產(chan)品(pin)名稱(cheng)：兔骨橋(qiao)素(su)(OPN)ELISA試(shi)劑(ji)盒

                                                       96T       僅(jin)供體外(wai)研究(jiu)使用(yong)，不(bu)用(yong)於(yu)臨(lin)床診斷(duan)!

兔骨橋(qiao)素(su)(OPN)ELISA試(shi)劑(ji)盒

本(ben)試(shi)劑(ji)盒運用雙抗(kang)體夾(jia)心ELISA法(fa)定量(liang)測定兔血(xue)清(qing)、血(xue)漿(jiang)、組(zu)織勻(yun)漿(jiang)、細胞(bao)裂解液(ye)、細胞(bao)培(pei)養(yang)上清(qing)液(ye)和其他(ta)生(sheng)物(wu)液(ye)體中(zhong)兔骨橋(qiao)素(su)(OPN)含(han)量。

 檢(jian)測範(fan)圍(wei)

0.156-10ng/mL

 *低(di)檢(jian)測限(xian)

0.065ng/mL

 實(shi)驗(yan)原理

將兔骨橋(qiao)素(su)(OPN)抗(kang)體包(bao)被(bei)於96孔(kong)微孔(kong)板(ban)中(zhong)，制(zhi)成固(gu)相載(zai)體(ti)，向微孔(kong)中(zhong)分(fen)別(bie)加(jia)入標準品(pin)或標本(ben)，其中(zhong)的兔骨橋(qiao)素(su)(OPN)與(yu)連(lian)接(jie)於(yu)固(gu)相載(zai)體(ti)上的抗(kang)體結(jie)合，然(ran)後(hou)加(jia)入生物(wu)素(su)化的兔骨橋(qiao)素(su)(OPN)抗(kang)體，將未(wei)結(jie)合的生(sheng)物(wu)素(su)化抗(kang)體洗(xi)凈(jing)後(hou)，加(jia)入HRP標記的親和素(su)，再次徹(che)底洗(xi)滌後(hou)加(jia)入TMB底物(wu)顯色(se)。TMB在(zai)過氧化物(wu)酶的催(cui)化下(xia)轉(zhuan)化成藍色，並在(zai)酸的作用下轉化成*終的黃(huang)色。顏色(se)的深淺(qian)和樣(yang)品(pin)中(zhong)的兔骨橋(qiao)素(su)(OPN)呈(cheng)正(zheng)相關(guan)。用(yong)酶標儀在(zai)450nm波(bo)長(chang)下(xia)測定吸光度(du)(O.D.值)，計算(suan)樣(yang)品(pin)濃度(du)。

 試(shi)劑(ji)盒內(nei)容

兔骨橋(qiao)素(su)(OPN)ELISA試(shi)劑(ji)盒需(xu)自(zi)備的設(she)備及試(shi)劑(ji)

1.         450±10nm濾(lv)光(guang)片(pian)的酶標儀(建議儀器(qi)使用(yong)前提(ti)前預熱(re))

2.         單道(dao)或(huo)多道(dao)微(wei)量加(jia)液(ye)器及吸頭(tou)

3.         稀釋樣(yang)品(pin)的EP管(guan)

4.         蒸(zheng)餾(liu)水或去離(li)子水(shui)

5.         吸水紙(zhi)

6.         盛(sheng)放洗(xi)液(ye)的容器

 試(shi)劑(ji)盒的儲(chu)存(cun)及有效期

1.         未(wei)開(kai)封的試(shi)劑(ji)盒：所(suo)有試(shi)劑(ji)均按試(shi)劑(ji)瓶標簽上(shang)所(suo)示(shi)保(bao)存(cun)。請註(zhu)意，收到試(shi)劑(ji)盒後(hou)請(qing)盡快將TMB 洗(xi)滌液(ye)，終止液(ye)保(bao)存(cun)於4℃，其他(ta)試(shi)劑(ji)保(bao)存(cun)於-20℃。

2.         使用(yong)後(hou)的試(shi)劑(ji)盒：剩(sheng)余(yu)試(shi)劑(ji)仍需(xu)按(an)照(zhao)試(shi)劑(ji)瓶標簽所(suo)示(shi)的溫(wen)度(du)保(bao)存(cun)，開(kai)封後(hou)的酶標板(ban)要加(jia)幹燥劑(ji)後(hou)密封保(bao)存(cun)於-20℃，避免(mian)潮(chao)濕(shi)。

註(zhu)意：

試(shi)劑(ji)盒內(nei)酶標條可(ke)拆(chai)卸，按實(shi)驗(yan)需(xu)求(qiu)可(ke)分(fen)多(duo)次使用(yong)；使用(yong)後(hou)的剩(sheng)余試(shi)劑(ji)盒建議在(zai)**實(shi)驗(yan)後(hou) 1個(ge)月內(nei)使用(yong)完(wan)畢(bi)。產(chan)品(pin)過期時間(jian)以盒子(zi)上(shang)的標簽為準，保(bao)質期內(nei)所(suo)有組(zu)分(fen)都(dou)確保(bao)是(shi)穩定的。

兔骨橋(qiao)素(su)(OPN)ELISA試(shi)劑(ji)盒標本(ben)的采集與(yu)保(bao)存(cun)

1.         血(xue)清(qing)：

將收集於(yu)血(xue)清(qing)分(fen)離(li)管(guan)的全(quan)血(xue)標本(ben)在(zai)室(shi)溫(wen)放(fang)置 2 小時或 4^oC 過夜(ye)，然(ran)後(hou) 1000×g 離(li)心 20 分(fen)鐘，取(qu)上清(qing)即(ji)可(ke)，或將上(shang)清(qing)置(zhi)於(yu)-20^oC 或(huo)-80^oC 保(bao)存(cun)，但(dan)應(ying)避(bi)免(mian)反(fan)復(fu)凍(dong)融(rong)。

2.         血(xue)漿(jiang)：

用(yong) EDTA 或(huo)肝素(su)作為抗(kang)凝(ning)劑(ji)采集標本(ben)，並將標本(ben)在(zai)采集後(hou)的 30 分(fen)鐘內(nei)於 2-8^oC 1000×g 離(li)心 15 分(fen)鐘，取(qu)上清(qing)即(ji)可(ke)檢(jian)測，或將上(shang)清(qing)置(zhi)於(yu)-20^oC 或(huo)-80^oC 保(bao)存(cun)，但(dan)應(ying)避(bi)免(mian)反(fan)復(fu)凍(dong)融(rong)。

3. 組(zu)織勻(yun)漿(jiang)：

1） 取(qu)適(shi)量組(zu)織塊(kuai)，於(yu)預(yu)冷PBS（0.01mol/L, pH 7.0-7.2）中(zhong)清(qing)洗(xi)去除(chu)血液(ye)，稱重後(hou)備用（組(zu)織塊(kuai)較(jiao)大(da)需(xu)先剪碎後(hou)再勻(yun)漿(jiang)）；

2） 可(ke)同(tong)時選(xuan)用(yong)多(duo)種勻漿(jiang)方法(fa)達到較(jiao)好(hao)的破(po)碎效果(guo)：首(shou)先將組(zu)織塊(kuai)移(yi)入(ru)玻(bo)璃勻(yun)漿(jiang)器(qi)，加(jia)入5-10mL 預冷PBS 進(jin)行(xing)充分(fen)研磨(mo)，該(gai)過程需(xu)在(zai)冰(bing)上進(jin)行(xing)（有(you)條(tiao)件(jian)實(shi)驗(yan)室(shi)可選用機(ji)器(qi)勻漿）；得到(dao)的勻(yun)漿液(ye)可再利用(yong)超聲破碎或反(fan)復(fu)凍(dong)融(rong) 進(jin)壹步(bu)處理（超(chao)聲破碎過程中(zhong)註(zhu)意冰(bing)浴降溫；反復(fu)凍(dong)融(rong)法(fa)可重(zhong)復(fu)2 次）。

3） 將制(zhi)備好的勻(yun)漿液(ye)於5000×g 離心5 分(fen)鐘，留取上(shang)清(qing)即(ji)可(ke)檢(jian)測。

4. 細胞(bao)裂解液(ye)：

1）貼(tie)壁(bi)細胞(bao)需(xu)要(yao)先用胰(yi)酶消化，離(li)心收集細胞(bao)（懸(xuan)浮細胞(bao)可(ke)直接(jie)離(li)心收集）；

2）將收集到(dao)的細胞(bao)用(yong)冷(leng)PBS 洗(xi)3 次；

3）物(wu)理(li)方(fang)法(fa)裂解細胞(bao)（可(ke)先(xian)超聲破碎細胞(bao)，再反(fan)復(fu)凍(dong)融(rong)）：

i 超(chao)聲破碎：取適(shi)量PBS 重(zhong)懸細胞(bao)，用(yong)壹定(ding)功(gong)率(lv)的超(chao)聲波處理細胞(bao)懸(xuan)液(ye)，使細胞(bao)急劇震(zhen)蕩破裂。

ii 反(fan)復(fu)凍(dong)融(rong)：將待破碎的細胞(bao)在(zai)-20 ^oC 以下(xia)冰(bing)凍(dong)，室(shi)溫(wen)融(rong)解，反復(fu)3 次，使細胞(bao)溶(rong)脹(zhang)破碎。

4）將標本(ben)於2-8 ^oC 1500×g 離(li)心10 分(fen)鐘，收集上(shang)清(qing)備用。

5. 細胞(bao)培(pei)養(yang)上清(qing)或(huo)其它(ta)生物(wu)標本(ben)：

請(qing) 1000×g 離(li)心 20 分(fen)鐘，取(qu)上清(qing)即(ji)可(ke)檢(jian)測，或將上(shang)清(qing)置(zhi)於(yu)-20^oC 或(huo)-80^oC 保(bao)存(cun)，但(dan)應(ying)避(bi)免(mian)反(fan)復(fu)凍(dong)融(rong)。

註(zhu)意：

1.         以上(shang)標本(ben)均需密封保(bao)存(cun)，4^oC保(bao)存(cun)應(ying)小(xiao)於1周(zhou)，-20^oC不(bu)應(ying)超(chao)過1個月，-80^oC不(bu)應(ying)超(chao)過2個月。

2.         標本(ben)使用(yong)前應(ying)緩(huan)慢均衡至室溫(wen)，不(bu)應(ying)加(jia)熱使之(zhi)融(rong)解。

3.         實(shi)驗(yan)前紅細胞(bao)裂解液(ye)必(bi)須用(yong)標準品(pin)稀釋液(ye)稀釋。

兔骨橋(qiao)素(su)(OPN)ELISA試(shi)劑(ji)盒試(shi)劑(ji)準備

1.         使用(yong)前將所(suo)有的試(shi)劑(ji)和標本(ben)緩慢(man)均衡至室溫(wen)(18-25oC)，試(shi)劑(ji)不(bu)能直接(jie)在(zai)37oC溶(rong)解(jie)。

2.         標準品(pin)(凍(dong)幹(gan)品(pin))：每瓶標準品(pin)加(jia)入標準品(pin)稀釋液(ye)1mL，蓋好後(hou)室(shi)溫(wen)靜(jing)置(zhi)大(da)約(yue)10分(fen)鐘，同(tong)時反(fan)復(fu)顛(dian)倒/搓動以助溶解，其濃度(du)為10ng/mL。準備7個稀釋標準品(pin)的EP管(guan)，每個(ge)EP管(guan)中(zhong)加(jia)入150μL的標準品(pin)稀釋液(ye)，如圖(tu)所(suo)示(shi)依(yi)次倍比(bi)稀釋成不(bu)同(tong)的梯(ti)度(du)， 標準品(pin)稀釋液(ye)(0pg/mL)直接(jie)作為空白孔(kong)。為保(bao)證(zheng)實驗結(jie)果有(you)效性(xing)，每次實(shi)驗(yan)請使用(yong)新的標準品(pin)溶液(ye)。

3.         濃(nong)洗(xi)滌液(ye)：用(yong)580mL蒸(zheng)餾(liu)水或去離(li)子水(shui)將20mL濃(nong)洗(xi)滌液(ye)稀釋至600mL，進(jin)行(xing)30倍稀釋。

標本(ben)處理

1.         本(ben)公司(si)只(zhi)對(dui)試(shi)劑(ji)盒本(ben)身負(fu)責(ze)，不(bu)對(dui)因使用(yong)該試(shi)劑(ji)盒所(suo)造成的樣(yang)本(ben)消耗負(fu)責(ze)，請使用(yong)者(zhe)使用(yong)前充分(fen)考慮(lv)到樣(yang)本(ben)的可(ke)能使用(yong)量，預(yu)留充足(zu)的樣(yang)本(ben)。

2.         實(shi)驗(yan)前應(ying)預(yu)測標本(ben)含量(liang)，如果(guo)標本(ben)濃度(du)過高，應(ying)對(dui)標本(ben)進(jin)行(xing)稀釋，使稀釋後(hou)的標本(ben)符(fu)合試(shi)劑(ji)盒的檢(jian)測範(fan)圍(wei)，計算(suan)時(shi)再乘(cheng)以相應(ying)的稀釋倍數。

3.         若(ruo)所(suo)檢(jian)樣(yang)本(ben)不(bu)包(bao)含在(zai)說(shuo)明(ming)書所(suo)列樣(yang)本(ben)之(zhi)中(zhong)，建議進(jin)行(xing)預(yu)實(shi)驗(yan)驗證其有效性(xing)，並註(zhu)意留存樣(yang)本(ben)。

4.         使用(yong)化學(xue)裂解液(ye)制(zhi)備的組(zu)織勻(yun)漿(jiang)或(huo)細胞(bao)提(ti)取(qu)液(ye)可能會由於某些化學(xue)物(wu)質的引(yin)入導致(zhi)  ELISA實驗(yan)結(jie)果偏(pian)差(cha)。

5.         若(ruo)樣(yang)本(ben)為細胞(bao)培(pei)養(yang)上清(qing)，因該類(lei)樣(yang)本(ben)幹擾因素(su) 較(jiao)多(duo)，如：細胞(bao)狀態、細胞(bao)數量、采樣(yang)時(shi)間(jian)等(deng)，所(suo)以可(ke)能存在(zai)檢(jian)測不(bu)出的情(qing)況。

6.         某些天然(ran)蛋(dan)白或(huo)重組(zu)蛋(dan)白，包(bao)括原(yuan)核及真核重組(zu)蛋(dan)白，可(ke)能因為與(yu)本(ben)產(chan)品(pin)所(suo)使用(yong)的檢(jian)測抗(kang)體及捕(bu)獲(huo)抗(kang)體不(bu)匹(pi)配，而(er)不(bu)被(bei)檢(jian)測出。

7.         建議使用(yong)新鮮樣(yang)本(ben)，保(bao)存(cun)時間(jian)過長可(ke)能會存在(zai)蛋(dan)白降解或變性(xing)導致(zhi)實驗(yan)結(jie)果偏(pian)差(cha)。

兔骨橋(qiao)素(su)(OPN)ELISA試(shi)劑(ji)盒操(cao)作步驟(zhou)

1.         加(jia)樣(yang)：分(fen)別(bie)設空白孔(kong)（空白對(dui)照(zhao)孔(kong)不(bu)加(jia)樣(yang)品(pin)及酶標試(shi)劑(ji)，其余各(ge)步操作相同(tong)）、標準孔(kong)、待測樣(yang)品(pin)孔(kong)。在(zai)酶標包(bao)被(bei)板(ban)上標準品(pin)準確(que)加(jia)樣(yang)50μl，待測樣(yang)品(pin)孔(kong)中(zhong)先(xian)加(jia)樣(yang)品(pin)稀釋液(ye)40μl，然(ran)後(hou)再加(jia)待測樣(yang)品(pin)10μl（樣(yang)品(pin)*終稀釋度(du)為5倍）。加(jia)樣(yang)將樣(yang)品(pin)加(jia)於酶標板(ban)孔(kong)底部，盡量(liang)不(bu)觸(chu)及孔(kong)壁(bi)，輕輕(qing)晃動(dong)混(hun)勻。

2.         溫(wen)育(yu)：用封板(ban)膜(mo)封板(ban)後(hou)置(zhi)37℃溫(wen)育(yu)30分(fen)鐘。  

3.         配液(ye)：將20倍濃(nong)縮洗(xi)滌液(ye)用蒸餾水20倍稀釋後(hou)備用

4.         洗(xi)滌：小心揭(jie)掉封板(ban)膜(mo)，棄(qi)去液(ye)體，甩幹，每孔(kong)加(jia)滿(man)洗(xi)滌液(ye)，靜置30秒(miao)後(hou)棄(qi)去，如此(ci)重(zhong)復(fu)5次，拍(pai)幹(gan)。

5.         加(jia)酶：每(mei)孔(kong)加(jia)入酶標試(shi)劑(ji)50μl，空白孔(kong)除(chu)外。

6.         溫(wen)育(yu)：操作同(tong)3。

7.         洗(xi)滌：操作同(tong)5。

8.         顯色(se)：每(mei)孔(kong)先加(jia)入顯色(se)劑(ji)A50μl，再加(jia)入顯色(se)劑(ji)B50μl，輕輕(qing)震(zhen)蕩混(hun)勻，37℃避(bi)光顯色(se)15分(fen)鐘.

9.         終止：每(mei)孔(kong)加(jia)終止液(ye)50μl，終止反(fan)應(ying)（此(ci)時藍色立(li)轉黃(huang)色(se)）。

10.     測定：以空(kong)白空(kong)調零(ling)，450nm波長(chang)依(yi)序測量各孔(kong)的吸光度(du)（OD值）。 測定應(ying)在(zai)加(jia)終止液(ye)後(hou)15分(fen)鐘以內(nei)進(jin)行(xing)。

註(zhu)意：

1.         試(shi)劑(ji)準備：準(zhun)備壹次實(shi)驗(yan)所(suo)需要(yao)的酶標條，其它(ta)的可(ke)從(cong)微(wei)孔(kong)板(ban)上拆(chai)下，密封，按(an)照(zhao)說(shuo)明(ming)書要求(qiu)保(bao)存(cun)，以備下次使用(yong)。

2.         加(jia)樣(yang)：實(shi)驗(yan)操作中(zhong)請(qing)使用(yong)壹次性(xing)的吸頭(tou)，避(bi)免(mian)交叉汙(wu)染。加(jia)樣(yang)時(shi)註(zhu)意不(bu)要(yao)有(you)氣(qi)泡，將樣(yang)品(pin)加(jia)於酶標板(ban)底部，盡量(liang)不(bu)觸(chu)及孔(kong)壁(bi)，輕輕(qing)晃動(dong)混(hun)勻。加(jia)樣(yang)或(huo)加(jia)試(shi)劑(ji)時，**個(ge)孔(kong)與(yu)*後(hou)壹個(ge)孔(kong)加(jia)樣(yang)之(zhi)間(jian)的時(shi)間(jian)間(jian)隔(ge)如果(guo)太(tai)大(da)，將會導致(zhi)不(bu)同(tong)的“預(yu)溫育(yu)”時間(jian)，從(cong)而(er)明(ming)顯地影響(xiang)到測量值的準(zhun)確性(xing)及重復(fu)性(xing)。因此，壹次加(jia)樣(yang)時(shi)間(jian)(包(bao)括標準品(pin)及所(suo)有樣(yang)品(pin))*好控(kong)制(zhi)在(zai)10分(fen)鐘內(nei)。推薦設置(zhi)復(fu)孔(kong)進(jin)行(xing)實(shi)驗(yan)。

3.          溫(wen)育(yu)：為防止樣(yang)品(pin)蒸發(fa)，實驗(yan)時請將加(jia)上蓋或覆(fu)膜(mo)的酶標板(ban)置於(yu)濕(shi)盒內(nei)，以避(bi)免(mian)液(ye)體蒸發(fa)，洗(xi)板(ban)後(hou)應(ying)盡快進(jin)行(xing)下(xia)步(bu)操(cao)作，任何時侯都(dou)應(ying)避(bi)免(mian)酶標板(ban)處於幹(gan)燥狀態，同(tong)時應(ying)嚴(yan)格遵守(shou)給定(ding)的溫(wen)育時(shi)間(jian)和溫(wen)度(du)。

4.         洗(xi)滌：充分(fen)的洗(xi)滌非常(chang)重要，在(zai)每(mei)次洗(xi)滌過程中(zhong)，都(dou)要將洗(xi)滌液(ye)完(wan)全(quan)甩(shuai)幹。洗(xi)滌過程中(zhong)反(fan)應(ying)孔(kong)中(zhong)殘(can)留的洗(xi)滌液(ye)應(ying)在(zai)濾(lv)紙(zhi)上(shang)拍(pai)幹(gan)，勿將濾(lv)紙(zhi)直接(jie)放(fang)入(ru)反(fan)應(ying)孔(kong)中(zhong)吸水，同(tong)時要(yao)消除(chu)板(ban)底殘留的液(ye)體和手(shou)指(zhi)印(yin)，避(bi)免(mian)影響(xiang)*後(hou)的酶標儀讀(du)數。如果(guo)有(you)自動(dong)洗(xi)板(ban)機(ji)，應(ying)在(zai)熟(shu)練(lian)使用(yong)後(hou)再用(yong)到(dao)正(zheng)式(shi)實(shi) 驗(yan)過程中(zhong)。

5.         反(fan)應(ying)時(shi)間(jian)的控(kong)制(zhi)：加(jia)入底物(wu)後(hou)請(qing)定(ding)時(shi)觀(guan)察反應(ying)孔(kong)的顏色(se)變化(比(bi)如，每(mei)隔(ge)10分(fen)鐘觀(guan)察壹次)，如顏色(se)較(jiao)深，請(qing)提(ti)前加(jia)入終止液(ye)終止反(fan)應(ying)，避(bi)免(mian)反(fan)應(ying)過強從(cong)而(er)影響(xiang)酶標儀光(guang)密度(du)讀(du)數。

6.         底物(wu)：底物(wu)請(qing)避(bi)光(guang)保(bao)存(cun)，在(zai)儲(chu)存(cun)和溫(wen)育(yu)時(shi)避(bi)免(mian)強(qiang)光直接(jie)照(zhao)射(she)。

7.         如果(guo)實(shi)驗室(shi)內(nei)濕(shi)度(du)低(di)於(yu)60%，推薦使用(yong)加(jia)濕(shi)器(qi)提(ti)高濕(shi)度(du)水平。

 實(shi)驗(yan)流程

1.         實(shi)驗(yan)前標準品(pin)、試(shi)劑(ji)及樣(yang)本(ben)的準(zhun)備；

2.         加(jia)樣(yang)（標準品(pin)及樣(yang)本(ben)）50μL，37℃孵(fu)育(yu)30分(fen)鐘；

3.         洗(xi)板(ban)5次，加(jia)酶標試(shi)劑(ji)50ul，37℃孵(fu)育(yu)半(ban)小(xiao)時(shi)；

4.         洗(xi)板(ban)5次；加(jia)入顯色(se)液(ye)A，B各50ul,37℃孵(fu)育(yu)顯色(se)15分(fen)鐘

5.         加(jia)終止液(ye)50μL，立(li)即(ji)450nm讀(du)數。

6.    計算(suan)

兔骨橋(qiao)素(su)(OPN)ELISA試(shi)劑(ji)盒計算(suan)

各(ge)標準品(pin)及樣(yang)本(ben)O.D.值扣(kou)除(chu)空白孔(kong)O.D.值後(hou)作圖(七(qi)點(dian)圖(tu))，如設(she)置(zhi)復(fu)孔(kong)，則應(ying)取(qu)其平均值計算(suan)。以標準品(pin)的濃(nong)度(du)為縱(zong)坐(zuo)標(或對(dui)數坐標)，O.D.值為橫(heng)坐(zuo)標(或對(dui)數坐標），繪出標準曲線(xian)(*佳(jia)方(fang)程(cheng)式(shi)應(ying)依(yi)回歸(gui)方程(cheng)計算(suan)的R2值(zhi)來定(ding)，以R2值(zhi)越(yue)趨近(jin)於1為好)。推薦使用(yong)專業(ye)制(zhi)作曲線(xian)軟(ruan)件(jian)進(jin)行(xing)分(fen)析，如curve expert 1.30，根據樣(yang)品(pin)O.D.值，由(you)標準曲線(xian)查出相應(ying)的濃(nong)度(du)，乘以稀釋倍數；或用標準物(wu)的濃(nong)度(du)與(yu)O.D.值計算(suan)出標準曲線(xian)的回(hui)歸(gui)方程(cheng)式(shi)，將樣(yang)品(pin)的O.D.值(zhi)代入方(fang)程式(shi)，計算(suan)出樣(yang)品(pin)濃度(du)，再乘(cheng)以稀釋倍數，即(ji)為樣(yang)品(pin)的實(shi)際(ji)濃(nong)度(du)。

 特異(yi)性(xing)

本(ben)試(shi)劑(ji)盒用(yong)於(yu)檢(jian)測兔骨橋(qiao)素(su)(OPN)，經檢(jian)測與(yu)其它(ta)相似物(wu)質無(wu)明(ming)顯交叉反應(ying)。

由(you)於(yu)受到技(ji)術及樣(yang)本(ben)來源(yuan)的限(xian)制(zhi)，不(bu)可(ke)能完(wan)成對(dui)所(suo)有相關(guan)或(huo)相似物(wu)質交叉反應(ying)檢(jian)測，因此本(ben)試(shi)劑(ji)盒有(you)可(ke)能與(yu)未(wei)經檢(jian)測的其它(ta)物(wu)質有(you)交叉反應(ying)。

 精(jing)密度(du)

精(jing)密度(du)用樣(yang)品(pin)測定值的變(bian)異(yi)系(xi)數CV表(biao)示(shi)。CV(%) = SD/mean×100

批(pi)內(nei)差(cha)：取(qu)同(tong)批(pi)次試(shi)劑(ji)盒對(dui)低(di)、中(zhong)、高值定(ding)值(zhi)樣(yang)本(ben)進(jin)行(xing)定(ding)量(liang)檢(jian)測,每份樣(yang)本(ben)連(lian)續(xu)測定20 次，分(fen)別(bie)計算(suan)不(bu)同(tong)濃度(du)樣(yang)本(ben)的平均值及SD值。

批(pi)間(jian)差(cha)：選(xuan)取(qu)3個(ge)不(bu)同(tong)批(pi)次的試(shi)劑(ji)盒分(fen)別(bie)對(dui)低(di)、中(zhong)、高值定(ding)值(zhi)樣(yang)本(ben)進(jin)行(xing)定(ding)量(liang)測定，每個樣(yang)本(ben)使用(yong)同(tong)壹試(shi)劑(ji)盒重(zhong)復(fu)測定8次，分(fen)別(bie)計算(suan)不(bu)同(tong)濃度(du)樣(yang)本(ben)的平均值及SD值。

批(pi)內(nei)差(cha)： CV<10%

批(pi)間(jian)差(cha)： CV<12%

兔骨橋(qiao)素(su)(OPN)ELISA試(shi)劑(ji)盒穩(wen)定(ding)性(xing)

經測定，試(shi)劑(ji)盒在(zai)有(you)效期內(nei)按推薦溫度(du)保(bao)存(cun)，其活(huo)性(xing)降低(di)率(lv)小於(yu)5%。

為減小(xiao)外部(bu)因素(su)對(dui)試(shi)劑(ji)盒破(po)壞(huai)前後(hou)檢(jian)測值的影響(xiang)，實驗(yan)室的環(huan)境條(tiao)件(jian)需(xu)盡量(liang)保(bao)持(chi)壹致(zhi)，尤(you)其是實(shi)驗室內(nei)溫度(du)、濕(shi)度(du)及溫育(yu)條(tiao)件(jian)。其次由(you)同(tong)壹實(shi)驗員(yuan)來進(jin)行(xing)操(cao)作可減少(shao)人(ren)為誤差(cha)。