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授(shou)權(quan)代理品(pin)牌
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ELISA試劑(ji)盒
- 農(nong)殘(can)檢測(ce)試劑(ji)盒
- 馬ELISA試劑(ji)盒
- 牛ELISA試劑(ji)盒
- 魚ELISA試劑(ji)盒
- 人ELISA試劑(ji)盒/Human
- 小(xiao)鼠ELISA試劑(ji)盒/Mouse
- 大鼠(shu)ELISA試劑(ji)盒/Rat
- 羊ELISA試劑(ji)盒/Sheep
- 兔ELISA試劑(ji)盒/ Rabbi...
- 豬ELISA試劑(ji)盒/Porcin...
- 豚鼠(shu)ELISA試劑(ji)盒/Guine...
- 狗ELISA試劑(ji)盒/ Canin...
- 雞ELISA試劑(ji)盒/Chicke...
- 鴨ELISA試劑(ji)盒
- 植(zhi)物(wu)ELISA試劑(ji)盒
- 猴(hou)ELISA試劑(ji)盒/ Monke...
- 其他ELISA試劑(ji)盒
- 抗體
- 蛋(dan)白
- CLIA試劑(ji)盒
- 細胞生(sheng)物學(xue)
- 分子生(sheng)物學(xue)/常用(yong)試劑(ji)
96T 僅(jin)供體外研(yan)究(jiu)使(shi)用(yong),不用(yong)於臨(lin)床診(zhen)斷!
馬(ma)白介(jie)素5(IL5)ELISA試劑(ji)盒
本(ben)試劑(ji)盒運用(yong)雙抗體夾(jia)心ELISA法(fa)定(ding)量(liang)測(ce)定(ding)馬(ma)血清、血漿、組織(zhi)勻漿(jiang)、細胞裂解液(ye)、細胞培(pei)養(yang)上清液(ye)和(he)其他生(sheng)物液體中(zhong)馬白介(jie)素5(IL5)含(han)量。
檢測(ce)範(fan)圍
15.625-1000pg/mL
*低檢測(ce)限
6.1pg/mL
實(shi)驗原(yuan)理
將(jiang)馬(ma)白介(jie)素5(IL5)抗體包(bao)被於96孔微孔(kong)板中,制成固(gu)相載體,向(xiang)微(wei)孔中分別加(jia)入(ru)標(biao)準品(pin)或標(biao)本,其中的馬(ma)白介(jie)素5(IL5)與(yu)連(lian)接(jie)於(yu)固(gu)相載體上的抗體結(jie)合,然後(hou)加入(ru)生(sheng)物素化(hua)的馬(ma)白介(jie)素5(IL5)抗體,將(jiang)未(wei)結(jie)合的生(sheng)物素化(hua)抗體洗(xi)凈後,加入(ru)HRP標(biao)記的親(qin)和(he)素,再(zai)次(ci)徹(che)底洗滌後加(jia)入(ru)TMB底(di)物(wu)顯(xian)色(se)。TMB在過氧(yang)化(hua)物酶(mei)的催(cui)化(hua)下轉(zhuan)化(hua)成藍色(se),並(bing)在酸(suan)的作用(yong)下轉(zhuan)化(hua)成*終的黃(huang)色(se)。顏色(se)的深(shen)淺和樣品(pin)中的馬(ma)白介(jie)素5(IL5)呈(cheng)正(zheng)相關(guan)。用(yong)酶(mei)標儀(yi)在(zai)450nm波(bo)長(chang)下測(ce)定(ding)吸光(guang)度(O.D.值),計算(suan)樣品(pin)濃度。
試劑(ji)盒內容(rong)
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試劑(ji)名(ming)稱(cheng) |
數(shu)量 |
試劑(ji)名(ming)稱(cheng) |
數(shu)量 |
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96孔(kong)板(預(yu)包被(bei)) |
1 |
96孔(kong)板覆(fu)膜(mo) |
2 |
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標(biao)準品(pin) |
0.5ml×1 |
標(biao)準品(pin)稀釋(shi)液(ye) |
1.5ml×1瓶 |
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顯(xian)色(se)劑(ji)A液(ye) |
6ml×1瓶 |
樣品(pin)稀釋(shi)液(ye) |
6ml×1瓶 |
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顯(xian)色(se)劑(ji)B液(ye) |
6ml×1瓶 |
終止液 |
6ml×1瓶 |
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酶(mei)標試劑(ji) |
6ml×1瓶 |
密(mi)封(feng)袋 |
1 |
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濃(nong)洗滌液(30×) |
1×20mL |
使(shi)用(yong)說明書 |
1 |
馬(ma)白介(jie)素5(IL5)ELISA試劑(ji)盒需(xu)自(zi)備(bei)的設備(bei)及(ji)試劑(ji)
1. 450±10nm濾(lv)光(guang)片的酶(mei)標儀(yi)(建(jian)議儀(yi)器(qi)使(shi)用(yong)前提(ti)前預(yu)熱)
2. 單(dan)道或(huo)多(duo)道(dao)微量(liang)加液器(qi)及(ji)吸頭(tou)
3. 稀釋(shi)樣品(pin)的EP管(guan)
4. 蒸(zheng)餾水(shui)或(huo)去離子(zi)水(shui)
5. 吸水(shui)紙
6. 盛放(fang)洗(xi)液(ye)的容(rong)器(qi)
試劑(ji)盒的儲(chu)存(cun)及(ji)有效(xiao)期(qi)
1. 未(wei)開(kai)封(feng)的試劑(ji)盒:所(suo)有試劑(ji)均按試劑(ji)瓶標簽上所(suo)示(shi)保(bao)存(cun)。請註(zhu)意(yi),收(shou)到試劑(ji)盒後請盡快將(jiang)TMB 洗滌液,終止液保(bao)存(cun)於(yu)4℃,其他試劑(ji)保(bao)存(cun)於(yu)-20℃。
2. 使(shi)用(yong)後的試劑(ji)盒:剩余(yu)試劑(ji)仍(reng)需(xu)按照試劑(ji)瓶標簽所(suo)示(shi)的溫(wen)度保(bao)存(cun),開(kai)封後的酶(mei)標板(ban)要(yao)加(jia)幹燥劑(ji)後(hou)密(mi)封(feng)保(bao)存(cun)於(yu)-20℃,避(bi)免(mian)潮(chao)濕(shi)。
註(zhu)意(yi):
試劑(ji)盒內酶(mei)標條(tiao)可拆(chai)卸(xie),按(an)實(shi)驗(yan)需(xu)求(qiu)可分多次(ci)使(shi)用(yong);使(shi)用(yong)後的剩(sheng)余(yu)試劑(ji)盒建議在(zai)**實(shi)驗(yan)後 1個(ge)月(yue)內使(shi)用(yong)完(wan)畢。產品(pin)過期(qi)時間以盒子上的標(biao)簽(qian)為準,保(bao)質期(qi)內所(suo)有組分都(dou)確保(bao)是穩(wen)定(ding)的。
馬(ma)白介(jie)素5(IL5)ELISA試劑(ji)盒標本(ben)的采(cai)集(ji)與保(bao)存(cun)
1. 血清:
將(jiang)收(shou)集(ji)於(yu)血清分離管(guan)的全血標本在室(shi)溫(wen)放(fang)置(zhi) 2 小(xiao)時或 4oC 過夜(ye),然後(hou) 1000×g 離心 20 分鐘,取上清即(ji)可,或(huo)將(jiang)上清置(zhi)於-20oC 或(huo)-80oC 保(bao)存(cun),但(dan)應避(bi)免(mian)反(fan)復(fu)凍(dong)融(rong)。
2. 血漿:
用(yong) EDTA 或肝素作為(wei)抗凝劑(ji)采(cai)集(ji)標本(ben),並(bing)將(jiang)標本在采(cai)集(ji)後(hou)的 30 分鐘內於(yu) 2-8oC 1000×g 離(li)心 15 分鐘,取上清即(ji)可檢測(ce),或將(jiang)上清置(zhi)於-20oC 或(huo)-80oC 保(bao)存(cun),但(dan)應避(bi)免(mian)反(fan)復(fu)凍(dong)融(rong)。
3. 組織(zhi)勻漿(jiang):
1) 取適量組織(zhi)塊,於(yu)預(yu)冷PBS(0.01mol/L, pH 7.0-7.2)中(zhong)清洗去除血液,稱(cheng)重(zhong)後(hou)備(bei)用(yong)(組織(zhi)塊較(jiao)大需(xu)先剪(jian)碎後再(zai)勻漿(jiang));
2) 可同時選用(yong)多種勻漿(jiang)方(fang)法(fa)達到較好(hao)的破(po)碎效(xiao)果:首(shou)先將(jiang)組織(zhi)塊移入(ru)玻(bo)璃勻漿(jiang)器(qi),加入(ru)5-10mL 預(yu)冷PBS 進行充分研磨,該(gai)過程(cheng)需(xu)在冰上進行(有(you)條件(jian)實(shi)驗(yan)室(shi)可選(xuan)用(yong)機器勻漿(jiang));得(de)到的勻漿(jiang)液(ye)可再(zai)利(li)用(yong)超聲破(po)碎或反(fan)復(fu)凍(dong)融(rong) 進壹步(bu)處(chu)理(超(chao)聲破(po)碎過程(cheng)中(zhong)註(zhu)意(yi)冰浴降(jiang)溫(wen);反(fan)復(fu)凍(dong)融(rong)法(fa)可重(zhong)復(fu)2 次(ci))。
3) 將(jiang)制備(bei)好的勻漿(jiang)液(ye)於5000×g 離(li)心5 分鐘,留取上清即(ji)可檢測(ce)。
4. 細胞裂解液(ye):
1)貼(tie)壁細胞需(xu)要先用(yong)胰酶(mei)消化(hua),離心收(shou)集(ji)細胞(懸浮細胞可直(zhi)接(jie)離(li)心收(shou)集(ji));
2)將(jiang)收(shou)集(ji)到的細胞用(yong)冷PBS 洗3 次(ci);
3)物(wu)理方(fang)法(fa)裂解細胞(可先超(chao)聲破(po)碎細胞,再(zai)反(fan)復(fu)凍(dong)融(rong)):
i 超(chao)聲破(po)碎:取適量PBS 重懸細胞,用(yong)壹定(ding)功(gong)率(lv)的超(chao)聲波(bo)處(chu)理細胞懸液,使(shi)細胞急劇(ju)震(zhen)蕩破(po)裂。
ii 反(fan)復(fu)凍(dong)融(rong):將(jiang)待破碎的細胞在(zai)-20 oC 以下冰凍(dong),室(shi)溫(wen)融(rong)解,反(fan)復(fu)3 次(ci),使(shi)細胞溶脹破碎。
4)將(jiang)標本於2-8 oC 1500×g 離(li)心10 分鐘,收(shou)集(ji)上清備(bei)用(yong)。
5. 細胞培(pei)養(yang)上清或(huo)其它(ta)生(sheng)物標本:
請 1000×g 離心 20 分鐘,取上清即(ji)可檢測(ce),或將(jiang)上清置(zhi)於-20oC 或(huo)-80oC 保(bao)存(cun),但(dan)應避(bi)免(mian)反(fan)復(fu)凍(dong)融(rong)。
註(zhu)意(yi):
1. 以上標本(ben)均需(xu)密(mi)封(feng)保(bao)存(cun),4oC保(bao)存(cun)應小(xiao)於1周(zhou),-20oC不應超(chao)過1個(ge)月(yue),-80oC不應超(chao)過2個(ge)月(yue)。
2. 標(biao)本使(shi)用(yong)前應緩(huan)慢(man)均衡(heng)至(zhi)室(shi)溫(wen),不(bu)應加(jia)熱使(shi)之(zhi)融(rong)解。
3. 實(shi)驗前紅細胞裂解液(ye)必須(xu)用(yong)標準品(pin)稀釋(shi)液(ye)稀釋(shi)。
馬(ma)白介(jie)素5(IL5)ELISA試劑(ji)盒試劑(ji)準備(bei)
1. 使(shi)用(yong)前將(jiang)所(suo)有的試劑(ji)和(he)標(biao)本緩(huan)慢(man)均衡(heng)至(zhi)室(shi)溫(wen)(18-25oC),試劑(ji)不(bu)能(neng)直(zhi)接(jie)在(zai)37oC溶解。
2. 標(biao)準品(pin)(凍(dong)幹品(pin)):每瓶標準品(pin)加入(ru)標(biao)準品(pin)稀釋(shi)液(ye)1mL,蓋(gai)好(hao)後室(shi)溫(wen)靜(jing)置(zhi)大約(yue)10分鐘,同時反(fan)復(fu)顛(dian)倒(dao)/搓動以助(zhu)溶解,其濃度為1000pg/mL。準備(bei)7個(ge)稀釋(shi)標(biao)準品(pin)的EP管(guan),每個(ge)EP管(guan)中加(jia)入(ru)150μL的標(biao)準品(pin)稀釋(shi)液(ye),如(ru)圖所(suo)示(shi)依(yi)次(ci)倍比(bi)稀釋(shi)成不(bu)同的梯(ti)度, 標準品(pin)稀釋(shi)液(ye)(0pg/mL)直(zhi)接(jie)作為(wei)空(kong)白孔(kong)。為(wei)保(bao)證(zheng)實(shi)驗結(jie)果有(you)效(xiao)性(xing),每(mei)次(ci)實驗(yan)請使(shi)用(yong)新的標(biao)準品(pin)溶液。
3. 濃(nong)洗滌液:用(yong)580mL蒸(zheng)餾水(shui)或(huo)去離子(zi)水(shui)將(jiang)20mL濃(nong)洗滌液稀釋(shi)至(zhi)600mL,進行30倍(bei)稀釋(shi)。
標(biao)本處(chu)理
1. 本(ben)公司只(zhi)對(dui)試劑(ji)盒本身(shen)負(fu)責(ze),不對(dui)因(yin)使(shi)用(yong)該(gai)試劑(ji)盒所(suo)造(zao)成的樣本(ben)消耗(hao)負(fu)責(ze),請使(shi)用(yong)者使(shi)用(yong)前充分考慮(lv)到樣本(ben)的可能(neng)使(shi)用(yong)量,預(yu)留充足的樣本(ben)。
2. 實(shi)驗前應預(yu)測(ce)標本(ben)含(han)量(liang),如果標(biao)本濃(nong)度過高(gao),應對(dui)標(biao)本進行稀釋(shi),使(shi)稀釋(shi)後(hou)的標(biao)本(ben)符合(he)試劑(ji)盒的檢測(ce)範(fan)圍,計算(suan)時再(zai)乘(cheng)以相(xiang)應的稀釋(shi)倍(bei)數(shu)。
3. 若(ruo)所(suo)檢樣本(ben)不包含(han)在說(shuo)明書所(suo)列樣本(ben)之(zhi)中(zhong),建(jian)議進行預(yu)實驗(yan)驗證(zheng)其有效(xiao)性(xing),並(bing)註(zhu)意(yi)留(liu)存(cun)樣本(ben)。
4. 使(shi)用(yong)化(hua)學(xue)裂解液(ye)制(zhi)備(bei)的組織(zhi)勻漿(jiang)或(huo)細胞提(ti)取液(ye)可能(neng)會(hui)由於(yu)某些化(hua)學(xue)物(wu)質的引(yin)入(ru)導(dao)致 ELISA實驗結(jie)果偏差。
5. 若(ruo)樣本(ben)為細胞培(pei)養(yang)上清,因(yin)該(gai)類(lei)樣本(ben)幹擾因(yin)素 較(jiao)多,如(ru):細胞狀(zhuang)態(tai)、細胞數(shu)量(liang)、采樣時間等(deng),所(suo)以可能(neng)存(cun)在(zai)檢測(ce)不出(chu)的情況。
6. 某些天然蛋(dan)白或(huo)重(zhong)組蛋(dan)白,包(bao)括原(yuan)核(he)及(ji)真(zhen)核(he)重(zhong)組蛋(dan)白,可能(neng)因(yin)為與本產品(pin)所(suo)使(shi)用(yong)的檢測(ce)抗體及(ji)捕獲抗體不(bu)匹配,而(er)不(bu)被(bei)檢測(ce)出(chu)。
7. 建(jian)議使(shi)用(yong)新鮮樣本(ben),保(bao)存(cun)時間過長(chang)可能(neng)會(hui)存(cun)在(zai)蛋(dan)白降(jiang)解(jie)或變(bian)性(xing)導(dao)致實驗結(jie)果偏差。
馬(ma)白介(jie)素5(IL5)ELISA試劑(ji)盒操(cao)作步(bu)驟(zhou)
1. 加(jia)樣:分別設空白孔(kong)(空(kong)白對(dui)照孔不(bu)加(jia)樣品(pin)及(ji)酶(mei)標試劑(ji),其余各(ge)步操(cao)作相(xiang)同)、標(biao)準孔、待測(ce)樣品(pin)孔。在(zai)酶(mei)標包(bao)被(bei)板(ban)上標準品(pin)準確加(jia)樣50μl,待測(ce)樣品(pin)孔中(zhong)先加(jia)樣品(pin)稀釋(shi)液(ye)40μl,然後(hou)再(zai)加(jia)待測(ce)樣品(pin)10μl(樣品(pin)*終稀釋(shi)度為5倍)。加樣將(jiang)樣品(pin)加於(yu)酶(mei)標板(ban)孔(kong)底(di)部,盡量不(bu)觸(chu)及(ji)孔壁,輕(qing)輕(qing)晃動混勻。
2. 溫(wen)育(yu):用(yong)封板膜封板(ban)後置(zhi)37℃溫育(yu)30分鐘。
3. 配液:將(jiang)20倍濃縮洗滌液用(yong)蒸餾水(shui)20倍(bei)稀釋(shi)後(hou)備(bei)用(yong)
4. 洗(xi)滌:小(xiao)心揭(jie)掉(diao)封(feng)板膜,棄去液體,甩(shuai)幹,每孔加滿(man)洗滌液,靜(jing)置(zhi)30秒後(hou)棄去,如此(ci)重復(fu)5次(ci),拍(pai)幹。
5. 加(jia)酶(mei):每孔(kong)加(jia)入(ru)酶(mei)標試劑(ji)50μl,空(kong)白孔(kong)除(chu)外。
6. 溫(wen)育(yu):操(cao)作同3。
7. 洗(xi)滌:操(cao)作同5。
8. 顯(xian)色(se):每孔先加(jia)入(ru)顯(xian)色(se)劑(ji)A50μl,再(zai)加(jia)入(ru)顯(xian)色(se)劑(ji)B50μl,輕(qing)輕(qing)震(zhen)蕩混勻,37℃避(bi)光(guang)顯(xian)色(se)15分鐘.
9. 終止:每孔加終止液50μl,終止反(fan)應(此(ci)時藍色(se)立(li)轉(zhuan)黃色(se))。
10. 測(ce)定(ding):以空(kong)白空(kong)調(tiao)零,450nm波(bo)長(chang)依(yi)序(xu)測(ce)量各(ge)孔的吸光(guang)度(OD值)。 測(ce)定(ding)應在(zai)加終止液後15分鐘以內進行。
註(zhu)意(yi):
1. 試劑(ji)準備(bei):準備(bei)壹次(ci)實驗(yan)所(suo)需(xu)要的酶(mei)標條(tiao),其它(ta)的可從(cong)微(wei)孔板上拆下,密(mi)封(feng),按(an)照說明書要求(qiu)保(bao)存(cun),以備(bei)下次(ci)使(shi)用(yong)。
2. 加(jia)樣:實(shi)驗操(cao)作中(zhong)請使(shi)用(yong)壹次(ci)性(xing)的吸頭(tou),避(bi)免(mian)交(jiao)叉(cha)汙(wu)染(ran)。加樣時註(zhu)意(yi)不(bu)要(yao)有(you)氣泡(pao),將(jiang)樣品(pin)加於(yu)酶(mei)標板(ban)底(di)部,盡量不(bu)觸(chu)及(ji)孔壁,輕(qing)輕(qing)晃動混勻。加(jia)樣或(huo)加試劑(ji)時,**個(ge)孔(kong)與*後(hou)壹個(ge)孔(kong)加樣之(zhi)間(jian)的時間間(jian)隔(ge)如(ru)果(guo)太(tai)大,將(jiang)會(hui)導(dao)致不同的“預(yu)溫育(yu)”時間,從(cong)而(er)明顯(xian)地(di)影(ying)響(xiang)到測(ce)量值(zhi)的準確性(xing)及(ji)重復(fu)性(xing)。因(yin)此,壹次(ci)加樣時間(包(bao)括標(biao)準品(pin)及(ji)所(suo)有樣品(pin))*好控制(zhi)在10分鐘內。推(tui)薦設置(zhi)復(fu)孔(kong)進行實(shi)驗。
3. 溫(wen)育(yu):為(wei)防(fang)止樣品(pin)蒸發(fa),實驗(yan)時請將(jiang)加上蓋或(huo)覆(fu)膜(mo)的酶(mei)標板(ban)置(zhi)於濕(shi)盒內,以避(bi)免(mian)液(ye)體蒸(zheng)發,洗板後應盡快進行下步操(cao)作,任何時侯都(dou)應避(bi)免(mian)酶(mei)標板(ban)處(chu)於幹(gan)燥(zao)狀(zhuang)態(tai),同時應嚴格遵守(shou)給定(ding)的溫(wen)育(yu)時間和(he)溫(wen)度。
4. 洗(xi)滌:充分的洗(xi)滌非(fei)常重(zhong)要,在每次(ci)洗滌過程(cheng)中(zhong),都(dou)要將(jiang)洗滌液完(wan)全甩幹。洗(xi)滌過程(cheng)中(zhong)反(fan)應孔(kong)中殘留(liu)的洗(xi)滌液應在(zai)濾(lv)紙上拍(pai)幹,勿將(jiang)濾(lv)紙直(zhi)接(jie)放(fang)入(ru)反(fan)應孔(kong)中吸水(shui),同時要消除(chu)板(ban)底殘(can)留的液(ye)體和(he)手指印(yin),避(bi)免(mian)影(ying)響(xiang)*後的酶(mei)標儀(yi)讀數。如果有(you)自(zi)動洗(xi)板(ban)機(ji),應在(zai)熟練使(shi)用(yong)後再(zai)用(yong)到正(zheng)式(shi)實(shi) 驗(yan)過程(cheng)中(zhong)。
5. 反(fan)應時間的控制(zhi):加(jia)入(ru)底(di)物(wu)後請定(ding)時觀(guan)察(cha)反(fan)應孔(kong)的顏(yan)色(se)變(bian)化(hua)(比如(ru),每(mei)隔(ge)10分鐘觀(guan)察(cha)壹次(ci)),如顏(yan)色(se)較深(shen),請提(ti)前加(jia)入(ru)終止液終止反(fan)應,避(bi)免(mian)反(fan)應過強(qiang)從(cong)而(er)影(ying)響(xiang)酶(mei)標儀(yi)光(guang)密(mi)度讀數。
6. 底(di)物:底(di)物請避(bi)光(guang)保(bao)存(cun),在(zai)儲(chu)存(cun)和(he)溫育(yu)時避(bi)免(mian)強(qiang)光直(zhi)接(jie)照射。
7. 如(ru)果實驗室(shi)內濕(shi)度低於60%,推(tui)薦使(shi)用(yong)加濕器提(ti)高濕(shi)度水(shui)平(ping)。
實(shi)驗流程(cheng)
1. 實(shi)驗前標準品(pin)、試劑(ji)及(ji)樣本(ben)的準備(bei);
2. 加(jia)樣(標(biao)準品(pin)及(ji)樣本(ben))50μL,37℃孵(fu)育(yu)30分鐘;
3. 洗(xi)板5次(ci),加酶(mei)標試劑(ji)50ul,37℃孵(fu)育(yu)半(ban)小(xiao)時;
4. 洗(xi)板5次(ci);加入(ru)顯(xian)色(se)液A,B各(ge)50ul,37℃孵(fu)育(yu)顯(xian)色(se)15分鐘
5. 加(jia)終止液50μL,立(li)即450nm讀數。
6. 計算(suan)
馬(ma)白介(jie)素5(IL5)ELISA試劑(ji)盒計算(suan)
各(ge)標準品(pin)及(ji)樣本(ben)O.D.值扣除空(kong)白孔(kong)O.D.值(zhi)後作圖(七(qi)點圖),如(ru)設置(zhi)復(fu)孔(kong),則應取其平(ping)均值計算(suan)。以標(biao)準品(pin)的濃(nong)度為縱坐(zuo)標(biao)(或(huo)對(dui)數(shu)坐(zuo)標(biao)),O.D.值(zhi)為(wei)橫(heng)坐(zuo)標(biao)(或(huo)對(dui)數(shu)坐(zuo)標(biao)),繪(hui)出(chu)標(biao)準曲(qu)線(*佳方(fang)程(cheng)式(shi)應依(yi)回歸(gui)方(fang)程(cheng)計算(suan)的R2值(zhi)來(lai)定(ding),以R2值(zhi)越趨(qu)近(jin)於(yu)1為(wei)好(hao))。推(tui)薦使(shi)用(yong)專(zhuan)業(ye)制作曲(qu)線軟件進行分析(xi),如curve expert 1.30,根據(ju)樣品(pin)O.D.值,由(you)標準曲(qu)線查出(chu)相(xiang)應的濃(nong)度,乘(cheng)以稀釋(shi)倍(bei)數(shu);或(huo)用(yong)標準物的濃(nong)度與O.D.值計算(suan)出(chu)標(biao)準曲(qu)線的回歸(gui)方(fang)程(cheng)式(shi),將(jiang)樣品(pin)的O.D.值(zhi)代入(ru)方(fang)程(cheng)式(shi),計算(suan)出(chu)樣品(pin)濃度,再(zai)乘(cheng)以稀釋(shi)倍(bei)數(shu),即(ji)為樣品(pin)的實(shi)際濃(nong)度。
特(te)異(yi)性(xing)
本(ben)試劑(ji)盒用(yong)於檢測(ce)馬白介(jie)素5(IL5),經(jing)檢測(ce)與其它(ta)相似(si)物質無明顯(xian)交(jiao)叉(cha)反(fan)應。
由(you)於受到技術及(ji)樣本(ben)來源的限制,不可能(neng)完(wan)成對(dui)所(suo)有相(xiang)關或相似(si)物質交(jiao)叉(cha)反(fan)應檢測(ce),因(yin)此本試劑(ji)盒有可能(neng)與未(wei)經(jing)檢測(ce)的其它(ta)物質有(you)交(jiao)叉(cha)反(fan)應。
精(jing)密(mi)度
精(jing)密(mi)度用(yong)樣品(pin)測(ce)定(ding)值(zhi)的變(bian)異(yi)系(xi)數(shu)CV表(biao)示(shi)。CV(%) = SD/mean×100
批內差:取同批次(ci)試劑(ji)盒對(dui)低、中、高(gao)值定(ding)值(zhi)樣本(ben)進行定(ding)量(liang)檢測(ce),每份(fen)樣本(ben)連(lian)續測(ce)定(ding)20 次(ci),分別計算(suan)不(bu)同濃(nong)度樣本(ben)的平(ping)均值及(ji)SD值。
批間差:選取3個(ge)不(bu)同批次(ci)的試劑(ji)盒分別對(dui)低、中、高(gao)值定(ding)值(zhi)樣本(ben)進行定(ding)量(liang)測(ce)定(ding),每(mei)個(ge)樣本(ben)使(shi)用(yong)同壹(yi)試劑(ji)盒重復(fu)測(ce)定(ding)8次(ci),分別計算(suan)不(bu)同濃(nong)度樣本(ben)的平(ping)均值及(ji)SD值。
批內差: CV<10%
批間差: CV<12%
馬(ma)白介(jie)素5(IL5)ELISA試劑(ji)盒穩(wen)定(ding)性(xing)
經(jing)測(ce)定(ding),試劑(ji)盒在有(you)效(xiao)期(qi)內按(an)推(tui)薦溫度保(bao)存(cun),其活性(xing)降(jiang)低率(lv)小(xiao)於5%。
為(wei)減小(xiao)外部因(yin)素對(dui)試劑(ji)盒破壞前後檢測(ce)值的影(ying)響(xiang),實驗室(shi)的環境條件需(xu)盡量保(bao)持壹(yi)致,尤(you)其是實驗(yan)室(shi)內溫(wen)度、濕度及(ji)溫育(yu)條(tiao)件。其次(ci)由同壹(yi)實驗(yan)員(yuan)來進行操(cao)作可減少(shao)人為(wei)誤(wu)差。



