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授(shou)權(quan)代(dai)理品(pin)牌(pai)
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ELISA試(shi)劑(ji)盒
- 農(nong)殘檢測試劑(ji)盒
- 馬ELISA試劑(ji)盒
- 牛(niu)ELISA試劑(ji)盒
- 魚(yu)ELISA試劑(ji)盒
- 人(ren)ELISA試劑(ji)盒/Human
- 小鼠(shu)ELISA試劑(ji)盒/Mouse
- 大(da)鼠(shu)ELISA試劑(ji)盒/Rat
- 羊ELISA試劑(ji)盒/Sheep
- 兔(tu)ELISA試劑(ji)盒/ Rabbi...
- 豬(zhu)ELISA試(shi)劑(ji)盒/Porcin...
- 豚鼠(shu)ELISA試劑(ji)盒/Guine...
- 狗ELISA試劑(ji)盒/ Canin...
- 雞(ji)ELISA試劑(ji)盒/Chicke...
- 鴨(ya)ELISA試(shi)劑(ji)盒
- 植(zhi)物ELISA試(shi)劑(ji)盒
- 猴(hou)ELISA試(shi)劑(ji)盒/ Monke...
- 其(qi)他ELISA試劑(ji)盒
- 抗(kang)體
- 蛋(dan)白
- CLIA試(shi)劑(ji)盒
- 細胞生物學(xue)
- 分(fen)子生(sheng)物學(xue)/常用試(shi)劑(ji)
96T 僅(jin)供體外(wai)研(yan)究(jiu)使用,不(bu)用於臨床診(zhen)斷(duan)!
馬組織金(jin)屬蛋白酶抑制(zhi)因子(zi)1(TIMP1)ELISA試(shi)劑(ji)盒
本(ben)試劑(ji)盒運用雙(shuang)抗體夾心ELISA法定(ding)量測定馬血清(qing)、血漿(jiang)、組(zu)織勻(yun)漿(jiang)、細胞裂解(jie)液(ye)、細胞培養上清(qing)液(ye)和其(qi)他生物液(ye)體中(zhong)馬組織金(jin)屬蛋白酶抑制(zhi)因子(zi)1(TIMP1)含量。
檢測範(fan)圍(wei)
62.5-4000pg/mL
*低(di)檢測限(xian)
25.3pg/mL
實(shi)驗原(yuan)理
將(jiang)馬組織金(jin)屬蛋白酶抑制(zhi)因子(zi)1(TIMP1)抗(kang)體包(bao)被(bei)於96孔(kong)微孔(kong)板(ban)中(zhong),制成(cheng)固(gu)相載(zai)體,向(xiang)微孔(kong)中分(fen)別(bie)加入標(biao)準品(pin)或(huo)標(biao)本(ben),其(qi)中(zhong)的馬組織金(jin)屬蛋白酶抑制(zhi)因子(zi)1(TIMP1)與(yu)連接(jie)於固(gu)相載(zai)體上的抗(kang)體結(jie)合,然(ran)後(hou)加入生(sheng)物(wu)素(su)化(hua)的馬組織金(jin)屬蛋白酶抑制(zhi)因子(zi)1(TIMP1)抗(kang)體,將(jiang)未結(jie)合的生(sheng)物(wu)素化(hua)抗體洗凈(jing)後,加入HRP標(biao)記(ji)的親和素(su),再次(ci)徹(che)底洗滌(di)後加入TMB底物(wu)顯(xian)色(se)。TMB在過氧化(hua)物酶的催化(hua)下轉化(hua)成藍色(se),並(bing)在(zai)酸(suan)的作(zuo)用下轉化(hua)成*終(zhong)的黃(huang)色(se)。顏色(se)的深(shen)淺(qian)和樣(yang)品(pin)中(zhong)的馬組織金(jin)屬蛋白酶抑制(zhi)因子(zi)1(TIMP1)呈正相關。用酶標儀在450nm波(bo)長下測定吸(xi)光(guang)度(O.D.值(zhi)),計(ji)算(suan)樣品(pin)濃(nong)度。
試(shi)劑(ji)盒內容(rong)
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試(shi)劑(ji)名稱(cheng) |
數(shu)量 |
試(shi)劑(ji)名稱(cheng) |
數(shu)量 |
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96孔(kong)板(ban)(預(yu)包(bao)被(bei)) |
1 |
96孔(kong)板(ban)覆(fu)膜 |
2 |
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標(biao)準品(pin) |
0.5ml×1 |
標(biao)準品(pin)稀(xi)釋液(ye) |
1.5ml×1瓶(ping) |
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顯(xian)色(se)劑(ji)A液(ye) |
6ml×1瓶(ping) |
樣(yang)品(pin)稀(xi)釋液(ye) |
6ml×1瓶(ping) |
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顯(xian)色(se)劑(ji)B液(ye) |
6ml×1瓶(ping) |
終(zhong)止液(ye) |
6ml×1瓶(ping) |
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酶標試(shi)劑(ji) |
6ml×1瓶(ping) |
密封袋(dai) |
1 |
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濃(nong)洗滌(di)液(ye)(30×) |
1×20mL |
使用說明書 |
1 |
馬組織金(jin)屬蛋白酶抑制(zhi)因子(zi)1(TIMP1)ELISA試(shi)劑(ji)盒需(xu)自(zi)備的設(she)備及(ji)試劑(ji)
1. 450±10nm濾(lv)光(guang)片的酶標儀(建議儀器(qi)使用前(qian)提(ti)前(qian)預(yu)熱(re))
2. 單(dan)道或多道微量加液(ye)器(qi)及(ji)吸頭
3. 稀(xi)釋樣品(pin)的EP管
4. 蒸(zheng)餾水(shui)或(huo)去(qu)離子(zi)水(shui)
5. 吸(xi)水(shui)紙(zhi)
6. 盛(sheng)放(fang)洗液(ye)的容(rong)器(qi)
試(shi)劑(ji)盒的儲存及(ji)有效(xiao)期
1. 未(wei)開封的試(shi)劑(ji)盒:所(suo)有試劑(ji)均按(an)試劑(ji)瓶(ping)標(biao)簽(qian)上所(suo)示(shi)保(bao)存。請註意,收(shou)到(dao)試劑(ji)盒後(hou)請盡快(kuai)將(jiang)TMB 洗滌(di)液(ye),終止液(ye)保(bao)存於4℃,其(qi)他試劑(ji)保(bao)存於-20℃。
2. 使用後(hou)的試(shi)劑(ji)盒:剩(sheng)余試(shi)劑(ji)仍需(xu)按(an)照(zhao)試劑(ji)瓶(ping)標(biao)簽(qian)所示(shi)的溫(wen)度(du)保(bao)存,開(kai)封後(hou)的酶標板(ban)要(yao)加幹(gan)燥(zao)劑(ji)後密封保(bao)存於-20℃,避(bi)免(mian)潮濕。
註(zhu)意:
試(shi)劑(ji)盒內酶標條可(ke)拆卸,按(an)實驗需(xu)求可(ke)分(fen)多次(ci)使用;使用後(hou)的剩(sheng)余試(shi)劑(ji)盒建(jian)議在**實驗後(hou) 1個(ge)月(yue)內使用完(wan)畢(bi)。產(chan)品(pin)過(guo)期時(shi)間(jian)以(yi)盒子(zi)上的標(biao)簽(qian)為(wei)準,保(bao)質期內所有組(zu)分(fen)都(dou)確(que)保(bao)是(shi)穩(wen)定的。
馬組織金(jin)屬蛋白酶抑制(zhi)因子(zi)1(TIMP1)ELISA試(shi)劑(ji)盒標(biao)本的采(cai)集(ji)與保(bao)存
1. 血清(qing):
將(jiang)收集於血清(qing)分(fen)離管的全(quan)血標本(ben)在室(shi)溫(wen)放(fang)置(zhi) 2 小時(shi)或(huo) 4oC 過(guo)夜,然(ran)後(hou) 1000×g 離心 20 分(fen)鐘,取上清(qing)即(ji)可(ke),或將上清(qing)置(zhi)於-20oC 或(huo)-80oC 保(bao)存,但(dan)應避(bi)免(mian)反復凍(dong)融(rong)。
2. 血漿(jiang):
用 EDTA 或(huo)肝(gan)素作(zuo)為(wei)抗凝劑(ji)采集標(biao)本,並(bing)將(jiang)標(biao)本(ben)在采集後的 30 分(fen)鐘內於 2-8oC 1000×g 離(li)心 15 分(fen)鐘,取上清(qing)即(ji)可(ke)檢測,或將(jiang)上清(qing)置(zhi)於-20oC 或(huo)-80oC 保(bao)存,但(dan)應避(bi)免(mian)反復凍(dong)融(rong)。
3. 組(zu)織勻(yun)漿(jiang):
1) 取適量組(zu)織塊(kuai),於預(yu)冷PBS(0.01mol/L, pH 7.0-7.2)中清(qing)洗去(qu)除(chu)血液(ye),稱(cheng)重(zhong)後(hou)備用(組(zu)織塊(kuai)較大需(xu)先剪(jian)碎(sui)後(hou)再勻(yun)漿(jiang));
2) 可(ke)同時(shi)選(xuan)用多種(zhong)勻(yun)漿(jiang)方(fang)法達(da)到(dao)較好的破(po)碎(sui)效(xiao)果(guo):首先將(jiang)組(zu)織塊(kuai)移入玻璃勻漿(jiang)器(qi),加入5-10mL 預(yu)冷PBS 進行充分(fen)研(yan)磨,該過(guo)程(cheng)需(xu)在(zai)冰(bing)上進行(有條件(jian)實驗室(shi)可(ke)選用機器(qi)勻(yun)漿(jiang));得(de)到(dao)的勻(yun)漿(jiang)液(ye)可(ke)再利(li)用超(chao)聲破碎或反復凍(dong)融 進壹步處(chu)理(超(chao)聲破碎過程中註(zhu)意冰(bing)浴(yu)降溫;反(fan)復凍融法可(ke)重復2 次)。
3) 將(jiang)制備好(hao)的勻(yun)漿(jiang)液(ye)於5000×g 離(li)心5 分(fen)鐘,留(liu)取上清(qing)即(ji)可(ke)檢測。
4. 細胞裂解(jie)液(ye):
1)貼(tie)壁(bi)細胞需(xu)要(yao)先用胰(yi)酶消化(hua),離心收集(ji)細胞(懸浮(fu)細胞可(ke)直(zhi)接離(li)心收集(ji));
2)將(jiang)收集到(dao)的細胞用冷PBS 洗3 次(ci);
3)物(wu)理方(fang)法裂(lie)解(jie)細胞(可(ke)先超(chao)聲破碎細胞,再反(fan)復(fu)凍融(rong)):
i 超(chao)聲破碎:取適量PBS 重(zhong)懸(xuan)細胞,用壹定功(gong)率的超(chao)聲波(bo)處(chu)理細胞懸液(ye),使細胞急劇震蕩破裂(lie)。
ii 反(fan)復凍融(rong):將(jiang)待破碎的細胞在-20 oC 以(yi)下冰(bing)凍(dong),室(shi)溫(wen)融解(jie),反復(fu)3 次,使細胞溶(rong)脹破(po)碎(sui)。
4)將(jiang)標本於2-8 oC 1500×g 離(li)心10 分(fen)鐘,收集上清(qing)備用。
5. 細胞培養上清(qing)或(huo)其(qi)它生(sheng)物(wu)標本(ben):
請 1000×g 離心 20 分(fen)鐘,取上清(qing)即(ji)可(ke)檢測,或將(jiang)上清(qing)置(zhi)於-20oC 或(huo)-80oC 保(bao)存,但(dan)應避(bi)免(mian)反復凍(dong)融(rong)。
註(zhu)意:
1. 以(yi)上標(biao)本均需(xu)密封保(bao)存,4oC保(bao)存應(ying)小於1周(zhou),-20oC不(bu)應超(chao)過(guo)1個(ge)月(yue),-80oC不應(ying)超(chao)過(guo)2個(ge)月(yue)。
2. 標(biao)本使用前(qian)應(ying)緩(huan)慢(man)均(jun)衡(heng)至(zhi)室(shi)溫(wen),不應加熱(re)使之(zhi)融解(jie)。
3. 實(shi)驗前(qian)紅(hong)細胞裂解(jie)液(ye)必須(xu)用標(biao)準品(pin)稀(xi)釋液(ye)稀釋。
馬組織金(jin)屬蛋白酶抑制(zhi)因子(zi)1(TIMP1)ELISA試(shi)劑(ji)盒試(shi)劑(ji)準備
1. 使用前(qian)將(jiang)所(suo)有(you)的試(shi)劑(ji)和標(biao)本緩慢(man)均衡(heng)至(zhi)室(shi)溫(wen)(18-25oC),試劑(ji)不能直(zhi)接在(zai)37oC溶(rong)解(jie)。
2. 標(biao)準品(pin)(凍(dong)幹(gan)品(pin)):每(mei)瓶(ping)標(biao)準品(pin)加入標(biao)準品(pin)稀(xi)釋液(ye)1mL,蓋(gai)好(hao)後(hou)室(shi)溫(wen)靜置(zhi)大約(yue)10分(fen)鐘,同時(shi)反(fan)復(fu)顛(dian)倒/搓(cuo)動以助(zhu)溶(rong)解(jie),其(qi)濃(nong)度為(wei)4000pg/mL。準備7個(ge)稀(xi)釋標準品(pin)的EP管,每(mei)個(ge)EP管中(zhong)加入150μL的標(biao)準品(pin)稀(xi)釋液(ye),如圖所示(shi)依次(ci)倍比稀釋成不(bu)同的梯(ti)度(du), 標準品(pin)稀(xi)釋液(ye)(0pg/mL)直(zhi)接作(zuo)為(wei)空白孔(kong)。為(wei)保(bao)證(zheng)實驗結(jie)果有(you)效(xiao)性(xing),每(mei)次實驗請使用新(xin)的標(biao)準品(pin)溶(rong)液(ye)。
3. 濃(nong)洗滌(di)液(ye):用580mL蒸(zheng)餾水(shui)或(huo)去(qu)離子(zi)水(shui)將(jiang)20mL濃(nong)洗滌(di)液(ye)稀釋至(zhi)600mL,進行30倍稀釋。
標(biao)本處理
1. 本(ben)公司只(zhi)對試(shi)劑(ji)盒本(ben)身(shen)負(fu)責,不對因使用該試(shi)劑(ji)盒所(suo)造成(cheng)的樣(yang)本(ben)消耗(hao)負(fu)責,請使用者(zhe)使用前(qian)充分(fen)考(kao)慮到(dao)樣本(ben)的可(ke)能使用量(liang),預(yu)留(liu)充足(zu)的樣(yang)本(ben)。
2. 實(shi)驗前(qian)應(ying)預(yu)測標本(ben)含量,如果標本濃(nong)度過(guo)高(gao),應對標本進行稀釋,使稀釋後的標(biao)本(ben)符合試劑(ji)盒的檢測範(fan)圍(wei),計(ji)算(suan)時(shi)再乘(cheng)以(yi)相應(ying)的稀(xi)釋倍數(shu)。
3. 若(ruo)所(suo)檢樣本(ben)不包(bao)含在說明書所列(lie)樣(yang)本(ben)之(zhi)中,建議進行預(yu)實(shi)驗驗證(zheng)其(qi)有(you)效(xiao)性(xing),並(bing)註(zhu)意留(liu)存(cun)樣(yang)本(ben)。
4. 使用化(hua)學(xue)裂解(jie)液(ye)制備的組(zu)織勻(yun)漿(jiang)或(huo)細胞提(ti)取液(ye)可(ke)能會(hui)由(you)於某些化(hua)學(xue)物質的引(yin)入導(dao)致(zhi) ELISA實(shi)驗結(jie)果偏(pian)差。
5. 若(ruo)樣(yang)本(ben)為(wei)細胞培養上清(qing),因(yin)該類(lei)樣(yang)本(ben)幹(gan)擾因素(su) 較多,如:細胞狀態、細胞數量、采(cai)樣(yang)時(shi)間(jian)等(deng),所以(yi)可(ke)能存在檢測不出的情(qing)況。
6. 某些天然(ran)蛋(dan)白或(huo)重(zhong)組蛋白,包(bao)括(kuo)原(yuan)核(he)及(ji)真核(he)重組(zu)蛋白,可(ke)能因為(wei)與本產(chan)品(pin)所(suo)使用的檢測抗體及(ji)捕獲(huo)抗(kang)體不(bu)匹配,而(er)不被(bei)檢測出。
7. 建(jian)議使用新(xin)鮮樣(yang)本(ben),保(bao)存時(shi)間(jian)過(guo)長可(ke)能會(hui)存在蛋白降解(jie)或變(bian)性(xing)導(dao)致(zhi)實(shi)驗結(jie)果偏(pian)差。
馬組織金(jin)屬蛋白酶抑制(zhi)因子(zi)1(TIMP1)ELISA試(shi)劑(ji)盒操作(zuo)步(bu)驟(zhou)
1. 加樣:分(fen)別(bie)設(she)空白孔(kong)(空白對(dui)照(zhao)孔(kong)不加樣品(pin)及(ji)酶標試(shi)劑(ji),其(qi)余各(ge)步操作(zuo)相同(tong))、標(biao)準孔(kong)、待測樣品(pin)孔(kong)。在酶標包(bao)被(bei)板(ban)上標(biao)準品(pin)準確加樣50μl,待(dai)測樣品(pin)孔(kong)中先加樣品(pin)稀(xi)釋液(ye)40μl,然(ran)後(hou)再加待測樣品(pin)10μl(樣(yang)品(pin)*終(zhong)稀(xi)釋度為(wei)5倍)。加樣將(jiang)樣品(pin)加於酶標板(ban)孔(kong)底部,盡(jin)量(liang)不(bu)觸及(ji)孔(kong)壁(bi),輕輕(qing)晃(huang)動混(hun)勻。
2. 溫(wen)育:用封板(ban)膜封板(ban)後(hou)置(zhi)37℃溫育30分(fen)鐘。
3. 配(pei)液(ye):將20倍(bei)濃(nong)縮洗滌(di)液(ye)用蒸(zheng)餾(liu)水(shui)20倍(bei)稀(xi)釋後備用
4. 洗滌(di):小心揭(jie)掉封板(ban)膜,棄去液(ye)體,甩幹(gan),每(mei)孔(kong)加滿洗滌(di)液(ye),靜置(zhi)30秒(miao)後棄(qi)去(qu),如此重復(fu)5次,拍(pai)幹(gan)。
5. 加酶:每(mei)孔(kong)加入酶標試(shi)劑(ji)50μl,空白孔(kong)除(chu)外(wai)。
6. 溫(wen)育:操作(zuo)同(tong)3。
7. 洗滌(di):操作(zuo)同(tong)5。
8. 顯(xian)色(se):每(mei)孔(kong)先加入顯(xian)色(se)劑(ji)A50μl,再加入顯(xian)色(se)劑(ji)B50μl,輕輕震蕩混(hun)勻,37℃避(bi)光(guang)顯(xian)色(se)15分(fen)鐘.
9. 終(zhong)止:每(mei)孔(kong)加終止液(ye)50μl,終止反應(ying)(此時(shi)藍色(se)立轉黃(huang)色(se))。
10. 測定:以(yi)空(kong)白空(kong)調(tiao)零(ling),450nm波(bo)長依序(xu)測量各(ge)孔(kong)的吸(xi)光(guang)度(OD值(zhi))。 測定應(ying)在(zai)加終止液(ye)後15分(fen)鐘以內進行。
註(zhu)意:
1. 試(shi)劑(ji)準備:準備壹次實(shi)驗所(suo)需(xu)要(yao)的酶標條,其(qi)它的可(ke)從(cong)微孔(kong)板(ban)上拆(chai)下,密封,按(an)照(zhao)說明書要求保(bao)存,以(yi)備下次使用。
2. 加樣:實(shi)驗操作(zuo)中(zhong)請使用壹次性(xing)的吸(xi)頭,避(bi)免(mian)交叉汙(wu)染。加樣時(shi)註(zhu)意不(bu)要有(you)氣(qi)泡,將樣(yang)品(pin)加於酶標板(ban)底部,盡(jin)量(liang)不(bu)觸及(ji)孔(kong)壁(bi),輕輕(qing)晃(huang)動混(hun)勻。加樣或(huo)加試劑(ji)時(shi),**個(ge)孔(kong)與*後(hou)壹個(ge)孔(kong)加樣之(zhi)間的時(shi)間(jian)間(jian)隔如果太大,將會(hui)導(dao)致(zhi)不(bu)同(tong)的“預(yu)溫(wen)育”時(shi)間(jian),從(cong)而(er)明顯(xian)地(di)影響(xiang)到(dao)測量值(zhi)的準確性(xing)及(ji)重復性(xing)。因(yin)此,壹次加樣時(shi)間(jian)(包(bao)括(kuo)標(biao)準品(pin)及(ji)所有樣品(pin))*好(hao)控(kong)制(zhi)在(zai)10分(fen)鐘內。推薦(jian)設(she)置(zhi)復孔(kong)進行實驗。
3. 溫(wen)育:為(wei)防止樣品(pin)蒸(zheng)發(fa),實(shi)驗時(shi)請將加上蓋(gai)或(huo)覆(fu)膜的酶標板(ban)置(zhi)於濕(shi)盒內,以避(bi)免(mian)液(ye)體蒸(zheng)發,洗板(ban)後(hou)應盡(jin)快(kuai)進行下步操作(zuo),任(ren)何時(shi)侯都(dou)應(ying)避(bi)免(mian)酶標板(ban)處(chu)於幹(gan)燥(zao)狀態,同時(shi)應(ying)嚴(yan)格(ge)遵(zun)守給(gei)定(ding)的溫(wen)育時(shi)間(jian)和溫(wen)度。
4. 洗滌(di):充分(fen)的洗滌(di)非(fei)常重(zhong)要(yao),在每(mei)次洗滌(di)過程(cheng)中,都(dou)要(yao)將(jiang)洗滌(di)液(ye)完(wan)全(quan)甩幹(gan)。洗滌(di)過程(cheng)中反應孔(kong)中殘(can)留(liu)的洗滌(di)液(ye)應在(zai)濾紙上拍(pai)幹(gan),勿(wu)將(jiang)濾(lv)紙(zhi)直(zhi)接放(fang)入反(fan)應(ying)孔(kong)中吸(xi)水(shui),同(tong)時(shi)要(yao)消(xiao)除(chu)板(ban)底殘(can)留(liu)的液(ye)體和手(shou)指印(yin),避(bi)免(mian)影響*後(hou)的酶標儀讀數(shu)。如果有自(zi)動洗板(ban)機,應在熟練使用後(hou)再用到(dao)正式(shi)實 驗過(guo)程(cheng)中(zhong)。
5. 反(fan)應時(shi)間(jian)的控(kong)制(zhi):加入底物(wu)後(hou)請定時(shi)觀(guan)察(cha)反(fan)應孔(kong)的顏色(se)變化(hua)(比如,每(mei)隔10分(fen)鐘觀(guan)察(cha)壹次),如顏色(se)較深(shen),請提(ti)前(qian)加入終(zhong)止液(ye)終止反應(ying),避(bi)免(mian)反應過(guo)強(qiang)從(cong)而(er)影響酶標儀光(guang)密度(du)讀數(shu)。
6. 底物(wu):底物(wu)請避(bi)光(guang)保(bao)存,在(zai)儲存和溫(wen)育時(shi)避(bi)免(mian)強(qiang)光(guang)直(zhi)接照(zhao)射。
7. 如果實驗室(shi)內濕度低(di)於60%,推薦(jian)使用加濕器(qi)提(ti)高(gao)濕度水(shui)平(ping)。
實(shi)驗流(liu)程(cheng)
1. 實(shi)驗前(qian)標(biao)準品(pin)、試(shi)劑(ji)及(ji)樣本的準備;
2. 加樣(標(biao)準品(pin)及(ji)樣本)50μL,37℃孵(fu)育30分(fen)鐘;
3. 洗板(ban)5次(ci),加酶標試(shi)劑(ji)50ul,37℃孵(fu)育半小時(shi);
4. 洗板(ban)5次(ci);加入顯(xian)色(se)液(ye)A,B各50ul,37℃孵(fu)育顯(xian)色(se)15分(fen)鐘
5. 加終止液(ye)50μL,立即(ji)450nm讀數。
6. 計(ji)算(suan)
馬組織金(jin)屬蛋白酶抑制(zhi)因子(zi)1(TIMP1)ELISA試(shi)劑(ji)盒計(ji)算(suan)
各(ge)標準品(pin)及(ji)樣本O.D.值(zhi)扣(kou)除(chu)空(kong)白孔(kong)O.D.值(zhi)後(hou)作(zuo)圖(七(qi)點(dian)圖),如設(she)置(zhi)復孔(kong),則(ze)應(ying)取其(qi)平(ping)均(jun)值(zhi)計(ji)算(suan)。以標(biao)準品(pin)的濃(nong)度為(wei)縱坐標(或對數(shu)坐(zuo)標),O.D.值(zhi)為(wei)橫坐標(或對(dui)數(shu)坐(zuo)標),繪(hui)出標(biao)準曲(qu)線(xian)(*佳(jia)方(fang)程式(shi)應依回(hui)歸方(fang)程計(ji)算(suan)的R2值(zhi)來定,以(yi)R2值(zhi)越(yue)趨近(jin)於1為(wei)好)。推薦(jian)使用專業(ye)制(zhi)作(zuo)曲(qu)線(xian)軟(ruan)件(jian)進行分(fen)析(xi),如curve expert 1.30,根據(ju)樣(yang)品(pin)O.D.值(zhi),由(you)標(biao)準曲(qu)線(xian)查出相應(ying)的濃(nong)度,乘(cheng)以(yi)稀釋倍數(shu);或用標(biao)準物的濃(nong)度與(yu)O.D.值(zhi)計(ji)算(suan)出標(biao)準曲(qu)線(xian)的回(hui)歸方(fang)程式(shi),將樣(yang)品(pin)的O.D.值(zhi)代(dai)入方(fang)程式(shi),計算(suan)出樣(yang)品(pin)濃(nong)度,再乘(cheng)以(yi)稀釋倍數(shu),即為(wei)樣品(pin)的實(shi)際濃(nong)度。
特(te)異(yi)性(xing)
本(ben)試劑(ji)盒用於檢測馬組織金(jin)屬蛋白酶抑制(zhi)因子(zi)1(TIMP1),經(jing)檢測與其(qi)它相似物(wu)質無(wu)明顯(xian)交(jiao)叉反應。
由(you)於受(shou)到(dao)技(ji)術(shu)及(ji)樣本來源的限(xian)制,不可(ke)能完(wan)成(cheng)對(dui)所有(you)相關或(huo)相似物(wu)質交(jiao)叉(cha)反應(ying)檢測,因此本試(shi)劑(ji)盒有(you)可(ke)能與未經(jing)檢測的其(qi)它物(wu)質有(you)交(jiao)叉反(fan)應。
精(jing)密度(du)
精(jing)密度(du)用樣(yang)品(pin)測定值(zhi)的變(bian)異(yi)系數CV表示(shi)。CV(%) = SD/mean×100
批(pi)內差:取同(tong)批(pi)次試(shi)劑(ji)盒對(dui)低、中、高(gao)值(zhi)定(ding)值(zhi)樣(yang)本(ben)進行定量檢測,每(mei)份樣本連續(xu)測定20 次(ci),分(fen)別(bie)計(ji)算(suan)不同(tong)濃(nong)度樣(yang)本的平(ping)均(jun)值(zhi)及(ji)SD值(zhi)。
批(pi)間差:選取3個(ge)不(bu)同(tong)批(pi)次的試(shi)劑(ji)盒分(fen)別(bie)對(dui)低(di)、中(zhong)、高(gao)值(zhi)定(ding)值(zhi)樣(yang)本(ben)進行定量測定,每(mei)個(ge)樣(yang)本(ben)使用同(tong)壹試劑(ji)盒重(zhong)復測定8次(ci),分(fen)別(bie)計(ji)算(suan)不同(tong)濃(nong)度樣(yang)本的平(ping)均(jun)值(zhi)及(ji)SD值(zhi)。
批(pi)內差: CV<10%
批(pi)間差: CV<12%
馬組織金(jin)屬蛋白酶抑制(zhi)因子(zi)1(TIMP1)ELISA試(shi)劑(ji)盒穩(wen)定性(xing)
經(jing)測定,試(shi)劑(ji)盒在(zai)有效(xiao)期內按(an)推薦(jian)溫(wen)度(du)保(bao)存,其(qi)活性(xing)降低率(lv)小於5%。
為(wei)減小外(wai)部因(yin)素(su)對(dui)試(shi)劑(ji)盒破(po)壞前(qian)後(hou)檢測值(zhi)的影(ying)響(xiang),實驗室(shi)的環(huan)境(jing)條件(jian)需(xu)盡(jin)量保(bao)持(chi)壹致,尤(you)其(qi)是(shi)實(shi)驗室(shi)內溫度、濕(shi)度及(ji)溫育條件(jian)。其(qi)次(ci)由(you)同(tong)壹實驗員(yuan)來進行操作(zuo)可(ke)減少人為(wei)誤(wu)差。



