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授權代(dai)理(li)品(pin)牌
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ELISA試劑(ji)盒(he)
- 農(nong)殘檢(jian)測試劑(ji)盒(he)
- 馬(ma)ELISA試劑(ji)盒(he)
- 牛(niu)ELISA試劑(ji)盒(he)
- 魚ELISA試劑(ji)盒(he)
- 人(ren)ELISA試劑(ji)盒(he)/Human
- 小(xiao)鼠(shu)ELISA試劑(ji)盒(he)/Mouse
- 大(da)鼠(shu)ELISA試劑(ji)盒(he)/Rat
- 羊ELISA試劑(ji)盒(he)/Sheep
- 兔ELISA試劑(ji)盒(he)/ Rabbi...
- 豬(zhu)ELISA試劑(ji)盒(he)/Porcin...
- 豚(tun)鼠(shu)ELISA試劑(ji)盒(he)/Guine...
- 狗(gou)ELISA試劑(ji)盒(he)/ Canin...
- 雞(ji)ELISA試劑(ji)盒(he)/Chicke...
- 鴨(ya)ELISA試劑(ji)盒(he)
- 植(zhi)物(wu)ELISA試劑(ji)盒(he)
- 猴(hou)ELISA試劑(ji)盒(he)/ Monke...
- 其(qi)他ELISA試劑(ji)盒(he)
- 抗(kang)體
- 蛋白
- CLIA試劑(ji)盒(he)
- 細胞生物(wu)學(xue)
- 分(fen)子生物學(xue)/常用試劑(ji)
96T 僅(jin)供(gong)體外(wai)研(yan)究使用,不用於臨床診(zhen)斷(duan)!
犬窖蛋白(CAV1)ELISA試劑(ji)盒(he)
本試劑(ji)盒(he)運(yun)用雙抗體夾(jia)心ELISA法定(ding)量(liang)測定(ding)犬(quan)血(xue)清(qing)、血(xue)漿、組織(zhi)勻漿(jiang)、細(xi)胞裂解(jie)液(ye)、細(xi)胞培養(yang)上清(qing)液(ye)和其(qi)他生物(wu)液(ye)體中犬窖蛋白(CAV1)含量(liang)。
檢(jian)測範(fan)圍
0.156-10ng/mL
*低(di)檢(jian)測限(xian)
0.064ng/mL
實(shi)驗原理(li)
將犬窖蛋白(CAV1)抗體包被於96孔(kong)微孔板中,制(zhi)成固(gu)相載體,向微孔中分(fen)別(bie)加(jia)入(ru)標(biao)準品(pin)或(huo)標(biao)本,其(qi)中(zhong)的犬窖蛋白(CAV1)與(yu)連接(jie)於固(gu)相載體上的抗體結(jie)合,然(ran)後(hou)加(jia)入(ru)生(sheng)物素化的犬窖蛋白(CAV1)抗體,將未結(jie)合的(de)生(sheng)物(wu)素化抗體洗凈後(hou),加(jia)入(ru)HRP標(biao)記的(de)親和素,再(zai)次(ci)徹底(di)洗滌(di)後(hou)加(jia)入(ru)TMB底(di)物顯色(se)。TMB在過氧(yang)化物酶的催(cui)化下轉化成藍色(se),並在酸(suan)的(de)作用下轉化成*終的黃(huang)色(se)。顏色(se)的深淺(qian)和樣品(pin)中(zhong)的(de)犬窖蛋白(CAV1)呈正相關(guan)。用酶標(biao)儀在(zai)450nm波長下測定(ding)吸(xi)光度(O.D.值(zhi)),計算(suan)樣品(pin)濃度。
試劑(ji)盒(he)內(nei)容(rong)
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試劑(ji)名稱(cheng) |
數量(liang) |
試劑(ji)名稱(cheng) |
數量(liang) |
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96孔板(預(yu)包(bao)被) |
1 |
96孔板覆(fu)膜 |
2 |
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標(biao)準品(pin) |
0.5ml×1 |
標(biao)準品(pin)稀(xi)釋液(ye) |
1.5ml×1瓶 |
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顯色(se)劑A液(ye) |
6ml×1瓶 |
樣品(pin)稀(xi)釋液(ye) |
6ml×1瓶 |
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顯色(se)劑B液(ye) |
6ml×1瓶 |
終止液(ye) |
6ml×1瓶 |
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酶標(biao)試劑(ji) |
6ml×1瓶 |
密(mi)封袋(dai) |
1 |
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濃洗滌(di)液(ye)(30×) |
1×20mL |
使用說(shuo)明(ming)書(shu) |
1 |
犬窖蛋白(CAV1)ELISA試劑(ji)盒(he)需(xu)自備(bei)的(de)設備(bei)及(ji)試劑(ji)
1. 450±10nm濾(lv)光片(pian)的(de)酶(mei)標(biao)儀(建(jian)議(yi)儀(yi)器使用前提前預(yu)熱(re))
2. 單(dan)道或(huo)多道微量(liang)加(jia)液(ye)器及(ji)吸(xi)頭
3. 稀(xi)釋樣品(pin)的(de)EP管(guan)
4. 蒸(zheng)餾水或(huo)去(qu)離(li)子(zi)水
5. 吸(xi)水紙
6. 盛放(fang)洗液(ye)的(de)容(rong)器
試劑(ji)盒(he)的(de)儲(chu)存(cun)及有(you)效(xiao)期
1. 未開封的(de)試劑(ji)盒(he):所(suo)有(you)試劑(ji)均按(an)試劑(ji)瓶標(biao)簽上(shang)所(suo)示(shi)保存(cun)。請註(zhu)意(yi),收到試劑(ji)盒(he)後(hou)請(qing)盡快將(jiang)TMB 洗滌(di)液(ye),終止液(ye)保存(cun)於4℃,其(qi)他試劑(ji)保存(cun)於-20℃。
2. 使用後(hou)的(de)試劑(ji)盒(he):剩(sheng)余(yu)試劑(ji)仍(reng)需按(an)照試劑(ji)瓶標(biao)簽所(suo)示(shi)的溫度保存(cun),開封後(hou)的(de)酶(mei)標(biao)板要(yao)加(jia)幹(gan)燥(zao)劑後(hou)密(mi)封保存(cun)於-20℃,避免(mian)潮濕(shi)。
註(zhu)意(yi):
試劑(ji)盒(he)內(nei)酶(mei)標(biao)條(tiao)可拆(chai)卸,按(an)實(shi)驗需(xu)求(qiu)可(ke)分(fen)多次(ci)使用;使用後(hou)的(de)剩(sheng)余(yu)試劑(ji)盒(he)建(jian)議(yi)在(zai)**實(shi)驗後(hou) 1個月內使用完畢(bi)。產(chan)品(pin)過期時間(jian)以盒(he)子(zi)上(shang)的(de)標(biao)簽為(wei)準,保質期內所(suo)有(you)組分(fen)都確保是(shi)穩定(ding)的(de)。
犬窖蛋白(CAV1)ELISA試劑(ji)盒(he)標(biao)本的(de)采集與(yu)保存(cun)
1. 血清:
將收集(ji)於(yu)血清(qing)分(fen)離管(guan)的全血(xue)標(biao)本在(zai)室(shi)溫放(fang)置(zhi) 2 小時或(huo) 4oC 過夜,然(ran)後(hou) 1000×g 離(li)心 20 分(fen)鐘,取上清(qing)即(ji)可,或(huo)將上清置(zhi)於-20oC 或(huo)-80oC 保存(cun),但(dan)應避免(mian)反(fan)復凍融(rong)。
2. 血漿:
用 EDTA 或(huo)肝素作為(wei)抗(kang)凝劑(ji)采集標(biao)本,並(bing)將標(biao)本在(zai)采集後(hou)的(de) 30 分(fen)鐘內於 2-8oC 1000×g 離(li)心 15 分(fen)鐘,取上清(qing)即(ji)可檢(jian)測,或(huo)將上清置(zhi)於-20oC 或(huo)-80oC 保存(cun),但(dan)應避免(mian)反(fan)復凍融(rong)。
3. 組織(zhi)勻漿(jiang):
1) 取適量(liang)組織(zhi)塊(kuai),於預(yu)冷(leng)PBS(0.01mol/L, pH 7.0-7.2)中(zhong)清洗去(qu)除(chu)血(xue)液(ye),稱(cheng)重後(hou)備(bei)用(組織(zhi)塊(kuai)較大(da)需先剪(jian)碎(sui)後(hou)再(zai)勻漿(jiang));
2) 可同(tong)時(shi)選用多種勻漿(jiang)方(fang)法達到較好(hao)的破(po)碎效(xiao)果:首先將組(zu)織(zhi)塊(kuai)移入玻(bo)璃(li)勻漿(jiang)器,加(jia)入(ru)5-10mL 預(yu)冷(leng)PBS 進(jin)行充分(fen)研(yan)磨,該過程(cheng)需在冰上(shang)進(jin)行(有(you)條(tiao)件實(shi)驗室(shi)可選用機器勻漿(jiang));得(de)到的(de)勻漿(jiang)液(ye)可(ke)再(zai)利用超(chao)聲(sheng)破(po)碎或(huo)反(fan)復凍融(rong) 進(jin)壹步處(chu)理(li)(超(chao)聲(sheng)破(po)碎過程(cheng)中註(zhu)意(yi)冰浴(yu)降溫;反(fan)復凍融(rong)法可重復2 次(ci))。
3) 將制(zhi)備(bei)好(hao)的(de)勻漿(jiang)液(ye)於(yu)5000×g 離(li)心5 分(fen)鐘,留(liu)取上清(qing)即(ji)可檢(jian)測。
4. 細胞裂解(jie)液(ye):
1)貼(tie)壁細(xi)胞需要(yao)先用胰(yi)酶消化,離心收集(ji)細(xi)胞(懸(xuan)浮細(xi)胞可直(zhi)接(jie)離(li)心收集(ji));
2)將收集(ji)到的(de)細胞用冷(leng)PBS 洗3 次(ci);
3)物理(li)方(fang)法裂解(jie)細胞(可先超(chao)聲(sheng)破(po)碎細胞,再反(fan)復凍融(rong)):
i 超(chao)聲(sheng)破(po)碎:取適量(liang)PBS 重懸(xuan)細胞,用壹定(ding)功(gong)率的(de)超(chao)聲(sheng)波處理(li)細(xi)胞懸(xuan)液(ye),使細胞急劇震蕩(dang)破(po)裂。
ii 反(fan)復凍融(rong):將(jiang)待破(po)碎的細(xi)胞在-20 oC 以下冰凍(dong),室(shi)溫融(rong)解(jie),反(fan)復3 次(ci),使細胞溶脹(zhang)破(po)碎。
4)將標(biao)本於(yu)2-8 oC 1500×g 離心10 分(fen)鐘,收集(ji)上(shang)清備(bei)用。
5. 細胞培養(yang)上清(qing)或(huo)其(qi)它生物標(biao)本:
請 1000×g 離心 20 分(fen)鐘,取上清(qing)即(ji)可檢(jian)測,或(huo)將上清置(zhi)於-20oC 或(huo)-80oC 保存(cun),但(dan)應避免(mian)反(fan)復凍融(rong)。
註(zhu)意(yi):
1. 以上標(biao)本均需密(mi)封保存(cun),4oC保存(cun)應小於(yu)1周(zhou),-20oC不應超(chao)過1個月,-80oC不應超(chao)過2個月。
2. 標(biao)本使用前應緩慢均衡(heng)至室(shi)溫,不(bu)應加(jia)熱(re)使之融(rong)解(jie)。
3. 實(shi)驗前紅(hong)細(xi)胞裂解(jie)液(ye)必須(xu)用標(biao)準品(pin)稀(xi)釋液(ye)稀(xi)釋。
犬窖蛋白(CAV1)ELISA試劑(ji)盒(he)試劑(ji)準備(bei)
1. 使用前將(jiang)所(suo)有(you)的試劑(ji)和標(biao)本緩(huan)慢均衡(heng)至室(shi)溫(18-25oC),試劑(ji)不能(neng)直(zhi)接(jie)在(zai)37oC溶(rong)解(jie)。
2. 標(biao)準品(pin)(凍幹品):每(mei)瓶(ping)標(biao)準品(pin)加(jia)入(ru)標(biao)準品(pin)稀(xi)釋液(ye)1mL,蓋(gai)好(hao)後(hou)室(shi)溫靜(jing)置(zhi)大約10分(fen)鐘,同(tong)時(shi)反(fan)復顛倒(dao)/搓(cuo)動以助(zhu)溶解(jie),其(qi)濃度為(wei)10ng/mL。準(zhun)備(bei)7個稀(xi)釋標(biao)準品(pin)的EP管(guan),每(mei)個EP管(guan)中加(jia)入(ru)150μL的(de)標(biao)準品(pin)稀(xi)釋液(ye),如圖所(suo)示(shi)依(yi)次(ci)倍(bei)比稀(xi)釋成不(bu)同(tong)的(de)梯度, 標(biao)準品(pin)稀(xi)釋液(ye)(0pg/mL)直(zhi)接(jie)作為(wei)空(kong)白孔(kong)。為保證實(shi)驗結(jie)果有(you)效(xiao)性,每(mei)次(ci)實(shi)驗請(qing)使用新的標(biao)準品(pin)溶液(ye)。
3. 濃洗滌(di)液(ye):用580mL蒸(zheng)餾水或(huo)去(qu)離(li)子(zi)水將(jiang)20mL濃洗滌(di)液(ye)稀(xi)釋至600mL,進行30倍稀(xi)釋。
標(biao)本處(chu)理(li)
1. 本公(gong)司只(zhi)對(dui)試劑(ji)盒(he)本身(shen)負責(ze),不對(dui)因(yin)使用該試劑(ji)盒(he)所(suo)造成的樣本消(xiao)耗負責(ze),請使用者使用前充(chong)分(fen)考慮(lv)到樣本的(de)可能(neng)使用量(liang),預(yu)留(liu)充足(zu)的樣本。
2. 實(shi)驗前應預(yu)測(ce)標(biao)本含(han)量(liang),如果標(biao)本濃度過高(gao),應對(dui)標(biao)本進(jin)行稀(xi)釋,使稀(xi)釋後(hou)的(de)標(biao)本符(fu)合試劑(ji)盒(he)的(de)檢(jian)測範(fan)圍,計算(suan)時(shi)再(zai)乘(cheng)以相應的稀(xi)釋倍數。
3. 若(ruo)所(suo)檢(jian)樣本不(bu)包含在(zai)說(shuo)明(ming)書(shu)所(suo)列(lie)樣本之(zhi)中,建議(yi)進(jin)行(xing)預(yu)實(shi)驗驗(yan)證其(qi)有(you)效(xiao)性,並註(zhu)意(yi)留(liu)存(cun)樣本。
4. 使用化學裂解(jie)液(ye)制(zhi)備(bei)的(de)組(zu)織(zhi)勻漿(jiang)或(huo)細胞提取液(ye)可(ke)能(neng)會(hui)由於(yu)某(mou)些化學物質的引(yin)入導(dao)致 ELISA實(shi)驗結(jie)果偏差。
5. 若(ruo)樣本為(wei)細胞培養(yang)上清(qing),因(yin)該類樣本幹(gan)擾因(yin)素 較多(duo),如:細胞狀態(tai)、細(xi)胞數量(liang)、采樣時(shi)間(jian)等(deng),所(suo)以可能(neng)存(cun)在檢(jian)測不(bu)出的情(qing)況。
6. 某些天(tian)然蛋(dan)白或(huo)重組(zu)蛋白,包括(kuo)原核及(ji)真(zhen)核重組(zu)蛋白,可能(neng)因(yin)為與(yu)本產(chan)品所(suo)使用的檢(jian)測抗(kang)體及捕獲抗體不匹配,而(er)不(bu)被檢(jian)測出。
7. 建議(yi)使用新鮮樣本,保存(cun)時間(jian)過長(chang)可能(neng)會(hui)存(cun)在蛋(dan)白(bai)降解(jie)或(huo)變(bian)性導致實(shi)驗結(jie)果偏差。
犬窖蛋白(CAV1)ELISA試劑(ji)盒(he)操(cao)作步(bu)驟
1. 加(jia)樣:分(fen)別(bie)設空(kong)白孔(kong)(空(kong)白對(dui)照孔(kong)不(bu)加(jia)樣品(pin)及(ji)酶(mei)標(biao)試劑(ji),其(qi)余(yu)各(ge)步操(cao)作相同(tong))、標(biao)準孔(kong)、待測樣品(pin)孔(kong)。在(zai)酶(mei)標(biao)包被板上標(biao)準品(pin)準確加(jia)樣50μl,待(dai)測(ce)樣品(pin)孔(kong)中(zhong)先加(jia)樣品(pin)稀(xi)釋液(ye)40μl,然(ran)後(hou)再(zai)加(jia)待(dai)測(ce)樣品(pin)10μl(樣品(pin)*終稀(xi)釋度為(wei)5倍(bei))。加(jia)樣將(jiang)樣品(pin)加(jia)於(yu)酶(mei)標(biao)板孔底(di)部(bu),盡量(liang)不觸(chu)及(ji)孔(kong)壁(bi),輕輕晃(huang)動混勻。
2. 溫育(yu):用封板膜封板後(hou)置(zhi)37℃溫育(yu)30分(fen)鐘。
3. 配液(ye):將(jiang)20倍(bei)濃縮(suo)洗滌(di)液(ye)用蒸(zheng)餾水20倍(bei)稀(xi)釋後(hou)備(bei)用
4. 洗滌(di):小心揭掉(diao)封板膜,棄(qi)去(qu)液(ye)體,甩幹,每(mei)孔(kong)加(jia)滿洗滌(di)液(ye),靜(jing)置(zhi)30秒後(hou)棄(qi)去(qu),如此(ci)重復5次(ci),拍幹。
5. 加(jia)酶(mei):每(mei)孔(kong)加(jia)入(ru)酶(mei)標(biao)試劑(ji)50μl,空(kong)白孔(kong)除(chu)外(wai)。
6. 溫育(yu):操(cao)作同(tong)3。
7. 洗滌(di):操作同(tong)5。
8. 顯色(se):每(mei)孔(kong)先加(jia)入(ru)顯(xian)色(se)劑A50μl,再加(jia)入(ru)顯(xian)色(se)劑B50μl,輕輕震蕩(dang)混勻,37℃避光顯(xian)色(se)15分(fen)鐘.
9. 終止:每(mei)孔(kong)加(jia)終止液(ye)50μl,終止反(fan)應(此(ci)時(shi)藍色(se)立轉黃色(se))。
10. 測定(ding):以空(kong)白空(kong)調(tiao)零(ling),450nm波(bo)長依(yi)序(xu)測(ce)量(liang)各(ge)孔的(de)吸(xi)光度(OD值(zhi))。 測(ce)定(ding)應在加(jia)終止液(ye)後(hou)15分(fen)鐘以內進行。
註(zhu)意(yi):
1. 試劑(ji)準備(bei):準備(bei)壹次(ci)實(shi)驗所(suo)需(xu)要(yao)的(de)酶(mei)標(biao)條(tiao),其(qi)它的可從微孔板上拆(chai)下,密(mi)封,按(an)照說(shuo)明(ming)書(shu)要(yao)求(qiu)保存(cun),以備(bei)下次(ci)使用。
2. 加(jia)樣:實(shi)驗操(cao)作中(zhong)請(qing)使用壹次(ci)性的吸(xi)頭,避免(mian)交叉(cha)汙(wu)染。加(jia)樣時(shi)註(zhu)意(yi)不(bu)要(yao)有(you)氣泡(pao),將樣品(pin)加(jia)於(yu)酶(mei)標(biao)板底部(bu),盡量(liang)不觸(chu)及(ji)孔(kong)壁(bi),輕輕晃(huang)動混勻。加(jia)樣或(huo)加(jia)試劑(ji)時,**個孔(kong)與(yu)*後(hou)壹個孔(kong)加(jia)樣之(zhi)間(jian)的(de)時(shi)間間隔如果太大,將會(hui)導致不(bu)同(tong)的(de)“預(yu)溫(wen)育(yu)”時(shi)間,從而(er)明(ming)顯(xian)地(di)影響到測(ce)量(liang)值(zhi)的(de)準(zhun)確性及重復性。因(yin)此(ci),壹次(ci)加(jia)樣時(shi)間(jian)(包(bao)括(kuo)標(biao)準品(pin)及所(suo)有(you)樣品(pin))*好(hao)控(kong)制(zhi)在10分(fen)鐘內。推(tui)薦設置(zhi)復孔進(jin)行(xing)實(shi)驗。
3. 溫育(yu):為防止樣品(pin)蒸(zheng)發,實(shi)驗時(shi)請(qing)將(jiang)加(jia)上(shang)蓋(gai)或(huo)覆(fu)膜的(de)酶(mei)標(biao)板置(zhi)於濕盒(he)內(nei),以避免(mian)液(ye)體蒸(zheng)發,洗板後(hou)應盡快進(jin)行下步操作,任何時侯都(dou)應避免(mian)酶標(biao)板處於(yu)幹(gan)燥(zao)狀態(tai),同(tong)時(shi)應嚴(yan)格(ge)遵守(shou)給定(ding)的(de)溫(wen)育(yu)時(shi)間和溫(wen)度。
4. 洗滌(di):充分(fen)的洗滌(di)非(fei)常重要(yao),在(zai)每(mei)次(ci)洗滌(di)過程(cheng)中,都要(yao)將(jiang)洗滌(di)液(ye)完(wan)全(quan)甩幹。洗滌(di)過程(cheng)中反(fan)應孔中(zhong)殘留(liu)的洗滌(di)液(ye)應在濾(lv)紙上(shang)拍幹,勿(wu)將(jiang)濾(lv)紙直(zhi)接(jie)放(fang)入反(fan)應孔中(zhong)吸(xi)水,同(tong)時(shi)要(yao)消(xiao)除(chu)板底殘留(liu)的液(ye)體和手指(zhi)印,避免(mian)影響*後(hou)的(de)酶(mei)標(biao)儀讀(du)數。如果有(you)自動洗板機,應在熟(shu)練(lian)使用後(hou)再(zai)用到正(zheng)式實(shi) 驗過程(cheng)中。
5. 反(fan)應時間(jian)的控(kong)制(zhi):加(jia)入(ru)底(di)物後(hou)請(qing)定(ding)時(shi)觀(guan)察(cha)反(fan)應孔的(de)顏色(se)變(bian)化(比如,每(mei)隔(ge)10分(fen)鐘觀察(cha)壹次(ci)),如顏色(se)較深(shen),請提前加(jia)入(ru)終止液(ye)終止反(fan)應,避免(mian)反(fan)應過強(qiang)從而(er)影響酶標(biao)儀光密(mi)度讀(du)數。
6. 底物:底物請避光保存(cun),在儲(chu)存(cun)和溫(wen)育(yu)時(shi)避免(mian)強(qiang)光直(zhi)接(jie)照射(she)。
7. 如果實(shi)驗室(shi)內濕(shi)度低(di)於(yu)60%,推(tui)薦使用加(jia)濕(shi)器提高(gao)濕(shi)度水平(ping)。
實(shi)驗流(liu)程(cheng)
1. 實(shi)驗前標(biao)準品(pin)、試劑(ji)及樣本的(de)準備(bei);
2. 加(jia)樣(標(biao)準品(pin)及樣本)50μL,37℃孵育(yu)30分(fen)鐘;
3. 洗板5次(ci),加(jia)酶(mei)標(biao)試劑(ji)50ul,37℃孵育(yu)半小(xiao)時(shi);
4. 洗板5次(ci);加(jia)入(ru)顯(xian)色(se)液(ye)A,B各(ge)50ul,37℃孵育(yu)顯(xian)色(se)15分(fen)鐘
5. 加(jia)終止液(ye)50μL,立即450nm讀數。
6. 計算(suan)
犬窖蛋白(CAV1)ELISA試劑(ji)盒(he)計算(suan)
各(ge)標(biao)準品(pin)及樣本O.D.值(zhi)扣(kou)除(chu)空(kong)白孔(kong)O.D.值(zhi)後(hou)作圖(tu)(七(qi)點圖),如設置(zhi)復孔,則(ze)應取其(qi)平(ping)均值(zhi)計算(suan)。以標(biao)準品(pin)的濃度為(wei)縱(zong)坐標(biao)(或(huo)對(dui)數坐(zuo)標(biao)),O.D.值(zhi)為(wei)橫坐標(biao)(或(huo)對(dui)數坐(zuo)標(biao)),繪出標(biao)準曲(qu)線(*佳(jia)方程(cheng)式應依(yi)回歸(gui)方(fang)程計算(suan)的(de)R2值(zhi)來(lai)定(ding),以R2值(zhi)越(yue)趨(qu)近於(yu)1為好(hao))。推(tui)薦使用專業制(zhi)作曲(qu)線(xian)軟(ruan)件(jian)進行分(fen)析,如curve expert 1.30,根(gen)據樣品(pin)O.D.值(zhi),由(you)標(biao)準曲(qu)線查出相應的濃度,乘(cheng)以稀(xi)釋倍數;或(huo)用標(biao)準物(wu)的濃度與(yu)O.D.值(zhi)計算(suan)出標(biao)準曲(qu)線的回歸(gui)方(fang)程式,將樣品(pin)的(de)O.D.值(zhi)代(dai)入(ru)方程(cheng)式,計算(suan)出樣品(pin)濃度,再(zai)乘(cheng)以稀(xi)釋倍數,即(ji)為(wei)樣品(pin)的(de)實(shi)際濃度。
特異性
本試劑(ji)盒(he)用於檢(jian)測犬(quan)窖蛋白(CAV1),經(jing)檢(jian)測與(yu)其(qi)它相似(si)物(wu)質無明(ming)顯(xian)交(jiao)叉(cha)反(fan)應。
由於受到技術及樣本來(lai)源的限(xian)制(zhi),不可(ke)能(neng)完(wan)成對(dui)所(suo)有(you)相關(guan)或(huo)相似(si)物(wu)質交叉(cha)反(fan)應檢(jian)測,因(yin)此(ci)本試劑(ji)盒(he)有(you)可能(neng)與(yu)未經(jing)檢(jian)測的(de)其(qi)它物質有(you)交叉(cha)反(fan)應。
精密(mi)度
精密(mi)度用樣品(pin)測(ce)定(ding)值(zhi)的(de)變(bian)異系(xi)數CV表(biao)示(shi)。CV(%) = SD/mean×100
批內差:取同(tong)批(pi)次(ci)試劑(ji)盒(he)對(dui)低(di)、中(zhong)、高(gao)值(zhi)定(ding)值(zhi)樣本進(jin)行定(ding)量(liang)檢(jian)測,每(mei)份樣本連(lian)續(xu)測(ce)定(ding)20 次(ci),分(fen)別(bie)計算(suan)不(bu)同(tong)濃度樣本的(de)平均值(zhi)及(ji)SD值(zhi)。
批間差:選取3個不(bu)同(tong)批(pi)次(ci)的(de)試劑(ji)盒(he)分(fen)別(bie)對(dui)低(di)、中(zhong)、高(gao)值(zhi)定(ding)值(zhi)樣本進(jin)行定(ding)量(liang)測定(ding),每(mei)個樣本使用同(tong)壹試劑(ji)盒(he)重復測定(ding)8次(ci),分(fen)別(bie)計算(suan)不(bu)同(tong)濃度樣本的(de)平均值(zhi)及(ji)SD值(zhi)。
批內差: CV<10%
批間差: CV<12%
犬窖蛋白(CAV1)ELISA試劑(ji)盒(he)穩(wen)定(ding)性
經(jing)測(ce)定(ding),試劑(ji)盒(he)在(zai)有(you)效(xiao)期內按(an)推(tui)薦溫度保存(cun),其(qi)活(huo)性降低(di)率(lv)小(xiao)於(yu)5%。
為減小(xiao)外(wai)部因(yin)素對(dui)試劑(ji)盒(he)破(po)壞前後(hou)檢(jian)測值(zhi)的(de)影響,實(shi)驗室(shi)的環(huan)境(jing)條(tiao)件需(xu)盡量(liang)保持壹致,尤(you)其(qi)是(shi)實(shi)驗室(shi)內溫(wen)度、濕(shi)度及(ji)溫(wen)育(yu)條(tiao)件。其(qi)次(ci)由(you)同(tong)壹實(shi)驗員(yuan)來進(jin)行操作可(ke)減少人(ren)為誤差。



