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授(shou)權代(dai)理(li)品(pin)牌
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ELISA試(shi)劑盒(he)
- 農殘檢測(ce)試(shi)劑盒(he)
- 馬(ma)ELISA試(shi)劑盒(he)
- 牛(niu)ELISA試(shi)劑盒(he)
- 魚ELISA試(shi)劑盒(he)
- 人(ren)ELISA試(shi)劑盒(he)/Human
- 小鼠ELISA試(shi)劑盒(he)/Mouse
- 大(da)鼠ELISA試(shi)劑盒(he)/Rat
- 羊(yang)ELISA試(shi)劑盒(he)/Sheep
- 兔(tu)ELISA試(shi)劑盒(he)/ Rabbi...
- 豬(zhu)ELISA試(shi)劑盒(he)/Porcin...
- 豚(tun)鼠ELISA試(shi)劑盒(he)/Guine...
- 狗(gou)ELISA試(shi)劑盒(he)/ Canin...
- 雞(ji)ELISA試(shi)劑盒(he)/Chicke...
- 鴨(ya)ELISA試(shi)劑盒(he)
- 植物(wu)ELISA試(shi)劑盒(he)
- 猴ELISA試(shi)劑盒(he)/ Monke...
- 其他ELISA試(shi)劑盒(he)
- 抗(kang)體
- 蛋白(bai)
- CLIA試(shi)劑盒(he)
- 細胞生物(wu)學(xue)
- 分子(zi)生(sheng)物(wu)學(xue)/常(chang)用(yong)試(shi)劑
96T 僅供(gong)體外研(yan)究使(shi)用(yong),不(bu)用(yong)於(yu)臨(lin)床(chuang)診(zhen)斷(duan)!
兔白(bai)介素(su)10(IL10)ELISA試(shi)劑盒(he)
本試(shi)劑盒(he)運用(yong)雙(shuang)抗(kang)體夾心(xin)ELISA法定(ding)量測定(ding)兔血(xue)清、血(xue)漿、組(zu)織勻(yun)漿、細胞裂(lie)解(jie)液(ye)、細胞培養上(shang)清液(ye)和(he)其他生物(wu)液(ye)體中兔白(bai)介素(su)10(IL10)含量。
檢測(ce)範圍(wei)
7.813-500pg/mL
*低檢(jian)測限(xian)
2.4pg/mL
實驗(yan)原(yuan)理
將兔白(bai)介素(su)10(IL10)抗體包(bao)被(bei)於(yu)96孔微(wei)孔板中,制成(cheng)固(gu)相(xiang)載體,向微(wei)孔中分別(bie)加(jia)入標(biao)準品或標(biao)本,其中的(de)兔白(bai)介素(su)10(IL10)與連(lian)接於(yu)固(gu)相(xiang)載體上的(de)抗(kang)體結(jie)合,然(ran)後(hou)加(jia)入生物(wu)素(su)化的(de)兔白(bai)介素(su)10(IL10)抗體,將未結(jie)合的(de)生(sheng)物(wu)素(su)化抗體洗(xi)凈(jing)後(hou),加(jia)入HRP標(biao)記(ji)的(de)親和(he)素(su),再(zai)次徹底(di)洗(xi)滌(di)後加(jia)入TMB底(di)物(wu)顯色(se)。TMB在過(guo)氧化物(wu)酶(mei)的(de)催化下(xia)轉(zhuan)化成藍(lan)色(se),並(bing)在(zai)酸的(de)作(zuo)用(yong)下(xia)轉(zhuan)化成*終的(de)黃色(se)。顏色(se)的(de)深(shen)淺和(he)樣(yang)品中的(de)兔白(bai)介素(su)10(IL10)呈正(zheng)相(xiang)關。用(yong)酶(mei)標(biao)儀在(zai)450nm波(bo)長(chang)下(xia)測(ce)定(ding)吸光(guang)度(du)(O.D.值(zhi)),計(ji)算樣(yang)品濃(nong)度。
試(shi)劑盒(he)內容(rong)
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試(shi)劑名(ming)稱 |
數量 |
試(shi)劑名(ming)稱 |
數量 |
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96孔板(預包(bao)被(bei)) |
1 |
96孔板覆(fu)膜 |
2 |
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標(biao)準品 |
0.5ml×1 |
標(biao)準品稀釋液(ye) |
1.5ml×1瓶(ping) |
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顯色(se)劑A液(ye) |
6ml×1瓶(ping) |
樣(yang)品稀釋液(ye) |
6ml×1瓶(ping) |
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顯色(se)劑B液(ye) |
6ml×1瓶(ping) |
終止液(ye) |
6ml×1瓶(ping) |
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酶(mei)標(biao)試(shi)劑 |
6ml×1瓶(ping) |
密封(feng)袋(dai) |
1 |
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濃洗(xi)滌(di)液(ye)(30×) |
1×20mL |
使(shi)用(yong)說明書(shu) |
1 |
兔白(bai)介素(su)10(IL10)ELISA試(shi)劑盒(he)需自備的(de)設(she)備(bei)及(ji)試(shi)劑
1. 450±10nm濾(lv)光(guang)片(pian)的(de)酶(mei)標(biao)儀(建議儀(yi)器使(shi)用(yong)前(qian)提(ti)前(qian)預(yu)熱(re))
2. 單道(dao)或(huo)多道微(wei)量加(jia)液(ye)器及(ji)吸頭(tou)
3. 稀釋樣(yang)品的(de)EP管(guan)
4. 蒸餾水或(huo)去離子水
5. 吸水紙
6. 盛(sheng)放(fang)洗(xi)液(ye)的(de)容(rong)器
試(shi)劑盒(he)的(de)儲存及(ji)有效期(qi)
1. 未開封的(de)試(shi)劑盒(he):所有試(shi)劑均(jun)按(an)試(shi)劑瓶(ping)標(biao)簽(qian)上所示保(bao)存。請(qing)註意,收(shou)到試(shi)劑盒(he)後(hou)請(qing)盡(jin)快將TMB 洗(xi)滌(di)液(ye),終(zhong)止液(ye)保(bao)存於(yu)4℃,其他試(shi)劑保(bao)存於(yu)-20℃。
2. 使(shi)用(yong)後(hou)的(de)試(shi)劑盒(he):剩(sheng)余試(shi)劑仍需按(an)照(zhao)試(shi)劑瓶(ping)標(biao)簽(qian)所示的(de)溫(wen)度保(bao)存,開封後的(de)酶(mei)標(biao)板要(yao)加(jia)幹燥劑後密(mi)封保(bao)存於(yu)-20℃,避(bi)免潮(chao)濕。
註意:
試(shi)劑盒(he)內酶(mei)標(biao)條可拆(chai)卸(xie),按(an)實驗(yan)需求(qiu)可分多次使(shi)用(yong);使(shi)用(yong)後(hou)的(de)剩(sheng)余試(shi)劑盒(he)建議在(zai)**實(shi)驗後 1個(ge)月內使(shi)用(yong)完(wan)畢。產(chan)品(pin)過(guo)期(qi)時(shi)間以(yi)盒子上(shang)的(de)標(biao)簽(qian)為(wei)準,保(bao)質期(qi)內所有組分都(dou)確保(bao)是穩定(ding)的(de)。
兔白(bai)介素(su)10(IL10)ELISA試(shi)劑盒(he)標(biao)本的(de)采集(ji)與(yu)保(bao)存
1. 血清(qing):
將收(shou)集於(yu)血(xue)清分離(li)管(guan)的(de)全血(xue)標(biao)本在(zai)室溫(wen)放置 2 小時或 4oC 過(guo)夜(ye),然(ran)後(hou) 1000×g 離(li)心(xin) 20 分鐘(zhong),取(qu)上(shang)清即可,或(huo)將上(shang)清(qing)置(zhi)於(yu)-20oC 或(huo)-80oC 保(bao)存,但應避(bi)免反復凍融(rong)。
2. 血漿:
用(yong) EDTA 或(huo)肝素(su)作為(wei)抗(kang)凝(ning)劑采集(ji)標(biao)本,並(bing)將標(biao)本在(zai)采集(ji)後(hou)的(de) 30 分鐘(zhong)內於(yu) 2-8oC 1000×g 離(li)心 15 分鐘(zhong),取(qu)上(shang)清即可檢(jian)測(ce),或(huo)將上(shang)清(qing)置(zhi)於(yu)-20oC 或(huo)-80oC 保(bao)存,但應避(bi)免反復凍融(rong)。
3. 組織勻(yun)漿:
1) 取(qu)適(shi)量組織塊,於(yu)預(yu)冷PBS(0.01mol/L, pH 7.0-7.2)中清洗(xi)去除血(xue)液(ye),稱(cheng)重(zhong)後(hou)備用(yong)(組(zu)織塊較(jiao)大(da)需先剪(jian)碎後(hou)再(zai)勻(yun)漿);
2) 可同(tong)時選(xuan)用(yong)多種勻(yun)漿方(fang)法(fa)達到較好的(de)破碎效(xiao)果:首先將組(zu)織塊移(yi)入玻(bo)璃(li)勻(yun)漿器,加(jia)入5-10mL 預冷(leng)PBS 進(jin)行充(chong)分研(yan)磨,該過程(cheng)需在冰上(shang)進(jin)行(有條件實(shi)驗室可(ke)選用(yong)機(ji)器勻(yun)漿);得(de)到的(de)勻(yun)漿液(ye)可(ke)再(zai)利(li)用(yong)超(chao)聲破碎或(huo)反復凍融(rong) 進(jin)壹步(bu)處(chu)理(li)(超聲破碎過(guo)程(cheng)中註意冰浴(yu)降溫(wen);反復凍融(rong)法(fa)可重(zhong)復2 次)。
3) 將制(zhi)備(bei)好(hao)的(de)勻(yun)漿液(ye)於(yu)5000×g 離(li)心5 分鐘(zhong),留(liu)取(qu)上(shang)清即可檢(jian)測(ce)。
4. 細胞裂(lie)解(jie)液(ye):
1)貼(tie)壁(bi)細胞需要(yao)先用(yong)胰(yi)酶(mei)消(xiao)化,離心收(shou)集細胞(懸浮(fu)細胞可直接離心(xin)收(shou)集);
2)將收(shou)集到的(de)細胞用(yong)冷(leng)PBS 洗(xi)3 次;
3)物(wu)理(li)方法裂(lie)解(jie)細胞(可先超(chao)聲破碎細胞,再(zai)反復凍融(rong)):
i 超聲破碎:取(qu)適(shi)量PBS 重(zhong)懸細胞,用(yong)壹定(ding)功率的(de)超(chao)聲波處(chu)理細胞懸液(ye),使(shi)細胞急劇震蕩破裂(lie)。
ii 反復凍融(rong):將待破碎的(de)細胞在-20 oC 以(yi)下(xia)冰凍,室溫(wen)融解,反復3 次,使(shi)細胞溶脹破碎。
4)將標(biao)本於(yu)2-8 oC 1500×g 離心(xin)10 分鐘(zhong),收(shou)集上(shang)清備(bei)用(yong)。
5. 細胞培養上(shang)清或(huo)其它(ta)生物(wu)標(biao)本:
請(qing) 1000×g 離心(xin) 20 分鐘(zhong),取(qu)上(shang)清即可檢(jian)測(ce),或(huo)將上(shang)清(qing)置(zhi)於(yu)-20oC 或(huo)-80oC 保(bao)存,但應避(bi)免反復凍融(rong)。
註意:
1. 以(yi)上標(biao)本均(jun)需密封保(bao)存,4oC保(bao)存應小於(yu)1周(zhou),-20oC不(bu)應超(chao)過(guo)1個(ge)月,-80oC不(bu)應超(chao)過(guo)2個(ge)月。
2. 標(biao)本使(shi)用(yong)前(qian)應緩(huan)慢(man)均衡至(zhi)室溫(wen),不(bu)應加(jia)熱(re)使(shi)之融解。
3. 實驗(yan)前(qian)紅(hong)細胞裂(lie)解(jie)液(ye)必(bi)須(xu)用(yong)標(biao)準品稀釋液(ye)稀釋。
兔白(bai)介素(su)10(IL10)ELISA試(shi)劑盒(he)試(shi)劑準備
1. 使(shi)用(yong)前(qian)將所有的(de)試(shi)劑和(he)標(biao)本緩(huan)慢(man)均衡至(zhi)室溫(wen)(18-25oC),試(shi)劑不(bu)能(neng)直(zhi)接在37oC溶解(jie)。
2. 標(biao)準品(凍幹品(pin)):每瓶(ping)標(biao)準品加(jia)入標(biao)準品稀釋液(ye)1mL,蓋(gai)好後(hou)室溫(wen)靜(jing)置(zhi)大(da)約10分鐘(zhong),同(tong)時(shi)反復顛(dian)倒(dao)/搓(cuo)動(dong)以(yi)助溶解(jie),其濃度為(wei)500pg/mL。準備7個稀釋標(biao)準品的(de)EP管(guan),每(mei)個(ge)EP管(guan)中加(jia)入150μL的(de)標(biao)準品稀釋液(ye),如圖(tu)所示依(yi)次倍比稀釋成不(bu)同的(de)梯度, 標(biao)準品稀釋液(ye)(0pg/mL)直(zhi)接作為(wei)空(kong)白(bai)孔。為(wei)保(bao)證實(shi)驗(yan)結(jie)果有效性,每(mei)次實驗請(qing)使(shi)用(yong)新(xin)的(de)標(biao)準品溶液(ye)。
3. 濃洗(xi)滌(di)液(ye):用(yong)580mL蒸餾水或(huo)去離子水將20mL濃洗(xi)滌(di)液(ye)稀釋至600mL,進行(xing)30倍稀釋。
標(biao)本處(chu)理(li)
1. 本公司只(zhi)對試(shi)劑盒(he)本(ben)身(shen)負責(ze),不(bu)對因(yin)使(shi)用(yong)該試(shi)劑盒(he)所造(zao)成(cheng)的(de)樣(yang)本消(xiao)耗(hao)負責(ze),請(qing)使(shi)用(yong)者使(shi)用(yong)前(qian)充(chong)分考慮到樣(yang)本的(de)可(ke)能(neng)使(shi)用(yong)量,預留(liu)充(chong)足(zu)的(de)樣(yang)本。
2. 實驗(yan)前(qian)應預(yu)測(ce)標(biao)本含(han)量,如果標(biao)本濃(nong)度(du)過(guo)高(gao),應對標(biao)本進(jin)行(xing)稀釋,使(shi)稀釋後的(de)標(biao)本符合試(shi)劑盒(he)的(de)檢(jian)測(ce)範(fan)圍(wei),計(ji)算時(shi)再(zai)乘以(yi)相(xiang)應的(de)稀釋倍數。
3. 若所檢樣(yang)本不(bu)包(bao)含(han)在說明書(shu)所列(lie)樣(yang)本之(zhi)中,建議進(jin)行(xing)預實驗(yan)驗證(zheng)其有效性,並(bing)註意留(liu)存樣(yang)本。
4. 使(shi)用(yong)化學(xue)裂(lie)解(jie)液(ye)制(zhi)備的(de)組(zu)織勻(yun)漿或(huo)細胞提(ti)取(qu)液(ye)可(ke)能(neng)會(hui)由(you)於(yu)某(mou)些化學(xue)物(wu)質的(de)引(yin)入導(dao)致 ELISA實驗(yan)結(jie)果偏差(cha)。
5. 若樣(yang)本為(wei)細胞培養上(shang)清,因(yin)該類樣(yang)本幹擾(rao)因素(su) 較多,如:細胞狀態、細胞數量、采樣(yang)時間(jian)等,所以(yi)可能(neng)存在檢(jian)測不(bu)出的(de)情(qing)況(kuang)。
6. 某(mou)些天然(ran)蛋(dan)白(bai)或重(zhong)組(zu)蛋白(bai),包(bao)括原(yuan)核及(ji)真核重(zhong)組(zu)蛋白(bai),可能(neng)因(yin)為(wei)與(yu)本(ben)產(chan)品(pin)所使(shi)用(yong)的(de)檢(jian)測(ce)抗(kang)體及(ji)捕獲抗(kang)體不(bu)匹(pi)配(pei),而不(bu)被(bei)檢(jian)測出。
7. 建議使(shi)用(yong)新(xin)鮮樣(yang)本,保(bao)存時間(jian)過長(chang)可能(neng)會(hui)存在蛋(dan)白(bai)降解或變(bian)性(xing)導(dao)致實驗(yan)結(jie)果偏差(cha)。
兔白(bai)介素(su)10(IL10)ELISA試(shi)劑盒(he)操(cao)作(zuo)步驟
1. 加(jia)樣(yang):分別(bie)設(she)空(kong)白(bai)孔(空(kong)白(bai)對照(zhao)孔不(bu)加(jia)樣(yang)品及(ji)酶(mei)標(biao)試(shi)劑,其余各(ge)步操(cao)作(zuo)相(xiang)同)、標(biao)準孔、待測樣(yang)品孔。在酶(mei)標(biao)包(bao)被(bei)板上標(biao)準品準確加(jia)樣(yang)50μl,待測樣(yang)品孔中先加(jia)樣(yang)品稀釋液(ye)40μl,然(ran)後(hou)再(zai)加(jia)待測樣(yang)品10μl(樣(yang)品*終(zhong)稀釋度為(wei)5倍(bei))。加(jia)樣(yang)將樣(yang)品加(jia)於(yu)酶(mei)標(biao)板孔底(di)部,盡(jin)量不(bu)觸及(ji)孔壁,輕(qing)輕(qing)晃(huang)動(dong)混(hun)勻(yun)。
2. 溫(wen)育:用(yong)封(feng)板膜封(feng)板後置(zhi)37℃溫(wen)育30分鐘(zhong)。
3. 配液(ye):將20倍(bei)濃(nong)縮洗(xi)滌(di)液(ye)用(yong)蒸餾水20倍(bei)稀釋後備(bei)用(yong)
4. 洗(xi)滌(di):小心揭掉(diao)封(feng)板膜,棄去液(ye)體,甩(shuai)幹,每(mei)孔加(jia)滿洗(xi)滌(di)液(ye),靜(jing)置(zhi)30秒後棄去,如此重(zhong)復5次,拍幹。
5. 加(jia)酶(mei):每(mei)孔加(jia)入酶(mei)標(biao)試(shi)劑50μl,空(kong)白(bai)孔除外(wai)。
6. 溫(wen)育:操(cao)作(zuo)同3。
7. 洗(xi)滌(di):操作(zuo)同5。
8. 顯色(se):每孔先加(jia)入顯色(se)劑A50μl,再(zai)加(jia)入顯色(se)劑B50μl,輕(qing)輕(qing)震(zhen)蕩混(hun)勻(yun),37℃避光(guang)顯色(se)15分鐘(zhong).
9. 終止:每(mei)孔加(jia)終(zhong)止液(ye)50μl,終(zhong)止反應(此時(shi)藍(lan)色(se)立(li)轉(zhuan)黃色(se))。
10. 測定(ding):以(yi)空(kong)白(bai)空(kong)調(tiao)零,450nm波(bo)長(chang)依(yi)序(xu)測量各(ge)孔的(de)吸光(guang)度(du)(OD值(zhi))。 測(ce)定(ding)應在(zai)加(jia)終(zhong)止液(ye)後(hou)15分鐘(zhong)以(yi)內進行(xing)。
註意:
1. 試(shi)劑準備:準備壹次實驗所需要(yao)的(de)酶(mei)標(biao)條,其它(ta)的(de)可(ke)從(cong)微(wei)孔板上拆(chai)下(xia),密(mi)封(feng),按(an)照(zhao)說明書(shu)要(yao)求(qiu)保(bao)存,以(yi)備下(xia)次使(shi)用(yong)。
2. 加(jia)樣(yang):實驗(yan)操作(zuo)中請(qing)使(shi)用(yong)壹次性的(de)吸頭(tou),避免交(jiao)叉(cha)汙染。加(jia)樣(yang)時註意不(bu)要(yao)有氣泡,將樣(yang)品加(jia)於(yu)酶(mei)標(biao)板底(di)部,盡(jin)量不(bu)觸及(ji)孔壁,輕(qing)輕(qing)晃(huang)動(dong)混(hun)勻(yun)。加(jia)樣(yang)或加(jia)試(shi)劑時(shi),**個(ge)孔與*後壹個(ge)孔加(jia)樣(yang)之間(jian)的(de)時(shi)間(jian)間(jian)隔如果太大(da),將會(hui)導(dao)致不(bu)同的(de)“預(yu)溫(wen)育”時(shi)間(jian),從(cong)而(er)明顯地影(ying)響(xiang)到測量值的(de)準確性及(ji)重(zhong)復性。因(yin)此,壹次加(jia)樣(yang)時間(jian)(包(bao)括標(biao)準品及(ji)所有樣(yang)品)*好(hao)控(kong)制在(zai)10分鐘(zhong)內。推(tui)薦(jian)設(she)置(zhi)復孔進行實(shi)驗。
3. 溫(wen)育:為(wei)防止樣(yang)品蒸發(fa),實驗(yan)時(shi)請(qing)將加(jia)上(shang)蓋(gai)或(huo)覆(fu)膜的(de)酶(mei)標(biao)板置於(yu)濕(shi)盒內,以(yi)避免液(ye)體蒸發(fa),洗(xi)板後應盡(jin)快進(jin)行(xing)下(xia)步(bu)操(cao)作(zuo),任(ren)何(he)時侯(hou)都(dou)應避(bi)免酶(mei)標(biao)板處於(yu)幹燥狀態,同時(shi)應嚴(yan)格(ge)遵(zun)守給(gei)定(ding)的(de)溫(wen)育時(shi)間(jian)和溫(wen)度。
4. 洗(xi)滌(di):充(chong)分的(de)洗(xi)滌(di)非常(chang)重(zhong)要(yao),在(zai)每次洗(xi)滌(di)過程(cheng)中,都(dou)要(yao)將洗(xi)滌(di)液(ye)完(wan)全甩(shuai)幹。洗(xi)滌(di)過程(cheng)中反應孔中殘留(liu)的(de)洗(xi)滌(di)液(ye)應在(zai)濾(lv)紙上拍(pai)幹,勿(wu)將濾(lv)紙直接放入反應孔中吸水,同(tong)時(shi)要(yao)消(xiao)除板底(di)殘留(liu)的(de)液(ye)體和手(shou)指印(yin),避免影(ying)響(xiang)*後的(de)酶(mei)標(biao)儀讀數。如果有自動(dong)洗(xi)板機,應在(zai)熟練使(shi)用(yong)後(hou)再(zai)用(yong)到正式(shi)實 驗(yan)過程(cheng)中。
5. 反應時(shi)間(jian)的(de)控(kong)制:加(jia)入底(di)物(wu)後(hou)請(qing)定(ding)時觀(guan)察反應孔的(de)顏(yan)色(se)變化(比如,每(mei)隔10分鐘(zhong)觀(guan)察壹次),如顏(yan)色(se)較深(shen),請(qing)提(ti)前(qian)加(jia)入終止液(ye)終(zhong)止反應,避(bi)免反應過(guo)強(qiang)從(cong)而(er)影(ying)響(xiang)酶(mei)標(biao)儀光(guang)密(mi)度(du)讀數。
6. 底(di)物(wu):底(di)物(wu)請(qing)避光(guang)保(bao)存,在儲存和溫(wen)育時(shi)避(bi)免強(qiang)光(guang)直(zhi)接照(zhao)射。
7. 如果實驗(yan)室內濕度(du)低於(yu)60%,推(tui)薦(jian)使(shi)用(yong)加(jia)濕(shi)器提(ti)高(gao)濕度水(shui)平。
實驗(yan)流程(cheng)
1. 實驗(yan)前(qian)標(biao)準品、試(shi)劑及(ji)樣(yang)本的(de)準備;
2. 加(jia)樣(yang)(標(biao)準品及(ji)樣(yang)本)50μL,37℃孵育30分鐘(zhong);
3. 洗(xi)板5次,加(jia)酶(mei)標(biao)試(shi)劑50ul,37℃孵育半小時;
4. 洗(xi)板5次;加(jia)入顯色(se)液(ye)A,B各(ge)50ul,37℃孵育顯色(se)15分鐘(zhong)
5. 加(jia)終(zhong)止液(ye)50μL,立(li)即(ji)450nm讀數。
6. 計(ji)算
兔白(bai)介素(su)10(IL10)ELISA試(shi)劑盒(he)計(ji)算
各(ge)標(biao)準品及(ji)樣(yang)本O.D.值(zhi)扣除空(kong)白(bai)孔O.D.值後作(zuo)圖(tu)(七(qi)點(dian)圖(tu)),如設(she)置(zhi)復孔,則應取(qu)其平均(jun)值計(ji)算。以(yi)標(biao)準品的(de)濃(nong)度(du)為(wei)縱(zong)坐(zuo)標(biao)(或對數坐標(biao)),O.D.值為(wei)橫(heng)坐(zuo)標(biao)(或對數坐標(biao)),繪(hui)出標(biao)準曲線(*佳方程(cheng)式(shi)應依(yi)回(hui)歸方程(cheng)計(ji)算的(de)R2值(zhi)來(lai)定(ding),以(yi)R2值越趨近於(yu)1為(wei)好(hao))。推(tui)薦(jian)使(shi)用(yong)專(zhuan)業制作(zuo)曲(qu)線軟(ruan)件(jian)進(jin)行分析(xi),如curve expert 1.30,根據(ju)樣(yang)品O.D.值(zhi),由(you)標(biao)準曲線查(zha)出相(xiang)應的(de)濃(nong)度(du),乘(cheng)以(yi)稀釋倍數;或用(yong)標(biao)準物(wu)的(de)濃(nong)度(du)與(yu)O.D.值(zhi)計(ji)算出標(biao)準曲線的(de)回(hui)歸方程(cheng)式(shi),將樣(yang)品的(de)O.D.值(zhi)代(dai)入方程(cheng)式(shi),計(ji)算出樣(yang)品濃(nong)度,再(zai)乘以(yi)稀釋倍數,即為(wei)樣(yang)品的(de)實(shi)際濃度(du)。
特異(yi)性
本試(shi)劑盒(he)用(yong)於(yu)檢(jian)測兔(tu)白(bai)介素(su)10(IL10),經檢測與其它(ta)相(xiang)似物(wu)質無(wu)明顯交(jiao)叉(cha)反應。
由(you)於(yu)受(shou)到技術及(ji)樣(yang)本來(lai)源的(de)限(xian)制,不(bu)可能(neng)完(wan)成對所有相(xiang)關或相(xiang)似物(wu)質交(jiao)叉(cha)反應檢(jian)測(ce),因(yin)此本(ben)試(shi)劑盒(he)有可能(neng)與(yu)未經檢測的(de)其它(ta)物(wu)質有交(jiao)叉(cha)反應。
精密(mi)度
精密(mi)度用(yong)樣(yang)品測(ce)定(ding)值的(de)變(bian)異(yi)系(xi)數CV表示。CV(%) = SD/mean×100
批內差(cha):取(qu)同(tong)批次試(shi)劑盒(he)對低(di)、中、高(gao)值定(ding)值樣(yang)本進(jin)行定(ding)量檢測(ce),每份(fen)樣(yang)本連(lian)續測定(ding)20 次,分別(bie)計(ji)算不(bu)同濃度(du)樣(yang)本的(de)平均(jun)值及(ji)SD值(zhi)。
批間(jian)差(cha):選取(qu)3個(ge)不(bu)同批次的(de)試(shi)劑盒(he)分別(bie)對低(di)、中、高(gao)值定(ding)值樣(yang)本進(jin)行定(ding)量測定(ding),每個(ge)樣(yang)本使(shi)用(yong)同(tong)壹試(shi)劑盒(he)重(zhong)復測定(ding)8次,分別(bie)計(ji)算不(bu)同濃度(du)樣(yang)本的(de)平均(jun)值及(ji)SD值(zhi)。
批內差(cha): CV<10%
批間(jian)差(cha): CV<12%
兔白(bai)介素(su)10(IL10)ELISA試(shi)劑盒(he)穩定(ding)性
經測定(ding),試(shi)劑盒(he)在(zai)有效期(qi)內按(an)推(tui)薦(jian)溫(wen)度保(bao)存,其活性降低率小於(yu)5%。
為(wei)減(jian)小外部因(yin)素(su)對試(shi)劑盒(he)破壞(huai)前(qian)後(hou)檢測(ce)值(zhi)的(de)影(ying)響(xiang),實驗室的(de)環(huan)境(jing)條件需盡(jin)量保(bao)持(chi)壹致(zhi),尤(you)其是實(shi)驗室內溫(wen)度、濕度(du)及(ji)溫(wen)育條件。其次由(you)同壹實(shi)驗(yan)員來(lai)進(jin)行(xing)操作可(ke)減(jian)少人(ren)為(wei)誤差(cha)。



