產(chan)品(pin)名(ming)稱(cheng)：犬白(bai)介(jie)素(su)1受(shou)體拮(jie)抗劑(ji)(IL1RA)ELISA試劑(ji)盒

                                                       96T       僅(jin)供(gong)體外(wai)研究使(shi)用，不(bu)用於(yu)臨床診(zhen)斷(duan)!

犬(quan)白(bai)介(jie)素(su)1受(shou)體拮(jie)抗劑(ji)(IL1RA)ELISA試劑(ji)盒

本(ben)試劑(ji)盒運(yun)用雙(shuang)抗(kang)體夾心ELISA法(fa)定(ding)量(liang)測(ce)定(ding)犬(quan)血(xue)清、血漿、組(zu)織(zhi)勻漿、細(xi)胞裂(lie)解液(ye)、細(xi)胞培(pei)養上(shang)清液(ye)和其他生(sheng)物液(ye)體中(zhong)犬白(bai)介(jie)素(su)1受(shou)體拮(jie)抗劑(ji)(IL1RA)含量(liang)。

 檢(jian)測(ce)範(fan)圍

46.875-3000pg/mL

 *低(di)檢(jian)測(ce)限(xian)

14.35pg/mL

 實(shi)驗原理(li)

將(jiang)犬(quan)白(bai)介(jie)素(su)1受(shou)體拮(jie)抗劑(ji)(IL1RA)抗(kang)體包(bao)被於(yu)96孔微(wei)孔板(ban)中(zhong)，制(zhi)成(cheng)固(gu)相載(zai)體，向(xiang)微(wei)孔中(zhong)分別加入標(biao)準品(pin)或標(biao)本，其中(zhong)的犬(quan)白(bai)介(jie)素(su)1受(shou)體拮(jie)抗劑(ji)(IL1RA)與(yu)連接於固(gu)相載(zai)體上(shang)的抗(kang)體結合(he)，然後加入生(sheng)物素(su)化(hua)的犬(quan)白(bai)介(jie)素(su)1受(shou)體拮(jie)抗劑(ji)(IL1RA)抗(kang)體，將(jiang)未(wei)結合(he)的生(sheng)物素(su)化(hua)抗體洗(xi)凈(jing)後，加入HRP標(biao)記的親和素(su)，再次(ci)徹底(di)洗(xi)滌(di)後加入TMB底(di)物顯色(se)。TMB在過(guo)氧化(hua)物酶(mei)的(de)催化(hua)下(xia)轉(zhuan)化(hua)成(cheng)藍色(se)，並在(zai)酸的(de)作用下(xia)轉(zhuan)化(hua)成(cheng)*終的黃(huang)色(se)。顏色(se)的深(shen)淺和樣(yang)品(pin)中(zhong)的犬(quan)白(bai)介(jie)素(su)1受(shou)體拮(jie)抗劑(ji)(IL1RA)呈(cheng)正相關。用酶(mei)標(biao)儀(yi)在450nm波(bo)長(chang)下(xia)測(ce)定(ding)吸光度(du)(O.D.值(zhi))，計(ji)算(suan)樣(yang)品(pin)濃(nong)度(du)。

 試劑(ji)盒內容

犬(quan)白(bai)介(jie)素(su)1受(shou)體拮(jie)抗劑(ji)(IL1RA)ELISA試劑(ji)盒需(xu)自備的(de)設(she)備及試劑(ji)

1.         450±10nm濾(lv)光(guang)片的酶(mei)標(biao)儀(yi)(建議(yi)儀(yi)器使(shi)用前(qian)提前(qian)預(yu)熱(re))

2.         單道(dao)或(huo)多(duo)道(dao)微(wei)量(liang)加液器及吸頭

3.         稀釋(shi)樣(yang)品(pin)的(de)EP管(guan)

4.         蒸(zheng)餾水(shui)或(huo)去(qu)離子水(shui)

5.         吸水紙(zhi)

6.         盛放(fang)洗(xi)液(ye)的(de)容器

 試劑(ji)盒的(de)儲存(cun)及有效(xiao)期(qi)

1.         未(wei)開(kai)封的試劑(ji)盒：所(suo)有試劑(ji)均(jun)按(an)試劑(ji)瓶標(biao)簽上(shang)所示(shi)保(bao)存(cun)。請註(zhu)意(yi)，收(shou)到試劑(ji)盒後請盡(jin)快(kuai)將(jiang)TMB 洗(xi)滌(di)液(ye)，終止(zhi)液保(bao)存(cun)於4℃，其他試劑(ji)保(bao)存(cun)於-20℃。

2.         使(shi)用後的試劑(ji)盒：剩余(yu)試劑(ji)仍需(xu)按(an)照試劑(ji)瓶標(biao)簽所示(shi)的(de)溫度保(bao)存(cun)，開封後的酶(mei)標(biao)板(ban)要(yao)加幹燥(zao)劑(ji)後密封(feng)保(bao)存(cun)於-20℃，避免(mian)潮濕(shi)。

註(zhu)意(yi)：

試劑(ji)盒內酶(mei)標(biao)條(tiao)可(ke)拆卸，按(an)實驗需求(qiu)可分多(duo)次(ci)使(shi)用；使(shi)用後的剩余(yu)試劑(ji)盒建議(yi)在(zai)**實驗後 1個月(yue)內使(shi)用完(wan)畢。產品(pin)過(guo)期時(shi)間(jian)以盒子上(shang)的標(biao)簽為準(zhun)，保(bao)質(zhi)期(qi)內所有組分都(dou)確保(bao)是穩定的(de)。

犬(quan)白(bai)介(jie)素(su)1受(shou)體拮(jie)抗劑(ji)(IL1RA)ELISA試劑(ji)盒標(biao)本的(de)采集與(yu)保(bao)存(cun)

1.         血(xue)清：

將(jiang)收集於(yu)血(xue)清分離管(guan)的(de)全(quan)血(xue)標(biao)本在(zai)室溫放(fang)置 2 小(xiao)時或 4^oC 過夜，然後 1000×g 離心(xin) 20 分鐘，取(qu)上(shang)清即可，或將上(shang)清置於(yu)-20^oC 或(huo)-80^oC 保(bao)存(cun)，但應避免(mian)反(fan)復凍(dong)融。

2.         血(xue)漿：

用(yong) EDTA 或肝(gan)素(su)作(zuo)為(wei)抗(kang)凝(ning)劑(ji)采集標(biao)本，並(bing)將標(biao)本在(zai)采集後的 30 分鐘內於 2-8^oC 1000×g 離(li)心 15 分鐘，取(qu)上(shang)清即可檢(jian)測(ce)，或(huo)將上(shang)清置於(yu)-20^oC 或(huo)-80^oC 保(bao)存(cun)，但應避免(mian)反(fan)復凍(dong)融。

3. 組(zu)織(zhi)勻漿：

1） 取(qu)適量(liang)組(zu)織(zhi)塊(kuai)，於(yu)預(yu)冷(leng)PBS（0.01mol/L, pH 7.0-7.2）中(zhong)清洗(xi)去(qu)除血液(ye)，稱(cheng)重(zhong)後備用(yong)（組(zu)織(zhi)塊(kuai)較(jiao)大(da)需(xu)先剪碎後再勻漿）；

2） 可(ke)同時選(xuan)用多(duo)種(zhong)勻漿方(fang)法達到較好的(de)破(po)碎效(xiao)果(guo)：首先(xian)將組織(zhi)塊(kuai)移(yi)入(ru)玻(bo)璃(li)勻漿器，加入5-10mL 預(yu)冷PBS 進(jin)行(xing)充(chong)分研磨(mo)，該過(guo)程(cheng)需(xu)在冰上(shang)進行(xing)（有條(tiao)件實驗室可選(xuan)用機器勻漿）；得(de)到的勻漿液(ye)可再利用超聲(sheng)破(po)碎或(huo)反(fan)復凍(dong)融 進壹(yi)步(bu)處(chu)理(li)（超聲(sheng)破(po)碎過(guo)程(cheng)中(zhong)註(zhu)意(yi)冰(bing)浴降溫；反(fan)復凍(dong)融法可(ke)重(zhong)復2 次(ci)）。

3） 將(jiang)制(zhi)備好的(de)勻漿液(ye)於5000×g 離心5 分鐘，留(liu)取上(shang)清即可檢(jian)測(ce)。

4. 細(xi)胞裂(lie)解液(ye)：

1）貼(tie)壁細(xi)胞需(xu)要先(xian)用胰酶(mei)消(xiao)化(hua)，離心收集細(xi)胞（懸(xuan)浮細(xi)胞可(ke)直(zhi)接離心收(shou)集）；

2）將(jiang)收集到的細(xi)胞用(yong)冷PBS 洗(xi)3 次(ci)；

3）物理(li)方(fang)法(fa)裂解細(xi)胞（可(ke)先超聲(sheng)破(po)碎細(xi)胞，再反(fan)復凍(dong)融）：

i 超聲(sheng)破(po)碎：取(qu)適量(liang)PBS 重(zhong)懸(xuan)細(xi)胞，用(yong)壹定(ding)功率(lv)的超聲(sheng)波處(chu)理(li)細(xi)胞懸(xuan)液，使(shi)細(xi)胞急(ji)劇(ju)震蕩(dang)破(po)裂。

ii 反(fan)復凍(dong)融：將待(dai)破(po)碎的(de)細(xi)胞在(zai)-20 ^oC 以下(xia)冰(bing)凍(dong)，室溫融解，反(fan)復3 次(ci)，使(shi)細(xi)胞溶(rong)脹(zhang)破(po)碎。

4）將(jiang)標(biao)本於(yu)2-8 ^oC 1500×g 離(li)心10 分鐘，收(shou)集上(shang)清備用(yong)。

5. 細(xi)胞培(pei)養上(shang)清或(huo)其它(ta)生(sheng)物標(biao)本：

請(qing) 1000×g 離心(xin) 20 分鐘，取(qu)上(shang)清即可檢(jian)測(ce)，或(huo)將上(shang)清置於(yu)-20^oC 或(huo)-80^oC 保(bao)存(cun)，但應避免(mian)反(fan)復凍(dong)融。

註(zhu)意(yi)：

1.         以上(shang)標(biao)本均(jun)需(xu)密封(feng)保(bao)存(cun)，4^oC保(bao)存(cun)應小(xiao)於1周(zhou)，-20^oC不應超過(guo)1個月(yue)，-80^oC不應超過(guo)2個月(yue)。

2.         標(biao)本使(shi)用前(qian)應(ying)緩(huan)慢均(jun)衡至(zhi)室溫，不應(ying)加熱使(shi)之(zhi)融解。

3.         實(shi)驗前(qian)紅(hong)細(xi)胞裂(lie)解液(ye)必須(xu)用標(biao)準品(pin)稀釋(shi)液稀釋(shi)。

犬(quan)白(bai)介(jie)素(su)1受(shou)體拮(jie)抗劑(ji)(IL1RA)ELISA試劑(ji)盒試劑(ji)準備

1.         使(shi)用前(qian)將(jiang)所(suo)有的試劑(ji)和標(biao)本緩(huan)慢均(jun)衡至(zhi)室溫(18-25oC)，試劑(ji)不能(neng)直(zhi)接在37oC溶解(jie)。

2.         標(biao)準品(pin)(凍(dong)幹品(pin))：每瓶標(biao)準品(pin)加入標(biao)準品(pin)稀釋(shi)液1mL，蓋(gai)好後室溫靜置大(da)約(yue)10分鐘，同時反(fan)復顛(dian)倒(dao)/搓動(dong)以助溶解(jie)，其濃(nong)度為(wei)3000pg/mL。準(zhun)備7個(ge)稀釋(shi)標(biao)準品(pin)的EP管(guan)，每個EP管(guan)中(zhong)加入150μL的(de)標(biao)準品(pin)稀釋(shi)液，如(ru)圖所(suo)示(shi)依(yi)次(ci)倍(bei)比稀釋(shi)成(cheng)不同的梯(ti)度(du)， 標(biao)準品(pin)稀釋(shi)液(0pg/mL)直(zhi)接作為空白(bai)孔。為保(bao)證(zheng)實驗結果有效(xiao)性(xing)，每次(ci)實(shi)驗請使(shi)用新(xin)的標(biao)準品(pin)溶液。

3.         濃(nong)洗(xi)滌(di)液(ye)：用(yong)580mL蒸(zheng)餾水(shui)或(huo)去(qu)離子水(shui)將(jiang)20mL濃(nong)洗(xi)滌(di)液(ye)稀釋(shi)至600mL，進(jin)行30倍(bei)稀釋(shi)。

標(biao)本處(chu)理(li)

1.         本(ben)公司(si)只(zhi)對試劑(ji)盒本(ben)身(shen)負(fu)責(ze)，不對(dui)因使(shi)用該試劑(ji)盒所(suo)造(zao)成(cheng)的樣(yang)本(ben)消(xiao)耗(hao)負(fu)責(ze)，請使(shi)用者使(shi)用前(qian)充(chong)分考(kao)慮到樣(yang)本(ben)的(de)可(ke)能使(shi)用量(liang)，預(yu)留(liu)充(chong)足的樣(yang)本(ben)。

2.         實(shi)驗前(qian)應(ying)預(yu)測(ce)標(biao)本含(han)量(liang)，如(ru)果(guo)標(biao)本濃(nong)度過高，應對標(biao)本進(jin)行稀釋(shi)，使(shi)稀釋(shi)後的標(biao)本符(fu)合(he)試劑(ji)盒的(de)檢(jian)測(ce)範(fan)圍，計(ji)算(suan)時(shi)再乘(cheng)以相應(ying)的(de)稀釋(shi)倍(bei)數(shu)。

3.         若(ruo)所檢(jian)樣(yang)本(ben)不(bu)包(bao)含在說明書所(suo)列樣(yang)本(ben)之(zhi)中(zhong)，建議(yi)進(jin)行預(yu)實驗驗證其有效(xiao)性(xing)，並註(zhu)意(yi)留(liu)存(cun)樣(yang)本(ben)。

4.         使(shi)用化(hua)學裂解(jie)液制(zhi)備的(de)組(zu)織(zhi)勻漿或(huo)細(xi)胞提取液可(ke)能(neng)會由於某(mou)些(xie)化(hua)學物質(zhi)的(de)引(yin)入導致  ELISA實(shi)驗結果偏(pian)差(cha)。

5.         若(ruo)樣(yang)本(ben)為(wei)細(xi)胞培(pei)養上(shang)清，因該類樣(yang)本(ben)幹擾因素(su) 較(jiao)多(duo)，如(ru)：細(xi)胞狀(zhuang)態(tai)、細(xi)胞數(shu)量(liang)、采(cai)樣(yang)時(shi)間(jian)等(deng)，所以可能(neng)存(cun)在檢(jian)測(ce)不(bu)出(chu)的(de)情(qing)況。

6.         某(mou)些(xie)天然蛋(dan)白(bai)或重(zhong)組(zu)蛋白(bai)，包括(kuo)原核(he)及真核重組(zu)蛋(dan)白(bai)，可能(neng)因為與本產(chan)品所使(shi)用的(de)檢(jian)測(ce)抗(kang)體及捕(bu)獲(huo)抗(kang)體不(bu)匹(pi)配(pei)，而不被(bei)檢(jian)測(ce)出(chu)。

7.         建議(yi)使(shi)用新(xin)鮮(xian)樣(yang)本(ben)，保(bao)存(cun)時間(jian)過(guo)長(chang)可能(neng)會存(cun)在蛋白(bai)降解或變(bian)性(xing)導致實(shi)驗結果偏(pian)差(cha)。

犬(quan)白(bai)介(jie)素(su)1受(shou)體拮(jie)抗劑(ji)(IL1RA)ELISA試劑(ji)盒操作(zuo)步(bu)驟

1.         加樣(yang)：分別設(she)空白(bai)孔（空白(bai)對照(zhao)孔不加樣(yang)品(pin)及酶(mei)標(biao)試劑(ji)，其余(yu)各步(bu)操作(zuo)相同）、標(biao)準孔、待測(ce)樣(yang)品(pin)孔。在酶(mei)標(biao)包被(bei)板(ban)上(shang)標(biao)準品(pin)準確加樣(yang)50μl，待(dai)測(ce)樣(yang)品(pin)孔中(zhong)先加樣(yang)品(pin)稀釋(shi)液40μl，然後再加待測(ce)樣(yang)品(pin)10μl（樣(yang)品(pin)*終稀釋(shi)度為(wei)5倍(bei)）。加樣(yang)將(jiang)樣(yang)品(pin)加於酶(mei)標(biao)板(ban)孔底部(bu)，盡(jin)量(liang)不(bu)觸及孔壁，輕(qing)輕晃動(dong)混勻。

2.         溫(wen)育：用(yong)封(feng)板(ban)膜(mo)封板(ban)後置37℃溫(wen)育30分鐘。  

3.         配(pei)液：將(jiang)20倍(bei)濃縮(suo)洗(xi)滌(di)液(ye)用蒸(zheng)餾(liu)水(shui)20倍(bei)稀釋(shi)後備用(yong)

4.         洗(xi)滌(di)：小(xiao)心揭(jie)掉(diao)封(feng)板(ban)膜(mo)，棄去(qu)液(ye)體，甩(shuai)幹，每孔加滿洗(xi)滌(di)液(ye)，靜置30秒後棄去(qu)，如(ru)此(ci)重(zhong)復(fu)5次(ci)，拍幹。

5.         加酶(mei)：每孔加入酶(mei)標(biao)試劑(ji)50μl，空白(bai)孔除外(wai)。

6.         溫(wen)育：操作(zuo)同3。

7.         洗(xi)滌(di)：操作(zuo)同5。

8.         顯色(se)：每孔先加入顯色(se)劑(ji)A50μl，再加入顯色(se)劑(ji)B50μl，輕輕(qing)震蕩(dang)混勻，37℃避光(guang)顯色(se)15分鐘.

9.         終止(zhi)：每孔加終止(zhi)液50μl，終止(zhi)反(fan)應（此(ci)時(shi)藍色(se)立轉(zhuan)黃(huang)色(se)）。

10.     測(ce)定：以空白(bai)空調零(ling)，450nm波(bo)長(chang)依(yi)序測量(liang)各(ge)孔的吸光度(du)（OD值(zhi)）。 測(ce)定(ding)應(ying)在(zai)加終止(zhi)液後15分鐘以內進行(xing)。

註(zhu)意(yi)：

1.         試劑(ji)準備：準(zhun)備壹(yi)次(ci)實(shi)驗所需(xu)要的(de)酶(mei)標(biao)條(tiao)，其它(ta)的可(ke)從(cong)微(wei)孔板(ban)上(shang)拆下(xia)，密(mi)封(feng)，按(an)照(zhao)說明書要(yao)求保(bao)存(cun)，以備下(xia)次(ci)使(shi)用。

2.         加樣(yang)：實(shi)驗操作(zuo)中(zhong)請使(shi)用壹(yi)次(ci)性(xing)的(de)吸頭，避免(mian)交叉(cha)汙(wu)染(ran)。加樣(yang)時(shi)註(zhu)意(yi)不(bu)要有氣泡，將樣(yang)品(pin)加於酶(mei)標(biao)板(ban)底(di)部(bu)，盡(jin)量(liang)不(bu)觸及孔壁，輕(qing)輕晃動(dong)混勻。加樣(yang)或(huo)加試劑(ji)時，**個(ge)孔與*後壹個(ge)孔加樣(yang)之(zhi)間(jian)的(de)時間(jian)間(jian)隔如(ru)果(guo)太大，將(jiang)會導致不(bu)同的“預(yu)溫(wen)育”時(shi)間(jian)，從(cong)而明顯地(di)影響到測量(liang)值(zhi)的(de)準(zhun)確(que)性(xing)及重復性。因此，壹次(ci)加樣(yang)時(shi)間(jian)(包(bao)括(kuo)標(biao)準品(pin)及所有樣(yang)品(pin))*好控制(zhi)在10分鐘內。推(tui)薦(jian)設置復(fu)孔進行(xing)實驗。

3.          溫(wen)育：為(wei)防止(zhi)樣(yang)品(pin)蒸(zheng)發，實(shi)驗時請(qing)將加上(shang)蓋或(huo)覆(fu)膜(mo)的酶(mei)標(biao)板(ban)置於(yu)濕(shi)盒(he)內，以避免(mian)液體蒸(zheng)發，洗(xi)板(ban)後應盡(jin)快(kuai)進(jin)行(xing)下(xia)步(bu)操作(zuo)，任(ren)何時(shi)侯(hou)都(dou)應避免(mian)酶(mei)標(biao)板(ban)處(chu)於幹燥(zao)狀(zhuang)態(tai)，同時應(ying)嚴(yan)格遵(zun)守給(gei)定的溫育時(shi)間(jian)和溫(wen)度(du)。

4.         洗(xi)滌(di)：充(chong)分的洗(xi)滌(di)非(fei)常重要(yao)，在每次(ci)洗(xi)滌(di)過(guo)程(cheng)中(zhong)，都(dou)要將(jiang)洗(xi)滌(di)液(ye)完全(quan)甩(shuai)幹。洗(xi)滌(di)過(guo)程(cheng)中(zhong)反(fan)應孔中(zhong)殘留(liu)的洗(xi)滌(di)液(ye)應在(zai)濾(lv)紙(zhi)上(shang)拍幹，勿將(jiang)濾(lv)紙(zhi)直(zhi)接放(fang)入反(fan)應孔中(zhong)吸水，同時要(yao)消(xiao)除板(ban)底(di)殘留的液(ye)體和手(shou)指(zhi)印(yin)，避免(mian)影響*後的酶(mei)標(biao)儀(yi)讀數(shu)。如(ru)果(guo)有自動(dong)洗(xi)板(ban)機，應在(zai)熟(shu)練(lian)使(shi)用後再用到正式(shi)實 驗過程(cheng)中(zhong)。

5.         反(fan)應時(shi)間(jian)的(de)控制(zhi)：加入底(di)物後請定(ding)時(shi)觀(guan)察反(fan)應孔的顏(yan)色(se)變(bian)化(hua)(比如(ru)，每隔10分鐘觀(guan)察壹次(ci))，如(ru)顏(yan)色(se)較深(shen)，請提前(qian)加入終止(zhi)液終止(zhi)反(fan)應，避免(mian)反(fan)應過(guo)強從而影響酶(mei)標(biao)儀(yi)光密(mi)度讀數(shu)。

6.         底(di)物：底(di)物請(qing)避光(guang)保(bao)存(cun)，在儲存(cun)和溫(wen)育時(shi)避免(mian)強光直(zhi)接照射(she)。

7.         如(ru)果(guo)實(shi)驗室內濕度(du)低(di)於(yu)60%，推(tui)薦(jian)使(shi)用加濕器提高濕度(du)水(shui)平。

 實(shi)驗流程(cheng)

1.         實(shi)驗前(qian)標(biao)準品(pin)、試劑(ji)及樣(yang)本(ben)的(de)準(zhun)備；

2.         加樣(yang)（標(biao)準品(pin)及樣(yang)本(ben)）50μL，37℃孵(fu)育30分鐘；

3.         洗(xi)板(ban)5次(ci)，加酶(mei)標(biao)試劑(ji)50ul，37℃孵(fu)育半(ban)小(xiao)時；

4.         洗(xi)板(ban)5次(ci)；加入顯色(se)液A，B各(ge)50ul,37℃孵(fu)育顯色(se)15分鐘

5.         加終止(zhi)液50μL，立即450nm讀數(shu)。

6.    計(ji)算

犬(quan)白(bai)介(jie)素(su)1受(shou)體拮(jie)抗劑(ji)(IL1RA)ELISA試劑(ji)盒計(ji)算

各(ge)標(biao)準品(pin)及樣(yang)本(ben)O.D.值(zhi)扣(kou)除空白(bai)孔O.D.值(zhi)後作圖(七點圖)，如(ru)設(she)置復(fu)孔，則應取(qu)其平(ping)均(jun)值(zhi)計(ji)算(suan)。以標(biao)準品(pin)的濃度為縱坐(zuo)標(biao)(或對(dui)數(shu)坐(zuo)標(biao))，O.D.值(zhi)為(wei)橫(heng)坐(zuo)標(biao)(或對(dui)數(shu)坐(zuo)標(biao)），繪(hui)出(chu)標(biao)準曲(qu)線(xian)(*佳方程(cheng)式(shi)應依(yi)回歸方程(cheng)計(ji)算的R2值(zhi)來定，以R2值(zhi)越(yue)趨(qu)近(jin)於(yu)1為好)。推(tui)薦(jian)使(shi)用專業(ye)制(zhi)作曲(qu)線(xian)軟(ruan)件進行(xing)分析，如(ru)curve expert 1.30，根(gen)據(ju)樣(yang)品(pin)O.D.值(zhi)，由標(biao)準曲(qu)線(xian)查出(chu)相應(ying)的(de)濃度(du)，乘(cheng)以稀釋(shi)倍(bei)數(shu)；或(huo)用標(biao)準物的(de)濃度(du)與(yu)O.D.值(zhi)計(ji)算(suan)出(chu)標(biao)準曲(qu)線(xian)的回歸方程(cheng)式(shi)，將樣(yang)品(pin)的(de)O.D.值(zhi)代(dai)入(ru)方(fang)程(cheng)式(shi)，計算出(chu)樣(yang)品(pin)濃(nong)度(du)，再乘(cheng)以稀釋(shi)倍(bei)數(shu)，即為樣(yang)品(pin)的(de)實(shi)際濃度。

 特(te)異性(xing)

本(ben)試劑(ji)盒用(yong)於檢(jian)測(ce)犬(quan)白(bai)介(jie)素(su)1受(shou)體拮(jie)抗劑(ji)(IL1RA)，經檢(jian)測(ce)與(yu)其它(ta)相似物質(zhi)無明顯交叉(cha)反(fan)應。

由於受(shou)到技術(shu)及樣(yang)本(ben)來源(yuan)的(de)限(xian)制(zhi)，不可能(neng)完(wan)成(cheng)對所(suo)有相關或相似物質(zhi)交叉(cha)反(fan)應檢(jian)測(ce)，因此本試劑(ji)盒有可能(neng)與(yu)未(wei)經檢(jian)測(ce)的(de)其它(ta)物質(zhi)有交叉(cha)反(fan)應。

 精(jing)密度(du)

精(jing)密度(du)用(yong)樣(yang)品(pin)測(ce)定(ding)值(zhi)的(de)變(bian)異(yi)系數(shu)CV表(biao)示。CV(%) = SD/mean×100

批(pi)內差：取(qu)同批(pi)次(ci)試劑(ji)盒對(dui)低(di)、中(zhong)、高值(zhi)定(ding)值(zhi)樣(yang)本(ben)進(jin)行(xing)定量(liang)檢(jian)測(ce),每份(fen)樣(yang)本(ben)連續(xu)測定20 次(ci)，分別計(ji)算不(bu)同濃度(du)樣(yang)本(ben)的(de)平(ping)均(jun)值(zhi)及SD值(zhi)。

批(pi)間(jian)差(cha)：選(xuan)取3個(ge)不同批(pi)次(ci)的(de)試劑(ji)盒分別對(dui)低(di)、中(zhong)、高值(zhi)定(ding)值(zhi)樣(yang)本(ben)進(jin)行(xing)定量(liang)測(ce)定(ding)，每個樣(yang)本(ben)使(shi)用同壹試劑(ji)盒重(zhong)復測定8次(ci)，分別計(ji)算不(bu)同濃度(du)樣(yang)本(ben)的(de)平(ping)均(jun)值(zhi)及SD值(zhi)。

批(pi)內差： CV<10%

批(pi)間(jian)差(cha)： CV<12%

犬(quan)白(bai)介(jie)素(su)1受(shou)體拮(jie)抗劑(ji)(IL1RA)ELISA試劑(ji)盒穩定性(xing)

經測定(ding)，試劑(ji)盒在(zai)有效(xiao)期(qi)內按推(tui)薦(jian)溫度(du)保(bao)存(cun)，其活性(xing)降低(di)率(lv)小(xiao)於5%。

為(wei)減小(xiao)外(wai)部(bu)因素(su)對(dui)試劑(ji)盒破(po)壞(huai)前(qian)後檢(jian)測(ce)值(zhi)的(de)影響，實驗室的環(huan)境(jing)條(tiao)件需盡(jin)量(liang)保(bao)持(chi)壹致，尤(you)其是實(shi)驗室內溫度(du)、濕度(du)及溫育條(tiao)件。其次(ci)由同壹實(shi)驗員來進行(xing)操作(zuo)可(ke)減少(shao)人(ren)為(wei)誤差。