產(chan)品(pin)名稱(cheng)：兔(tu)骨(gu)成型(xing)蛋(dan)白(bai)4(BMP4)ELISA試劑(ji)盒(he)

                                                       96T       僅(jin)供體(ti)外(wai)研(yan)究(jiu)使(shi)用(yong)，不用(yong)於(yu)臨床診斷!

兔(tu)骨(gu)成型(xing)蛋(dan)白(bai)4(BMP4)ELISA試劑(ji)盒(he)

本(ben)試劑(ji)盒(he)運(yun)用(yong)雙(shuang)抗(kang)體(ti)夾(jia)心ELISA法定量測(ce)定兔血清、血漿、組織勻漿、細胞裂(lie)解(jie)液、細胞培養上(shang)清液和(he)其他(ta)生(sheng)物(wu)液體(ti)中(zhong)兔(tu)骨(gu)成型(xing)蛋(dan)白(bai)4(BMP4)含(han)量。

 檢(jian)測範(fan)圍(wei)

15.625-1000pg/mL

 *低(di)檢(jian)測限

5.8pg/mL

 實(shi)驗原(yuan)理

將兔(tu)骨(gu)成型(xing)蛋(dan)白(bai)4(BMP4)抗(kang)體包(bao)被(bei)於(yu)96孔(kong)微孔(kong)板中(zhong)，制成(cheng)固相載體(ti)，向(xiang)微(wei)孔(kong)中分(fen)別(bie)加(jia)入(ru)標準品(pin)或(huo)標本(ben)，其中的兔(tu)骨(gu)成型(xing)蛋(dan)白(bai)4(BMP4)與(yu)連(lian)接於固(gu)相載體(ti)上(shang)的抗(kang)體(ti)結(jie)合，然(ran)後加(jia)入(ru)生物(wu)素化(hua)的兔(tu)骨(gu)成型(xing)蛋(dan)白(bai)4(BMP4)抗(kang)體，將未結(jie)合的生(sheng)物(wu)素化(hua)抗體(ti)洗(xi)凈(jing)後，加(jia)入(ru)HRP標記(ji)的親(qin)和素，再(zai)次徹底(di)洗(xi)滌(di)後加(jia)入(ru)TMB底(di)物(wu)顯(xian)色。TMB在過氧(yang)化(hua)物(wu)酶(mei)的催(cui)化(hua)下轉(zhuan)化(hua)成藍(lan)色，並在酸(suan)的作用(yong)下(xia)轉(zhuan)化(hua)成*終的黃色。顏色的深(shen)淺(qian)和樣品中的兔(tu)骨(gu)成型(xing)蛋(dan)白(bai)4(BMP4)呈(cheng)正相(xiang)關。用(yong)酶(mei)標(biao)儀在450nm波長(chang)下(xia)測定吸光度(du)(O.D.值)，計(ji)算(suan)樣(yang)品濃(nong)度(du)。

 試劑(ji)盒(he)內(nei)容

兔(tu)骨(gu)成型(xing)蛋(dan)白(bai)4(BMP4)ELISA試劑(ji)盒(he)需自備的設(she)備(bei)及試劑(ji)

1.         450±10nm濾(lv)光片(pian)的酶(mei)標(biao)儀(建議(yi)儀器使(shi)用(yong)前(qian)提(ti)前(qian)預熱)

2.         單(dan)道或(huo)多(duo)道微(wei)量加(jia)液器(qi)及吸(xi)頭

3.         稀(xi)釋樣(yang)品(pin)的EP管(guan)

4.         蒸(zheng)餾(liu)水或(huo)去(qu)離(li)子(zi)水

5.         吸(xi)水紙(zhi)

6.         盛放洗(xi)液的容(rong)器(qi)

 試劑(ji)盒(he)的儲(chu)存及有(you)效(xiao)期

1.         未開封的試劑(ji)盒(he)：所(suo)有試劑(ji)均按(an)試劑(ji)瓶(ping)標簽(qian)上所(suo)示(shi)保(bao)存。請(qing)註(zhu)意(yi)，收到(dao)試劑(ji)盒(he)後(hou)請盡快將TMB 洗滌(di)液，終止液保(bao)存於(yu)4℃，其他(ta)試劑(ji)保(bao)存於(yu)-20℃。

2.         使(shi)用(yong)後(hou)的試劑(ji)盒(he)：剩(sheng)余(yu)試劑(ji)仍(reng)需按(an)照(zhao)試劑(ji)瓶(ping)標簽(qian)所示(shi)的溫(wen)度(du)保(bao)存，開封後(hou)的酶(mei)標(biao)板要(yao)加(jia)幹(gan)燥劑(ji)後(hou)密封保(bao)存於(yu)-20℃，避免(mian)潮(chao)濕(shi)。

註(zhu)意(yi)：

試劑(ji)盒(he)內(nei)酶標條(tiao)可拆卸(xie)，按(an)實(shi)驗需求可分(fen)多(duo)次使(shi)用(yong)；使(shi)用(yong)後(hou)的剩(sheng)余(yu)試劑(ji)盒(he)建(jian)議在**實驗後 1個(ge)月(yue)內(nei)使(shi)用(yong)完(wan)畢(bi)。產(chan)品(pin)過期時(shi)間以盒(he)子(zi)上的標(biao)簽(qian)為準，保(bao)質(zhi)期內(nei)所有組(zu)分(fen)都(dou)確(que)保(bao)是(shi)穩(wen)定的。

兔(tu)骨(gu)成型(xing)蛋(dan)白(bai)4(BMP4)ELISA試劑(ji)盒(he)標(biao)本(ben)的采集與(yu)保(bao)存

1.         血清：

將收集於(yu)血清分(fen)離(li)管(guan)的全(quan)血標本(ben)在(zai)室(shi)溫(wen)放置(zhi) 2 小時(shi)或 4^oC 過夜(ye)，然(ran)後(hou) 1000×g 離(li)心(xin) 20 分(fen)鐘(zhong)，取上清即(ji)可(ke)，或將上清置(zhi)於-20^oC 或(huo)-80^oC 保(bao)存，但(dan)應(ying)避免(mian)反(fan)復(fu)凍融。

2.         血漿：

用(yong) EDTA 或(huo)肝(gan)素作為(wei)抗(kang)凝(ning)劑(ji)采集標(biao)本(ben)，並將標本(ben)在(zai)采集後(hou)的 30 分(fen)鐘(zhong)內(nei)於 2-8^oC 1000×g 離(li)心(xin) 15 分(fen)鐘(zhong)，取上清即(ji)可(ke)檢(jian)測，或(huo)將上清置(zhi)於-20^oC 或(huo)-80^oC 保(bao)存，但(dan)應(ying)避免(mian)反(fan)復(fu)凍融。

3. 組(zu)織勻漿：

1） 取適量組(zu)織塊，於(yu)預(yu)冷PBS（0.01mol/L, pH 7.0-7.2）中(zhong)清洗(xi)去(qu)除血液，稱(cheng)重(zhong)後備用(yong)（組(zu)織塊較(jiao)大需先剪(jian)碎後再勻漿）；

2） 可(ke)同(tong)時(shi)選(xuan)用(yong)多(duo)種勻漿方(fang)法達(da)到(dao)較(jiao)好的破碎效果(guo)：首(shou)先(xian)將組織塊移(yi)入(ru)玻璃(li)勻漿器，加(jia)入(ru)5-10mL 預冷(leng)PBS 進行充(chong)分(fen)研(yan)磨(mo)，該(gai)過程(cheng)需在冰(bing)上(shang)進(jin)行（有(you)條(tiao)件實(shi)驗室可(ke)選(xuan)用(yong)機(ji)器(qi)勻漿）；得到(dao)的勻漿液可(ke)再(zai)利(li)用(yong)超聲(sheng)破碎或反(fan)復(fu)凍融 進壹(yi)步處(chu)理(li)（超聲(sheng)破碎過程(cheng)中註(zhu)意(yi)冰(bing)浴(yu)降溫(wen)；反(fan)復(fu)凍融法可(ke)重(zhong)復(fu)2 次）。

3） 將制備(bei)好的勻漿液於(yu)5000×g 離(li)心(xin)5 分(fen)鐘(zhong)，留取上清即(ji)可(ke)檢(jian)測。

4. 細胞裂(lie)解(jie)液：

1）貼壁細胞需要(yao)先(xian)用(yong)胰(yi)酶(mei)消(xiao)化(hua)，離(li)心(xin)收集細胞（懸浮細胞可直接離(li)心(xin)收集）；

2）將收集到(dao)的細胞用(yong)冷(leng)PBS 洗(xi)3 次；

3）物(wu)理(li)方(fang)法裂(lie)解(jie)細胞（可先超聲(sheng)破碎細胞，再反(fan)復(fu)凍融）：

i 超聲(sheng)破碎：取適量PBS 重(zhong)懸細胞，用(yong)壹(yi)定功率(lv)的超聲(sheng)波處(chu)理細胞懸液，使(shi)細胞急劇震蕩(dang)破裂(lie)。

ii 反(fan)復(fu)凍融：將待(dai)破碎的細胞在-20 ^oC 以(yi)下冰(bing)凍，室(shi)溫(wen)融解(jie)，反(fan)復(fu)3 次，使(shi)細胞溶脹(zhang)破碎。

4）將標本(ben)於(yu)2-8 ^oC 1500×g 離(li)心(xin)10 分(fen)鐘(zhong)，收集上(shang)清備(bei)用(yong)。

5. 細胞培養上(shang)清或(huo)其它生(sheng)物(wu)標(biao)本(ben)：

請(qing) 1000×g 離(li)心(xin) 20 分(fen)鐘(zhong)，取上清即(ji)可(ke)檢(jian)測，或(huo)將上清置(zhi)於-20^oC 或(huo)-80^oC 保(bao)存，但(dan)應(ying)避免(mian)反(fan)復(fu)凍融。

註(zhu)意(yi)：

1.         以(yi)上標(biao)本(ben)均需密封(feng)保(bao)存，4^oC保(bao)存應(ying)小於(yu)1周(zhou)，-20^oC不應(ying)超過1個(ge)月(yue)，-80^oC不應(ying)超過2個(ge)月(yue)。

2.         標(biao)本(ben)使(shi)用(yong)前(qian)應(ying)緩慢(man)均衡(heng)至(zhi)室(shi)溫(wen)，不應(ying)加(jia)熱使(shi)之融解(jie)。

3.         實(shi)驗前紅(hong)細胞裂(lie)解(jie)液必須(xu)用(yong)標(biao)準品(pin)稀(xi)釋液稀(xi)釋(shi)。

兔(tu)骨(gu)成型(xing)蛋(dan)白(bai)4(BMP4)ELISA試劑(ji)盒(he)試劑(ji)準備(bei)

1.         使(shi)用(yong)前(qian)將所有(you)的試劑(ji)和(he)標本(ben)緩(huan)慢(man)均衡(heng)至(zhi)室(shi)溫(wen)(18-25oC)，試劑(ji)不能(neng)直接在37oC溶(rong)解(jie)。

2.         標(biao)準品(pin)(凍幹(gan)品)：每瓶(ping)標準品(pin)加(jia)入(ru)標準品(pin)稀(xi)釋液1mL，蓋(gai)好後室(shi)溫(wen)靜置(zhi)大約(yue)10分(fen)鐘(zhong)，同(tong)時(shi)反(fan)復(fu)顛(dian)倒(dao)/搓動(dong)以(yi)助(zhu)溶(rong)解(jie)，其濃(nong)度(du)為1000pg/mL。準備(bei)7個(ge)稀釋(shi)標準品(pin)的EP管(guan)，每個EP管(guan)中加(jia)入(ru)150μL的標(biao)準品(pin)稀(xi)釋液，如(ru)圖(tu)所(suo)示(shi)依(yi)次倍比(bi)稀(xi)釋成不同(tong)的梯(ti)度(du)， 標準品(pin)稀(xi)釋液(0pg/mL)直(zhi)接作為(wei)空白(bai)孔(kong)。為保(bao)證實驗結(jie)果(guo)有(you)效(xiao)性(xing)，每次實驗請使(shi)用(yong)新(xin)的標(biao)準品(pin)溶(rong)液。

3.         濃(nong)洗(xi)滌(di)液：用(yong)580mL蒸(zheng)餾(liu)水或(huo)去(qu)離(li)子(zi)水將20mL濃(nong)洗(xi)滌(di)液稀(xi)釋(shi)至(zhi)600mL，進(jin)行30倍稀(xi)釋(shi)。

標(biao)本(ben)處(chu)理(li)

1.         本(ben)公(gong)司只對(dui)試劑(ji)盒(he)本(ben)身負(fu)責(ze)，不對(dui)因使(shi)用(yong)該(gai)試劑(ji)盒(he)所(suo)造(zao)成的樣(yang)本(ben)消(xiao)耗負(fu)責(ze)，請(qing)使(shi)用(yong)者(zhe)使(shi)用(yong)前(qian)充(chong)分(fen)考(kao)慮(lv)到(dao)樣(yang)本(ben)的可(ke)能(neng)使(shi)用(yong)量，預(yu)留充足(zu)的樣(yang)本(ben)。

2.         實(shi)驗前應(ying)預測(ce)標本(ben)含(han)量，如(ru)果(guo)標(biao)本(ben)濃(nong)度(du)過高(gao)，應(ying)對(dui)標本(ben)進(jin)行稀(xi)釋(shi)，使(shi)稀(xi)釋後(hou)的標(biao)本(ben)符(fu)合試劑(ji)盒(he)的檢(jian)測範(fan)圍(wei)，計算(suan)時(shi)再乘(cheng)以相(xiang)應(ying)的稀(xi)釋(shi)倍數(shu)。

3.         若(ruo)所檢(jian)樣本(ben)不包含(han)在說明書所(suo)列樣本(ben)之中(zhong)，建(jian)議進(jin)行預(yu)實(shi)驗驗證其有效(xiao)性(xing)，並註(zhu)意(yi)留存樣(yang)本(ben)。

4.         使(shi)用(yong)化(hua)學裂(lie)解(jie)液制(zhi)備(bei)的組(zu)織勻漿或細胞提(ti)取液可(ke)能(neng)會(hui)由於(yu)某(mou)些(xie)化(hua)學物(wu)質(zhi)的引入(ru)導致(zhi)  ELISA實驗結(jie)果(guo)偏差(cha)。

5.         若(ruo)樣本(ben)為(wei)細胞培養上(shang)清，因(yin)該類樣本(ben)幹(gan)擾因(yin)素 較(jiao)多(duo)，如(ru)：細胞狀態(tai)、細胞數(shu)量、采樣時(shi)間等(deng)，所以(yi)可(ke)能(neng)存在(zai)檢(jian)測不出(chu)的情(qing)況。

6.         某(mou)些(xie)天然(ran)蛋(dan)白(bai)或重(zhong)組蛋(dan)白(bai)，包括(kuo)原(yuan)核及真(zhen)核(he)重(zhong)組蛋(dan)白(bai)，可能(neng)因為(wei)與(yu)本(ben)產(chan)品(pin)所使(shi)用(yong)的檢(jian)測抗(kang)體(ti)及捕(bu)獲(huo)抗(kang)體(ti)不匹配，而不被(bei)檢(jian)測出(chu)。

7.         建(jian)議使(shi)用(yong)新(xin)鮮樣(yang)本(ben)，保(bao)存時(shi)間過長(chang)可(ke)能(neng)會(hui)存在(zai)蛋(dan)白(bai)降解(jie)或(huo)變性(xing)導致(zhi)實驗結(jie)果(guo)偏差(cha)。

兔(tu)骨(gu)成型(xing)蛋(dan)白(bai)4(BMP4)ELISA試劑(ji)盒(he)操(cao)作步(bu)驟(zhou)

1.         加(jia)樣：分(fen)別(bie)設(she)空白(bai)孔(kong)（空白(bai)對(dui)照(zhao)孔(kong)不加(jia)樣品(pin)及酶(mei)標(biao)試劑(ji)，其余各(ge)步操(cao)作相(xiang)同(tong)）、標準孔(kong)、待(dai)測(ce)樣(yang)品(pin)孔(kong)。在酶(mei)標包(bao)被(bei)板(ban)上(shang)標準品(pin)準確(que)加(jia)樣50μl，待(dai)測(ce)樣(yang)品(pin)孔(kong)中先(xian)加(jia)樣品(pin)稀釋液40μl，然(ran)後(hou)再(zai)加(jia)待(dai)測(ce)樣(yang)品(pin)10μl（樣品*終稀釋(shi)度(du)為5倍）。加(jia)樣將樣品(pin)加(jia)於酶(mei)標板孔(kong)底(di)部(bu)，盡量不觸及孔(kong)壁，輕輕(qing)晃動(dong)混(hun)勻。

2.         溫(wen)育(yu)：用(yong)封(feng)板(ban)膜(mo)封(feng)板後置(zhi)37℃溫(wen)育(yu)30分(fen)鐘(zhong)。  

3.         配液：將20倍濃(nong)縮(suo)洗(xi)滌(di)液用(yong)蒸(zheng)餾(liu)水20倍稀(xi)釋(shi)後備用(yong)

4.         洗(xi)滌(di)：小心(xin)揭(jie)掉封板(ban)膜(mo)，棄去(qu)液體(ti)，甩(shuai)幹(gan)，每孔(kong)加(jia)滿洗滌(di)液，靜置(zhi)30秒後(hou)棄去(qu)，如(ru)此(ci)重(zhong)復(fu)5次，拍幹(gan)。

5.         加(jia)酶：每孔(kong)加(jia)入(ru)酶標(biao)試劑(ji)50μl，空白(bai)孔(kong)除外(wai)。

6.         溫(wen)育(yu)：操(cao)作同(tong)3。

7.         洗(xi)滌(di)：操作同(tong)5。

8.         顯(xian)色：每孔(kong)先加(jia)入(ru)顯色劑(ji)A50μl，再(zai)加(jia)入(ru)顯色劑(ji)B50μl，輕(qing)輕震蕩(dang)混(hun)勻，37℃避光顯(xian)色15分(fen)鐘(zhong).

9.         終止：每孔(kong)加(jia)終止液50μl，終止反(fan)應(ying)（此時(shi)藍色立轉(zhuan)黃色）。

10.     測(ce)定：以空白(bai)空調零，450nm波長(chang)依(yi)序(xu)測(ce)量各(ge)孔(kong)的吸(xi)光度(du)（OD值）。 測(ce)定應(ying)在加(jia)終止液後(hou)15分(fen)鐘(zhong)以內(nei)進行。

註(zhu)意(yi)：

1.         試劑(ji)準備(bei)：準備(bei)壹(yi)次實驗所需要(yao)的酶(mei)標(biao)條(tiao)，其它的可(ke)從(cong)微孔(kong)板上(shang)拆下(xia)，密封(feng)，按(an)照(zhao)說明(ming)書要(yao)求保(bao)存，以(yi)備下(xia)次使(shi)用(yong)。

2.         加(jia)樣：實(shi)驗操作中(zhong)請(qing)使(shi)用(yong)壹(yi)次性(xing)的吸(xi)頭，避免(mian)交叉汙(wu)染。加(jia)樣時(shi)註(zhu)意(yi)不要(yao)有(you)氣(qi)泡(pao)，將樣品(pin)加(jia)於酶(mei)標板底(di)部(bu)，盡量不觸及孔(kong)壁，輕輕(qing)晃動(dong)混(hun)勻。加(jia)樣或(huo)加(jia)試劑(ji)時(shi)，**個孔(kong)與(yu)*後壹(yi)個孔(kong)加(jia)樣之間的時(shi)間間隔如(ru)果(guo)太大，將會(hui)導致(zhi)不同(tong)的“預(yu)溫(wen)育(yu)”時(shi)間，從而(er)明顯地(di)影(ying)響到(dao)測(ce)量值(zhi)的準確(que)性(xing)及重(zhong)復(fu)性(xing)。因此(ci)，壹(yi)次加(jia)樣時(shi)間(包括(kuo)標準品(pin)及所(suo)有(you)樣品(pin))*好控制(zhi)在(zai)10分(fen)鐘(zhong)內(nei)。推(tui)薦設(she)置(zhi)復(fu)孔(kong)進行實(shi)驗。

3.          溫(wen)育(yu)：為(wei)防(fang)止樣品蒸(zheng)發，實驗時(shi)請將加(jia)上蓋(gai)或覆(fu)膜的酶(mei)標(biao)板置(zhi)於濕(shi)盒(he)內(nei)，以避免(mian)液體(ti)蒸(zheng)發，洗板(ban)後應(ying)盡快(kuai)進行下(xia)步(bu)操(cao)作，任(ren)何(he)時(shi)侯(hou)都(dou)應(ying)避免(mian)酶(mei)標板(ban)處於幹(gan)燥狀態(tai)，同(tong)時(shi)應(ying)嚴格(ge)遵守(shou)給定的溫(wen)育(yu)時(shi)間和溫(wen)度(du)。

4.         洗(xi)滌(di)：充(chong)分(fen)的洗(xi)滌(di)非常重(zhong)要(yao)，在(zai)每次洗滌(di)過程(cheng)中，都(dou)要(yao)將洗滌(di)液完(wan)全(quan)甩幹(gan)。洗滌(di)過程(cheng)中反(fan)應(ying)孔(kong)中殘留的洗(xi)滌(di)液應(ying)在濾(lv)紙上(shang)拍幹(gan)，勿將濾紙(zhi)直接放入(ru)反(fan)應(ying)孔(kong)中吸(xi)水，同(tong)時(shi)要(yao)消(xiao)除板(ban)底(di)殘留的液體(ti)和(he)手(shou)指(zhi)印，避免(mian)影(ying)響*後的酶(mei)標(biao)儀讀數(shu)。如果(guo)有(you)自動洗板(ban)機，應(ying)在熟練(lian)使(shi)用(yong)後(hou)再(zai)用(yong)到(dao)正(zheng)式(shi)實(shi) 驗過程(cheng)中。

5.         反(fan)應(ying)時(shi)間的控(kong)制(zhi)：加(jia)入(ru)底(di)物(wu)後(hou)請定時(shi)觀察反(fan)應(ying)孔(kong)的顏色變化(hua)(比如(ru)，每隔10分(fen)鐘(zhong)觀察壹(yi)次)，如顏色較(jiao)深(shen)，請(qing)提(ti)前(qian)加(jia)入(ru)終止液終止反(fan)應(ying)，避免(mian)反(fan)應(ying)過強(qiang)從(cong)而(er)影響酶標儀光密(mi)度(du)讀數(shu)。

6.         底(di)物(wu)：底(di)物(wu)請(qing)避光保(bao)存，在(zai)儲(chu)存和(he)溫(wen)育(yu)時(shi)避免(mian)強(qiang)光直(zhi)接照(zhao)射。

7.         如(ru)果(guo)實(shi)驗室內(nei)濕度(du)低於(yu)60%，推(tui)薦使(shi)用(yong)加(jia)濕器(qi)提(ti)高(gao)濕(shi)度(du)水平(ping)。

 實(shi)驗流(liu)程(cheng)

1.         實(shi)驗前標(biao)準品(pin)、試劑(ji)及樣(yang)本(ben)的準備(bei)；

2.         加(jia)樣（標(biao)準品(pin)及樣(yang)本(ben)）50μL，37℃孵(fu)育30分(fen)鐘(zhong)；

3.         洗(xi)板5次，加(jia)酶標(biao)試劑(ji)50ul，37℃孵(fu)育半小(xiao)時(shi)；

4.         洗(xi)板5次；加(jia)入(ru)顯色液A，B各(ge)50ul,37℃孵(fu)育顯(xian)色15分(fen)鐘(zhong)

5.         加(jia)終止液50μL，立即(ji)450nm讀數(shu)。

6.    計(ji)算

兔(tu)骨(gu)成型(xing)蛋(dan)白(bai)4(BMP4)ELISA試劑(ji)盒(he)計(ji)算

各(ge)標準品(pin)及樣(yang)本(ben)O.D.值(zhi)扣(kou)除空白(bai)孔(kong)O.D.值後(hou)作圖(tu)(七點(dian)圖(tu))，如(ru)設(she)置(zhi)復(fu)孔(kong)，則應(ying)取其平均值(zhi)計(ji)算。以(yi)標準品(pin)的濃(nong)度(du)為縱(zong)坐(zuo)標(biao)(或(huo)對(dui)數(shu)坐(zuo)標(biao))，O.D.值(zhi)為(wei)橫(heng)坐(zuo)標(biao)(或(huo)對(dui)數(shu)坐(zuo)標(biao)），繪(hui)出(chu)標(biao)準曲(qu)線(*佳(jia)方(fang)程(cheng)式(shi)應(ying)依(yi)回歸方(fang)程(cheng)計算(suan)的R2值(zhi)來(lai)定，以R2值(zhi)越(yue)趨近於1為好)。推(tui)薦使(shi)用(yong)專(zhuan)業(ye)制作曲(qu)線軟(ruan)件(jian)進(jin)行分(fen)析，如(ru)curve expert 1.30，根據(ju)樣(yang)品(pin)O.D.值，由標(biao)準曲(qu)線查(zha)出(chu)相(xiang)應(ying)的濃(nong)度(du)，乘(cheng)以稀(xi)釋倍數(shu)；或用(yong)標(biao)準物(wu)的濃(nong)度(du)與(yu)O.D.值計(ji)算(suan)出(chu)標(biao)準曲(qu)線的回歸方(fang)程(cheng)式(shi)，將樣品(pin)的O.D.值(zhi)代(dai)入(ru)方(fang)程(cheng)式(shi)，計(ji)算(suan)出(chu)樣(yang)品(pin)濃(nong)度(du)，再乘(cheng)以稀(xi)釋倍數(shu)，即(ji)為(wei)樣品的實(shi)際(ji)濃(nong)度(du)。

 特異(yi)性(xing)

本(ben)試劑(ji)盒(he)用(yong)於(yu)檢(jian)測兔(tu)骨(gu)成型(xing)蛋(dan)白(bai)4(BMP4)，經(jing)檢(jian)測與(yu)其它相(xiang)似物(wu)質(zhi)無明(ming)顯(xian)交叉反(fan)應(ying)。

由於(yu)受(shou)到(dao)技術(shu)及樣(yang)本(ben)來(lai)源的限制，不可能(neng)完(wan)成(cheng)對(dui)所有(you)相(xiang)關或相(xiang)似物(wu)質(zhi)交叉反(fan)應(ying)檢(jian)測，因(yin)此(ci)本(ben)試劑(ji)盒(he)有(you)可能(neng)與(yu)未經(jing)檢(jian)測的其它物(wu)質(zhi)有交叉反(fan)應(ying)。

 精(jing)密(mi)度(du)

精(jing)密(mi)度(du)用(yong)樣(yang)品(pin)測(ce)定值的變(bian)異(yi)系數(shu)CV表示(shi)。CV(%) = SD/mean×100

批內(nei)差(cha)：取同(tong)批次試劑(ji)盒(he)對(dui)低、中(zhong)、高(gao)值(zhi)定值樣(yang)本(ben)進(jin)行定量檢(jian)測,每份(fen)樣(yang)本(ben)連(lian)續(xu)測定20 次，分(fen)別(bie)計算不同(tong)濃(nong)度(du)樣本(ben)的平(ping)均值(zhi)及SD值(zhi)。

批間差(cha)：選(xuan)取3個不同(tong)批次的試劑(ji)盒(he)分(fen)別(bie)對(dui)低、中(zhong)、高(gao)值(zhi)定值樣(yang)本(ben)進(jin)行定量測(ce)定，每個樣(yang)本(ben)使(shi)用(yong)同(tong)壹(yi)試劑(ji)盒(he)重(zhong)復(fu)測(ce)定8次，分(fen)別(bie)計算不同(tong)濃(nong)度(du)樣本(ben)的平(ping)均值(zhi)及SD值(zhi)。

批內(nei)差(cha)： CV<10%

批間差(cha)： CV<12%

兔(tu)骨(gu)成型(xing)蛋(dan)白(bai)4(BMP4)ELISA試劑(ji)盒(he)穩(wen)定性(xing)

經(jing)測定，試劑(ji)盒(he)在(zai)有效期內(nei)按(an)推(tui)薦溫(wen)度(du)保(bao)存，其活性(xing)降低(di)率(lv)小於(yu)5%。

為(wei)減小(xiao)外(wai)部(bu)因素對(dui)試劑(ji)盒(he)破壞前(qian)後檢(jian)測值(zhi)的影(ying)響，實驗室的環(huan)境條(tiao)件需盡量保(bao)持(chi)壹(yi)致(zhi)，尤(you)其是(shi)實(shi)驗室內(nei)溫(wen)度(du)、濕度(du)及溫(wen)育(yu)條(tiao)件。其次由同(tong)壹(yi)實驗員來(lai)進行操(cao)作可(ke)減(jian)少(shao)人(ren)為誤(wu)差(cha)。