產品(pin)名(ming)稱：雞(ji)腦(nao)源(yuan)性神(shen)經(jing)營養(yang)因(yin)子(zi)(BDNF)ELISA試(shi)劑(ji)盒

                                                       96T       僅(jin)供體(ti)外(wai)研究(jiu)使(shi)用(yong)，不用(yong)於(yu)臨床診(zhen)斷!

雞(ji)腦(nao)源(yuan)性神(shen)經(jing)營養(yang)因(yin)子(zi)(BDNF)ELISA試(shi)劑(ji)盒

本(ben)試(shi)劑(ji)盒運用(yong)雙抗體(ti)夾(jia)心(xin)ELISA法定量(liang)測定(ding)雞(ji)血(xue)清(qing)、血(xue)漿、組(zu)織(zhi)勻(yun)漿、細胞裂(lie)解液(ye)、細胞培(pei)養(yang)上清(qing)液(ye)和其(qi)他生物液體(ti)中(zhong)雞(ji)腦(nao)源(yuan)性神(shen)經(jing)營養(yang)因(yin)子(zi)(BDNF)含(han)量(liang)。

 檢(jian)測範(fan)圍(wei)

0.156-10 ng/mL

 *低(di)檢測(ce)限(xian)

0.034 ng/mL

 實驗原理

將(jiang)雞(ji)腦(nao)源(yuan)性神(shen)經(jing)營養(yang)因(yin)子(zi)(BDNF)抗體(ti)包(bao)被(bei)於(yu)96孔(kong)微(wei)孔(kong)板(ban)中(zhong)，制(zhi)成固(gu)相(xiang)載體(ti)，向(xiang)微(wei)孔(kong)中(zhong)分別加(jia)入(ru)標(biao)準品(pin)或標(biao)本(ben)，其中(zhong)的(de)雞(ji)腦(nao)源(yuan)性神(shen)經(jing)營養(yang)因(yin)子(zi)(BDNF)與(yu)連接(jie)於(yu)固相載體上的抗體(ti)結(jie)合，然(ran)後(hou)加(jia)入(ru)生(sheng)物素化的雞(ji)腦(nao)源(yuan)性神(shen)經(jing)營養(yang)因(yin)子(zi)(BDNF)抗體(ti)，將(jiang)未結(jie)合的生(sheng)物素化抗體(ti)洗(xi)凈後，加(jia)入(ru)HRP標(biao)記(ji)的(de)親(qin)和素，再(zai)次徹(che)底洗(xi)滌後(hou)加(jia)入(ru)TMB底物顯(xian)色。TMB在過(guo)氧化物酶(mei)的(de)催(cui)化下轉化成藍色，並在酸(suan)的(de)作(zuo)用(yong)下轉(zhuan)化成*終的黃(huang)色。顏色的深(shen)淺和樣品(pin)中(zhong)的雞(ji)腦(nao)源(yuan)性神(shen)經(jing)營養(yang)因(yin)子(zi)(BDNF)呈(cheng)正相(xiang)關(guan)。用(yong)酶(mei)標(biao)儀在450nm波長(chang)下(xia)測(ce)定吸(xi)光(guang)度(O.D.值(zhi))，計算(suan)樣(yang)品濃(nong)度。

 試(shi)劑(ji)盒內容

雞(ji)腦(nao)源(yuan)性神(shen)經(jing)營養(yang)因(yin)子(zi)(BDNF)ELISA試(shi)劑(ji)盒需(xu)自備的(de)設(she)備及試(shi)劑(ji)

1.         450±10nm濾(lv)光(guang)片的酶(mei)標(biao)儀(建議(yi)儀(yi)器(qi)使(shi)用(yong)前(qian)提前(qian)預(yu)熱)

2.         單(dan)道(dao)或多道(dao)微(wei)量(liang)加(jia)液(ye)器(qi)及吸(xi)頭

3.         稀(xi)釋(shi)樣(yang)品的(de)EP管

4.         蒸(zheng)餾(liu)水或去(qu)離子(zi)水

5.         吸(xi)水紙(zhi)

6.         盛放(fang)洗(xi)液(ye)的(de)容(rong)器(qi)

 試(shi)劑(ji)盒的儲存及有效期

1.         未開封的試(shi)劑(ji)盒：所(suo)有試(shi)劑(ji)均按(an)試(shi)劑(ji)瓶標(biao)簽(qian)上所(suo)示(shi)保(bao)存。請(qing)註意，收到試(shi)劑(ji)盒後請盡快將TMB 洗(xi)滌液(ye)，終止液(ye)保(bao)存於(yu)4℃，其他試(shi)劑(ji)保(bao)存於(yu)-20℃。

2.         使(shi)用(yong)後的(de)試(shi)劑(ji)盒：剩余試(shi)劑(ji)仍(reng)需(xu)按照(zhao)試(shi)劑(ji)瓶標(biao)簽(qian)所(suo)示(shi)的(de)溫(wen)度保(bao)存，開封後的酶(mei)標(biao)板(ban)要(yao)加(jia)幹(gan)燥劑後密(mi)封保(bao)存於(yu)-20℃，避(bi)免潮(chao)濕。

註(zhu)意：

試(shi)劑(ji)盒內酶(mei)標(biao)條可(ke)拆(chai)卸(xie)，按實驗需(xu)求(qiu)可(ke)分多次使(shi)用(yong)；使(shi)用(yong)後的(de)剩余試(shi)劑(ji)盒建議在**實驗後 1個月內使(shi)用(yong)完畢。產(chan)品過(guo)期時間(jian)以盒子(zi)上的標(biao)簽(qian)為(wei)準，保(bao)質期內所(suo)有組(zu)分都確保(bao)是穩(wen)定的。

雞(ji)腦(nao)源(yuan)性神(shen)經(jing)營養(yang)因(yin)子(zi)(BDNF)ELISA試(shi)劑(ji)盒標(biao)本(ben)的采(cai)集與(yu)保(bao)存

1.         血(xue)清(qing)：

將(jiang)收集於(yu)血清(qing)分離管(guan)的全血(xue)標(biao)本(ben)在室(shi)溫(wen)放(fang)置(zhi) 2 小時(shi)或 4^oC 過(guo)夜，然(ran)後(hou) 1000×g 離心(xin) 20 分鐘(zhong)，取上清(qing)即(ji)可，或將上清(qing)置(zhi)於(yu)-20^oC 或-80^oC 保(bao)存，但(dan)應(ying)避(bi)免反復凍融。

2.         血(xue)漿：

用(yong) EDTA 或肝(gan)素(su)作(zuo)為(wei)抗凝(ning)劑(ji)采(cai)集標(biao)本(ben)，並將(jiang)標(biao)本(ben)在采(cai)集後(hou)的 30 分鐘(zhong)內於(yu) 2-8^oC 1000×g 離心(xin) 15 分鐘(zhong)，取上清(qing)即(ji)可檢(jian)測(ce)，或將上清(qing)置(zhi)於(yu)-20^oC 或-80^oC 保(bao)存，但(dan)應(ying)避(bi)免反復凍融。

3. 組(zu)織(zhi)勻(yun)漿：

1） 取(qu)適量(liang)組(zu)織(zhi)塊(kuai)，於(yu)預(yu)冷PBS（0.01mol/L, pH 7.0-7.2）中(zhong)清(qing)洗(xi)去(qu)除(chu)血液，稱重後備用(yong)（組(zu)織(zhi)塊(kuai)較(jiao)大需(xu)先剪(jian)碎(sui)後(hou)再(zai)勻漿）；

2） 可(ke)同時(shi)選(xuan)用(yong)多種(zhong)勻漿方(fang)法達(da)到較(jiao)好的(de)破碎(sui)效果(guo)：首先將(jiang)組(zu)織(zhi)塊(kuai)移(yi)入(ru)玻璃(li)勻漿器，加(jia)入(ru)5-10mL 預(yu)冷PBS 進(jin)行充(chong)分研磨(mo)，該(gai)過(guo)程(cheng)需(xu)在冰(bing)上進行（有條件(jian)實驗室(shi)可(ke)選(xuan)用(yong)機(ji)器(qi)勻漿）；得到的(de)勻(yun)漿液可再(zai)利用(yong)超聲破碎(sui)或反復凍融 進壹步處(chu)理（超聲破碎(sui)過(guo)程(cheng)中(zhong)註(zhu)意冰浴(yu)降(jiang)溫(wen)；反(fan)復凍融法可(ke)重復2 次(ci)）。

3） 將(jiang)制(zhi)備好(hao)的(de)勻(yun)漿液於(yu)5000×g 離心(xin)5 分鐘(zhong)，留取上清(qing)即(ji)可檢(jian)測(ce)。

4. 細胞裂(lie)解液(ye)：

1）貼壁細胞需(xu)要(yao)先用(yong)胰酶(mei)消化，離心(xin)收集細胞（懸(xuan)浮細胞可(ke)直(zhi)接(jie)離心(xin)收集）；

2）將(jiang)收集到的(de)細胞用(yong)冷PBS 洗(xi)3 次(ci)；

3）物理方(fang)法裂(lie)解細胞（可(ke)先超聲破碎(sui)細胞，再(zai)反復凍融）：

i 超聲破碎(sui)：取(qu)適(shi)量(liang)PBS 重懸(xuan)細胞，用(yong)壹定(ding)功率(lv)的超聲波處理(li)細胞懸(xuan)液，使(shi)細胞急(ji)劇(ju)震蕩(dang)破裂(lie)。

ii 反(fan)復凍融：將待破碎(sui)的(de)細胞在-20 ^oC 以(yi)下冰(bing)凍，室(shi)溫(wen)融解，反(fan)復3 次(ci)，使(shi)細胞溶脹破碎(sui)。

4）將(jiang)標(biao)本(ben)於(yu)2-8 ^oC 1500×g 離心(xin)10 分鐘(zhong)，收集上清(qing)備用(yong)。

5. 細胞培(pei)養(yang)上清(qing)或其它(ta)生(sheng)物標(biao)本(ben)：

請(qing) 1000×g 離心(xin) 20 分鐘(zhong)，取上清(qing)即(ji)可檢(jian)測(ce)，或將上清(qing)置(zhi)於(yu)-20^oC 或-80^oC 保(bao)存，但(dan)應(ying)避(bi)免反復凍融。

註(zhu)意：

1.         以(yi)上標(biao)本(ben)均需(xu)密(mi)封保(bao)存，4^oC保(bao)存應(ying)小於(yu)1周(zhou)，-20^oC不應(ying)超過(guo)1個月，-80^oC不應(ying)超過(guo)2個月。

2.         標(biao)本(ben)使(shi)用(yong)前(qian)應緩(huan)慢(man)均衡(heng)至(zhi)室(shi)溫(wen)，不應(ying)加(jia)熱使(shi)之融解。

3.         實驗前(qian)紅細胞裂(lie)解液(ye)必(bi)須用(yong)標(biao)準品(pin)稀(xi)釋(shi)液(ye)稀(xi)釋(shi)。

雞(ji)腦(nao)源(yuan)性神(shen)經(jing)營養(yang)因(yin)子(zi)(BDNF)ELISA試(shi)劑(ji)盒試(shi)劑(ji)準備

1.         使(shi)用(yong)前(qian)將所(suo)有的(de)試(shi)劑(ji)和標(biao)本(ben)緩慢(man)均衡(heng)至(zhi)室(shi)溫(wen)(18-25oC)，試(shi)劑(ji)不能(neng)直(zhi)接(jie)在37oC溶解。

2.         標(biao)準品(pin)(凍幹品(pin))：每瓶標(biao)準品(pin)加(jia)入(ru)標(biao)準品(pin)稀(xi)釋(shi)液(ye)1mL，蓋(gai)好後(hou)室(shi)溫(wen)靜(jing)置(zhi)大約(yue)10分鐘(zhong)，同時反復顛(dian)倒(dao)/搓動以(yi)助溶解，其(qi)濃(nong)度為(wei)10ng/mL。準備7個(ge)稀(xi)釋(shi)標(biao)準品(pin)的EP管，每個EP管(guan)中加(jia)入(ru)150μL的(de)標(biao)準品(pin)稀(xi)釋(shi)液(ye)，如(ru)圖(tu)所(suo)示(shi)依次倍比(bi)稀(xi)釋(shi)成不同(tong)的梯(ti)度， 標(biao)準品(pin)稀(xi)釋(shi)液(ye)(0pg/mL)直(zhi)接(jie)作(zuo)為(wei)空(kong)白(bai)孔(kong)。為(wei)保(bao)證(zheng)實驗結(jie)果有效性(xing)，每次實驗請使(shi)用(yong)新的(de)標(biao)準品(pin)溶液。

3.         濃(nong)洗(xi)滌液(ye)：用(yong)580mL蒸(zheng)餾(liu)水或去(qu)離子(zi)水將20mL濃(nong)洗(xi)滌液(ye)稀(xi)釋(shi)至(zhi)600mL，進(jin)行30倍稀(xi)釋(shi)。

標(biao)本(ben)處理(li)

1.         本(ben)公司(si)只對試(shi)劑(ji)盒本(ben)身(shen)負(fu)責(ze)，不對(dui)因(yin)使(shi)用(yong)該(gai)試(shi)劑(ji)盒所(suo)造(zao)成的(de)樣(yang)本(ben)消耗(hao)負(fu)責(ze)，請(qing)使(shi)用(yong)者使(shi)用(yong)前(qian)充(chong)分考(kao)慮到樣(yang)本(ben)的可(ke)能(neng)使(shi)用(yong)量(liang)，預(yu)留充(chong)足的(de)樣本(ben)。

2.         實驗前(qian)應預(yu)測標(biao)本(ben)含(han)量(liang)，如(ru)果標(biao)本(ben)濃(nong)度過(guo)高，應(ying)對(dui)標(biao)本(ben)進行(xing)稀(xi)釋(shi)，使(shi)稀(xi)釋(shi)後(hou)的標(biao)本(ben)符(fu)合試(shi)劑(ji)盒的檢測範(fan)圍(wei)，計算(suan)時(shi)再(zai)乘(cheng)以(yi)相(xiang)應(ying)的稀(xi)釋(shi)倍數(shu)。

3.         若(ruo)所(suo)檢(jian)樣(yang)本(ben)不包(bao)含(han)在說(shuo)明(ming)書(shu)所(suo)列(lie)樣(yang)本(ben)之中(zhong)，建(jian)議(yi)進行預(yu)實驗驗證(zheng)其(qi)有效性(xing)，並註意留存(cun)樣(yang)本(ben)。

4.         使(shi)用(yong)化學裂(lie)解液(ye)制(zhi)備的(de)組(zu)織(zhi)勻(yun)漿或細胞提取(qu)液(ye)可(ke)能(neng)會由於(yu)某(mou)些化學物質的引(yin)入(ru)導致  ELISA實驗結(jie)果偏差(cha)。

5.         若(ruo)樣本(ben)為(wei)細胞培(pei)養(yang)上清(qing)，因(yin)該(gai)類樣(yang)本(ben)幹擾(rao)因(yin)素(su) 較(jiao)多，如(ru)：細胞狀(zhuang)態、細胞數(shu)量(liang)、采樣(yang)時(shi)間(jian)等，所(suo)以(yi)可(ke)能(neng)存在檢(jian)測(ce)不出(chu)的情(qing)況(kuang)。

6.         某(mou)些天然(ran)蛋(dan)白(bai)或重組(zu)蛋(dan)白(bai)，包括(kuo)原(yuan)核(he)及真(zhen)核重組(zu)蛋(dan)白(bai)，可能(neng)因(yin)為(wei)與(yu)本(ben)產品(pin)所(suo)使(shi)用(yong)的檢(jian)測(ce)抗體(ti)及捕(bu)獲(huo)抗體(ti)不匹(pi)配，而不被(bei)檢(jian)測出。

7.         建(jian)議使(shi)用(yong)新鮮樣(yang)本(ben)，保(bao)存時(shi)間過(guo)長(chang)可(ke)能(neng)會存(cun)在蛋(dan)白(bai)降(jiang)解(jie)或變性導致實驗結(jie)果偏差(cha)。

雞(ji)腦(nao)源(yuan)性神(shen)經(jing)營養(yang)因(yin)子(zi)(BDNF)ELISA試(shi)劑(ji)盒操作(zuo)步驟

1.         加(jia)樣(yang)：分別設空白(bai)孔(kong)（空(kong)白(bai)對照(zhao)孔(kong)不加(jia)樣(yang)品(pin)及酶(mei)標(biao)試(shi)劑(ji)，其余(yu)各步操(cao)作(zuo)相同(tong)）、標(biao)準孔(kong)、待測(ce)樣(yang)品(pin)孔(kong)。在酶(mei)標(biao)包被(bei)板(ban)上標(biao)準品(pin)準確(que)加(jia)樣(yang)50μl，待測(ce)樣(yang)品(pin)孔(kong)中(zhong)先(xian)加(jia)樣(yang)品(pin)稀(xi)釋(shi)液(ye)40μl，然(ran)後(hou)再(zai)加(jia)待測(ce)樣(yang)品(pin)10μl（樣品*終稀(xi)釋(shi)度為(wei)5倍）。加(jia)樣(yang)將(jiang)樣(yang)品(pin)加(jia)於(yu)酶(mei)標(biao)板(ban)孔(kong)底部(bu)，盡量(liang)不觸及孔(kong)壁，輕輕晃動混勻。

2.         溫(wen)育(yu)：用(yong)封板(ban)膜封板(ban)後(hou)置(zhi)37℃溫育(yu)30分鐘(zhong)。  

3.         配(pei)液：將(jiang)20倍濃(nong)縮(suo)洗(xi)滌液(ye)用(yong)蒸(zheng)餾(liu)水20倍稀(xi)釋(shi)後(hou)備用(yong)

4.         洗(xi)滌：小(xiao)心(xin)揭(jie)掉(diao)封(feng)板(ban)膜，棄去(qu)液(ye)體，甩幹，每孔(kong)加(jia)滿洗(xi)滌液(ye)，靜置(zhi)30秒(miao)後棄去(qu)，如(ru)此重復5次(ci)，拍幹。

5.         加(jia)酶(mei)：每孔(kong)加(jia)入(ru)酶(mei)標(biao)試(shi)劑(ji)50μl，空白(bai)孔(kong)除(chu)外(wai)。

6.         溫(wen)育(yu)：操(cao)作(zuo)同3。

7.         洗(xi)滌：操(cao)作(zuo)同5。

8.         顯(xian)色：每孔(kong)先(xian)加(jia)入(ru)顯(xian)色劑A50μl，再(zai)加(jia)入(ru)顯(xian)色劑B50μl，輕輕震(zhen)蕩(dang)混勻，37℃避(bi)光(guang)顯(xian)色15分鐘(zhong).

9.         終止：每孔(kong)加(jia)終止液(ye)50μl，終止反(fan)應(ying)（此時藍色立轉(zhuan)黃(huang)色）。

10.     測(ce)定：以(yi)空(kong)白(bai)空調(tiao)零(ling)，450nm波長(chang)依序測量(liang)各孔(kong)的(de)吸(xi)光(guang)度（OD值(zhi)）。 測定(ding)應在加(jia)終止液(ye)後(hou)15分鐘(zhong)以內進行(xing)。

註(zhu)意：

1.         試(shi)劑(ji)準備：準備壹次(ci)實驗所(suo)需(xu)要(yao)的酶(mei)標(biao)條，其(qi)它(ta)的(de)可(ke)從微(wei)孔(kong)板(ban)上拆下，密(mi)封，按(an)照說(shuo)明(ming)書(shu)要(yao)求(qiu)保(bao)存，以(yi)備下(xia)次(ci)使(shi)用(yong)。

2.         加(jia)樣(yang)：實驗操作(zuo)中請(qing)使(shi)用(yong)壹次(ci)性的(de)吸(xi)頭，避(bi)免交叉(cha)汙(wu)染(ran)。加(jia)樣(yang)時(shi)註(zhu)意不要(yao)有氣(qi)泡(pao)，將樣(yang)品加(jia)於(yu)酶(mei)標(biao)板(ban)底部(bu)，盡量(liang)不觸及孔(kong)壁，輕輕晃動混勻。加(jia)樣(yang)或加(jia)試(shi)劑(ji)時，**個(ge)孔(kong)與(yu)*後(hou)壹個(ge)孔(kong)加(jia)樣(yang)之(zhi)間(jian)的(de)時間間隔(ge)如(ru)果太(tai)大，將(jiang)會(hui)導致不同(tong)的“預(yu)溫育(yu)”時(shi)間，從而明顯(xian)地影(ying)響(xiang)到測(ce)量(liang)值的(de)準確(que)性及重復性(xing)。因(yin)此，壹次(ci)加(jia)樣(yang)時(shi)間(jian)(包(bao)括標(biao)準品(pin)及所(suo)有樣(yang)品(pin))*好控(kong)制(zhi)在10分鐘(zhong)內。推薦(jian)設(she)置(zhi)復孔(kong)進(jin)行(xing)實驗。

3.          溫(wen)育(yu)：為(wei)防(fang)止樣(yang)品(pin)蒸(zheng)發(fa)，實驗時請將(jiang)加(jia)上蓋(gai)或覆(fu)膜的酶(mei)標(biao)板(ban)置(zhi)於(yu)濕盒內，以避(bi)免液體(ti)蒸(zheng)發(fa)，洗(xi)板(ban)後(hou)應(ying)盡快進行下步操(cao)作(zuo)，任何(he)時(shi)侯都應避(bi)免酶(mei)標(biao)板(ban)處(chu)於(yu)幹燥狀(zhuang)態，同(tong)時(shi)應(ying)嚴格(ge)遵(zun)守(shou)給(gei)定的(de)溫(wen)育(yu)時(shi)間和溫度。

4.         洗(xi)滌：充(chong)分的洗(xi)滌非(fei)常(chang)重要(yao)，在每次洗(xi)滌過(guo)程(cheng)中(zhong)，都要(yao)將洗(xi)滌液(ye)完全甩幹。洗(xi)滌過(guo)程(cheng)中(zhong)反(fan)應(ying)孔(kong)中(zhong)殘留(liu)的(de)洗(xi)滌液(ye)應在濾(lv)紙(zhi)上拍幹，勿(wu)將濾紙(zhi)直(zhi)接(jie)放(fang)入(ru)反(fan)應孔(kong)中(zhong)吸(xi)水，同時(shi)要(yao)消除(chu)板(ban)底殘留(liu)的(de)液體和(he)手(shou)指印，避(bi)免影(ying)響(xiang)*後的酶(mei)標(biao)儀讀(du)數。如(ru)果有自(zi)動洗(xi)板(ban)機(ji)，應(ying)在熟練使(shi)用(yong)後再(zai)用(yong)到正(zheng)式(shi)實 驗過(guo)程(cheng)中(zhong)。

5.         反(fan)應時(shi)間(jian)的(de)控(kong)制(zhi)：加(jia)入(ru)底物後請(qing)定(ding)時(shi)觀察(cha)反(fan)應孔(kong)的(de)顏色變化(比如(ru)，每隔10分鐘(zhong)觀察(cha)壹次(ci))，如(ru)顏色較(jiao)深(shen)，請(qing)提前(qian)加(jia)入(ru)終止液(ye)終止反(fan)應(ying)，避(bi)免反應(ying)過(guo)強從而影(ying)響(xiang)酶(mei)標(biao)儀光(guang)密(mi)度讀(du)數。

6.         底物：底物請避(bi)光(guang)保(bao)存，在儲(chu)存(cun)和溫(wen)育(yu)時(shi)避(bi)免強光(guang)直(zhi)接(jie)照(zhao)射。

7.         如(ru)果實驗室(shi)內(nei)濕(shi)度低(di)於(yu)60%，推薦(jian)使(shi)用(yong)加(jia)濕(shi)器(qi)提高濕(shi)度水平(ping)。

 實驗流(liu)程(cheng)

1.         實驗前(qian)標(biao)準品(pin)、試(shi)劑(ji)及樣(yang)本(ben)的準備；

2.         加(jia)樣(yang)（標(biao)準品(pin)及樣(yang)本(ben)）50μL，37℃孵育(yu)30分鐘(zhong)；

3.         洗(xi)板(ban)5次(ci)，加(jia)酶(mei)標(biao)試(shi)劑(ji)50ul，37℃孵育(yu)半小時(shi)；

4.         洗(xi)板(ban)5次(ci)；加(jia)入(ru)顯(xian)色液A，B各50ul,37℃孵育(yu)顯(xian)色15分鐘(zhong)

5.         加(jia)終止液(ye)50μL，立(li)即450nm讀(du)數。

6.    計算(suan)

雞(ji)腦(nao)源(yuan)性神(shen)經(jing)營養(yang)因(yin)子(zi)(BDNF)ELISA試(shi)劑(ji)盒計算(suan)

各標(biao)準品(pin)及樣(yang)本(ben)O.D.值扣(kou)除(chu)空白(bai)孔(kong)O.D.值(zhi)後(hou)作(zuo)圖(tu)(七點(dian)圖(tu))，如(ru)設置(zhi)復孔(kong)，則(ze)應(ying)取其平(ping)均值(zhi)計算(suan)。以(yi)標(biao)準品(pin)的濃(nong)度為(wei)縱(zong)坐標(biao)(或對數(shu)坐標(biao))，O.D.值為(wei)橫(heng)坐標(biao)(或對數(shu)坐標(biao)），繪出標(biao)準曲(qu)線(*佳方(fang)程(cheng)式(shi)應依回歸方(fang)程(cheng)計算(suan)的(de)R2值來(lai)定，以R2值(zhi)越(yue)趨(qu)近(jin)於(yu)1為(wei)好(hao))。推薦(jian)使(shi)用(yong)專(zhuan)業(ye)制(zhi)作(zuo)曲線(xian)軟(ruan)件(jian)進行分析，如(ru)curve expert 1.30，根據樣品O.D.值，由標(biao)準曲(qu)線查出相(xiang)應(ying)的(de)濃(nong)度，乘(cheng)以(yi)稀(xi)釋(shi)倍數(shu)；或用(yong)標(biao)準物的濃(nong)度與(yu)O.D.值計算(suan)出(chu)標(biao)準曲(qu)線的回歸方(fang)程(cheng)式(shi)，將樣品(pin)的O.D.值(zhi)代(dai)入(ru)方(fang)程(cheng)式(shi)，計算(suan)出(chu)樣品濃(nong)度，再(zai)乘(cheng)以(yi)稀(xi)釋(shi)倍數(shu)，即(ji)為(wei)樣(yang)品(pin)的(de)實際濃(nong)度。

 特(te)異(yi)性(xing)

本(ben)試(shi)劑(ji)盒用(yong)於(yu)檢測雞(ji)腦(nao)源(yuan)性神(shen)經(jing)營養(yang)因(yin)子(zi)(BDNF)，經(jing)檢測與其它(ta)相(xiang)似物質無明(ming)顯(xian)交(jiao)叉(cha)反應(ying)。

由於(yu)受到技(ji)術(shu)及樣(yang)本(ben)來(lai)源(yuan)的限(xian)制(zhi)，不可(ke)能(neng)完成對(dui)所(suo)有相(xiang)關(guan)或相似物質交叉(cha)反應(ying)檢測(ce)，因(yin)此本(ben)試(shi)劑(ji)盒有可(ke)能(neng)與未經(jing)檢測的其它(ta)物質有交(jiao)叉(cha)反應(ying)。

 精(jing)密(mi)度

精(jing)密(mi)度用(yong)樣品(pin)測(ce)定(ding)值的變異(yi)系(xi)數CV表示。CV(%) = SD/mean×100

批內差(cha)：取同批次試(shi)劑(ji)盒對低、中、高值(zhi)定(ding)值樣(yang)本(ben)進行(xing)定(ding)量(liang)檢測(ce),每份(fen)樣(yang)本(ben)連續測(ce)定(ding)20 次(ci)，分別計算(suan)不同(tong)濃(nong)度樣(yang)本(ben)的平(ping)均值(zhi)及SD值(zhi)。

批間差(cha)：選取3個不同(tong)批次的(de)試(shi)劑(ji)盒分別對低、中(zhong)、高值(zhi)定(ding)值樣(yang)本(ben)進行(xing)定(ding)量(liang)測定(ding)，每個樣(yang)本(ben)使(shi)用(yong)同壹試(shi)劑(ji)盒重復測(ce)定(ding)8次，分別計算(suan)不同(tong)濃(nong)度樣(yang)本(ben)的平(ping)均值(zhi)及SD值(zhi)。

批內差(cha)： CV<10%

批間差(cha)： CV<12%

雞(ji)腦(nao)源(yuan)性神(shen)經(jing)營養(yang)因(yin)子(zi)(BDNF)ELISA試(shi)劑(ji)盒穩定性

經(jing)測定，試(shi)劑(ji)盒在有效期內按(an)推薦(jian)溫(wen)度保(bao)存，其(qi)活性(xing)降(jiang)低(di)率(lv)小於(yu)5%。

為(wei)減(jian)小(xiao)外(wai)部(bu)因(yin)素(su)對試(shi)劑(ji)盒破壞(huai)前(qian)後檢(jian)測值的影(ying)響(xiang)，實驗室(shi)的(de)環(huan)境條件(jian)需(xu)盡量(liang)保(bao)持壹致，尤其是(shi)實驗室(shi)內(nei)溫(wen)度、濕(shi)度及溫(wen)育(yu)條件(jian)。其(qi)次(ci)由同(tong)壹實驗員來(lai)進行操(cao)作(zuo)可減(jian)少(shao)人為(wei)誤(wu)差(cha)。