產品名(ming)稱(cheng)：雞(ji)幹擾素(su)β(IFNβ)ELISA試(shi)劑盒

                                                       96T       僅供體外(wai)研究(jiu)使(shi)用(yong)，不用(yong)於臨床(chuang)診(zhen)斷!

雞(ji)幹擾素(su)β(IFNβ)ELISA試(shi)劑盒

本試劑(ji)盒運用(yong)雙抗(kang)體夾心(xin)ELISA法定(ding)量(liang)測(ce)定(ding)雞(ji)血(xue)清(qing)、血(xue)漿(jiang)、組織勻漿(jiang)、細(xi)胞(bao)裂(lie)解液、細(xi)胞(bao)培養上清(qing)液和(he)其(qi)他(ta)生(sheng)物液體(ti)中雞(ji)幹擾素(su)β(IFNβ)含(han)量(liang)。

 檢(jian)測範(fan)圍(wei)

15.625-1000pg/mL

 *低檢測(ce)限

5.7pg/mL

 實驗(yan)原(yuan)理

將雞(ji)幹擾素(su)β(IFNβ)抗(kang)體包被(bei)於96孔(kong)微(wei)孔(kong)板(ban)中，制成固(gu)相(xiang)載(zai)體(ti)，向(xiang)微(wei)孔(kong)中分別(bie)加(jia)入(ru)標(biao)準品或(huo)標本，其(qi)中的(de)雞(ji)幹擾素(su)β(IFNβ)與連(lian)接(jie)於固(gu)相(xiang)載(zai)體(ti)上的抗(kang)體結合，然後(hou)加(jia)入(ru)生(sheng)物素化的雞(ji)幹擾素(su)β(IFNβ)抗(kang)體，將未結合的生(sheng)物素化抗(kang)體洗(xi)凈後(hou)，加(jia)入(ru)HRP標(biao)記的親(qin)和(he)素(su)，再次(ci)徹(che)底洗(xi)滌後(hou)加(jia)入(ru)TMB底物顯色。TMB在(zai)過氧(yang)化物酶的(de)催(cui)化下轉化成藍(lan)色，並在酸的(de)作(zuo)用(yong)下轉(zhuan)化成*終(zhong)的(de)黃(huang)色。顏(yan)色的(de)深淺(qian)和(he)樣品中的(de)雞(ji)幹擾素(su)β(IFNβ)呈(cheng)正相(xiang)關。用(yong)酶標(biao)儀(yi)在450nm波(bo)長(chang)下測(ce)定(ding)吸(xi)光(guang)度(du)(O.D.值)，計(ji)算(suan)樣品濃(nong)度(du)。

 試(shi)劑盒內容

雞(ji)幹擾素(su)β(IFNβ)ELISA試(shi)劑盒需(xu)自(zi)備(bei)的設(she)備(bei)及試(shi)劑

1.         450±10nm濾(lv)光(guang)片的酶標(biao)儀(yi)(建(jian)議(yi)儀(yi)器(qi)使(shi)用(yong)前提(ti)前(qian)預(yu)熱)

2.         單(dan)道(dao)或(huo)多道(dao)微(wei)量(liang)加(jia)液器(qi)及(ji)吸頭(tou)

3.         稀(xi)釋樣品的(de)EP管(guan)

4.         蒸(zheng)餾(liu)水或(huo)去(qu)離子水

5.         吸(xi)水紙

6.         盛(sheng)放洗(xi)液的(de)容器(qi)

 試(shi)劑盒的儲(chu)存(cun)及(ji)有(you)效(xiao)期

1.         未開封(feng)的試(shi)劑盒：所(suo)有試(shi)劑(ji)均按(an)試劑瓶標(biao)簽上所(suo)示(shi)保(bao)存(cun)。請(qing)註意，收(shou)到試劑盒後請(qing)盡快(kuai)將TMB 洗(xi)滌液，終(zhong)止(zhi)液保(bao)存(cun)於(yu)4℃，其(qi)他(ta)試(shi)劑(ji)保(bao)存(cun)於(yu)-20℃。

2.         使(shi)用(yong)後的(de)試(shi)劑(ji)盒：剩(sheng)余試劑(ji)仍(reng)需(xu)按(an)照(zhao)試劑(ji)瓶標(biao)簽所(suo)示(shi)的(de)溫(wen)度(du)保(bao)存(cun)，開(kai)封(feng)後的(de)酶標(biao)板(ban)要(yao)加(jia)幹燥(zao)劑後(hou)密封(feng)保(bao)存(cun)於(yu)-20℃，避(bi)免(mian)潮(chao)濕(shi)。

註意：

試(shi)劑盒內酶標(biao)條可(ke)拆(chai)卸(xie)，按(an)實驗(yan)需(xu)求(qiu)可(ke)分多次(ci)使(shi)用(yong)；使(shi)用(yong)後的(de)剩(sheng)余試劑(ji)盒建(jian)議(yi)在(zai)**實驗(yan)後(hou) 1個月(yue)內使(shi)用(yong)完畢。產品過期時(shi)間(jian)以盒子上的標簽為(wei)準(zhun)，保(bao)質(zhi)期內所(suo)有組(zu)分都確(que)保(bao)是(shi)穩(wen)定(ding)的(de)。

雞(ji)幹擾素(su)β(IFNβ)ELISA試(shi)劑盒標本的采集(ji)與保(bao)存(cun)

1.         血(xue)清(qing)：

將收(shou)集(ji)於(yu)血(xue)清(qing)分離管(guan)的全(quan)血(xue)標(biao)本在室(shi)溫(wen)放置 2 小(xiao)時(shi)或(huo) 4^oC 過夜，然後(hou) 1000×g 離心 20 分鐘(zhong)，取上清(qing)即(ji)可(ke)，或(huo)將上清(qing)置於(yu)-20^oC 或(huo)-80^oC 保(bao)存(cun)，但應(ying)避免反復凍融(rong)。

2.         血(xue)漿(jiang)：

用(yong) EDTA 或(huo)肝素作(zuo)為抗(kang)凝劑(ji)采集(ji)標(biao)本，並將標本在采集(ji)後(hou)的(de) 30 分鐘(zhong)內於 2-8^oC 1000×g 離心 15 分鐘(zhong)，取上清(qing)即(ji)可(ke)檢測(ce)，或(huo)將上清(qing)置於(yu)-20^oC 或(huo)-80^oC 保(bao)存(cun)，但應(ying)避免反復凍融(rong)。

3. 組(zu)織勻(yun)漿(jiang)：

1） 取(qu)適量(liang)組織(zhi)塊(kuai)，於(yu)預(yu)冷(leng)PBS（0.01mol/L, pH 7.0-7.2）中清(qing)洗(xi)去(qu)除(chu)血(xue)液，稱(cheng)重(zhong)後備(bei)用(yong)（組織(zhi)塊(kuai)較(jiao)大(da)需(xu)先剪碎後再勻漿）；

2） 可(ke)同(tong)時(shi)選用(yong)多種勻(yun)漿方法達(da)到較好的破(po)碎效(xiao)果：首(shou)先將組織(zhi)塊(kuai)移(yi)入(ru)玻(bo)璃勻(yun)漿器(qi)，加(jia)入(ru)5-10mL 預(yu)冷(leng)PBS 進(jin)行充分研磨，該(gai)過程(cheng)需(xu)在(zai)冰上進(jin)行（有條件(jian)實驗(yan)室(shi)可(ke)選用(yong)機(ji)器(qi)勻(yun)漿）；得(de)到的勻漿液可(ke)再利(li)用(yong)超聲(sheng)破(po)碎或(huo)反復(fu)凍(dong)融(rong) 進(jin)壹(yi)步(bu)處(chu)理（超(chao)聲(sheng)破(po)碎過程(cheng)中註意冰(bing)浴降溫(wen)；反復凍(dong)融(rong)法可(ke)重復(fu)2 次(ci)）。

3） 將制備(bei)好的(de)勻漿(jiang)液於(yu)5000×g 離心5 分鐘(zhong)，留取上清(qing)即(ji)可(ke)檢測(ce)。

4. 細(xi)胞(bao)裂(lie)解液：

1）貼(tie)壁細(xi)胞(bao)需(xu)要(yao)先用(yong)胰酶消化，離心收(shou)集(ji)細(xi)胞(bao)（懸浮(fu)細(xi)胞(bao)可(ke)直接(jie)離心收(shou)集(ji)）；

2）將收(shou)集(ji)到的細(xi)胞(bao)用(yong)冷PBS 洗(xi)3 次(ci)；

3）物理方(fang)法裂(lie)解細(xi)胞(bao)（可(ke)先超聲(sheng)破(po)碎細(xi)胞(bao)，再反復凍融(rong)）：

i 超(chao)聲(sheng)破(po)碎：取適量(liang)PBS 重懸(xuan)細(xi)胞(bao)，用(yong)壹定(ding)功率(lv)的(de)超聲(sheng)波處(chu)理細(xi)胞(bao)懸液，使(shi)細(xi)胞(bao)急劇震(zhen)蕩破(po)裂(lie)。

ii 反(fan)復凍(dong)融(rong)：將待破(po)碎的細(xi)胞(bao)在-20 ^oC 以(yi)下冰(bing)凍(dong)，室(shi)溫(wen)融(rong)解，反(fan)復(fu)3 次(ci)，使(shi)細(xi)胞(bao)溶(rong)脹(zhang)破(po)碎。

4）將標本於2-8 ^oC 1500×g 離心10 分鐘(zhong)，收(shou)集(ji)上清(qing)備(bei)用(yong)。

5. 細(xi)胞(bao)培養上清(qing)或(huo)其(qi)它生(sheng)物標本：

請(qing) 1000×g 離心 20 分鐘(zhong)，取上清(qing)即(ji)可(ke)檢測(ce)，或(huo)將上清(qing)置於(yu)-20^oC 或(huo)-80^oC 保(bao)存(cun)，但應(ying)避免反復凍融(rong)。

註意：

1.         以(yi)上標本均需(xu)密封(feng)保(bao)存(cun)，4^oC保(bao)存(cun)應(ying)小於1周，-20^oC不(bu)應(ying)超過1個月(yue)，-80^oC不應(ying)超過2個月(yue)。

2.         標(biao)本使(shi)用(yong)前應(ying)緩慢(man)均衡至室(shi)溫(wen)，不應(ying)加(jia)熱使(shi)之(zhi)融(rong)解。

3.         實驗(yan)前(qian)紅細(xi)胞(bao)裂(lie)解液必須用(yong)標準(zhun)品稀(xi)釋液稀(xi)釋。

雞(ji)幹擾素(su)β(IFNβ)ELISA試(shi)劑盒試劑(ji)準備(bei)

1.         使(shi)用(yong)前將所(suo)有的(de)試(shi)劑(ji)和(he)標(biao)本緩慢(man)均衡至室(shi)溫(wen)(18-25oC)，試劑不(bu)能(neng)直接(jie)在37oC溶(rong)解。

2.         標(biao)準品(凍(dong)幹品)：每瓶標準(zhun)品加(jia)入(ru)標(biao)準品稀(xi)釋液1mL，蓋(gai)好(hao)後室(shi)溫(wen)靜置大(da)約(yue)10分鐘(zhong)，同(tong)時(shi)反(fan)復(fu)顛(dian)倒(dao)/搓(cuo)動(dong)以助溶(rong)解，其(qi)濃(nong)度(du)為1000pg/mL。準(zhun)備(bei)7個稀(xi)釋標準品的(de)EP管(guan)，每個EP管(guan)中加(jia)入(ru)150μL的(de)標準品稀(xi)釋液，如(ru)圖(tu)所(suo)示(shi)依次(ci)倍比(bi)稀(xi)釋成不(bu)同(tong)的梯度(du)， 標準(zhun)品稀(xi)釋液(0pg/mL)直接(jie)作(zuo)為空(kong)白(bai)孔。為保(bao)證(zheng)實驗(yan)結(jie)果有效(xiao)性，每次(ci)實驗(yan)請(qing)使(shi)用(yong)新的標(biao)準品溶(rong)液。

3.         濃(nong)洗(xi)滌液：用(yong)580mL蒸(zheng)餾(liu)水或(huo)去(qu)離子水將20mL濃(nong)洗(xi)滌液稀(xi)釋至600mL，進(jin)行30倍稀(xi)釋。

標(biao)本處(chu)理

1.         本公司(si)只(zhi)對(dui)試(shi)劑(ji)盒本身負(fu)責，不(bu)對(dui)因使(shi)用(yong)該(gai)試(shi)劑(ji)盒所(suo)造(zao)成的(de)樣本消耗負(fu)責，請(qing)使(shi)用(yong)者使(shi)用(yong)前充(chong)分考(kao)慮(lv)到樣本的可(ke)能(neng)使(shi)用(yong)量，預(yu)留(liu)充足的(de)樣本。

2.         實驗(yan)前(qian)應(ying)預(yu)測(ce)標本含(han)量(liang)，如(ru)果(guo)標(biao)本濃(nong)度(du)過高，應(ying)對標本進(jin)行稀(xi)釋，使(shi)稀(xi)釋後的標本符合試劑(ji)盒的檢(jian)測範(fan)圍(wei)，計(ji)算(suan)時(shi)再乘(cheng)以(yi)相(xiang)應(ying)的稀(xi)釋倍數(shu)。

3.         若(ruo)所(suo)檢樣本不包(bao)含(han)在(zai)說(shuo)明書所(suo)列樣本之中，建(jian)議(yi)進(jin)行預(yu)實驗(yan)驗(yan)證(zheng)其(qi)有效(xiao)性，並註意留(liu)存(cun)樣本。

4.         使(shi)用(yong)化學裂(lie)解液制備(bei)的組(zu)織勻(yun)漿或(huo)細(xi)胞(bao)提取(qu)液可(ke)能(neng)會由(you)於(yu)某些化學物質的(de)引入(ru)導(dao)致(zhi)  ELISA實驗(yan)結(jie)果偏差。

5.         若(ruo)樣本為細(xi)胞(bao)培養上清(qing)，因該(gai)類(lei)樣本幹擾因素 較(jiao)多，如(ru)：細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態、細(xi)胞(bao)數(shu)量、采樣時(shi)間(jian)等，所(suo)以可(ke)能(neng)存(cun)在(zai)檢(jian)測(ce)不(bu)出(chu)的(de)情況。

6.         某些天(tian)然蛋白(bai)或(huo)重組(zu)蛋(dan)白(bai)，包括(kuo)原(yuan)核及(ji)真(zhen)核重(zhong)組(zu)蛋(dan)白(bai)，可(ke)能(neng)因為與本產品所(suo)使(shi)用(yong)的檢(jian)測(ce)抗(kang)體及捕獲(huo)抗(kang)體不匹配(pei)，而(er)不(bu)被(bei)檢(jian)測(ce)出(chu)。

7.         建(jian)議(yi)使(shi)用(yong)新鮮樣本，保(bao)存(cun)時(shi)間(jian)過長(chang)可(ke)能(neng)會存(cun)在(zai)蛋(dan)白(bai)降解或(huo)變性(xing)導(dao)致(zhi)實驗(yan)結(jie)果偏差。

雞(ji)幹擾素(su)β(IFNβ)ELISA試(shi)劑盒操作(zuo)步驟(zhou)

1.         加(jia)樣：分別(bie)設(she)空(kong)白(bai)孔（空白(bai)對照(zhao)孔不(bu)加(jia)樣品及(ji)酶標(biao)試劑(ji)，其(qi)余各步(bu)操作(zuo)相(xiang)同(tong)）、標準(zhun)孔、待測樣品孔(kong)。在酶標(biao)包被(bei)板(ban)上標準品準(zhun)確(que)加(jia)樣50μl，待(dai)測樣品孔(kong)中先加(jia)樣品稀(xi)釋液40μl，然(ran)後(hou)再加(jia)待測(ce)樣品10μl（樣品*終(zhong)稀(xi)釋度(du)為5倍(bei)）。加(jia)樣將樣品加(jia)於酶標(biao)板(ban)孔(kong)底部，盡(jin)量(liang)不觸(chu)及孔(kong)壁，輕(qing)輕(qing)晃動混勻。

2.         溫(wen)育：用(yong)封(feng)板(ban)膜(mo)封(feng)板(ban)後(hou)置37℃溫(wen)育30分鐘(zhong)。  

3.         配(pei)液：將20倍濃(nong)縮洗(xi)滌液用(yong)蒸餾(liu)水20倍稀(xi)釋後備(bei)用(yong)

4.         洗(xi)滌：小(xiao)心揭(jie)掉封(feng)板(ban)膜(mo)，棄(qi)去(qu)液體(ti)，甩幹(gan)，每孔加(jia)滿洗(xi)滌液，靜置30秒(miao)後棄去(qu)，如(ru)此(ci)重(zhong)復(fu)5次(ci)，拍幹。

5.         加(jia)酶：每孔加(jia)入(ru)酶標(biao)試劑(ji)50μl，空白(bai)孔除外(wai)。

6.         溫(wen)育：操作(zuo)同(tong)3。

7.         洗(xi)滌：操(cao)作(zuo)同(tong)5。

8.         顯色：每孔先加(jia)入(ru)顯色劑(ji)A50μl，再加(jia)入(ru)顯色劑(ji)B50μl，輕(qing)輕(qing)震(zhen)蕩混勻，37℃避(bi)光(guang)顯色15分鐘(zhong).

9.         終(zhong)止(zhi)：每孔加(jia)終(zhong)止(zhi)液50μl，終(zhong)止(zhi)反(fan)應(ying)（此時(shi)藍(lan)色立轉黃(huang)色）。

10.     測(ce)定(ding)：以(yi)空(kong)白(bai)空調(tiao)零(ling)，450nm波(bo)長(chang)依序(xu)測(ce)量各(ge)孔的吸光(guang)度(du)（OD值）。 測(ce)定(ding)應(ying)在加(jia)終(zhong)止(zhi)液後(hou)15分鐘(zhong)以內進(jin)行。

註意：

1.         試(shi)劑準(zhun)備(bei)：準(zhun)備(bei)壹次(ci)實驗(yan)所(suo)需(xu)要(yao)的酶標(biao)條，其(qi)它的(de)可(ke)從微(wei)孔(kong)板(ban)上拆(chai)下(xia)，密封(feng)，按(an)照(zhao)說(shuo)明書要(yao)求(qiu)保(bao)存(cun)，以(yi)備(bei)下次(ci)使(shi)用(yong)。

2.         加(jia)樣：實驗(yan)操(cao)作(zuo)中請(qing)使(shi)用(yong)壹次(ci)性的吸(xi)頭(tou)，避免交(jiao)叉汙染(ran)。加(jia)樣時(shi)註意不(bu)要有氣泡(pao)，將樣品加(jia)於酶標(biao)板(ban)底部，盡(jin)量(liang)不觸(chu)及孔(kong)壁，輕(qing)輕(qing)晃動混勻。加(jia)樣或(huo)加(jia)試劑(ji)時(shi)，**個孔與*後(hou)壹個孔加(jia)樣之(zhi)間(jian)的時(shi)間(jian)間(jian)隔如(ru)果(guo)太大(da)，將會導(dao)致(zhi)不同(tong)的“預(yu)溫(wen)育”時(shi)間(jian)，從而(er)明(ming)顯地(di)影響(xiang)到測量值的(de)準(zhun)確(que)性(xing)及(ji)重復性(xing)。因此，壹(yi)次(ci)加(jia)樣時(shi)間(jian)(包括(kuo)標(biao)準品及(ji)所(suo)有樣品)*好(hao)控制在(zai)10分鐘(zhong)內。推薦(jian)設(she)置復(fu)孔進(jin)行實驗(yan)。

3.          溫(wen)育：為(wei)防(fang)止樣品蒸(zheng)發，實驗(yan)時(shi)請(qing)將加(jia)上蓋或(huo)覆(fu)膜的(de)酶標(biao)板(ban)置於(yu)濕(shi)盒內，以(yi)避免(mian)液體(ti)蒸(zheng)發，洗(xi)板(ban)後(hou)應(ying)盡快進(jin)行下步操作(zuo)，任何(he)時(shi)侯(hou)都應(ying)避免酶標(biao)板(ban)處(chu)於(yu)幹(gan)燥狀(zhuang)態，同(tong)時(shi)應(ying)嚴格(ge)遵(zun)守(shou)給(gei)定(ding)的(de)溫(wen)育時(shi)間(jian)和(he)溫(wen)度(du)。

4.         洗(xi)滌：充(chong)分的(de)洗(xi)滌非(fei)常(chang)重(zhong)要，在(zai)每次(ci)洗(xi)滌過程(cheng)中，都要(yao)將洗(xi)滌液完(wan)全(quan)甩幹(gan)。洗(xi)滌過程(cheng)中反(fan)應(ying)孔中殘(can)留的(de)洗(xi)滌液應(ying)在濾紙上拍幹，勿(wu)將濾紙直接(jie)放入(ru)反(fan)應(ying)孔中吸(xi)水(shui)，同(tong)時(shi)要(yao)消除板(ban)底殘(can)留的(de)液體(ti)和(he)手(shou)指(zhi)印，避(bi)免影響(xiang)*後的(de)酶標(biao)儀(yi)讀數(shu)。如(ru)果(guo)有(you)自(zi)動(dong)洗(xi)板(ban)機(ji)，應(ying)在熟(shu)練使(shi)用(yong)後再用(yong)到正式(shi)實 驗(yan)過程(cheng)中。

5.         反(fan)應(ying)時(shi)間(jian)的控(kong)制：加(jia)入(ru)底物後請(qing)定(ding)時(shi)觀(guan)察反應(ying)孔的顏(yan)色變(bian)化(比(bi)如(ru)，每隔10分鐘(zhong)觀察壹次(ci))，如(ru)顏(yan)色較(jiao)深，請提(ti)前加(jia)入(ru)終(zhong)止(zhi)液終(zhong)止(zhi)反(fan)應(ying)，避免反應(ying)過強從而(er)影(ying)響(xiang)酶標(biao)儀(yi)光(guang)密度(du)讀數(shu)。

6.         底物：底物請避(bi)光(guang)保(bao)存(cun)，在(zai)儲(chu)存(cun)和(he)溫(wen)育時(shi)避(bi)免(mian)強(qiang)光(guang)直接(jie)照(zhao)射(she)。

7.         如(ru)果(guo)實驗(yan)室(shi)內(nei)濕(shi)度(du)低於60%，推(tui)薦(jian)使(shi)用(yong)加(jia)濕(shi)器(qi)提(ti)高濕(shi)度(du)水平。

 實驗(yan)流(liu)程(cheng)

1.         實驗(yan)前(qian)標準品、試(shi)劑及樣本的準(zhun)備(bei)；

2.         加(jia)樣（標(biao)準品及(ji)樣本）50μL，37℃孵(fu)育30分鐘(zhong)；

3.         洗(xi)板(ban)5次(ci)，加(jia)酶標(biao)試劑(ji)50ul，37℃孵(fu)育半(ban)小(xiao)時(shi)；

4.         洗(xi)板(ban)5次(ci)；加(jia)入(ru)顯色液A，B各(ge)50ul,37℃孵(fu)育顯色15分鐘(zhong)

5.         加(jia)終(zhong)止(zhi)液50μL，立即(ji)450nm讀(du)數(shu)。

6.    計(ji)算(suan)

雞(ji)幹擾素(su)β(IFNβ)ELISA試(shi)劑盒計(ji)算(suan)

各(ge)標準(zhun)品及(ji)樣本O.D.值扣除空(kong)白(bai)孔O.D.值後(hou)作(zuo)圖(七點圖)，如(ru)設(she)置復(fu)孔，則(ze)應(ying)取其(qi)平均值(zhi)計(ji)算(suan)。以標準品的(de)濃(nong)度(du)為縱(zong)坐(zuo)標(biao)(或(huo)對數(shu)坐(zuo)標(biao))，O.D.值(zhi)為(wei)橫(heng)坐(zuo)標(biao)(或(huo)對數(shu)坐(zuo)標(biao)），繪(hui)出(chu)標(biao)準曲(qu)線(xian)(*佳(jia)方程(cheng)式(shi)應(ying)依回歸方程(cheng)計(ji)算(suan)的R2值來(lai)定(ding)，以(yi)R2值(zhi)越趨(qu)近於1為(wei)好(hao))。推薦(jian)使(shi)用(yong)專業(ye)制作(zuo)曲(qu)線(xian)軟(ruan)件(jian)進(jin)行分析，如(ru)curve expert 1.30，根(gen)據(ju)樣品O.D.值(zhi)，由(you)標(biao)準(zhun)曲(qu)線(xian)查(zha)出(chu)相(xiang)應(ying)的濃(nong)度(du)，乘(cheng)以(yi)稀(xi)釋倍數(shu)；或(huo)用(yong)標準(zhun)物的濃(nong)度(du)與O.D.值(zhi)計(ji)算(suan)出(chu)標(biao)準曲(qu)線(xian)的(de)回歸方程(cheng)式(shi)，將樣品的(de)O.D.值代入(ru)方(fang)程(cheng)式(shi)，計(ji)算(suan)出(chu)樣品濃(nong)度(du)，再乘(cheng)以(yi)稀(xi)釋倍數(shu)，即(ji)為(wei)樣品的(de)實際(ji)濃(nong)度(du)。

 特(te)異(yi)性

本試劑(ji)盒用(yong)於檢(jian)測(ce)雞(ji)幹擾素(su)β(IFNβ)，經檢(jian)測(ce)與其(qi)它相(xiang)似物質無(wu)明(ming)顯交(jiao)叉反(fan)應(ying)。

由(you)於(yu)受到技術及樣本來(lai)源(yuan)的限制，不(bu)可(ke)能(neng)完成對(dui)所(suo)有相(xiang)關或(huo)相(xiang)似物質交(jiao)叉(cha)反應(ying)檢測，因此本試劑(ji)盒有可(ke)能(neng)與未經檢(jian)測(ce)的(de)其(qi)它物質有(you)交(jiao)叉反(fan)應(ying)。

 精(jing)密度(du)

精(jing)密度(du)用(yong)樣品測(ce)定(ding)值(zhi)的(de)變異(yi)系數(shu)CV表示(shi)。CV(%) = SD/mean×100

批內(nei)差：取同(tong)批次(ci)試劑盒對低、中、高(gao)值(zhi)定(ding)值(zhi)樣本進(jin)行定(ding)量(liang)檢(jian)測,每份樣本連(lian)續測定(ding)20 次(ci)，分別(bie)計(ji)算(suan)不同(tong)濃(nong)度(du)樣本的平均值(zhi)及(ji)SD值(zhi)。

批間(jian)差：選取(qu)3個不同(tong)批次(ci)的試劑(ji)盒分別(bie)對低、中、高(gao)值(zhi)定(ding)值(zhi)樣本進(jin)行定(ding)量(liang)測(ce)定(ding)，每個樣本使(shi)用(yong)同(tong)壹試(shi)劑盒重復(fu)測定(ding)8次(ci)，分別(bie)計(ji)算(suan)不同(tong)濃(nong)度(du)樣本的平均值(zhi)及(ji)SD值(zhi)。

批內(nei)差： CV<10%

批間(jian)差： CV<12%

雞(ji)幹擾素(su)β(IFNβ)ELISA試(shi)劑盒穩定(ding)性(xing)

經測(ce)定(ding)，試(shi)劑(ji)盒在有(you)效(xiao)期內按(an)推薦(jian)溫(wen)度(du)保(bao)存(cun)，其(qi)活性(xing)降低率小(xiao)於(yu)5%。

為(wei)減小(xiao)外(wai)部(bu)因素對(dui)試(shi)劑盒破(po)壞前後檢(jian)測(ce)值的(de)影(ying)響(xiang)，實驗(yan)室(shi)的(de)環境條件(jian)需(xu)盡(jin)量保(bao)持(chi)壹致(zhi)，尤其(qi)是(shi)實驗(yan)室(shi)內(nei)溫(wen)度(du)、濕(shi)度(du)及溫(wen)育條件(jian)。其(qi)次(ci)由(you)同(tong)壹實驗(yan)員(yuan)來(lai)進(jin)行操作(zuo)可(ke)減少(shao)人為誤差。