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96T 僅(jin)供(gong)體(ti)外研(yan)究使用,不(bu)用於(yu)臨(lin)床診斷(duan)!
馬(ma)白(bai)介(jie)素1β(IL1β)ELISA試劑(ji)盒
本試劑(ji)盒運用雙(shuang)抗體夾(jia)心(xin)ELISA法(fa)定量測定(ding)馬血清、血漿(jiang)、組(zu)織勻漿(jiang)、細胞(bao)裂解(jie)液(ye)、細胞(bao)培養(yang)上(shang)清(qing)液和其他生物(wu)液體中(zhong)馬白(bai)介(jie)素1β(IL1β)含量。
檢測範(fan)圍(wei)
15.625-1000pg/mL
*低(di)檢(jian)測限(xian)
5.9pg/mL
實(shi)驗原(yuan)理
將(jiang)馬白(bai)介(jie)素1β(IL1β)抗體包(bao)被於(yu)96孔(kong)微孔板中(zhong),制成(cheng)固(gu)相載體(ti),向微(wei)孔(kong)中(zhong)分別(bie)加入標準(zhun)品或標本(ben),其(qi)中(zhong)的(de)馬(ma)白(bai)介(jie)素1β(IL1β)與連(lian)接(jie)於(yu)固(gu)相載體(ti)上的(de)抗體結(jie)合(he),然後加入生物(wu)素化的(de)馬(ma)白(bai)介(jie)素1β(IL1β)抗體,將(jiang)未結(jie)合(he)的(de)生(sheng)物(wu)素化抗體洗(xi)凈(jing)後,加入HRP標記(ji)的(de)親(qin)和素,再(zai)次(ci)徹(che)底(di)洗(xi)滌後加入TMB底(di)物(wu)顯色。TMB在過氧化物(wu)酶的(de)催化(hua)下轉化(hua)成(cheng)藍(lan)色(se),並(bing)在酸的(de)作用下轉化(hua)成(cheng)*終(zhong)的(de)黃(huang)色(se)。顏(yan)色的(de)深淺(qian)和樣(yang)品中(zhong)的(de)馬(ma)白(bai)介(jie)素1β(IL1β)呈正相關(guan)。用酶標(biao)儀在450nm波長下測定(ding)吸(xi)光(guang)度(du)(O.D.值),計(ji)算(suan)樣(yang)品濃度(du)。
試劑(ji)盒內容(rong)
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試劑(ji)名稱(cheng) |
數(shu)量 |
試劑(ji)名稱(cheng) |
數(shu)量 |
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96孔板(預(yu)包(bao)被) |
1 |
96孔(kong)板覆膜(mo) |
2 |
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標準(zhun)品 |
0.5ml×1 |
標準(zhun)品稀釋(shi)液 |
1.5ml×1瓶 |
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顯(xian)色劑(ji)A液(ye) |
6ml×1瓶(ping) |
樣(yang)品稀釋(shi)液 |
6ml×1瓶(ping) |
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顯(xian)色(se)劑(ji)B液 |
6ml×1瓶(ping) |
終止(zhi)液 |
6ml×1瓶 |
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酶標(biao)試劑(ji) |
6ml×1瓶 |
密封(feng)袋(dai) |
1 |
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濃洗(xi)滌液(30×) |
1×20mL |
使用說明(ming)書 |
1 |
馬(ma)白(bai)介(jie)素1β(IL1β)ELISA試劑(ji)盒需自(zi)備(bei)的(de)設(she)備(bei)及試劑(ji)
1. 450±10nm濾光片的(de)酶(mei)標(biao)儀(yi)(建議(yi)儀器(qi)使(shi)用前提前預熱(re))
2. 單(dan)道或多(duo)道微量加(jia)液(ye)器及吸(xi)頭(tou)
3. 稀釋(shi)樣(yang)品的(de)EP管(guan)
4. 蒸餾(liu)水(shui)或去(qu)離(li)子(zi)水
5. 吸(xi)水(shui)紙
6. 盛放洗液(ye)的(de)容(rong)器(qi)
試劑(ji)盒的(de)儲(chu)存(cun)及有效期
1. 未開(kai)封(feng)的(de)試劑(ji)盒:所有試劑(ji)均按(an)試劑(ji)瓶標(biao)簽上(shang)所示(shi)保(bao)存(cun)。請(qing)註(zhu)意,收到(dao)試劑(ji)盒後請盡快(kuai)將(jiang)TMB 洗(xi)滌液,終(zhong)止(zhi)液保存(cun)於(yu)4℃,其(qi)他試劑(ji)保存(cun)於(yu)-20℃。
2. 使用後的(de)試劑(ji)盒:剩余試劑(ji)仍需按(an)照試劑(ji)瓶標(biao)簽所示(shi)的(de)溫(wen)度(du)保存(cun),開(kai)封(feng)後的(de)酶(mei)標(biao)板(ban)要加幹(gan)燥劑(ji)後密封(feng)保(bao)存於(yu)-20℃,避(bi)免潮(chao)濕(shi)。
註(zhu)意:
試劑(ji)盒內酶標條可(ke)拆(chai)卸(xie),按(an)實(shi)驗需求(qiu)可分多(duo)次(ci)使(shi)用;使用後的(de)剩(sheng)余(yu)試劑(ji)盒建議(yi)在**實(shi)驗後 1個(ge)月(yue)內(nei)使(shi)用完(wan)畢(bi)。產品過期時(shi)間(jian)以(yi)盒子(zi)上的(de)標(biao)簽(qian)為(wei)準(zhun),保(bao)質(zhi)期內(nei)所有組(zu)分都確(que)保(bao)是(shi)穩定的(de)。
馬(ma)白(bai)介(jie)素1β(IL1β)ELISA試劑(ji)盒標本的(de)采(cai)集與保存
1. 血(xue)清(qing):
將(jiang)收集於(yu)血(xue)清分離管的(de)全(quan)血(xue)標(biao)本(ben)在室(shi)溫放(fang)置 2 小(xiao)時(shi)或(huo) 4oC 過夜,然後 1000×g 離心(xin) 20 分(fen)鐘(zhong),取上(shang)清(qing)即可,或將(jiang)上(shang)清置於(yu)-20oC 或(huo)-80oC 保存,但(dan)應(ying)避(bi)免反復(fu)凍(dong)融(rong)。
2. 血漿(jiang):
用 EDTA 或肝素(su)作為抗凝劑(ji)采(cai)集標本(ben),並(bing)將(jiang)標(biao)本在采集後的(de) 30 分(fen)鐘(zhong)內(nei)於(yu) 2-8oC 1000×g 離(li)心(xin) 15 分(fen)鐘(zhong),取上(shang)清(qing)即可檢測,或(huo)將(jiang)上(shang)清置於(yu)-20oC 或(huo)-80oC 保存,但(dan)應(ying)避(bi)免反復(fu)凍(dong)融(rong)。
3. 組(zu)織勻漿(jiang):
1) 取適(shi)量組(zu)織塊,於(yu)預(yu)冷PBS(0.01mol/L, pH 7.0-7.2)中(zhong)清洗(xi)去除血(xue)液,稱(cheng)重(zhong)後備(bei)用(組(zu)織塊較(jiao)大(da)需先剪碎(sui)後再勻漿(jiang));
2) 可同(tong)時(shi)選(xuan)用多種(zhong)勻漿(jiang)方(fang)法(fa)達到(dao)較(jiao)好(hao)的(de)破(po)碎(sui)效果:首先將(jiang)組(zu)織塊移入玻璃勻漿(jiang)器(qi),加入5-10mL 預冷PBS 進行(xing)充(chong)分(fen)研(yan)磨(mo),該(gai)過程(cheng)需在冰上進行(有條件(jian)實(shi)驗室(shi)可選(xuan)用機器(qi)勻漿(jiang));得(de)到的(de)勻漿(jiang)液(ye)可再利(li)用超聲破(po)碎(sui)或反復(fu)凍(dong)融(rong) 進壹(yi)步(bu)處理(超聲破(po)碎(sui)過程(cheng)中(zhong)註(zhu)意冰浴(yu)降溫(wen);反復(fu)凍(dong)融(rong)法(fa)可重(zhong)復(fu)2 次(ci))。
3) 將(jiang)制備(bei)好(hao)的(de)勻漿(jiang)液(ye)於(yu)5000×g 離(li)心(xin)5 分(fen)鐘(zhong),留(liu)取上(shang)清(qing)即可檢測。
4. 細胞(bao)裂解(jie)液(ye):
1)貼壁細胞(bao)需要先用胰酶(mei)消化(hua),離心(xin)收集細胞(bao)(懸浮(fu)細胞(bao)可直(zhi)接(jie)離(li)心(xin)收集);
2)將(jiang)收集到的(de)細胞(bao)用冷PBS 洗(xi)3 次(ci);
3)物(wu)理方(fang)法(fa)裂解(jie)細胞(bao)(可先超聲破(po)碎(sui)細胞(bao),再反復(fu)凍(dong)融(rong)):
i 超聲破(po)碎(sui):取適(shi)量PBS 重(zhong)懸細胞(bao),用壹(yi)定(ding)功(gong)率的(de)超(chao)聲波處理細胞(bao)懸液(ye),使(shi)細胞(bao)急劇(ju)震蕩破(po)裂(lie)。
ii 反復(fu)凍(dong)融(rong):將(jiang)待破(po)碎(sui)的(de)細胞(bao)在-20 oC 以(yi)下冰凍(dong),室(shi)溫融(rong)解,反復(fu)3 次(ci),使(shi)細胞(bao)溶(rong)脹破(po)碎(sui)。
4)將(jiang)標(biao)本於(yu)2-8 oC 1500×g 離心(xin)10 分(fen)鐘(zhong),收集上清(qing)備(bei)用。
5. 細胞(bao)培養(yang)上(shang)清(qing)或其它(ta)生物(wu)標本:
請(qing) 1000×g 離(li)心(xin) 20 分(fen)鐘(zhong),取上(shang)清(qing)即可檢測,或(huo)將(jiang)上(shang)清置於(yu)-20oC 或(huo)-80oC 保存,但(dan)應(ying)避(bi)免反復(fu)凍(dong)融(rong)。
註(zhu)意:
1. 以(yi)上標(biao)本均(jun)需密封(feng)保(bao)存,4oC保存應(ying)小(xiao)於(yu)1周,-20oC不(bu)應(ying)超(chao)過1個(ge)月(yue),-80oC不(bu)應(ying)超(chao)過2個(ge)月(yue)。
2. 標本(ben)使用前應(ying)緩(huan)慢(man)均(jun)衡至室(shi)溫,不(bu)應(ying)加(jia)熱(re)使(shi)之(zhi)融(rong)解。
3. 實(shi)驗前(qian)紅細胞(bao)裂解(jie)液(ye)必(bi)須用標準(zhun)品稀釋(shi)液稀(xi)釋(shi)。
馬白(bai)介(jie)素1β(IL1β)ELISA試劑(ji)盒試劑(ji)準(zhun)備(bei)
1. 使用前將(jiang)所有的(de)試劑(ji)和標本(ben)緩(huan)慢(man)均(jun)衡至室(shi)溫(18-25oC),試劑(ji)不(bu)能(neng)直接(jie)在37oC溶(rong)解(jie)。
2. 標準(zhun)品(凍(dong)幹(gan)品):每(mei)瓶(ping)標準(zhun)品加入標準(zhun)品稀釋(shi)液1mL,蓋(gai)好(hao)後室(shi)溫靜置(zhi)大(da)約(yue)10分鐘(zhong),同(tong)時(shi)反復(fu)顛倒(dao)/搓動以(yi)助溶(rong)解(jie),其濃度(du)為1000pg/mL。準(zhun)備(bei)7個(ge)稀(xi)釋(shi)標準(zhun)品的(de)EP管(guan),每(mei)個(ge)EP管(guan)中(zhong)加入150μL的(de)標(biao)準(zhun)品稀釋(shi)液,如(ru)圖所示(shi)依次(ci)倍(bei)比稀釋(shi)成(cheng)不(bu)同(tong)的(de)梯(ti)度(du), 標準(zhun)品稀釋(shi)液(0pg/mL)直(zhi)接(jie)作為空白(bai)孔。為(wei)保(bao)證實(shi)驗結(jie)果(guo)有效性(xing),每(mei)次(ci)實(shi)驗請(qing)使(shi)用新的(de)標(biao)準(zhun)品溶(rong)液(ye)。
3. 濃洗(xi)滌液:用580mL蒸餾(liu)水(shui)或去(qu)離(li)子(zi)水將(jiang)20mL濃洗(xi)滌液稀(xi)釋(shi)至600mL,進行30倍稀(xi)釋(shi)。
標本(ben)處理
1. 本(ben)公(gong)司(si)只對試劑(ji)盒本身負(fu)責(ze),不(bu)對(dui)因(yin)使用該試劑(ji)盒所造(zao)成(cheng)的(de)樣(yang)本消耗負責(ze),請使(shi)用者使(shi)用前充(chong)分(fen)考慮到樣(yang)本的(de)可(ke)能(neng)使用量,預(yu)留(liu)充(chong)足(zu)的(de)樣(yang)本。
2. 實(shi)驗前(qian)應(ying)預(yu)測標(biao)本含量,如(ru)果(guo)標本濃度(du)過高(gao),應(ying)對(dui)標(biao)本(ben)進(jin)行(xing)稀(xi)釋(shi),使稀(xi)釋(shi)後的(de)標(biao)本(ben)符(fu)合試劑(ji)盒的(de)檢(jian)測範(fan)圍(wei),計(ji)算(suan)時(shi)再(zai)乘以(yi)相應(ying)的(de)稀(xi)釋(shi)倍數(shu)。
3. 若所檢樣(yang)本不(bu)包(bao)含(han)在說明(ming)書所列(lie)樣(yang)本之(zhi)中(zhong),建議(yi)進行(xing)預(yu)實(shi)驗驗證(zheng)其(qi)有效性(xing),並(bing)註(zhu)意留(liu)存樣(yang)本。
4. 使(shi)用化學(xue)裂解(jie)液制備(bei)的(de)組(zu)織勻漿(jiang)或(huo)細胞(bao)提取液(ye)可(ke)能(neng)會(hui)由(you)於(yu)某(mou)些化學物(wu)質的(de)引(yin)入導致 ELISA實(shi)驗結(jie)果(guo)偏(pian)差。
5. 若樣(yang)本為(wei)細胞(bao)培養(yang)上(shang)清(qing),因(yin)該類樣(yang)本幹(gan)擾因(yin)素 較(jiao)多,如(ru):細胞(bao)狀(zhuang)態(tai)、細胞(bao)數量、采(cai)樣(yang)時(shi)間(jian)等,所以(yi)可能(neng)存在檢測不(bu)出(chu)的(de)情(qing)況。
6. 某些天(tian)然蛋(dan)白(bai)或重(zhong)組(zu)蛋白(bai),包括(kuo)原(yuan)核(he)及真(zhen)核重(zhong)組(zu)蛋白(bai),可能(neng)因(yin)為與本產品所使用的(de)檢(jian)測抗體及捕(bu)獲抗體不(bu)匹配,而(er)不(bu)被檢(jian)測出(chu)。
7. 建議(yi)使用新鮮(xian)樣(yang)本,保(bao)存(cun)時(shi)間(jian)過長可能(neng)會(hui)存(cun)在蛋白(bai)降解(jie)或變(bian)性(xing)導致實(shi)驗結(jie)果(guo)偏(pian)差。
馬白(bai)介(jie)素1β(IL1β)ELISA試劑(ji)盒操作步驟
1. 加樣(yang):分別(bie)設(she)空白(bai)孔(空白(bai)對照孔(kong)不(bu)加(jia)樣(yang)品及酶(mei)標(biao)試劑(ji),其余(yu)各(ge)步(bu)操作相同(tong))、標(biao)準(zhun)孔(kong)、待測樣(yang)品孔。在酶標(biao)包(bao)被板(ban)上標(biao)準(zhun)品準(zhun)確(que)加(jia)樣(yang)50μl,待測樣(yang)品孔中(zhong)先加樣(yang)品稀釋(shi)液40μl,然(ran)後再加待測樣(yang)品10μl(樣(yang)品*終稀釋(shi)度(du)為5倍(bei))。加(jia)樣(yang)將(jiang)樣(yang)品加於(yu)酶(mei)標板孔底(di)部(bu),盡量不(bu)觸(chu)及孔(kong)壁,輕(qing)輕(qing)晃動混勻。
2. 溫育(yu):用封板(ban)膜封(feng)板後置37℃溫育(yu)30分鐘(zhong)。
3. 配液(ye):將(jiang)20倍(bei)濃縮洗滌液用蒸餾(liu)水(shui)20倍稀(xi)釋(shi)後備(bei)用
4. 洗滌:小(xiao)心(xin)揭掉(diao)封(feng)板膜,棄去液(ye)體(ti),甩幹(gan),每(mei)孔(kong)加滿(man)洗(xi)滌液,靜置(zhi)30秒後棄去,如此重復(fu)5次(ci),拍(pai)幹(gan)。
5. 加(jia)酶(mei):每(mei)孔(kong)加入酶標試劑(ji)50μl,空白(bai)孔除外(wai)。
6. 溫育(yu):操作同(tong)3。
7. 洗滌:操作同(tong)5。
8. 顯色(se):每(mei)孔(kong)先加入顯色劑A50μl,再(zai)加(jia)入顯色劑B50μl,輕(qing)輕(qing)震蕩混勻,37℃避(bi)光(guang)顯色15分鐘(zhong).
9. 終止(zhi):每(mei)孔(kong)加終止(zhi)液50μl,終止(zhi)反應(ying)(此時(shi)藍(lan)色立(li)轉(zhuan)黃(huang)色(se))。
10. 測定(ding):以(yi)空白(bai)空調零,450nm波(bo)長依序(xu)測量各(ge)孔(kong)的(de)吸(xi)光(guang)度(du)(OD值)。 測定(ding)應(ying)在加終(zhong)止(zhi)液後15分鐘以(yi)內進(jin)行。
註(zhu)意:
1. 試劑(ji)準(zhun)備(bei):準(zhun)備(bei)壹(yi)次(ci)實(shi)驗所需要的(de)酶(mei)標(biao)條,其(qi)它(ta)的(de)可(ke)從微(wei)孔(kong)板上(shang)拆(chai)下,密封(feng),按(an)照說明(ming)書要求(qiu)保存,以(yi)備(bei)下次(ci)使(shi)用。
2. 加樣(yang):實(shi)驗操(cao)作中(zhong)請使(shi)用壹(yi)次(ci)性(xing)的(de)吸(xi)頭(tou),避(bi)免交(jiao)叉汙染。加(jia)樣(yang)時(shi)註(zhu)意不(bu)要有氣泡,將(jiang)樣(yang)品加於(yu)酶(mei)標板底(di)部(bu),盡量不(bu)觸(chu)及孔(kong)壁,輕(qing)輕(qing)晃動混勻。加(jia)樣(yang)或加(jia)試劑(ji)時(shi),**個(ge)孔(kong)與*後壹(yi)個(ge)孔(kong)加(jia)樣(yang)之間(jian)的(de)時(shi)間(jian)間隔(ge)如果(guo)太(tai)大(da),將(jiang)會(hui)導致不(bu)同(tong)的(de)“預(yu)溫(wen)育(yu)”時(shi)間(jian),從而(er)明(ming)顯地影響(xiang)到測量值(zhi)的(de)準(zhun)確(que)性(xing)及重(zhong)復(fu)性(xing)。因(yin)此,壹(yi)次(ci)加(jia)樣(yang)時(shi)間(jian)(包括標準(zhun)品及所有樣(yang)品)*好(hao)控制在10分鐘(zhong)內(nei)。推薦(jian)設(she)置復(fu)孔進(jin)行(xing)實(shi)驗。
3. 溫(wen)育(yu):為防(fang)止(zhi)樣(yang)品蒸發,實(shi)驗時(shi)請(qing)將(jiang)加(jia)上蓋或覆(fu)膜(mo)的(de)酶(mei)標(biao)板(ban)置於(yu)濕(shi)盒內,以(yi)避(bi)免液(ye)體蒸發(fa),洗(xi)板後應(ying)盡快(kuai)進(jin)行(xing)下步操(cao)作,任何時(shi)侯都應(ying)避(bi)免酶(mei)標板處於(yu)幹(gan)燥狀(zhuang)態(tai),同(tong)時(shi)應(ying)嚴(yan)格(ge)遵守(shou)給定(ding)的(de)溫(wen)育(yu)時(shi)間(jian)和溫度(du)。
4. 洗滌:充(chong)分(fen)的(de)洗(xi)滌非常重(zhong)要,在每(mei)次(ci)洗(xi)滌過程(cheng)中(zhong),都要將(jiang)洗(xi)滌液完(wan)全(quan)甩幹(gan)。洗滌過程(cheng)中(zhong)反應(ying)孔(kong)中(zhong)殘(can)留(liu)的(de)洗(xi)滌液應(ying)在濾紙上(shang)拍(pai)幹(gan),勿(wu)將(jiang)濾(lv)紙直(zhi)接(jie)放(fang)入反應(ying)孔(kong)中(zhong)吸(xi)水(shui),同(tong)時(shi)要消除板(ban)底(di)殘(can)留(liu)的(de)液(ye)體(ti)和手指(zhi)印(yin),避(bi)免影響(xiang)*後的(de)酶(mei)標(biao)儀(yi)讀(du)數(shu)。如(ru)果有自動洗(xi)板機(ji),應(ying)在熟(shu)練使用後再用到正(zheng)式實(shi) 驗過程(cheng)中(zhong)。
5. 反應(ying)時(shi)間(jian)的(de)控制:加入底(di)物(wu)後請定時(shi)觀察(cha)反應(ying)孔(kong)的(de)顏(yan)色變(bian)化(hua)(比如,每(mei)隔(ge)10分鐘(zhong)觀察(cha)壹(yi)次(ci)),如(ru)顏(yan)色較(jiao)深,請(qing)提前加入終止(zhi)液終止(zhi)反應(ying),避(bi)免反應(ying)過強(qiang)從而(er)影響(xiang)酶標儀(yi)光密度(du)讀(du)數(shu)。
6. 底(di)物(wu):底(di)物(wu)請避(bi)光(guang)保存,在儲存(cun)和溫育(yu)時(shi)避(bi)免強(qiang)光直(zhi)接(jie)照射(she)。
7. 如(ru)果(guo)實(shi)驗室(shi)內濕(shi)度(du)低(di)於(yu)60%,推(tui)薦使用加濕(shi)器提高(gao)濕度(du)水平。
實(shi)驗流程(cheng)
1. 實(shi)驗前(qian)標(biao)準(zhun)品、試劑(ji)及樣(yang)本的(de)準(zhun)備(bei);
2. 加樣(yang)(標準(zhun)品及樣(yang)本)50μL,37℃孵育(yu)30分鐘(zhong);
3. 洗板(ban)5次(ci),加(jia)酶(mei)標試劑(ji)50ul,37℃孵育(yu)半(ban)小(xiao)時(shi);
4. 洗板5次(ci);加(jia)入顯色液A,B各(ge)50ul,37℃孵育(yu)顯色(se)15分鐘(zhong)
5. 加(jia)終止(zhi)液50μL,立(li)即450nm讀(du)數(shu)。
6. 計(ji)算(suan)
馬白(bai)介(jie)素1β(IL1β)ELISA試劑(ji)盒計(ji)算(suan)
各(ge)標(biao)準(zhun)品及樣(yang)本O.D.值(zhi)扣除空白(bai)孔O.D.值(zhi)後作圖(七點(dian)圖),如設(she)置復(fu)孔,則應(ying)取其(qi)平均(jun)值(zhi)計(ji)算(suan)。以(yi)標準(zhun)品的(de)濃度(du)為縱(zong)坐標(biao)(或(huo)對數(shu)坐(zuo)標(biao)),O.D.值(zhi)為橫(heng)坐標(或(huo)對(dui)數坐標),繪(hui)出(chu)標準(zhun)曲(qu)線(xian)(*佳(jia)方(fang)程式應(ying)依回(hui)歸(gui)方(fang)程計(ji)算(suan)的(de)R2值(zhi)來(lai)定(ding),以(yi)R2值越(yue)趨(qu)近於(yu)1為(wei)好(hao))。推(tui)薦使用專業(ye)制作曲線(xian)軟件(jian)進(jin)行(xing)分析,如(ru)curve expert 1.30,根據樣(yang)品O.D.值,由標(biao)準(zhun)曲(qu)線(xian)查出相應(ying)的(de)濃度(du),乘以(yi)稀釋(shi)倍數(shu);或用標準(zhun)物(wu)的(de)濃度(du)與O.D.值計(ji)算(suan)出(chu)標(biao)準(zhun)曲(qu)線(xian)的(de)回(hui)歸(gui)方(fang)程式,將(jiang)樣(yang)品的(de)O.D.值(zhi)代入方(fang)程式,計(ji)算(suan)出(chu)樣(yang)品濃度(du),再乘(cheng)以(yi)稀釋(shi)倍數(shu),即為樣(yang)品的(de)實(shi)際(ji)濃度(du)。
特(te)異(yi)性(xing)
本試劑(ji)盒用於(yu)檢(jian)測馬(ma)白(bai)介(jie)素1β(IL1β),經(jing)檢測與其它(ta)相似物(wu)質無明(ming)顯交叉反應(ying)。
由(you)於(yu)受(shou)到技(ji)術及樣(yang)本來(lai)源(yuan)的(de)限(xian)制,不(bu)可(ke)能(neng)完(wan)成(cheng)對(dui)所有相關(guan)或(huo)相似物(wu)質交叉反應(ying)檢(jian)測,因(yin)此本試劑(ji)盒有可能(neng)與未經(jing)檢測的(de)其(qi)它(ta)物(wu)質有交叉反應(ying)。
精密度(du)
精密度(du)用樣(yang)品測定(ding)值的(de)變(bian)異(yi)系(xi)數(shu)CV表示(shi)。CV(%) = SD/mean×100
批內(nei)差:取同(tong)批次(ci)試劑(ji)盒對低(di)、中(zhong)、高(gao)值定(ding)值(zhi)樣(yang)本進(jin)行(xing)定(ding)量檢(jian)測,每(mei)份(fen)樣(yang)本連(lian)續測定(ding)20 次(ci),分(fen)別(bie)計(ji)算(suan)不(bu)同(tong)濃度(du)樣(yang)本的(de)平均(jun)值(zhi)及SD值(zhi)。
批間(jian)差:選(xuan)取3個(ge)不(bu)同(tong)批次(ci)的(de)試劑(ji)盒分別(bie)對低(di)、中(zhong)、高(gao)值定(ding)值(zhi)樣(yang)本進(jin)行(xing)定(ding)量測定(ding),每(mei)個(ge)樣(yang)本使(shi)用同(tong)壹(yi)試劑(ji)盒重復(fu)測定(ding)8次(ci),分(fen)別(bie)計(ji)算(suan)不(bu)同(tong)濃度(du)樣(yang)本的(de)平均(jun)值(zhi)及SD值(zhi)。
批內(nei)差: CV<10%
批間(jian)差: CV<12%
馬白(bai)介(jie)素1β(IL1β)ELISA試劑(ji)盒穩定性(xing)
經(jing)測定(ding),試劑(ji)盒在有效期內(nei)按推薦溫(wen)度(du)保存(cun),其(qi)活(huo)性(xing)降低(di)率(lv)小(xiao)於(yu)5%。
為減(jian)小(xiao)外部(bu)因(yin)素對(dui)試劑(ji)盒破(po)壞(huai)前後檢測值(zhi)的(de)影響(xiang),實(shi)驗室(shi)的(de)環境(jing)條件(jian)需盡量保(bao)持壹(yi)致(zhi),尤(you)其(qi)是(shi)實(shi)驗室(shi)內溫(wen)度(du)、濕度(du)及溫(wen)育(yu)條件(jian)。其次(ci)由(you)同(tong)壹(yi)實(shi)驗員(yuan)來(lai)進(jin)行(xing)操作可減(jian)少(shao)人(ren)為(wei)誤差。



