產(chan)品(pin)名(ming)稱(cheng)：兔(tu)白(bai)蛋(dan)白(bai)(ALB)ELISA試(shi)劑盒

                                                       96T       僅供(gong)體(ti)外(wai)研(yan)究(jiu)使用(yong)，不用(yong)於(yu)臨床診斷!

兔白(bai)蛋(dan)白(bai)(ALB)ELISA試(shi)劑盒

本試(shi)劑盒運用雙(shuang)抗(kang)體(ti)夾(jia)心(xin)ELISA法(fa)定量測(ce)定兔血(xue)清、血(xue)漿(jiang)、組織(zhi)勻漿(jiang)、細胞(bao)裂(lie)解(jie)液、細(xi)胞(bao)培養上(shang)清(qing)液和(he)其(qi)他生物(wu)液體(ti)中兔(tu)白(bai)蛋(dan)白(bai)(ALB)含(han)量。

 檢測(ce)範圍(wei)

617.28-50000ng/mL

 *低檢測(ce)限(xian)

245.5ng/mL

 實驗(yan)原(yuan)理

將兔白(bai)蛋(dan)白(bai)(ALB)抗(kang)體(ti)包被於(yu)96孔微(wei)孔板(ban)中，制(zhi)成(cheng)固(gu)相(xiang)載體(ti)，向微(wei)孔中分(fen)別(bie)加入(ru)標(biao)準(zhun)品或(huo)標(biao)本，其(qi)中(zhong)的(de)兔白(bai)蛋(dan)白(bai)(ALB)與連接(jie)於(yu)固(gu)相(xiang)載體(ti)上(shang)的(de)抗(kang)體(ti)結(jie)合，然(ran)後(hou)加(jia)入生物(wu)素(su)化(hua)的(de)兔白(bai)蛋(dan)白(bai)(ALB)抗(kang)體(ti)，將未結(jie)合的(de)生物(wu)素(su)化(hua)抗(kang)體(ti)洗(xi)凈後(hou)，加入HRP標(biao)記的親(qin)和(he)素，再次(ci)徹底(di)洗(xi)滌(di)後加(jia)入(ru)TMB底(di)物(wu)顯(xian)色(se)。TMB在(zai)過氧化(hua)物(wu)酶(mei)的(de)催(cui)化下轉(zhuan)化成(cheng)藍色(se)，並(bing)在酸的(de)作(zuo)用(yong)下轉(zhuan)化成(cheng)*終的(de)黃(huang)色(se)。顏(yan)色(se)的(de)深(shen)淺(qian)和(he)樣品中(zhong)的兔白(bai)蛋(dan)白(bai)(ALB)呈正相關(guan)。用(yong)酶(mei)標(biao)儀(yi)在(zai)450nm波(bo)長(chang)下測定吸光度(du)(O.D.值(zhi))，計算(suan)樣品濃度。

 試劑盒內(nei)容

兔白(bai)蛋(dan)白(bai)(ALB)ELISA試(shi)劑盒需自(zi)備(bei)的(de)設備(bei)及(ji)試劑

1.         450±10nm濾光(guang)片的(de)酶(mei)標(biao)儀(yi)(建(jian)議(yi)儀(yi)器(qi)使(shi)用前(qian)提前(qian)預熱(re))

2.         單道或(huo)多道(dao)微(wei)量加液器(qi)及(ji)吸頭

3.         稀(xi)釋樣品的(de)EP管(guan)

4.         蒸餾水或(huo)去(qu)離(li)子水

5.         吸水紙(zhi)

6.         盛放(fang)洗(xi)液的(de)容器(qi)

 試劑盒的儲存(cun)及(ji)有(you)效(xiao)期

1.         未開(kai)封(feng)的(de)試劑盒：所有(you)試(shi)劑均(jun)按試劑瓶標(biao)簽(qian)上(shang)所(suo)示保存(cun)。請註意(yi)，收(shou)到試劑盒後請盡(jin)快(kuai)將TMB 洗(xi)滌(di)液，終(zhong)止(zhi)液保存(cun)於(yu)4℃，其(qi)他試劑保存(cun)於(yu)-20℃。

2.         使用(yong)後(hou)的(de)試劑盒：剩余試(shi)劑仍需按照試劑瓶標(biao)簽(qian)所示的溫(wen)度保存(cun)，開封(feng)後(hou)的酶(mei)標(biao)板(ban)要加(jia)幹燥劑後密封保存(cun)於(yu)-20℃，避免(mian)潮(chao)濕(shi)。

註意(yi)：

試劑盒內(nei)酶(mei)標(biao)條(tiao)可拆卸(xie)，按實驗(yan)需求(qiu)可分(fen)多(duo)次(ci)使(shi)用(yong)；使(shi)用(yong)後的剩余(yu)試劑盒建議(yi)在**實驗(yan)後 1個月(yue)內(nei)使(shi)用(yong)完畢(bi)。產(chan)品(pin)過(guo)期時(shi)間以(yi)盒(he)子上(shang)的(de)標(biao)簽(qian)為(wei)準(zhun)，保質(zhi)期內(nei)所(suo)有(you)組(zu)分都確保是(shi)穩(wen)定的。

兔白(bai)蛋(dan)白(bai)(ALB)ELISA試(shi)劑盒標(biao)本的(de)采(cai)集與保存(cun)

1.         血(xue)清：

將收(shou)集於(yu)血(xue)清分(fen)離(li)管(guan)的(de)全(quan)血(xue)標(biao)本在(zai)室(shi)溫(wen)放(fang)置(zhi) 2 小(xiao)時(shi)或(huo) 4^oC 過(guo)夜，然(ran)後(hou) 1000×g 離(li)心(xin) 20 分鐘(zhong)，取(qu)上(shang)清(qing)即(ji)可，或(huo)將上(shang)清(qing)置(zhi)於(yu)-20^oC 或-80^oC 保存(cun)，但應(ying)避免(mian)反復(fu)凍融(rong)。

2.         血(xue)漿(jiang)：

用 EDTA 或(huo)肝(gan)素(su)作(zuo)為(wei)抗(kang)凝(ning)劑采集標(biao)本，並(bing)將標(biao)本在(zai)采(cai)集後的(de) 30 分鐘(zhong)內(nei)於(yu) 2-8^oC 1000×g 離(li)心(xin) 15 分鐘(zhong)，取(qu)上(shang)清(qing)即(ji)可檢測(ce)，或(huo)將上(shang)清(qing)置(zhi)於(yu)-20^oC 或-80^oC 保存(cun)，但應(ying)避免(mian)反復(fu)凍融(rong)。

3. 組織(zhi)勻漿(jiang)：

1） 取(qu)適量組織(zhi)塊，於(yu)預冷PBS（0.01mol/L, pH 7.0-7.2）中清洗(xi)去(qu)除血(xue)液，稱(cheng)重後備(bei)用(yong)（組織(zhi)塊較大需先(xian)剪(jian)碎(sui)後(hou)再勻漿(jiang)）；

2） 可同時(shi)選(xuan)用(yong)多(duo)種勻漿(jiang)方法(fa)達到較好(hao)的破碎(sui)效(xiao)果(guo)：首先將組織(zhi)塊移入(ru)玻(bo)璃(li)勻漿(jiang)器，加入(ru)5-10mL 預冷PBS 進(jin)行(xing)充分研磨(mo)，該(gai)過(guo)程(cheng)需(xu)在(zai)冰(bing)上(shang)進(jin)行(xing)（有(you)條(tiao)件(jian)實驗(yan)室可選(xuan)用(yong)機(ji)器勻(yun)漿(jiang)）；得到的勻漿(jiang)液可再(zai)利用(yong)超聲破(po)碎(sui)或(huo)反復凍融(rong) 進(jin)壹(yi)步(bu)處理(li)（超聲破(po)碎(sui)過(guo)程(cheng)中(zhong)註意(yi)冰浴降溫(wen)；反復(fu)凍融(rong)法(fa)可重復2 次(ci)）。

3） 將制備(bei)好(hao)的勻漿(jiang)液於(yu)5000×g 離(li)心(xin)5 分鐘(zhong)，留(liu)取(qu)上(shang)清(qing)即(ji)可檢測(ce)。

4. 細胞(bao)裂(lie)解(jie)液：

1）貼壁細胞(bao)需(xu)要(yao)先(xian)用(yong)胰酶(mei)消(xiao)化(hua)，離(li)心(xin)收(shou)集細胞(bao)（懸浮細(xi)胞(bao)可直(zhi)接(jie)離(li)心(xin)收(shou)集）；

2）將收(shou)集到的(de)細胞(bao)用(yong)冷(leng)PBS 洗(xi)3 次(ci)；

3）物(wu)理(li)方(fang)法(fa)裂(lie)解細胞(bao)（可先(xian)超聲破(po)碎(sui)細(xi)胞(bao)，再(zai)反(fan)復(fu)凍(dong)融(rong)）：

i 超聲破(po)碎(sui)：取(qu)適量PBS 重懸細胞(bao)，用(yong)壹(yi)定功(gong)率(lv)的(de)超聲波(bo)處理(li)細胞(bao)懸液，使(shi)細(xi)胞(bao)急(ji)劇(ju)震(zhen)蕩(dang)破(po)裂(lie)。

ii 反復(fu)凍(dong)融(rong)：將待(dai)破(po)碎(sui)的(de)細胞(bao)在(zai)-20 ^oC 以(yi)下冰凍，室(shi)溫(wen)融(rong)解，反復(fu)3 次(ci)，使(shi)細(xi)胞(bao)溶(rong)脹破碎(sui)。

4）將標(biao)本於(yu)2-8 ^oC 1500×g 離(li)心(xin)10 分鐘(zhong)，收(shou)集上(shang)清(qing)備(bei)用(yong)。

5. 細胞(bao)培養上(shang)清(qing)或(huo)其(qi)它生物(wu)標(biao)本：

請 1000×g 離(li)心(xin) 20 分鐘(zhong)，取(qu)上(shang)清(qing)即(ji)可檢測(ce)，或(huo)將上(shang)清(qing)置(zhi)於(yu)-20^oC 或-80^oC 保存(cun)，但應(ying)避免(mian)反復(fu)凍融(rong)。

註意(yi)：

1.         以(yi)上(shang)標(biao)本均(jun)需(xu)密封保存(cun)，4^oC保存(cun)應小(xiao)於(yu)1周，-20^oC不應超過1個月(yue)，-80^oC不應超過2個月(yue)。

2.         標(biao)本使(shi)用(yong)前(qian)應緩(huan)慢(man)均(jun)衡(heng)至(zhi)室(shi)溫(wen)，不應(ying)加熱使之融(rong)解。

3.         實驗(yan)前(qian)紅(hong)細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液必須用標(biao)準(zhun)品稀(xi)釋液稀(xi)釋。

兔白(bai)蛋(dan)白(bai)(ALB)ELISA試(shi)劑盒試劑準備(bei)

1.         使用(yong)前(qian)將所有(you)的(de)試劑和標(biao)本緩(huan)慢(man)均(jun)衡(heng)至(zhi)室(shi)溫(wen)(18-25oC)，試劑不能直(zhi)接(jie)在37oC溶(rong)解。

2.         標(biao)準(zhun)品(凍幹(gan)品(pin))：每瓶(ping)標(biao)準(zhun)品加(jia)入(ru)標(biao)準(zhun)品稀(xi)釋液1mL，蓋(gai)好(hao)後室溫(wen)靜(jing)置(zhi)大(da)約(yue)10分鐘(zhong)，同時(shi)反(fan)復(fu)顛(dian)倒(dao)/搓動以(yi)助溶(rong)解(jie)，其(qi)濃度為(wei)50000ng/mL。準(zhun)備(bei)7個稀(xi)釋標(biao)準(zhun)品的(de)EP管(guan)，每個EP管(guan)中(zhong)加(jia)入(ru)150μL的(de)標(biao)準(zhun)品稀(xi)釋液，如(ru)圖所示依次(ci)倍比稀(xi)釋成(cheng)不同的梯度， 標(biao)準(zhun)品稀(xi)釋液(0pg/mL)直(zhi)接(jie)作(zuo)為(wei)空(kong)白(bai)孔(kong)。為(wei)保證(zheng)實驗(yan)結(jie)果有(you)效(xiao)性(xing)，每次(ci)實驗(yan)請使(shi)用新(xin)的(de)標(biao)準(zhun)品溶(rong)液。

3.         濃洗(xi)滌(di)液：用580mL蒸餾水或(huo)去(qu)離(li)子水將20mL濃洗(xi)滌(di)液稀(xi)釋至(zhi)600mL，進(jin)行(xing)30倍稀(xi)釋。

標(biao)本處理(li)

1.         本公司(si)只(zhi)對(dui)試(shi)劑盒本身(shen)負(fu)責(ze)，不(bu)對(dui)因(yin)使(shi)用(yong)該(gai)試(shi)劑盒所造成(cheng)的樣本消(xiao)耗(hao)負(fu)責(ze)，請(qing)使(shi)用者使(shi)用前(qian)充分考慮到樣本的(de)可能(neng)使(shi)用量(liang)，預(yu)留(liu)充足的樣本。

2.         實驗(yan)前(qian)應預(yu)測(ce)標(biao)本含(han)量(liang)，如果(guo)標(biao)本濃度過(guo)高，應(ying)對(dui)標(biao)本進(jin)行(xing)稀(xi)釋，使(shi)稀(xi)釋後(hou)的標(biao)本符合試(shi)劑盒的檢測(ce)範圍(wei)，計(ji)算(suan)時(shi)再(zai)乘(cheng)以(yi)相(xiang)應(ying)的稀(xi)釋倍數。

3.         若(ruo)所檢樣本不(bu)包含在(zai)說(shuo)明書所(suo)列樣本之中(zhong)，建(jian)議(yi)進(jin)行(xing)預(yu)實驗(yan)驗(yan)證其(qi)有(you)效(xiao)性(xing)，並註意(yi)留存(cun)樣本。

4.         使用(yong)化(hua)學(xue)裂(lie)解(jie)液制(zhi)備(bei)的(de)組織(zhi)勻漿(jiang)或細胞(bao)提(ti)取(qu)液可能(neng)會(hui)由於(yu)某些(xie)化(hua)學(xue)物(wu)質(zhi)的引(yin)入導(dao)致(zhi)  ELISA實驗(yan)結(jie)果偏(pian)差(cha)。

5.         若(ruo)樣本為(wei)細(xi)胞(bao)培養上(shang)清(qing)，因(yin)該(gai)類(lei)樣本幹(gan)擾(rao)因(yin)素(su) 較多，如：細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態(tai)、細胞(bao)數量、采樣時(shi)間等，所(suo)以(yi)可能(neng)存(cun)在檢測(ce)不(bu)出(chu)的情(qing)況(kuang)。

6.         某些(xie)天然(ran)蛋(dan)白(bai)或(huo)重組蛋(dan)白(bai)，包括原(yuan)核及(ji)真核(he)重組蛋(dan)白(bai)，可能(neng)因(yin)為(wei)與本產(chan)品(pin)所(suo)使(shi)用(yong)的檢測(ce)抗(kang)體(ti)及(ji)捕獲(huo)抗(kang)體(ti)不匹(pi)配(pei)，而不(bu)被檢測(ce)出(chu)。

7.         建議(yi)使用(yong)新(xin)鮮(xian)樣本，保存(cun)時(shi)間過(guo)長可能(neng)會(hui)存(cun)在蛋(dan)白(bai)降(jiang)解或變(bian)性(xing)導(dao)致(zhi)實驗(yan)結(jie)果偏(pian)差(cha)。

兔白(bai)蛋(dan)白(bai)(ALB)ELISA試(shi)劑盒操作(zuo)步(bu)驟(zhou)

1.         加樣：分別(bie)設空(kong)白(bai)孔(kong)（空白(bai)對(dui)照孔不(bu)加樣品及(ji)酶(mei)標(biao)試(shi)劑，其(qi)余(yu)各(ge)步操(cao)作(zuo)相(xiang)同）、標(biao)準(zhun)孔、待(dai)測(ce)樣品孔(kong)。在酶(mei)標(biao)包被板(ban)上(shang)標(biao)準(zhun)品準(zhun)確(que)加(jia)樣50μl，待(dai)測(ce)樣品孔(kong)中先(xian)加(jia)樣品稀(xi)釋液40μl，然(ran)後(hou)再(zai)加待(dai)測(ce)樣品10μl（樣品*終(zhong)稀(xi)釋度(du)為(wei)5倍）。加樣將樣品加(jia)於(yu)酶(mei)標(biao)板(ban)孔底(di)部(bu)，盡(jin)量(liang)不觸及(ji)孔壁，輕輕晃動混勻。

2.         溫(wen)育(yu)：用封(feng)板(ban)膜(mo)封板(ban)後置(zhi)37℃溫(wen)育(yu)30分鐘(zhong)。  

3.         配(pei)液：將20倍濃縮洗(xi)滌(di)液用(yong)蒸(zheng)餾水20倍稀(xi)釋後(hou)備(bei)用(yong)

4.         洗(xi)滌(di)：小(xiao)心(xin)揭掉(diao)封板(ban)膜(mo)，棄去(qu)液體(ti)，甩幹(gan)，每孔(kong)加滿(man)洗(xi)滌(di)液，靜(jing)置(zhi)30秒後棄(qi)去(qu)，如(ru)此重復5次(ci)，拍(pai)幹(gan)。

5.         加酶(mei)：每孔(kong)加入(ru)酶(mei)標(biao)試(shi)劑50μl，空白(bai)孔(kong)除外(wai)。

6.         溫(wen)育(yu)：操作(zuo)同3。

7.         洗(xi)滌(di)：操作(zuo)同5。

8.         顯(xian)色(se)：每孔(kong)先加(jia)入顯(xian)色(se)劑A50μl，再加入顯(xian)色(se)劑B50μl，輕輕震(zhen)蕩(dang)混(hun)勻(yun)，37℃避光(guang)顯(xian)色(se)15分(fen)鐘(zhong).

9.         終止(zhi)：每孔(kong)加終(zhong)止液50μl，終(zhong)止(zhi)反應(ying)（此時(shi)藍色(se)立轉(zhuan)黃(huang)色(se)）。

10.     測定：以(yi)空(kong)白(bai)空(kong)調(tiao)零(ling)，450nm波(bo)長(chang)依(yi)序(xu)測(ce)量(liang)各(ge)孔的(de)吸光度(du)（OD值(zhi)）。 測定應在(zai)加終(zhong)止(zhi)液後(hou)15分(fen)鐘(zhong)以(yi)內(nei)進(jin)行(xing)。

註意(yi)：

1.         試劑準備(bei)：準備(bei)壹(yi)次(ci)實驗(yan)所需(xu)要的酶(mei)標(biao)條(tiao)，其(qi)它的可從(cong)微(wei)孔板(ban)上(shang)拆下，密封，按照說明(ming)書要(yao)求保存(cun)，以(yi)備(bei)下次(ci)使(shi)用(yong)。

2.         加樣：實驗(yan)操作(zuo)中(zhong)請(qing)使用壹次(ci)性(xing)的(de)吸頭，避免(mian)交(jiao)叉(cha)汙(wu)染。加樣時(shi)註意(yi)不要有(you)氣(qi)泡(pao)，將樣品加(jia)於(yu)酶(mei)標(biao)板(ban)底(di)部(bu)，盡(jin)量(liang)不觸及(ji)孔壁，輕輕晃動混勻。加樣或加(jia)試劑時(shi)，**個孔(kong)與*後壹個孔(kong)加樣之間的(de)時(shi)間間隔(ge)如果(guo)太(tai)大，將會(hui)導(dao)致(zhi)不(bu)同的“預(yu)溫(wen)育(yu)”時(shi)間，從(cong)而明(ming)顯(xian)地(di)影(ying)響到(dao)測(ce)量(liang)值的準(zhun)確性(xing)及(ji)重復性。因(yin)此，壹(yi)次(ci)加(jia)樣時(shi)間(包括標(biao)準(zhun)品及(ji)所有(you)樣品)*好(hao)控制在10分(fen)鐘(zhong)內(nei)。推(tui)薦(jian)設置(zhi)復(fu)孔進(jin)行(xing)實驗(yan)。

3.          溫(wen)育(yu)：為(wei)防止樣品蒸(zheng)發，實驗(yan)時(shi)請(qing)將加上(shang)蓋(gai)或(huo)覆膜(mo)的酶(mei)標(biao)板(ban)置(zhi)於(yu)濕(shi)盒內(nei)，以(yi)避免(mian)液體(ti)蒸發(fa)，洗(xi)板(ban)後應(ying)盡(jin)快(kuai)進(jin)行(xing)下步操作(zuo)，任(ren)何(he)時(shi)侯(hou)都(dou)應(ying)避免(mian)酶(mei)標(biao)板(ban)處於(yu)幹燥狀(zhuang)態(tai)，同時(shi)應(ying)嚴格遵(zun)守給定的溫(wen)育(yu)時(shi)間和(he)溫(wen)度。

4.         洗(xi)滌(di)：充分的洗(xi)滌(di)非(fei)常重要，在每次(ci)洗(xi)滌(di)過程(cheng)中(zhong)，都(dou)要(yao)將洗(xi)滌(di)液完(wan)全(quan)甩幹(gan)。洗(xi)滌(di)過程(cheng)中(zhong)反(fan)應(ying)孔中殘留的(de)洗(xi)滌(di)液應(ying)在(zai)濾紙(zhi)上(shang)拍(pai)幹(gan)，勿將濾紙(zhi)直(zhi)接(jie)放(fang)入(ru)反(fan)應(ying)孔(kong)中吸水，同時(shi)要(yao)消(xiao)除板(ban)底(di)殘(can)留的液體(ti)和手(shou)指印(yin)，避免(mian)影(ying)響*後(hou)的(de)酶(mei)標(biao)儀(yi)讀(du)數。如果有(you)自(zi)動洗(xi)板(ban)機(ji)，應在(zai)熟練(lian)使(shi)用後(hou)再用到正式實 驗(yan)過程(cheng)中(zhong)。

5.         反應(ying)時(shi)間的(de)控制(zhi)：加入(ru)底(di)物(wu)後(hou)請(qing)定時(shi)觀(guan)察(cha)反(fan)應(ying)孔的顏色(se)變(bian)化(hua)(比如，每隔(ge)10分鐘(zhong)觀(guan)察壹(yi)次(ci))，如(ru)顏(yan)色(se)較深(shen)，請(qing)提(ti)前(qian)加入(ru)終(zhong)止(zhi)液終(zhong)止(zhi)反應(ying)，避免(mian)反應(ying)過強從(cong)而影(ying)響酶(mei)標(biao)儀(yi)光(guang)密度讀(du)數。

6.         底(di)物(wu)：底(di)物(wu)請(qing)避光(guang)保存(cun)，在儲(chu)存(cun)和溫(wen)育(yu)時(shi)避免(mian)強光(guang)直(zhi)接(jie)照射。

7.         如果(guo)實驗(yan)室內(nei)濕(shi)度低於(yu)60%，推薦使用加濕(shi)器提高(gao)濕(shi)度水平(ping)。

 實驗(yan)流程(cheng)

1.         實驗(yan)前(qian)標(biao)準(zhun)品、試(shi)劑及(ji)樣本的(de)準(zhun)備(bei)；

2.         加樣（標(biao)準(zhun)品及(ji)樣本）50μL，37℃孵育(yu)30分鐘(zhong)；

3.         洗(xi)板(ban)5次(ci)，加(jia)酶(mei)標(biao)試(shi)劑50ul，37℃孵育(yu)半小(xiao)時(shi)；

4.         洗(xi)板(ban)5次(ci)；加(jia)入(ru)顯(xian)色(se)液A，B各(ge)50ul,37℃孵育(yu)顯(xian)色(se)15分(fen)鐘(zhong)

5.         加終(zhong)止(zhi)液50μL，立即450nm讀(du)數。

6.    計算(suan)

兔白(bai)蛋(dan)白(bai)(ALB)ELISA試(shi)劑盒計算(suan)

各(ge)標(biao)準(zhun)品及(ji)樣本O.D.值(zhi)扣除空(kong)白(bai)孔(kong)O.D.值後作(zuo)圖(七點(dian)圖)，如設置(zhi)復(fu)孔，則(ze)應取(qu)其(qi)平(ping)均(jun)值(zhi)計(ji)算(suan)。以(yi)標(biao)準(zhun)品的(de)濃度為(wei)縱(zong)坐(zuo)標(biao)(或(huo)對(dui)數坐標(biao))，O.D.值(zhi)為(wei)橫坐標(biao)(或(huo)對(dui)數坐標(biao)），繪(hui)出(chu)標(biao)準(zhun)曲(qu)線(*佳方程(cheng)式應依(yi)回(hui)歸方(fang)程(cheng)計(ji)算(suan)的R2值(zhi)來定，以(yi)R2值(zhi)越趨近(jin)於(yu)1為(wei)好(hao))。推薦使用(yong)專(zhuan)業(ye)制(zhi)作(zuo)曲(qu)線軟(ruan)件(jian)進(jin)行(xing)分(fen)析(xi)，如(ru)curve expert 1.30，根(gen)據樣品O.D.值(zhi)，由標(biao)準(zhun)曲(qu)線查(zha)出(chu)相應(ying)的濃度，乘(cheng)以(yi)稀(xi)釋倍數；或用標(biao)準(zhun)物(wu)的(de)濃度與O.D.值計算(suan)出(chu)標(biao)準(zhun)曲(qu)線的回(hui)歸方(fang)程(cheng)式，將樣品的(de)O.D.值代(dai)入(ru)方(fang)程(cheng)式，計算(suan)出(chu)樣品濃度，再(zai)乘以(yi)稀(xi)釋倍數，即為(wei)樣品的(de)實際濃度。

 特(te)異性(xing)

本試(shi)劑盒用於(yu)檢測(ce)兔(tu)白(bai)蛋(dan)白(bai)(ALB)，經檢測(ce)與其(qi)它相似物(wu)質(zhi)無明(ming)顯(xian)交(jiao)叉(cha)反(fan)應。

由於(yu)受到技術(shu)及(ji)樣本來源(yuan)的限(xian)制(zhi)，不可能(neng)完(wan)成(cheng)對(dui)所(suo)有(you)相(xiang)關(guan)或(huo)相似物(wu)質(zhi)交(jiao)叉(cha)反(fan)應檢測(ce)，因(yin)此本試(shi)劑盒有(you)可能(neng)與未經檢測(ce)的(de)其(qi)它物(wu)質(zhi)有(you)交(jiao)叉(cha)反(fan)應。

 精密度

精密度用(yong)樣品測(ce)定值的(de)變(bian)異(yi)系數CV表示。CV(%) = SD/mean×100

批內(nei)差(cha)：取(qu)同批次(ci)試(shi)劑盒對(dui)低(di)、中(zhong)、高值定值樣本進(jin)行(xing)定量檢測(ce),每份(fen)樣本連(lian)續(xu)測定20 次(ci)，分(fen)別(bie)計算(suan)不同濃度樣本的(de)平(ping)均(jun)值(zhi)及(ji)SD值。

批間差(cha)：選取(qu)3個不(bu)同批次(ci)的(de)試(shi)劑盒分別(bie)對(dui)低(di)、中(zhong)、高值定值樣本進(jin)行(xing)定量測(ce)定，每個樣本使(shi)用(yong)同壹試(shi)劑盒重復測定8次(ci)，分(fen)別(bie)計算(suan)不同濃度樣本的(de)平(ping)均(jun)值(zhi)及(ji)SD值。

批內(nei)差(cha)： CV<10%

批間差(cha)： CV<12%

兔白(bai)蛋(dan)白(bai)(ALB)ELISA試(shi)劑盒穩(wen)定性

經測(ce)定，試劑盒在有(you)效(xiao)期內(nei)按推薦(jian)溫(wen)度保存(cun)，其(qi)活(huo)性(xing)降(jiang)低率小(xiao)於(yu)5%。

為(wei)減(jian)小(xiao)外(wai)部(bu)因(yin)素(su)對(dui)試(shi)劑盒破壞前(qian)後檢測(ce)值(zhi)的影(ying)響，實驗(yan)室的(de)環境條件(jian)需(xu)盡(jin)量(liang)保持(chi)壹(yi)致(zhi)，尤(you)其(qi)是(shi)實驗(yan)室內(nei)溫(wen)度、濕(shi)度及(ji)溫(wen)育(yu)條件(jian)。其(qi)次(ci)由(you)同壹實驗(yan)員(yuan)來進(jin)行(xing)操(cao)作(zuo)可減(jian)少(shao)人(ren)為(wei)誤(wu)差。