產品名稱(cheng)：牛Ⅱ型前膠(jiao)原(yuan)氨基(ji)端原肽(PⅡNT)ELISA試(shi)劑盒(he)

                                                       96T       僅(jin)供體(ti)外研究(jiu)使用，不(bu)用於臨床(chuang)診斷!

牛Ⅱ型前膠(jiao)原(yuan)氨基(ji)端原肽(PⅡNT)ELISA試(shi)劑盒(he)

本試(shi)劑盒(he)運用雙(shuang)抗(kang)體(ti)夾心(xin)ELISA法(fa)定量測定(ding)牛血清(qing)、血漿(jiang)、組織勻漿(jiang)、細(xi)胞(bao)裂(lie)解液、細胞(bao)培養(yang)上清(qing)液和(he)其他生(sheng)物液體中牛Ⅱ型前膠(jiao)原(yuan)氨基(ji)端原肽(PⅡNT)含量(liang)。

 檢(jian)測範(fan)圍

78.125-5000pg/mL

 *低(di)檢測限

34pg/mL

 實(shi)驗(yan)原理(li)

將(jiang)牛Ⅱ型前膠(jiao)原(yuan)氨基(ji)端原肽(PⅡNT)抗(kang)體(ti)包被(bei)於(yu)96孔(kong)微(wei)孔(kong)板中，制成固相載(zai)體(ti)，向微(wei)孔(kong)中分(fen)別加(jia)入標(biao)準品或標(biao)本，其中的牛Ⅱ型前膠(jiao)原(yuan)氨基(ji)端原肽(PⅡNT)與連(lian)接(jie)於(yu)固相載(zai)體(ti)上的抗(kang)體(ti)結(jie)合(he)，然(ran)後加(jia)入生(sheng)物素(su)化的牛Ⅱ型前膠(jiao)原(yuan)氨基(ji)端原肽(PⅡNT)抗(kang)體(ti)，將(jiang)未(wei)結(jie)合(he)的生(sheng)物素(su)化抗(kang)體(ti)洗凈(jing)後，加(jia)入HRP標(biao)記的親(qin)和(he)素(su)，再(zai)次徹(che)底洗滌(di)後加(jia)入TMB底物顯(xian)色。TMB在(zai)過(guo)氧(yang)化(hua)物酶的催化(hua)下(xia)轉(zhuan)化(hua)成藍色(se)，並(bing)在酸的作用下(xia)轉(zhuan)化(hua)成*終的黃色。顏(yan)色的深淺(qian)和(he)樣(yang)品中的牛Ⅱ型前膠(jiao)原(yuan)氨基(ji)端原肽(PⅡNT)呈(cheng)正相關(guan)。用酶標(biao)儀在(zai)450nm波長(chang)下(xia)測(ce)定(ding)吸光度(O.D.值)，計算(suan)樣(yang)品濃度。

 試(shi)劑盒(he)內容(rong)

牛Ⅱ型前膠(jiao)原(yuan)氨基(ji)端原肽(PⅡNT)ELISA試(shi)劑盒(he)需自(zi)備的設備(bei)及試(shi)劑

1.         450±10nm濾(lv)光片(pian)的酶標(biao)儀(建議儀(yi)器(qi)使用前提(ti)前預(yu)熱(re))

2.         單(dan)道或多道(dao)微量(liang)加(jia)液器及吸頭(tou)

3.         稀釋(shi)樣(yang)品的EP管

4.         蒸(zheng)餾(liu)水或去(qu)離子水

5.         吸水紙

6.         盛(sheng)放(fang)洗液的容(rong)器

 試(shi)劑盒(he)的儲(chu)存(cun)及有效期(qi)

1.         未(wei)開封(feng)的試(shi)劑盒(he)：所有試(shi)劑均(jun)按(an)試(shi)劑瓶(ping)標(biao)簽(qian)上(shang)所(suo)示(shi)保存(cun)。請註(zhu)意(yi)，收到(dao)試(shi)劑盒(he)後請盡(jin)快將(jiang)TMB 洗滌(di)液，終止(zhi)液保存(cun)於4℃，其他試(shi)劑保(bao)存(cun)於-20℃。

2.         使用後的試(shi)劑盒(he)：剩余(yu)試(shi)劑仍需(xu)按(an)照(zhao)試(shi)劑瓶(ping)標(biao)簽(qian)所(suo)示(shi)的溫度保存(cun)，開封(feng)後的酶標(biao)板要加(jia)幹燥劑後密(mi)封(feng)保存(cun)於-20℃，避免潮(chao)濕。

註意(yi)：

試(shi)劑盒(he)內酶(mei)標(biao)條可(ke)拆(chai)卸(xie)，按(an)實(shi)驗需求可(ke)分(fen)多次使用；使用後的剩余(yu)試(shi)劑盒(he)建議在(zai)**實(shi)驗後 1個月(yue)內使用完畢。產(chan)品過期(qi)時(shi)間以盒(he)子上(shang)的標(biao)簽(qian)為(wei)準(zhun)，保(bao)質期內(nei)所(suo)有組分都確(que)保是穩定的。

牛Ⅱ型前膠(jiao)原(yuan)氨基(ji)端原肽(PⅡNT)ELISA試(shi)劑盒(he)標(biao)本的采集(ji)與(yu)保(bao)存(cun)

1.         血清(qing)：

將(jiang)收集(ji)於(yu)血(xue)清(qing)分離管(guan)的全(quan)血標(biao)本在(zai)室(shi)溫放(fang)置(zhi) 2 小(xiao)時(shi)或 4^oC 過夜(ye)，然(ran)後 1000×g 離心(xin) 20 分(fen)鐘，取上清(qing)即可(ke)，或將(jiang)上(shang)清(qing)置於(yu)-20^oC 或-80^oC 保存(cun)，但(dan)應(ying)避免反(fan)復(fu)凍融(rong)。

2.         血漿(jiang)：

用 EDTA 或肝素(su)作為(wei)抗(kang)凝(ning)劑采(cai)集(ji)標(biao)本，並(bing)將(jiang)標(biao)本在(zai)采(cai)集(ji)後的 30 分鐘(zhong)內於(yu) 2-8^oC 1000×g 離心(xin) 15 分(fen)鐘，取上清(qing)即可(ke)檢(jian)測，或將(jiang)上(shang)清(qing)置於(yu)-20^oC 或-80^oC 保存(cun)，但(dan)應(ying)避免反(fan)復(fu)凍融(rong)。

3. 組織勻漿(jiang)：

1） 取適(shi)量(liang)組織塊，於(yu)預(yu)冷PBS（0.01mol/L, pH 7.0-7.2）中清(qing)洗去(qu)除血(xue)液，稱重(zhong)後備用（組織塊較(jiao)大(da)需(xu)先剪(jian)碎後再(zai)勻漿(jiang)）；

2） 可(ke)同(tong)時選用多種勻漿(jiang)方(fang)法(fa)達到(dao)較(jiao)好的破(po)碎(sui)效果：首先將(jiang)組織塊移入玻璃(li)勻漿(jiang)器(qi)，加(jia)入5-10mL 預(yu)冷PBS 進行(xing)充(chong)分(fen)研(yan)磨(mo)，該(gai)過(guo)程(cheng)需(xu)在冰上進行(xing)（有條件(jian)實驗室(shi)可(ke)選(xuan)用機(ji)器(qi)勻漿(jiang)）；得(de)到(dao)的勻漿(jiang)液可(ke)再(zai)利用超(chao)聲(sheng)破(po)碎(sui)或反(fan)復(fu)凍融(rong) 進壹步處(chu)理(li)（超(chao)聲(sheng)破(po)碎(sui)過程(cheng)中註(zhu)意冰(bing)浴(yu)降(jiang)溫；反(fan)復(fu)凍融(rong)法可(ke)重(zhong)復(fu)2 次）。

3） 將(jiang)制備(bei)好的勻漿(jiang)液於5000×g 離心(xin)5 分(fen)鐘，留取上(shang)清(qing)即可(ke)檢(jian)測。

4. 細(xi)胞裂(lie)解液：

1）貼(tie)壁(bi)細(xi)胞需(xu)要先(xian)用胰(yi)酶(mei)消(xiao)化(hua)，離心(xin)收集(ji)細(xi)胞(bao)（懸(xuan)浮細(xi)胞可(ke)直(zhi)接(jie)離心(xin)收集(ji)）；

2）將(jiang)收集(ji)到(dao)的細胞(bao)用冷PBS 洗3 次；

3）物(wu)理(li)方(fang)法裂解細(xi)胞(bao)（可(ke)先(xian)超(chao)聲(sheng)破(po)碎(sui)細胞(bao)，再(zai)反(fan)復(fu)凍融(rong)）：

i 超(chao)聲(sheng)破(po)碎(sui)：取適(shi)量(liang)PBS 重(zhong)懸(xuan)細胞(bao)，用壹定功率(lv)的超(chao)聲(sheng)波處(chu)理(li)細(xi)胞懸(xuan)液，使細胞(bao)急劇震(zhen)蕩(dang)破(po)裂(lie)。

ii 反(fan)復(fu)凍融(rong)：將(jiang)待(dai)破(po)碎(sui)的細胞(bao)在-20 ^oC 以下(xia)冰(bing)凍，室(shi)溫融(rong)解，反(fan)復(fu)3 次，使細胞(bao)溶脹(zhang)破(po)碎(sui)。

4）將(jiang)標(biao)本於(yu)2-8 ^oC 1500×g 離心(xin)10 分(fen)鐘，收集(ji)上(shang)清(qing)備用。

5. 細(xi)胞培(pei)養(yang)上清(qing)或其它(ta)生(sheng)物標(biao)本：

請 1000×g 離心(xin) 20 分(fen)鐘，取上清(qing)即可(ke)檢(jian)測，或將(jiang)上(shang)清(qing)置於(yu)-20^oC 或-80^oC 保存(cun)，但(dan)應(ying)避免反(fan)復(fu)凍融(rong)。

註意：

1.         以上(shang)標(biao)本均(jun)需(xu)密(mi)封(feng)保存(cun)，4^oC保(bao)存(cun)應(ying)小(xiao)於(yu)1周(zhou)，-20^oC不(bu)應(ying)超(chao)過(guo)1個月(yue)，-80^oC不(bu)應(ying)超(chao)過(guo)2個月(yue)。

2.         標(biao)本使用前應(ying)緩(huan)慢(man)均(jun)衡(heng)至室溫，不(bu)應(ying)加(jia)熱使之融(rong)解。

3.         實驗前紅(hong)細(xi)胞裂解液必(bi)須(xu)用標(biao)準品稀釋(shi)液稀釋(shi)。

牛Ⅱ型前膠(jiao)原(yuan)氨基(ji)端原肽(PⅡNT)ELISA試(shi)劑盒(he)試(shi)劑準(zhun)備

1.         使用前將(jiang)所(suo)有的試(shi)劑和(he)標(biao)本緩(huan)慢(man)均(jun)衡(heng)至室溫(18-25oC)，試(shi)劑不(bu)能直(zhi)接(jie)在(zai)37oC溶解。

2.         標(biao)準品(凍幹品)：每瓶(ping)標(biao)準品加(jia)入標(biao)準品稀釋(shi)液1mL，蓋好後室溫靜置大(da)約(yue)10分鐘，同(tong)時(shi)反(fan)復(fu)顛倒(dao)/搓動(dong)以助溶(rong)解，其濃(nong)度為(wei)5000pg/mL。準(zhun)備(bei)7個稀(xi)釋(shi)標(biao)準品的EP管，每個EP管(guan)中加(jia)入150μL的標(biao)準品稀釋(shi)液，如圖(tu)所示(shi)依次倍(bei)比(bi)稀釋(shi)成不(bu)同的梯度， 標(biao)準品稀釋(shi)液(0pg/mL)直(zhi)接(jie)作(zuo)為(wei)空(kong)白(bai)孔(kong)。為(wei)保(bao)證(zheng)實驗結(jie)果有效性(xing)，每次(ci)實(shi)驗(yan)請使用新(xin)的標(biao)準品溶液。

3.         濃洗滌(di)液：用580mL蒸(zheng)餾水或去(qu)離子水將(jiang)20mL濃洗滌(di)液稀釋(shi)至600mL，進行(xing)30倍(bei)稀(xi)釋(shi)。

標(biao)本處(chu)理(li)

1.         本公(gong)司(si)只對(dui)試(shi)劑盒(he)本身負責，不(bu)對因使用該試(shi)劑盒(he)所造成的樣本消(xiao)耗(hao)負(fu)責，請使用者(zhe)使用前充(chong)分(fen)考(kao)慮到(dao)樣(yang)本的可(ke)能(neng)使用量，預(yu)留(liu)充(chong)足(zu)的樣本。

2.         實(shi)驗(yan)前應(ying)預(yu)測(ce)標(biao)本含(han)量(liang)，如(ru)果標(biao)本濃(nong)度過高(gao)，應(ying)對(dui)標(biao)本進行(xing)稀(xi)釋(shi)，使稀釋(shi)後的標(biao)本符(fu)合(he)試(shi)劑盒(he)的檢測(ce)範(fan)圍，計算(suan)時(shi)再(zai)乘以相應(ying)的稀釋(shi)倍(bei)數(shu)。

3.         若所檢(jian)樣本不(bu)包含(han)在(zai)說明書所列(lie)樣(yang)本之中，建議進行(xing)預(yu)實(shi)驗(yan)驗證(zheng)其有效性(xing)，並(bing)註意留存(cun)樣本。

4.         使用化學裂解(jie)液制備(bei)的組織勻漿(jiang)或細胞(bao)提取(qu)液可(ke)能(neng)會由於某些(xie)化(hua)學物質(zhi)的引入導致(zhi)  ELISA實驗結(jie)果偏差。

5.         若樣本為(wei)細(xi)胞(bao)培養(yang)上清(qing)，因該類樣(yang)本幹擾因素(su) 較(jiao)多，如：細胞狀(zhuang)態(tai)、細胞數(shu)量、采(cai)樣時(shi)間等，所(suo)以可(ke)能(neng)存(cun)在檢(jian)測不(bu)出的情況(kuang)。

6.         某些(xie)天然(ran)蛋白(bai)或重組蛋白，包括(kuo)原(yuan)核(he)及真核(he)重組蛋白，可(ke)能(neng)因為(wei)與(yu)本產(chan)品所使用的檢測(ce)抗(kang)體(ti)及捕(bu)獲(huo)抗(kang)體(ti)不(bu)匹(pi)配(pei)，而不(bu)被(bei)檢(jian)測(ce)出。

7.         建議使用新(xin)鮮(xian)樣本，保(bao)存(cun)時間過長(chang)可(ke)能(neng)會存(cun)在蛋(dan)白降解(jie)或變性(xing)導(dao)致實驗結(jie)果偏差。

牛Ⅱ型前膠(jiao)原(yuan)氨基(ji)端原肽(PⅡNT)ELISA試(shi)劑盒(he)操作(zuo)步驟

1.         加(jia)樣：分(fen)別設(she)空(kong)白(bai)孔(kong)（空(kong)白(bai)對(dui)照(zhao)孔(kong)不(bu)加(jia)樣品及酶標(biao)試(shi)劑，其余(yu)各(ge)步操作(zuo)相同(tong)）、標(biao)準孔(kong)、待(dai)測(ce)樣(yang)品孔(kong)。在(zai)酶(mei)標(biao)包被(bei)板上標(biao)準品準確(que)加(jia)樣50μl，待(dai)測(ce)樣(yang)品孔(kong)中先(xian)加(jia)樣品稀釋(shi)液40μl，然後再(zai)加(jia)待(dai)測(ce)樣(yang)品10μl（樣品*終稀(xi)釋(shi)度為(wei)5倍(bei)）。加(jia)樣將(jiang)樣(yang)品加(jia)於酶(mei)標(biao)板孔(kong)底部(bu)，盡(jin)量不(bu)觸及孔(kong)壁(bi)，輕(qing)輕(qing)晃(huang)動(dong)混(hun)勻。

2.         溫育：用封(feng)板膜封(feng)板後置37℃溫育30分(fen)鐘(zhong)。  

3.         配(pei)液：將(jiang)20倍(bei)濃(nong)縮(suo)洗滌(di)液用蒸餾水20倍稀釋(shi)後備用

4.         洗滌(di)：小心(xin)揭(jie)掉封(feng)板膜，棄(qi)去(qu)液體，甩(shuai)幹，每孔(kong)加(jia)滿洗滌(di)液，靜置30秒(miao)後棄(qi)去(qu)，如此(ci)重(zhong)復(fu)5次，拍(pai)幹。

5.         加(jia)酶：每孔(kong)加(jia)入酶標(biao)試(shi)劑50μl，空(kong)白(bai)孔(kong)除(chu)外。

6.         溫育：操(cao)作(zuo)同3。

7.         洗滌(di)：操作(zuo)同5。

8.         顯(xian)色：每孔(kong)先(xian)加(jia)入顯(xian)色劑A50μl，再(zai)加(jia)入顯(xian)色劑B50μl，輕(qing)輕(qing)震(zhen)蕩(dang)混(hun)勻，37℃避光(guang)顯(xian)色15分(fen)鐘(zhong).

9.         終止(zhi)：每孔(kong)加(jia)終止(zhi)液50μl，終止(zhi)反(fan)應(ying)（此(ci)時(shi)藍(lan)色立轉(zhuan)黃色）。

10.     測(ce)定(ding)：以空(kong)白(bai)空(kong)調零(ling)，450nm波長(chang)依序測量(liang)各(ge)孔(kong)的吸光度（OD值）。 測(ce)定應(ying)在(zai)加(jia)終止(zhi)液後15分鐘(zhong)以內(nei)進行(xing)。

註(zhu)意：

1.         試(shi)劑準(zhun)備：準備壹次實驗所(suo)需要(yao)的酶標(biao)條，其它(ta)的可(ke)從微(wei)孔(kong)板上拆(chai)下(xia)，密(mi)封(feng)，按(an)照(zhao)說明書要求保(bao)存(cun)，以備(bei)下(xia)次(ci)使用。

2.         加(jia)樣：實驗操(cao)作(zuo)中請使用壹次性(xing)的吸頭(tou)，避免交(jiao)叉汙(wu)染。加(jia)樣時(shi)註意(yi)不(bu)要有氣泡(pao)，將(jiang)樣(yang)品加(jia)於酶(mei)標(biao)板底部(bu)，盡(jin)量不(bu)觸及孔(kong)壁(bi)，輕(qing)輕(qing)晃(huang)動(dong)混(hun)勻。加(jia)樣或加(jia)試(shi)劑時(shi)，**個孔(kong)與(yu)*後壹個孔(kong)加(jia)樣之間的時間間隔如(ru)果太大(da)，將(jiang)會(hui)導(dao)致(zhi)不(bu)同的“預(yu)溫育”時(shi)間，從而明顯(xian)地影響(xiang)到(dao)測(ce)量(liang)值(zhi)的準確(que)性(xing)及重復(fu)性(xing)。因此，壹次加(jia)樣時(shi)間(包括(kuo)標(biao)準品及所有樣品)*好控制在(zai)10分(fen)鐘內(nei)。推薦(jian)設(she)置(zhi)復(fu)孔(kong)進行(xing)實(shi)驗(yan)。

3.          溫育：為(wei)防止(zhi)樣品蒸發(fa)，實(shi)驗(yan)時請將(jiang)加(jia)上蓋(gai)或覆(fu)膜的酶標(biao)板置於(yu)濕盒(he)內，以避免液體蒸(zheng)發，洗板後應(ying)盡(jin)快進行(xing)下(xia)步操作(zuo)，任(ren)何時(shi)侯(hou)都應(ying)避免酶標(biao)板處(chu)於幹燥狀(zhuang)態(tai)，同時應(ying)嚴(yan)格(ge)遵(zun)守給(gei)定的溫育時(shi)間和(he)溫度。

4.         洗滌(di)：充(chong)分(fen)的洗滌(di)非(fei)常重(zhong)要(yao)，在每次(ci)洗滌(di)過程(cheng)中，都要(yao)將(jiang)洗滌(di)液完全(quan)甩(shuai)幹。洗滌(di)過程(cheng)中反(fan)應(ying)孔(kong)中殘(can)留(liu)的洗滌(di)液應(ying)在(zai)濾(lv)紙上拍(pai)幹，勿將(jiang)濾(lv)紙直(zhi)接(jie)放(fang)入反(fan)應(ying)孔(kong)中吸水，同時要消(xiao)除(chu)板底殘(can)留(liu)的液體和(he)手指印(yin)，避免影響(xiang)*後的酶標(biao)儀讀數(shu)。如果有自(zi)動(dong)洗板機(ji)，應(ying)在(zai)熟練使用後再(zai)用到(dao)正式(shi)實 驗(yan)過程中。

5.         反(fan)應(ying)時(shi)間的控制：加(jia)入底物後請定(ding)時(shi)觀(guan)察反(fan)應(ying)孔(kong)的顏色(se)變化(hua)(比(bi)如，每隔10分(fen)鐘(zhong)觀察壹次)，如顏色(se)較(jiao)深，請提(ti)前加(jia)入終止(zhi)液終止(zhi)反(fan)應(ying)，避免反(fan)應(ying)過(guo)強(qiang)從而影響(xiang)酶標(biao)儀光(guang)密(mi)度讀數(shu)。

6.         底物：底物請避光(guang)保(bao)存(cun)，在儲(chu)存(cun)和(he)溫育時(shi)避免強光(guang)直(zhi)接(jie)照(zhao)射(she)。

7.         如(ru)果實驗室內濕度低(di)於60%，推薦(jian)使用加(jia)濕器(qi)提(ti)高(gao)濕度水平。

 實(shi)驗(yan)流程

1.         實(shi)驗前標(biao)準品、試(shi)劑及樣本的準備(bei)；

2.         加(jia)樣（標(biao)準品及樣本）50μL，37℃孵育(yu)30分鐘(zhong)；

3.         洗板5次，加(jia)酶標(biao)試(shi)劑50ul，37℃孵育(yu)半小(xiao)時(shi)；

4.         洗板5次；加(jia)入顯(xian)色液A，B各(ge)50ul,37℃孵育(yu)顯(xian)色15分(fen)鐘(zhong)

5.         加(jia)終止(zhi)液50μL，立即450nm讀數(shu)。

6.    計算(suan)

牛Ⅱ型前膠(jiao)原(yuan)氨基(ji)端原肽(PⅡNT)ELISA試(shi)劑盒(he)計算(suan)

各(ge)標(biao)準品及樣本O.D.值(zhi)扣(kou)除(chu)空(kong)白(bai)孔(kong)O.D.值(zhi)後作圖(tu)(七(qi)點圖)，如設置(zhi)復(fu)孔(kong)，則(ze)應(ying)取(qu)其平均值(zhi)計算(suan)。以標(biao)準品的濃度為(wei)縱(zong)坐(zuo)標(biao)(或對數(shu)坐標(biao))，O.D.值為(wei)橫(heng)坐(zuo)標(biao)(或對數(shu)坐標(biao)），繪出(chu)標(biao)準曲線(xian)(*佳(jia)方程(cheng)式應(ying)依(yi)回(hui)歸(gui)方(fang)程計算(suan)的R2值來(lai)定，以R2值(zhi)越(yue)趨近(jin)於1為(wei)好)。推薦(jian)使用專業制作(zuo)曲線(xian)軟(ruan)件進行(xing)分(fen)析(xi)，如(ru)curve expert 1.30，根據(ju)樣(yang)品O.D.值，由標(biao)準曲線(xian)查(zha)出相應(ying)的濃度，乘以稀(xi)釋(shi)倍(bei)數(shu)；或用標(biao)準物(wu)的濃度與O.D.值(zhi)計算(suan)出(chu)標(biao)準曲線(xian)的回歸(gui)方(fang)程式，將(jiang)樣(yang)品的O.D.值代(dai)入方程(cheng)式，計算(suan)出(chu)樣(yang)品濃度，再(zai)乘以稀(xi)釋(shi)倍(bei)數(shu)，即為(wei)樣(yang)品的實際(ji)濃度。

 特異(yi)性(xing)

本試(shi)劑盒(he)用於檢測(ce)牛Ⅱ型前膠(jiao)原(yuan)氨基(ji)端原肽(PⅡNT)，經檢測與其它(ta)相似物(wu)質無明顯(xian)交(jiao)叉反(fan)應(ying)。

由於受(shou)到(dao)技(ji)術及樣本來(lai)源(yuan)的限制，不(bu)可(ke)能(neng)完成對所(suo)有相關(guan)或相似物(wu)質交(jiao)叉反(fan)應(ying)檢(jian)測(ce)，因此本試(shi)劑盒(he)有可(ke)能(neng)與未經檢測的其它(ta)物質(zhi)有交(jiao)叉反(fan)應(ying)。

 精(jing)密(mi)度

精(jing)密(mi)度用樣品測定(ding)值(zhi)的變異(yi)系(xi)數(shu)CV表示(shi)。CV(%) = SD/mean×100

批(pi)內(nei)差(cha)：取(qu)同(tong)批(pi)次(ci)試(shi)劑盒(he)對低(di)、中、高(gao)值(zhi)定值樣本進行(xing)定(ding)量(liang)檢(jian)測,每份樣本連(lian)續(xu)測(ce)定20 次(ci)，分別計算(suan)不(bu)同濃度樣本的平均值(zhi)及SD值。

批(pi)間差：選(xuan)取3個不(bu)同批(pi)次(ci)的試(shi)劑盒(he)分別對(dui)低(di)、中、高(gao)值(zhi)定值樣本進行(xing)定(ding)量(liang)測(ce)定，每個樣(yang)本使用同壹試(shi)劑盒(he)重復(fu)測定8次，分(fen)別計算(suan)不(bu)同濃度樣本的平均值(zhi)及SD值。

批(pi)內(nei)差(cha)： CV<10%

批(pi)間差： CV<12%

牛Ⅱ型前膠(jiao)原(yuan)氨基(ji)端原肽(PⅡNT)ELISA試(shi)劑盒(he)穩定性(xing)

經測定，試(shi)劑盒(he)在有效期(qi)內按(an)推(tui)薦(jian)溫度保存(cun)，其活性(xing)降(jiang)低(di)率(lv)小(xiao)於5%。

為(wei)減(jian)小(xiao)外部(bu)因素(su)對試(shi)劑盒(he)破(po)壞(huai)前後檢測(ce)值的影響(xiang)，實驗室(shi)的環境(jing)條件(jian)需盡(jin)量保(bao)持(chi)壹致，尤其是實(shi)驗(yan)室內溫度、濕度及溫育條(tiao)件(jian)。其次(ci)由同壹實驗員來(lai)進行(xing)操(cao)作(zuo)可(ke)減(jian)少人為(wei)誤(wu)差(cha)。