產(chan)品名(ming)稱：馬(ma)轉(zhuan)化生(sheng)長因子(zi)β3(TGFβ3)ELISA試劑盒

                                                       96T       僅(jin)供(gong)體(ti)外(wai)研究(jiu)使用(yong)，不(bu)用(yong)於臨床診(zhen)斷!

馬(ma)轉(zhuan)化生(sheng)長因子(zi)β3(TGFβ3)ELISA試劑盒

本試劑盒運(yun)用(yong)雙(shuang)抗體(ti)夾心ELISA法(fa)定(ding)量(liang)測(ce)定(ding)馬(ma)血清(qing)、血漿(jiang)、組(zu)織勻(yun)漿(jiang)、細(xi)胞裂(lie)解(jie)液、細(xi)胞培(pei)養(yang)上清液和(he)其(qi)他生(sheng)物液體(ti)中(zhong)馬(ma)轉(zhuan)化生(sheng)長因子(zi)β3(TGFβ3)含(han)量(liang)。

 檢測(ce)範(fan)圍(wei)

125-8000 pg/mL

 *低檢測限

31 pg/mL

 實驗原(yuan)理

將(jiang)馬(ma)轉(zhuan)化生(sheng)長因子(zi)β3(TGFβ3)抗體(ti)包被(bei)於96孔微孔板(ban)中(zhong)，制成固(gu)相載體(ti)，向(xiang)微孔中(zhong)分(fen)別(bie)加入標準(zhun)品或(huo)標本(ben)，其(qi)中(zhong)的馬(ma)轉(zhuan)化生(sheng)長因子(zi)β3(TGFβ3)與連接(jie)於固(gu)相載體(ti)上的抗體(ti)結合(he)，然後加(jia)入生(sheng)物素(su)化的(de)馬(ma)轉(zhuan)化生(sheng)長因子(zi)β3(TGFβ3)抗體(ti)，將(jiang)未(wei)結合(he)的生(sheng)物素(su)化抗體(ti)洗凈(jing)後，加入HRP標記(ji)的親和(he)素(su)，再次(ci)徹(che)底洗滌後加(jia)入TMB底物顯(xian)色。TMB在(zai)過氧(yang)化物酶的催化下轉化成(cheng)藍色，並在(zai)酸的作(zuo)用(yong)下轉化成(cheng)*終的(de)黃(huang)色。顏(yan)色的深(shen)淺和樣品中(zhong)的馬(ma)轉(zhuan)化生(sheng)長因子(zi)β3(TGFβ3)呈正(zheng)相關。用(yong)酶標儀(yi)在(zai)450nm波長(chang)下測定(ding)吸光度(O.D.值(zhi))，計算(suan)樣品濃(nong)度。

 試劑盒內(nei)容

馬(ma)轉(zhuan)化生(sheng)長因子(zi)β3(TGFβ3)ELISA試劑盒需(xu)自(zi)備的(de)設(she)備及試劑

1.         450±10nm濾光片(pian)的(de)酶標儀(yi)(建議(yi)儀(yi)器使用(yong)前(qian)提前(qian)預熱(re))

2.         單(dan)道(dao)或(huo)多(duo)道(dao)微量(liang)加(jia)液器及吸頭

3.         稀(xi)釋(shi)樣品的(de)EP管

4.         蒸(zheng)餾(liu)水或(huo)去(qu)離子(zi)水

5.         吸水紙

6.         盛放(fang)洗液的(de)容器

 試劑盒的(de)儲(chu)存及有效期(qi)

1.         未(wei)開封的(de)試劑盒：所(suo)有試劑均(jun)按試劑瓶標簽(qian)上所示保存。請(qing)註(zhu)意(yi)，收(shou)到(dao)試劑盒後(hou)請(qing)盡(jin)快將(jiang)TMB 洗滌(di)液，終(zhong)止(zhi)液保(bao)存於4℃，其(qi)他試劑保存於-20℃。

2.         使用(yong)後(hou)的試劑盒：剩(sheng)余試劑仍需(xu)按(an)照試劑瓶標簽(qian)所(suo)示的溫度保存，開封後(hou)的酶標板(ban)要加幹(gan)燥(zao)劑後密(mi)封保(bao)存於-20℃，避免潮(chao)濕(shi)。

註(zhu)意(yi)：

試劑盒內(nei)酶標條(tiao)可(ke)拆(chai)卸(xie)，按(an)實(shi)驗需求(qiu)可(ke)分(fen)多(duo)次(ci)使用(yong)；使(shi)用(yong)後(hou)的剩(sheng)余試劑盒建議(yi)在(zai)**實驗後 1個月(yue)內(nei)使用(yong)完(wan)畢(bi)。產(chan)品過期(qi)時(shi)間(jian)以盒子(zi)上的標簽(qian)為準(zhun)，保質(zhi)期(qi)內(nei)所有組(zu)分(fen)都確(que)保是(shi)穩(wen)定(ding)的(de)。

馬(ma)轉(zhuan)化生(sheng)長因子(zi)β3(TGFβ3)ELISA試劑盒標本(ben)的(de)采集與保存

1.         血清(qing)：

將(jiang)收集於血清(qing)分(fen)離管(guan)的全血標本(ben)在(zai)室溫(wen)放(fang)置(zhi) 2 小時(shi)或(huo) 4^oC 過夜(ye)，然後 1000×g 離(li)心 20 分(fen)鐘，取(qu)上清即可(ke)，或(huo)將(jiang)上清置(zhi)於-20^oC 或(huo)-80^oC 保(bao)存，但(dan)應(ying)避免反(fan)復凍融(rong)。

2.         血漿(jiang)：

用(yong) EDTA 或(huo)肝素作(zuo)為抗凝(ning)劑采集標本(ben)，並將(jiang)標本(ben)在(zai)采集後(hou)的 30 分(fen)鐘內(nei)於 2-8^oC 1000×g 離心 15 分(fen)鐘，取(qu)上清即可(ke)檢測(ce)，或(huo)將(jiang)上清置(zhi)於-20^oC 或(huo)-80^oC 保(bao)存，但(dan)應(ying)避免反(fan)復凍融(rong)。

3. 組(zu)織勻(yun)漿(jiang)：

1） 取適量(liang)組(zu)織塊，於預冷PBS（0.01mol/L, pH 7.0-7.2）中(zhong)清洗(xi)去(qu)除血液，稱重後(hou)備(bei)用(yong)（組(zu)織塊較(jiao)大(da)需(xu)先(xian)剪(jian)碎(sui)後再(zai)勻(yun)漿(jiang)）；

2） 可(ke)同時(shi)選(xuan)用(yong)多(duo)種(zhong)勻(yun)漿(jiang)方法(fa)達(da)到較(jiao)好(hao)的(de)破(po)碎(sui)效果(guo)：首(shou)先(xian)將(jiang)組(zu)織塊移(yi)入玻璃(li)勻(yun)漿(jiang)器，加入5-10mL 預冷PBS 進行充(chong)分(fen)研磨，該過程需(xu)在(zai)冰上進行(xing)（有條(tiao)件(jian)實驗室可(ke)選(xuan)用(yong)機器勻(yun)漿(jiang)）；得到(dao)的勻(yun)漿(jiang)液可(ke)再利(li)用(yong)超聲(sheng)破碎(sui)或(huo)反(fan)復凍融(rong) 進(jin)壹(yi)步處(chu)理（超聲(sheng)破碎(sui)過程中(zhong)註(zhu)意(yi)冰(bing)浴(yu)降(jiang)溫；反(fan)復凍融(rong)法(fa)可(ke)重復2 次(ci)）。

3） 將(jiang)制備好(hao)的勻(yun)漿(jiang)液於5000×g 離心5 分(fen)鐘，留(liu)取上清即可(ke)檢測(ce)。

4. 細(xi)胞裂(lie)解(jie)液：

1）貼壁細(xi)胞需(xu)要先(xian)用(yong)胰(yi)酶消(xiao)化，離(li)心收(shou)集細(xi)胞（懸(xuan)浮(fu)細(xi)胞可(ke)直接(jie)離(li)心收(shou)集）；

2）將(jiang)收集到(dao)的細(xi)胞用(yong)冷PBS 洗3 次；

3）物理(li)方(fang)法裂解(jie)細(xi)胞（可(ke)先(xian)超聲(sheng)破碎(sui)細(xi)胞，再(zai)反(fan)復凍融(rong)）：

i 超聲(sheng)破碎(sui)：取適量(liang)PBS 重(zhong)懸細(xi)胞，用(yong)壹(yi)定(ding)功(gong)率的(de)超聲(sheng)波處(chu)理細(xi)胞懸(xuan)液，使(shi)細(xi)胞急(ji)劇震蕩(dang)破(po)裂。

ii 反復凍融(rong)：將(jiang)待破(po)碎(sui)的細(xi)胞在(zai)-20 ^oC 以下冰凍，室溫(wen)融(rong)解(jie)，反復3 次(ci)，使細(xi)胞溶(rong)脹(zhang)破(po)碎(sui)。

4）將(jiang)標本(ben)於2-8 ^oC 1500×g 離心10 分(fen)鐘，收(shou)集上清備(bei)用(yong)。

5. 細(xi)胞培(pei)養(yang)上清或(huo)其(qi)它生(sheng)物標本(ben)：

請(qing) 1000×g 離(li)心 20 分(fen)鐘，取(qu)上清即可(ke)檢測(ce)，或(huo)將(jiang)上清置(zhi)於-20^oC 或(huo)-80^oC 保(bao)存，但(dan)應(ying)避免反(fan)復凍融(rong)。

註(zhu)意(yi)：

1.         以上標本(ben)均(jun)需密(mi)封保(bao)存，4^oC保存應(ying)小於1周，-20^oC不(bu)應(ying)超過1個月(yue)，-80^oC不(bu)應(ying)超過2個月(yue)。

2.         標本(ben)使(shi)用(yong)前(qian)應(ying)緩慢均(jun)衡至室溫(wen)，不(bu)應(ying)加熱(re)使之(zhi)融解(jie)。

3.         實驗前(qian)紅細(xi)胞裂(lie)解(jie)液必須用(yong)標準(zhun)品稀(xi)釋(shi)液稀(xi)釋(shi)。

馬(ma)轉(zhuan)化生(sheng)長因子(zi)β3(TGFβ3)ELISA試劑盒試劑準備(bei)

1.         使用(yong)前(qian)將(jiang)所有的試劑和標本(ben)緩(huan)慢均(jun)衡至室溫(wen)(18-25oC)，試劑不(bu)能(neng)直接(jie)在(zai)37oC溶(rong)解(jie)。

2.         標準(zhun)品(凍幹(gan)品)：每(mei)瓶標準(zhun)品加(jia)入標準(zhun)品稀(xi)釋(shi)液1mL，蓋好(hao)後(hou)室溫(wen)靜(jing)置(zhi)大(da)約10分(fen)鐘，同(tong)時(shi)反復顛(dian)倒/搓(cuo)動以助(zhu)溶(rong)解(jie)，其(qi)濃度為8000 pg/mL。準(zhun)備7個稀(xi)釋(shi)標準(zhun)品的(de)EP管，每個EP管中(zhong)加入150μL的標準(zhun)品稀(xi)釋(shi)液，如(ru)圖所示依(yi)次倍(bei)比(bi)稀(xi)釋(shi)成不(bu)同(tong)的梯(ti)度， 標準(zhun)品稀(xi)釋(shi)液(0pg/mL)直(zhi)接(jie)作(zuo)為空(kong)白孔(kong)。為保(bao)證實(shi)驗結果(guo)有效性(xing)，每(mei)次實驗請(qing)使(shi)用(yong)新(xin)的標準(zhun)品溶(rong)液。

3.         濃洗(xi)滌(di)液：用(yong)580mL蒸(zheng)餾(liu)水或(huo)去(qu)離子(zi)水將(jiang)20mL濃洗(xi)滌(di)液稀(xi)釋(shi)至600mL，進行(xing)30倍(bei)稀(xi)釋(shi)。

標本(ben)處(chu)理

1.         本公司(si)只對試劑盒本(ben)身負責(ze)，不(bu)對(dui)因使(shi)用(yong)該試劑盒所(suo)造(zao)成的(de)樣本(ben)消(xiao)耗(hao)負責(ze)，請(qing)使(shi)用(yong)者(zhe)使(shi)用(yong)前(qian)充(chong)分(fen)考(kao)慮到(dao)樣本(ben)的(de)可(ke)能使(shi)用(yong)量(liang)，預留(liu)充足(zu)的(de)樣本(ben)。

2.         實驗前(qian)應(ying)預測(ce)標本(ben)含(han)量(liang)，如(ru)果標本(ben)濃(nong)度過高，應(ying)對標本(ben)進(jin)行稀(xi)釋(shi)，使稀(xi)釋(shi)後的標本(ben)符(fu)合(he)試劑盒的(de)檢(jian)測範(fan)圍(wei)，計算(suan)時(shi)再乘(cheng)以相應(ying)的稀(xi)釋(shi)倍數。

3.         若所(suo)檢(jian)樣本(ben)不(bu)包(bao)含(han)在(zai)說(shuo)明書所(suo)列(lie)樣本(ben)之(zhi)中(zhong)，建議(yi)進(jin)行預實(shi)驗驗證其(qi)有效性(xing)，並註(zhu)意(yi)留(liu)存樣本(ben)。

4.         使用(yong)化學裂解(jie)液制備的(de)組(zu)織勻(yun)漿(jiang)或(huo)細(xi)胞提取(qu)液可(ke)能會由於某些化學物質(zhi)的引入導致  ELISA實驗結果(guo)偏(pian)差。

5.         若樣本(ben)為細(xi)胞培(pei)養(yang)上清，因該類樣本(ben)幹(gan)擾(rao)因素(su) 較(jiao)多(duo)，如(ru)：細(xi)胞狀態(tai)、細(xi)胞數量(liang)、采(cai)樣時(shi)間(jian)等，所以可(ke)能存在(zai)檢測(ce)不(bu)出(chu)的情(qing)況。

6.         某些(xie)天(tian)然蛋(dan)白或(huo)重(zhong)組(zu)蛋(dan)白，包(bao)括原(yuan)核(he)及(ji)真(zhen)核(he)重(zhong)組(zu)蛋(dan)白，可(ke)能因為與本產(chan)品所(suo)使用(yong)的(de)檢測(ce)抗體(ti)及捕(bu)獲(huo)抗體(ti)不(bu)匹配(pei)，而(er)不(bu)被(bei)檢測出(chu)。

7.         建議(yi)使(shi)用(yong)新(xin)鮮樣本(ben)，保(bao)存時(shi)間(jian)過長可(ke)能會存在(zai)蛋(dan)白降(jiang)解(jie)或(huo)變性(xing)導致實驗結果(guo)偏(pian)差。

馬(ma)轉(zhuan)化生(sheng)長因子(zi)β3(TGFβ3)ELISA試劑盒操(cao)作(zuo)步驟(zhou)

1.         加樣：分(fen)別(bie)設(she)空(kong)白孔(kong)（空(kong)白對(dui)照孔(kong)不(bu)加(jia)樣品及(ji)酶標試劑，其(qi)余各步操作相同）、標準(zhun)孔(kong)、待測樣品孔(kong)。在(zai)酶標包(bao)被(bei)板(ban)上標準(zhun)品準(zhun)確加樣50μl，待(dai)測(ce)樣品孔(kong)中(zhong)先(xian)加樣品稀(xi)釋(shi)液40μl，然後再(zai)加待(dai)測(ce)樣品10μl（樣品*終(zhong)稀(xi)釋(shi)度為5倍(bei)）。加樣將(jiang)樣品加(jia)於酶標板(ban)孔(kong)底部，盡(jin)量(liang)不(bu)觸及(ji)孔壁，輕(qing)輕(qing)晃(huang)動混勻(yun)。

2.         溫育(yu)：用(yong)封板(ban)膜(mo)封板(ban)後(hou)置(zhi)37℃溫(wen)育(yu)30分(fen)鐘。  

3.         配液：將(jiang)20倍濃(nong)縮(suo)洗(xi)滌液用(yong)蒸(zheng)餾(liu)水20倍稀(xi)釋(shi)後備用(yong)

4.         洗滌(di)：小心揭(jie)掉(diao)封板(ban)膜(mo)，棄(qi)去液體(ti)，甩(shuai)幹(gan)，每(mei)孔(kong)加滿洗滌液，靜(jing)置(zhi)30秒後棄(qi)去，如此重復5次(ci)，拍(pai)幹(gan)。

5.         加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空(kong)白孔(kong)除外(wai)。

6.         溫育(yu)：操(cao)作同3。

7.         洗滌(di)：操(cao)作(zuo)同5。

8.         顯(xian)色：每孔(kong)先(xian)加入顯(xian)色劑A50μl，再加(jia)入顯(xian)色劑B50μl，輕(qing)輕(qing)震(zhen)蕩(dang)混勻(yun)，37℃避光顯(xian)色15分(fen)鐘.

9.         終止(zhi)：每孔加(jia)終(zhong)止(zhi)液50μl，終(zhong)止(zhi)反應(ying)（此時(shi)藍色立轉(zhuan)黃(huang)色）。

10.     測定(ding)：以空(kong)白空(kong)調零，450nm波(bo)長(chang)依(yi)序測(ce)量(liang)各(ge)孔的吸光度（OD值(zhi)）。 測(ce)定(ding)應(ying)在(zai)加終(zhong)止(zhi)液後(hou)15分(fen)鐘以內(nei)進行(xing)。

註(zhu)意(yi)：

1.         試劑準備(bei)：準備(bei)壹(yi)次實(shi)驗所需(xu)要的酶標條(tiao)，其(qi)它的可(ke)從(cong)微孔板(ban)上拆(chai)下，密封，按(an)照說(shuo)明書要求(qiu)保存，以備(bei)下次使(shi)用(yong)。

2.         加樣：實驗操作(zuo)中(zhong)請(qing)使(shi)用(yong)壹(yi)次性(xing)的(de)吸頭，避免交(jiao)叉(cha)汙染(ran)。加樣時(shi)註(zhu)意(yi)不(bu)要有氣泡，將(jiang)樣品加(jia)於酶標板(ban)底部，盡(jin)量(liang)不(bu)觸及(ji)孔壁，輕(qing)輕(qing)晃(huang)動混勻(yun)。加樣或(huo)加(jia)試劑時(shi)，**個孔與*後壹(yi)個孔加(jia)樣之(zhi)間(jian)的時(shi)間(jian)間(jian)隔如(ru)果太大(da)，將(jiang)會導致不(bu)同(tong)的“預溫(wen)育(yu)”時(shi)間(jian)，從(cong)而(er)明(ming)顯(xian)地(di)影響(xiang)到測(ce)量(liang)值(zhi)的(de)準(zhun)確(que)性(xing)及(ji)重復性(xing)。因此，壹(yi)次加(jia)樣時(shi)間(jian)(包括標準(zhun)品及(ji)所有樣品)*好(hao)控制在(zai)10分(fen)鐘內(nei)。推(tui)薦(jian)設(she)置(zhi)復孔(kong)進行(xing)實(shi)驗。

3.          溫育(yu)：為防(fang)止(zhi)樣品蒸(zheng)發(fa)，實驗時(shi)請(qing)將(jiang)加上蓋或(huo)覆(fu)膜(mo)的(de)酶標板(ban)置(zhi)於濕盒內(nei)，以避免液體(ti)蒸(zheng)發(fa)，洗板(ban)後(hou)應(ying)盡(jin)快進行(xing)下步操作，任何時(shi)侯都應(ying)避免酶標板(ban)處(chu)於幹(gan)燥(zao)狀態(tai)，同時(shi)應(ying)嚴格遵守(shou)給(gei)定(ding)的(de)溫(wen)育(yu)時(shi)間(jian)和溫(wen)度。

4.         洗滌(di)：充分(fen)的洗(xi)滌非常重要，在(zai)每次(ci)洗滌(di)過程中(zhong)，都要將(jiang)洗滌(di)液完(wan)全甩(shuai)幹(gan)。洗(xi)滌(di)過程中(zhong)反應(ying)孔中(zhong)殘留(liu)的洗(xi)滌(di)液應(ying)在(zai)濾紙上拍(pai)幹(gan)，勿(wu)將(jiang)濾紙直接(jie)放(fang)入反應(ying)孔中(zhong)吸水，同時(shi)要消(xiao)除板(ban)底殘留(liu)的液體(ti)和手(shou)指印，避免影響(xiang)*後的(de)酶標儀(yi)讀數。如果有自(zi)動洗(xi)板(ban)機，應(ying)在(zai)熟(shu)練(lian)使用(yong)後(hou)再用(yong)到(dao)正式實(shi) 驗過程中(zhong)。

5.         反應(ying)時(shi)間(jian)的控制：加入底物後(hou)請(qing)定(ding)時(shi)觀(guan)察反(fan)應(ying)孔的顏(yan)色變化(比(bi)如(ru)，每隔(ge)10分(fen)鐘觀(guan)察壹(yi)次)，如(ru)顏(yan)色較(jiao)深(shen)，請(qing)提前(qian)加(jia)入終止(zhi)液終(zhong)止(zhi)反應(ying)，避免反(fan)應(ying)過強從(cong)而(er)影響(xiang)酶標儀(yi)光密(mi)度讀數。

6.         底物：底物請(qing)避光保(bao)存，在(zai)儲存和溫(wen)育(yu)時(shi)避免強(qiang)光直(zhi)接(jie)照射。

7.         如果(guo)實(shi)驗室內(nei)濕度低於60%，推(tui)薦(jian)使用(yong)加(jia)濕器提高濕度水平。

 實驗流程(cheng)

1.         實驗前(qian)標準(zhun)品、試劑及樣本(ben)的(de)準(zhun)備；

2.         加樣（標準(zhun)品及(ji)樣本(ben)）50μL，37℃孵(fu)育(yu)30分(fen)鐘；

3.         洗板(ban)5次(ci)，加(jia)酶標試劑50ul，37℃孵(fu)育(yu)半(ban)小時(shi)；

4.         洗板(ban)5次(ci)；加(jia)入顯(xian)色液A，B各(ge)50ul,37℃孵(fu)育(yu)顯(xian)色15分(fen)鐘

5.         加終(zhong)止(zhi)液50μL，立(li)即450nm讀數。

6.    計算(suan)

馬(ma)轉(zhuan)化生(sheng)長因子(zi)β3(TGFβ3)ELISA試劑盒計算(suan)

各標準(zhun)品及(ji)樣本(ben)O.D.值(zhi)扣除空(kong)白孔(kong)O.D.值(zhi)後(hou)作(zuo)圖(七點(dian)圖)，如設(she)置(zhi)復孔(kong)，則應(ying)取其(qi)平均(jun)值(zhi)計算(suan)。以標準(zhun)品的(de)濃度為縱(zong)坐標(或(huo)對(dui)數坐標)，O.D.值(zhi)為橫(heng)坐標(或(huo)對(dui)數坐標），繪(hui)出(chu)標準(zhun)曲(qu)線(*佳方(fang)程式應(ying)依(yi)回歸方程計算(suan)的R2值(zhi)來(lai)定(ding)，以R2值(zhi)越(yue)趨近於1為好(hao))。推(tui)薦(jian)使用(yong)專(zhuan)業制作曲(qu)線軟件(jian)進行分(fen)析，如(ru)curve expert 1.30，根(gen)據樣品O.D.值(zhi)，由(you)標準(zhun)曲(qu)線查(zha)出(chu)相應(ying)的濃度，乘(cheng)以稀(xi)釋(shi)倍數；或(huo)用(yong)標準(zhun)物的(de)濃(nong)度與O.D.值(zhi)計算(suan)出(chu)標準(zhun)曲(qu)線的回歸方程式，將(jiang)樣品的(de)O.D.值(zhi)代(dai)入方程式，計算(suan)出(chu)樣品濃(nong)度，再乘(cheng)以稀(xi)釋(shi)倍數，即為樣品的(de)實際(ji)濃(nong)度。

 特異(yi)性(xing)

本試劑盒用(yong)於檢測馬(ma)轉(zhuan)化生(sheng)長因子(zi)β3(TGFβ3)，經(jing)檢測(ce)與其(qi)它相似(si)物質(zhi)無(wu)明顯(xian)交(jiao)叉(cha)反應(ying)。

由於受(shou)到(dao)技(ji)術(shu)及(ji)樣本(ben)來(lai)源(yuan)的限制，不(bu)可(ke)能完(wan)成對所有相關或(huo)相似(si)物質(zhi)交(jiao)叉(cha)反應(ying)檢測，因此本試劑盒有可(ke)能與未(wei)經(jing)檢測(ce)的(de)其(qi)它物質(zhi)有交(jiao)叉(cha)反應(ying)。

 精密(mi)度

精密(mi)度用(yong)樣品測(ce)定(ding)值(zhi)的(de)變異(yi)系數CV表示。CV(%) = SD/mean×100

批(pi)內(nei)差：取(qu)同批(pi)次試劑盒對(dui)低、中(zhong)、高值(zhi)定(ding)值(zhi)樣本(ben)進(jin)行(xing)定(ding)量(liang)檢(jian)測,每份(fen)樣本(ben)連(lian)續(xu)測定(ding)20 次(ci)，分(fen)別(bie)計算(suan)不(bu)同(tong)濃度樣本(ben)的(de)平均(jun)值(zhi)及(ji)SD值(zhi)。

批(pi)間(jian)差：選(xuan)取(qu)3個不(bu)同(tong)批(pi)次的(de)試劑盒分(fen)別(bie)對低、中(zhong)、高值(zhi)定(ding)值(zhi)樣本(ben)進(jin)行(xing)定(ding)量(liang)測(ce)定(ding)，每(mei)個樣本(ben)使(shi)用(yong)同(tong)壹(yi)試劑盒重(zhong)復測(ce)定(ding)8次(ci)，分(fen)別(bie)計算(suan)不(bu)同(tong)濃度樣本(ben)的(de)平均(jun)值(zhi)及(ji)SD值(zhi)。

批(pi)內(nei)差： CV<10%

批(pi)間(jian)差： CV<12%

馬(ma)轉(zhuan)化生(sheng)長因子(zi)β3(TGFβ3)ELISA試劑盒穩(wen)定(ding)性(xing)

經(jing)測定(ding)，試劑盒在(zai)有效期(qi)內(nei)按推(tui)薦(jian)溫度保存，其(qi)活性(xing)降(jiang)低率小於5%。

為減(jian)小外(wai)部因素(su)對試劑盒破(po)壞(huai)前(qian)後(hou)檢測值(zhi)的(de)影響(xiang)，實驗室的(de)環(huan)境條(tiao)件(jian)需盡(jin)量(liang)保(bao)持壹(yi)致，尤其(qi)是(shi)實驗室內(nei)溫度、濕度及溫(wen)育(yu)條(tiao)件(jian)。其(qi)次由(you)同(tong)壹(yi)實驗員來(lai)進行操(cao)作可(ke)減少(shao)人(ren)為誤(wu)差(cha)。