產(chan)品(pin)名(ming)稱(cheng)：雞(ji)幹(gan)細(xi)胞因子(zi)(SCF)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)

                                                       96T       僅供體(ti)外(wai)研(yan)究使(shi)用，不用(yong)於臨床診(zhen)斷(duan)!

雞(ji)幹(gan)細(xi)胞因子(zi)(SCF)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)

本(ben)試(shi)劑(ji)盒(he)運用雙(shuang)抗(kang)體(ti)夾(jia)心ELISA法(fa)定(ding)量測(ce)定雞(ji)血(xue)清、血(xue)漿、組(zu)織(zhi)勻(yun)漿、細(xi)胞裂(lie)解(jie)液(ye)、細(xi)胞培養(yang)上(shang)清液(ye)和(he)其他生(sheng)物(wu)液(ye)體(ti)中(zhong)雞(ji)幹(gan)細(xi)胞因子(zi)(SCF)含量。

 檢(jian)測(ce)範(fan)圍(wei)

31.25-2000 pg/mL

 *低(di)檢(jian)測(ce)限

6.8 pg/mL

 實驗原理

將(jiang)雞(ji)幹(gan)細(xi)胞因子(zi)(SCF)抗(kang)體(ti)包(bao)被(bei)於96孔(kong)微(wei)孔(kong)板(ban)中(zhong)，制(zhi)成固(gu)相(xiang)載(zai)體(ti)，向(xiang)微孔中分別(bie)加(jia)入(ru)標(biao)準品(pin)或(huo)標本(ben)，其中(zhong)的雞(ji)幹(gan)細(xi)胞因子(zi)(SCF)與(yu)連接於固(gu)相(xiang)載(zai)體(ti)上(shang)的抗(kang)體(ti)結(jie)合(he)，然(ran)後(hou)加(jia)入(ru)生(sheng)物(wu)素化(hua)的(de)雞(ji)幹(gan)細(xi)胞因子(zi)(SCF)抗(kang)體(ti)，將(jiang)未結(jie)合(he)的生(sheng)物(wu)素化(hua)抗(kang)體(ti)洗凈(jing)後，加(jia)入(ru)HRP標(biao)記的親(qin)和(he)素，再次(ci)徹底洗滌後加(jia)入(ru)TMB底(di)物(wu)顯(xian)色(se)。TMB在(zai)過(guo)氧化(hua)物(wu)酶的(de)催(cui)化(hua)下(xia)轉(zhuan)化(hua)成(cheng)藍色(se)，並(bing)在(zai)酸(suan)的(de)作用下(xia)轉(zhuan)化(hua)成(cheng)*終的黃(huang)色(se)。顏色(se)的(de)深淺(qian)和(he)樣品(pin)中(zhong)的雞(ji)幹(gan)細(xi)胞因子(zi)(SCF)呈(cheng)正相關。用(yong)酶(mei)標(biao)儀在(zai)450nm波(bo)長(chang)下(xia)測(ce)定吸光度(O.D.值)，計(ji)算樣品(pin)濃(nong)度。

 試(shi)劑(ji)盒(he)內(nei)容(rong)

雞(ji)幹(gan)細(xi)胞因子(zi)(SCF)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)需(xu)自備(bei)的設(she)備(bei)及(ji)試(shi)劑(ji)

1.         450±10nm濾光片的(de)酶(mei)標(biao)儀(建議儀器使用前(qian)提前預(yu)熱(re))

2.         單(dan)道(dao)或(huo)多(duo)道微量加(jia)液(ye)器及(ji)吸頭(tou)

3.         稀釋樣(yang)品(pin)的(de)EP管(guan)

4.         蒸(zheng)餾水(shui)或(huo)去(qu)離(li)子(zi)水(shui)

5.         吸(xi)水(shui)紙

6.         盛(sheng)放洗液(ye)的(de)容(rong)器

 試(shi)劑(ji)盒(he)的(de)儲(chu)存及(ji)有效期(qi)

1.         未(wei)開(kai)封(feng)的(de)試(shi)劑(ji)盒(he)：所(suo)有(you)試(shi)劑(ji)均按(an)試(shi)劑(ji)瓶標簽上(shang)所示保(bao)存。請註意，收到(dao)試(shi)劑(ji)盒(he)後(hou)請(qing)盡快將(jiang)TMB 洗滌液(ye)，終止液(ye)保(bao)存於4℃，其他試(shi)劑(ji)保(bao)存於-20℃。

2.         使(shi)用後的試(shi)劑(ji)盒(he)：剩(sheng)余(yu)試(shi)劑(ji)仍需(xu)按(an)照試(shi)劑(ji)瓶標簽所(suo)示的溫(wen)度保(bao)存，開(kai)封(feng)後(hou)的(de)酶標(biao)板(ban)要加(jia)幹(gan)燥(zao)劑(ji)後密封(feng)保(bao)存於-20℃，避免潮濕。

註(zhu)意：

試(shi)劑(ji)盒(he)內(nei)酶(mei)標(biao)條可拆(chai)卸，按(an)實驗需(xu)求(qiu)可(ke)分多(duo)次(ci)使用(yong)；使用後的剩(sheng)余(yu)試(shi)劑(ji)盒(he)建(jian)議(yi)在(zai)**實驗後 1個月(yue)內使用(yong)完(wan)畢(bi)。產(chan)品(pin)過(guo)期(qi)時(shi)間(jian)以(yi)盒(he)子(zi)上的標簽為準，保(bao)質期內(nei)所有(you)組(zu)分都確保(bao)是穩定的(de)。

雞(ji)幹(gan)細(xi)胞因子(zi)(SCF)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)標(biao)本(ben)的(de)采集(ji)與(yu)保(bao)存

1.         血(xue)清：

將(jiang)收集(ji)於血(xue)清分離(li)管(guan)的全(quan)血(xue)標(biao)本(ben)在(zai)室(shi)溫(wen)放置(zhi) 2 小(xiao)時(shi)或 4^oC 過(guo)夜(ye)，然(ran)後(hou) 1000×g 離(li)心 20 分鐘(zhong)，取上(shang)清即可，或(huo)將(jiang)上清置(zhi)於-20^oC 或(huo)-80^oC 保(bao)存，但(dan)應避免反復(fu)凍融(rong)。

2.         血(xue)漿：

用(yong) EDTA 或肝素作(zuo)為抗(kang)凝(ning)劑(ji)采集(ji)標(biao)本(ben)，並(bing)將(jiang)標本(ben)在(zai)采集(ji)後(hou)的 30 分鐘(zhong)內於 2-8^oC 1000×g 離(li)心 15 分鐘(zhong)，取上(shang)清即可檢(jian)測(ce)，或將(jiang)上清置(zhi)於-20^oC 或(huo)-80^oC 保(bao)存，但(dan)應避免反復(fu)凍融(rong)。

3. 組(zu)織(zhi)勻(yun)漿：

1） 取適(shi)量組(zu)織(zhi)塊(kuai)，於預(yu)冷(leng)PBS（0.01mol/L, pH 7.0-7.2）中(zhong)清洗去(qu)除(chu)血液(ye)，稱(cheng)重(zhong)後(hou)備用（組(zu)織(zhi)塊(kuai)較大需(xu)先(xian)剪(jian)碎(sui)後(hou)再勻(yun)漿）；

2） 可(ke)同時選(xuan)用多(duo)種(zhong)勻(yun)漿方法(fa)達到(dao)較好的(de)破碎(sui)效果(guo)：首(shou)先(xian)將(jiang)組(zu)織(zhi)塊(kuai)移入(ru)玻(bo)璃勻(yun)漿器，加(jia)入(ru)5-10mL 預(yu)冷(leng)PBS 進行(xing)充分研(yan)磨，該(gai)過(guo)程(cheng)需(xu)在冰(bing)上(shang)進行(xing)（有(you)條件(jian)實驗室(shi)可選(xuan)用機(ji)器勻(yun)漿）；得(de)到(dao)的(de)勻(yun)漿液(ye)可(ke)再利(li)用(yong)超(chao)聲(sheng)破(po)碎(sui)或(huo)反(fan)復(fu)凍融(rong) 進壹步(bu)處理(li)（超(chao)聲(sheng)破(po)碎(sui)過(guo)程(cheng)中(zhong)註意冰(bing)浴(yu)降(jiang)溫(wen)；反復(fu)凍融(rong)法可(ke)重(zhong)復(fu)2 次(ci)）。

3） 將(jiang)制(zhi)備好的勻(yun)漿液(ye)於5000×g 離(li)心5 分鐘(zhong)，留取上(shang)清即可檢(jian)測(ce)。

4. 細(xi)胞裂(lie)解(jie)液(ye)：

1）貼(tie)壁細(xi)胞需(xu)要先(xian)用(yong)胰酶消化(hua)，離(li)心收集(ji)細(xi)胞（懸浮(fu)細(xi)胞可直(zhi)接離心收集(ji)）；

2）將(jiang)收集(ji)到(dao)的(de)細(xi)胞用冷(leng)PBS 洗3 次(ci)；

3）物(wu)理方法(fa)裂(lie)解(jie)細(xi)胞（可先(xian)超(chao)聲(sheng)破(po)碎(sui)細(xi)胞，再反復(fu)凍融(rong)）：

i 超(chao)聲(sheng)破(po)碎(sui)：取適(shi)量PBS 重(zhong)懸(xuan)細(xi)胞，用壹定(ding)功率的(de)超(chao)聲(sheng)波(bo)處理(li)細(xi)胞懸液(ye)，使(shi)細(xi)胞急(ji)劇(ju)震(zhen)蕩(dang)破裂(lie)。

ii 反(fan)復(fu)凍融(rong)：將(jiang)待破(po)碎(sui)的(de)細(xi)胞在-20 ^oC 以(yi)下(xia)冰(bing)凍(dong)，室(shi)溫(wen)融(rong)解(jie)，反復(fu)3 次(ci)，使細(xi)胞溶脹破碎(sui)。

4）將(jiang)標本(ben)於2-8 ^oC 1500×g 離(li)心10 分鐘(zhong)，收集(ji)上(shang)清備(bei)用(yong)。

5. 細(xi)胞培養(yang)上(shang)清或(huo)其它(ta)生(sheng)物(wu)標本(ben)：

請(qing) 1000×g 離心 20 分鐘(zhong)，取上(shang)清即可檢(jian)測(ce)，或將(jiang)上清置(zhi)於-20^oC 或(huo)-80^oC 保(bao)存，但(dan)應避免反復(fu)凍融(rong)。

註(zhu)意：

1.         以(yi)上標本(ben)均需(xu)密封(feng)保(bao)存，4^oC保(bao)存應小於1周，-20^oC不應超(chao)過(guo)1個(ge)月(yue)，-80^oC不應超(chao)過(guo)2個(ge)月(yue)。

2.         標(biao)本(ben)使(shi)用前應緩(huan)慢(man)均衡(heng)至室(shi)溫(wen)，不應加(jia)熱(re)使之(zhi)融(rong)解(jie)。

3.         實驗前紅細(xi)胞裂(lie)解(jie)液(ye)必(bi)須用(yong)標準品(pin)稀釋液(ye)稀釋。

雞(ji)幹(gan)細(xi)胞因子(zi)(SCF)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)試(shi)劑(ji)準備

1.         使(shi)用前將(jiang)所有(you)的試(shi)劑(ji)和(he)標本(ben)緩(huan)慢(man)均衡(heng)至室(shi)溫(wen)(18-25oC)，試(shi)劑(ji)不能(neng)直(zhi)接在37oC溶(rong)解(jie)。

2.         標(biao)準品(pin)(凍(dong)幹品(pin))：每(mei)瓶標準品(pin)加(jia)入(ru)標(biao)準品(pin)稀釋液(ye)1mL，蓋(gai)好(hao)後室(shi)溫(wen)靜(jing)置大(da)約10分鐘(zhong)，同時反(fan)復(fu)顛倒(dao)/搓動以(yi)助(zhu)溶解(jie)，其濃(nong)度為2000 pg/mL。準備7個稀釋標(biao)準品(pin)的(de)EP管(guan)，每個(ge)EP管(guan)中加(jia)入(ru)150μL的(de)標(biao)準品(pin)稀釋液(ye)，如圖(tu)所示依次(ci)倍比稀釋成(cheng)不同(tong)的(de)梯度， 標準品(pin)稀釋液(ye)(0pg/mL)直(zhi)接作為空(kong)白孔(kong)。為保(bao)證實驗結果有效性(xing)，每次(ci)實驗請使用新(xin)的標準品(pin)溶(rong)液(ye)。

3.         濃(nong)洗滌液(ye)：用(yong)580mL蒸(zheng)餾水(shui)或(huo)去(qu)離(li)子(zi)水(shui)將(jiang)20mL濃(nong)洗滌液(ye)稀釋至600mL，進(jin)行30倍稀釋。

標(biao)本(ben)處理(li)

1.         本(ben)公(gong)司(si)只(zhi)對(dui)試(shi)劑(ji)盒(he)本(ben)身(shen)負責(ze)，不對(dui)因使用(yong)該試(shi)劑(ji)盒(he)所(suo)造(zao)成(cheng)的樣本(ben)消耗負責(ze)，請使(shi)用者使用前充分考(kao)慮到(dao)樣(yang)本(ben)的(de)可能使用量，預(yu)留充足的(de)樣本(ben)。

2.         實驗前應預測(ce)標本(ben)含(han)量，如果標(biao)本(ben)濃(nong)度過(guo)高，應對(dui)標(biao)本(ben)進(jin)行稀釋，使(shi)稀釋後(hou)的標(biao)本(ben)符(fu)合(he)試(shi)劑(ji)盒(he)的(de)檢(jian)測(ce)範(fan)圍(wei)，計(ji)算時再乘以(yi)相(xiang)應的稀釋倍數。

3.         若(ruo)所檢(jian)樣本(ben)不包(bao)含(han)在說明書(shu)所(suo)列(lie)樣(yang)本(ben)之(zhi)中，建議進行預(yu)實驗驗證其有(you)效性(xing)，並註(zhu)意留存樣本(ben)。

4.         使(shi)用化學裂(lie)解(jie)液(ye)制(zhi)備的組(zu)織(zhi)勻(yun)漿或(huo)細(xi)胞提取液(ye)可(ke)能(neng)會(hui)由於某些化(hua)學(xue)物(wu)質的引(yin)入(ru)導(dao)致(zhi)  ELISA實驗結果偏(pian)差(cha)。

5.         若(ruo)樣本(ben)為細(xi)胞培養(yang)上(shang)清，因該類樣本(ben)幹(gan)擾(rao)因素 較多，如：細(xi)胞狀態(tai)、細(xi)胞數量、采(cai)樣時(shi)間(jian)等，所(suo)以(yi)可(ke)能(neng)存在檢(jian)測(ce)不出(chu)的(de)情(qing)況(kuang)。

6.         某些天(tian)然(ran)蛋(dan)白(bai)或(huo)重(zhong)組(zu)蛋白，包(bao)括(kuo)原核及(ji)真核重(zhong)組(zu)蛋白，可能因為與(yu)本(ben)產(chan)品(pin)所(suo)使用的檢(jian)測(ce)抗(kang)體(ti)及(ji)捕獲(huo)抗(kang)體(ti)不匹(pi)配(pei)，而不被(bei)檢(jian)測(ce)出(chu)。

7.         建(jian)議使用新(xin)鮮(xian)樣本(ben)，保(bao)存時間(jian)過(guo)長(chang)可(ke)能會(hui)存在蛋白(bai)降(jiang)解(jie)或變性(xing)導致(zhi)實驗結果偏(pian)差(cha)。

雞(ji)幹(gan)細(xi)胞因子(zi)(SCF)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)操(cao)作(zuo)步驟

1.         加(jia)樣(yang)：分別(bie)設空白(bai)孔(kong)（空白(bai)對(dui)照孔不加(jia)樣(yang)品(pin)及(ji)酶標(biao)試(shi)劑(ji)，其余(yu)各步操(cao)作(zuo)相同）、標準孔、待測(ce)樣品(pin)孔(kong)。在酶標包(bao)被(bei)板(ban)上(shang)標準品(pin)準確加(jia)樣(yang)50μl，待測(ce)樣品(pin)孔(kong)中先(xian)加(jia)樣(yang)品(pin)稀釋液(ye)40μl，然(ran)後(hou)再加(jia)待(dai)測(ce)樣品(pin)10μl（樣(yang)品(pin)*終稀釋度為5倍）。加(jia)樣(yang)將(jiang)樣品(pin)加(jia)於酶(mei)標(biao)板(ban)孔(kong)底部，盡量不觸(chu)及(ji)孔壁(bi)，輕輕(qing)晃動混勻(yun)。

2.         溫(wen)育：用(yong)封(feng)板(ban)膜(mo)封板(ban)後(hou)置37℃溫(wen)育30分鐘(zhong)。  

3.         配(pei)液(ye)：將(jiang)20倍濃(nong)縮(suo)洗滌液(ye)用(yong)蒸(zheng)餾水(shui)20倍稀釋後(hou)備用(yong)

4.         洗滌：小心揭(jie)掉(diao)封(feng)板(ban)膜(mo)，棄去(qu)液(ye)體(ti)，甩(shuai)幹，每孔加(jia)滿(man)洗滌液(ye)，靜(jing)置30秒後棄去(qu)，如此重(zhong)復(fu)5次(ci)，拍幹。

5.         加(jia)酶(mei)：每孔加(jia)入(ru)酶(mei)標(biao)試(shi)劑(ji)50μl，空白孔除(chu)外。

6.         溫(wen)育：操(cao)作(zuo)同3。

7.         洗滌：操(cao)作(zuo)同5。

8.         顯(xian)色(se)：每(mei)孔(kong)先(xian)加(jia)入(ru)顯(xian)色(se)劑(ji)A50μl，再加(jia)入(ru)顯(xian)色(se)劑(ji)B50μl，輕輕震蕩(dang)混勻(yun)，37℃避光顯(xian)色(se)15分鐘(zhong).

9.         終止：每(mei)孔加(jia)終止液(ye)50μl，終止反(fan)應（此時藍色(se)立(li)轉(zhuan)黃(huang)色(se)）。

10.     測(ce)定：以空白(bai)空調(tiao)零(ling)，450nm波(bo)長(chang)依(yi)序(xu)測(ce)量各孔的(de)吸(xi)光度（OD值）。 測(ce)定應在加(jia)終止液(ye)後(hou)15分鐘(zhong)以內進(jin)行(xing)。

註(zhu)意：

1.         試(shi)劑(ji)準備：準備壹次(ci)實驗所需(xu)要的酶(mei)標條，其它(ta)的(de)可從(cong)微(wei)孔(kong)板(ban)上(shang)拆(chai)下(xia)，密封(feng)，按(an)照說明書(shu)要求(qiu)保(bao)存，以備下(xia)次(ci)使用(yong)。

2.         加(jia)樣(yang)：實驗操(cao)作(zuo)中請使用(yong)壹次(ci)性(xing)的吸(xi)頭(tou)，避免交(jiao)叉(cha)汙染(ran)。加(jia)樣(yang)時註意不要有氣(qi)泡，將(jiang)樣品(pin)加(jia)於酶(mei)標(biao)板(ban)底(di)部，盡量不觸(chu)及(ji)孔壁(bi)，輕輕(qing)晃動混勻(yun)。加(jia)樣(yang)或加(jia)試(shi)劑(ji)時，**個孔與(yu)*後壹個(ge)孔加(jia)樣(yang)之間(jian)的(de)時間(jian)間(jian)隔如果太(tai)大，將(jiang)會(hui)導致(zhi)不同(tong)的(de)“預溫(wen)育”時(shi)間(jian)，從(cong)而明顯(xian)地(di)影響(xiang)到(dao)測(ce)量值(zhi)的準確性(xing)及(ji)重(zhong)復(fu)性(xing)。因此，壹次(ci)加(jia)樣(yang)時間(jian)(包(bao)括(kuo)標準品(pin)及(ji)所有(you)樣品(pin))*好(hao)控制(zhi)在10分鐘(zhong)內。推薦(jian)設(she)置復(fu)孔進(jin)行(xing)實驗。

3.          溫(wen)育：為防止樣(yang)品(pin)蒸(zheng)發，實驗時請將(jiang)加(jia)上(shang)蓋或覆(fu)膜(mo)的酶標板(ban)置(zhi)於濕(shi)盒(he)內(nei)，以(yi)避免液(ye)體(ti)蒸(zheng)發，洗板(ban)後(hou)應盡快進(jin)行下(xia)步操(cao)作(zuo)，任何(he)時侯都應避免酶標板(ban)處於幹(gan)燥(zao)狀(zhuang)態(tai)，同時應嚴格(ge)遵(zun)守(shou)給(gei)定(ding)的溫(wen)育時(shi)間(jian)和(he)溫(wen)度。

4.         洗滌：充分的(de)洗滌非常(chang)重(zhong)要，在每(mei)次(ci)洗滌過(guo)程(cheng)中(zhong)，都要將(jiang)洗滌液(ye)完(wan)全(quan)甩(shuai)幹(gan)。洗滌過(guo)程(cheng)中(zhong)反應孔中殘留的(de)洗滌液(ye)應在濾紙上(shang)拍幹，勿(wu)將(jiang)濾紙直(zhi)接放入(ru)反(fan)應孔中吸水(shui)，同(tong)時(shi)要消除(chu)板(ban)底(di)殘留的(de)液(ye)體(ti)和(he)手(shou)指印(yin)，避免影響(xiang)*後(hou)的酶標儀(yi)讀(du)數(shu)。如果有(you)自動洗板(ban)機(ji)，應在熟(shu)練使(shi)用(yong)後(hou)再用到(dao)正(zheng)式(shi)實 驗過(guo)程(cheng)中(zhong)。

5.         反(fan)應時間(jian)的(de)控制(zhi)：加(jia)入(ru)底(di)物(wu)後請(qing)定(ding)時(shi)觀察反(fan)應孔的顏色(se)變化(hua)(比(bi)如，每隔10分鐘(zhong)觀察壹次(ci))，如顏色(se)較深，請(qing)提前加(jia)入(ru)終止液(ye)終止反(fan)應，避免反應過(guo)強(qiang)從(cong)而影響(xiang)酶(mei)標儀光密度讀(du)數(shu)。

6.         底(di)物(wu)：底(di)物(wu)請避光保(bao)存，在儲存和(he)溫(wen)育時(shi)避免強光直(zhi)接照射(she)。

7.         如果實驗室(shi)內濕(shi)度低(di)於60%，推(tui)薦(jian)使(shi)用加(jia)濕(shi)器提高濕度水(shui)平(ping)。

 實驗流程

1.         實驗前標準品(pin)、試(shi)劑(ji)及(ji)樣本(ben)的(de)準備；

2.         加(jia)樣(yang)（標準品(pin)及(ji)樣本(ben)）50μL，37℃孵(fu)育30分鐘(zhong)；

3.         洗板(ban)5次(ci)，加(jia)酶(mei)標試(shi)劑(ji)50ul，37℃孵(fu)育半(ban)小時(shi)；

4.         洗板(ban)5次(ci)；加(jia)入(ru)顯(xian)色(se)液(ye)A，B各50ul,37℃孵(fu)育顯(xian)色(se)15分鐘(zhong)

5.         加(jia)終止液(ye)50μL，立(li)即450nm讀(du)數(shu)。

6.    計(ji)算

雞(ji)幹(gan)細(xi)胞因子(zi)(SCF)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)計(ji)算

各標準品(pin)及(ji)樣本(ben)O.D.值(zhi)扣(kou)除(chu)空白(bai)孔O.D.值後作圖(tu)(七點圖(tu))，如設置(zhi)復(fu)孔，則(ze)應取其平(ping)均值計(ji)算。以標準品(pin)的(de)濃(nong)度為縱(zong)坐標(biao)(或對(dui)數(shu)坐(zuo)標(biao))，O.D.值(zhi)為橫坐標(biao)(或對(dui)數(shu)坐(zuo)標(biao)），繪出(chu)標(biao)準曲線(xian)(*佳方程(cheng)式應依回歸(gui)方程(cheng)計算的R2值來(lai)定，以(yi)R2值越趨(qu)近(jin)於1為好(hao))。推薦(jian)使(shi)用(yong)專業制(zhi)作曲線(xian)軟(ruan)件(jian)進(jin)行(xing)分析(xi)，如curve expert 1.30，根據(ju)樣品(pin)O.D.值(zhi)，由標準曲線(xian)查(zha)出(chu)相(xiang)應的濃(nong)度，乘以(yi)稀釋倍數；或(huo)用標(biao)準物(wu)的濃(nong)度與(yu)O.D.值計(ji)算出(chu)標(biao)準曲線(xian)的(de)回歸(gui)方程(cheng)式，將(jiang)樣品(pin)的(de)O.D.值代入(ru)方程(cheng)式，計算出(chu)樣(yang)品(pin)濃(nong)度，再乘以(yi)稀釋倍數，即為樣(yang)品(pin)的(de)實際濃(nong)度。

 特異性(xing)

本(ben)試(shi)劑(ji)盒(he)用(yong)於檢(jian)測(ce)雞(ji)幹(gan)細(xi)胞因子(zi)(SCF)，經檢(jian)測(ce)與(yu)其它(ta)相(xiang)似物(wu)質無明顯(xian)交(jiao)叉(cha)反應。

由(you)於受(shou)到(dao)技術(shu)及(ji)樣本(ben)來(lai)源的(de)限(xian)制(zhi)，不可(ke)能(neng)完成(cheng)對(dui)所(suo)有(you)相(xiang)關(guan)或相似物(wu)質交(jiao)叉(cha)反應檢(jian)測(ce)，因此本(ben)試(shi)劑(ji)盒(he)有(you)可(ke)能(neng)與(yu)未經(jing)檢(jian)測(ce)的其它(ta)物(wu)質有交(jiao)叉(cha)反應。

 精(jing)密度

精(jing)密度用樣(yang)品(pin)測(ce)定值的變異系數CV表示。CV(%) = SD/mean×100

批內差：取同(tong)批次(ci)試(shi)劑(ji)盒(he)對(dui)低(di)、中、高值定值樣本(ben)進(jin)行定量檢(jian)測(ce),每份樣本(ben)連(lian)續測(ce)定20 次(ci)，分別(bie)計算不同(tong)濃(nong)度樣本(ben)的(de)平(ping)均值及(ji)SD值。

批間(jian)差(cha)：選(xuan)取3個(ge)不同(tong)批次(ci)的試(shi)劑(ji)盒(he)分別(bie)對(dui)低(di)、中、高值定值樣本(ben)進(jin)行定量測(ce)定，每個樣(yang)本(ben)使(shi)用同壹試(shi)劑(ji)盒(he)重(zhong)復(fu)測(ce)定8次(ci)，分別(bie)計算不同(tong)濃(nong)度樣本(ben)的(de)平(ping)均值及(ji)SD值。

批內差： CV<10%

批間(jian)差(cha)： CV<12%

雞(ji)幹(gan)細(xi)胞因子(zi)(SCF)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)穩定性(xing)

經(jing)測(ce)定，試(shi)劑(ji)盒(he)在(zai)有(you)效期(qi)內按(an)推(tui)薦(jian)溫(wen)度保(bao)存，其活性(xing)降(jiang)低(di)率小(xiao)於5%。

為減(jian)小(xiao)外部因素對(dui)試(shi)劑(ji)盒(he)破(po)壞前後(hou)檢(jian)測(ce)值的影響(xiang)，實驗室(shi)的環境(jing)條件(jian)需(xu)盡量保(bao)持壹致(zhi)，尤其是(shi)實驗室(shi)內溫(wen)度、濕度及(ji)溫(wen)育條件(jian)。其次(ci)由同(tong)壹實驗員(yuan)來(lai)進(jin)行(xing)操(cao)作(zuo)可減(jian)少人(ren)為誤(wu)差。