產品名稱：雞(ji)幹擾(rao)素γ(IFNγ)ELISA試劑(ji)盒

                                                       96T       僅(jin)供(gong)體外(wai)研究(jiu)使(shi)用(yong)，不用(yong)於(yu)臨床診(zhen)斷!

雞(ji)幹擾(rao)素γ(IFNγ)ELISA試劑(ji)盒

本(ben)試(shi)劑(ji)盒運(yun)用(yong)雙抗體夾(jia)心(xin)ELISA法定量(liang)測(ce)定雞(ji)血(xue)清、血漿、組織勻(yun)漿、細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye)、細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)上(shang)清液和其(qi)他(ta)生物(wu)液(ye)體中(zhong)雞(ji)幹擾(rao)素γ(IFNγ)含(han)量(liang)。

 檢(jian)測(ce)範圍

15.625-1000pg/mL

 *低(di)檢測(ce)限(xian)

5.8pg/mL

 實(shi)驗(yan)原理(li)

將雞(ji)幹擾(rao)素γ(IFNγ)抗體包被於(yu)96孔(kong)微孔(kong)板(ban)中(zhong)，制成固(gu)相載(zai)體，向(xiang)微孔(kong)中(zhong)分別(bie)加入(ru)標(biao)準品或(huo)標本(ben)，其(qi)中(zhong)的(de)雞(ji)幹擾(rao)素γ(IFNγ)與連(lian)接於(yu)固相(xiang)載體上(shang)的(de)抗體結(jie)合(he)，然(ran)後加(jia)入(ru)生物(wu)素化(hua)的(de)雞(ji)幹擾(rao)素γ(IFNγ)抗體，將未(wei)結(jie)合(he)的(de)生物(wu)素化(hua)抗體洗凈(jing)後(hou)，加入(ru)HRP標(biao)記(ji)的(de)親和素，再次(ci)徹(che)底洗滌(di)後加(jia)入(ru)TMB底(di)物(wu)顯色。TMB在(zai)過氧化(hua)物(wu)酶(mei)的(de)催化(hua)下轉(zhuan)化(hua)成藍(lan)色，並(bing)在(zai)酸(suan)的(de)作(zuo)用(yong)下轉(zhuan)化(hua)成*終的(de)黃色。顏(yan)色的(de)深淺(qian)和樣(yang)品中(zhong)的(de)雞(ji)幹擾(rao)素γ(IFNγ)呈正(zheng)相(xiang)關(guan)。用(yong)酶標儀在(zai)450nm波長下測(ce)定吸光(guang)度(du)(O.D.值(zhi))，計算(suan)樣(yang)品濃度(du)。

 試(shi)劑(ji)盒內容(rong)

雞(ji)幹擾(rao)素γ(IFNγ)ELISA試劑(ji)盒需自備的(de)設備及試劑(ji)

1.         450±10nm濾(lv)光(guang)片(pian)的(de)酶(mei)標儀(建議儀器使用(yong)前提前預熱)

2.         單(dan)道(dao)或(huo)多(duo)道微量(liang)加(jia)液(ye)器及吸頭

3.         稀(xi)釋(shi)樣(yang)品的(de)EP管(guan)

4.         蒸餾(liu)水(shui)或(huo)去離(li)子(zi)水(shui)

5.         吸(xi)水(shui)紙

6.         盛(sheng)放(fang)洗液(ye)的(de)容(rong)器

 試(shi)劑(ji)盒的(de)儲(chu)存及有效期(qi)

1.         未(wei)開(kai)封的(de)試(shi)劑(ji)盒：所有試劑(ji)均按試劑(ji)瓶標(biao)簽上所示保存。請註(zhu)意(yi)，收到試劑(ji)盒後請盡快(kuai)將TMB 洗滌(di)液，終止(zhi)液保(bao)存(cun)於(yu)4℃，其他(ta)試劑(ji)保存(cun)於(yu)-20℃。

2.         使(shi)用(yong)後的(de)試(shi)劑(ji)盒：剩余(yu)試劑(ji)仍需(xu)按照試(shi)劑(ji)瓶標(biao)簽所示的(de)溫(wen)度(du)保存，開(kai)封後的(de)酶(mei)標板(ban)要加幹燥(zao)劑(ji)後密(mi)封保存於(yu)-20℃，避免潮(chao)濕。

註(zhu)意(yi)：

試(shi)劑(ji)盒內酶(mei)標條(tiao)可(ke)拆卸(xie)，按實驗(yan)需(xu)求可分(fen)多(duo)次(ci)使(shi)用(yong)；使用(yong)後的(de)剩(sheng)余(yu)試劑(ji)盒建議在**實(shi)驗(yan)後(hou) 1個月(yue)內(nei)使(shi)用(yong)完(wan)畢。產(chan)品過期(qi)時間以盒子上(shang)的(de)標(biao)簽為(wei)準(zhun)，保(bao)質(zhi)期(qi)內所有組分都確(que)保(bao)是穩定(ding)的(de)。

雞(ji)幹擾(rao)素γ(IFNγ)ELISA試劑(ji)盒標本(ben)的(de)采(cai)集與保存(cun)

1.         血(xue)清(qing)：

將收(shou)集(ji)於(yu)血清(qing)分離(li)管(guan)的(de)全血(xue)標(biao)本(ben)在(zai)室(shi)溫(wen)放置(zhi) 2 小時或(huo) 4^oC 過夜(ye)，然(ran)後 1000×g 離(li)心(xin) 20 分鐘，取上(shang)清即(ji)可(ke)，或(huo)將上(shang)清(qing)置(zhi)於(yu)-20^oC 或(huo)-80^oC 保存(cun)，但(dan)應(ying)避免反(fan)復凍(dong)融(rong)。

2.         血(xue)漿(jiang)：

用(yong) EDTA 或(huo)肝(gan)素作為(wei)抗凝(ning)劑(ji)采集(ji)標本(ben)，並(bing)將標(biao)本(ben)在(zai)采(cai)集後的(de) 30 分(fen)鐘內於(yu) 2-8^oC 1000×g 離(li)心(xin) 15 分鐘，取上(shang)清即(ji)可(ke)檢(jian)測(ce)，或(huo)將上(shang)清(qing)置(zhi)於(yu)-20^oC 或(huo)-80^oC 保存(cun)，但(dan)應(ying)避免反(fan)復凍(dong)融(rong)。

3. 組(zu)織(zhi)勻(yun)漿：

1） 取適量(liang)組(zu)織(zhi)塊，於(yu)預冷(leng)PBS（0.01mol/L, pH 7.0-7.2）中(zhong)清洗去除(chu)血(xue)液(ye)，稱(cheng)重(zhong)後備用(yong)（組織塊較(jiao)大(da)需先(xian)剪(jian)碎後(hou)再勻(yun)漿）；

2） 可(ke)同(tong)時選用(yong)多(duo)種(zhong)勻(yun)漿方(fang)法達(da)到(dao)較(jiao)好的(de)破(po)碎效果(guo)：首(shou)先(xian)將組(zu)織(zhi)塊移入(ru)玻(bo)璃(li)勻(yun)漿器，加入(ru)5-10mL 預冷(leng)PBS 進行(xing)充分研磨，該(gai)過程需在冰上進(jin)行(xing)（有條(tiao)件(jian)實(shi)驗(yan)室(shi)可選(xuan)用(yong)機器勻(yun)漿）；得到的(de)勻(yun)漿液(ye)可再利用(yong)超(chao)聲(sheng)破碎或(huo)反(fan)復凍(dong)融(rong) 進(jin)壹(yi)步(bu)處(chu)理(li)（超(chao)聲(sheng)破碎過程中(zhong)註(zhu)意(yi)冰浴降溫(wen)；反(fan)復凍(dong)融(rong)法可重(zhong)復2 次(ci)）。

3） 將制(zhi)備好的(de)勻(yun)漿液(ye)於(yu)5000×g 離(li)心(xin)5 分鐘，留取上(shang)清即(ji)可(ke)檢(jian)測(ce)。

4. 細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye)：

1）貼(tie)壁(bi)細(xi)胞(bao)需(xu)要(yao)先(xian)用(yong)胰酶消化(hua)，離(li)心(xin)收集細(xi)胞(bao)（懸(xuan)浮細(xi)胞(bao)可(ke)直接離(li)心(xin)收集）；

2）將收(shou)集(ji)到的(de)細(xi)胞(bao)用(yong)冷(leng)PBS 洗3 次(ci)；

3）物(wu)理(li)方(fang)法裂解(jie)細(xi)胞(bao)（可(ke)先(xian)超(chao)聲(sheng)破碎細(xi)胞(bao)，再反(fan)復凍(dong)融(rong)）：

i 超(chao)聲(sheng)破碎：取適量(liang)PBS 重(zhong)懸(xuan)細(xi)胞(bao)，用(yong)壹定功率(lv)的(de)超(chao)聲(sheng)波處(chu)理(li)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)，使細(xi)胞(bao)急(ji)劇(ju)震蕩(dang)破裂(lie)。

ii 反(fan)復凍(dong)融(rong)：將待(dai)破碎(sui)的(de)細(xi)胞(bao)在(zai)-20 ^oC 以(yi)下冰凍，室(shi)溫(wen)融(rong)解(jie)，反(fan)復3 次(ci)，使(shi)細(xi)胞(bao)溶(rong)脹(zhang)破(po)碎。

4）將標(biao)本(ben)於(yu)2-8 ^oC 1500×g 離(li)心(xin)10 分鐘，收集(ji)上(shang)清備用(yong)。

5. 細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)上(shang)清或(huo)其它(ta)生物(wu)標(biao)本(ben)：

請 1000×g 離(li)心(xin) 20 分鐘，取上(shang)清即(ji)可(ke)檢(jian)測(ce)，或(huo)將上(shang)清(qing)置(zhi)於(yu)-20^oC 或(huo)-80^oC 保存(cun)，但(dan)應(ying)避免反(fan)復凍(dong)融(rong)。

註(zhu)意(yi)：

1.         以(yi)上(shang)標本(ben)均需密封保存，4^oC保(bao)存(cun)應(ying)小(xiao)於(yu)1周，-20^oC不應(ying)超(chao)過1個月(yue)，-80^oC不應(ying)超(chao)過2個月(yue)。

2.         標(biao)本(ben)使(shi)用(yong)前應(ying)緩(huan)慢均衡(heng)至室(shi)溫(wen)，不應(ying)加(jia)熱使(shi)之融(rong)解(jie)。

3.         實(shi)驗(yan)前紅細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye)必須用(yong)標準品稀(xi)釋(shi)液(ye)稀釋(shi)。

雞(ji)幹擾(rao)素γ(IFNγ)ELISA試劑(ji)盒試劑(ji)準備

1.         使(shi)用(yong)前將所有的(de)試(shi)劑(ji)和標(biao)本(ben)緩(huan)慢均衡(heng)至室(shi)溫(wen)(18-25oC)，試劑(ji)不能直接在(zai)37oC溶(rong)解(jie)。

2.         標(biao)準(zhun)品(凍(dong)幹品)：每(mei)瓶標(biao)準(zhun)品加(jia)入(ru)標(biao)準品稀(xi)釋(shi)液(ye)1mL，蓋好後室(shi)溫(wen)靜(jing)置(zhi)大(da)約(yue)10分鐘，同時反(fan)復顛(dian)倒(dao)/搓動以助溶(rong)解(jie)，其濃度(du)為(wei)1000pg/mL。準(zhun)備7個稀(xi)釋(shi)標(biao)準品的(de)EP管(guan)，每個EP管(guan)中(zhong)加入(ru)150μL的(de)標(biao)準品稀(xi)釋(shi)液(ye)，如圖所示依次(ci)倍(bei)比(bi)稀釋(shi)成不同的(de)梯(ti)度(du)， 標準品稀(xi)釋(shi)液(ye)(0pg/mL)直接作(zuo)為(wei)空(kong)白(bai)孔(kong)。為(wei)保(bao)證實驗結(jie)果(guo)有(you)效性，每次(ci)實(shi)驗(yan)請使(shi)用(yong)新的(de)標(biao)準品溶(rong)液(ye)。

3.         濃洗滌(di)液：用(yong)580mL蒸餾(liu)水(shui)或(huo)去離(li)子(zi)水(shui)將20mL濃洗滌(di)液稀(xi)釋(shi)至(zhi)600mL，進(jin)行(xing)30倍稀釋(shi)。

標(biao)本(ben)處(chu)理(li)

1.         本(ben)公(gong)司(si)只(zhi)對(dui)試劑(ji)盒本(ben)身負責，不對因(yin)使(shi)用(yong)該(gai)試劑(ji)盒所造成的(de)樣(yang)本(ben)消(xiao)耗(hao)負責，請使(shi)用(yong)者(zhe)使(shi)用(yong)前充分(fen)考(kao)慮(lv)到樣(yang)本(ben)的(de)可(ke)能使(shi)用(yong)量(liang)，預留(liu)充足(zu)的(de)樣(yang)本(ben)。

2.         實(shi)驗(yan)前應(ying)預測(ce)標本(ben)含(han)量(liang)，如(ru)果(guo)標(biao)本(ben)濃度(du)過高，應(ying)對(dui)標本(ben)進(jin)行(xing)稀釋(shi)，使(shi)稀釋(shi)後(hou)的(de)標(biao)本(ben)符合(he)試劑(ji)盒的(de)檢(jian)測(ce)範圍，計算(suan)時再乘以(yi)相應(ying)的(de)稀(xi)釋(shi)倍(bei)數。

3.         若(ruo)所檢樣(yang)本(ben)不包含(han)在(zai)說(shuo)明(ming)書(shu)所列樣(yang)本(ben)之中(zhong)，建議進行(xing)預實(shi)驗驗(yan)證其有效性，並註(zhu)意(yi)留存樣(yang)本(ben)。

4.         使(shi)用(yong)化(hua)學裂解液(ye)制備的(de)組(zu)織勻(yun)漿或(huo)細(xi)胞(bao)提取液(ye)可能會由於(yu)某(mou)些(xie)化(hua)學物(wu)質(zhi)的(de)引入(ru)導(dao)致  ELISA實驗結(jie)果(guo)偏(pian)差(cha)。

5.         若(ruo)樣(yang)本(ben)為(wei)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)上(shang)清，因(yin)該(gai)類(lei)樣(yang)本(ben)幹擾(rao)因(yin)素 較多(duo)，如：細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態(tai)、細(xi)胞(bao)數量(liang)、采(cai)樣(yang)時間等，所以可能存(cun)在(zai)檢測(ce)不出的(de)情(qing)況。

6.         某(mou)些(xie)天然(ran)蛋白(bai)或(huo)重組(zu)蛋(dan)白(bai)，包括原(yuan)核及真核重(zhong)組蛋(dan)白(bai)，可(ke)能因(yin)為(wei)與本(ben)產(chan)品所使用(yong)的(de)檢(jian)測(ce)抗體及捕(bu)獲抗體不匹(pi)配(pei)，而不被檢(jian)測(ce)出。

7.         建議使用(yong)新鮮樣(yang)本(ben)，保(bao)存(cun)時間過長可能會存(cun)在(zai)蛋白(bai)降(jiang)解(jie)或(huo)變(bian)性導致(zhi)實驗結(jie)果(guo)偏(pian)差(cha)。

雞(ji)幹擾(rao)素γ(IFNγ)ELISA試劑(ji)盒操(cao)作步(bu)驟

1.         加(jia)樣(yang)：分別(bie)設空白(bai)孔(kong)（空白(bai)對(dui)照(zhao)孔(kong)不加樣(yang)品及酶標試(shi)劑(ji)，其余(yu)各(ge)步(bu)操(cao)作相(xiang)同）、標(biao)準孔(kong)、待(dai)測(ce)樣(yang)品孔(kong)。在酶(mei)標包被板(ban)上標準品準(zhun)確(que)加樣(yang)50μl，待(dai)測(ce)樣(yang)品孔(kong)中(zhong)先加(jia)樣(yang)品稀(xi)釋(shi)液(ye)40μl，然(ran)後再加待(dai)測(ce)樣(yang)品10μl（樣(yang)品*終稀(xi)釋(shi)度(du)為(wei)5倍(bei)）。加(jia)樣(yang)將樣(yang)品加(jia)於(yu)酶標(biao)板(ban)孔(kong)底部(bu)，盡量(liang)不觸(chu)及孔(kong)壁(bi)，輕(qing)輕(qing)晃動混勻(yun)。

2.         溫(wen)育：用(yong)封板(ban)膜(mo)封板(ban)後置(zhi)37℃溫(wen)育30分(fen)鐘。  

3.         配(pei)液：將20倍(bei)濃縮(suo)洗滌(di)液用(yong)蒸餾(liu)水(shui)20倍稀(xi)釋(shi)後(hou)備用(yong)

4.         洗滌(di)：小心(xin)揭掉封板(ban)膜(mo)，棄(qi)去液(ye)體，甩幹，每(mei)孔(kong)加滿(man)洗滌(di)液，靜(jing)置(zhi)30秒後棄(qi)去，如(ru)此重(zhong)復(fu)5次(ci)，拍(pai)幹。

5.         加(jia)酶(mei)：每孔(kong)加入(ru)酶(mei)標試劑(ji)50μl，空白(bai)孔(kong)除(chu)外(wai)。

6.         溫(wen)育：操(cao)作同(tong)3。

7.         洗滌(di)：操(cao)作同(tong)5。

8.         顯色：每(mei)孔(kong)先加(jia)入(ru)顯色劑(ji)A50μl，再加入(ru)顯色劑(ji)B50μl，輕(qing)輕(qing)震蕩(dang)混勻(yun)，37℃避光(guang)顯色15分(fen)鐘.

9.         終止(zhi)：每孔(kong)加終止(zhi)液50μl，終止(zhi)反(fan)應(ying)（此(ci)時藍(lan)色立(li)轉(zhuan)黃色）。

10.     測(ce)定：以空(kong)白(bai)空(kong)調零，450nm波長依序測(ce)量(liang)各(ge)孔(kong)的(de)吸(xi)光(guang)度(du)（OD值(zhi)）。 測(ce)定應(ying)在(zai)加終止(zhi)液後(hou)15分(fen)鐘以內(nei)進(jin)行(xing)。

註(zhu)意(yi)：

1.         試(shi)劑(ji)準備：準(zhun)備壹次(ci)實(shi)驗(yan)所需要的(de)酶(mei)標條(tiao)，其(qi)它(ta)的(de)可(ke)從微孔(kong)板(ban)上拆下，密(mi)封，按照說(shuo)明(ming)書(shu)要(yao)求保存(cun)，以備下次(ci)使(shi)用(yong)。

2.         加(jia)樣(yang)：實(shi)驗(yan)操(cao)作中(zhong)請使(shi)用(yong)壹次(ci)性的(de)吸(xi)頭，避免交(jiao)叉汙染(ran)。加樣(yang)時註(zhu)意(yi)不要有(you)氣(qi)泡(pao)，將樣(yang)品加(jia)於(yu)酶標(biao)板(ban)底部(bu)，盡量(liang)不觸(chu)及孔(kong)壁(bi)，輕(qing)輕(qing)晃動混勻(yun)。加樣(yang)或(huo)加試(shi)劑(ji)時，**個孔(kong)與*後壹(yi)個孔(kong)加樣(yang)之間(jian)的(de)時間間隔如(ru)果(guo)太(tai)大(da)，將會導(dao)致(zhi)不同的(de)“預溫(wen)育”時間，從而(er)明(ming)顯地影(ying)響到測(ce)量(liang)值(zhi)的(de)準(zhun)確性及重復性。因(yin)此(ci)，壹次(ci)加(jia)樣(yang)時間(包括標(biao)準品及所有樣(yang)品)*好控制在10分鐘內。推(tui)薦(jian)設置(zhi)復孔(kong)進行(xing)實驗。

3.          溫(wen)育：為(wei)防(fang)止(zhi)樣(yang)品蒸發(fa)，實(shi)驗時請將加(jia)上(shang)蓋或(huo)覆膜(mo)的(de)酶(mei)標板(ban)置(zhi)於(yu)濕盒內，以(yi)避免液(ye)體蒸發(fa)，洗板(ban)後應(ying)盡快(kuai)進(jin)行(xing)下步(bu)操(cao)作，任(ren)何時侯都應(ying)避免酶(mei)標(biao)板(ban)處(chu)於(yu)幹燥(zao)狀(zhuang)態(tai)，同時應(ying)嚴格(ge)遵(zun)守(shou)給定的(de)溫(wen)育時間和溫(wen)度(du)。

4.         洗滌(di)：充(chong)分(fen)的(de)洗滌(di)非(fei)常重(zhong)要，在每次(ci)洗滌(di)過程中(zhong)，都要(yao)將洗滌(di)液完(wan)全甩幹。洗滌(di)過程中(zhong)反(fan)應(ying)孔(kong)中(zhong)殘(can)留的(de)洗滌(di)液應(ying)在(zai)濾(lv)紙(zhi)上(shang)拍(pai)幹，勿(wu)將濾(lv)紙(zhi)直接放(fang)入(ru)反(fan)應(ying)孔(kong)中(zhong)吸水(shui)，同時要消除(chu)板(ban)底殘(can)留的(de)液(ye)體和手(shou)指印，避免影(ying)響*後的(de)酶(mei)標儀讀數。如果(guo)有(you)自動洗板(ban)機，應(ying)在(zai)熟練(lian)使(shi)用(yong)後再用(yong)到正(zheng)式(shi)實(shi) 驗過程中(zhong)。

5.         反(fan)應(ying)時間的(de)控(kong)制：加(jia)入(ru)底(di)物(wu)後(hou)請定(ding)時觀察(cha)反(fan)應(ying)孔(kong)的(de)顏(yan)色變(bian)化(hua)(比(bi)如，每(mei)隔10分(fen)鐘觀察(cha)壹次(ci))，如(ru)顏(yan)色較(jiao)深，請提前加入(ru)終止(zhi)液終止(zhi)反(fan)應(ying)，避免反(fan)應(ying)過強從而(er)影(ying)響酶標儀光(guang)密度(du)讀數。

6.         底(di)物(wu)：底(di)物(wu)請避光(guang)保存(cun)，在(zai)儲(chu)存和溫(wen)育時避免強光(guang)直接照(zhao)射。

7.         如(ru)果(guo)實(shi)驗(yan)室(shi)內濕度(du)低(di)於(yu)60%，推(tui)薦(jian)使用(yong)加濕器提高濕度(du)水(shui)平。

 實(shi)驗(yan)流程

1.         實(shi)驗(yan)前標準(zhun)品、試(shi)劑(ji)及樣(yang)本(ben)的(de)準(zhun)備；

2.         加(jia)樣(yang)（標準(zhun)品及樣(yang)本(ben)）50μL，37℃孵育30分(fen)鐘；

3.         洗板(ban)5次(ci)，加(jia)酶(mei)標(biao)試(shi)劑(ji)50ul，37℃孵育半(ban)小(xiao)時；

4.         洗板(ban)5次(ci)；加(jia)入(ru)顯色液(ye)A，B各(ge)50ul,37℃孵育顯色15分(fen)鐘

5.         加(jia)終止(zhi)液50μL，立(li)即(ji)450nm讀數。

6.    計算(suan)

雞(ji)幹擾(rao)素γ(IFNγ)ELISA試劑(ji)盒計算(suan)

各(ge)標(biao)準(zhun)品及樣(yang)本(ben)O.D.值(zhi)扣除(chu)空(kong)白(bai)孔(kong)O.D.值(zhi)後作(zuo)圖(七(qi)點(dian)圖)，如設置(zhi)復孔(kong)，則(ze)應(ying)取其(qi)平均值(zhi)計算(suan)。以(yi)標準(zhun)品的(de)濃度(du)為(wei)縱(zong)坐(zuo)標(biao)(或(huo)對數坐標(biao))，O.D.值(zhi)為(wei)橫(heng)坐(zuo)標(biao)(或(huo)對數坐標(biao)），繪(hui)出標準曲(qu)線(xian)(*佳(jia)方(fang)程式應(ying)依(yi)回(hui)歸(gui)方(fang)程計算(suan)的(de)R2值(zhi)來(lai)定(ding)，以R2值(zhi)越趨近(jin)於(yu)1為(wei)好)。推(tui)薦(jian)使用(yong)專(zhuan)業制作曲線(xian)軟(ruan)件(jian)進(jin)行(xing)分析，如(ru)curve expert 1.30，根(gen)據(ju)樣(yang)品O.D.值(zhi)，由標(biao)準曲線(xian)查出(chu)相應(ying)的(de)濃度(du)，乘以稀(xi)釋(shi)倍(bei)數；或(huo)用(yong)標準物(wu)的(de)濃度(du)與O.D.值(zhi)計算(suan)出(chu)標準(zhun)曲(qu)線(xian)的(de)回(hui)歸(gui)方(fang)程式，將樣(yang)品的(de)O.D.值(zhi)代入(ru)方(fang)程式，計算(suan)出(chu)樣(yang)品濃度(du)，再乘以(yi)稀釋(shi)倍(bei)數，即(ji)為(wei)樣(yang)品的(de)實(shi)際濃度(du)。

 特異性

本(ben)試(shi)劑(ji)盒用(yong)於(yu)檢測(ce)雞(ji)幹擾(rao)素γ(IFNγ)，經檢測(ce)與其它(ta)相(xiang)似(si)物(wu)質(zhi)無明(ming)顯交叉反(fan)應(ying)。

由於(yu)受到技(ji)術(shu)及樣(yang)本(ben)來(lai)源(yuan)的(de)限(xian)制(zhi)，不可能完(wan)成對(dui)所有相關(guan)或(huo)相似(si)物(wu)質(zhi)交叉反(fan)應(ying)檢(jian)測(ce)，因(yin)此(ci)本(ben)試(shi)劑(ji)盒有可(ke)能與未經(jing)檢(jian)測(ce)的(de)其(qi)它(ta)物(wu)質(zhi)有交叉反(fan)應(ying)。

 精(jing)密度(du)

精(jing)密度(du)用(yong)樣(yang)品測(ce)定值(zhi)的(de)變(bian)異系數CV表(biao)示。CV(%) = SD/mean×100

批(pi)內(nei)差：取同(tong)批次(ci)試(shi)劑(ji)盒對低(di)、中(zhong)、高值(zhi)定值(zhi)樣(yang)本(ben)進(jin)行(xing)定量(liang)檢(jian)測(ce),每份(fen)樣(yang)本(ben)連(lian)續(xu)測(ce)定20 次(ci)，分(fen)別(bie)計算(suan)不同濃度(du)樣(yang)本(ben)的(de)平均值(zhi)及SD值(zhi)。

批(pi)間(jian)差：選(xuan)取3個不同批(pi)次(ci)的(de)試(shi)劑(ji)盒分別(bie)對低(di)、中(zhong)、高值(zhi)定值(zhi)樣(yang)本(ben)進(jin)行(xing)定量(liang)測(ce)定，每個樣(yang)本(ben)使(shi)用(yong)同壹試劑(ji)盒重復(fu)測(ce)定8次(ci)，分(fen)別(bie)計算(suan)不同濃度(du)樣(yang)本(ben)的(de)平均值(zhi)及SD值(zhi)。

批(pi)內(nei)差： CV<10%

批(pi)間(jian)差： CV<12%

雞(ji)幹擾(rao)素γ(IFNγ)ELISA試劑(ji)盒穩定(ding)性

經(jing)測(ce)定，試劑(ji)盒在有(you)效期(qi)內按推(tui)薦(jian)溫(wen)度(du)保存，其(qi)活(huo)性降低(di)率小(xiao)於(yu)5%。

為(wei)減小(xiao)外(wai)部(bu)因(yin)素對試劑(ji)盒破壞(huai)前後檢(jian)測(ce)值(zhi)的(de)影(ying)響，實驗室(shi)的(de)環境(jing)條(tiao)件(jian)需(xu)盡量(liang)保(bao)持壹致，尤(you)其(qi)是實驗(yan)室(shi)內溫(wen)度(du)、濕度(du)及溫(wen)育條(tiao)件(jian)。其(qi)次(ci)由同(tong)壹實驗員(yuan)來(lai)進(jin)行(xing)操(cao)作可(ke)減少(shao)人(ren)為(wei)誤(wu)差(cha)。