-
授權(quan)代理品牌(pai)
-
ELISA試劑盒(he)
- 農(nong)殘(can)檢(jian)測試(shi)劑盒(he)
- 馬ELISA試劑盒(he)
- 牛(niu)ELISA試劑盒(he)
- 魚ELISA試(shi)劑盒(he)
- 人ELISA試劑盒(he)/Human
- 小鼠(shu)ELISA試劑盒(he)/Mouse
- 大鼠(shu)ELISA試劑盒(he)/Rat
- 羊(yang)ELISA試(shi)劑盒(he)/Sheep
- 兔(tu)ELISA試(shi)劑盒(he)/ Rabbi...
- 豬ELISA試劑盒(he)/Porcin...
- 豚鼠(shu)ELISA試劑盒(he)/Guine...
- 狗ELISA試劑盒(he)/ Canin...
- 雞(ji)ELISA試(shi)劑盒(he)/Chicke...
- 鴨ELISA試(shi)劑盒(he)
- 植(zhi)物(wu)ELISA試劑盒(he)
- 猴ELISA試劑盒(he)/ Monke...
- 其他(ta)ELISA試劑盒(he)
- 抗體
- 蛋(dan)白(bai)
- CLIA試(shi)劑盒(he)
- 細(xi)胞生(sheng)物(wu)學(xue)
- 分子(zi)生(sheng)物(wu)學(xue)/常(chang)用(yong)試劑
96T 僅(jin)供體外研究(jiu)使(shi)用,不用(yong)於(yu)臨床(chuang)診斷(duan)!
小鼠(shu)10kDa幹擾(rao)素(su)γ誘(you)導蛋(dan)白(bai)(IP10)ELISA試(shi)劑盒(he)
本試(shi)劑盒(he)運用雙(shuang)抗(kang)體(ti)夾心(xin)ELISA法定量測定小鼠(shu)血清(qing)、血漿(jiang)、組(zu)織勻漿(jiang)、細(xi)胞裂解液(ye)、細(xi)胞(bao)培養上清(qing)液和(he)其他(ta)生(sheng)物(wu)液(ye)體(ti)中小鼠(shu)10kDa幹擾(rao)素(su)γ誘(you)導蛋(dan)白(bai)(IP10)含(han)量。
檢(jian)測範(fan)圍(wei)
15.625-1000pg/mL
*低檢(jian)測限(xian)
5.7pg/mL
實驗(yan)原(yuan)理
將小鼠(shu)10kDa幹擾(rao)素(su)γ誘(you)導蛋(dan)白(bai)(IP10)抗(kang)體(ti)包被於96孔(kong)微(wei)孔(kong)板中,制(zhi)成固(gu)相載(zai)體,向微(wei)孔(kong)中分(fen)別加(jia)入(ru)標(biao)準品或標(biao)本,其中的(de)小鼠(shu)10kDa幹擾(rao)素(su)γ誘(you)導蛋(dan)白(bai)(IP10)與(yu)連(lian)接(jie)於固(gu)相(xiang)載(zai)體上(shang)的(de)抗(kang)體(ti)結合,然後加(jia)入(ru)生(sheng)物(wu)素(su)化的(de)小鼠(shu)10kDa幹擾(rao)素(su)γ誘(you)導蛋(dan)白(bai)(IP10)抗(kang)體(ti),將未結合(he)的(de)生(sheng)物(wu)素(su)化抗體洗凈(jing)後,加(jia)入(ru)HRP標(biao)記的(de)親(qin)和(he)素(su),再(zai)次徹底洗(xi)滌(di)後加(jia)入(ru)TMB底物(wu)顯(xian)色。TMB在過氧(yang)化物酶(mei)的(de)催(cui)化下轉化成藍色,並(bing)在酸的(de)作(zuo)用(yong)下轉化成*終的(de)黃(huang)色。顏色的(de)深(shen)淺(qian)和(he)樣(yang)品中的(de)小鼠(shu)10kDa幹擾(rao)素(su)γ誘(you)導蛋(dan)白(bai)(IP10)呈正(zheng)相關(guan)。用酶(mei)標(biao)儀(yi)在450nm波長(chang)下測定吸光(guang)度(O.D.值),計(ji)算樣(yang)品濃(nong)度。
試(shi)劑盒(he)內容
|
試劑名稱(cheng) |
數量 |
試(shi)劑名稱(cheng) |
數量 |
|
96孔(kong)板(預包被) |
1 |
96孔板覆(fu)膜(mo) |
2 |
|
標準品 |
0.5ml×1 |
標準品稀(xi)釋液(ye) |
1.5ml×1瓶(ping) |
|
顯色劑A液 |
6ml×1瓶 |
樣(yang)品稀(xi)釋液(ye) |
6ml×1瓶 |
|
顯(xian)色劑B液 |
6ml×1瓶 |
終止(zhi)液 |
6ml×1瓶 |
|
酶(mei)標(biao)試(shi)劑 |
6ml×1瓶(ping) |
密封(feng)袋(dai) |
1 |
|
濃(nong)洗(xi)滌(di)液(30×) |
1×20mL |
使用(yong)說(shuo)明(ming)書(shu) |
1 |
小鼠(shu)10kDa幹擾(rao)素(su)γ誘(you)導蛋(dan)白(bai)(IP10)ELISA試(shi)劑盒(he)需自備的(de)設(she)備及(ji)試劑
1. 450±10nm濾(lv)光(guang)片(pian)的(de)酶(mei)標(biao)儀(yi)(建議儀(yi)器使(shi)用前提前預熱)
2. 單(dan)道或多(duo)道微(wei)量加(jia)液(ye)器(qi)及(ji)吸頭
3. 稀(xi)釋樣(yang)品的(de)EP管(guan)
4. 蒸餾(liu)水(shui)或去(qu)離(li)子(zi)水(shui)
5. 吸水(shui)紙
6. 盛放洗(xi)液的(de)容器
試劑盒(he)的(de)儲存(cun)及有效(xiao)期(qi)
1. 未開(kai)封(feng)的(de)試(shi)劑盒(he):所有(you)試(shi)劑均按(an)試(shi)劑瓶標(biao)簽(qian)上(shang)所示(shi)保存(cun)。請註意,收(shou)到(dao)試劑盒(he)後請(qing)盡快將TMB 洗滌(di)液,終止(zhi)液保存(cun)於4℃,其他(ta)試劑保存(cun)於-20℃。
2. 使(shi)用後的(de)試(shi)劑盒(he):剩余(yu)試(shi)劑仍(reng)需(xu)按(an)照(zhao)試劑瓶標(biao)簽(qian)所示(shi)的(de)溫(wen)度保存(cun),開(kai)封(feng)後的(de)酶(mei)標(biao)板要(yao)加(jia)幹燥(zao)劑後密封(feng)保存(cun)於-20℃,避免潮濕。
註意:
試劑盒(he)內酶(mei)標(biao)條(tiao)可拆卸,按(an)實(shi)驗需求可分多次(ci)使用(yong);使用(yong)後的(de)剩(sheng)余(yu)試(shi)劑盒(he)建議在**實驗(yan)後 1個(ge)月內使(shi)用(yong)完畢(bi)。產品過(guo)期(qi)時間(jian)以盒(he)子(zi)上的(de)標(biao)簽(qian)為(wei)準,保質期(qi)內所有(you)組(zu)分都(dou)確保是(shi)穩定的(de)。
小鼠(shu)10kDa幹擾(rao)素(su)γ誘(you)導蛋(dan)白(bai)(IP10)ELISA試(shi)劑盒(he)標本的(de)采(cai)集(ji)與(yu)保存(cun)
1. 血(xue)清(qing):
將收(shou)集(ji)於(yu)血(xue)清(qing)分離(li)管(guan)的(de)全(quan)血標本在室溫(wen)放(fang)置 2 小時(shi)或 4oC 過(guo)夜(ye),然後 1000×g 離(li)心(xin) 20 分鐘,取上清(qing)即可,或將上清(qing)置(zhi)於(yu)-20oC 或-80oC 保存(cun),但應避免反(fan)復(fu)凍融。
2. 血漿(jiang):
用 EDTA 或肝(gan)素(su)作(zuo)為抗(kang)凝劑采集(ji)標(biao)本,並(bing)將標本在采集(ji)後的(de) 30 分(fen)鐘內於(yu) 2-8oC 1000×g 離(li)心(xin) 15 分鐘,取上清(qing)即可檢(jian)測,或將上清(qing)置(zhi)於(yu)-20oC 或-80oC 保存(cun),但應避免反(fan)復(fu)凍融。
3. 組織勻漿(jiang):
1) 取適量組織塊,於(yu)預冷PBS(0.01mol/L, pH 7.0-7.2)中清(qing)洗去(qu)除血液(ye),稱(cheng)重(zhong)後備用(yong)(組織塊較(jiao)大(da)需先剪碎(sui)後再(zai)勻漿(jiang));
2) 可同時選用(yong)多種(zhong)勻漿(jiang)方(fang)法達(da)到較(jiao)好的(de)破(po)碎(sui)效(xiao)果(guo):首(shou)先將組織塊移(yi)入(ru)玻璃勻漿(jiang)器(qi),加(jia)入(ru)5-10mL 預冷PBS 進行充(chong)分研磨,該(gai)過(guo)程(cheng)需在冰上(shang)進行(有(you)條(tiao)件(jian)實(shi)驗室可選用機(ji)器勻漿(jiang));得(de)到(dao)的(de)勻漿(jiang)液(ye)可再(zai)利(li)用(yong)超聲破(po)碎或反(fan)復(fu)凍融 進壹(yi)步(bu)處理(超聲破(po)碎過(guo)程(cheng)中註(zhu)意冰(bing)浴(yu)降(jiang)溫;反(fan)復(fu)凍融法可重(zhong)復(fu)2 次(ci))。
3) 將制(zhi)備好(hao)的(de)勻漿(jiang)液(ye)於5000×g 離(li)心(xin)5 分鐘,留取上清(qing)即可檢(jian)測。
4. 細胞裂(lie)解液(ye):
1)貼壁細(xi)胞(bao)需(xu)要(yao)先用胰(yi)酶(mei)消化,離(li)心(xin)收(shou)集(ji)細(xi)胞(bao)(懸(xuan)浮細胞可直接離(li)心(xin)收(shou)集(ji));
2)將收(shou)集(ji)到(dao)的(de)細(xi)胞(bao)用冷PBS 洗3 次(ci);
3)物理方(fang)法裂解細(xi)胞(bao)(可先超聲破(po)碎細(xi)胞(bao),再(zai)反(fan)復(fu)凍融):
i 超聲破(po)碎:取適量PBS 重(zhong)懸(xuan)細(xi)胞(bao),用(yong)壹(yi)定功率(lv)的(de)超聲波處理細(xi)胞懸(xuan)液,使(shi)細(xi)胞急(ji)劇震蕩破(po)裂(lie)。
ii 反(fan)復(fu)凍融:將待破碎(sui)的(de)細(xi)胞(bao)在-20 oC 以(yi)下冰凍,室(shi)溫融解,反(fan)復(fu)3 次(ci),使細胞溶脹(zhang)破(po)碎。
4)將標本於(yu)2-8 oC 1500×g 離(li)心(xin)10 分鐘,收(shou)集(ji)上(shang)清(qing)備用(yong)。
5. 細胞(bao)培養上清(qing)或其它(ta)生(sheng)物(wu)標(biao)本:
請(qing) 1000×g 離(li)心(xin) 20 分鐘,取上清(qing)即可檢(jian)測,或將上清(qing)置(zhi)於(yu)-20oC 或-80oC 保存(cun),但應避免反(fan)復(fu)凍融。
註意:
1. 以上標(biao)本均需密封(feng)保存(cun),4oC保存(cun)應小於(yu)1周(zhou),-20oC不應超過1個(ge)月,-80oC不應超過2個(ge)月。
2. 標本使(shi)用前應緩慢均衡至室(shi)溫(wen),不應加(jia)熱(re)使(shi)之(zhi)融解。
3. 實(shi)驗(yan)前紅(hong)細(xi)胞裂解液(ye)必(bi)須(xu)用標準品稀(xi)釋液(ye)稀(xi)釋。
小鼠(shu)10kDa幹擾(rao)素(su)γ誘(you)導蛋(dan)白(bai)(IP10)ELISA試(shi)劑盒(he)試劑準備
1. 使(shi)用(yong)前(qian)將所有(you)的(de)試(shi)劑和(he)標(biao)本緩慢均衡至室(shi)溫(wen)(18-25oC),試劑不能(neng)直(zhi)接(jie)在37oC溶解。
2. 標(biao)準品(凍幹品):每(mei)瓶標(biao)準品加(jia)入(ru)標(biao)準品稀(xi)釋液(ye)1mL,蓋(gai)好後室(shi)溫靜(jing)置大約10分(fen)鐘,同時反(fan)復(fu)顛(dian)倒/搓(cuo)動(dong)以助(zhu)溶解,其濃(nong)度為(wei)1000pg/mL。準備7個(ge)稀(xi)釋標(biao)準品的(de)EP管(guan),每(mei)個(ge)EP管中加(jia)入(ru)150μL的(de)標(biao)準品稀(xi)釋液(ye),如圖所示(shi)依次(ci)倍比(bi)稀(xi)釋成(cheng)不同的(de)梯(ti)度, 標(biao)準品稀(xi)釋液(ye)(0pg/mL)直接(jie)作為空(kong)白(bai)孔(kong)。為(wei)保證實驗(yan)結(jie)果有效(xiao)性(xing),每(mei)次實(shi)驗(yan)請(qing)使用新(xin)的(de)標(biao)準品溶液(ye)。
3. 濃(nong)洗(xi)滌(di)液:用(yong)580mL蒸餾(liu)水(shui)或去(qu)離(li)子(zi)水(shui)將20mL濃(nong)洗(xi)滌(di)液稀(xi)釋至(zhi)600mL,進行30倍(bei)稀(xi)釋。
標(biao)本處理
1. 本公司(si)只(zhi)對試劑盒(he)本身(shen)負責(ze),不對因(yin)使(shi)用(yong)該(gai)試劑盒(he)所造成的(de)樣(yang)本消耗(hao)負責,請(qing)使用者使(shi)用前充分(fen)考(kao)慮(lv)到(dao)樣(yang)本的(de)可能使用(yong)量,預留充足(zu)的(de)樣(yang)本。
2. 實驗(yan)前(qian)應預測標(biao)本含(han)量,如果(guo)標(biao)本濃(nong)度過(guo)高,應對標本進行稀(xi)釋,使(shi)稀(xi)釋後的(de)標(biao)本符(fu)合試劑盒(he)的(de)檢(jian)測範(fan)圍(wei),計(ji)算時(shi)再(zai)乘(cheng)以相應的(de)稀(xi)釋倍(bei)數。
3. 若所檢(jian)樣(yang)本不包(bao)含(han)在說(shuo)明(ming)書(shu)所列樣(yang)本之(zhi)中,建議進行預實驗驗(yan)證其有(you)效(xiao)性(xing),並(bing)註(zhu)意留存(cun)樣(yang)本。
4. 使用(yong)化學裂解液(ye)制(zhi)備的(de)組(zu)織勻漿(jiang)或細(xi)胞(bao)提取液可能會(hui)由(you)於某些(xie)化學物質的(de)引(yin)入(ru)導致 ELISA實驗(yan)結(jie)果偏差(cha)。
5. 若(ruo)樣(yang)本為(wei)細胞培養上清(qing),因(yin)該(gai)類(lei)樣(yang)本幹擾(rao)因(yin)素(su) 較(jiao)多,如(ru):細胞狀(zhuang)態(tai)、細(xi)胞(bao)數(shu)量、采樣(yang)時(shi)間(jian)等,所以(yi)可能存(cun)在檢(jian)測不出的(de)情況。
6. 某些(xie)天(tian)然蛋(dan)白(bai)或重(zhong)組(zu)蛋(dan)白(bai),包(bao)括(kuo)原(yuan)核(he)及真(zhen)核(he)重(zhong)組(zu)蛋(dan)白(bai),可能因(yin)為(wei)與(yu)本產品所使(shi)用(yong)的(de)檢(jian)測抗(kang)體(ti)及捕獲(huo)抗(kang)體不匹(pi)配,而(er)不被(bei)檢(jian)測出。
7. 建議使用新(xin)鮮(xian)樣(yang)本,保存(cun)時間過(guo)長(chang)可能會(hui)存(cun)在蛋(dan)白(bai)降(jiang)解或變(bian)性(xing)導致(zhi)實驗結果偏差(cha)。
小鼠(shu)10kDa幹擾(rao)素(su)γ誘(you)導蛋(dan)白(bai)(IP10)ELISA試(shi)劑盒(he)操(cao)作步(bu)驟(zhou)
1. 加(jia)樣(yang):分(fen)別設(she)空(kong)白(bai)孔(kong)(空(kong)白(bai)對照孔不加(jia)樣(yang)品及(ji)酶(mei)標(biao)試(shi)劑,其余(yu)各(ge)步(bu)操(cao)作相(xiang)同)、標準孔、待測樣(yang)品孔(kong)。在酶(mei)標(biao)包(bao)被板上(shang)標(biao)準品準確加(jia)樣(yang)50μl,待測樣(yang)品孔(kong)中先加(jia)樣(yang)品稀(xi)釋液(ye)40μl,然後再(zai)加(jia)待測樣(yang)品10μl(樣(yang)品*終稀(xi)釋度為(wei)5倍)。加(jia)樣(yang)將樣(yang)品加(jia)於(yu)酶(mei)標(biao)板孔(kong)底部(bu),盡量不觸(chu)及(ji)孔(kong)壁,輕(qing)輕(qing)晃(huang)動(dong)混勻。
2. 溫(wen)育(yu):用封(feng)板膜(mo)封(feng)板後置(zhi)37℃溫育(yu)30分鐘。
3. 配液(ye):將20倍濃(nong)縮(suo)洗(xi)滌(di)液用(yong)蒸餾(liu)水(shui)20倍(bei)稀(xi)釋後備用(yong)
4. 洗(xi)滌(di):小心(xin)揭掉封(feng)板膜(mo),棄(qi)去(qu)液(ye)體,甩幹,每(mei)孔加(jia)滿(man)洗(xi)滌(di)液,靜(jing)置30秒後棄(qi)去,如(ru)此重(zhong)復(fu)5次(ci),拍幹。
5. 加(jia)酶(mei):每(mei)孔加(jia)入(ru)酶(mei)標(biao)試(shi)劑50μl,空(kong)白(bai)孔(kong)除(chu)外。
6. 溫育(yu):操(cao)作同3。
7. 洗(xi)滌(di):操(cao)作同5。
8. 顯(xian)色:每(mei)孔先加(jia)入(ru)顯(xian)色劑A50μl,再(zai)加(jia)入(ru)顯(xian)色劑B50μl,輕(qing)輕(qing)震蕩混勻,37℃避光(guang)顯(xian)色15分鐘.
9. 終止(zhi):每(mei)孔加(jia)終止(zhi)液50μl,終止(zhi)反(fan)應(此(ci)時藍色立轉黃(huang)色)。
10. 測定:以空(kong)白(bai)空(kong)調(tiao)零,450nm波長(chang)依(yi)序測量各(ge)孔(kong)的(de)吸光(guang)度(OD值)。 測定應在加(jia)終止(zhi)液後15分(fen)鐘以(yi)內進行。
註(zhu)意:
1. 試(shi)劑準備:準備壹(yi)次(ci)實(shi)驗(yan)所需(xu)要(yao)的(de)酶(mei)標(biao)條(tiao),其它(ta)的(de)可從(cong)微(wei)孔(kong)板上(shang)拆(chai)下,密封(feng),按(an)照(zhao)說(shuo)明(ming)書(shu)要(yao)求保存(cun),以備下次使用。
2. 加(jia)樣(yang):實驗操(cao)作中請(qing)使用(yong)壹(yi)次(ci)性(xing)的(de)吸頭,避免交(jiao)叉汙染。加(jia)樣(yang)時(shi)註(zhu)意不要(yao)有(you)氣(qi)泡(pao),將樣(yang)品加(jia)於(yu)酶(mei)標(biao)板底部(bu),盡量不觸(chu)及(ji)孔(kong)壁,輕(qing)輕(qing)晃(huang)動(dong)混勻。加(jia)樣(yang)或加(jia)試(shi)劑時,**個(ge)孔與(yu)*後壹(yi)個(ge)孔加(jia)樣(yang)之(zhi)間(jian)的(de)時(shi)間(jian)間隔(ge)如(ru)果(guo)太(tai)大,將會(hui)導(dao)致(zhi)不同的(de)“預溫育(yu)”時間(jian),從(cong)而明(ming)顯(xian)地影響(xiang)到(dao)測量值的(de)準確性及(ji)重(zhong)復(fu)性(xing)。因(yin)此(ci),壹(yi)次(ci)加(jia)樣(yang)時(shi)間(jian)(包(bao)括標準品及(ji)所有(you)樣(yang)品)*好(hao)控制(zhi)在10分鐘內。推(tui)薦(jian)設置(zhi)復(fu)孔(kong)進行實(shi)驗。
3. 溫育(yu):為(wei)防止(zhi)樣(yang)品蒸發(fa),實驗(yan)時(shi)請將加(jia)上(shang)蓋(gai)或覆(fu)膜(mo)的(de)酶(mei)標(biao)板置(zhi)於(yu)濕盒(he)內,以(yi)避免液(ye)體蒸發(fa),洗板後應盡快進行下步(bu)操(cao)作,任何(he)時(shi)侯(hou)都(dou)應避免酶(mei)標(biao)板處於幹燥(zao)狀態,同時應嚴(yan)格遵(zun)守給(gei)定的(de)溫(wen)育(yu)時間(jian)和(he)溫(wen)度。
4. 洗滌(di):充(chong)分(fen)的(de)洗(xi)滌(di)非常(chang)重(zhong)要(yao),在每(mei)次洗(xi)滌(di)過程(cheng)中,都(dou)要將洗滌(di)液完全(quan)甩幹。洗(xi)滌(di)過程(cheng)中反(fan)應孔(kong)中殘(can)留的(de)洗(xi)滌(di)液應在濾紙上拍幹,勿(wu)將濾紙直接放入(ru)反(fan)應孔(kong)中吸水(shui),同時要消除(chu)板底殘(can)留的(de)液(ye)體(ti)和(he)手指印(yin),避免影響(xiang)*後的(de)酶(mei)標(biao)儀(yi)讀數(shu)。如果有自動(dong)洗板機(ji),應在熟(shu)練(lian)使用後再(zai)用到(dao)正(zheng)式實 驗過程(cheng)中。
5. 反(fan)應時(shi)間的(de)控制(zhi):加(jia)入(ru)底物(wu)後請(qing)定時觀(guan)察反(fan)應孔(kong)的(de)顏色變化(比如,每(mei)隔(ge)10分(fen)鐘觀(guan)察壹(yi)次(ci)),如(ru)顏色較深(shen),請提前(qian)加(jia)入(ru)終止(zhi)液終止(zhi)反(fan)應,避免反(fan)應過(guo)強從(cong)而影響(xiang)酶(mei)標(biao)儀(yi)光(guang)密度讀(du)數。
6. 底物(wu):底物(wu)請(qing)避光(guang)保存(cun),在儲存(cun)和(he)溫(wen)育(yu)時避免強(qiang)光(guang)直(zhi)接(jie)照(zhao)射(she)。
7. 如(ru)果(guo)實(shi)驗(yan)室內濕度低(di)於60%,推(tui)薦(jian)使用(yong)加(jia)濕器提高濕度水(shui)平。
實驗流程(cheng)
1. 實(shi)驗前標準品、試(shi)劑及樣(yang)本的(de)準備;
2. 加(jia)樣(yang)(標(biao)準品及(ji)樣(yang)本)50μL,37℃孵(fu)育(yu)30分鐘;
3. 洗(xi)板5次(ci),加(jia)酶(mei)標(biao)試(shi)劑50ul,37℃孵(fu)育(yu)半小時(shi);
4. 洗(xi)板5次(ci);加(jia)入(ru)顯(xian)色液A,B各(ge)50ul,37℃孵育(yu)顯色15分鐘
5. 加(jia)終止(zhi)液50μL,立(li)即(ji)450nm讀(du)數。
6. 計(ji)算
小鼠(shu)10kDa幹擾(rao)素(su)γ誘(you)導蛋(dan)白(bai)(IP10)ELISA試(shi)劑盒(he)計(ji)算
各(ge)標(biao)準品及(ji)樣(yang)本O.D.值扣除(chu)空(kong)白(bai)孔(kong)O.D.值後作(zuo)圖(七(qi)點(dian)圖),如(ru)設置復(fu)孔(kong),則應取其平均值計(ji)算。以(yi)標準品的(de)濃(nong)度為(wei)縱(zong)坐(zuo)標(biao)(或對數坐(zuo)標(biao)),O.D.值為橫(heng)坐(zuo)標(biao)(或對數坐(zuo)標(biao)),繪(hui)出標(biao)準曲(qu)線(*佳方(fang)程(cheng)式應依(yi)回歸(gui)方(fang)程(cheng)計(ji)算的(de)R2值來(lai)定,以R2值越趨(qu)近(jin)於(yu)1為好)。推(tui)薦(jian)使用(yong)專(zhuan)業制(zhi)作曲(qu)線軟件(jian)進行分(fen)析,如(ru)curve expert 1.30,根(gen)據樣(yang)品O.D.值,由(you)標準曲(qu)線查出相(xiang)應的(de)濃(nong)度,乘(cheng)以稀(xi)釋倍(bei)數;或用(yong)標(biao)準物的(de)濃(nong)度與(yu)O.D.值計(ji)算出標(biao)準曲(qu)線的(de)回(hui)歸(gui)方(fang)程(cheng)式,將樣(yang)品的(de)O.D.值代入(ru)方(fang)程(cheng)式,計(ji)算出樣(yang)品濃(nong)度,再(zai)乘(cheng)以稀(xi)釋倍(bei)數,即(ji)為樣(yang)品的(de)實(shi)際(ji)濃(nong)度。
特(te)異性
本試(shi)劑盒(he)用於檢(jian)測小鼠(shu)10kDa幹擾(rao)素(su)γ誘(you)導蛋(dan)白(bai)(IP10),經(jing)檢(jian)測與(yu)其它(ta)相似物質無(wu)明(ming)顯(xian)交(jiao)叉反(fan)應。
由(you)於受(shou)到技術(shu)及(ji)樣(yang)本來(lai)源(yuan)的(de)限(xian)制(zhi),不可能完成(cheng)對所有(you)相(xiang)關(guan)或相(xiang)似物質交(jiao)叉反(fan)應檢(jian)測,因(yin)此(ci)本試(shi)劑盒(he)有可能與未經(jing)檢(jian)測的(de)其它(ta)物質有(you)交(jiao)叉反(fan)應。
精密度
精密度用(yong)樣(yang)品測定值的(de)變(bian)異系(xi)數(shu)CV表(biao)示(shi)。CV(%) = SD/mean×100
批內差(cha):取同批次(ci)試劑盒(he)對低、中、高值定值樣(yang)本進行定量檢(jian)測,每(mei)份樣(yang)本連(lian)續測定20 次,分(fen)別計(ji)算不同濃(nong)度樣(yang)本的(de)平均值及SD值。
批間(jian)差:選(xuan)取3個(ge)不同批次(ci)的(de)試(shi)劑盒(he)分別對低、中、高值定值樣(yang)本進行定量測定,每(mei)個(ge)樣(yang)本使(shi)用同壹(yi)試(shi)劑盒(he)重(zhong)復(fu)測定8次,分(fen)別計(ji)算不同濃(nong)度樣(yang)本的(de)平均值及SD值。
批內差(cha): CV<10%
批間(jian)差: CV<12%
小鼠(shu)10kDa幹擾(rao)素(su)γ誘(you)導蛋(dan)白(bai)(IP10)ELISA試(shi)劑盒(he)穩定性
經(jing)測定,試劑盒(he)在有效(xiao)期(qi)內按(an)推(tui)薦(jian)溫度保存(cun),其活(huo)性降(jiang)低率(lv)小於(yu)5%。
為(wei)減(jian)小外部(bu)因(yin)素(su)對試劑盒(he)破壞前(qian)後檢(jian)測值的(de)影響(xiang),實(shi)驗(yan)室(shi)的(de)環(huan)境(jing)條(tiao)件(jian)需(xu)盡量保持(chi)壹(yi)致(zhi),尤(you)其是(shi)實(shi)驗(yan)室(shi)內溫(wen)度、濕度及(ji)溫育(yu)條(tiao)件(jian)。其次(ci)由(you)同壹(yi)實(shi)驗(yan)員(yuan)來(lai)進行操(cao)作可減(jian)少(shao)人(ren)為(wei)誤(wu)差(cha)。



