei)開封(feng)的試(shi)劑(ji)盒：所(suo)有試劑(ji)均(jun)按(an)試(shi)劑(ji)瓶標(biao)簽上(shang)所(suo)示保存。請註意(yi)，收(shou)到(dao)試劑(ji)盒後(hou)請(qing)盡快(kuai)將(jiang)TMB 洗(xi)滌(di)液，終(zhong)止(zhi)液保存於(yu)4℃，其他(ta)試(shi)劑(ji)保存於(yu)-20℃。

2.         使(shi)用(yong)後(hou)的試(shi)劑(ji)盒：剩余試劑(ji)仍需(xu)按(an)照試(shi)劑(ji)瓶標(biao)簽所(suo)示的溫(wen)度保存，開封(feng)後(hou)的酶標(biao)板要(yao)加幹燥(zao)劑(ji)後(hou)密封(feng)保存於(yu)-20℃，避免(mian)潮(chao)濕。

註意(yi)：

試(shi)劑(ji)盒內(nei)酶標(biao)條可(ke)拆卸(xie)，按(an)實(shi)驗(yan)需(xu)求(qiu)可分(fen)多次(ci)使(shi)用(yong)；使(shi)用(yong)後(hou)的剩余試劑(ji)盒建議(yi)在(zai)**實驗(yan)後(hou) 1個(ge)月內(nei)使(shi)用(yong)完(wan)畢(bi)。產(chan)品過(guo)期時(shi)間以(yi)盒子(zi)上(shang)的標(biao)簽(qian)為(wei)準(zhun)，保質(zhi)期內所(suo)有組分(fen)都確(que)保是(shi)穩(wen)定(ding)的。

雞白細胞(bao)激活黏(nian)附(fu)因(yin)子(zi)(ALCAM)ELISA試劑(ji)盒標(biao)本(ben)的采集與保存

1.         血(xue)清：

將(jiang)收(shou)集於(yu)血(xue)清分(fen)離管(guan)的全(quan)血(xue)標本(ben)在室溫(wen)放置(zhi) 2 小時(shi)或(huo) 4^oC 過(guo)夜(ye)，然(ran)後(hou) 1000×g 離(li)心 20 分(fen)鐘，取(qu)上(shang)清即可，或(huo)將(jiang)上(shang)清置(zhi)於(yu)-20^oC 或-80^oC 保存，但應(ying)避免(mian)反復凍(dong)融。

2.         血(xue)漿：

用(yong) EDTA 或肝(gan)素作為(wei)抗(kang)凝(ning)劑(ji)采集標本(ben)，並將標(biao)本(ben)在采集後(hou)的 30 分(fen)鐘內(nei)於(yu) 2-8^oC 1000×g 離心 15 分(fen)鐘，取(qu)上(shang)清即可檢(jian)測(ce)，或將上(shang)清置(zhi)於(yu)-20^oC 或-80^oC 保存，但應(ying)避免(mian)反復凍(dong)融。

3. 組織(zhi)勻漿(jiang)：

1） 取(qu)適量組織(zhi)塊(kuai)，於(yu)預冷(leng)PBS（0.01mol/L, pH 7.0-7.2）中(zhong)清洗(xi)去(qu)除血(xue)液，稱重(zhong)後(hou)備(bei)用(yong)（組織(zhi)塊(kuai)較(jiao)大(da)需(xu)先剪碎後(hou)再勻(yun)漿(jiang)）；

2） 可(ke)同時(shi)選(xuan)用(yong)多(duo)種(zhong)勻漿方法(fa)達(da)到(dao)較好(hao)的破碎(sui)效(xiao)果(guo)：首(shou)先將組織(zhi)塊(kuai)移(yi)入玻(bo)璃(li)勻(yun)漿(jiang)器(qi)，加(jia)入5-10mL 預冷(leng)PBS 進行充(chong)分(fen)研磨，該(gai)過程需(xu)在(zai)冰上(shang)進行(xing)（有條件(jian)實(shi)驗(yan)室可選用(yong)機器(qi)勻(yun)漿(jiang)）；得(de)到(dao)的勻(yun)漿(jiang)液(ye)可(ke)再利(li)用(yong)超聲(sheng)破碎(sui)或(huo)反復凍(dong)融 進壹步(bu)處理(li)（超(chao)聲(sheng)破碎(sui)過(guo)程中(zhong)註意(yi)冰(bing)浴降溫(wen)；反復凍(dong)融法可重(zhong)復2 次）。

3） 將(jiang)制備(bei)好(hao)的勻(yun)漿(jiang)液(ye)於(yu)5000×g 離心5 分(fen)鐘，留(liu)取(qu)上(shang)清即可檢(jian)測(ce)。

4. 細胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye)：

1）貼壁(bi)細胞(bao)需(xu)要(yao)先用胰(yi)酶消(xiao)化(hua)，離心收(shou)集細胞(bao)（懸浮細胞(bao)可直接離(li)心收(shou)集）；

2）將(jiang)收(shou)集到(dao)的細胞(bao)用冷(leng)PBS 洗(xi)3 次；

3）物(wu)理(li)方法(fa)裂(lie)解(jie)細胞(bao)（可先超聲(sheng)破碎(sui)細胞(bao)，再反(fan)復凍(dong)融）：

i 超(chao)聲(sheng)破碎(sui)：取(qu)適量PBS 重懸(xuan)細胞(bao)，用壹(yi)定(ding)功率的超(chao)聲(sheng)波(bo)處理(li)細胞(bao)懸液(ye)，使(shi)細胞(bao)急劇(ju)震(zhen)蕩破裂(lie)。

ii 反(fan)復凍(dong)融：將待破碎(sui)的細胞(bao)在-20 ^oC 以(yi)下冰(bing)凍(dong)，室溫(wen)融解(jie)，反復3 次，使(shi)細胞(bao)溶(rong)脹(zhang)破碎(sui)。

4）將(jiang)標本(ben)於(yu)2-8 ^oC 1500×g 離(li)心10 分(fen)鐘，收(shou)集上(shang)清備(bei)用(yong)。

5. 細胞(bao)培養(yang)上(shang)清或(huo)其它(ta)生物(wu)標(biao)本(ben)：

請(qing) 1000×g 離心 20 分(fen)鐘，取(qu)上(shang)清即可檢(jian)測(ce)，或將上(shang)清置(zhi)於(yu)-20^oC 或-80^oC 保存，但應(ying)避免(mian)反復凍(dong)融。

註意(yi)：

1.         以(yi)上(shang)標本(ben)均(jun)需(xu)密封(feng)保存，4^oC保存應(ying)小於(yu)1周，-20^oC不應(ying)超過(guo)1個(ge)月，-80^oC不(bu)應(ying)超過(guo)2個(ge)月。

2.         標(biao)本(ben)使(shi)用(yong)前(qian)應(ying)緩(huan)慢(man)均(jun)衡(heng)至(zhi)室溫(wen)，不應(ying)加熱(re)使(shi)之(zhi)融解。

3.         實(shi)驗(yan)前(qian)紅細胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye)必(bi)須用(yong)標準(zhun)品(pin)稀(xi)釋(shi)液稀(xi)釋(shi)。

雞白細胞(bao)激活黏(nian)附(fu)因(yin)子(zi)(ALCAM)ELISA試劑(ji)盒試(shi)劑(ji)準(zhun)備(bei)

1.         使(shi)用(yong)前(qian)將所(suo)有的試(shi)劑(ji)和標(biao)本(ben)緩(huan)慢(man)均(jun)衡(heng)至(zhi)室溫(wen)(18-25oC)，試劑(ji)不能(neng)直接在(zai)37oC溶(rong)解。

2.         標(biao)準(zhun)品(pin)(凍(dong)幹品)：每(mei)瓶(ping)標準(zhun)品(pin)加(jia)入標(biao)準(zhun)品(pin)稀(xi)釋(shi)液1mL，蓋好後(hou)室溫(wen)靜置(zhi)大約10分(fen)鐘，同(tong)時(shi)反(fan)復顛(dian)倒(dao)/搓(cuo)動以(yi)助溶(rong)解，其(qi)濃(nong)度為(wei)400 ng/mL。準(zhun)備(bei)7個(ge)稀(xi)釋(shi)標準(zhun)品(pin)的EP管(guan)，每(mei)個(ge)EP管(guan)中(zhong)加(jia)入150μL的標(biao)準(zhun)品(pin)稀(xi)釋(shi)液，如圖所(suo)示依(yi)次(ci)倍(bei)比(bi)稀(xi)釋(shi)成(cheng)不同(tong)的梯(ti)度， 標準(zhun)品(pin)稀(xi)釋(shi)液(0pg/mL)直接作為(wei)空白孔。為(wei)保證(zheng)實驗(yan)結果有效(xiao)性，每(mei)次(ci)實驗(yan)請使(shi)用(yong)新(xin)的標(biao)準(zhun)品(pin)溶(rong)液。

3.         濃(nong)洗(xi)滌(di)液：用(yong)580mL蒸(zheng)餾(liu)水(shui)或(huo)去(qu)離子(zi)水將20mL濃(nong)洗(xi)滌(di)液稀(xi)釋(shi)至(zhi)600mL，進(jin)行30倍(bei)稀(xi)釋(shi)。

標(biao)本(ben)處理(li)

1.         本(ben)公(gong)司只(zhi)對(dui)試(shi)劑(ji)盒本(ben)身負責，不(bu)對(dui)因(yin)使(shi)用(yong)該試劑(ji)盒所(suo)造(zao)成(cheng)的樣(yang)本(ben)消(xiao)耗負責，請(qing)使(shi)用(yong)者使(shi)用(yong)前(qian)充分(fen)考(kao)慮(lv)到(dao)樣(yang)本(ben)的可(ke)能(neng)使(shi)用(yong)量，預留(liu)充足的樣(yang)本(ben)。

2.         實(shi)驗(yan)前(qian)應(ying)預測(ce)標本(ben)含量，如果標本(ben)濃(nong)度過高，應(ying)對(dui)標(biao)本(ben)進行稀(xi)釋(shi)，使(shi)稀(xi)釋(shi)後(hou)的標(biao)本(ben)符(fu)合試(shi)劑(ji)盒的檢(jian)測(ce)範圍，計(ji)算(suan)時(shi)再乘以(yi)相應(ying)的稀(xi)釋(shi)倍(bei)數(shu)。

3.         若(ruo)所(suo)檢樣(yang)本(ben)不包含在說(shuo)明書(shu)所(suo)列樣(yang)本(ben)之中(zhong)，建議(yi)進(jin)行預實(shi)驗(yan)驗(yan)證(zheng)其有效(xiao)性，並註意(yi)留(liu)存樣(yang)本(ben)。

4.         使(shi)用(yong)化(hua)學裂(lie)解(jie)液(ye)制(zhi)備(bei)的組織(zhi)勻漿(jiang)或細胞(bao)提取(qu)液(ye)可(ke)能會(hui)由於(yu)某(mou)些(xie)化(hua)學物(wu)質(zhi)的引(yin)入導(dao)致(zhi)  ELISA實(shi)驗(yan)結果偏差。

5.         若(ruo)樣(yang)本(ben)為(wei)細胞(bao)培養(yang)上(shang)清，因(yin)該類樣(yang)本(ben)幹擾因(yin)素 較(jiao)多(duo)，如：細胞(bao)狀態(tai)、細胞(bao)數量、采樣(yang)時(shi)間等，所(suo)以(yi)可能(neng)存在檢測不(bu)出的情況。

6.         某(mou)些(xie)天然(ran)蛋白或重(zhong)組蛋白，包括原核(he)及真核(he)重組蛋白，可能(neng)因為(wei)與本(ben)產(chan)品所(suo)使(shi)用(yong)的檢(jian)測(ce)抗(kang)體(ti)及捕獲(huo)抗(kang)體(ti)不匹(pi)配，而(er)不(bu)被檢測出。

7.         建議(yi)使(shi)用(yong)新(xin)鮮(xian)樣(yang)本(ben)，保存時(shi)間過長(chang)可(ke)能會(hui)存在蛋白降解(jie)或變(bian)性導(dao)致(zhi)實(shi)驗(yan)結果偏差。

雞白細胞(bao)激活黏(nian)附(fu)因(yin)子(zi)(ALCAM)ELISA試劑(ji)盒操(cao)作步(bu)驟(zhou)

1.         加(jia)樣(yang)：分(fen)別(bie)設(she)空白孔（空白對(dui)照孔不加(jia)樣(yang)品(pin)及酶標(biao)試劑(ji)，其余(yu)各(ge)步(bu)操(cao)作相同）、標(biao)準(zhun)孔、待測(ce)樣(yang)品(pin)孔。在酶標(biao)包被板上(shang)標準(zhun)品(pin)準(zhun)確(que)加(jia)樣(yang)50μl，待測(ce)樣(yang)品(pin)孔中(zhong)先加樣(yang)品(pin)稀(xi)釋(shi)液40μl，然(ran)後(hou)再加(jia)待測(ce)樣(yang)品(pin)10μl（樣(yang)品(pin)*終(zhong)稀(xi)釋(shi)度為(wei)5倍(bei)）。加(jia)樣(yang)將(jiang)樣(yang)品(pin)加(jia)於(yu)酶標(biao)板孔底部，盡量不觸(chu)及孔壁(bi)，輕(qing)輕(qing)晃動(dong)混(hun)勻。

2.         溫(wen)育：用封(feng)板膜封(feng)板後(hou)置(zhi)37℃溫(wen)育30分(fen)鐘。  

3.         配液(ye)：將(jiang)20倍(bei)濃(nong)縮(suo)洗(xi)滌(di)液用(yong)蒸餾(liu)水(shui)20倍(bei)稀(xi)釋(shi)後(hou)備(bei)用(yong)

4.         洗(xi)滌(di)：小心揭掉封(feng)板膜，棄(qi)去(qu)液體(ti)，甩(shuai)幹，每(mei)孔加滿(man)洗(xi)滌(di)液，靜置(zhi)30秒後(hou)棄(qi)去(qu)，如此重復5次，拍(pai)幹。

5.         加(jia)酶：每(mei)孔加入酶標(biao)試劑(ji)50μl，空白孔除外。

6.         溫(wen)育：操(cao)作同(tong)3。

7.         洗(xi)滌(di)：操(cao)作同(tong)5。

8.         顯(xian)色：每(mei)孔先加入顯(xian)色劑(ji)A50μl，再加(jia)入顯(xian)色劑(ji)B50μl，輕(qing)輕(qing)震(zhen)蕩混(hun)勻，37℃避(bi)光顯(xian)色15分(fen)鐘.

9.         終(zhong)止(zhi)：每(mei)孔加終(zhong)止(zhi)液50μl，終(zhong)止(zhi)反應(ying)（此時(shi)藍(lan)色立(li)轉(zhuan)黃色）。

10.     測(ce)定：以(yi)空白空調(tiao)零，450nm波(bo)長(chang)依(yi)序測(ce)量各(ge)孔的吸(xi)光度（OD值）。 測(ce)定(ding)應(ying)在加(jia)終(zhong)止(zhi)液後(hou)15分(fen)鐘以(yi)內進(jin)行。

註意(yi)：

1.         試(shi)劑(ji)準(zhun)備(bei)：準(zhun)備(bei)壹(yi)次(ci)實(shi)驗(yan)所(suo)需(xu)要(yao)的酶標(biao)條，其(qi)它的可(ke)從微(wei)孔板上(shang)拆下(xia)，密封(feng)，按(an)照說(shuo)明書(shu)要(yao)求(qiu)保存，以(yi)備(bei)下(xia)次(ci)使(shi)用(yong)。

2.         加(jia)樣(yang)：實(shi)驗(yan)操(cao)作中(zhong)請(qing)使(shi)用(yong)壹次性的吸(xi)頭(tou)，避免(mian)交(jiao)叉汙染。加(jia)樣(yang)時(shi)註意(yi)不(bu)要(yao)有氣泡，將(jiang)樣(yang)品(pin)加(jia)於(yu)酶標(biao)板底(di)部，盡量不觸(chu)及孔壁(bi)，輕(qing)輕(qing)晃動(dong)混(hun)勻。加(jia)樣(yang)或(huo)加(jia)試(shi)劑(ji)時(shi)，**個(ge)孔與*後(hou)壹(yi)個孔加樣(yang)之(zhi)間的時(shi)間間隔(ge)如果太大，將(jiang)會(hui)導(dao)致(zhi)不(bu)同(tong)的“預溫(wen)育”時(shi)間，從而(er)明顯(xian)地(di)影響到(dao)測量值的準(zhun)確(que)性及重復性。因此，壹次加(jia)樣(yang)時(shi)間(包括標準(zhun)品(pin)及所(suo)有樣(yang)品(pin))*好(hao)控(kong)制在10分(fen)鐘內(nei)。推(tui)薦(jian)設(she)置(zhi)復孔進行(xing)實驗(yan)。

3.          溫(wen)育：為(wei)防(fang)止(zhi)樣(yang)品(pin)蒸(zheng)發(fa)，實(shi)驗(yan)時(shi)請(qing)將(jiang)加(jia)上(shang)蓋或覆膜的酶標(biao)板置(zhi)於(yu)濕盒(he)內，以(yi)避免(mian)液體(ti)蒸(zheng)發(fa)，洗(xi)板後(hou)應(ying)盡快(kuai)進(jin)行下步操(cao)作，任(ren)何(he)時(shi)侯都應(ying)避免(mian)酶標(biao)板處(chu)於(yu)幹燥(zao)狀(zhuang)態(tai)，同(tong)時(shi)應(ying)嚴格遵守給定(ding)的溫(wen)育時(shi)間和溫(wen)度。

4.         洗(xi)滌(di)：充(chong)分(fen)的洗(xi)滌(di)非常重要(yao)，在每(mei)次(ci)洗(xi)滌(di)過程中(zhong)，都(dou)要(yao)將洗(xi)滌(di)液完(wan)全(quan)甩(shuai)幹。洗(xi)滌(di)過程中(zhong)反(fan)應(ying)孔中(zhong)殘(can)留的洗(xi)滌(di)液應(ying)在濾(lv)紙(zhi)上(shang)拍(pai)幹，勿(wu)將(jiang)濾(lv)紙(zhi)直接放(fang)入反(fan)應(ying)孔中(zhong)吸(xi)水，同(tong)時(shi)要(yao)消(xiao)除板底(di)殘留(liu)的液(ye)體(ti)和(he)手指印，避免(mian)影響*後(hou)的酶標(biao)儀(yi)讀(du)數。如果有自(zi)動洗(xi)板機，應(ying)在熟(shu)練使(shi)用(yong)後(hou)再用(yong)到(dao)正(zheng)式(shi)實(shi) 驗(yan)過程中(zhong)。

5.         反(fan)應(ying)時(shi)間的控(kong)制：加(jia)入底(di)物(wu)後(hou)請(qing)定時(shi)觀(guan)察(cha)反(fan)應(ying)孔的顏(yan)色變(bian)化(hua)(比(bi)如，每(mei)隔(ge)10分(fen)鐘觀(guan)察(cha)壹次)，如顏色較(jiao)深，請提(ti)前(qian)加入終(zhong)止(zhi)液終(zhong)止(zhi)反應(ying)，避免(mian)反應(ying)過強從而(er)影響酶標(biao)儀(yi)光密度讀數(shu)。

6.         底(di)物(wu)：底(di)物(wu)請(qing)避(bi)光保存，在儲(chu)存和溫(wen)育時(shi)避(bi)免(mian)強光直接照射。

7.         如果實驗(yan)室內濕度低於(yu)60%，推(tui)薦(jian)使(shi)用(yong)加濕器(qi)提(ti)高濕度水平(ping)。

 實(shi)驗(yan)流程

1.         實(shi)驗(yan)前(qian)標準(zhun)品(pin)、試(shi)劑(ji)及樣(yang)本(ben)的準(zhun)備(bei)；

2.         加(jia)樣(yang)（標(biao)準(zhun)品(pin)及樣(yang)本(ben)）50μL，37℃孵(fu)育30分(fen)鐘；

3.         洗(xi)板5次(ci)，加酶標(biao)試劑(ji)50ul，37℃孵(fu)育半小時(shi)；

4.         洗(xi)板5次(ci)；加入顯(xian)色液(ye)A，B各(ge)50ul,37℃孵(fu)育顯(xian)色15分(fen)鐘

5.         加(jia)終止(zhi)液50μL，立(li)即450nm讀數(shu)。

6.    計(ji)算(suan)

雞白細胞(bao)激活黏(nian)附(fu)因(yin)子(zi)(ALCAM)ELISA試劑(ji)盒計(ji)算(suan)

各(ge)標(biao)準(zhun)品(pin)及樣(yang)本(ben)O.D.值扣(kou)除空白孔O.D.值後(hou)作圖(tu)(七(qi)點圖(tu))，如設置(zhi)復孔，則應(ying)取其(qi)平(ping)均(jun)值計(ji)算(suan)。以(yi)標準(zhun)品(pin)的濃(nong)度為(wei)縱坐標(biao)(或對(dui)數(shu)坐(zuo)標(biao))，O.D.值(zhi)為(wei)橫坐標(biao)(或(huo)對(dui)數(shu)坐(zuo)標(biao)），繪(hui)出標(biao)準(zhun)曲(qu)線(xian)(*佳方程式應(ying)依回歸方程計(ji)算(suan)的R2值(zhi)來定(ding)，以(yi)R2值越趨近(jin)於(yu)1為(wei)好(hao))。推(tui)薦(jian)使(shi)用(yong)專業制作曲(qu)線(xian)軟(ruan)件(jian)進(jin)行分(fen)析，如curve expert 1.30，根據樣(yang)品(pin)O.D.值(zhi)，由標準(zhun)曲(qu)線(xian)查出相應(ying)的濃(nong)度，乘以(yi)稀(xi)釋(shi)倍(bei)數(shu)；或(huo)用(yong)標(biao)準(zhun)物(wu)的濃(nong)度與O.D.值計(ji)算(suan)出標(biao)準(zhun)曲(qu)線(xian)的回歸方程式，將(jiang)樣(yang)品(pin)的O.D.值(zhi)代(dai)入方程式，計(ji)算(suan)出樣(yang)品(pin)濃(nong)度，再乘以(yi)稀(xi)釋(shi)倍(bei)數(shu)，即為(wei)樣(yang)品(pin)的實(shi)際(ji)濃(nong)度。

 特(te)異性

本(ben)試劑(ji)盒用(yong)於(yu)檢測(ce)雞白細胞(bao)激活黏(nian)附(fu)因(yin)子(zi)(ALCAM)，經檢測與其它(ta)相似物(wu)質(zhi)無明顯(xian)交(jiao)叉反應(ying)。

由於(yu)受(shou)到(dao)技(ji)術(shu)及樣(yang)本(ben)來源的限(xian)制(zhi)，不(bu)可(ke)能完(wan)成(cheng)對(dui)所(suo)有相關(guan)或相似物(wu)質(zhi)交(jiao)叉反應(ying)檢測(ce)，因(yin)此(ci)本(ben)試劑(ji)盒有可能(neng)與未(wei)經檢(jian)測的其(qi)它(ta)物(wu)質(zhi)有交(jiao)叉反應(ying)。

 精密度

精密度用樣(yang)品(pin)測(ce)定(ding)值(zhi)的變(bian)異(yi)系(xi)數CV表示(shi)。CV(%) = SD/mean×100

批(pi)內差：取(qu)同(tong)批(pi)次試(shi)劑(ji)盒對(dui)低(di)、中(zhong)、高值定(ding)值(zhi)樣(yang)本(ben)進行定(ding)量檢測(ce),每(mei)份(fen)樣(yang)本(ben)連續(xu)測(ce)定20 次，分(fen)別(bie)計(ji)算(suan)不同濃(nong)度樣(yang)本(ben)的平(ping)均(jun)值及SD值。

批(pi)間差：選(xuan)取(qu)3個(ge)不(bu)同(tong)批(pi)次的試(shi)劑(ji)盒分(fen)別(bie)對(dui)低(di)、中(zhong)、高值定(ding)值(zhi)樣(yang)本(ben)進行定(ding)量測定(ding)，每(mei)個(ge)樣(yang)本(ben)使(shi)用(yong)同壹試(shi)劑(ji)盒重(zhong)復測定(ding)8次，分(fen)別(bie)計(ji)算(suan)不同濃(nong)度樣(yang)本(ben)的平(ping)均(jun)值及SD值。

批(pi)內差： CV<10%

批(pi)間差： CV<12%

雞白細胞(bao)激活黏(nian)附(fu)因(yin)子(zi)(ALCAM)ELISA試劑(ji)盒穩(wen)定性

經(jing)測定(ding)，試劑(ji)盒在(zai)有效(xiao)期內按(an)推(tui)薦(jian)溫(wen)度保存，其活性降低率小於(yu)5%。

為(wei)減小外部因素對(dui)試(shi)劑(ji)盒破壞(huai)前(qian)後(hou)檢(jian)測值(zhi)的影響，實(shi)驗(yan)室的環(huan)境(jing)條(tiao)件(jian)需(xu)盡量保持壹致(zhi)，尤(you)其(qi)是(shi)實(shi)驗(yan)室內溫(wen)度、濕度及溫(wen)育條件(jian)。其(qi)次由同壹實驗(yan)員來進(jin)行操(cao)作可(ke)減少(shao)人(ren)為(wei)誤(wu)差。