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      1. <dl id="Ht0T0p"></dl>

        1. 產品(pin)詳情(qing)
          • 產品(pin)名稱:牛(niu)70kDa熱(re)休克(ke)蛋白(bai)1B(HSPA1B)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)

          • 產品(pin)型號:HSPA1B
          • 產品(pin)廠商:KALANG
          • 產品(pin)文檔(dang):
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          簡(jian)單(dan)介紹:
          牛(niu)70kDa熱(re)休克(ke)蛋白(bai)1B(HSPA1B)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)運(yun)用(yong)雙(shuang)抗(kang)體(ti)夾(jia)心(xin)ELISA法定(ding)量測(ce)定(ding)牛(niu)血清(qing)、血漿(jiang)、組(zu)織(zhi)勻(yun)漿(jiang)、細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液、細胞(bao)培(pei)養上清(qing)液和(he)其(qi)他(ta)生(sheng)物液體中牛(niu)70kDa熱(re)休克(ke)蛋白(bai)1B(HSPA1B)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)含量。
          詳情(qing)介紹:


                                                                 96T       僅供體(ti)外(wai)研(yan)究使用(yong),不用於(yu)臨床(chuang)診(zhen)斷!

          牛(niu)70kDa熱(re)休克(ke)蛋白(bai)1B(HSPA1B)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)

          本試(shi)劑(ji)盒(he)運(yun)用(yong)雙(shuang)抗(kang)體(ti)夾(jia)心(xin)ELISA法定(ding)量測(ce)定(ding)牛(niu)血清(qing)、血漿(jiang)、組(zu)織(zhi)勻(yun)漿(jiang)、細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液、細胞(bao)培(pei)養上清(qing)液和(he)其(qi)他(ta)生(sheng)物液體中牛(niu)70kDa熱(re)休克(ke)蛋白(bai)1B(HSPA1B)含(han)量。

           檢測(ce)範(fan)圍(wei)

          1.563-100ng/mL

           *低檢測(ce)限(xian)

          0.53ng/mL

           實驗原(yuan)理(li)

          將(jiang)牛(niu)70kDa熱(re)休克(ke)蛋白(bai)1B(HSPA1B)抗(kang)體(ti)包被(bei)於(yu)96孔微(wei)孔板(ban)中,制成固(gu)相(xiang)載體(ti),向微(wei)孔中分別加入(ru)標(biao)準品(pin)或標(biao)本,其(qi)中的牛(niu)70kDa熱(re)休克(ke)蛋白(bai)1B(HSPA1B)與連接(jie)於固相(xiang)載體(ti)上的抗(kang)體(ti)結(jie)合(he),然後加(jia)入(ru)生(sheng)物素(su)化(hua)的牛(niu)70kDa熱(re)休克(ke)蛋白(bai)1B(HSPA1B)抗(kang)體(ti),將(jiang)未結(jie)合(he)的生(sheng)物素(su)化(hua)抗(kang)體(ti)洗(xi)凈(jing)後,加(jia)入(ru)HRP標(biao)記(ji)的親(qin)和(he)素(su),再(zai)次(ci)徹底(di)洗滌(di)後加(jia)入(ru)TMB底(di)物顯(xian)色(se)。TMB在過氧化(hua)物酶(mei)的催化(hua)下轉化(hua)成藍(lan)色(se),並(bing)在酸(suan)的作用(yong)下轉化(hua)成*終(zhong)的黃(huang)色(se)。顏色(se)的深(shen)淺和(he)樣(yang)品(pin)中的牛(niu)70kDa熱(re)休克(ke)蛋白(bai)1B(HSPA1B)呈正相(xiang)關(guan)。用酶(mei)標(biao)儀(yi)在450nm波長下測(ce)定(ding)吸(xi)光度(du)(O.D.值(zhi)),計(ji)算樣(yang)品(pin)濃(nong)度。

           試(shi)劑(ji)盒(he)內(nei)容(rong)

          試(shi)劑(ji)名稱

          數量

          試(shi)劑(ji)名稱

          數量

          96孔板(ban)(預(yu)包被(bei))

          1

          96孔板(ban)覆(fu)膜

          2

          標(biao)準品(pin)

          0.5ml×1

          標(biao)準品(pin)稀釋(shi)液

          1.5ml×1瓶(ping)

          顯色(se)劑(ji)A

          6ml×1瓶(ping)

          樣品(pin)稀釋(shi)液

          6ml×1瓶(ping)

          顯色(se)劑(ji)B

          6ml×1瓶(ping)

          終止液

          6ml×1瓶(ping)

          酶(mei)標(biao)試(shi)劑(ji)

          6ml×1瓶(ping)

          密封(feng)袋

          1

          濃(nong)洗滌(di)液(30×)

          1×20mL

          使用(yong)說明書

          1

          牛(niu)70kDa熱(re)休克(ke)蛋白(bai)1B(HSPA1B)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)需自備(bei)的設(she)備(bei)及試(shi)劑(ji)

          1.         450±10nm濾光片的酶(mei)標(biao)儀(yi)(建(jian)議(yi)儀(yi)器使用(yong)前提前(qian)預(yu)熱(re))

          2.         單(dan)道或多(duo)道(dao)微(wei)量加液器及吸(xi)頭

          3.         稀釋(shi)樣品(pin)的EP管(guan)

          4.         蒸餾(liu)水或去(qu)離(li)子水

          5.         吸(xi)水紙(zhi)

          6.         盛(sheng)放洗液的容(rong)器

           試(shi)劑(ji)盒(he)的儲(chu)存及有(you)效期

          1.         未開封的試(shi)劑(ji)盒(he):所有(you)試(shi)劑(ji)均(jun)按試(shi)劑(ji)瓶(ping)標(biao)簽上所示保(bao)存。請註意,收到試(shi)劑(ji)盒(he)後請(qing)盡快(kuai)將(jiang)TMB 洗(xi)滌(di)液,終止液保存於4℃,其他試(shi)劑(ji)保(bao)存於-20℃。

          2.         使用(yong)後的試(shi)劑(ji)盒(he):剩余試(shi)劑(ji)仍需(xu)按(an)照(zhao)試(shi)劑(ji)瓶(ping)標(biao)簽所(suo)示的溫(wen)度保(bao)存,開封後的酶(mei)標(biao)板(ban)要加(jia)幹燥(zao)劑(ji)後密(mi)封保(bao)存於-20℃,避(bi)免(mian)潮(chao)濕。

          註意(yi):

          試(shi)劑(ji)盒(he)內(nei)酶(mei)標(biao)條可拆(chai)卸(xie),按實驗需(xu)求可分多(duo)次(ci)使用(yong);使用(yong)後的剩余試(shi)劑(ji)盒(he)建(jian)議(yi)在**實驗後 1個(ge)月內(nei)使用(yong)完畢。產品(pin)過期時間(jian)以盒子上的標(biao)簽為(wei)準,保質期內(nei)所(suo)有(you)組分都確保(bao)是穩定(ding)的。

          牛(niu)70kDa熱(re)休克(ke)蛋白(bai)1B(HSPA1B)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)標(biao)本的采(cai)集與保(bao)存

          1.         血清(qing)

          將(jiang)收集於血清(qing)分離(li)管(guan)的全(quan)血標(biao)本在室(shi)溫(wen)放置(zhi) 2 小時或 4oC 過夜,然後 1000×g 離(li)心(xin) 20 分鐘(zhong),取(qu)上清(qing)即可,或將(jiang)上清(qing)置(zhi)於-20oC -80oC 保(bao)存,但(dan)應(ying)避(bi)免(mian)反(fan)復(fu)凍(dong)融。

          2.         血漿(jiang):

          EDTA 或肝(gan)素(su)作為(wei)抗(kang)凝(ning)劑(ji)采(cai)集標(biao)本,並(bing)將(jiang)標(biao)本在采(cai)集後的 30 分(fen)鐘(zhong)內(nei)於(yu) 2-8oC 1000×g 離(li)心(xin) 15 分鐘(zhong),取(qu)上清(qing)即可檢測(ce),或將(jiang)上清(qing)置(zhi)於-20oC -80oC 保(bao)存,但(dan)應(ying)避(bi)免(mian)反(fan)復(fu)凍(dong)融。

          3. 組織(zhi)勻(yun)漿(jiang):

          1) 取適(shi)量組織(zhi)塊(kuai),於預(yu)冷PBS0.01mol/L, pH 7.0-7.2)中清(qing)洗去(qu)除血液,稱重(zhong)後備(bei)用(yong)(組(zu)織(zhi)塊(kuai)較(jiao)大(da)需(xu)先剪(jian)碎後再(zai)勻(yun)漿(jiang));

          2) 可同時選用(yong)多(duo)種(zhong)勻(yun)漿(jiang)方(fang)法達(da)到較(jiao)好(hao)的破碎效果:首先將(jiang)組(zu)織(zhi)塊(kuai)移(yi)入(ru)玻(bo)璃(li)勻(yun)漿(jiang)器,加(jia)入(ru)5-10mL 預(yu)冷PBS 進行充(chong)分研(yan)磨(mo),該(gai)過程需在冰上進行(有(you)條件實驗室(shi)可選用(yong)機器勻(yun)漿(jiang));得(de)到的勻(yun)漿(jiang)液可再(zai)利(li)用超聲破碎或反(fan)復(fu)凍(dong)融 進壹(yi)步處(chu)理(超聲破碎過程中註意(yi)冰浴(yu)降溫(wen);反(fan)復(fu)凍(dong)融法(fa)可重(zhong)復(fu)2 次(ci))。

          3) 將(jiang)制(zhi)備(bei)好(hao)的勻(yun)漿(jiang)液於5000×g 離(li)心(xin)5 分鐘(zhong),留(liu)取上清(qing)即可檢測(ce)。

          4. 細胞(bao)裂(lie)解(jie)液:

          1)貼(tie)壁(bi)細(xi)胞(bao)需(xu)要先用(yong)胰酶(mei)消(xiao)化(hua),離(li)心(xin)收集細胞(bao)(懸浮細(xi)胞(bao)可直接(jie)離(li)心(xin)收集);

          2)將(jiang)收集到的細(xi)胞(bao)用(yong)冷PBS 洗(xi)3 次(ci);

          3)物理(li)方(fang)法裂(lie)解(jie)細胞(bao)(可先超聲破碎細(xi)胞(bao),再(zai)反(fan)復(fu)凍(dong)融):

          i 超聲破碎:取(qu)適(shi)量PBS 重(zhong)懸細胞(bao),用(yong)壹(yi)定功(gong)率(lv)的超聲波處理細(xi)胞(bao)懸液,使細(xi)胞(bao)急(ji)劇(ju)震蕩破裂。

          ii 反(fan)復(fu)凍(dong)融:將(jiang)待(dai)破碎的細(xi)胞(bao)在-20 oC 以下冰凍(dong),室溫(wen)融解(jie),反(fan)復(fu)3 次(ci),使細(xi)胞(bao)溶脹(zhang)破碎。

          4)將(jiang)標(biao)本於(yu)2-8 oC 1500×g 離(li)心(xin)10 分鐘(zhong),收集上清(qing)備(bei)用(yong)。

          5. 細胞(bao)培(pei)養上清(qing)或其(qi)它(ta)生(sheng)物標(biao)本:

          1000×g 離(li)心(xin) 20 分鐘(zhong),取(qu)上清(qing)即可檢測(ce),或將(jiang)上清(qing)置(zhi)於-20oC -80oC 保(bao)存,但(dan)應(ying)避(bi)免(mian)反(fan)復(fu)凍(dong)融。

          註意(yi):

          1.         以上標(biao)本均(jun)需(xu)密(mi)封(feng)保(bao)存4oC保存應小於1周,-20oC不應超過1個月,-80oC不應超過2個月。

          2.         標(biao)本使用(yong)前應緩(huan)慢(man)均衡至(zhi)室溫(wen),不應加(jia)熱(re)使之融解(jie)。

          3.         實驗前(qian)紅細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液必(bi)須用(yong)標(biao)準品(pin)稀釋(shi)液稀釋(shi)。

          牛(niu)70kDa熱(re)休克(ke)蛋白(bai)1B(HSPA1B)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)試(shi)劑(ji)準備(bei)

          1.         使用(yong)前將(jiang)所(suo)有(you)的試(shi)劑(ji)和(he)標(biao)本緩(huan)慢(man)均衡至(zhi)室溫(wen)(18-25oC),試(shi)劑(ji)不能直接(jie)在37oC溶解(jie)。

          2.         標(biao)準品(pin)(凍(dong)幹品(pin)):每瓶(ping)標(biao)準品(pin)加入(ru)標(biao)準品(pin)稀釋(shi)液1mL,蓋好後室(shi)溫(wen)靜(jing)置(zhi)大(da)約(yue)10分(fen)鐘(zhong),同(tong)時反(fan)復(fu)顛倒(dao)/搓(cuo)動以助溶解(jie),其濃(nong)度為(wei)100ng/mL。準備(bei)7個(ge)稀(xi)釋(shi)標(biao)準品(pin)的EP管(guan),每個(ge)EP管(guan)中加入(ru)150μL的標(biao)準品(pin)稀釋(shi)液,如圖所示依(yi)次(ci)倍(bei)比稀釋(shi)成不同的梯(ti)度, 標(biao)準品(pin)稀釋(shi)液(0pg/mL)直接(jie)作為(wei)空(kong)白(bai)孔。為(wei)保證(zheng)實驗結(jie)果(guo)有(you)效性(xing),每(mei)次(ci)實驗請(qing)使用(yong)新(xin)的標(biao)準品(pin)溶液。

           

           

           

          3.         濃(nong)洗滌(di)液:用580mL蒸餾(liu)水或去(qu)離(li)子水將(jiang)20mL濃(nong)洗滌(di)液稀釋(shi)至600mL,進行30倍(bei)稀釋(shi)。

          標(biao)本處(chu)理(li)

          1.         本公(gong)司只對(dui)試(shi)劑(ji)盒(he)本身(shen)負責,不對(dui)因使用(yong)該試(shi)劑(ji)盒(he)所造成的樣(yang)本消(xiao)耗(hao)負責,請(qing)使用(yong)者使用(yong)前充分(fen)考慮(lv)到樣(yang)本的可能使用(yong)量,預(yu)留(liu)充(chong)足的樣(yang)本。

          2.         實驗前(qian)應(ying)預(yu)測(ce)標(biao)本含(han)量,如果標(biao)本濃(nong)度過高,應對(dui)標(biao)本進行稀(xi)釋(shi),使稀(xi)釋(shi)後的標(biao)本符(fu)合試(shi)劑(ji)盒(he)的檢測(ce)範(fan)圍(wei),計(ji)算時再(zai)乘(cheng)以相(xiang)應的稀(xi)釋(shi)倍(bei)數。

          3.         若(ruo)所檢樣本不包含(han)在說明書所(suo)列(lie)樣本之中,建(jian)議(yi)進行預(yu)實驗驗證(zheng)其(qi)有(you)效性(xing),並(bing)註意(yi)留(liu)存樣本。

          4.         使用(yong)化(hua)學(xue)裂(lie)解(jie)液制備(bei)的組(zu)織(zhi)勻(yun)漿(jiang)或細(xi)胞(bao)提取(qu)液可能會由(you)於某(mou)些(xie)化(hua)學(xue)物質的引(yin)入(ru)導致(zhi)  ELISA實驗結(jie)果(guo)偏(pian)差(cha)。

          5.         若(ruo)樣本為(wei)細胞(bao)培(pei)養上清(qing),因該(gai)類樣本幹擾(rao)因素(su) 較(jiao)多(duo),如:細胞(bao)狀(zhuang)態(tai)、細胞(bao)數(shu)量、采樣(yang)時間(jian)等(deng),所以可能存在檢測(ce)不出的情(qing)況(kuang)。

          6.         某(mou)些(xie)天然蛋白(bai)或重(zhong)組(zu)蛋白(bai),包括(kuo)原(yuan)核(he)及真核(he)重(zhong)組(zu)蛋白(bai),可能因為(wei)與本產品(pin)所使用(yong)的檢測(ce)抗(kang)體(ti)及捕獲(huo)抗(kang)體(ti)不匹配(pei),而(er)不被(bei)檢測(ce)出(chu)。

          7.         建(jian)議(yi)使用(yong)新(xin)鮮(xian)樣本,保(bao)存時間(jian)過長可能會存在蛋(dan)白(bai)降解(jie)或變(bian)性(xing)導致(zhi)實驗結(jie)果(guo)偏(pian)差(cha)。

          牛(niu)70kDa熱(re)休克(ke)蛋白(bai)1B(HSPA1B)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)操(cao)作步(bu)驟(zhou)

          1.         加樣(yang):分別設(she)空(kong)白(bai)孔(空(kong)白(bai)對(dui)照(zhao)孔不加樣(yang)品(pin)及酶(mei)標(biao)試(shi)劑(ji),其(qi)余各步(bu)操(cao)作相(xiang)同)、標(biao)準孔、待(dai)測(ce)樣(yang)品(pin)孔。在酶(mei)標(biao)包被(bei)板(ban)上標(biao)準品(pin)準確加(jia)樣50μl,待(dai)測(ce)樣(yang)品(pin)孔中先加(jia)樣品(pin)稀釋(shi)液40μl,然後再(zai)加(jia)待測(ce)樣(yang)品(pin)10μl(樣品(pin)*終稀(xi)釋(shi)度為(wei)5倍(bei))。加樣(yang)將(jiang)樣(yang)品(pin)加於(yu)酶(mei)標(biao)板(ban)孔底(di)部,盡量不觸及孔壁(bi),輕輕晃(huang)動混(hun)勻。

          2.         溫(wen)育:用(yong)封板(ban)膜封(feng)板(ban)後置(zhi)37℃溫(wen)育30分(fen)鐘(zhong)。  

          3.         配液:將(jiang)20倍(bei)濃(nong)縮洗(xi)滌(di)液用蒸餾(liu)水20倍(bei)稀釋(shi)後備(bei)用(yong)

          4.         洗滌(di):小(xiao)心(xin)揭掉(diao)封板(ban)膜,棄(qi)去液體,甩(shuai)幹,每(mei)孔加(jia)滿洗滌(di)液,靜(jing)置(zhi)30秒後棄(qi)去,如此重(zhong)復(fu)5次(ci),拍(pai)幹。

          5.         加酶(mei):每(mei)孔加(jia)入(ru)酶(mei)標(biao)試(shi)劑(ji)50μl,空(kong)白(bai)孔除(chu)外(wai)。

          6.         溫(wen)育:操(cao)作同(tong)3

          7.         洗滌(di):操(cao)作同(tong)5

          8.         顯色(se):每孔先加(jia)入(ru)顯(xian)色(se)劑(ji)A50μl,再(zai)加(jia)入(ru)顯(xian)色(se)劑(ji)B50μl,輕輕震蕩混(hun)勻,37℃避(bi)光顯色(se)15分鐘(zhong).

          9.         終止:每(mei)孔加(jia)終止液50μl,終止反(fan)應(ying)(此時藍(lan)色(se)立轉黃色(se))。

          10.     測(ce)定(ding):以空(kong)白(bai)空(kong)調零(ling),450nm波長依序測(ce)量各孔的吸(xi)光度(du)(OD值(zhi))。 測(ce)定(ding)應在加(jia)終(zhong)止液後15分(fen)鐘(zhong)以內(nei)進行。

          註意(yi):

          1.         試(shi)劑(ji)準備(bei)準備(bei)壹(yi)次(ci)實驗所(suo)需(xu)要的酶(mei)標(biao)條,其它(ta)的可從(cong)微(wei)孔板(ban)上拆(chai)下,密封,按照(zhao)說明書要求保存,以備(bei)下次(ci)使用(yong)。

          2.         加樣(yang)實驗操(cao)作中請使用(yong)壹(yi)次(ci)性(xing)的吸(xi)頭,避(bi)免(mian)交叉(cha)汙染。加(jia)樣時註(zhu)意(yi)不要有(you)氣(qi)泡(pao),將(jiang)樣(yang)品(pin)加於(yu)酶(mei)標(biao)板(ban)底(di)部,盡量不觸及孔壁(bi),輕輕晃(huang)動混(hun)勻。加(jia)樣(yang)或加(jia)試(shi)劑(ji)時,**個(ge)孔與(yu)*後壹(yi)個孔加(jia)樣之間(jian)的時間(jian)間(jian)隔(ge)如果太(tai)大(da),將(jiang)會(hui)導致(zhi)不同的“預(yu)溫(wen)育”時間(jian),從(cong)而(er)明顯地(di)影(ying)響到測(ce)量值的準確性(xing)及重(zhong)復(fu)性(xing)。因此,壹(yi)次(ci)加樣(yang)時間(jian)(包括(kuo)標(biao)準品(pin)及所有(you)樣品(pin))*好控制(zhi)在10分(fen)鐘(zhong)內(nei)。推(tui)薦(jian)設(she)置(zhi)復孔進行實驗。

          3.          溫(wen)育為(wei)防止樣(yang)品(pin)蒸發(fa),實驗時請(qing)將(jiang)加(jia)上蓋或覆(fu)膜的酶(mei)標(biao)板(ban)置(zhi)於濕盒內(nei),以避(bi)免(mian)液體蒸發(fa),洗(xi)板(ban)後應(ying)盡快(kuai)進行下步操(cao)作,任(ren)何(he)時侯(hou)都應避(bi)免(mian)酶(mei)標(biao)板(ban)處(chu)於(yu)幹燥(zao)狀態(tai),同時應(ying)嚴格(ge)遵守(shou)給定的溫(wen)育時間(jian)和(he)溫(wen)度。

          4.         洗滌(di):充分(fen)的洗(xi)滌(di)非(fei)常重(zhong)要,在每(mei)次(ci)洗滌(di)過程中,都要將(jiang)洗(xi)滌(di)液完全(quan)甩(shuai)幹。洗(xi)滌(di)過程中反(fan)應(ying)孔中殘留的洗(xi)滌(di)液應在濾紙上拍(pai)幹,勿(wu)將(jiang)濾紙直接(jie)放入(ru)反(fan)應(ying)孔中吸(xi)水,同(tong)時要消(xiao)除(chu)板(ban)底(di)殘留的液體和(he)手指(zhi)印,避(bi)免(mian)影(ying)響*後的酶(mei)標(biao)儀(yi)讀數。如果有(you)自動洗板(ban)機,應在熟(shu)練(lian)使用(yong)後再(zai)用(yong)到正式(shi)實 驗過程中。

          5.         反(fan)應(ying)時間(jian)的控制(zhi)加入(ru)底(di)物後請(qing)定時觀(guan)察(cha)反(fan)應(ying)孔的顏(yan)色(se)變(bian)化(hua)(比如,每隔(ge)10分鐘(zhong)觀(guan)察(cha)壹(yi)次(ci)),如顏色(se)較(jiao)深(shen),請(qing)提前(qian)加入(ru)終(zhong)止液終止反(fan)應(ying),避(bi)免(mian)反(fan)應(ying)過強從(cong)而(er)影(ying)響酶(mei)標(biao)儀(yi)光密度(du)讀(du)數。

          6.         底(di)物底(di)物請(qing)避(bi)光保存,在儲(chu)存和(he)溫(wen)育時避(bi)免(mian)強(qiang)光直接(jie)照(zhao)射(she)。

          7.         如果實驗室(shi)內(nei)濕度低於(yu)60%,推(tui)薦(jian)使用(yong)加濕器提高(gao)濕度水平。

           實驗流(liu)程(cheng)

          1.         實驗前(qian)標(biao)準品(pin)、試(shi)劑(ji)及樣本的準備(bei);

          2.         加樣(yang)(標(biao)準品(pin)及樣本)50μL37孵育(yu)30分鐘(zhong);

          3.         洗板(ban)5次(ci),加酶(mei)標(biao)試(shi)劑(ji)50ul37孵育(yu)半(ban)小時;

          4.         洗板(ban)5次(ci);加入(ru)顯(xian)色(se)液AB50ul,37孵育(yu)顯色(se)15分鐘(zhong)

          5.         加終(zhong)止液50μL,立即450nm讀(du)數。

          6.    計(ji)算

          牛(niu)70kDa熱(re)休克(ke)蛋白(bai)1B(HSPA1B)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)計(ji)算

          各標(biao)準品(pin)及樣本O.D.值(zhi)扣(kou)除空(kong)白(bai)孔O.D.值(zhi)後作圖(tu)(七點(dian)圖),如設(she)置(zhi)復孔,則應(ying)取(qu)其(qi)平均值(zhi)計(ji)算。以標(biao)準品(pin)的濃(nong)度為(wei)縱(zong)坐標(biao)(或對(dui)數(shu)坐標(biao))O.D.值為(wei)橫坐標(biao)(或對(dui)數(shu)坐標(biao)),繪(hui)出標(biao)準曲線(*佳(jia)方程(cheng)式(shi)應(ying)依回歸(gui)方(fang)程計(ji)算的R2值(zhi)來(lai)定,以R2值越趨近(jin)於1為(wei)好)。推(tui)薦(jian)使用(yong)專(zhuan)業(ye)制作曲線軟(ruan)件進行分(fen)析,如curve expert 1.30,根(gen)據樣品(pin)O.D.值,由(you)標(biao)準曲線查(zha)出相(xiang)應的濃(nong)度,乘(cheng)以稀釋(shi)倍(bei)數;或用(yong)標(biao)準物的濃(nong)度與(yu)O.D.值(zhi)計(ji)算出(chu)標(biao)準曲線的回(hui)歸(gui)方(fang)程式,將(jiang)樣(yang)品(pin)的O.D.值(zhi)代(dai)入(ru)方(fang)程(cheng)式(shi),計(ji)算出(chu)樣(yang)品(pin)濃(nong)度,再(zai)乘(cheng)以稀釋(shi)倍(bei)數,即為(wei)樣品(pin)的實際(ji)濃(nong)度。

           特(te)異性(xing)

          本試(shi)劑(ji)盒(he)用於檢測(ce)牛(niu)70kDa熱(re)休克(ke)蛋白(bai)1B(HSPA1B),經(jing)檢測(ce)與(yu)其它相(xiang)似物質無(wu)明顯交叉(cha)反(fan)應(ying)。

          由於(yu)受到技術及樣本來(lai)源的限(xian)制(zhi),不可能完成對(dui)所(suo)有(you)相(xiang)關(guan)或相(xiang)似物質交叉(cha)反(fan)應(ying)檢測(ce),因此本試(shi)劑(ji)盒(he)有(you)可能與未經檢測(ce)的其(qi)它(ta)物質有(you)交叉(cha)反(fan)應(ying)。

           精(jing)密度(du)

          精(jing)密度(du)用(yong)樣(yang)品(pin)測(ce)定(ding)值的變(bian)異系數CV表示。CV(%) = SD/mean×100

          批內(nei)差(cha):取同批次(ci)試(shi)劑(ji)盒(he)對(dui)低、中、高值(zhi)定(ding)值樣本進行定(ding)量檢測(ce),每(mei)份樣(yang)本連續測(ce)定(ding)20 次(ci),分別計(ji)算不同濃(nong)度樣(yang)本的平均值(zhi)及SD值。

          批間(jian)差(cha):選取(qu)3個(ge)不同批(pi)次(ci)的試(shi)劑(ji)盒(he)分別對(dui)低、中、高值(zhi)定(ding)值樣本進行定(ding)量測(ce)定(ding),每個樣本使用(yong)同壹(yi)試(shi)劑(ji)盒(he)重(zhong)復(fu)測(ce)定(ding)8次(ci),分別計(ji)算不同濃(nong)度樣(yang)本的平均值(zhi)及SD值。

          批內(nei)差(cha): CV<10%

          批間(jian)差(cha): CV<12%

          牛(niu)70kDa熱(re)休克(ke)蛋白(bai)1B(HSPA1B)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)穩定性(xing)

          經測(ce)定(ding),試(shi)劑(ji)盒(he)在有(you)效期內(nei)按(an)推(tui)薦(jian)溫(wen)度保(bao)存,其活(huo)性(xing)降低率(lv)小於(yu)5%

          為(wei)減小外(wai)部因素(su)對(dui)試(shi)劑(ji)盒(he)破壞前(qian)後檢測(ce)值(zhi)的影(ying)響,實驗室(shi)的環(huan)境條件需(xu)盡量保持(chi)壹(yi)致(zhi),尤其(qi)是實驗室(shi)內(nei)溫(wen)度、濕度及溫(wen)育條件。其(qi)次(ci)由同(tong)壹(yi)實驗員(yuan)來(lai)進行操(cao)作可減少人為(wei)誤(wu)差(cha)。


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