-
授(shou)權(quan)代理品(pin)牌(pai)
-
ELISA試(shi)劑盒(he)
- 農(nong)殘(can)檢(jian)測試(shi)劑盒(he)
- 馬(ma)ELISA試(shi)劑盒(he)
- 牛ELISA試劑盒(he)
- 魚(yu)ELISA試劑盒(he)
- 人ELISA試劑盒(he)/Human
- 小(xiao)鼠(shu)ELISA試(shi)劑盒(he)/Mouse
- 大(da)鼠(shu)ELISA試(shi)劑盒(he)/Rat
- 羊(yang)ELISA試(shi)劑盒(he)/Sheep
- 兔(tu)ELISA試(shi)劑盒(he)/ Rabbi...
- 豬(zhu)ELISA試(shi)劑盒(he)/Porcin...
- 豚鼠(shu)ELISA試(shi)劑盒(he)/Guine...
- 狗(gou)ELISA試(shi)劑盒(he)/ Canin...
- 雞(ji)ELISA試(shi)劑盒(he)/Chicke...
- 鴨(ya)ELISA試(shi)劑盒(he)
- 植物ELISA試劑盒(he)
- 猴(hou)ELISA試(shi)劑盒(he)/ Monke...
- 其他ELISA試劑盒(he)
- 抗(kang)體
- 蛋(dan)白(bai)
- CLIA試(shi)劑盒(he)
- 細胞(bao)生(sheng)物學(xue)
- 分(fen)子生(sheng)物學(xue)/常(chang)用試(shi)劑
96T 僅供(gong)體外(wai)研究(jiu)使(shi)用,不用於臨床診斷(duan)!
兔(tu)S100鈣(gai)結合蛋白(bai)B(S100B)ELISA試(shi)劑盒(he)
本(ben)試劑盒(he)運用雙(shuang)抗(kang)體夾心ELISA法(fa)定量(liang)測定(ding)兔(tu)血(xue)清(qing)、血(xue)漿、組織(zhi)勻(yun)漿、細胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye)、細胞(bao)培(pei)養(yang)上(shang)清(qing)液和(he)其他生(sheng)物液(ye)體(ti)中(zhong)兔S100鈣(gai)結合蛋白(bai)B(S100B)含(han)量(liang)。
檢(jian)測範(fan)圍(wei)
15.625-1000 pg/mL
*低檢(jian)測限(xian)
4.5 pg/mL
實(shi)驗原(yuan)理
將(jiang)兔(tu)S100鈣(gai)結合蛋白(bai)B(S100B)抗(kang)體包(bao)被於(yu)96孔微孔板(ban)中,制(zhi)成固(gu)相載體,向微孔中(zhong)分(fen)別加(jia)入標(biao)準(zhun)品或(huo)標(biao)本,其中(zhong)的兔(tu)S100鈣(gai)結合蛋白(bai)B(S100B)與(yu)連接於固(gu)相載體上(shang)的抗(kang)體結合,然(ran)後加(jia)入生(sheng)物素(su)化的(de)兔(tu)S100鈣(gai)結合蛋白(bai)B(S100B)抗(kang)體,將(jiang)未結合的生(sheng)物素(su)化抗(kang)體洗凈後,加(jia)入HRP標(biao)記的(de)親和(he)素(su),再次徹底(di)洗滌後加(jia)入TMB底(di)物(wu)顯(xian)色。TMB在(zai)過氧化物(wu)酶的(de)催(cui)化下(xia)轉(zhuan)化成(cheng)藍(lan)色(se),並(bing)在(zai)酸的作(zuo)用(yong)下轉(zhuan)化成(cheng)*終(zhong)的黃(huang)色(se)。顏(yan)色的(de)深(shen)淺(qian)和(he)樣(yang)品中(zhong)的(de)兔(tu)S100鈣(gai)結合蛋白(bai)B(S100B)呈(cheng)正相關(guan)。用酶標(biao)儀在(zai)450nm波長(chang)下測(ce)定吸光(guang)度(du)(O.D.值),計(ji)算樣品濃(nong)度(du)。
試(shi)劑盒(he)內(nei)容
|
試(shi)劑名稱(cheng) |
數量(liang) |
試(shi)劑名稱(cheng) |
數量(liang) |
|
96孔板(ban)(預包(bao)被) |
1 |
96孔板(ban)覆膜(mo) |
2 |
|
標(biao)準(zhun)品 |
0.5ml×1 |
標(biao)準(zhun)品稀釋液 |
1.5ml×1瓶(ping) |
|
顯(xian)色劑A液(ye) |
6ml×1瓶(ping) |
樣(yang)品稀釋液 |
6ml×1瓶(ping) |
|
顯(xian)色劑B液(ye) |
6ml×1瓶(ping) |
終(zhong)止液 |
6ml×1瓶(ping) |
|
酶標(biao)試劑 |
6ml×1瓶(ping) |
密封袋(dai) |
1 |
|
濃(nong)洗滌液(ye)(30×) |
1×20mL |
使(shi)用說明書(shu) |
1 |
兔(tu)S100鈣(gai)結合蛋白(bai)B(S100B)ELISA試(shi)劑盒(he)需(xu)自備的設(she)備及試(shi)劑
1. 450±10nm濾(lv)光(guang)片(pian)的酶標(biao)儀(建(jian)議儀器使(shi)用前提前預熱)
2. 單(dan)道或(huo)多(duo)道(dao)微量(liang)加(jia)液(ye)器及吸頭(tou)
3. 稀釋樣品(pin)的(de)EP管(guan)
4. 蒸(zheng)餾水或(huo)去離子水
5. 吸水(shui)紙(zhi)
6. 盛(sheng)放洗液的(de)容器(qi)
試(shi)劑盒(he)的(de)儲存(cun)及(ji)有(you)效期
1. 未開封(feng)的試(shi)劑盒(he):所(suo)有試(shi)劑均(jun)按試(shi)劑瓶(ping)標(biao)簽上所(suo)示保存(cun)。請(qing)註意,收(shou)到試劑盒(he)後請(qing)盡快將(jiang)TMB 洗滌液(ye),終止液保存(cun)於(yu)4℃,其他試劑保存(cun)於(yu)-20℃。
2. 使(shi)用後的(de)試劑盒(he):剩(sheng)余試劑仍需按照(zhao)試(shi)劑瓶(ping)標(biao)簽所(suo)示的(de)溫度(du)保存(cun),開封(feng)後的(de)酶標(biao)板要(yao)加(jia)幹(gan)燥(zao)劑後密封保存(cun)於(yu)-20℃,避免(mian)潮(chao)濕(shi)。
註意:
試(shi)劑盒(he)內(nei)酶標(biao)條可拆卸,按實(shi)驗需(xu)求(qiu)可分(fen)多(duo)次(ci)使(shi)用;使(shi)用後的(de)剩(sheng)余試劑盒(he)建(jian)議在(zai)**實(shi)驗後 1個(ge)月(yue)內(nei)使(shi)用完(wan)畢(bi)。產品過期時間(jian)以盒(he)子上的標(biao)簽為(wei)準(zhun),保質(zhi)期內(nei)所(suo)有組(zu)分(fen)都(dou)確保是(shi)穩定的。
兔(tu)S100鈣(gai)結合蛋白(bai)B(S100B)ELISA試(shi)劑盒(he)標(biao)本的(de)采集(ji)與(yu)保存(cun)
1. 血(xue)清(qing):
將(jiang)收(shou)集(ji)於(yu)血(xue)清(qing)分(fen)離管(guan)的全(quan)血(xue)標(biao)本在(zai)室溫放(fang)置(zhi) 2 小時或(huo) 4oC 過(guo)夜,然(ran)後 1000×g 離(li)心 20 分(fen)鐘,取上(shang)清(qing)即可(ke),或(huo)將(jiang)上(shang)清(qing)置於(yu)-20oC 或(huo)-80oC 保存(cun),但(dan)應避免(mian)反(fan)復凍融。
2. 血(xue)漿:
用(yong) EDTA 或(huo)肝(gan)素(su)作為(wei)抗(kang)凝劑采集(ji)標(biao)本,並(bing)將(jiang)標(biao)本在(zai)采集(ji)後的(de) 30 分(fen)鐘內(nei)於 2-8oC 1000×g 離心(xin) 15 分(fen)鐘,取上(shang)清(qing)即可(ke)檢(jian)測,或(huo)將(jiang)上(shang)清(qing)置於(yu)-20oC 或(huo)-80oC 保存(cun),但(dan)應避免(mian)反(fan)復凍融。
3. 組(zu)織(zhi)勻(yun)漿:
1) 取適量(liang)組織(zhi)塊(kuai),於預冷PBS(0.01mol/L, pH 7.0-7.2)中(zhong)清(qing)洗去除(chu)血(xue)液(ye),稱(cheng)重(zhong)後備用(組(zu)織(zhi)塊(kuai)較(jiao)大(da)需(xu)先剪碎後再勻(yun)漿);
2) 可(ke)同時選用(yong)多(duo)種(zhong)勻(yun)漿方法達(da)到較(jiao)好的(de)破碎效果(guo):首(shou)先將(jiang)組(zu)織(zhi)塊(kuai)移(yi)入玻璃(li)勻(yun)漿器,加(jia)入5-10mL 預冷PBS 進(jin)行(xing)充分(fen)研磨(mo),該過(guo)程需(xu)在(zai)冰(bing)上進行(xing)(有條件(jian)實(shi)驗室可選用(yong)機器(qi)勻(yun)漿);得(de)到的勻(yun)漿液可(ke)再利用(yong)超(chao)聲破(po)碎或(huo)反(fan)復凍融 進(jin)壹(yi)步處(chu)理(超(chao)聲(sheng)破(po)碎過程中(zhong)註意冰(bing)浴(yu)降溫;反(fan)復凍融法(fa)可(ke)重(zhong)復(fu)2 次(ci))。
3) 將(jiang)制(zhi)備好的(de)勻(yun)漿液於(yu)5000×g 離(li)心(xin)5 分(fen)鐘,留取上(shang)清(qing)即可(ke)檢(jian)測。
4. 細胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye):
1)貼(tie)壁(bi)細胞(bao)需(xu)要(yao)先用(yong)胰酶消化,離(li)心(xin)收集(ji)細胞(bao)(懸(xuan)浮細胞(bao)可(ke)直接離心(xin)收集(ji));
2)將(jiang)收(shou)集(ji)到的細胞(bao)用(yong)冷PBS 洗3 次;
3)物(wu)理方法裂(lie)解(jie)細胞(bao)(可(ke)先超(chao)聲破碎細胞(bao),再反(fan)復凍融):
i 超(chao)聲破碎:取適量(liang)PBS 重(zhong)懸(xuan)細胞(bao),用(yong)壹(yi)定功率(lv)的超聲波處(chu)理細胞(bao)懸(xuan)液,使(shi)細胞(bao)急(ji)劇(ju)震蕩破(po)裂(lie)。
ii 反(fan)復凍融:將(jiang)待(dai)破(po)碎的細胞(bao)在(zai)-20 oC 以下(xia)冰(bing)凍,室溫融(rong)解(jie),反(fan)復3 次,使(shi)細胞(bao)溶脹破碎。
4)將(jiang)標(biao)本於(yu)2-8 oC 1500×g 離(li)心10 分(fen)鐘,收集上清(qing)備用。
5. 細胞(bao)培(pei)養(yang)上(shang)清(qing)或(huo)其它(ta)生(sheng)物標(biao)本:
請(qing) 1000×g 離心(xin) 20 分(fen)鐘,取上(shang)清(qing)即可(ke)檢(jian)測,或(huo)將(jiang)上(shang)清(qing)置於(yu)-20oC 或(huo)-80oC 保存(cun),但(dan)應避免(mian)反(fan)復凍融。
註意:
1. 以上(shang)標(biao)本均(jun)需密封保存(cun),4oC保存(cun)應(ying)小(xiao)於1周,-20oC不應超過1個(ge)月(yue),-80oC不應超過2個(ge)月(yue)。
2. 標(biao)本使(shi)用前應緩(huan)慢(man)均(jun)衡(heng)至室溫,不應加(jia)熱使(shi)之融(rong)解(jie)。
3. 實(shi)驗前紅細胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye)必須用標(biao)準(zhun)品稀釋液稀釋。
兔(tu)S100鈣(gai)結合蛋白(bai)B(S100B)ELISA試(shi)劑盒(he)試(shi)劑準(zhun)備
1. 使(shi)用前將(jiang)所(suo)有的(de)試(shi)劑和(he)標(biao)本緩(huan)慢(man)均(jun)衡(heng)至室溫(18-25oC),試(shi)劑不能(neng)直接在(zai)37oC溶解(jie)。
2. 標(biao)準(zhun)品(凍幹品(pin)):每(mei)瓶(ping)標(biao)準(zhun)品加(jia)入標(biao)準(zhun)品稀釋液1mL,蓋好後室溫靜(jing)置(zhi)大(da)約10分(fen)鐘,同時反(fan)復顛(dian)倒/搓(cuo)動以助(zhu)溶解(jie),其濃(nong)度(du)為(wei)1000 pg/mL。準(zhun)備7個(ge)稀釋標(biao)準(zhun)品的EP管(guan),每(mei)個(ge)EP管(guan)中加(jia)入150μL的標(biao)準(zhun)品稀釋液,如(ru)圖(tu)所(suo)示依次(ci)倍比稀釋成不同的梯度(du), 標(biao)準(zhun)品稀釋液(0pg/mL)直接作為(wei)空(kong)白(bai)孔。為(wei)保證(zheng)實(shi)驗結果(guo)有(you)效性,每(mei)次(ci)實(shi)驗請(qing)使(shi)用新的(de)標(biao)準(zhun)品溶液。
3. 濃(nong)洗滌液(ye):用(yong)580mL蒸(zheng)餾水或(huo)去離子水將(jiang)20mL濃(nong)洗滌液(ye)稀釋至600mL,進(jin)行(xing)30倍稀釋。
標(biao)本處(chu)理
1. 本(ben)公司只對(dui)試(shi)劑盒(he)本(ben)身(shen)負(fu)責,不對因使(shi)用該(gai)試(shi)劑盒(he)所(suo)造成(cheng)的(de)樣本消耗負(fu)責,請(qing)使(shi)用者(zhe)使(shi)用前充分(fen)考慮(lv)到樣本(ben)的可(ke)能(neng)使(shi)用量(liang),預留(liu)充足的(de)樣(yang)本(ben)。
2. 實(shi)驗前應預測(ce)標(biao)本含(han)量(liang),如果(guo)標(biao)本濃(nong)度(du)過高(gao),應(ying)對(dui)標(biao)本進(jin)行(xing)稀釋,使(shi)稀釋後的(de)標(biao)本符(fu)合試劑盒(he)的(de)檢(jian)測範(fan)圍(wei),計(ji)算時再乘以相應的稀釋倍數。
3. 若(ruo)所(suo)檢(jian)樣本(ben)不包(bao)含在(zai)說明書(shu)所(suo)列(lie)樣本(ben)之(zhi)中(zhong),建(jian)議進(jin)行(xing)預實(shi)驗驗(yan)證(zheng)其有(you)效性,並註意留(liu)存(cun)樣(yang)本(ben)。
4. 使(shi)用化學(xue)裂(lie)解(jie)液(ye)制(zhi)備的組(zu)織(zhi)勻(yun)漿或(huo)細胞(bao)提取液(ye)可(ke)能(neng)會由(you)於(yu)某(mou)些(xie)化學(xue)物(wu)質的(de)引入導致 ELISA實(shi)驗結果(guo)偏(pian)差(cha)。
5. 若(ruo)樣本為(wei)細胞(bao)培(pei)養(yang)上(shang)清(qing),因該(gai)類樣本幹擾因(yin)素(su) 較(jiao)多(duo),如(ru):細胞(bao)狀(zhuang)態(tai)、細胞(bao)數量(liang)、采樣(yang)時間(jian)等,所(suo)以可(ke)能(neng)存(cun)在(zai)檢(jian)測不出(chu)的(de)情況。
6. 某(mou)些(xie)天(tian)然(ran)蛋白(bai)或(huo)重(zhong)組(zu)蛋(dan)白(bai),包(bao)括原(yuan)核及真(zhen)核重(zhong)組(zu)蛋(dan)白(bai),可(ke)能(neng)因為(wei)與(yu)本產品所(suo)使(shi)用的(de)檢(jian)測抗(kang)體及(ji)捕獲抗(kang)體不匹配,而(er)不被檢(jian)測出(chu)。
7. 建(jian)議使(shi)用新鮮(xian)樣本(ben),保存(cun)時間(jian)過長(chang)可能(neng)會存(cun)在(zai)蛋白(bai)降解(jie)或(huo)變(bian)性導致實(shi)驗結果(guo)偏(pian)差(cha)。
兔(tu)S100鈣(gai)結合蛋白(bai)B(S100B)ELISA試(shi)劑盒(he)操(cao)作(zuo)步(bu)驟(zhou)
1. 加(jia)樣(yang):分(fen)別設空白(bai)孔(空(kong)白(bai)對(dui)照(zhao)孔不加(jia)樣(yang)品及酶標(biao)試劑,其余(yu)各步操(cao)作(zuo)相同)、標(biao)準(zhun)孔、待(dai)測樣(yang)品孔。在(zai)酶標(biao)包(bao)被板(ban)上標(biao)準(zhun)品準(zhun)確加(jia)樣(yang)50μl,待測樣品(pin)孔中(zhong)先加(jia)樣(yang)品稀釋液40μl,然(ran)後再加(jia)待(dai)測樣品10μl(樣(yang)品(pin)*終(zhong)稀釋度(du)為(wei)5倍)。加(jia)樣(yang)將(jiang)樣(yang)品(pin)加(jia)於(yu)酶標(biao)板孔底(di)部(bu),盡(jin)量(liang)不觸及孔壁(bi),輕(qing)輕(qing)晃(huang)動混(hun)勻(yun)。
2. 溫育:用封板膜(mo)封(feng)板(ban)後置(zhi)37℃溫育30分(fen)鐘。
3. 配液(ye):將(jiang)20倍濃(nong)縮洗滌液(ye)用蒸(zheng)餾(liu)水20倍稀釋後備用
4. 洗滌:小(xiao)心揭掉(diao)封板膜(mo),棄(qi)去液體,甩幹,每(mei)孔加(jia)滿(man)洗滌液(ye),靜(jing)置(zhi)30秒後棄(qi)去,如此(ci)重(zhong)復(fu)5次(ci),拍(pai)幹(gan)。
5. 加(jia)酶:每(mei)孔加(jia)入酶標(biao)試劑50μl,空(kong)白(bai)孔除(chu)外(wai)。
6. 溫育:操(cao)作(zuo)同(tong)3。
7. 洗滌:操(cao)作(zuo)同(tong)5。
8. 顯(xian)色:每(mei)孔先加(jia)入顯(xian)色劑A50μl,再加(jia)入顯(xian)色劑B50μl,輕(qing)輕(qing)震蕩混(hun)勻(yun),37℃避光(guang)顯(xian)色15分(fen)鐘.
9. 終(zhong)止:每(mei)孔加(jia)終(zhong)止液50μl,終止反(fan)應(此(ci)時藍(lan)色(se)立(li)轉(zhuan)黃(huang)色(se))。
10. 測(ce)定:以空(kong)白(bai)空(kong)調零(ling),450nm波長(chang)依序(xu)測量(liang)各孔的(de)吸光(guang)度(du)(OD值)。 測定應在(zai)加(jia)終(zhong)止液後15分(fen)鐘以內(nei)進行(xing)。
註意:
1. 試(shi)劑準(zhun)備:準(zhun)備壹次(ci)實(shi)驗所(suo)需要(yao)的(de)酶標(biao)條,其它(ta)的可從(cong)微孔板(ban)上拆下,密封,按照(zhao)說明書(shu)要(yao)求(qiu)保存(cun),以備下次(ci)使(shi)用。
2. 加(jia)樣(yang):實(shi)驗操(cao)作(zuo)中(zhong)請(qing)使(shi)用壹(yi)次(ci)性的吸頭(tou),避免(mian)交(jiao)叉(cha)汙染。加(jia)樣(yang)時註意不要(yao)有(you)氣泡(pao),將(jiang)樣(yang)品(pin)加(jia)於(yu)酶標(biao)板底(di)部(bu),盡(jin)量(liang)不觸及孔壁(bi),輕(qing)輕(qing)晃(huang)動混(hun)勻(yun)。加(jia)樣(yang)或(huo)加(jia)試(shi)劑時,**個(ge)孔與(yu)*後壹(yi)個(ge)孔加(jia)樣(yang)之間(jian)的時間(jian)間(jian)隔如(ru)果(guo)太(tai)大(da),將(jiang)會(hui)導致不同的“預溫育”時間(jian),從而(er)明顯(xian)地(di)影響(xiang)到測量(liang)值的(de)準(zhun)確性及重(zhong)復(fu)性。因此(ci),壹次(ci)加(jia)樣(yang)時間(jian)(包(bao)括標(biao)準(zhun)品及所(suo)有樣(yang)品(pin))*好控(kong)制在(zai)10分(fen)鐘內(nei)。推薦設(she)置(zhi)復孔進(jin)行(xing)實(shi)驗。
3. 溫育:為(wei)防止樣品蒸發,實(shi)驗時請(qing)將(jiang)加(jia)上(shang)蓋或(huo)覆(fu)膜(mo)的(de)酶標(biao)板置(zhi)於濕(shi)盒(he)內(nei),以避免(mian)液(ye)體(ti)蒸(zheng)發,洗板後應(ying)盡快進(jin)行(xing)下步(bu)操(cao)作(zuo),任(ren)何時侯都(dou)應避免(mian)酶標(biao)板處(chu)於(yu)幹(gan)燥(zao)狀(zhuang)態(tai),同時應嚴格(ge)遵守(shou)給(gei)定的(de)溫育時間(jian)和溫度(du)。
4. 洗滌:充(chong)分(fen)的洗滌非常(chang)重(zhong)要(yao),在(zai)每(mei)次(ci)洗滌過(guo)程中(zhong),都(dou)要(yao)將(jiang)洗滌液(ye)完全(quan)甩幹。洗滌過(guo)程中(zhong)反(fan)應孔中(zhong)殘留(liu)的洗滌液(ye)應在(zai)濾(lv)紙(zhi)上拍(pai)幹(gan),勿將(jiang)濾(lv)紙(zhi)直接放入反(fan)應孔中(zhong)吸水(shui),同時要(yao)消除(chu)板(ban)底(di)殘(can)留(liu)的(de)液體(ti)和(he)手指印,避免(mian)影響(xiang)*後的(de)酶標(biao)儀讀(du)數。如果(guo)有(you)自動洗板機(ji),應在(zai)熟練使(shi)用後再用到正式實(shi) 驗過(guo)程中(zhong)。
5. 反(fan)應時間(jian)的控(kong)制:加(jia)入底(di)物(wu)後請(qing)定時觀(guan)察反(fan)應孔的(de)顏色(se)變化(比(bi)如(ru),每(mei)隔(ge)10分(fen)鐘觀(guan)察壹(yi)次),如顏色較(jiao)深(shen),請(qing)提前加(jia)入終止液終止反(fan)應,避免(mian)反(fan)應過強(qiang)從(cong)而(er)影響(xiang)酶標(biao)儀光(guang)密度(du)讀(du)數。
6. 底(di)物(wu):底(di)物(wu)請(qing)避光(guang)保存(cun),在(zai)儲存(cun)和(he)溫育時避免(mian)強(qiang)光(guang)直接照射(she)。
7. 如(ru)果(guo)實(shi)驗室內(nei)濕度(du)低於60%,推(tui)薦使(shi)用加(jia)濕(shi)器提高(gao)濕(shi)度(du)水平(ping)。
實(shi)驗流(liu)程
1. 實(shi)驗前標(biao)準(zhun)品、試劑及(ji)樣(yang)本(ben)的準(zhun)備;
2. 加(jia)樣(yang)(標(biao)準(zhun)品及樣(yang)本)50μL,37℃孵(fu)育30分(fen)鐘;
3. 洗板5次(ci),加(jia)酶標(biao)試劑50ul,37℃孵(fu)育半小時;
4. 洗板5次(ci);加(jia)入顯(xian)色液A,B各50ul,37℃孵(fu)育顯(xian)色15分(fen)鐘
5. 加(jia)終(zhong)止液50μL,立即450nm讀(du)數。
6. 計(ji)算
兔(tu)S100鈣(gai)結合蛋白(bai)B(S100B)ELISA試(shi)劑盒(he)計(ji)算
各(ge)標(biao)準(zhun)品及樣(yang)本O.D.值(zhi)扣(kou)除(chu)空(kong)白(bai)孔O.D.值(zhi)後作(zuo)圖(七點圖),如(ru)設置(zhi)復(fu)孔,則(ze)應取其平(ping)均值(zhi)計(ji)算。以標(biao)準(zhun)品的濃(nong)度(du)為(wei)縱坐(zuo)標(biao)(或(huo)對(dui)數坐(zuo)標(biao)),O.D.值為(wei)橫(heng)坐(zuo)標(biao)(或(huo)對(dui)數坐(zuo)標(biao)),繪出(chu)標(biao)準(zhun)曲線(*佳方程式(shi)應(ying)依回(hui)歸(gui)方程計(ji)算的R2值來定(ding),以R2值(zhi)越(yue)趨近(jin)於1為(wei)好)。推(tui)薦使(shi)用專(zhuan)業制(zhi)作曲線軟(ruan)件(jian)進(jin)行(xing)分(fen)析,如(ru)curve expert 1.30,根據樣品O.D.值(zhi),由(you)標(biao)準(zhun)曲線查(zha)出(chu)相應的濃(nong)度(du),乘以稀釋倍數;或(huo)用(yong)標(biao)準(zhun)物的濃(nong)度(du)與O.D.值計(ji)算出(chu)標(biao)準(zhun)曲線的回(hui)歸(gui)方程式(shi),將(jiang)樣(yang)品(pin)的(de)O.D.值(zhi)代入方程式(shi),計(ji)算出(chu)樣(yang)品濃(nong)度(du),再乘以稀釋倍數,即為(wei)樣(yang)品的實(shi)際(ji)濃(nong)度(du)。
特(te)異(yi)性
本(ben)試劑盒(he)用(yong)於(yu)檢(jian)測兔(tu)S100鈣(gai)結合蛋白(bai)B(S100B),經(jing)檢(jian)測與(yu)其它(ta)相似物質無(wu)明顯(xian)交叉反(fan)應。
由(you)於(yu)受(shou)到技術(shu)及樣本來源的限(xian)制(zhi),不可能(neng)完成(cheng)對所(suo)有相關(guan)或(huo)相似物質交叉(cha)反(fan)應檢(jian)測,因(yin)此(ci)本試(shi)劑盒(he)有(you)可(ke)能(neng)與未經(jing)檢(jian)測的(de)其它(ta)物質有(you)交叉(cha)反(fan)應。
精密度(du)
精密度(du)用樣品測定值(zhi)的變異系(xi)數CV表示。CV(%) = SD/mean×100
批(pi)內(nei)差:取同(tong)批(pi)次試(shi)劑盒(he)對(dui)低、中、高(gao)值(zhi)定(ding)值樣本(ben)進(jin)行(xing)定量(liang)檢(jian)測,每(mei)份(fen)樣(yang)本(ben)連續測(ce)定(ding)20 次,分(fen)別計(ji)算不同濃(nong)度(du)樣本的平(ping)均值(zhi)及SD值。
批(pi)間(jian)差:選取3個(ge)不同批次的(de)試(shi)劑盒(he)分(fen)別對低、中、高(gao)值(zhi)定(ding)值樣本(ben)進(jin)行(xing)定量(liang)測定(ding),每(mei)個(ge)樣(yang)本使(shi)用同(tong)壹(yi)試(shi)劑盒(he)重(zhong)復(fu)測(ce)定8次,分(fen)別計(ji)算不同濃(nong)度(du)樣本的平(ping)均值(zhi)及SD值。
批(pi)內(nei)差: CV<10%
批(pi)間(jian)差: CV<12%
兔(tu)S100鈣(gai)結合蛋白(bai)B(S100B)ELISA試(shi)劑盒(he)穩定性
經(jing)測定(ding),試劑盒(he)在(zai)有效期內(nei)按推(tui)薦(jian)溫度(du)保存(cun),其活(huo)性降低率小(xiao)於5%。
為(wei)減(jian)小外(wai)部(bu)因(yin)素(su)對試(shi)劑盒(he)破(po)壞前後檢(jian)測值(zhi)的(de)影響(xiang),實(shi)驗室的環(huan)境(jing)條件(jian)需(xu)盡(jin)量(liang)保持(chi)壹(yi)致,尤(you)其是(shi)實(shi)驗室內(nei)溫度(du)、濕度(du)及溫育條件(jian)。其次(ci)由(you)同(tong)壹實(shi)驗員(yuan)來進(jin)行(xing)操(cao)作(zuo)可(ke)減(jian)少人為(wei)誤(wu)差。



