產品名(ming)稱(cheng)：兔(tu)骨成(cheng)型(xing)蛋(dan)白(bai)2(BMP2)ELISA試劑盒

                                                       96T       僅供體外(wai)研(yan)究使(shi)用(yong)，不(bu)用(yong)於(yu)臨床(chuang)診(zhen)斷(duan)!

兔(tu)骨(gu)成型(xing)蛋(dan)白(bai)2(BMP2)ELISA試劑盒

本(ben)試(shi)劑盒運用(yong)雙(shuang)抗(kang)體夾(jia)心(xin)ELISA法定(ding)量測(ce)定(ding)兔(tu)血(xue)清(qing)、血(xue)漿(jiang)、組織勻(yun)漿(jiang)、細胞裂(lie)解液(ye)、細(xi)胞(bao)培養上清(qing)液(ye)和(he)其他生(sheng)物液(ye)體(ti)中兔(tu)骨(gu)成型(xing)蛋(dan)白(bai)2(BMP2)含量。

 檢(jian)測(ce)範(fan)圍

31.25-2000pg/mL

 *低(di)檢(jian)測(ce)限

11.5pg/mL

 實(shi)驗(yan)原(yuan)理

將(jiang)兔(tu)骨(gu)成型(xing)蛋(dan)白(bai)2(BMP2)抗(kang)體包(bao)被(bei)於(yu)96孔微(wei)孔板(ban)中，制(zhi)成固相載體(ti)，向(xiang)微(wei)孔中分(fen)別(bie)加(jia)入(ru)標(biao)準品或(huo)標(biao)本(ben)，其中的(de)兔(tu)骨(gu)成型(xing)蛋(dan)白(bai)2(BMP2)與(yu)連接於(yu)固相載體(ti)上的(de)抗(kang)體結合，然(ran)後加(jia)入(ru)生(sheng)物素化的兔(tu)骨(gu)成型(xing)蛋(dan)白(bai)2(BMP2)抗(kang)體，將(jiang)未(wei)結合的生(sheng)物素化抗(kang)體洗(xi)凈(jing)後，加(jia)入(ru)HRP標(biao)記的親和(he)素，再次(ci)徹底(di)洗(xi)滌後加(jia)入(ru)TMB底(di)物顯(xian)色。TMB在(zai)過(guo)氧化物酶(mei)的(de)催化(hua)下轉化成(cheng)藍色，並(bing)在酸的作(zuo)用(yong)下轉化成(cheng)*終的(de)黃(huang)色。顏色的(de)深淺(qian)和(he)樣品中的(de)兔(tu)骨(gu)成型(xing)蛋(dan)白(bai)2(BMP2)呈正(zheng)相關。用(yong)酶(mei)標(biao)儀在450nm波(bo)長(chang)下測(ce)定(ding)吸(xi)光度(du)(O.D.值)，計算樣(yang)品濃度。

 試(shi)劑盒內容(rong)

兔(tu)骨(gu)成型(xing)蛋(dan)白(bai)2(BMP2)ELISA試劑盒需(xu)自備(bei)的(de)設(she)備(bei)及(ji)試(shi)劑

1.         450±10nm濾(lv)光(guang)片(pian)的(de)酶(mei)標(biao)儀(建(jian)議儀(yi)器(qi)使(shi)用(yong)前(qian)提前(qian)預(yu)熱(re))

2.         單(dan)道(dao)或(huo)多(duo)道(dao)微(wei)量加(jia)液(ye)器(qi)及(ji)吸(xi)頭(tou)

3.         稀(xi)釋樣(yang)品的(de)EP管(guan)

4.         蒸餾水或去(qu)離(li)子(zi)水

5.         吸(xi)水紙

6.         盛(sheng)放(fang)洗(xi)液的容(rong)器

 試(shi)劑盒的(de)儲(chu)存(cun)及(ji)有效期(qi)

1.         未(wei)開(kai)封(feng)的試(shi)劑盒：所有試(shi)劑均(jun)按(an)試(shi)劑瓶標簽(qian)上所示(shi)保存(cun)。請註意，收到(dao)試劑盒後請盡快將TMB 洗(xi)滌液，終止(zhi)液(ye)保存(cun)於4℃，其(qi)他試(shi)劑保存(cun)於-20℃。

2.         使(shi)用(yong)後的試(shi)劑盒：剩(sheng)余(yu)試劑仍需(xu)按照(zhao)試(shi)劑瓶標簽(qian)所示(shi)的(de)溫(wen)度(du)保存(cun)，開封(feng)後的酶(mei)標(biao)板(ban)要加(jia)幹(gan)燥(zao)劑後密封(feng)保存(cun)於-20℃，避(bi)免(mian)潮濕(shi)。

註意：

試(shi)劑盒內酶(mei)標(biao)條可(ke)拆卸，按(an)實驗(yan)需(xu)求可(ke)分(fen)多(duo)次(ci)使用(yong)；使(shi)用(yong)後的剩(sheng)余(yu)試劑盒建(jian)議在(zai)**實(shi)驗(yan)後 1個月(yue)內使(shi)用(yong)完畢。產品過(guo)期(qi)時(shi)間(jian)以盒子(zi)上的(de)標(biao)簽(qian)為(wei)準，保質期(qi)內所有組分(fen)都(dou)確保是(shi)穩定(ding)的(de)。

兔(tu)骨(gu)成型(xing)蛋(dan)白(bai)2(BMP2)ELISA試劑盒標(biao)本(ben)的采(cai)集與(yu)保存(cun)

1.         血(xue)清(qing)：

將(jiang)收(shou)集於血(xue)清分(fen)離管(guan)的(de)全血(xue)標(biao)本(ben)在室溫放(fang)置 2 小(xiao)時或(huo) 4^oC 過(guo)夜(ye)，然(ran)後 1000×g 離心(xin) 20 分(fen)鐘(zhong)，取(qu)上清(qing)即(ji)可(ke)，或將上清(qing)置於-20^oC 或(huo)-80^oC 保存(cun)，但應(ying)避免(mian)反(fan)復凍融(rong)。

2.         血(xue)漿(jiang)：

用(yong) EDTA 或(huo)肝(gan)素作(zuo)為(wei)抗(kang)凝劑采(cai)集(ji)標(biao)本，並將標(biao)本(ben)在采集(ji)後的 30 分(fen)鐘(zhong)內於(yu) 2-8^oC 1000×g 離(li)心 15 分(fen)鐘(zhong)，取(qu)上清(qing)即(ji)可(ke)檢測(ce)，或(huo)將上清(qing)置於-20^oC 或(huo)-80^oC 保存(cun)，但應(ying)避免(mian)反(fan)復凍融(rong)。

3. 組織勻(yun)漿(jiang)：

1） 取(qu)適量組織塊(kuai)，於(yu)預(yu)冷PBS（0.01mol/L, pH 7.0-7.2）中清(qing)洗(xi)去(qu)除(chu)血(xue)液(ye)，稱(cheng)重(zhong)後備(bei)用(yong)（組織塊(kuai)較(jiao)大需(xu)先剪碎(sui)後再勻(yun)漿(jiang)）；

2） 可(ke)同時選(xuan)用(yong)多(duo)種勻漿方(fang)法(fa)達到(dao)較好(hao)的破碎(sui)效果：首先將組織塊(kuai)移(yi)入玻(bo)璃(li)勻(yun)漿器，加(jia)入(ru)5-10mL 預(yu)冷PBS 進行(xing)充(chong)分(fen)研磨，該(gai)過(guo)程需(xu)在冰上進行(xing)（有條(tiao)件實驗(yan)室(shi)可(ke)選(xuan)用(yong)機(ji)器(qi)勻(yun)漿(jiang)）；得到(dao)的勻(yun)漿液(ye)可(ke)再利用(yong)超(chao)聲(sheng)破碎(sui)或(huo)反(fan)復凍融(rong) 進壹步(bu)處(chu)理(li)（超(chao)聲(sheng)破碎(sui)過(guo)程中註意冰浴降(jiang)溫(wen)；反(fan)復凍融(rong)法(fa)可(ke)重復2 次(ci)）。

3） 將(jiang)制(zhi)備(bei)好(hao)的勻(yun)漿液於5000×g 離心5 分(fen)鐘(zhong)，留(liu)取上清(qing)即(ji)可(ke)檢測(ce)。

4. 細(xi)胞(bao)裂解液(ye)：

1）貼(tie)壁(bi)細(xi)胞(bao)需(xu)要先用(yong)胰(yi)酶(mei)消(xiao)化，離心(xin)收集細(xi)胞（懸(xuan)浮細(xi)胞可(ke)直(zhi)接離(li)心(xin)收(shou)集(ji)）；

2）將(jiang)收(shou)集到(dao)的細(xi)胞用(yong)冷(leng)PBS 洗(xi)3 次(ci)；

3）物理(li)方(fang)法(fa)裂(lie)解(jie)細(xi)胞（可(ke)先超(chao)聲(sheng)破碎(sui)細(xi)胞(bao)，再(zai)反(fan)復凍融(rong)）：

i 超(chao)聲(sheng)破碎(sui)：取(qu)適量PBS 重懸(xuan)細胞(bao)，用(yong)壹(yi)定(ding)功(gong)率的超(chao)聲(sheng)波處理細(xi)胞(bao)懸(xuan)液，使(shi)細胞急劇震(zhen)蕩破裂(lie)。

ii 反(fan)復凍融(rong)：將(jiang)待(dai)破碎(sui)的(de)細(xi)胞(bao)在-20 ^oC 以(yi)下冰(bing)凍，室(shi)溫(wen)融(rong)解(jie)，反(fan)復3 次(ci)，使細(xi)胞溶脹破碎(sui)。

4）將(jiang)標(biao)本於2-8 ^oC 1500×g 離(li)心(xin)10 分(fen)鐘(zhong)，收(shou)集上清(qing)備(bei)用(yong)。

5. 細(xi)胞(bao)培養上清(qing)或(huo)其它(ta)生(sheng)物標(biao)本(ben)：

請(qing) 1000×g 離(li)心 20 分(fen)鐘(zhong)，取(qu)上清(qing)即(ji)可(ke)檢測(ce)，或(huo)將上清(qing)置於-20^oC 或(huo)-80^oC 保存(cun)，但應(ying)避免(mian)反(fan)復凍融(rong)。

註意：

1.         以(yi)上標(biao)本(ben)均需(xu)密封(feng)保存(cun)，4^oC保存(cun)應(ying)小(xiao)於1周(zhou)，-20^oC不應(ying)超(chao)過(guo)1個月(yue)，-80^oC不應(ying)超(chao)過(guo)2個月(yue)。

2.         標(biao)本(ben)使用(yong)前(qian)應(ying)緩慢均衡至室溫，不(bu)應(ying)加(jia)熱(re)使(shi)之(zhi)融(rong)解(jie)。

3.         實(shi)驗(yan)前(qian)紅(hong)細胞(bao)裂解(jie)液必須(xu)用(yong)標(biao)準(zhun)品稀(xi)釋液(ye)稀(xi)釋。

兔(tu)骨(gu)成型(xing)蛋(dan)白(bai)2(BMP2)ELISA試劑盒試(shi)劑準(zhun)備(bei)

1.         使(shi)用(yong)前(qian)將(jiang)所有的(de)試劑和(he)標本(ben)緩慢均衡至室溫(18-25oC)，試(shi)劑不(bu)能(neng)直(zhi)接在(zai)37oC溶(rong)解(jie)。

2.         標(biao)準(zhun)品(凍幹(gan)品)：每(mei)瓶標準品加(jia)入(ru)標(biao)準品稀(xi)釋液(ye)1mL，蓋好(hao)後室溫(wen)靜(jing)置大約(yue)10分(fen)鐘(zhong)，同時反(fan)復顛(dian)倒(dao)/搓(cuo)動(dong)以助溶(rong)解(jie)，其濃度為(wei)2000pg/mL。準備(bei)7個稀(xi)釋標(biao)準(zhun)品的(de)EP管(guan)，每(mei)個EP管(guan)中加(jia)入(ru)150μL的(de)標準品稀(xi)釋液(ye)，如圖所示(shi)依(yi)次(ci)倍比稀(xi)釋成(cheng)不(bu)同的梯(ti)度， 標(biao)準品稀(xi)釋液(ye)(0pg/mL)直(zhi)接作(zuo)為(wei)空白(bai)孔。為(wei)保證實(shi)驗(yan)結果有效性，每次(ci)實驗(yan)請(qing)使用(yong)新(xin)的(de)標(biao)準(zhun)品溶(rong)液(ye)。

3.         濃洗(xi)滌液：用(yong)580mL蒸餾水或去(qu)離(li)子(zi)水將(jiang)20mL濃洗(xi)滌液稀(xi)釋至600mL，進行(xing)30倍(bei)稀(xi)釋。

標(biao)本(ben)處理

1.         本(ben)公(gong)司(si)只(zhi)對(dui)試(shi)劑盒本(ben)身(shen)負(fu)責，不對(dui)因使用(yong)該(gai)試(shi)劑盒所造(zao)成的(de)樣本消(xiao)耗負(fu)責，請使(shi)用(yong)者(zhe)使(shi)用(yong)前(qian)充(chong)分(fen)考(kao)慮(lv)到(dao)樣本(ben)的可(ke)能(neng)使(shi)用(yong)量，預(yu)留充足的樣本。

2.         實(shi)驗(yan)前(qian)應(ying)預(yu)測(ce)標(biao)本含量，如果標(biao)本(ben)濃度過(guo)高(gao)，應(ying)對標(biao)本進行(xing)稀(xi)釋，使(shi)稀(xi)釋後的標(biao)本(ben)符(fu)合試劑盒的(de)檢(jian)測(ce)範(fan)圍，計算時(shi)再(zai)乘(cheng)以(yi)相應(ying)的稀(xi)釋倍(bei)數(shu)。

3.         若(ruo)所檢(jian)樣(yang)本不(bu)包含在說(shuo)明書所列(lie)樣(yang)本之(zhi)中，建(jian)議進行(xing)預(yu)實驗(yan)驗(yan)證(zheng)其有效性，並註意留存(cun)樣本(ben)。

4.         使(shi)用(yong)化(hua)學(xue)裂(lie)解(jie)液制(zhi)備(bei)的(de)組織勻(yun)漿(jiang)或細胞(bao)提取(qu)液可(ke)能(neng)會(hui)由(you)於某些(xie)化(hua)學物質(zhi)的(de)引(yin)入導(dao)致  ELISA實驗(yan)結果偏差。

5.         若(ruo)樣(yang)本為(wei)細胞(bao)培養上清(qing)，因該類樣本(ben)幹(gan)擾(rao)因素 較多(duo)，如：細胞(bao)狀(zhuang)態(tai)、細胞(bao)數(shu)量、采樣時(shi)間(jian)等，所以(yi)可(ke)能(neng)存(cun)在檢(jian)測(ce)不(bu)出的情況(kuang)。

6.         某些(xie)天然(ran)蛋(dan)白(bai)或重組蛋(dan)白(bai)，包括(kuo)原(yuan)核(he)及(ji)真核(he)重(zhong)組蛋(dan)白(bai)，可(ke)能(neng)因為(wei)與(yu)本產(chan)品所使(shi)用(yong)的(de)檢(jian)測(ce)抗(kang)體及(ji)捕(bu)獲抗(kang)體不(bu)匹(pi)配(pei)，而不被(bei)檢(jian)測(ce)出。

7.         建(jian)議使(shi)用(yong)新(xin)鮮(xian)樣(yang)本，保存(cun)時間(jian)過(guo)長(chang)可(ke)能(neng)會(hui)存(cun)在蛋(dan)白(bai)降(jiang)解(jie)或變(bian)性導致實驗(yan)結果偏差。

兔(tu)骨(gu)成型(xing)蛋(dan)白(bai)2(BMP2)ELISA試劑盒操(cao)作(zuo)步(bu)驟

1.         加(jia)樣(yang)：分(fen)別(bie)設空(kong)白(bai)孔（空白(bai)對照(zhao)孔不加(jia)樣(yang)品及(ji)酶(mei)標(biao)試劑，其(qi)余(yu)各步(bu)操(cao)作(zuo)相同）、標準(zhun)孔、待(dai)測(ce)樣(yang)品孔。在酶(mei)標(biao)包被(bei)板(ban)上標(biao)準(zhun)品準(zhun)確加(jia)樣(yang)50μl，待(dai)測(ce)樣(yang)品孔中先加(jia)樣(yang)品稀(xi)釋液(ye)40μl，然(ran)後再加(jia)待(dai)測(ce)樣(yang)品10μl（樣(yang)品*終稀(xi)釋度(du)為(wei)5倍）。加(jia)樣(yang)將(jiang)樣品加(jia)於(yu)酶(mei)標(biao)板(ban)孔底(di)部(bu)，盡量不觸及(ji)孔壁，輕(qing)輕晃動(dong)混(hun)勻。

2.         溫(wen)育：用(yong)封(feng)板(ban)膜(mo)封(feng)板(ban)後置37℃溫育30分(fen)鐘(zhong)。  

3.         配(pei)液(ye)：將20倍濃縮洗(xi)滌液用(yong)蒸餾水20倍稀(xi)釋後備(bei)用(yong)

4.         洗(xi)滌：小(xiao)心揭(jie)掉封(feng)板(ban)膜(mo)，棄(qi)去(qu)液(ye)體(ti)，甩幹(gan)，每(mei)孔加(jia)滿(man)洗(xi)滌液，靜(jing)置30秒後棄(qi)去(qu)，如此重(zhong)復5次(ci)，拍幹(gan)。

5.         加(jia)酶(mei)：每(mei)孔加(jia)入(ru)酶(mei)標(biao)試劑50μl，空(kong)白(bai)孔除(chu)外(wai)。

6.         溫(wen)育：操(cao)作(zuo)同3。

7.         洗(xi)滌：操(cao)作(zuo)同5。

8.         顯(xian)色：每(mei)孔先加(jia)入(ru)顯(xian)色劑A50μl，再(zai)加(jia)入(ru)顯(xian)色劑B50μl，輕(qing)輕(qing)震(zhen)蕩混(hun)勻，37℃避(bi)光顯(xian)色15分(fen)鐘(zhong).

9.         終止(zhi)：每(mei)孔加(jia)終止(zhi)液(ye)50μl，終止(zhi)反(fan)應(ying)（此時(shi)藍(lan)色立(li)轉黃(huang)色）。

10.     測(ce)定(ding)：以(yi)空(kong)白(bai)空(kong)調(tiao)零，450nm波長依序測(ce)量各孔的吸(xi)光度(du)（OD值）。 測(ce)定(ding)應(ying)在加(jia)終止(zhi)液(ye)後15分(fen)鐘(zhong)以(yi)內進行(xing)。

註意：

1.         試(shi)劑準(zhun)備(bei)：準(zhun)備(bei)壹(yi)次(ci)實驗(yan)所需(xu)要的酶(mei)標(biao)條，其它(ta)的可(ke)從微(wei)孔板(ban)上拆(chai)下，密封(feng)，按照(zhao)說(shuo)明書要(yao)求保存(cun)，以備(bei)下次(ci)使用(yong)。

2.         加(jia)樣(yang)：實(shi)驗(yan)操(cao)作(zuo)中請(qing)使(shi)用(yong)壹(yi)次(ci)性的吸(xi)頭(tou)，避(bi)免(mian)交叉汙(wu)染(ran)。加(jia)樣(yang)時(shi)註意不要有氣泡，將(jiang)樣品加(jia)於(yu)酶(mei)標(biao)板(ban)底(di)部(bu)，盡量不觸及(ji)孔壁，輕(qing)輕晃動(dong)混(hun)勻。加(jia)樣(yang)或(huo)加(jia)試(shi)劑時(shi)，**個孔與(yu)*後壹個孔加(jia)樣(yang)之(zhi)間的時(shi)間間隔(ge)如果太(tai)大(da)，將會(hui)導(dao)致不同的“預(yu)溫育”時(shi)間(jian)，從而(er)明顯(xian)地影響到(dao)測(ce)量值的(de)準確性及(ji)重(zhong)復性。因此，壹(yi)次(ci)加(jia)樣(yang)時(shi)間(包括(kuo)標(biao)準品及(ji)所有樣(yang)品)*好(hao)控(kong)制(zhi)在10分(fen)鐘(zhong)內。推薦設置復孔進行(xing)實(shi)驗(yan)。

3.          溫(wen)育：為(wei)防止(zhi)樣品蒸發(fa)，實(shi)驗(yan)時(shi)請將加(jia)上蓋或(huo)覆膜(mo)的(de)酶(mei)標(biao)板(ban)置於濕(shi)盒內，以(yi)避(bi)免(mian)液體(ti)蒸發(fa)，洗(xi)板(ban)後應(ying)盡快進行(xing)下步(bu)操(cao)作(zuo)，任何(he)時侯(hou)都(dou)應(ying)避免(mian)酶(mei)標(biao)板(ban)處於(yu)幹(gan)燥(zao)狀(zhuang)態(tai)，同時應(ying)嚴格(ge)遵(zun)守(shou)給定(ding)的(de)溫(wen)育時(shi)間(jian)和(he)溫度(du)。

4.         洗(xi)滌：充(chong)分(fen)的洗(xi)滌非常(chang)重(zhong)要，在(zai)每次(ci)洗(xi)滌過(guo)程中，都(dou)要(yao)將洗(xi)滌液完全甩幹(gan)。洗(xi)滌過(guo)程中反(fan)應(ying)孔中殘(can)留(liu)的洗(xi)滌液應(ying)在濾(lv)紙上拍(pai)幹(gan)，勿(wu)將(jiang)濾(lv)紙直(zhi)接放(fang)入(ru)反(fan)應(ying)孔中吸(xi)水，同時要(yao)消(xiao)除(chu)板(ban)底(di)殘留(liu)的(de)液(ye)體和(he)手(shou)指(zhi)印(yin)，避免(mian)影響*後的酶(mei)標(biao)儀讀(du)數(shu)。如果有自(zi)動(dong)洗(xi)板(ban)機，應(ying)在熟練(lian)使(shi)用(yong)後再用(yong)到(dao)正式(shi)實 驗(yan)過(guo)程中。

5.         反(fan)應(ying)時間(jian)的控(kong)制(zhi)：加(jia)入(ru)底(di)物後請定(ding)時(shi)觀(guan)察(cha)反(fan)應(ying)孔的顏色變(bian)化(hua)(比如，每隔(ge)10分(fen)鐘(zhong)觀(guan)察壹次(ci))，如顏色較(jiao)深，請(qing)提前(qian)加(jia)入(ru)終止(zhi)液(ye)終止(zhi)反(fan)應(ying)，避免(mian)反(fan)應(ying)過(guo)強(qiang)從而(er)影響酶(mei)標(biao)儀光密度(du)讀(du)數(shu)。

6.         底(di)物：底(di)物請(qing)避(bi)光保存(cun)，在儲(chu)存(cun)和(he)溫育時(shi)避(bi)免(mian)強(qiang)光(guang)直(zhi)接照(zhao)射。

7.         如果實(shi)驗(yan)室(shi)內濕(shi)度低於(yu)60%，推薦使用(yong)加(jia)濕(shi)器提高(gao)濕(shi)度水平。

 實(shi)驗(yan)流(liu)程

1.         實(shi)驗(yan)前(qian)標準品、試(shi)劑及(ji)樣(yang)本的準備(bei)；

2.         加(jia)樣(yang)（標(biao)準品及(ji)樣(yang)本）50μL，37℃孵(fu)育30分(fen)鐘(zhong)；

3.         洗(xi)板(ban)5次(ci)，加(jia)酶(mei)標(biao)試劑50ul，37℃孵(fu)育半(ban)小(xiao)時；

4.         洗(xi)板(ban)5次(ci)；加(jia)入(ru)顯(xian)色液(ye)A，B各50ul,37℃孵(fu)育顯(xian)色15分(fen)鐘(zhong)

5.         加(jia)終止(zhi)液(ye)50μL，立(li)即(ji)450nm讀(du)數(shu)。

6.    計算

兔(tu)骨(gu)成型(xing)蛋(dan)白(bai)2(BMP2)ELISA試劑盒計算

各(ge)標(biao)準品及(ji)樣(yang)本O.D.值扣(kou)除(chu)空(kong)白(bai)孔O.D.值後作(zuo)圖(七點(dian)圖)，如設置復孔，則(ze)應(ying)取其(qi)平均值計算。以(yi)標(biao)準(zhun)品的(de)濃度為(wei)縱坐標(或(huo)對(dui)數(shu)坐標)，O.D.值為(wei)橫坐標(或(huo)對(dui)數(shu)坐標），繪(hui)出標準(zhun)曲線(*佳(jia)方(fang)程式(shi)應(ying)依回(hui)歸方(fang)程計算的(de)R2值來(lai)定(ding)，以(yi)R2值越(yue)趨(qu)近(jin)於1為(wei)好(hao))。推薦使用(yong)專業制(zhi)作(zuo)曲線軟件(jian)進行(xing)分(fen)析，如curve expert 1.30，根(gen)據(ju)樣品O.D.值，由(you)標準(zhun)曲線查出相應(ying)的濃度，乘(cheng)以(yi)稀(xi)釋倍(bei)數(shu)；或(huo)用(yong)標(biao)準(zhun)物的(de)濃度與(yu)O.D.值計算出標準(zhun)曲線的回歸方(fang)程式(shi)，將(jiang)樣品的(de)O.D.值代(dai)入方(fang)程式(shi)，計算出樣品濃度，再(zai)乘(cheng)以(yi)稀(xi)釋倍(bei)數(shu)，即(ji)為(wei)樣品的(de)實(shi)際濃度。

 特異性

本(ben)試(shi)劑盒用(yong)於(yu)檢(jian)測(ce)兔(tu)骨成型(xing)蛋(dan)白(bai)2(BMP2)，經(jing)檢測(ce)與(yu)其它(ta)相似物質(zhi)無(wu)明顯(xian)交叉反(fan)應(ying)。

由(you)於受(shou)到(dao)技(ji)術及(ji)樣(yang)本來源(yuan)的(de)限制(zhi)，不可(ke)能(neng)完成(cheng)對所有相關或相似物質(zhi)交(jiao)叉反(fan)應(ying)檢測(ce)，因此本(ben)試(shi)劑盒有可(ke)能(neng)與(yu)未經(jing)檢測(ce)的(de)其它(ta)物質(zhi)有交(jiao)叉反(fan)應(ying)。

 精密度(du)

精密度(du)用(yong)樣(yang)品測(ce)定(ding)值的(de)變(bian)異系數(shu)CV表(biao)示(shi)。CV(%) = SD/mean×100

批內差：取(qu)同批次(ci)試劑盒對(dui)低(di)、中、高(gao)值定(ding)值樣(yang)本進行(xing)定(ding)量檢測(ce),每(mei)份樣本連續測(ce)定(ding)20 次(ci)，分(fen)別(bie)計算不(bu)同濃度樣(yang)本的(de)平均值及(ji)SD值。

批間差：選(xuan)取3個不(bu)同批次(ci)的試(shi)劑盒分(fen)別(bie)對低(di)、中、高(gao)值定(ding)值樣(yang)本進行(xing)定(ding)量測(ce)定(ding)，每(mei)個樣(yang)本使用(yong)同壹試(shi)劑盒重(zhong)復測(ce)定(ding)8次(ci)，分(fen)別(bie)計算不(bu)同濃度樣(yang)本的(de)平均值及(ji)SD值。

批內差： CV<10%

批間差： CV<12%

兔(tu)骨(gu)成型(xing)蛋(dan)白(bai)2(BMP2)ELISA試劑盒穩(wen)定(ding)性

經(jing)測(ce)定(ding)，試(shi)劑盒在(zai)有效期(qi)內按(an)推薦溫度(du)保存(cun)，其活性降(jiang)低(di)率小(xiao)於5%。

為(wei)減(jian)小(xiao)外部(bu)因素對試劑盒破壞(huai)前(qian)後檢測(ce)值的(de)影響，實(shi)驗(yan)室(shi)的環境(jing)條(tiao)件需(xu)盡量保持壹(yi)致，尤其(qi)是(shi)實驗(yan)室(shi)內溫(wen)度(du)、濕(shi)度及(ji)溫(wen)育條(tiao)件(jian)。其次(ci)由(you)同壹實(shi)驗(yan)員來進行(xing)操(cao)作(zuo)可(ke)減(jian)少(shao)人為(wei)誤差。