產(chan)品(pin)名(ming)稱(cheng)：馬轉化生(sheng)長(chang)因子β1(TGFβ1)ELISA試劑(ji)盒

                                                       96T       僅(jin)供(gong)體外(wai)研究(jiu)使(shi)用(yong)，不用(yong)於(yu)臨(lin)床(chuang)診(zhen)斷!

馬轉化生(sheng)長(chang)因子β1(TGFβ1)ELISA試劑(ji)盒

本試劑(ji)盒運用(yong)雙(shuang)抗體夾(jia)心(xin)ELISA法(fa)定量測定馬血(xue)清(qing)、血(xue)漿(jiang)、組織勻漿、細(xi)胞(bao)裂解(jie)液(ye)、細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)上清(qing)液(ye)和其(qi)他生(sheng)物(wu)液(ye)體中馬轉化生(sheng)長(chang)因子β1(TGFβ1)含量(liang)。

 檢(jian)測範圍(wei)

15.625-1000pg/mL

 *低(di)檢(jian)測限

6.3pg/mL

 實(shi)驗(yan)原理

將(jiang)馬轉化生(sheng)長(chang)因子β1(TGFβ1)抗體包(bao)被(bei)於(yu)96孔(kong)微(wei)孔(kong)板中，制成(cheng)固(gu)相載(zai)體，向(xiang)微(wei)孔(kong)中分(fen)別(bie)加入(ru)標準品或(huo)標(biao)本，其中的馬轉化生(sheng)長(chang)因子β1(TGFβ1)與(yu)連(lian)接於(yu)固(gu)相載(zai)體上的抗體結合，然後(hou)加入(ru)生(sheng)物(wu)素(su)化的馬轉化生(sheng)長(chang)因子β1(TGFβ1)抗體，將(jiang)未(wei)結合的生(sheng)物(wu)素(su)化抗體洗(xi)凈(jing)後(hou)，加入(ru)HRP標記的親(qin)和素(su)，再(zai)次(ci)徹底(di)洗(xi)滌(di)後(hou)加入(ru)TMB底物(wu)顯(xian)色(se)。TMB在(zai)過氧化物(wu)酶的催化下(xia)轉(zhuan)化成(cheng)藍色(se)，並(bing)在酸(suan)的作用(yong)下(xia)轉(zhuan)化成(cheng)*終(zhong)的黃色(se)。顏(yan)色(se)的深淺和樣(yang)品(pin)中的馬轉化生(sheng)長(chang)因子β1(TGFβ1)呈(cheng)正(zheng)相關(guan)。用(yong)酶標儀(yi)在450nm波(bo)長下(xia)測定吸光(guang)度(du)(O.D.值)，計算(suan)樣(yang)品(pin)濃(nong)度(du)。

 試(shi)劑(ji)盒內容(rong)

馬轉化生(sheng)長(chang)因子β1(TGFβ1)ELISA試劑(ji)盒需(xu)自(zi)備(bei)的設(she)備(bei)及(ji)試劑(ji)

1.         450±10nm濾(lv)光(guang)片(pian)的酶標儀(yi)(建(jian)議儀(yi)器(qi)使(shi)用(yong)前提前預(yu)熱)

2.         單(dan)道(dao)或(huo)多(duo)道(dao)微(wei)量(liang)加液(ye)器及吸頭(tou)

3.         稀(xi)釋(shi)樣(yang)品(pin)的EP管(guan)

4.         蒸(zheng)餾水(shui)或(huo)去離子(zi)水(shui)

5.         吸水(shui)紙(zhi)

6.         盛(sheng)放(fang)洗(xi)液(ye)的容(rong)器(qi)

 試(shi)劑(ji)盒的儲存(cun)及(ji)有(you)效(xiao)期(qi)

1.         未(wei)開封(feng)的試劑(ji)盒：所(suo)有(you)試(shi)劑(ji)均(jun)按試(shi)劑(ji)瓶標(biao)簽(qian)上所(suo)示(shi)保(bao)存(cun)。請(qing)註(zhu)意，收到試(shi)劑(ji)盒後(hou)請盡快(kuai)將(jiang)TMB 洗(xi)滌(di)液，終(zhong)止液保(bao)存(cun)於(yu)4℃，其(qi)他試劑(ji)保(bao)存(cun)於(yu)-20℃。

2.         使(shi)用(yong)後(hou)的試劑(ji)盒：剩(sheng)余試劑(ji)仍需(xu)按照(zhao)試(shi)劑(ji)瓶標(biao)簽(qian)所示(shi)的溫度(du)保(bao)存(cun)，開(kai)封(feng)後(hou)的酶標板(ban)要(yao)加幹燥劑(ji)後(hou)密(mi)封(feng)保(bao)存(cun)於(yu)-20℃，避(bi)免潮(chao)濕。

註(zhu)意(yi)：

試(shi)劑(ji)盒內酶標條可拆卸(xie)，按實(shi)驗(yan)需(xu)求可(ke)分(fen)多(duo)次(ci)使用(yong)；使(shi)用(yong)後(hou)的剩余試劑(ji)盒建(jian)議在(zai)**實(shi)驗(yan)後(hou) 1個月內使用(yong)完畢。產(chan)品(pin)過期(qi)時(shi)間以(yi)盒子上的標簽(qian)為準，保(bao)質期(qi)內所有(you)組分(fen)都(dou)確保(bao)是(shi)穩定的。

馬轉化生(sheng)長(chang)因子β1(TGFβ1)ELISA試劑(ji)盒標(biao)本的采(cai)集與(yu)保(bao)存(cun)

1.         血(xue)清(qing)：

將(jiang)收(shou)集於(yu)血(xue)清(qing)分(fen)離管(guan)的全血(xue)標(biao)本在室(shi)溫(wen)放(fang)置 2 小時或(huo) 4^oC 過夜(ye)，然後(hou) 1000×g 離心(xin) 20 分(fen)鐘，取(qu)上清(qing)即可，或(huo)將(jiang)上清(qing)置於(yu)-20^oC 或(huo)-80^oC 保(bao)存(cun)，但(dan)應避免(mian)反(fan)復(fu)凍(dong)融(rong)。

2.         血(xue)漿(jiang)：

用(yong) EDTA 或(huo)肝(gan)素(su)作為抗凝(ning)劑(ji)采(cai)集標(biao)本，並將(jiang)標(biao)本在采(cai)集後(hou)的 30 分(fen)鐘內於(yu) 2-8^oC 1000×g 離心(xin) 15 分(fen)鐘，取(qu)上清(qing)即可檢(jian)測，或(huo)將(jiang)上清(qing)置於(yu)-20^oC 或(huo)-80^oC 保(bao)存(cun)，但(dan)應避免(mian)反(fan)復(fu)凍(dong)融(rong)。

3. 組織勻漿：

1） 取(qu)適量組織塊(kuai)，於(yu)預(yu)冷(leng)PBS（0.01mol/L, pH 7.0-7.2）中清(qing)洗(xi)去除(chu)血(xue)液(ye)，稱(cheng)重後(hou)備(bei)用(yong)（組織塊(kuai)較(jiao)大(da)需(xu)先(xian)剪碎(sui)後(hou)再(zai)勻漿）；

2） 可(ke)同(tong)時選(xuan)用(yong)多(duo)種勻漿方(fang)法(fa)達到較(jiao)好(hao)的破(po)碎(sui)效果：首先(xian)將(jiang)組織塊(kuai)移(yi)入玻璃勻漿器，加入(ru)5-10mL 預(yu)冷(leng)PBS 進(jin)行充(chong)分(fen)研(yan)磨(mo)，該(gai)過程需(xu)在冰(bing)上進(jin)行（有(you)條件實(shi)驗(yan)室(shi)可(ke)選(xuan)用(yong)機器勻漿）；得到的勻漿液可再(zai)利(li)用(yong)超聲破(po)碎(sui)或(huo)反(fan)復(fu)凍(dong)融(rong) 進(jin)壹步處理(li)（超聲破(po)碎(sui)過程中註(zhu)意冰(bing)浴(yu)降溫；反(fan)復(fu)凍(dong)融(rong)法可重復2 次(ci)）。

3） 將(jiang)制備(bei)好(hao)的勻漿液於(yu)5000×g 離心(xin)5 分(fen)鐘，留取(qu)上清(qing)即可檢(jian)測。

4. 細(xi)胞(bao)裂解(jie)液(ye)：

1）貼(tie)壁(bi)細(xi)胞(bao)需(xu)要(yao)先(xian)用(yong)胰(yi)酶消(xiao)化，離心(xin)收集(ji)細(xi)胞(bao)（懸(xuan)浮(fu)細(xi)胞(bao)可直接離心(xin)收集(ji)）；

2）將(jiang)收(shou)集到的細(xi)胞(bao)用(yong)冷(leng)PBS 洗(xi)3 次(ci)；

3）物(wu)理(li)方(fang)法(fa)裂解(jie)細(xi)胞(bao)（可先(xian)超聲破(po)碎(sui)細(xi)胞(bao)，再(zai)反(fan)復(fu)凍(dong)融(rong)）：

i 超聲破(po)碎(sui)：取(qu)適量PBS 重懸(xuan)細(xi)胞(bao)，用(yong)壹(yi)定功率(lv)的超聲波(bo)處理(li)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)，使細(xi)胞(bao)急劇震(zhen)蕩(dang)破(po)裂。

ii 反(fan)復(fu)凍(dong)融(rong)：將待(dai)破(po)碎(sui)的細(xi)胞(bao)在-20 ^oC 以(yi)下(xia)冰(bing)凍(dong)，室(shi)溫(wen)融(rong)解，反(fan)復(fu)3 次(ci)，使細(xi)胞(bao)溶脹破(po)碎(sui)。

4）將(jiang)標(biao)本於(yu)2-8 ^oC 1500×g 離心(xin)10 分(fen)鐘，收集(ji)上清(qing)備(bei)用(yong)。

5. 細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)上清(qing)或(huo)其(qi)它(ta)生(sheng)物(wu)標(biao)本：

請(qing) 1000×g 離心(xin) 20 分(fen)鐘，取(qu)上清(qing)即可檢(jian)測，或(huo)將(jiang)上清(qing)置於(yu)-20^oC 或(huo)-80^oC 保(bao)存(cun)，但(dan)應避免(mian)反(fan)復(fu)凍(dong)融(rong)。

註(zhu)意(yi)：

1.         以(yi)上標(biao)本均(jun)需(xu)密(mi)封(feng)保(bao)存(cun)，4^oC保(bao)存(cun)應小於(yu)1周(zhou)，-20^oC不應超過1個月，-80^oC不應超過2個月。

2.         標(biao)本使用(yong)前應緩慢(man)均(jun)衡至室(shi)溫(wen)，不應加熱使之(zhi)融解(jie)。

3.         實(shi)驗(yan)前紅(hong)細(xi)胞(bao)裂解(jie)液(ye)必須用(yong)標(biao)準品稀釋液(ye)稀(xi)釋。

馬轉化生(sheng)長(chang)因子β1(TGFβ1)ELISA試劑(ji)盒試(shi)劑(ji)準備(bei)

1.         使(shi)用(yong)前將(jiang)所(suo)有(you)的試劑(ji)和標(biao)本緩慢(man)均(jun)衡至室(shi)溫(wen)(18-25oC)，試(shi)劑(ji)不能直接在(zai)37oC溶(rong)解。

2.         標(biao)準(zhun)品(凍(dong)幹品)：每(mei)瓶標(biao)準(zhun)品(pin)加入(ru)標準品稀(xi)釋液1mL，蓋好(hao)後(hou)室(shi)溫(wen)靜置大(da)約10分(fen)鐘，同時(shi)反(fan)復(fu)顛(dian)倒/搓(cuo)動以(yi)助溶解(jie)，其(qi)濃度(du)為1000pg/mL。準備(bei)7個(ge)稀釋標(biao)準品(pin)的EP管(guan)，每個(ge)EP管(guan)中加入(ru)150μL的標準(zhun)品(pin)稀釋液(ye)，如圖(tu)所(suo)示(shi)依次(ci)倍(bei)比稀(xi)釋(shi)成(cheng)不同的梯度(du)， 標(biao)準品稀(xi)釋液(ye)(0pg/mL)直接作(zuo)為空白(bai)孔(kong)。為保(bao)證(zheng)實(shi)驗(yan)結果有(you)效(xiao)性(xing)，每次(ci)實(shi)驗(yan)請(qing)使(shi)用(yong)新(xin)的標準(zhun)品(pin)溶液。

3.         濃(nong)洗(xi)滌(di)液：用(yong)580mL蒸(zheng)餾水(shui)或(huo)去離子(zi)水(shui)將(jiang)20mL濃(nong)洗(xi)滌(di)液稀釋至600mL，進(jin)行30倍(bei)稀釋(shi)。

標(biao)本處理(li)

1.         本公司(si)只對試劑(ji)盒本身負責(ze)，不對因使(shi)用(yong)該(gai)試劑(ji)盒所(suo)造(zao)成(cheng)的樣(yang)本消(xiao)耗(hao)負責(ze)，請(qing)使(shi)用(yong)者(zhe)使用(yong)前充(chong)分(fen)考(kao)慮(lv)到樣(yang)本的可能(neng)使(shi)用(yong)量(liang)，預(yu)留充(chong)足的樣(yang)本。

2.         實(shi)驗(yan)前應預(yu)測標本含量(liang)，如(ru)果標(biao)本濃度(du)過高，應對標本進(jin)行稀釋(shi)，使稀(xi)釋後(hou)的標本符合(he)試(shi)劑(ji)盒的檢測範圍(wei)，計算(suan)時(shi)再(zai)乘(cheng)以(yi)相應的稀釋(shi)倍(bei)數。

3.         若(ruo)所檢(jian)樣(yang)本不包(bao)含在說(shuo)明(ming)書(shu)所列樣(yang)本之中，建(jian)議進(jin)行預(yu)實(shi)驗(yan)驗(yan)證(zheng)其有(you)效(xiao)性(xing)，並註意留存(cun)樣(yang)本。

4.         使(shi)用(yong)化學裂解(jie)液(ye)制備(bei)的組織勻漿或(huo)細(xi)胞(bao)提取(qu)液可能(neng)會(hui)由於(yu)某些化學物(wu)質的引(yin)入(ru)導致(zhi)  ELISA實(shi)驗(yan)結果偏(pian)差。

5.         若(ruo)樣(yang)本為細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)上清(qing)，因(yin)該類樣(yang)本幹擾(rao)因素 較(jiao)多(duo)，如(ru)：細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態、細(xi)胞(bao)數量、采(cai)樣(yang)時(shi)間等，所以(yi)可能存在(zai)檢測不出的情(qing)況(kuang)。

6.         某些天然蛋白(bai)或(huo)重組蛋白(bai)，包(bao)括(kuo)原核及(ji)真核(he)重組蛋白(bai)，可(ke)能因為與本產(chan)品(pin)所(suo)使(shi)用(yong)的檢測抗體及(ji)捕獲(huo)抗體不匹配，而不被(bei)檢(jian)測出。

7.         建(jian)議使(shi)用(yong)新(xin)鮮樣(yang)本，保(bao)存(cun)時(shi)間過長可(ke)能會(hui)存(cun)在(zai)蛋白(bai)降(jiang)解或(huo)變(bian)性(xing)導致(zhi)實(shi)驗(yan)結果偏(pian)差。

馬轉化生(sheng)長(chang)因子β1(TGFβ1)ELISA試劑(ji)盒操作步(bu)驟(zhou)

1.         加樣(yang)：分(fen)別(bie)設(she)空白(bai)孔(kong)（空白(bai)對照孔(kong)不加樣(yang)品(pin)及(ji)酶標試(shi)劑(ji)，其余各步操作相同(tong)）、標(biao)準(zhun)孔(kong)、待(dai)測樣(yang)品(pin)孔(kong)。在酶標包(bao)被(bei)板(ban)上標(biao)準品(pin)準(zhun)確加樣(yang)50μl，待(dai)測樣(yang)品(pin)孔(kong)中先(xian)加樣(yang)品(pin)稀(xi)釋(shi)液40μl，然後(hou)再(zai)加待(dai)測樣(yang)品(pin)10μl（樣(yang)品(pin)*終(zhong)稀(xi)釋(shi)度(du)為5倍(bei)）。加樣(yang)將(jiang)樣(yang)品(pin)加於(yu)酶標板(ban)孔(kong)底部(bu)，盡量(liang)不觸及(ji)孔(kong)壁，輕(qing)輕(qing)晃(huang)動混勻。

2.         溫(wen)育：用(yong)封(feng)板膜(mo)封(feng)板後(hou)置37℃溫育30分(fen)鐘。  

3.         配液：將20倍(bei)濃縮(suo)洗(xi)滌(di)液用(yong)蒸(zheng)餾水(shui)20倍(bei)稀釋(shi)後(hou)備(bei)用(yong)

4.         洗(xi)滌(di)：小心揭掉封(feng)板膜(mo)，棄去液(ye)體，甩(shuai)幹，每孔(kong)加滿(man)洗(xi)滌(di)液，靜置30秒後(hou)棄去，如(ru)此(ci)重復5次(ci)，拍幹。

5.         加酶：每孔(kong)加入(ru)酶標試(shi)劑(ji)50μl，空白(bai)孔(kong)除外(wai)。

6.         溫(wen)育：操作同(tong)3。

7.         洗(xi)滌(di)：操作同(tong)5。

8.         顯(xian)色(se)：每(mei)孔(kong)先(xian)加入(ru)顯(xian)色(se)劑(ji)A50μl，再(zai)加入(ru)顯(xian)色(se)劑(ji)B50μl，輕(qing)輕(qing)震(zhen)蕩(dang)混勻，37℃避光顯(xian)色(se)15分(fen)鐘.

9.         終(zhong)止：每孔(kong)加終(zhong)止液50μl，終(zhong)止反(fan)應（此時(shi)藍色(se)立轉黃色(se)）。

10.     測定：以(yi)空白(bai)空(kong)調(tiao)零(ling)，450nm波(bo)長依序(xu)測量各(ge)孔(kong)的吸光(guang)度(du)（OD值）。 測定應在加終(zhong)止液後(hou)15分(fen)鐘以(yi)內進(jin)行。

註(zhu)意(yi)：

1.         試(shi)劑(ji)準備(bei)：準(zhun)備(bei)壹(yi)次(ci)實(shi)驗(yan)所(suo)需(xu)要(yao)的酶標條，其它(ta)的可從(cong)微(wei)孔(kong)板上拆下(xia)，密(mi)封(feng)，按照(zhao)說(shuo)明(ming)書(shu)要(yao)求保(bao)存(cun)，以(yi)備(bei)下(xia)次(ci)使用(yong)。

2.         加樣(yang)：實(shi)驗(yan)操作中請(qing)使用(yong)壹(yi)次(ci)性(xing)的吸頭(tou)，避(bi)免交叉(cha)汙(wu)染。加樣(yang)時(shi)註(zhu)意(yi)不要(yao)有(you)氣(qi)泡(pao)，將(jiang)樣(yang)品(pin)加於(yu)酶標板(ban)底部(bu)，盡量(liang)不觸及(ji)孔(kong)壁，輕(qing)輕(qing)晃(huang)動混勻。加樣(yang)或(huo)加試(shi)劑(ji)時，**個(ge)孔(kong)與*後(hou)壹個(ge)孔(kong)加樣(yang)之(zhi)間的時間間隔如果太(tai)大(da)，將(jiang)會(hui)導致(zhi)不同的“預(yu)溫育”時間，從而明顯(xian)地(di)影響(xiang)到測量值(zhi)的準確性(xing)及重復性(xing)。因此，壹次(ci)加樣(yang)時(shi)間(包(bao)括(kuo)標準品(pin)及所(suo)有(you)樣(yang)品(pin))*好(hao)控(kong)制在10分(fen)鐘內。推薦設(she)置復孔(kong)進(jin)行實(shi)驗(yan)。

3.          溫(wen)育：為防止樣(yang)品(pin)蒸(zheng)發，實(shi)驗(yan)時(shi)請(qing)將加上蓋(gai)或(huo)覆(fu)膜(mo)的酶標板(ban)置於(yu)濕盒(he)內，以(yi)避免液體蒸(zheng)發，洗(xi)板(ban)後(hou)應盡快(kuai)進(jin)行下(xia)步(bu)操作，任(ren)何(he)時侯都(dou)應避免(mian)酶標板(ban)處於(yu)幹燥狀(zhuang)態，同(tong)時(shi)應嚴格遵(zun)守(shou)給(gei)定的溫育時間和溫(wen)度。

4.         洗(xi)滌(di)：充(chong)分(fen)的洗(xi)滌(di)非常重要(yao)，在每(mei)次(ci)洗(xi)滌(di)過程中，都(dou)要(yao)將洗(xi)滌(di)液完全(quan)甩幹。洗(xi)滌(di)過程中反(fan)應孔(kong)中殘(can)留的洗(xi)滌(di)液應在濾(lv)紙上拍(pai)幹，勿(wu)將(jiang)濾紙直接放(fang)入(ru)反(fan)應孔(kong)中吸水(shui)，同(tong)時要(yao)消(xiao)除板(ban)底殘(can)留的液體和(he)手(shou)指印，避免影響(xiang)*後(hou)的酶標儀(yi)讀數(shu)。如(ru)果有(you)自(zi)動洗(xi)板(ban)機，應在熟練使(shi)用(yong)後(hou)再(zai)用(yong)到正(zheng)式實(shi) 驗(yan)過程中。

5.         反(fan)應時間的控制：加入(ru)底物(wu)後(hou)請定(ding)時觀察(cha)反(fan)應孔(kong)的顏色(se)變(bian)化(比如(ru)，每(mei)隔10分(fen)鐘觀察(cha)壹(yi)次(ci))，如顏(yan)色(se)較(jiao)深，請(qing)提前加入(ru)終(zhong)止液終(zhong)止反(fan)應，避免(mian)反(fan)應過強從而影響(xiang)酶標儀(yi)光密(mi)度讀(du)數(shu)。

6.         底(di)物(wu)：底(di)物(wu)請(qing)避(bi)光(guang)保(bao)存(cun)，在(zai)儲(chu)存和溫育時避(bi)免強光直接照(zhao)射(she)。

7.         如(ru)果實(shi)驗(yan)室(shi)內濕度(du)低於(yu)60%，推(tui)薦使(shi)用(yong)加濕器(qi)提高濕度(du)水(shui)平(ping)。

 實(shi)驗(yan)流程

1.         實(shi)驗(yan)前標(biao)準(zhun)品、試(shi)劑(ji)及樣(yang)本的準備(bei)；

2.         加樣(yang)（標(biao)準(zhun)品(pin)及樣(yang)本）50μL，37℃孵育30分(fen)鐘；

3.         洗(xi)板(ban)5次(ci)，加酶標試(shi)劑(ji)50ul，37℃孵育半小時；

4.         洗(xi)板(ban)5次(ci)；加入(ru)顯(xian)色(se)液(ye)A，B各50ul,37℃孵育顯(xian)色(se)15分(fen)鐘

5.         加終(zhong)止液50μL，立即450nm讀數(shu)。

6.    計算(suan)

馬轉化生(sheng)長(chang)因子β1(TGFβ1)ELISA試劑(ji)盒計算(suan)

各(ge)標(biao)準品(pin)及樣(yang)本O.D.值扣(kou)除(chu)空白(bai)孔(kong)O.D.值後(hou)作圖(tu)(七(qi)點(dian)圖)，如(ru)設(she)置復孔(kong)，則應取(qu)其平均(jun)值(zhi)計算(suan)。以(yi)標準品的濃度(du)為縱坐(zuo)標(biao)(或(huo)對數坐(zuo)標)，O.D.值(zhi)為橫坐標(biao)(或(huo)對數坐(zuo)標），繪(hui)出標(biao)準(zhun)曲線(*佳方(fang)程(cheng)式應依回(hui)歸(gui)方(fang)程(cheng)計算(suan)的R2值來(lai)定(ding)，以(yi)R2值越趨(qu)近(jin)於(yu)1為好)。推(tui)薦使(shi)用(yong)專業制作曲線軟(ruan)件進(jin)行分(fen)析(xi)，如(ru)curve expert 1.30，根(gen)據樣(yang)品(pin)O.D.值(zhi)，由標(biao)準曲線查(zha)出相應的濃度(du)，乘(cheng)以(yi)稀釋倍(bei)數；或(huo)用(yong)標(biao)準物(wu)的濃度(du)與(yu)O.D.值計算(suan)出標(biao)準(zhun)曲線的回歸(gui)方(fang)程(cheng)式，將樣(yang)品(pin)的O.D.值代(dai)入(ru)方(fang)程(cheng)式，計算(suan)出樣(yang)品(pin)濃(nong)度(du)，再(zai)乘(cheng)以(yi)稀釋倍(bei)數，即為樣(yang)品(pin)的實(shi)際(ji)濃(nong)度(du)。

 特異性(xing)

本試劑(ji)盒用(yong)於(yu)檢(jian)測馬轉化生(sheng)長(chang)因子β1(TGFβ1)，經檢(jian)測與其(qi)它相似物(wu)質無(wu)明顯(xian)交(jiao)叉(cha)反(fan)應。

由於(yu)受(shou)到技術及樣(yang)本來源(yuan)的限制，不可能(neng)完成(cheng)對所有(you)相關(guan)或(huo)相似物(wu)質交(jiao)叉反(fan)應檢測，因此(ci)本試劑(ji)盒有(you)可(ke)能(neng)與(yu)未(wei)經檢測的其它(ta)物(wu)質有(you)交(jiao)叉(cha)反(fan)應。

 精密(mi)度

精密(mi)度用(yong)樣(yang)品(pin)測定值(zhi)的變(bian)異(yi)系(xi)數(shu)CV表示(shi)。CV(%) = SD/mean×100

批內差：取(qu)同批次(ci)試劑(ji)盒對低、中、高值定(ding)值樣(yang)本進(jin)行定量(liang)檢測,每份(fen)樣(yang)本連續(xu)測定20 次(ci)，分(fen)別(bie)計算(suan)不同濃(nong)度樣(yang)本的平均(jun)值(zhi)及(ji)SD值(zhi)。

批間差：選(xuan)取(qu)3個不同批次(ci)的試劑(ji)盒分(fen)別(bie)對低、中、高值定(ding)值樣(yang)本進(jin)行定量(liang)測定，每(mei)個樣(yang)本使用(yong)同(tong)壹試劑(ji)盒重復測定8次(ci)，分(fen)別(bie)計算(suan)不同濃(nong)度樣(yang)本的平均(jun)值(zhi)及(ji)SD值(zhi)。

批內差： CV<10%

批間差： CV<12%

馬轉化生(sheng)長(chang)因子β1(TGFβ1)ELISA試劑(ji)盒穩定性(xing)

經(jing)測定，試(shi)劑(ji)盒在(zai)有(you)效(xiao)期(qi)內按推(tui)薦溫(wen)度保(bao)存(cun)，其(qi)活(huo)性(xing)降低率(lv)小於(yu)5%。

為減小外(wai)部(bu)因素(su)對試劑(ji)盒破(po)壞(huai)前後(hou)檢測值的影響(xiang)，實(shi)驗(yan)室(shi)的環境(jing)條件需(xu)盡量(liang)保(bao)持(chi)壹(yi)致(zhi)，尤(you)其是(shi)實(shi)驗(yan)室(shi)內溫度、濕度(du)及溫育條件。其(qi)次(ci)由同(tong)壹實(shi)驗(yan)員(yuan)來(lai)進(jin)行操作可(ke)減(jian)少人(ren)為誤(wu)差。