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授(shou)權(quan)代理品(pin)牌
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ELISA試劑(ji)盒(he)
- 農(nong)殘(can)檢測(ce)試劑(ji)盒(he)
- 馬ELISA試劑(ji)盒
- 牛(niu)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)
- 魚(yu)ELISA試(shi)劑(ji)盒
- 人ELISA試(shi)劑(ji)盒/Human
- 小鼠ELISA試劑(ji)盒/Mouse
- 大(da)鼠ELISA試(shi)劑盒(he)/Rat
- 羊ELISA試劑盒(he)/Sheep
- 兔(tu)ELISA試(shi)劑盒(he)/ Rabbi...
- 豬ELISA試劑(ji)盒/Porcin...
- 豚(tun)鼠(shu)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)/Guine...
- 狗ELISA試(shi)劑盒/ Canin...
- 雞ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)/Chicke...
- 鴨ELISA試(shi)劑(ji)盒
- 植物(wu)ELISA試劑(ji)盒(he)
- 猴(hou)ELISA試劑(ji)盒/ Monke...
- 其他ELISA試(shi)劑(ji)盒
- 抗(kang)體
- 蛋(dan)白
- CLIA試(shi)劑盒(he)
- 細(xi)胞生(sheng)物學
- 分子生(sheng)物學/常用試劑
96T 僅(jin)供(gong)體外(wai)研(yan)究使(shi)用,不(bu)用於臨床(chuang)診斷!
馬白介(jie)素(su)8(IL8)ELISA試(shi)劑(ji)盒
本(ben)試劑(ji)盒(he)運用雙抗體夾(jia)心(xin)ELISA法(fa)定(ding)量測定(ding)馬血(xue)清(qing)、血(xue)漿、組織勻漿、細(xi)胞裂(lie)解(jie)液(ye)、細(xi)胞培(pei)養上(shang)清液(ye)和(he)其他生(sheng)物液(ye)體(ti)中馬白介(jie)素(su)8(IL8)含(han)量。
檢測(ce)範圍
31.25-2000pg/mL
*低(di)檢測(ce)限(xian)
12.4pg/mL
實(shi)驗(yan)原(yuan)理
將(jiang)馬白介(jie)素(su)8(IL8)抗體(ti)包(bao)被(bei)於(yu)96孔微(wei)孔(kong)板(ban)中,制成(cheng)固相(xiang)載(zai)體,向(xiang)微(wei)孔(kong)中分別(bie)加入(ru)標準(zhun)品(pin)或標本(ben),其中(zhong)的馬白介(jie)素(su)8(IL8)與連(lian)接(jie)於固相(xiang)載(zai)體上(shang)的抗體結合,然(ran)後(hou)加入(ru)生(sheng)物素(su)化(hua)的馬白介(jie)素(su)8(IL8)抗體(ti),將(jiang)未結合的(de)生(sheng)物素(su)化(hua)抗體洗(xi)凈後(hou),加入(ru)HRP標記(ji)的親和素(su),再次徹底(di)洗(xi)滌後(hou)加入(ru)TMB底(di)物顯色(se)。TMB在(zai)過(guo)氧化(hua)物酶的催化(hua)下轉化(hua)成藍色(se),並在(zai)酸(suan)的作用下轉化(hua)成*終的黃色。顏(yan)色的(de)深淺(qian)和(he)樣(yang)品(pin)中的馬白介(jie)素(su)8(IL8)呈正相(xiang)關(guan)。用酶標儀在(zai)450nm波(bo)長下測(ce)定吸光(guang)度(du)(O.D.值(zhi)),計(ji)算(suan)樣(yang)品(pin)濃度(du)。
試(shi)劑(ji)盒內(nei)容(rong)
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試(shi)劑名稱 |
數量(liang) |
試劑名稱 |
數量(liang) |
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96孔板(ban)(預包(bao)被(bei)) |
1 |
96孔(kong)板(ban)覆(fu)膜(mo) |
2 |
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標準(zhun)品(pin) |
0.5ml×1 |
標準(zhun)品(pin)稀釋(shi)液(ye) |
1.5ml×1瓶(ping) |
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顯色(se)劑(ji)A液(ye) |
6ml×1瓶(ping) |
樣(yang)品(pin)稀釋(shi)液(ye) |
6ml×1瓶(ping) |
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顯色(se)劑(ji)B液(ye) |
6ml×1瓶(ping) |
終止液(ye) |
6ml×1瓶(ping) |
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酶標試(shi)劑 |
6ml×1瓶(ping) |
密封袋(dai) |
1 |
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濃洗(xi)滌液(ye)(30×) |
1×20mL |
使(shi)用說明書 |
1 |
馬白介(jie)素(su)8(IL8)ELISA試(shi)劑(ji)盒需(xu)自(zi)備的設備及試劑(ji)
1. 450±10nm濾光(guang)片(pian)的(de)酶標儀(建議(yi)儀器使(shi)用前(qian)提(ti)前(qian)預熱(re))
2. 單(dan)道或多道微(wei)量(liang)加液(ye)器及(ji)吸(xi)頭
3. 稀釋(shi)樣(yang)品(pin)的EP管
4. 蒸(zheng)餾水或(huo)去離子水
5. 吸水紙
6. 盛放(fang)洗(xi)液(ye)的(de)容器
試劑盒的儲存(cun)及有(you)效(xiao)期
1. 未開封(feng)的試(shi)劑(ji)盒(he):所(suo)有(you)試(shi)劑(ji)均按(an)試(shi)劑瓶(ping)標簽(qian)上所(suo)示保存(cun)。請(qing)註意(yi),收到試劑盒(he)後(hou)請盡(jin)快將(jiang)TMB 洗(xi)滌液(ye),終止液(ye)保存(cun)於(yu)4℃,其他試(shi)劑(ji)保存(cun)於(yu)-20℃。
2. 使(shi)用後(hou)的試(shi)劑盒(he):剩余試劑仍(reng)需(xu)按(an)照(zhao)試劑(ji)瓶(ping)標簽(qian)所(suo)示的(de)溫(wen)度(du)保存(cun),開(kai)封後(hou)的酶標板(ban)要加幹燥(zao)劑後(hou)密封保存(cun)於(yu)-20℃,避免(mian)潮(chao)濕(shi)。
註(zhu)意:
試劑(ji)盒(he)內(nei)酶標條(tiao)可(ke)拆(chai)卸,按(an)實(shi)驗(yan)需求(qiu)可(ke)分多(duo)次使(shi)用;使(shi)用後(hou)的剩余試劑盒(he)建(jian)議(yi)在(zai)**實(shi)驗(yan)後(hou) 1個(ge)月(yue)內(nei)使(shi)用完畢(bi)。產品(pin)過(guo)期時(shi)間(jian)以盒(he)子上(shang)的標簽(qian)為準,保質(zhi)期內(nei)所(suo)有(you)組分都(dou)確(que)保是穩(wen)定的。
馬白介(jie)素(su)8(IL8)ELISA試(shi)劑(ji)盒標本(ben)的采(cai)集(ji)與保存(cun)
1. 血(xue)清(qing):
將(jiang)收集(ji)於血(xue)清(qing)分離管的全(quan)血(xue)標本(ben)在(zai)室(shi)溫(wen)放(fang)置 2 小時(shi)或(huo) 4oC 過(guo)夜,然後(hou) 1000×g 離心 20 分鐘(zhong),取上清即可(ke),或將(jiang)上清置於(yu)-20oC 或(huo)-80oC 保存(cun),但應避(bi)免(mian)反復凍(dong)融(rong)。
2. 血(xue)漿:
用 EDTA 或肝素(su)作為抗凝(ning)劑采(cai)集(ji)標本(ben),並將(jiang)標本(ben)在(zai)采(cai)集(ji)後(hou)的 30 分鐘(zhong)內(nei)於(yu) 2-8oC 1000×g 離心 15 分鐘(zhong),取上清即可(ke)檢測(ce),或將(jiang)上清置於(yu)-20oC 或(huo)-80oC 保存(cun),但應避(bi)免(mian)反復凍(dong)融(rong)。
3. 組織勻漿:
1) 取適量組織塊,於預(yu)冷(leng)PBS(0.01mol/L, pH 7.0-7.2)中(zhong)清洗(xi)去除血(xue)液(ye),稱(cheng)重(zhong)後(hou)備用(組織塊較大(da)需先(xian)剪碎後(hou)再勻(yun)漿);
2) 可(ke)同(tong)時(shi)選(xuan)用多種(zhong)勻(yun)漿方法(fa)達(da)到較好(hao)的(de)破(po)碎效果(guo):首先將(jiang)組織塊移(yi)入(ru)玻(bo)璃(li)勻漿器,加入(ru)5-10mL 預(yu)冷(leng)PBS 進行充分研(yan)磨,該過(guo)程(cheng)需(xu)在(zai)冰(bing)上(shang)進行(有(you)條(tiao)件(jian)實(shi)驗(yan)室可(ke)選(xuan)用機器勻(yun)漿);得(de)到的(de)勻漿液(ye)可(ke)再利(li)用超聲破(po)碎或反復凍(dong)融(rong) 進壹步(bu)處理(超聲破(po)碎過(guo)程(cheng)中(zhong)註意(yi)冰(bing)浴(yu)降(jiang)溫;反復凍(dong)融(rong)法(fa)可(ke)重(zhong)復2 次)。
3) 將(jiang)制備(bei)好(hao)的勻(yun)漿液(ye)於(yu)5000×g 離心5 分鐘(zhong),留(liu)取上清即可(ke)檢測(ce)。
4. 細(xi)胞裂(lie)解(jie)液(ye):
1)貼壁細(xi)胞需要先(xian)用胰(yi)酶消(xiao)化(hua),離心收集(ji)細(xi)胞(懸浮細(xi)胞可(ke)直(zhi)接(jie)離心收集(ji));
2)將(jiang)收集(ji)到的細(xi)胞用冷(leng)PBS 洗(xi)3 次;
3)物(wu)理方法(fa)裂(lie)解(jie)細(xi)胞(可(ke)先超(chao)聲破(po)碎細(xi)胞,再反復凍(dong)融(rong)):
i 超聲破(po)碎:取適量PBS 重(zhong)懸細(xi)胞,用壹定功(gong)率(lv)的超(chao)聲波(bo)處理細(xi)胞懸液(ye),使(shi)細(xi)胞急劇震蕩破(po)裂(lie)。
ii 反復凍(dong)融(rong):將(jiang)待(dai)破(po)碎的細(xi)胞在(zai)-20 oC 以下(xia)冰(bing)凍(dong),室(shi)溫融(rong)解(jie),反復3 次,使(shi)細(xi)胞溶脹破(po)碎。
4)將(jiang)標本(ben)於2-8 oC 1500×g 離心10 分鐘(zhong),收(shou)集(ji)上清備用。
5. 細(xi)胞培(pei)養上(shang)清或其它生(sheng)物標本(ben):
請 1000×g 離心 20 分鐘(zhong),取上清即可(ke)檢測(ce),或將(jiang)上清置於(yu)-20oC 或(huo)-80oC 保存(cun),但應避(bi)免(mian)反復凍(dong)融(rong)。
註(zhu)意(yi):
1. 以上(shang)標本(ben)均需密封保存(cun),4oC保存(cun)應(ying)小於1周,-20oC不(bu)應超(chao)過(guo)1個(ge)月(yue),-80oC不(bu)應超(chao)過(guo)2個(ge)月(yue)。
2. 標本(ben)使(shi)用前(qian)應緩(huan)慢(man)均衡至室(shi)溫(wen),不(bu)應加熱(re)使(shi)之(zhi)融(rong)解(jie)。
3. 實(shi)驗(yan)前(qian)紅細(xi)胞裂(lie)解(jie)液(ye)必(bi)須(xu)用標準(zhun)品(pin)稀釋(shi)液(ye)稀(xi)釋(shi)。
馬白介(jie)素(su)8(IL8)ELISA試(shi)劑(ji)盒試(shi)劑(ji)準備
1. 使(shi)用前(qian)將(jiang)所(suo)有(you)的(de)試(shi)劑(ji)和標本(ben)緩(huan)慢(man)均衡至室(shi)溫(wen)(18-25oC),試(shi)劑不(bu)能(neng)直(zhi)接(jie)在(zai)37oC溶(rong)解(jie)。
2. 標準(zhun)品(pin)(凍(dong)幹(gan)品(pin)):每(mei)瓶(ping)標準(zhun)品(pin)加入(ru)標準(zhun)品(pin)稀釋(shi)液(ye)1mL,蓋(gai)好後(hou)室溫(wen)靜置大(da)約10分鐘(zhong),同(tong)時(shi)反復顛倒/搓(cuo)動(dong)以助(zhu)溶(rong)解(jie),其濃度(du)為2000pg/mL。準備7個(ge)稀(xi)釋(shi)標準(zhun)品(pin)的EP管,每(mei)個(ge)EP管(guan)中(zhong)加入(ru)150μL的(de)標準(zhun)品(pin)稀釋(shi)液(ye),如(ru)圖所(suo)示依(yi)次倍比稀釋(shi)成(cheng)不(bu)同(tong)的(de)梯(ti)度(du), 標準(zhun)品(pin)稀釋(shi)液(ye)(0pg/mL)直(zhi)接(jie)作為空白孔(kong)。為保證(zheng)實(shi)驗(yan)結果(guo)有(you)效(xiao)性(xing),每(mei)次實(shi)驗(yan)請使(shi)用新(xin)的標準(zhun)品(pin)溶液(ye)。
3. 濃洗(xi)滌液(ye):用580mL蒸餾(liu)水或(huo)去離子水將(jiang)20mL濃洗(xi)滌液(ye)稀(xi)釋(shi)至(zhi)600mL,進行30倍稀(xi)釋(shi)。
標本(ben)處理
1. 本(ben)公(gong)司(si)只對(dui)試劑(ji)盒本(ben)身(shen)負(fu)責,不(bu)對(dui)因使(shi)用該試劑(ji)盒所(suo)造成的樣(yang)本(ben)消(xiao)耗(hao)負(fu)責(ze),請(qing)使(shi)用者使(shi)用前(qian)充分考(kao)慮到(dao)樣(yang)本(ben)的可(ke)能(neng)使(shi)用量,預留充足的樣(yang)本(ben)。
2. 實(shi)驗(yan)前(qian)應預(yu)測標本(ben)含(han)量,如(ru)果(guo)標本(ben)濃度(du)過(guo)高(gao),應(ying)對(dui)標本(ben)進行稀釋(shi),使(shi)稀(xi)釋(shi)後(hou)的標本(ben)符合試(shi)劑盒(he)的檢測(ce)範圍,計(ji)算(suan)時(shi)再乘(cheng)以相(xiang)應(ying)的稀釋(shi)倍(bei)數。
3. 若所(suo)檢樣(yang)本(ben)不(bu)包含(han)在(zai)說明書所(suo)列樣(yang)本(ben)之(zhi)中(zhong),建議(yi)進行預實(shi)驗(yan)驗證(zheng)其有(you)效(xiao)性(xing),並註意(yi)留(liu)存樣(yang)本(ben)。
4. 使(shi)用化(hua)學裂(lie)解(jie)液(ye)制備(bei)的(de)組織勻漿或細(xi)胞提(ti)取液(ye)可(ke)能(neng)會由(you)於某(mou)些化(hua)學物質的引入(ru)導(dao)致 ELISA實(shi)驗(yan)結果(guo)偏差(cha)。
5. 若樣(yang)本(ben)為細(xi)胞培(pei)養上(shang)清,因該類樣(yang)本(ben)幹擾(rao)因(yin)素(su) 較多(duo),如(ru):細(xi)胞狀態、細(xi)胞數量(liang)、采(cai)樣(yang)時(shi)間(jian)等(deng),所(suo)以可(ke)能(neng)存在(zai)檢測(ce)不(bu)出(chu)的情(qing)況。
6. 某(mou)些天然(ran)蛋(dan)白或(huo)重(zhong)組蛋(dan)白,包(bao)括原(yuan)核及(ji)真核重(zhong)組蛋(dan)白,可(ke)能(neng)因為與本(ben)產品(pin)所(suo)使(shi)用的檢測(ce)抗體(ti)及(ji)捕獲(huo)抗(kang)體(ti)不(bu)匹(pi)配(pei),而不(bu)被(bei)檢測(ce)出(chu)。
7. 建議(yi)使(shi)用新(xin)鮮樣(yang)本(ben),保存(cun)時(shi)間(jian)過(guo)長(chang)可(ke)能(neng)會存(cun)在(zai)蛋(dan)白降(jiang)解(jie)或變性(xing)導(dao)致實(shi)驗(yan)結果(guo)偏差(cha)。
馬白介(jie)素(su)8(IL8)ELISA試(shi)劑(ji)盒操(cao)作步(bu)驟
1. 加樣(yang):分別(bie)設空白孔(kong)(空白對(dui)照孔(kong)不(bu)加樣(yang)品(pin)及酶標試(shi)劑,其余(yu)各步(bu)操(cao)作相(xiang)同(tong))、標準(zhun)孔、待(dai)測樣(yang)品(pin)孔。在(zai)酶標包(bao)被(bei)板(ban)上標準(zhun)品(pin)準確加樣(yang)50μl,待(dai)測樣(yang)品(pin)孔中先加樣(yang)品(pin)稀釋(shi)液(ye)40μl,然(ran)後(hou)再加待(dai)測樣(yang)品(pin)10μl(樣(yang)品(pin)*終稀釋(shi)度(du)為5倍)。加樣(yang)將(jiang)樣(yang)品(pin)加於酶標板(ban)孔底(di)部,盡量(liang)不(bu)觸及(ji)孔壁,輕輕晃動(dong)混勻。
2. 溫育(yu):用封板(ban)膜(mo)封(feng)板(ban)後(hou)置37℃溫(wen)育(yu)30分鐘(zhong)。
3. 配(pei)液(ye):將(jiang)20倍濃縮洗(xi)滌液(ye)用蒸餾水20倍(bei)稀釋(shi)後(hou)備用
4. 洗(xi)滌:小心揭(jie)掉(diao)封(feng)板(ban)膜(mo),棄(qi)去液(ye)體(ti),甩(shuai)幹,每(mei)孔(kong)加滿洗(xi)滌液(ye),靜(jing)置30秒後(hou)棄(qi)去,如(ru)此(ci)重(zhong)復5次,拍(pai)幹。
5. 加酶:每(mei)孔(kong)加入(ru)酶標試(shi)劑50μl,空白孔(kong)除外(wai)。
6. 溫育:操(cao)作同(tong)3。
7. 洗(xi)滌:操(cao)作同(tong)5。
8. 顯色(se):每(mei)孔(kong)先(xian)加入(ru)顯色(se)劑(ji)A50μl,再加入(ru)顯色(se)劑(ji)B50μl,輕輕震蕩混(hun)勻(yun),37℃避光(guang)顯色(se)15分鐘(zhong).
9. 終止:每(mei)孔(kong)加終止液(ye)50μl,終止反應(ying)(此(ci)時(shi)藍色(se)立(li)轉(zhuan)黃色)。
10. 測(ce)定(ding):以空白空調零(ling),450nm波(bo)長依(yi)序(xu)測(ce)量(liang)各孔的吸光(guang)度(du)(OD值(zhi))。 測定(ding)應在(zai)加終止液(ye)後(hou)15分鐘(zhong)以內(nei)進行。
註(zhu)意(yi):
1. 試(shi)劑準(zhun)備(bei):準備壹次實(shi)驗(yan)所(suo)需要(yao)的酶標條(tiao),其它的(de)可(ke)從微(wei)孔(kong)板(ban)上拆(chai)下,密封,按(an)照(zhao)說明書要求(qiu)保存(cun),以備(bei)下(xia)次使(shi)用。
2. 加樣(yang):實(shi)驗(yan)操(cao)作中(zhong)請(qing)使(shi)用壹次性(xing)的(de)吸(xi)頭(tou),避免(mian)交(jiao)叉汙(wu)染(ran)。加樣(yang)時(shi)註(zhu)意不(bu)要有(you)氣泡(pao),將(jiang)樣(yang)品(pin)加於酶標板(ban)底(di)部,盡量(liang)不(bu)觸及(ji)孔壁,輕輕晃動(dong)混勻。加樣(yang)或加試劑(ji)時(shi),**個(ge)孔(kong)與(yu)*後(hou)壹個(ge)孔(kong)加樣(yang)之(zhi)間(jian)的(de)時(shi)間(jian)間(jian)隔(ge)如(ru)果(guo)太(tai)大(da),將(jiang)會導(dao)致不(bu)同(tong)的(de)“預(yu)溫(wen)育”時(shi)間(jian),從而(er)明顯地(di)影(ying)響到(dao)測(ce)量(liang)值(zhi)的準(zhun)確性(xing)及(ji)重(zhong)復性(xing)。因(yin)此(ci),壹(yi)次加樣(yang)時(shi)間(jian)(包(bao)括標準(zhun)品(pin)及所(suo)有(you)樣(yang)品(pin))*好控制在(zai)10分鐘(zhong)內(nei)。推薦設置復孔(kong)進行實(shi)驗(yan)。
3. 溫育:為防(fang)止樣(yang)品(pin)蒸發,實(shi)驗(yan)時(shi)請(qing)將(jiang)加上蓋(gai)或覆(fu)膜(mo)的(de)酶標板(ban)置於(yu)濕(shi)盒內(nei),以避(bi)免(mian)液(ye)體(ti)蒸發,洗(xi)板(ban)後(hou)應盡(jin)快進行下步(bu)操(cao)作,任(ren)何(he)時(shi)侯(hou)都(dou)應(ying)避免酶標板(ban)處於(yu)幹燥(zao)狀態(tai),同(tong)時(shi)應(ying)嚴(yan)格遵守(shou)給(gei)定的溫(wen)育時(shi)間(jian)和(he)溫度(du)。
4. 洗(xi)滌:充分的(de)洗(xi)滌非常重(zhong)要,在(zai)每(mei)次洗(xi)滌過(guo)程(cheng)中(zhong),都(dou)要(yao)將(jiang)洗(xi)滌液(ye)完(wan)全甩(shuai)幹。洗(xi)滌過(guo)程(cheng)中(zhong)反應(ying)孔中殘(can)留的(de)洗(xi)滌液(ye)應(ying)在(zai)濾(lv)紙上拍(pai)幹,勿將(jiang)濾紙直(zhi)接(jie)放(fang)入(ru)反應(ying)孔中吸(xi)水,同(tong)時(shi)要(yao)消(xiao)除板(ban)底(di)殘留的(de)液(ye)體(ti)和手(shou)指(zhi)印(yin),避免(mian)影響(xiang)*後(hou)的酶標儀讀數。如(ru)果(guo)有(you)自(zi)動(dong)洗(xi)板(ban)機,應(ying)在(zai)熟(shu)練使(shi)用後(hou)再用到正式(shi)實(shi) 驗(yan)過(guo)程(cheng)中(zhong)。
5. 反應(ying)時(shi)間(jian)的(de)控制:加入(ru)底(di)物後(hou)請定(ding)時(shi)觀(guan)察反應(ying)孔的顏(yan)色變(bian)化(hua)(比如(ru),每(mei)隔(ge)10分鐘(zhong)觀(guan)察壹(yi)次),如(ru)顏(yan)色(se)較深,請提(ti)前(qian)加入(ru)終止液(ye)終止反應(ying),避免反應(ying)過(guo)強(qiang)從而(er)影響(xiang)酶標儀光(guang)密度(du)讀數。
6. 底(di)物:底(di)物請避(bi)光(guang)保存(cun),在(zai)儲(chu)存(cun)和(he)溫(wen)育時(shi)避(bi)免強(qiang)光(guang)直(zhi)接(jie)照(zhao)射。
7. 如(ru)果(guo)實(shi)驗(yan)室內(nei)濕(shi)度(du)低(di)於60%,推薦使(shi)用加濕器提(ti)高濕(shi)度(du)水平(ping)。
實(shi)驗(yan)流程
1. 實(shi)驗(yan)前(qian)標準(zhun)品(pin)、試劑及樣(yang)本(ben)的準(zhun)備(bei);
2. 加樣(yang)(標準(zhun)品(pin)及樣(yang)本(ben))50μL,37℃孵育(yu)30分鐘(zhong);
3. 洗(xi)板(ban)5次,加酶標試(shi)劑50ul,37℃孵育(yu)半小時(shi);
4. 洗(xi)板(ban)5次;加入(ru)顯色(se)液(ye)A,B各(ge)50ul,37℃孵育(yu)顯色(se)15分鐘(zhong)
5. 加終止液(ye)50μL,立(li)即(ji)450nm讀數。
6. 計(ji)算(suan)
馬白介(jie)素(su)8(IL8)ELISA試(shi)劑(ji)盒計(ji)算(suan)
各標準(zhun)品(pin)及樣(yang)本(ben)O.D.值(zhi)扣(kou)除空白孔(kong)O.D.值(zhi)後(hou)作圖(七點圖),如(ru)設置復孔(kong),則應(ying)取其平(ping)均值(zhi)計(ji)算(suan)。以標準(zhun)品(pin)的濃度(du)為縱(zong)坐標(或(huo)對(dui)數坐(zuo)標),O.D.值(zhi)為橫坐標(或(huo)對(dui)數坐(zuo)標),繪(hui)出(chu)標準(zhun)曲線(*佳方(fang)程式(shi)應(ying)依(yi)回歸方(fang)程計(ji)算(suan)的(de)R2值(zhi)來定,以R2值(zhi)越趨近(jin)於1為好)。推薦使(shi)用專(zhuan)業(ye)制作曲線軟件(jian)進行分析(xi),如(ru)curve expert 1.30,根(gen)據(ju)樣(yang)品(pin)O.D.值(zhi),由(you)標準(zhun)曲線查出(chu)相應(ying)的濃度(du),乘(cheng)以稀(xi)釋(shi)倍(bei)數;或(huo)用標準(zhun)物的濃度(du)與(yu)O.D.值(zhi)計(ji)算(suan)出(chu)標準(zhun)曲線的回歸方(fang)程式(shi),將(jiang)樣(yang)品(pin)的O.D.值(zhi)代入(ru)方(fang)程式(shi),計(ji)算(suan)出(chu)樣(yang)品(pin)濃度(du),再乘(cheng)以稀(xi)釋(shi)倍(bei)數,即(ji)為樣(yang)品(pin)的實(shi)際濃度(du)。
特(te)異(yi)性(xing)
本(ben)試劑(ji)盒(he)用於檢測(ce)馬白介(jie)素(su)8(IL8),經(jing)檢測(ce)與其它相(xiang)似物(wu)質(zhi)無(wu)明顯交(jiao)叉反應(ying)。
由(you)於受(shou)到(dao)技(ji)術及(ji)樣(yang)本(ben)來源的(de)限(xian)制,不(bu)可(ke)能(neng)完成(cheng)對(dui)所(suo)有(you)相(xiang)關(guan)或相(xiang)似物質交(jiao)叉反應(ying)檢測(ce),因此(ci)本(ben)試劑(ji)盒(he)有(you)可(ke)能(neng)與未經(jing)檢測(ce)的其它物(wu)質有(you)交(jiao)叉反應(ying)。
精(jing)密度(du)
精(jing)密度(du)用樣(yang)品(pin)測定值(zhi)的變(bian)異(yi)系數CV表(biao)示。CV(%) = SD/mean×100
批(pi)內(nei)差(cha):取同(tong)批(pi)次試劑盒對(dui)低(di)、中、高(gao)值(zhi)定值(zhi)樣(yang)本(ben)進行定量(liang)檢測(ce),每(mei)份樣(yang)本(ben)連續(xu)測(ce)定(ding)20 次,分別(bie)計(ji)算(suan)不(bu)同(tong)濃度(du)樣(yang)本(ben)的平(ping)均值(zhi)及SD值(zhi)。
批(pi)間(jian)差(cha):選(xuan)取3個(ge)不(bu)同(tong)批(pi)次的試劑盒分別(bie)對(dui)低(di)、中、高(gao)值(zhi)定值(zhi)樣(yang)本(ben)進行定量(liang)測(ce)定(ding),每(mei)個(ge)樣(yang)本(ben)使(shi)用同(tong)壹(yi)試(shi)劑(ji)盒重(zhong)復測(ce)定8次,分別(bie)計(ji)算(suan)不(bu)同(tong)濃度(du)樣(yang)本(ben)的平(ping)均值(zhi)及SD值(zhi)。
批(pi)內(nei)差(cha): CV<10%
批(pi)間(jian)差(cha): CV<12%
馬白介(jie)素(su)8(IL8)ELISA試(shi)劑(ji)盒穩(wen)定性(xing)
經(jing)測(ce)定,試劑盒(he)在(zai)有(you)效(xiao)期內(nei)按(an)推薦溫度(du)保存(cun),其活(huo)性(xing)降(jiang)低(di)率(lv)小於5%。
為減(jian)小外部因(yin)素(su)對(dui)試劑(ji)盒破(po)壞前(qian)後(hou)檢測(ce)值(zhi)的影(ying)響,實(shi)驗(yan)室的(de)環境(jing)條(tiao)件(jian)需盡(jin)量(liang)保持(chi)壹(yi)致,尤其是實(shi)驗(yan)室內(nei)溫(wen)度(du)、濕(shi)度(du)及(ji)溫(wen)育(yu)條(tiao)件(jian)。其次由(you)同(tong)壹(yi)實(shi)驗(yan)員(yuan)來進行操(cao)作可(ke)減(jian)少人為誤(wu)差(cha)。



