產品(pin)名稱：雞膽(dan)囊(nang)收(shou)縮素A受(shou)體(ti)(CCKAR)ELISA試劑盒(he)

                                                       96T       僅(jin)供體外(wai)研究使用(yong)，不用(yong)於臨床診斷!

雞膽(dan)囊(nang)收(shou)縮素A受(shou)體(ti)(CCKAR)ELISA試劑盒(he)

本(ben)試劑盒(he)運用(yong)雙(shuang)抗體(ti)夾心(xin)ELISA法定量測(ce)定雞血清(qing)、血漿(jiang)、組(zu)織勻漿(jiang)、細(xi)胞裂(lie)解(jie)液(ye)、細(xi)胞培(pei)養(yang)上清(qing)液(ye)和其(qi)他生(sheng)物(wu)液(ye)體(ti)中雞膽(dan)囊(nang)收(shou)縮素A受(shou)體(ti)(CCKAR)含(han)量。

 檢(jian)測(ce)範圍(wei)

0.313-20ng/mL

 *低檢(jian)測(ce)限(xian)

0.179ng/mL

 實(shi)驗原(yuan)理(li)

將雞膽(dan)囊(nang)收(shou)縮素A受(shou)體(ti)(CCKAR)抗(kang)體包(bao)被於96孔(kong)微(wei)孔(kong)板(ban)中(zhong)，制(zhi)成(cheng)固相(xiang)載體(ti)，向微(wei)孔(kong)中(zhong)分(fen)別加入(ru)標(biao)準(zhun)品(pin)或標(biao)本(ben)，其(qi)中的雞膽(dan)囊(nang)收(shou)縮素A受(shou)體(ti)(CCKAR)與連(lian)接於固相(xiang)載體(ti)上的抗(kang)體結(jie)合，然(ran)後(hou)加入(ru)生(sheng)物(wu)素(su)化的雞膽(dan)囊(nang)收(shou)縮素A受(shou)體(ti)(CCKAR)抗(kang)體，將未結合(he)的生(sheng)物(wu)素(su)化抗體洗凈後(hou)，加入(ru)HRP標(biao)記(ji)的親(qin)和素，再(zai)次(ci)徹底洗滌(di)後(hou)加入(ru)TMB底物顯色(se)。TMB在(zai)過氧化物酶的催(cui)化下轉(zhuan)化成(cheng)藍色(se)，並在(zai)酸(suan)的作(zuo)用(yong)下轉(zhuan)化成(cheng)*終的黃(huang)色(se)。顏色(se)的深(shen)淺和樣(yang)品(pin)中的雞膽(dan)囊(nang)收(shou)縮素A受(shou)體(ti)(CCKAR)呈正相(xiang)關(guan)。用(yong)酶標(biao)儀(yi)在(zai)450nm波長(chang)下測(ce)定吸光(guang)度(O.D.值)，計算(suan)樣(yang)品(pin)濃(nong)度。

 試劑盒(he)內容(rong)

雞膽(dan)囊(nang)收(shou)縮素A受(shou)體(ti)(CCKAR)ELISA試劑盒(he)需自(zi)備(bei)的設備(bei)及(ji)試劑

1.         450±10nm濾(lv)光片(pian)的酶標(biao)儀(yi)(建議儀(yi)器(qi)使用(yong)前(qian)提(ti)前(qian)預(yu)熱(re))

2.         單(dan)道或多(duo)道微(wei)量(liang)加液(ye)器(qi)及(ji)吸頭(tou)

3.         稀(xi)釋樣(yang)品(pin)的EP管

4.         蒸餾水(shui)或(huo)去(qu)離(li)子(zi)水(shui)

5.         吸水(shui)紙(zhi)

6.         盛(sheng)放(fang)洗液(ye)的容(rong)器

 試劑盒(he)的儲存及(ji)有(you)效(xiao)期

1.         未開封的試劑盒(he)：所有(you)試劑均按(an)試劑瓶(ping)標(biao)簽(qian)上所(suo)示保存。請(qing)註意(yi)，收(shou)到試劑盒(he)後(hou)請(qing)盡快將TMB 洗滌(di)液(ye)，終止(zhi)液(ye)保(bao)存於(yu)4℃，其(qi)他試劑保(bao)存於(yu)-20℃。

2.         使(shi)用(yong)後(hou)的試劑盒(he)：剩(sheng)余(yu)試劑仍需按照試劑瓶(ping)標(biao)簽(qian)所(suo)示的溫(wen)度保存，開封後(hou)的酶標(biao)板(ban)要(yao)加幹燥劑(ji)後(hou)密封保(bao)存於(yu)-20℃，避(bi)免潮濕。

註(zhu)意(yi)：

試劑盒(he)內酶標(biao)條(tiao)可(ke)拆(chai)卸，按實(shi)驗需求可(ke)分(fen)多次(ci)使(shi)用(yong)；使用(yong)後(hou)的剩(sheng)余(yu)試劑盒(he)建議在(zai)**實(shi)驗後(hou) 1個月(yue)內使用(yong)完畢。產品(pin)過期時(shi)間(jian)以(yi)盒(he)子上的標(biao)簽(qian)為(wei)準，保(bao)質(zhi)期內所有(you)組(zu)分(fen)都確保(bao)是(shi)穩定的。

雞膽(dan)囊(nang)收(shou)縮素A受(shou)體(ti)(CCKAR)ELISA試劑盒(he)標(biao)本(ben)的采(cai)集與保存

1.         血(xue)清(qing)：

將收(shou)集於(yu)血清(qing)分(fen)離(li)管的全(quan)血(xue)標(biao)本(ben)在(zai)室(shi)溫(wen)放(fang)置 2 小時(shi)或(huo) 4^oC 過夜(ye)，然(ran)後(hou) 1000×g 離(li)心(xin) 20 分(fen)鐘，取上清(qing)即可，或(huo)將上清(qing)置於-20^oC 或(huo)-80^oC 保(bao)存，但(dan)應(ying)避免反(fan)復凍融(rong)。

2.         血(xue)漿(jiang)：

用(yong) EDTA 或肝(gan)素作(zuo)為抗(kang)凝劑(ji)采集標(biao)本(ben)，並將標(biao)本(ben)在(zai)采(cai)集後(hou)的 30 分(fen)鐘內於 2-8^oC 1000×g 離(li)心(xin) 15 分(fen)鐘，取上清(qing)即可檢(jian)測(ce)，或將上清(qing)置於-20^oC 或(huo)-80^oC 保(bao)存，但(dan)應(ying)避免反(fan)復凍融(rong)。

3. 組(zu)織勻漿(jiang)：

1） 取適量(liang)組(zu)織塊，於預冷(leng)PBS（0.01mol/L, pH 7.0-7.2）中清(qing)洗去除血(xue)液(ye)，稱(cheng)重後(hou)備(bei)用(yong)（組(zu)織塊較大(da)需先剪碎後(hou)再(zai)勻(yun)漿(jiang)）；

2） 可(ke)同時(shi)選(xuan)用(yong)多種勻漿(jiang)方法達(da)到較好的破(po)碎效果：首先將組(zu)織塊移入(ru)玻璃勻漿(jiang)器，加入(ru)5-10mL 預(yu)冷(leng)PBS 進(jin)行(xing)充(chong)分(fen)研磨(mo)，該(gai)過程(cheng)需在(zai)冰(bing)上進(jin)行(xing)（有(you)條(tiao)件(jian)實(shi)驗室可選(xuan)用(yong)機(ji)器(qi)勻(yun)漿(jiang)）；得到的勻(yun)漿(jiang)液(ye)可(ke)再利用(yong)超(chao)聲(sheng)破(po)碎或反(fan)復凍融(rong) 進(jin)壹步(bu)處(chu)理(li)（超(chao)聲(sheng)破(po)碎過程(cheng)中(zhong)註(zhu)意(yi)冰(bing)浴(yu)降溫(wen)；反(fan)復凍融(rong)法可(ke)重復2 次(ci)）。

3） 將制(zhi)備(bei)好的勻(yun)漿(jiang)液(ye)於(yu)5000×g 離(li)心(xin)5 分(fen)鐘，留(liu)取上清(qing)即可檢(jian)測(ce)。

4. 細(xi)胞裂(lie)解(jie)液(ye)：

1）貼(tie)壁細(xi)胞需要先(xian)用(yong)胰(yi)酶消(xiao)化，離(li)心(xin)收(shou)集細(xi)胞（懸(xuan)浮細(xi)胞可(ke)直(zhi)接(jie)離(li)心(xin)收(shou)集）；

2）將收(shou)集到的細(xi)胞用(yong)冷(leng)PBS 洗3 次(ci)；

3）物(wu)理(li)方法裂(lie)解(jie)細(xi)胞（可(ke)先(xian)超(chao)聲(sheng)破(po)碎細(xi)胞，再(zai)反(fan)復凍融(rong)）：

i 超(chao)聲(sheng)破(po)碎：取適量(liang)PBS 重(zhong)懸細(xi)胞，用(yong)壹定功(gong)率(lv)的超(chao)聲(sheng)波處(chu)理(li)細(xi)胞懸(xuan)液(ye)，使(shi)細(xi)胞急(ji)劇震蕩破(po)裂(lie)。

ii 反(fan)復凍融(rong)：將待破(po)碎的細(xi)胞在(zai)-20 ^oC 以(yi)下(xia)冰(bing)凍，室(shi)溫(wen)融(rong)解(jie)，反(fan)復3 次(ci)，使(shi)細(xi)胞溶脹破(po)碎。

4）將標(biao)本(ben)於(yu)2-8 ^oC 1500×g 離(li)心(xin)10 分(fen)鐘，收(shou)集上清(qing)備(bei)用(yong)。

5. 細(xi)胞培(pei)養(yang)上清(qing)或其(qi)它生(sheng)物(wu)標(biao)本(ben)：

請(qing) 1000×g 離(li)心(xin) 20 分(fen)鐘，取上清(qing)即可檢(jian)測(ce)，或將上清(qing)置於-20^oC 或(huo)-80^oC 保(bao)存，但(dan)應(ying)避免反(fan)復凍融(rong)。

註(zhu)意(yi)：

1.         以(yi)上標(biao)本(ben)均需密封保(bao)存，4^oC保(bao)存應(ying)小(xiao)於1周(zhou)，-20^oC不應(ying)超(chao)過1個月(yue)，-80^oC不應(ying)超(chao)過2個月(yue)。

2.         標(biao)本(ben)使(shi)用(yong)前(qian)應(ying)緩(huan)慢(man)均衡(heng)至室(shi)溫(wen)，不應(ying)加熱(re)使(shi)之(zhi)融(rong)解(jie)。

3.         實(shi)驗前(qian)紅細(xi)胞裂(lie)解(jie)液(ye)必(bi)須用(yong)標(biao)準(zhun)品(pin)稀釋液(ye)稀(xi)釋。

雞膽(dan)囊(nang)收(shou)縮素A受(shou)體(ti)(CCKAR)ELISA試劑盒(he)試劑準(zhun)備(bei)

1.         使(shi)用(yong)前(qian)將所有(you)的試劑和標(biao)本(ben)緩(huan)慢(man)均衡(heng)至室(shi)溫(wen)(18-25oC)，試劑不能(neng)直(zhi)接(jie)在(zai)37oC溶解(jie)。

2.         標(biao)準(zhun)品(pin)(凍幹品(pin))：每(mei)瓶(ping)標(biao)準(zhun)品(pin)加入(ru)標(biao)準(zhun)品(pin)稀釋液(ye)1mL，蓋(gai)好後(hou)室(shi)溫(wen)靜(jing)置大約(yue)10分(fen)鐘，同時(shi)反(fan)復顛倒(dao)/搓動(dong)以(yi)助(zhu)溶解(jie)，其(qi)濃(nong)度為20ng/mL。準(zhun)備(bei)7個稀釋標(biao)準(zhun)品(pin)的EP管，每(mei)個EP管中加入(ru)150μL的標(biao)準(zhun)品(pin)稀釋液(ye)，如(ru)圖所(suo)示(shi)依次(ci)倍(bei)比稀釋(shi)成(cheng)不同的梯度， 標(biao)準(zhun)品(pin)稀釋液(ye)(0pg/mL)直(zhi)接作(zuo)為空(kong)白孔(kong)。為保證(zheng)實(shi)驗結果有(you)效(xiao)性，每(mei)次(ci)實(shi)驗請(qing)使用(yong)新(xin)的標(biao)準(zhun)品(pin)溶液(ye)。

3.         濃(nong)洗滌(di)液(ye)：用(yong)580mL蒸餾水(shui)或(huo)去(qu)離(li)子(zi)水(shui)將20mL濃(nong)洗滌(di)液(ye)稀(xi)釋至600mL，進(jin)行(xing)30倍稀(xi)釋(shi)。

標(biao)本(ben)處(chu)理(li)

1.         本(ben)公(gong)司(si)只對(dui)試劑盒(he)本身(shen)負(fu)責，不對(dui)因使(shi)用(yong)該試劑盒(he)所造成(cheng)的樣(yang)本(ben)消(xiao)耗負(fu)責，請(qing)使用(yong)者(zhe)使用(yong)前(qian)充(chong)分(fen)考慮到樣(yang)本(ben)的可(ke)能使(shi)用(yong)量，預留(liu)充(chong)足(zu)的樣(yang)本(ben)。

2.         實(shi)驗前(qian)應(ying)預(yu)測(ce)標(biao)本(ben)含(han)量，如(ru)果標(biao)本(ben)濃(nong)度過高(gao)，應對(dui)標(biao)本(ben)進(jin)行(xing)稀釋(shi)，使(shi)稀(xi)釋後(hou)的標(biao)本(ben)符(fu)合試劑盒(he)的檢(jian)測(ce)範圍(wei)，計算(suan)時(shi)再(zai)乘以(yi)相(xiang)應(ying)的稀(xi)釋倍(bei)數。

3.         若(ruo)所檢(jian)樣(yang)本(ben)不包(bao)含(han)在(zai)說(shuo)明書所(suo)列樣(yang)本(ben)之(zhi)中(zhong)，建議進(jin)行(xing)預實(shi)驗驗證(zheng)其(qi)有(you)效(xiao)性，並註意(yi)留(liu)存樣(yang)本(ben)。

4.         使(shi)用(yong)化學裂(lie)解(jie)液(ye)制(zhi)備(bei)的組(zu)織勻漿(jiang)或細(xi)胞提(ti)取液(ye)可(ke)能會(hui)由於某(mou)些化學物(wu)質的引(yin)入(ru)導致  ELISA實驗結果偏差。

5.         若(ruo)樣(yang)本(ben)為(wei)細(xi)胞培(pei)養(yang)上清(qing)，因該(gai)類(lei)樣(yang)本(ben)幹擾因素(su) 較多(duo)，如(ru)：細(xi)胞狀態、細(xi)胞數量、采樣(yang)時(shi)間(jian)等，所以(yi)可(ke)能(neng)存在(zai)檢(jian)測(ce)不出(chu)的情(qing)況。

6.         某(mou)些天(tian)然(ran)蛋白或(huo)重組(zu)蛋白，包(bao)括(kuo)原(yuan)核(he)及(ji)真(zhen)核(he)重組(zu)蛋白，可(ke)能因為(wei)與本產(chan)品(pin)所使用(yong)的檢(jian)測(ce)抗體(ti)及(ji)捕(bu)獲(huo)抗體(ti)不匹(pi)配(pei)，而(er)不被檢(jian)測(ce)出。

7.         建議使用(yong)新(xin)鮮(xian)樣(yang)本(ben)，保(bao)存時(shi)間(jian)過長(chang)可能(neng)會(hui)存在(zai)蛋白降解(jie)或(huo)變性導致實驗結果偏差。

雞膽(dan)囊(nang)收(shou)縮素A受(shou)體(ti)(CCKAR)ELISA試劑盒(he)操作(zuo)步驟(zhou)

1.         加樣(yang)：分(fen)別設空白孔（空(kong)白(bai)對(dui)照孔不加樣(yang)品(pin)及(ji)酶標(biao)試劑，其(qi)余各(ge)步(bu)操作(zuo)相(xiang)同）、標(biao)準(zhun)孔(kong)、待測(ce)樣(yang)品(pin)孔。在(zai)酶標(biao)包(bao)被板上標(biao)準(zhun)品(pin)準確加樣(yang)50μl，待測(ce)樣(yang)品(pin)孔中先(xian)加樣(yang)品(pin)稀釋液(ye)40μl，然(ran)後(hou)再(zai)加待測(ce)樣(yang)品(pin)10μl（樣(yang)品(pin)*終稀(xi)釋(shi)度為5倍(bei)）。加樣(yang)將樣(yang)品(pin)加於(yu)酶標(biao)板(ban)孔(kong)底部(bu)，盡量不觸(chu)及(ji)孔(kong)壁，輕(qing)輕晃(huang)動(dong)混(hun)勻。

2.         溫(wen)育(yu)：用(yong)封板(ban)膜(mo)封板(ban)後(hou)置37℃溫(wen)育(yu)30分(fen)鐘。  

3.         配(pei)液(ye)：將20倍濃(nong)縮洗滌(di)液(ye)用(yong)蒸餾水(shui)20倍(bei)稀(xi)釋後(hou)備(bei)用(yong)

4.         洗滌(di)：小心(xin)揭掉封板(ban)膜(mo)，棄(qi)去(qu)液(ye)體(ti)，甩幹，每(mei)孔(kong)加滿洗滌(di)液(ye)，靜(jing)置30秒後(hou)棄(qi)去(qu)，如(ru)此重復5次(ci)，拍(pai)幹。

5.         加酶：每(mei)孔(kong)加入(ru)酶標(biao)試劑50μl，空(kong)白孔(kong)除(chu)外(wai)。

6.         溫(wen)育(yu)：操作(zuo)同3。

7.         洗滌(di)：操作(zuo)同5。

8.         顯色(se)：每(mei)孔(kong)先(xian)加入(ru)顯色(se)劑A50μl，再加入(ru)顯色(se)劑B50μl，輕輕震(zhen)蕩(dang)混(hun)勻，37℃避(bi)光顯色(se)15分(fen)鐘.

9.         終止(zhi)：每(mei)孔(kong)加終止(zhi)液(ye)50μl，終止(zhi)反(fan)應（此時(shi)藍色(se)立(li)轉(zhuan)黃色(se)）。

10.     測(ce)定：以(yi)空(kong)白(bai)空(kong)調零，450nm波長(chang)依序測(ce)量各(ge)孔(kong)的吸光(guang)度（OD值）。 測(ce)定應在(zai)加終止(zhi)液(ye)後(hou)15分(fen)鐘以(yi)內進(jin)行(xing)。

註(zhu)意(yi)：

1.         試劑準(zhun)備(bei)：準(zhun)備(bei)壹(yi)次(ci)實(shi)驗所需要的酶標(biao)條(tiao)，其(qi)它的可(ke)從微(wei)孔(kong)板(ban)上拆(chai)下，密封，按(an)照說(shuo)明書要(yao)求保(bao)存，以(yi)備(bei)下(xia)次(ci)使(shi)用(yong)。

2.         加樣(yang)：實(shi)驗操作(zuo)中請(qing)使用(yong)壹次(ci)性的吸頭(tou)，避(bi)免交叉(cha)汙染。加樣(yang)時(shi)註(zhu)意(yi)不要(yao)有(you)氣泡，將樣(yang)品(pin)加於(yu)酶標(biao)板(ban)底部(bu)，盡量不觸(chu)及(ji)孔(kong)壁，輕(qing)輕晃(huang)動(dong)混(hun)勻。加樣(yang)或(huo)加試劑時(shi)，**個孔與*後(hou)壹(yi)個孔加樣(yang)之(zhi)間(jian)的時(shi)間(jian)間(jian)隔如(ru)果太大，將會導致不同的“預(yu)溫(wen)育(yu)”時(shi)間(jian)，從而(er)明顯地影(ying)響(xiang)到測(ce)量值(zhi)的準(zhun)確性及(ji)重(zhong)復性。因此，壹次(ci)加樣(yang)時(shi)間(jian)(包(bao)括(kuo)標(biao)準(zhun)品(pin)及(ji)所(suo)有(you)樣(yang)品(pin))*好控(kong)制(zhi)在(zai)10分(fen)鐘內。推薦設置復孔(kong)進(jin)行(xing)實驗。

3.          溫(wen)育(yu)：為(wei)防止(zhi)樣(yang)品(pin)蒸發(fa)，實驗時(shi)請(qing)將加上蓋(gai)或覆(fu)膜(mo)的酶標(biao)板(ban)置於濕(shi)盒(he)內，以(yi)避(bi)免液(ye)體(ti)蒸發(fa)，洗板後(hou)應(ying)盡(jin)快進(jin)行(xing)下步(bu)操作(zuo)，任(ren)何(he)時(shi)侯都應避(bi)免酶標(biao)板(ban)處(chu)於(yu)幹燥狀態，同時(shi)應(ying)嚴格遵(zun)守給定的溫(wen)育(yu)時(shi)間(jian)和溫(wen)度。

4.         洗滌(di)：充(chong)分(fen)的洗滌(di)非常重(zhong)要，在(zai)每(mei)次(ci)洗滌(di)過程(cheng)中(zhong)，都要將洗滌(di)液(ye)完(wan)全(quan)甩(shuai)幹。洗滌(di)過程(cheng)中(zhong)反(fan)應孔中殘留(liu)的洗滌(di)液(ye)應(ying)在(zai)濾(lv)紙(zhi)上拍(pai)幹，勿將濾紙(zhi)直(zhi)接(jie)放(fang)入(ru)反(fan)應孔中吸水(shui)，同時(shi)要(yao)消(xiao)除板(ban)底殘留(liu)的液(ye)體(ti)和手(shou)指(zhi)印(yin)，避(bi)免影(ying)響(xiang)*後(hou)的酶標(biao)儀(yi)讀(du)數。如果有(you)自(zi)動(dong)洗板機(ji)，應(ying)在(zai)熟(shu)練(lian)使(shi)用(yong)後(hou)再(zai)用(yong)到正式實 驗過程(cheng)中(zhong)。

5.         反(fan)應時(shi)間(jian)的控(kong)制(zhi)：加入(ru)底物後(hou)請(qing)定時(shi)觀(guan)察(cha)反(fan)應孔的顏(yan)色(se)變化(比如，每(mei)隔(ge)10分(fen)鐘觀察(cha)壹次(ci))，如(ru)顏色(se)較深(shen)，請(qing)提前(qian)加入(ru)終止(zhi)液(ye)終止(zhi)反(fan)應，避免反(fan)應過強(qiang)從而(er)影(ying)響(xiang)酶標(biao)儀(yi)光(guang)密度讀數。

6.         底物：底物請(qing)避光(guang)保(bao)存，在(zai)儲存和溫(wen)育(yu)時(shi)避(bi)免強(qiang)光直(zhi)接(jie)照射。

7.         如(ru)果實驗室內濕度低於(yu)60%，推(tui)薦使用(yong)加濕(shi)器(qi)提高(gao)濕度水(shui)平(ping)。

 實(shi)驗流程(cheng)

1.         實(shi)驗前(qian)標(biao)準(zhun)品(pin)、試劑及(ji)樣(yang)本(ben)的準(zhun)備(bei)；

2.         加樣(yang)（標(biao)準(zhun)品(pin)及(ji)樣(yang)本(ben)）50μL，37℃孵育(yu)30分(fen)鐘；

3.         洗板5次(ci)，加酶標(biao)試劑50ul，37℃孵育(yu)半(ban)小時(shi)；

4.         洗板5次(ci)；加入(ru)顯色(se)液(ye)A，B各(ge)50ul,37℃孵育(yu)顯色(se)15分(fen)鐘

5.         加終止(zhi)液(ye)50μL，立(li)即450nm讀數。

6.    計算(suan)

雞膽(dan)囊(nang)收(shou)縮素A受(shou)體(ti)(CCKAR)ELISA試劑盒(he)計算(suan)

各(ge)標(biao)準(zhun)品(pin)及(ji)樣(yang)本(ben)O.D.值(zhi)扣(kou)除(chu)空白孔O.D.值(zhi)後(hou)作(zuo)圖(七(qi)點圖(tu))，如設置復孔(kong)，則(ze)應取其(qi)平均值(zhi)計算(suan)。以(yi)標(biao)準(zhun)品(pin)的濃(nong)度為縱坐標(biao)(或(huo)對(dui)數坐標(biao))，O.D.值(zhi)為(wei)橫(heng)坐標(biao)(或(huo)對(dui)數坐標(biao)），繪(hui)出(chu)標(biao)準(zhun)曲線(xian)(*佳(jia)方程(cheng)式(shi)應(ying)依回(hui)歸(gui)方程(cheng)計算(suan)的R2值(zhi)來定，以(yi)R2值(zhi)越(yue)趨(qu)近於(yu)1為好)。推薦使用(yong)專業(ye)制(zhi)作(zuo)曲線(xian)軟(ruan)件(jian)進(jin)行(xing)分(fen)析，如(ru)curve expert 1.30，根(gen)據樣(yang)品(pin)O.D.值，由標(biao)準(zhun)曲線(xian)查(zha)出(chu)相(xiang)應(ying)的濃(nong)度，乘以(yi)稀(xi)釋(shi)倍(bei)數；或用(yong)標(biao)準(zhun)物(wu)的濃(nong)度與O.D.值計算(suan)出標(biao)準(zhun)曲線(xian)的回(hui)歸(gui)方程(cheng)式(shi)，將樣(yang)品(pin)的O.D.值(zhi)代(dai)入方程(cheng)式(shi)，計算(suan)出樣(yang)品(pin)濃(nong)度，再乘以(yi)稀(xi)釋(shi)倍(bei)數，即為樣(yang)品(pin)的實(shi)際濃(nong)度。

 特(te)異性

本(ben)試劑盒(he)用(yong)於檢(jian)測(ce)雞膽(dan)囊(nang)收(shou)縮素A受(shou)體(ti)(CCKAR)，經檢(jian)測(ce)與其(qi)它相(xiang)似(si)物(wu)質無(wu)明顯交叉(cha)反(fan)應。

由於受(shou)到技術及(ji)樣(yang)本(ben)來源(yuan)的限(xian)制(zhi)，不可(ke)能(neng)完(wan)成(cheng)對(dui)所有(you)相(xiang)關(guan)或相(xiang)似(si)物(wu)質交叉(cha)反(fan)應檢(jian)測(ce)，因此本試劑盒(he)有(you)可(ke)能(neng)與未經檢(jian)測(ce)的其(qi)它物質(zhi)有(you)交(jiao)叉(cha)反(fan)應。

 精(jing)密度

精(jing)密度用(yong)樣(yang)品(pin)測(ce)定值的變(bian)異系(xi)數CV表(biao)示。CV(%) = SD/mean×100

批(pi)內差：取同批(pi)次(ci)試劑盒(he)對(dui)低、中(zhong)、高(gao)值定值樣(yang)本(ben)進(jin)行(xing)定量檢(jian)測(ce),每(mei)份樣(yang)本(ben)連(lian)續測(ce)定20 次(ci)，分(fen)別計算(suan)不同濃(nong)度樣(yang)本(ben)的平(ping)均值(zhi)及(ji)SD值(zhi)。

批(pi)間(jian)差：選(xuan)取3個不同批(pi)次(ci)的試劑盒(he)分(fen)別對(dui)低、中(zhong)、高(gao)值定值樣(yang)本(ben)進(jin)行(xing)定量測(ce)定，每(mei)個樣(yang)本(ben)使(shi)用(yong)同壹試劑盒(he)重復測(ce)定8次(ci)，分(fen)別計算(suan)不同濃(nong)度樣(yang)本(ben)的平(ping)均值(zhi)及(ji)SD值(zhi)。

批(pi)內差： CV<10%

批(pi)間(jian)差： CV<12%

雞膽(dan)囊(nang)收(shou)縮素A受(shou)體(ti)(CCKAR)ELISA試劑盒(he)穩定性

經(jing)測(ce)定，試劑盒(he)在(zai)有(you)效(xiao)期內按推(tui)薦溫(wen)度保存，其(qi)活性降低率(lv)小(xiao)於(yu)5%。

為(wei)減小(xiao)外(wai)部(bu)因素(su)對(dui)試劑盒(he)破(po)壞(huai)前(qian)後(hou)檢(jian)測(ce)值的影(ying)響(xiang)，實驗室的環(huan)境條(tiao)件(jian)需盡量(liang)保持(chi)壹(yi)致，尤其(qi)是(shi)實驗室內溫(wen)度、濕度及(ji)溫(wen)育(yu)條(tiao)件(jian)。其(qi)次(ci)由同壹實驗員來進(jin)行(xing)操作(zuo)可減(jian)少(shao)人(ren)為誤(wu)差(cha)。