產品(pin)名稱(cheng)：犬白(bai)介(jie)素1β(IL1β)ELISA試(shi)劑盒(he)

                                                       96T       僅供(gong)體外(wai)研(yan)究(jiu)使用，不用於臨(lin)床(chuang)診斷!

犬(quan)白(bai)介(jie)素1β(IL1β)ELISA試(shi)劑盒(he)

本(ben)試(shi)劑盒(he)運用雙(shuang)抗(kang)體夾心ELISA法(fa)定(ding)量測(ce)定(ding)犬血清、血漿、組(zu)織勻漿、細(xi)胞裂解(jie)液、細(xi)胞培養(yang)上清液和(he)其(qi)他(ta)生(sheng)物液體中犬白(bai)介(jie)素1β(IL1β)含量。

 檢測(ce)範(fan)圍(wei)

15.625-1000pg/mL

 *低檢測(ce)限(xian)

6.4pg/mL

 實驗(yan)原理

將(jiang)犬(quan)白(bai)介(jie)素1β(IL1β)抗(kang)體包(bao)被於96孔(kong)微(wei)孔(kong)板(ban)中(zhong)，制成(cheng)固(gu)相(xiang)載(zai)體(ti)，向(xiang)微(wei)孔(kong)中(zhong)分別(bie)加入(ru)標(biao)準(zhun)品(pin)或標(biao)本(ben)，其(qi)中(zhong)的(de)犬白(bai)介(jie)素1β(IL1β)與連(lian)接於固(gu)相(xiang)載(zai)體(ti)上的(de)抗(kang)體結(jie)合，然後加入(ru)生(sheng)物素化(hua)的(de)犬白(bai)介(jie)素1β(IL1β)抗(kang)體，將(jiang)未結合(he)的(de)生(sheng)物素化(hua)抗(kang)體洗(xi)凈(jing)後，加(jia)入(ru)HRP標(biao)記的(de)親(qin)和(he)素，再(zai)次徹(che)底洗(xi)滌後(hou)加入TMB底物顯(xian)色(se)。TMB在過(guo)氧(yang)化(hua)物酶的(de)催化(hua)下(xia)轉(zhuan)化(hua)成(cheng)藍色(se)，並(bing)在酸的(de)作(zuo)用(yong)下(xia)轉(zhuan)化(hua)成(cheng)*終(zhong)的(de)黃色(se)。顏(yan)色(se)的(de)深(shen)淺(qian)和(he)樣(yang)品(pin)中的(de)犬白(bai)介(jie)素1β(IL1β)呈正相(xiang)關(guan)。用(yong)酶(mei)標(biao)儀在450nm波(bo)長下(xia)測(ce)定(ding)吸光(guang)度(O.D.值(zhi))，計算(suan)樣(yang)品(pin)濃(nong)度。

 試(shi)劑盒(he)內(nei)容(rong)

犬(quan)白(bai)介(jie)素1β(IL1β)ELISA試(shi)劑盒(he)需(xu)自備(bei)的(de)設(she)備(bei)及(ji)試(shi)劑

1.         450±10nm濾(lv)光(guang)片的(de)酶(mei)標(biao)儀(建議(yi)儀(yi)器(qi)使(shi)用前提(ti)前預(yu)熱(re))

2.         單道(dao)或多(duo)道(dao)微(wei)量加液(ye)器(qi)及(ji)吸頭(tou)

3.         稀(xi)釋樣(yang)品(pin)的(de)EP管

4.         蒸(zheng)餾水或去(qu)離(li)子(zi)水

5.         吸水紙

6.         盛(sheng)放(fang)洗(xi)液的(de)容(rong)器(qi)

 試(shi)劑盒(he)的(de)儲(chu)存(cun)及(ji)有效(xiao)期

1.         未開封(feng)的(de)試(shi)劑盒(he)：所有試(shi)劑均按(an)試(shi)劑瓶標(biao)簽(qian)上所示(shi)保存(cun)。請註意(yi)，收(shou)到(dao)試(shi)劑盒(he)後請盡快(kuai)將(jiang)TMB 洗(xi)滌液(ye)，終止液(ye)保存(cun)於4℃，其(qi)他(ta)試(shi)劑保存(cun)於-20℃。

2.         使(shi)用後的(de)試(shi)劑盒(he)：剩(sheng)余試(shi)劑仍需(xu)按(an)照試(shi)劑瓶標(biao)簽(qian)所(suo)示(shi)的(de)溫(wen)度保存(cun)，開(kai)封(feng)後的(de)酶(mei)標(biao)板(ban)要(yao)加(jia)幹燥劑後密(mi)封保存(cun)於-20℃，避(bi)免(mian)潮濕(shi)。

註(zhu)意(yi)：

試(shi)劑盒(he)內(nei)酶(mei)標條(tiao)可拆卸(xie)，按實驗(yan)需(xu)求(qiu)可分多(duo)次(ci)使(shi)用(yong)；使(shi)用後的(de)剩(sheng)余試(shi)劑盒(he)建議(yi)在(zai)**實驗(yan)後(hou) 1個月(yue)內(nei)使(shi)用完(wan)畢(bi)。產品(pin)過(guo)期(qi)時間以盒(he)子(zi)上的(de)標(biao)簽(qian)為準，保質期內(nei)所(suo)有組(zu)分都(dou)確保是(shi)穩定(ding)的(de)。

犬白(bai)介(jie)素1β(IL1β)ELISA試(shi)劑盒(he)標本(ben)的(de)采集與保存(cun)

1.         血清：

將(jiang)收(shou)集(ji)於血(xue)清分離管的(de)全(quan)血標(biao)本(ben)在(zai)室溫(wen)放(fang)置(zhi) 2 小(xiao)時或 4^oC 過(guo)夜(ye)，然後 1000×g 離心 20 分鐘(zhong)，取上清即可，或將(jiang)上清置(zhi)於-20^oC 或-80^oC 保存(cun)，但(dan)應(ying)避(bi)免(mian)反復凍融。

2.         血(xue)漿(jiang)：

用 EDTA 或肝(gan)素(su)作為抗(kang)凝劑采集標本(ben)，並(bing)將(jiang)標(biao)本(ben)在(zai)采集後的(de) 30 分(fen)鐘(zhong)內(nei)於 2-8^oC 1000×g 離(li)心 15 分鐘(zhong)，取上清即可檢測(ce)，或將(jiang)上清置(zhi)於-20^oC 或-80^oC 保存(cun)，但(dan)應(ying)避(bi)免(mian)反復凍融。

3. 組(zu)織勻漿：

1） 取(qu)適(shi)量組(zu)織塊(kuai)，於預(yu)冷(leng)PBS（0.01mol/L, pH 7.0-7.2）中(zhong)清洗(xi)去除(chu)血液，稱(cheng)重後備(bei)用(yong)（組(zu)織塊(kuai)較(jiao)大(da)需(xu)先(xian)剪碎後再(zai)勻漿）；

2） 可同時選用(yong)多(duo)種(zhong)勻漿方(fang)法(fa)達到(dao)較(jiao)好的(de)破(po)碎效(xiao)果：首先(xian)將(jiang)組(zu)織塊(kuai)移(yi)入(ru)玻(bo)璃勻漿器(qi)，加(jia)入5-10mL 預(yu)冷(leng)PBS 進(jin)行(xing)充分研(yan)磨(mo)，該(gai)過(guo)程(cheng)需(xu)在(zai)冰上進(jin)行(xing)（有條(tiao)件實驗(yan)室可選用(yong)機器(qi)勻漿）；得(de)到的(de)勻漿液(ye)可再(zai)利用(yong)超(chao)聲破(po)碎或反復凍融 進(jin)壹步(bu)處(chu)理（超(chao)聲破(po)碎過(guo)程(cheng)中(zhong)註意(yi)冰浴(yu)降溫；反復凍融法(fa)可重復2 次）。

3） 將(jiang)制備(bei)好的(de)勻漿液(ye)於5000×g 離(li)心5 分鐘(zhong)，留(liu)取(qu)上清即可檢測(ce)。

4. 細(xi)胞裂解(jie)液：

1）貼(tie)壁(bi)細(xi)胞需(xu)要(yao)先(xian)用(yong)胰(yi)酶(mei)消化(hua)，離心收(shou)集(ji)細(xi)胞（懸浮(fu)細(xi)胞可直接(jie)離心收(shou)集(ji)）；

2）將(jiang)收(shou)集(ji)到的(de)細(xi)胞用冷(leng)PBS 洗(xi)3 次；

3）物理方法(fa)裂解(jie)細(xi)胞（可先超聲破(po)碎細(xi)胞，再(zai)反復凍融）：

i 超(chao)聲破(po)碎：取(qu)適(shi)量PBS 重懸細(xi)胞，用壹(yi)定(ding)功率的(de)超(chao)聲波(bo)處(chu)理細(xi)胞懸液(ye)，使細(xi)胞急劇(ju)震蕩破(po)裂。

ii 反復凍融：將(jiang)待(dai)破(po)碎的(de)細(xi)胞在-20 ^oC 以(yi)下(xia)冰凍，室溫(wen)融解(jie)，反復3 次，使細(xi)胞溶脹(zhang)破(po)碎。

4）將(jiang)標(biao)本(ben)於2-8 ^oC 1500×g 離心10 分鐘(zhong)，收(shou)集(ji)上清備(bei)用(yong)。

5. 細(xi)胞培養(yang)上清或其(qi)它生(sheng)物標本(ben)：

請 1000×g 離心 20 分鐘(zhong)，取上清即可檢測(ce)，或將(jiang)上清置(zhi)於-20^oC 或-80^oC 保存(cun)，但(dan)應(ying)避(bi)免(mian)反復凍融。

註(zhu)意(yi)：

1.         以上標本(ben)均(jun)需(xu)密(mi)封保存(cun)，4^oC保存(cun)應(ying)小(xiao)於1周(zhou)，-20^oC不應(ying)超(chao)過(guo)1個月(yue)，-80^oC不應(ying)超(chao)過(guo)2個月(yue)。

2.         標本(ben)使(shi)用(yong)前應(ying)緩(huan)慢均(jun)衡至(zhi)室溫(wen)，不應(ying)加(jia)熱(re)使(shi)之(zhi)融解(jie)。

3.         實驗(yan)前紅(hong)細(xi)胞裂解(jie)液必(bi)須用標(biao)準品(pin)稀釋液稀釋。

犬白(bai)介(jie)素1β(IL1β)ELISA試(shi)劑盒(he)試(shi)劑準備(bei)

1.         使(shi)用前將(jiang)所(suo)有的(de)試(shi)劑和(he)標本(ben)緩(huan)慢均(jun)衡至(zhi)室溫(wen)(18-25oC)，試(shi)劑不能直接(jie)在37oC溶(rong)解(jie)。

2.         標(biao)準(zhun)品(pin)(凍幹品(pin))：每瓶標(biao)準(zhun)品(pin)加入(ru)標準(zhun)品(pin)稀釋液1mL，蓋好後(hou)室溫(wen)靜置(zhi)大(da)約(yue)10分鐘(zhong)，同時反復顛倒(dao)/搓動(dong)以(yi)助(zhu)溶解(jie)，其(qi)濃(nong)度為1000pg/mL。準備(bei)7個稀(xi)釋標準品(pin)的(de)EP管，每個EP管中加(jia)入(ru)150μL的(de)標(biao)準(zhun)品(pin)稀釋液，如(ru)圖所示(shi)依(yi)次倍(bei)比稀(xi)釋成(cheng)不同的(de)梯(ti)度， 標(biao)準(zhun)品(pin)稀釋液(0pg/mL)直接(jie)作為空白(bai)孔(kong)。為保證實驗(yan)結(jie)果有效(xiao)性(xing)，每次(ci)實驗(yan)請使用新(xin)的(de)標(biao)準(zhun)品(pin)溶液(ye)。

3.         濃(nong)洗(xi)滌液(ye)：用580mL蒸餾水或去(qu)離(li)子(zi)水將(jiang)20mL濃(nong)洗(xi)滌液(ye)稀釋至600mL，進(jin)行(xing)30倍(bei)稀釋。

標本(ben)處(chu)理

1.         本(ben)公(gong)司(si)只對試(shi)劑盒(he)本(ben)身(shen)負(fu)責，不對因使(shi)用(yong)該(gai)試(shi)劑盒(he)所造成(cheng)的(de)樣(yang)本(ben)消(xiao)耗負責，請使用者使用前充分考(kao)慮到(dao)樣(yang)本(ben)的(de)可能使用(yong)量，預留(liu)充足的(de)樣(yang)本(ben)。

2.         實驗(yan)前應(ying)預(yu)測(ce)標(biao)本(ben)含量，如(ru)果標本(ben)濃(nong)度過(guo)高，應(ying)對標(biao)本(ben)進(jin)行(xing)稀釋，使稀釋後的(de)標(biao)本(ben)符(fu)合試(shi)劑盒(he)的(de)檢測(ce)範(fan)圍(wei)，計算(suan)時再(zai)乘以(yi)相(xiang)應(ying)的(de)稀(xi)釋倍(bei)數。

3.         若(ruo)所檢樣(yang)本(ben)不包(bao)含在說(shuo)明(ming)書(shu)所列(lie)樣(yang)本(ben)之(zhi)中，建議(yi)進(jin)行(xing)預實驗(yan)驗(yan)證其(qi)有效(xiao)性(xing)，並(bing)註意(yi)留(liu)存(cun)樣(yang)本(ben)。

4.         使(shi)用(yong)化(hua)學(xue)裂解(jie)液制備(bei)的(de)組(zu)織勻漿或細(xi)胞提取(qu)液可能會(hui)由(you)於某(mou)些化(hua)學(xue)物質的(de)引(yin)入(ru)導(dao)致  ELISA實驗(yan)結(jie)果偏(pian)差(cha)。

5.         若樣(yang)本(ben)為細(xi)胞培養(yang)上清，因該(gai)類樣(yang)本(ben)幹擾(rao)因素(su) 較(jiao)多(duo)，如(ru)：細(xi)胞狀(zhuang)態、細(xi)胞數量、采樣(yang)時間等，所以(yi)可能存(cun)在(zai)檢測(ce)不出的(de)情(qing)況。

6.         某(mou)些天(tian)然蛋白(bai)或重組(zu)蛋白(bai)，包(bao)括(kuo)原核(he)及真(zhen)核(he)重組(zu)蛋白(bai)，可能因為與本(ben)產品(pin)所使(shi)用的(de)檢測(ce)抗(kang)體及(ji)捕獲(huo)抗(kang)體不匹(pi)配(pei)，而(er)不被檢測(ce)出。

7.         建議(yi)使(shi)用新(xin)鮮(xian)樣(yang)本(ben)，保存(cun)時間過(guo)長(chang)可能會(hui)存(cun)在(zai)蛋白(bai)降解(jie)或變(bian)性(xing)導(dao)致實驗(yan)結(jie)果偏(pian)差(cha)。

犬白(bai)介(jie)素1β(IL1β)ELISA試(shi)劑盒(he)操作步(bu)驟(zhou)

1.         加樣(yang)：分別(bie)設空(kong)白(bai)孔(kong)（空(kong)白(bai)對照(zhao)孔(kong)不加樣(yang)品(pin)及酶(mei)標試(shi)劑，其(qi)余各(ge)步(bu)操作(zuo)相(xiang)同）、標(biao)準(zhun)孔(kong)、待(dai)測(ce)樣(yang)品(pin)孔(kong)。在(zai)酶標包(bao)被板(ban)上標準品(pin)準確加(jia)樣(yang)50μl，待(dai)測(ce)樣(yang)品(pin)孔(kong)中(zhong)先加樣(yang)品(pin)稀釋液40μl，然後再(zai)加待(dai)測(ce)樣(yang)品(pin)10μl（樣(yang)品(pin)*終稀(xi)釋度為5倍(bei)）。加樣(yang)將(jiang)樣(yang)品(pin)加於酶(mei)標(biao)板(ban)孔(kong)底部，盡量不觸及孔(kong)壁(bi)，輕(qing)輕(qing)晃(huang)動混勻。

2.         溫育(yu)：用封板(ban)膜(mo)封板(ban)後(hou)置(zhi)37℃溫(wen)育30分(fen)鐘(zhong)。  

3.         配液(ye)：將(jiang)20倍(bei)濃(nong)縮洗(xi)滌液(ye)用蒸餾水20倍(bei)稀釋後備(bei)用(yong)

4.         洗(xi)滌：小(xiao)心揭(jie)掉(diao)封(feng)板(ban)膜(mo)，棄去液(ye)體(ti)，甩幹，每孔(kong)加(jia)滿洗(xi)滌液(ye)，靜置(zhi)30秒後棄(qi)去，如(ru)此重復5次，拍幹。

5.         加(jia)酶(mei)：每(mei)孔(kong)加(jia)入酶標試(shi)劑50μl，空白(bai)孔(kong)除(chu)外(wai)。

6.         溫育：操作同3。

7.         洗(xi)滌：操(cao)作同5。

8.         顯(xian)色(se)：每孔(kong)先(xian)加入顯(xian)色(se)劑A50μl，再(zai)加入(ru)顯(xian)色(se)劑B50μl，輕(qing)輕(qing)震蕩混勻，37℃避光(guang)顯(xian)色(se)15分鐘(zhong).

9.         終止：每(mei)孔(kong)加(jia)終止液(ye)50μl，終(zhong)止反應(ying)（此(ci)時藍色(se)立轉(zhuan)黃色(se)）。

10.     測(ce)定(ding)：以空白(bai)空調零(ling)，450nm波(bo)長依(yi)序(xu)測(ce)量各孔(kong)的(de)吸(xi)光(guang)度（OD值(zhi)）。 測(ce)定(ding)應(ying)在(zai)加(jia)終(zhong)止液(ye)後(hou)15分(fen)鐘(zhong)以內(nei)進(jin)行(xing)。

註意(yi)：

1.         試(shi)劑準備(bei)：準備(bei)壹(yi)次(ci)實驗(yan)所(suo)需(xu)要(yao)的(de)酶(mei)標(biao)條(tiao)，其(qi)它的(de)可從微(wei)孔(kong)板(ban)上拆下(xia)，密(mi)封，按照(zhao)說(shuo)明(ming)書(shu)要(yao)求(qiu)保存(cun)，以(yi)備(bei)下(xia)次使用。

2.         加(jia)樣(yang)：實驗(yan)操(cao)作(zuo)中請使用壹次(ci)性(xing)的(de)吸(xi)頭(tou)，避免(mian)交叉(cha)汙染(ran)。加樣(yang)時註意(yi)不要(yao)有氣(qi)泡(pao)，將(jiang)樣(yang)品(pin)加於酶(mei)標(biao)板(ban)底部，盡量不觸及孔(kong)壁(bi)，輕(qing)輕(qing)晃(huang)動混勻。加樣(yang)或加(jia)試(shi)劑時，**個孔(kong)與*後(hou)壹個孔(kong)加(jia)樣(yang)之(zhi)間的(de)時間間隔如(ru)果太大(da)，將(jiang)會(hui)導(dao)致不同的(de)“預(yu)溫(wen)育”時間，從而(er)明(ming)顯(xian)地影(ying)響到測(ce)量值(zhi)的(de)準(zhun)確性(xing)及重復性(xing)。因此(ci)，壹(yi)次加(jia)樣(yang)時間(包(bao)括(kuo)標(biao)準(zhun)品(pin)及所(suo)有樣(yang)品(pin))*好控(kong)制在10分鐘(zhong)內(nei)。推薦(jian)設置(zhi)復孔(kong)進(jin)行(xing)實驗(yan)。

3.          溫育：為防止樣(yang)品(pin)蒸發，實驗(yan)時請將(jiang)加(jia)上蓋或覆(fu)膜(mo)的(de)酶(mei)標(biao)板(ban)置(zhi)於濕(shi)盒(he)內(nei)，以(yi)避免(mian)液體(ti)蒸(zheng)發，洗(xi)板(ban)後(hou)應(ying)盡快(kuai)進(jin)行(xing)下(xia)步(bu)操作(zuo)，任(ren)何時侯都(dou)應(ying)避(bi)免(mian)酶標(biao)板(ban)處(chu)於幹燥狀(zhuang)態，同時應(ying)嚴格遵守(shou)給定(ding)的(de)溫(wen)育(yu)時間和(he)溫度。

4.         洗(xi)滌：充分的(de)洗(xi)滌非(fei)常重要(yao)，在(zai)每(mei)次(ci)洗(xi)滌過(guo)程(cheng)中(zhong)，都(dou)要(yao)將(jiang)洗(xi)滌液(ye)完(wan)全(quan)甩幹。洗(xi)滌過(guo)程(cheng)中(zhong)反應(ying)孔(kong)中(zhong)殘(can)留(liu)的(de)洗(xi)滌液(ye)應(ying)在(zai)濾(lv)紙(zhi)上拍幹，勿(wu)將(jiang)濾(lv)紙(zhi)直接(jie)放入(ru)反應(ying)孔(kong)中(zhong)吸水，同時要(yao)消(xiao)除(chu)板(ban)底殘(can)留(liu)的(de)液(ye)體(ti)和(he)手指(zhi)印(yin)，避(bi)免(mian)影(ying)響*後的(de)酶(mei)標(biao)儀讀數。如(ru)果有自動洗(xi)板(ban)機，應(ying)在(zai)熟練使用(yong)後再(zai)用到(dao)正式實 驗(yan)過(guo)程(cheng)中(zhong)。

5.         反應(ying)時間的(de)控(kong)制：加(jia)入(ru)底物後請定(ding)時觀察(cha)反應(ying)孔(kong)的(de)顏(yan)色(se)變化(hua)(比如(ru)，每隔(ge)10分(fen)鐘(zhong)觀察(cha)壹(yi)次)，如(ru)顏(yan)色(se)較深(shen)，請提前加(jia)入(ru)終(zhong)止液(ye)終(zhong)止反應(ying)，避(bi)免(mian)反應(ying)過(guo)強從(cong)而(er)影(ying)響酶標(biao)儀(yi)光(guang)密(mi)度讀數。

6.         底物：底物請避光(guang)保存(cun)，在(zai)儲(chu)存(cun)和(he)溫育(yu)時避免(mian)強光(guang)直接(jie)照射。

7.         如(ru)果實驗(yan)室內(nei)濕(shi)度低(di)於60%，推薦(jian)使用(yong)加濕器(qi)提(ti)高濕度水平(ping)。

 實驗(yan)流程(cheng)

1.         實驗(yan)前標(biao)準(zhun)品(pin)、試(shi)劑及樣(yang)本(ben)的(de)準(zhun)備(bei)；

2.         加(jia)樣(yang)（標準品(pin)及樣(yang)本(ben)）50μL，37℃孵育30分鐘(zhong)；

3.         洗(xi)板(ban)5次(ci)，加(jia)酶(mei)標(biao)試(shi)劑50ul，37℃孵(fu)育半小(xiao)時；

4.         洗(xi)板(ban)5次(ci)；加(jia)入(ru)顯(xian)色(se)液A，B各(ge)50ul,37℃孵(fu)育顯(xian)色(se)15分鐘(zhong)

5.         加終(zhong)止液(ye)50μL，立即(ji)450nm讀數。

6.    計算(suan)

犬(quan)白(bai)介(jie)素1β(IL1β)ELISA試(shi)劑盒(he)計算(suan)

各(ge)標(biao)準(zhun)品(pin)及樣(yang)本(ben)O.D.值(zhi)扣除空(kong)白(bai)孔(kong)O.D.值(zhi)後作(zuo)圖(七(qi)點圖)，如(ru)設置(zhi)復孔(kong)，則(ze)應(ying)取(qu)其(qi)平(ping)均(jun)值(zhi)計算(suan)。以(yi)標(biao)準(zhun)品(pin)的(de)濃(nong)度為縱坐(zuo)標(或對數坐(zuo)標)，O.D.值(zhi)為橫(heng)坐(zuo)標(或對數坐(zuo)標），繪(hui)出標準曲線(xian)(*佳方程(cheng)式(shi)應(ying)依(yi)回(hui)歸(gui)方程(cheng)計(ji)算(suan)的(de)R2值(zhi)來定(ding)，以R2值(zhi)越趨近於1為好)。推薦(jian)使用(yong)專業制作曲線軟(ruan)件(jian)進(jin)行(xing)分析(xi)，如(ru)curve expert 1.30，根據樣(yang)品(pin)O.D.值(zhi)，由(you)標(biao)準(zhun)曲(qu)線查出相(xiang)應(ying)的(de)濃(nong)度，乘(cheng)以(yi)稀(xi)釋倍(bei)數；或用(yong)標(biao)準物的(de)濃(nong)度與O.D.值(zhi)計算(suan)出標準曲線(xian)的(de)回(hui)歸(gui)方程(cheng)式(shi)，將(jiang)樣(yang)品(pin)的(de)O.D.值(zhi)代入(ru)方程(cheng)式(shi)，計算(suan)出樣(yang)品(pin)濃(nong)度，再(zai)乘以(yi)稀(xi)釋倍(bei)數，即為樣(yang)品(pin)的(de)實際(ji)濃(nong)度。

 特(te)異性(xing)

本(ben)試(shi)劑盒(he)用於檢測(ce)犬(quan)白(bai)介(jie)素1β(IL1β)，經(jing)檢測(ce)與其(qi)它相(xiang)似(si)物質無明顯(xian)交(jiao)叉(cha)反應(ying)。

由(you)於受到(dao)技術(shu)及(ji)樣(yang)本(ben)來(lai)源的(de)限(xian)制，不可能完(wan)成(cheng)對所(suo)有相(xiang)關(guan)或相(xiang)似(si)物質交叉(cha)反應(ying)檢測(ce)，因此(ci)本(ben)試(shi)劑盒(he)有可能與未經(jing)檢測(ce)的(de)其(qi)它物質有交(jiao)叉(cha)反應(ying)。

 精密(mi)度

精(jing)密(mi)度用(yong)樣(yang)品(pin)測(ce)定(ding)值(zhi)的(de)變(bian)異系數CV表示(shi)。CV(%) = SD/mean×100

批(pi)內(nei)差(cha)：取同批(pi)次(ci)試(shi)劑盒(he)對低(di)、中(zhong)、高值(zhi)定(ding)值(zhi)樣(yang)本(ben)進(jin)行(xing)定(ding)量檢測(ce),每(mei)份樣(yang)本(ben)連(lian)續(xu)測(ce)定(ding)20 次，分別(bie)計算(suan)不同濃(nong)度樣(yang)本(ben)的(de)平(ping)均(jun)值(zhi)及SD值(zhi)。

批間差(cha)：選取(qu)3個不同批(pi)次(ci)的(de)試(shi)劑盒(he)分別(bie)對低(di)、中(zhong)、高值(zhi)定(ding)值(zhi)樣(yang)本(ben)進(jin)行(xing)定(ding)量測(ce)定(ding)，每個樣(yang)本(ben)使(shi)用(yong)同壹(yi)試(shi)劑盒(he)重復測(ce)定(ding)8次，分別(bie)計算(suan)不同濃(nong)度樣(yang)本(ben)的(de)平(ping)均(jun)值(zhi)及SD值(zhi)。

批內(nei)差(cha)： CV<10%

批間差(cha)： CV<12%

犬白(bai)介(jie)素1β(IL1β)ELISA試(shi)劑盒(he)穩定(ding)性(xing)

經(jing)測(ce)定(ding)，試(shi)劑盒(he)在有效(xiao)期內(nei)按(an)推薦(jian)溫度保存(cun)，其(qi)活(huo)性(xing)降低率小(xiao)於5%。

為減小(xiao)外(wai)部因素(su)對試(shi)劑盒(he)破(po)壞前後(hou)檢測(ce)值(zhi)的(de)影(ying)響，實驗(yan)室的(de)環境條(tiao)件需(xu)盡量保持(chi)壹致(zhi)，尤其(qi)是(shi)實驗(yan)室內(nei)溫(wen)度、濕(shi)度及(ji)溫(wen)育(yu)條(tiao)件。其(qi)次(ci)由(you)同壹(yi)實驗(yan)員來(lai)進(jin)行(xing)操作(zuo)可減少(shao)人(ren)為誤差(cha)。