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96T 僅供(gong)體(ti)外研究(jiu)使用(yong),不(bu)用(yong)於臨床(chuang)診斷(duan)!
兔P選擇(ze)素(SELP)ELISA試(shi)劑盒
本試劑盒運(yun)用雙(shuang)抗體(ti)夾(jia)心ELISA法(fa)定(ding)量(liang)測(ce)定(ding)兔血清、血漿、組(zu)織勻漿、細(xi)胞(bao)裂解液、細(xi)胞(bao)培(pei)養上(shang)清液和其(qi)他(ta)生物(wu)液體(ti)中(zhong)兔P選擇(ze)素(SELP)含量(liang)。
檢(jian)測(ce)範(fan)圍
0.625-40ng/mL
*低(di)檢(jian)測(ce)限
0.282ng/mL
實驗原(yuan)理(li)
將(jiang)兔P選擇(ze)素(SELP)抗體(ti)包(bao)被(bei)於96孔(kong)微(wei)孔(kong)板(ban)中,制成(cheng)固相載(zai)體(ti),向(xiang)微(wei)孔(kong)中(zhong)分別加(jia)入標(biao)準(zhun)品或(huo)標本,其中(zhong)的(de)兔P選擇(ze)素(SELP)與(yu)連(lian)接於固相載(zai)體(ti)上(shang)的(de)抗體(ti)結合(he),然後加(jia)入生(sheng)物(wu)素化(hua)的兔P選擇(ze)素(SELP)抗體(ti),將(jiang)未(wei)結合(he)的(de)生物(wu)素化(hua)抗體(ti)洗凈後(hou),加(jia)入HRP標(biao)記的(de)親和素,再(zai)次(ci)徹(che)底洗滌後加(jia)入TMB底(di)物(wu)顯(xian)色。TMB在(zai)過氧(yang)化(hua)物(wu)酶(mei)的(de)催化(hua)下轉(zhuan)化(hua)成(cheng)藍色(se),並在(zai)酸(suan)的作(zuo)用(yong)下轉(zhuan)化(hua)成(cheng)*終的(de)黃色(se)。顏色的深(shen)淺(qian)和樣(yang)品中(zhong)的兔P選擇(ze)素(SELP)呈(cheng)正(zheng)相關(guan)。用酶(mei)標(biao)儀(yi)在450nm波長下測(ce)定(ding)吸(xi)光度(O.D.值(zhi)),計(ji)算樣(yang)品濃(nong)度(du)。
試(shi)劑盒內容(rong)
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試(shi)劑名稱(cheng) |
數(shu)量(liang) |
試(shi)劑名稱(cheng) |
數(shu)量(liang) |
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96孔(kong)板(ban)(預包被) |
1 |
96孔(kong)板(ban)覆膜 |
2 |
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標(biao)準(zhun)品 |
0.5ml×1 |
標(biao)準(zhun)品稀(xi)釋液 |
1.5ml×1瓶(ping) |
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顯(xian)色劑A液 |
6ml×1瓶(ping) |
樣(yang)品稀(xi)釋液 |
6ml×1瓶(ping) |
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顯(xian)色劑B液 |
6ml×1瓶(ping) |
終(zhong)止(zhi)液 |
6ml×1瓶(ping) |
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酶(mei)標(biao)試(shi)劑 |
6ml×1瓶(ping) |
密(mi)封(feng)袋(dai) |
1 |
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濃(nong)洗滌液(30×) |
1×20mL |
使用(yong)說(shuo)明(ming)書 |
1 |
兔P選擇(ze)素(SELP)ELISA試(shi)劑盒需自(zi)備的(de)設(she)備(bei)及試(shi)劑
1. 450±10nm濾(lv)光片的(de)酶(mei)標(biao)儀(yi)(建議儀器使用(yong)前(qian)提(ti)前(qian)預熱(re))
2. 單(dan)道(dao)或多(duo)道(dao)微(wei)量(liang)加(jia)液器(qi)及吸(xi)頭(tou)
3. 稀(xi)釋樣(yang)品的(de)EP管(guan)
4. 蒸(zheng)餾水(shui)或(huo)去離子水(shui)
5. 吸(xi)水(shui)紙
6. 盛放(fang)洗液的(de)容(rong)器
試(shi)劑盒的(de)儲(chu)存(cun)及有效(xiao)期
1. 未(wei)開(kai)封(feng)的(de)試(shi)劑盒:所有試劑均(jun)按(an)試(shi)劑瓶(ping)標簽(qian)上(shang)所示(shi)保(bao)存。請(qing)註意,收到(dao)試(shi)劑盒後(hou)請盡(jin)快(kuai)將(jiang)TMB 洗滌液,終(zhong)止(zhi)液保(bao)存於4℃,其他(ta)試劑保(bao)存於-20℃。
2. 使用(yong)後(hou)的(de)試(shi)劑盒:剩(sheng)余(yu)試(shi)劑仍需按(an)照(zhao)試劑瓶(ping)標簽(qian)所示(shi)的(de)溫(wen)度(du)保(bao)存,開(kai)封(feng)後(hou)的(de)酶(mei)標(biao)板(ban)要加(jia)幹(gan)燥(zao)劑後密(mi)封保(bao)存於-20℃,避(bi)免(mian)潮(chao)濕。
註意:
試(shi)劑盒內酶(mei)標(biao)條(tiao)可拆(chai)卸,按實驗需求可(ke)分多(duo)次使用(yong);使用(yong)後(hou)的(de)剩(sheng)余(yu)試(shi)劑盒建(jian)議在**實驗後 1個(ge)月(yue)內使用(yong)完(wan)畢(bi)。產(chan)品過期時間(jian)以(yi)盒(he)子上的(de)標(biao)簽(qian)為(wei)準(zhun),保(bao)質期內所有組(zu)分都確保(bao)是穩(wen)定(ding)的(de)。
兔P選擇(ze)素(SELP)ELISA試(shi)劑盒標(biao)本的采(cai)集(ji)與(yu)保(bao)存
1. 血清:
將(jiang)收集(ji)於血清分離管(guan)的全(quan)血標本在室(shi)溫(wen)放(fang)置 2 小時(shi)或(huo) 4oC 過夜,然後 1000×g 離心 20 分鐘,取(qu)上清即可,或(huo)將(jiang)上清置於-20oC 或-80oC 保(bao)存,但(dan)應(ying)避(bi)免(mian)反(fan)復凍融。
2. 血漿:
用(yong) EDTA 或(huo)肝素作(zuo)為(wei)抗凝(ning)劑采集(ji)標本,並將(jiang)標本在采(cai)集(ji)後的(de) 30 分鐘內於 2-8oC 1000×g 離心 15 分鐘,取(qu)上清即可檢(jian)測(ce),或(huo)將(jiang)上清置於-20oC 或-80oC 保(bao)存,但(dan)應(ying)避(bi)免(mian)反(fan)復凍融。
3. 組(zu)織勻漿:
1) 取(qu)適(shi)量組(zu)織塊(kuai),於預冷(leng)PBS(0.01mol/L, pH 7.0-7.2)中(zhong)清洗去(qu)除(chu)血液,稱(cheng)重後備用(組(zu)織塊(kuai)較大需先(xian)剪碎(sui)後再(zai)勻漿);
2) 可(ke)同(tong)時(shi)選用多(duo)種勻漿方(fang)法(fa)達(da)到(dao)較好的破(po)碎(sui)效(xiao)果:首(shou)先(xian)將(jiang)組(zu)織塊(kuai)移入玻(bo)璃勻漿器(qi),加(jia)入5-10mL 預(yu)冷(leng)PBS 進(jin)行(xing)充(chong)分研磨(mo),該過程需在(zai)冰(bing)上(shang)進(jin)行(xing)(有條(tiao)件實驗室可(ke)選用機器(qi)勻漿);得(de)到(dao)的(de)勻漿液可(ke)再(zai)利(li)用超聲破碎(sui)或反(fan)復凍融 進(jin)壹(yi)步處(chu)理(li)(超(chao)聲破碎(sui)過程中(zhong)註意冰(bing)浴降溫(wen);反(fan)復凍融法(fa)可重復2 次)。
3) 將(jiang)制備(bei)好的勻漿液於5000×g 離心5 分鐘,留(liu)取上(shang)清即可檢(jian)測(ce)。
4. 細(xi)胞(bao)裂解液:
1)貼(tie)壁細(xi)胞(bao)需要(yao)先(xian)用胰(yi)酶(mei)消(xiao)化(hua),離心收集(ji)細(xi)胞(bao)(懸(xuan)浮(fu)細(xi)胞(bao)可(ke)直(zhi)接離心收集(ji));
2)將(jiang)收集(ji)到(dao)的(de)細(xi)胞(bao)用(yong)冷(leng)PBS 洗3 次(ci);
3)物(wu)理(li)方(fang)法(fa)裂解細(xi)胞(bao)(可(ke)先(xian)超聲破碎(sui)細(xi)胞(bao),再(zai)反(fan)復凍融):
i 超(chao)聲破碎(sui):取適量(liang)PBS 重懸細(xi)胞(bao),用(yong)壹(yi)定(ding)功率的超(chao)聲波處(chu)理(li)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液,使細(xi)胞(bao)急(ji)劇(ju)震(zhen)蕩(dang)破裂。
ii 反(fan)復凍融:將(jiang)待(dai)破(po)碎(sui)的細(xi)胞(bao)在(zai)-20 oC 以(yi)下冰(bing)凍,室溫(wen)融(rong)解,反(fan)復3 次,使細(xi)胞(bao)溶(rong)脹(zhang)破(po)碎(sui)。
4)將(jiang)標本於2-8 oC 1500×g 離心10 分鐘,收集(ji)上(shang)清備(bei)用(yong)。
5. 細(xi)胞(bao)培(pei)養上(shang)清或(huo)其(qi)它(ta)生(sheng)物(wu)標(biao)本:
請(qing) 1000×g 離心 20 分鐘,取(qu)上清即可檢(jian)測(ce),或(huo)將(jiang)上清置於-20oC 或-80oC 保(bao)存,但(dan)應(ying)避(bi)免(mian)反(fan)復凍融。
註意:
1. 以(yi)上(shang)標本均(jun)需密(mi)封(feng)保(bao)存,4oC保(bao)存應(ying)小(xiao)於1周,-20oC不(bu)應(ying)超過1個(ge)月(yue),-80oC不(bu)應超過2個(ge)月(yue)。
2. 標(biao)本使用(yong)前(qian)應(ying)緩(huan)慢均(jun)衡(heng)至(zhi)室溫(wen),不(bu)應(ying)加(jia)熱(re)使之(zhi)融(rong)解。
3. 實驗前紅細(xi)胞(bao)裂解液必須用標(biao)準(zhun)品稀(xi)釋液稀(xi)釋。
兔P選擇(ze)素(SELP)ELISA試(shi)劑盒試(shi)劑準(zhun)備(bei)
1. 使用(yong)前(qian)將(jiang)所有的試劑和標(biao)本緩(huan)慢均(jun)衡(heng)至(zhi)室溫(wen)(18-25oC),試(shi)劑不能(neng)直(zhi)接在(zai)37oC溶解。
2. 標(biao)準(zhun)品(凍幹(gan)品):每(mei)瓶(ping)標準(zhun)品加(jia)入標(biao)準(zhun)品稀(xi)釋液1mL,蓋(gai)好後室(shi)溫(wen)靜(jing)置大約10分鐘,同(tong)時(shi)反(fan)復顛(dian)倒/搓(cuo)動以助(zhu)溶解,其濃(nong)度(du)為40ng/mL。準(zhun)備(bei)7個(ge)稀(xi)釋標(biao)準(zhun)品的(de)EP管(guan),每個(ge)EP管(guan)中加(jia)入150μL的(de)標準(zhun)品稀(xi)釋液,如(ru)圖所示(shi)依(yi)次倍比稀(xi)釋成(cheng)不同(tong)的(de)梯度(du), 標(biao)準(zhun)品稀(xi)釋液(0pg/mL)直(zhi)接作(zuo)為空(kong)白孔(kong)。為(wei)保(bao)證實驗結果有效(xiao)性(xing),每次實驗請使用(yong)新(xin)的(de)標(biao)準(zhun)品溶(rong)液。
3. 濃(nong)洗滌液:用(yong)580mL蒸(zheng)餾水(shui)或(huo)去離子水(shui)將(jiang)20mL濃(nong)洗滌液稀(xi)釋至(zhi)600mL,進(jin)行(xing)30倍稀(xi)釋。
標(biao)本處(chu)理(li)
1. 本公司(si)只(zhi)對試(shi)劑盒本身(shen)負責,不(bu)對因(yin)使用(yong)該(gai)試(shi)劑盒所造(zao)成(cheng)的樣(yang)本消耗負責,請(qing)使用(yong)者(zhe)使用(yong)前(qian)充(chong)分考慮(lv)到(dao)樣(yang)本的可(ke)能(neng)使用(yong)量(liang),預(yu)留(liu)充(chong)足的(de)樣(yang)本。
2. 實驗前應(ying)預(yu)測(ce)標(biao)本含量(liang),如(ru)果標本濃(nong)度(du)過高,應(ying)對(dui)標本進行(xing)稀(xi)釋,使稀(xi)釋後(hou)的標本符(fu)合(he)試(shi)劑盒的(de)檢測(ce)範(fan)圍,計(ji)算時(shi)再(zai)乘(cheng)以相應(ying)的(de)稀(xi)釋倍數(shu)。
3. 若(ruo)所檢(jian)樣(yang)本不包(bao)含在(zai)說(shuo)明(ming)書所列(lie)樣(yang)本之(zhi)中(zhong),建(jian)議進行(xing)預實驗驗證其(qi)有效(xiao)性(xing),並註意留存樣(yang)本。
4. 使用(yong)化(hua)學(xue)裂解液制(zhi)備(bei)的組(zu)織勻漿或(huo)細(xi)胞(bao)提(ti)取(qu)液可(ke)能(neng)會由於某些化(hua)學(xue)物(wu)質(zhi)的(de)引(yin)入(ru)導致(zhi) ELISA實驗結果偏差。
5. 若(ruo)樣(yang)本為細(xi)胞(bao)培(pei)養上(shang)清,因(yin)該類(lei)樣(yang)本幹(gan)擾因(yin)素 較多(duo),如:細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態(tai)、細(xi)胞(bao)數(shu)量(liang)、采樣(yang)時(shi)間(jian)等(deng),所以(yi)可(ke)能存在檢測(ce)不(bu)出的情況(kuang)。
6. 某(mou)些天(tian)然蛋白或(huo)重組(zu)蛋白,包(bao)括(kuo)原(yuan)核(he)及真核(he)重組(zu)蛋白,可(ke)能(neng)因(yin)為與(yu)本產(chan)品所使用(yong)的(de)檢(jian)測(ce)抗體(ti)及捕(bu)獲(huo)抗體(ti)不(bu)匹(pi)配(pei),而不(bu)被(bei)檢(jian)測(ce)出(chu)。
7. 建(jian)議使用(yong)新(xin)鮮(xian)樣(yang)本,保(bao)存時(shi)間(jian)過長可(ke)能(neng)會存在(zai)蛋白降解或變(bian)性導致(zhi)實驗結果偏差。
兔P選擇(ze)素(SELP)ELISA試(shi)劑盒操(cao)作步驟(zhou)
1. 加(jia)樣(yang):分別設(she)空(kong)白孔(kong)(空(kong)白對照(zhao)孔(kong)不(bu)加(jia)樣(yang)品及酶(mei)標(biao)試(shi)劑,其余(yu)各(ge)步操作相同(tong))、標(biao)準(zhun)孔(kong)、待(dai)測(ce)樣(yang)品孔(kong)。在(zai)酶(mei)標(biao)包(bao)被板上標(biao)準(zhun)品準(zhun)確加(jia)樣(yang)50μl,待(dai)測(ce)樣(yang)品孔(kong)中(zhong)先(xian)加(jia)樣(yang)品稀(xi)釋液40μl,然後再(zai)加(jia)待(dai)測(ce)樣(yang)品10μl(樣(yang)品*終(zhong)稀(xi)釋度(du)為5倍)。加(jia)樣(yang)將(jiang)樣(yang)品加(jia)於酶(mei)標(biao)板(ban)孔(kong)底(di)部(bu),盡(jin)量不觸(chu)及孔(kong)壁(bi),輕輕晃動混勻。
2. 溫(wen)育(yu):用(yong)封(feng)板膜封板後(hou)置37℃溫(wen)育(yu)30分鐘。
3. 配(pei)液:將(jiang)20倍濃(nong)縮(suo)洗滌液用(yong)蒸(zheng)餾水(shui)20倍稀(xi)釋後(hou)備用
4. 洗滌:小心揭(jie)掉(diao)封(feng)板膜(mo),棄(qi)去液體(ti),甩(shuai)幹(gan),每(mei)孔(kong)加(jia)滿洗滌液,靜(jing)置30秒(miao)後棄(qi)去,如此(ci)重復5次,拍幹(gan)。
5. 加(jia)酶(mei):每(mei)孔(kong)加(jia)入酶(mei)標(biao)試(shi)劑50μl,空白(bai)孔(kong)除(chu)外。
6. 溫(wen)育(yu):操(cao)作(zuo)同(tong)3。
7. 洗滌:操作(zuo)同(tong)5。
8. 顯(xian)色:每(mei)孔(kong)先(xian)加(jia)入顯(xian)色劑A50μl,再(zai)加(jia)入顯(xian)色劑B50μl,輕輕震蕩(dang)混勻,37℃避(bi)光顯(xian)色15分鐘.
9. 終(zhong)止(zhi):每孔(kong)加(jia)終止(zhi)液50μl,終(zhong)止(zhi)反(fan)應(此(ci)時(shi)藍(lan)色立(li)轉(zhuan)黃(huang)色(se))。
10. 測(ce)定(ding):以(yi)空白空調零(ling),450nm波(bo)長依序測(ce)量(liang)各孔(kong)的(de)吸(xi)光度(OD值(zhi))。 測(ce)定(ding)應(ying)在加(jia)終止(zhi)液後(hou)15分鐘以(yi)內進行(xing)。
註意:
1. 試(shi)劑準(zhun)備(bei):準(zhun)備(bei)壹(yi)次(ci)實驗所需要(yao)的(de)酶(mei)標(biao)條(tiao),其它(ta)的(de)可從微(wei)孔(kong)板(ban)上拆(chai)下,密封(feng),按照(zhao)說(shuo)明(ming)書要(yao)求保(bao)存,以(yi)備(bei)下次使用(yong)。
2. 加(jia)樣(yang):實驗操作(zuo)中(zhong)請使用(yong)壹(yi)次(ci)性(xing)的吸(xi)頭(tou),避(bi)免(mian)交(jiao)叉汙(wu)染。加(jia)樣(yang)時(shi)註意不要有氣泡,將(jiang)樣(yang)品加(jia)於酶(mei)標(biao)板(ban)底部(bu),盡(jin)量不觸(chu)及孔(kong)壁(bi),輕輕晃動混勻。加(jia)樣(yang)或(huo)加(jia)試劑時,**個(ge)孔(kong)與(yu)*後(hou)壹個(ge)孔(kong)加(jia)樣(yang)之(zhi)間(jian)的(de)時(shi)間(jian)間(jian)隔如(ru)果太大,將(jiang)會導致(zhi)不(bu)同(tong)的(de)“預溫(wen)育(yu)”時(shi)間(jian),從(cong)而(er)明(ming)顯(xian)地影(ying)響(xiang)到(dao)測(ce)量(liang)值的準(zhun)確性(xing)及重復性。因(yin)此,壹(yi)次(ci)加(jia)樣(yang)時(shi)間(jian)(包(bao)括(kuo)標準(zhun)品及所有樣(yang)品)*好控(kong)制(zhi)在(zai)10分鐘內。推薦(jian)設(she)置復孔(kong)進(jin)行(xing)實驗。
3. 溫(wen)育(yu):為(wei)防(fang)止(zhi)樣(yang)品蒸(zheng)發,實驗時請(qing)將(jiang)加(jia)上蓋(gai)或覆(fu)膜(mo)的(de)酶(mei)標(biao)板(ban)置於濕盒(he)內,以避(bi)免(mian)液體(ti)蒸(zheng)發(fa),洗板(ban)後應盡快進(jin)行(xing)下步操作,任何時(shi)侯(hou)都應(ying)避(bi)免(mian)酶(mei)標(biao)板(ban)處(chu)於幹(gan)燥(zao)狀(zhuang)態,同(tong)時(shi)應嚴格遵守(shou)給(gei)定(ding)的(de)溫(wen)育(yu)時(shi)間(jian)和溫(wen)度(du)。
4. 洗滌:充(chong)分的洗滌非常重要,在每次(ci)洗滌過程中(zhong),都要(yao)將(jiang)洗滌液完(wan)全(quan)甩(shuai)幹(gan)。洗滌過程中(zhong)反(fan)應孔(kong)中(zhong)殘留的(de)洗滌液應(ying)在(zai)濾(lv)紙上拍幹(gan),勿(wu)將(jiang)濾(lv)紙直(zhi)接放(fang)入(ru)反(fan)應孔(kong)中(zhong)吸(xi)水(shui),同(tong)時(shi)要消除(chu)板底(di)殘留的(de)液體(ti)和手(shou)指印,避(bi)免(mian)影(ying)響(xiang)*後(hou)的(de)酶(mei)標(biao)儀(yi)讀(du)數(shu)。如(ru)果有自(zi)動洗板(ban)機,應(ying)在熟練(lian)使用(yong)後(hou)再(zai)用(yong)到(dao)正(zheng)式(shi)實 驗過程中(zhong)。
5. 反(fan)應時(shi)間(jian)的(de)控(kong)制(zhi):加(jia)入底(di)物(wu)後(hou)請(qing)定(ding)時(shi)觀(guan)察(cha)反(fan)應孔(kong)的(de)顏色變(bian)化(hua)(比如(ru),每隔10分鐘觀(guan)察(cha)壹(yi)次(ci)),如顏色較深,請(qing)提(ti)前加(jia)入終(zhong)止(zhi)液終(zhong)止(zhi)反(fan)應,避(bi)免(mian)反(fan)應過強從(cong)而(er)影響(xiang)酶(mei)標(biao)儀(yi)光密度(du)讀(du)數(shu)。
6. 底(di)物(wu):底(di)物(wu)請(qing)避(bi)光保(bao)存,在(zai)儲(chu)存(cun)和溫(wen)育(yu)時(shi)避(bi)免(mian)強光直(zhi)接照(zhao)射。
7. 如(ru)果實驗室內濕度(du)低(di)於60%,推薦(jian)使用(yong)加(jia)濕器(qi)提高(gao)濕度水(shui)平(ping)。
實驗流程(cheng)
1. 實驗前標(biao)準(zhun)品、試(shi)劑及樣(yang)本的準(zhun)備(bei);
2. 加(jia)樣(yang)(標(biao)準(zhun)品及樣(yang)本)50μL,37℃孵(fu)育(yu)30分鐘;
3. 洗板(ban)5次,加(jia)酶(mei)標(biao)試(shi)劑50ul,37℃孵(fu)育(yu)半小時(shi);
4. 洗板(ban)5次;加(jia)入顯(xian)色液A,B各(ge)50ul,37℃孵(fu)育(yu)顯(xian)色15分鐘
5. 加(jia)終止(zhi)液50μL,立(li)即450nm讀(du)數(shu)。
6. 計(ji)算
兔P選擇(ze)素(SELP)ELISA試(shi)劑盒計(ji)算
各(ge)標(biao)準(zhun)品及樣(yang)本O.D.值扣(kou)除(chu)空白(bai)孔(kong)O.D.值(zhi)後作圖(七點(dian)圖),如設(she)置復孔(kong),則應(ying)取其平(ping)均(jun)值(zhi)計(ji)算。以(yi)標(biao)準(zhun)品的(de)濃(nong)度(du)為縱坐標(biao)(或(huo)對數(shu)坐(zuo)標),O.D.值為橫(heng)坐(zuo)標(或(huo)對(dui)數(shu)坐(zuo)標),繪出標(biao)準(zhun)曲(qu)線(*佳方(fang)程式(shi)應(ying)依回歸(gui)方(fang)程(cheng)計(ji)算的(de)R2值(zhi)來定(ding),以(yi)R2值越趨(qu)近(jin)於1為好)。推薦(jian)使用(yong)專(zhuan)業(ye)制(zhi)作曲線軟件(jian)進行(xing)分析,如(ru)curve expert 1.30,根(gen)據(ju)樣(yang)品O.D.值(zhi),由標準(zhun)曲(qu)線查出(chu)相應(ying)的(de)濃(nong)度(du),乘以稀(xi)釋倍數(shu);或(huo)用標準(zhun)物(wu)的(de)濃(nong)度(du)與(yu)O.D.值(zhi)計(ji)算出(chu)標(biao)準(zhun)曲(qu)線的回(hui)歸(gui)方(fang)程(cheng)式(shi),將(jiang)樣(yang)品的(de)O.D.值代入(ru)方(fang)程(cheng)式(shi),計(ji)算出(chu)樣(yang)品濃(nong)度(du),再(zai)乘(cheng)以稀(xi)釋倍數(shu),即為樣(yang)品的(de)實際(ji)濃(nong)度(du)。
特(te)異(yi)性
本試劑盒用(yong)於檢測(ce)兔P選擇(ze)素(SELP),經(jing)檢(jian)測(ce)與(yu)其(qi)它(ta)相似(si)物(wu)質(zhi)無(wu)明(ming)顯(xian)交(jiao)叉反(fan)應。
由(you)於受到(dao)技術(shu)及樣(yang)本來源的限制(zhi),不(bu)可能完(wan)成(cheng)對所有相關(guan)或相似(si)物(wu)質(zhi)交(jiao)叉反(fan)應檢(jian)測(ce),因(yin)此本試劑盒有可能與(yu)未(wei)經(jing)檢(jian)測(ce)的(de)其它(ta)物(wu)質(zhi)有交(jiao)叉反(fan)應。
精(jing)密(mi)度
精(jing)密(mi)度用樣(yang)品測(ce)定(ding)值(zhi)的變(bian)異系(xi)數(shu)CV表示。CV(%) = SD/mean×100
批(pi)內差:取(qu)同(tong)批(pi)次(ci)試(shi)劑盒對(dui)低(di)、中(zhong)、高(gao)值(zhi)定(ding)值(zhi)樣(yang)本進行(xing)定(ding)量(liang)檢測(ce),每(mei)份樣(yang)本連續(xu)測(ce)定(ding)20 次(ci),分別計(ji)算不(bu)同(tong)濃(nong)度(du)樣(yang)本的平(ping)均(jun)值(zhi)及SD值(zhi)。
批(pi)間(jian)差(cha):選取3個(ge)不(bu)同(tong)批(pi)次(ci)的(de)試(shi)劑盒分別對(dui)低(di)、中(zhong)、高(gao)值(zhi)定(ding)值(zhi)樣(yang)本進行(xing)定(ding)量(liang)測(ce)定(ding),每(mei)個(ge)樣(yang)本使用(yong)同(tong)壹(yi)試劑盒重復測(ce)定(ding)8次(ci),分別計(ji)算不(bu)同(tong)濃(nong)度(du)樣(yang)本的平(ping)均(jun)值(zhi)及SD值(zhi)。
批(pi)內差: CV<10%
批(pi)間(jian)差(cha): CV<12%
兔P選擇(ze)素(SELP)ELISA試(shi)劑盒穩(wen)定(ding)性(xing)
經(jing)測(ce)定(ding),試(shi)劑盒在(zai)有效(xiao)期內按推(tui)薦溫(wen)度(du)保(bao)存,其(qi)活(huo)性降低(di)率(lv)小(xiao)於5%。
為(wei)減(jian)小(xiao)外部(bu)因(yin)素對(dui)試(shi)劑盒破(po)壞前(qian)後(hou)檢(jian)測(ce)值(zhi)的影響(xiang),實驗室的(de)環境(jing)條(tiao)件需盡(jin)量(liang)保(bao)持壹(yi)致(zhi),尤其(qi)是實驗室內溫(wen)度(du)、濕(shi)度(du)及溫(wen)育(yu)條(tiao)件。其(qi)次(ci)由(you)同(tong)壹(yi)實驗員來進(jin)行(xing)操作(zuo)可(ke)減(jian)少(shao)人(ren)為(wei)誤差。



