產品名稱(cheng)：小鼠(shu)1號染色(se)體開放閱讀框85(C1orf85)ELISA試劑(ji)盒(he)

                                                       96T       僅供體外(wai)研(yan)究(jiu)使(shi)用，不用於(yu)臨(lin)床診斷!

小(xiao)鼠(shu)1號染色(se)體開放閱讀框85(C1orf85)ELISA試劑(ji)盒(he)

本試劑(ji)盒(he)運(yun)用雙抗體夾(jia)心ELISA法(fa)定量(liang)測(ce)定小鼠(shu)血(xue)清、血(xue)漿、組織(zhi)勻漿、細(xi)胞(bao)裂(lie)解液、細(xi)胞(bao)培養(yang)上(shang)清液和其(qi)他生物液體中小(xiao)鼠(shu)1號染色(se)體開放閱讀框85(C1orf85)含量。

 檢測範圍

0.313-20ng/mL

 *低檢測限(xian)

0.123ng/mL

 實(shi)驗(yan)原理

將小(xiao)鼠(shu)1號染色(se)體開放閱讀框85(C1orf85)抗體包(bao)被(bei)於(yu)96孔(kong)微(wei)孔(kong)板(ban)中，制成固(gu)相(xiang)載體，向微(wei)孔(kong)中分(fen)別(bie)加(jia)入標(biao)準品(pin)或標本，其(qi)中的(de)小(xiao)鼠(shu)1號染色(se)體開放閱讀框85(C1orf85)與(yu)連接於(yu)固(gu)相(xiang)載體上(shang)的抗體結合，然(ran)後(hou)加(jia)入生(sheng)物素(su)化的小(xiao)鼠(shu)1號染色(se)體開放閱讀框85(C1orf85)抗體，將未(wei)結合的生物素(su)化抗體洗凈(jing)後(hou)，加(jia)入HRP標(biao)記的(de)親(qin)和素(su)，再次(ci)徹(che)底(di)洗滌(di)後(hou)加(jia)入TMB底(di)物顯色(se)。TMB在過氧化物酶(mei)的(de)催化下轉化成藍色(se)，並(bing)在酸(suan)的作(zuo)用下轉化成*終(zhong)的(de)黃(huang)色(se)。顏色(se)的深(shen)淺(qian)和(he)樣(yang)品(pin)中的(de)小(xiao)鼠(shu)1號染色(se)體開放閱讀框85(C1orf85)呈(cheng)正(zheng)相(xiang)關(guan)。用酶標儀(yi)在450nm波長(chang)下測(ce)定吸(xi)光(guang)度(du)(O.D.值)，計(ji)算(suan)樣(yang)品(pin)濃(nong)度(du)。

 試劑(ji)盒(he)內(nei)容

小(xiao)鼠(shu)1號染色(se)體開放閱讀框85(C1orf85)ELISA試劑(ji)盒(he)需自(zi)備(bei)的設備及試劑(ji)

1.         450±10nm濾光片(pian)的(de)酶(mei)標(biao)儀(yi)(建議(yi)儀(yi)器(qi)使(shi)用前提(ti)前預(yu)熱)

2.         單道(dao)或多道(dao)微量加(jia)液器(qi)及吸(xi)頭

3.         稀(xi)釋(shi)樣(yang)品(pin)的(de)EP管

4.         蒸餾(liu)水或去(qu)離子水

5.         吸(xi)水紙

6.         盛(sheng)放洗液的容(rong)器(qi)

 試劑(ji)盒(he)的儲存及有(you)效期(qi)

1.         未(wei)開封的(de)試劑(ji)盒(he)：所有試劑(ji)均(jun)按(an)試劑(ji)瓶(ping)標簽上(shang)所示保(bao)存(cun)。請(qing)註意(yi)，收(shou)到(dao)試劑(ji)盒(he)後(hou)請(qing)盡(jin)快(kuai)將TMB 洗滌(di)液，終(zhong)止(zhi)液保存(cun)於(yu)4℃，其(qi)他試劑(ji)保(bao)存於(yu)-20℃。

2.         使(shi)用後(hou)的試劑(ji)盒(he)：剩余試劑(ji)仍(reng)需按(an)照(zhao)試劑(ji)瓶(ping)標簽所示的(de)溫(wen)度(du)保存(cun)，開封後(hou)的酶(mei)標板(ban)要(yao)加(jia)幹燥劑(ji)後(hou)密封保存於(yu)-20℃，避(bi)免(mian)潮濕。

註意(yi)：

試劑(ji)盒(he)內(nei)酶標(biao)條可拆卸(xie)，按(an)實(shi)驗需求可分(fen)多(duo)次(ci)使(shi)用；使(shi)用後(hou)的剩余試劑(ji)盒(he)建議在**實驗(yan)後(hou) 1個(ge)月內(nei)使(shi)用完畢。產(chan)品(pin)過(guo)期(qi)時間(jian)以(yi)盒(he)子上(shang)的標(biao)簽為(wei)準，保質期(qi)內(nei)所有組(zu)分(fen)都(dou)確(que)保(bao)是(shi)穩(wen)定的。

小(xiao)鼠(shu)1號染色(se)體開放閱讀框85(C1orf85)ELISA試劑(ji)盒(he)標本的(de)采(cai)集與保(bao)存(cun)

1.         血(xue)清：

將收(shou)集於(yu)血(xue)清分(fen)離管的(de)全(quan)血(xue)標(biao)本在室(shi)溫(wen)放置(zhi) 2 小時或 4^oC 過夜(ye)，然(ran)後(hou) 1000×g 離心 20 分鐘，取(qu)上(shang)清即(ji)可，或將上(shang)清置(zhi)於(yu)-20^oC 或-80^oC 保存(cun)，但(dan)應避(bi)免(mian)反(fan)復(fu)凍(dong)融(rong)。

2.         血(xue)漿：

用 EDTA 或肝(gan)素(su)作為(wei)抗凝(ning)劑(ji)采(cai)集標本，並(bing)將標本在采(cai)集後(hou)的 30 分(fen)鐘內(nei)於(yu) 2-8^oC 1000×g 離心 15 分鐘，取(qu)上(shang)清即(ji)可檢測，或將上(shang)清置(zhi)於(yu)-20^oC 或-80^oC 保存(cun)，但(dan)應避(bi)免(mian)反(fan)復(fu)凍(dong)融(rong)。

3. 組(zu)織(zhi)勻漿：

1） 取(qu)適量組織(zhi)塊(kuai)，於(yu)預(yu)冷(leng)PBS（0.01mol/L, pH 7.0-7.2）中清洗去(qu)除血(xue)液，稱(cheng)重(zhong)後(hou)備用（組織(zhi)塊(kuai)較大(da)需先(xian)剪(jian)碎後(hou)再勻漿）；

2） 可同(tong)時選(xuan)用多種勻漿方(fang)法(fa)達(da)到(dao)較(jiao)好(hao)的(de)破碎效果：首(shou)先(xian)將組織(zhi)塊(kuai)移(yi)入(ru)玻璃(li)勻(yun)漿器(qi)，加(jia)入5-10mL 預(yu)冷(leng)PBS 進行(xing)充分研(yan)磨(mo)，該(gai)過程需在冰上(shang)進行(xing)（有條件實驗(yan)室(shi)可選(xuan)用機器(qi)勻漿）；得到(dao)的(de)勻(yun)漿液可再利用超聲(sheng)破(po)碎(sui)或反(fan)復(fu)凍(dong)融(rong) 進壹(yi)步(bu)處理（超聲(sheng)破(po)碎(sui)過(guo)程中註意(yi)冰(bing)浴(yu)降溫(wen)；反(fan)復(fu)凍(dong)融(rong)法可重(zhong)復(fu)2 次(ci)）。

3） 將制備好(hao)的勻(yun)漿液於(yu)5000×g 離心5 分鐘，留(liu)取(qu)上(shang)清即(ji)可檢測。

4. 細(xi)胞(bao)裂(lie)解液：

1）貼(tie)壁(bi)細(xi)胞(bao)需(xu)要先(xian)用胰酶消化，離心收(shou)集細(xi)胞(bao)（懸(xuan)浮細(xi)胞(bao)可直(zhi)接離心收(shou)集）；

2）將收(shou)集到(dao)的(de)細(xi)胞(bao)用冷(leng)PBS 洗3 次(ci)；

3）物理方(fang)法(fa)裂(lie)解細(xi)胞(bao)（可先(xian)超(chao)聲(sheng)破(po)碎(sui)細(xi)胞(bao)，再反(fan)復(fu)凍(dong)融(rong)）：

i 超(chao)聲(sheng)破(po)碎(sui)：取(qu)適量PBS 重(zhong)懸(xuan)細(xi)胞(bao)，用壹(yi)定(ding)功(gong)率(lv)的(de)超(chao)聲(sheng)波(bo)處理細(xi)胞(bao)懸(xuan)液，使(shi)細(xi)胞(bao)急劇震蕩(dang)破(po)裂(lie)。

ii 反(fan)復(fu)凍(dong)融(rong)：將待(dai)破(po)碎(sui)的(de)細(xi)胞(bao)在-20 ^oC 以(yi)下(xia)冰凍，室(shi)溫(wen)融(rong)解，反(fan)復(fu)3 次(ci)，使(shi)細(xi)胞(bao)溶脹(zhang)破(po)碎(sui)。

4）將標本於(yu)2-8 ^oC 1500×g 離心10 分鐘，收(shou)集上(shang)清備(bei)用。

5. 細(xi)胞(bao)培養(yang)上(shang)清或其它生物標(biao)本：

請(qing) 1000×g 離心 20 分鐘，取(qu)上(shang)清即(ji)可檢測，或將上(shang)清置(zhi)於(yu)-20^oC 或-80^oC 保存(cun)，但(dan)應避(bi)免(mian)反(fan)復(fu)凍(dong)融(rong)。

註意(yi)：

1.         以(yi)上(shang)標本均(jun)需(xu)密封保存，4^oC保(bao)存(cun)應小(xiao)於(yu)1周(zhou)，-20^oC不應超(chao)過(guo)1個(ge)月，-80^oC不應超(chao)過(guo)2個(ge)月。

2.         標(biao)本使(shi)用前應(ying)緩(huan)慢(man)均(jun)衡(heng)至室(shi)溫(wen)，不應加(jia)熱使(shi)之(zhi)融(rong)解。

3.         實(shi)驗(yan)前紅(hong)細(xi)胞(bao)裂(lie)解液必須用標準品(pin)稀(xi)釋(shi)液稀(xi)釋(shi)。

小(xiao)鼠(shu)1號染色(se)體開放閱讀框85(C1orf85)ELISA試劑(ji)盒(he)試劑(ji)準(zhun)備

1.         使(shi)用前將所有的(de)試劑(ji)和(he)標本緩(huan)慢(man)均(jun)衡(heng)至室(shi)溫(wen)(18-25oC)，試劑(ji)不能直接在37oC溶解。

2.         標(biao)準(zhun)品(凍(dong)幹品)：每(mei)瓶標(biao)準(zhun)品加(jia)入標(biao)準品(pin)稀(xi)釋(shi)液1mL，蓋好(hao)後(hou)室(shi)溫(wen)靜置(zhi)大約(yue)10分鐘(zhong)，同(tong)時反(fan)復(fu)顛倒/搓動(dong)以(yi)助(zhu)溶解，其濃(nong)度(du)為20ng/mL。準(zhun)備(bei)7個(ge)稀(xi)釋(shi)標準(zhun)品的EP管，每(mei)個(ge)EP管中加(jia)入150μL的(de)標準(zhun)品稀(xi)釋(shi)液，如(ru)圖所示依(yi)次(ci)倍(bei)比(bi)稀(xi)釋(shi)成不同(tong)的梯度(du)， 標準(zhun)品(pin)稀(xi)釋(shi)液(0pg/mL)直接作為(wei)空(kong)白(bai)孔(kong)。為(wei)保(bao)證實(shi)驗(yan)結果有效性，每(mei)次(ci)實(shi)驗(yan)請(qing)使(shi)用新(xin)的標(biao)準(zhun)品(pin)溶液。

3.         濃(nong)洗滌(di)液：用580mL蒸餾(liu)水或去(qu)離子水將20mL濃(nong)洗滌(di)液稀(xi)釋(shi)至600mL，進行(xing)30倍(bei)稀(xi)釋(shi)。

標(biao)本處理

1.         本公司(si)只(zhi)對試劑(ji)盒(he)本身(shen)負(fu)責，不對因(yin)使(shi)用該試劑(ji)盒(he)所造成(cheng)的(de)樣(yang)本消耗(hao)負責(ze)，請(qing)使(shi)用者使(shi)用前充(chong)分(fen)考慮(lv)到(dao)樣(yang)本的(de)可能使(shi)用量，預(yu)留(liu)充(chong)足(zu)的(de)樣(yang)本。

2.         實(shi)驗(yan)前應(ying)預(yu)測(ce)標(biao)本含量，如(ru)果標本濃(nong)度(du)過高，應(ying)對(dui)標本進行(xing)稀(xi)釋(shi)，使(shi)稀(xi)釋(shi)後(hou)的標(biao)本符(fu)合試劑(ji)盒(he)的檢測範圍，計(ji)算(suan)時再乘以(yi)相(xiang)應(ying)的(de)稀(xi)釋(shi)倍(bei)數。

3.         若所檢樣(yang)本不包(bao)含在說明書所列樣(yang)本之(zhi)中，建(jian)議(yi)進行(xing)預(yu)實(shi)驗(yan)驗(yan)證其(qi)有(you)效性，並(bing)註意(yi)留(liu)存(cun)樣(yang)本。

4.         使(shi)用化學裂解液制備的(de)組織(zhi)勻漿或細(xi)胞(bao)提(ti)取液可能會(hui)由於(yu)某(mou)些化學物質(zhi)的(de)引入(ru)導致(zhi)  ELISA實(shi)驗結果偏(pian)差。

5.         若樣(yang)本為(wei)細(xi)胞(bao)培養(yang)上(shang)清，因(yin)該(gai)類(lei)樣(yang)本幹擾因(yin)素(su) 較多(duo)，如(ru)：細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態(tai)、細(xi)胞(bao)數量(liang)、采(cai)樣(yang)時間(jian)等(deng)，所以(yi)可能存在檢測不出的(de)情(qing)況(kuang)。

6.         某(mou)些天(tian)然(ran)蛋(dan)白(bai)或重(zhong)組(zu)蛋白(bai)，包(bao)括(kuo)原核及真(zhen)核重(zhong)組(zu)蛋白(bai)，可能因為(wei)與本產(chan)品(pin)所使(shi)用的檢測抗體及捕獲抗體不匹配，而不被檢測出。

7.         建(jian)議(yi)使(shi)用新(xin)鮮(xian)樣(yang)本，保(bao)存(cun)時間(jian)過(guo)長(chang)可能會(hui)存在蛋白(bai)降解或變(bian)性(xing)導致(zhi)實(shi)驗結果偏(pian)差。

小(xiao)鼠(shu)1號染色(se)體開放閱讀框85(C1orf85)ELISA試劑(ji)盒(he)操作步驟(zhou)

1.         加(jia)樣(yang)：分(fen)別(bie)設空(kong)白(bai)孔(kong)（空(kong)白(bai)對(dui)照(zhao)孔(kong)不加(jia)樣(yang)品(pin)及酶(mei)標試劑(ji)，其(qi)余各步操(cao)作相(xiang)同(tong)）、標準(zhun)孔(kong)、待(dai)測(ce)樣(yang)品(pin)孔(kong)。在酶標(biao)包(bao)被(bei)板(ban)上(shang)標準(zhun)品準確(que)加(jia)樣(yang)50μl，待(dai)測(ce)樣(yang)品(pin)孔(kong)中先(xian)加(jia)樣(yang)品(pin)稀(xi)釋(shi)液40μl，然(ran)後(hou)再加(jia)待(dai)測(ce)樣(yang)品(pin)10μl（樣(yang)品(pin)*終(zhong)稀(xi)釋(shi)度(du)為5倍(bei)）。加(jia)樣(yang)將樣(yang)品(pin)加(jia)於(yu)酶(mei)標板(ban)孔(kong)底(di)部，盡(jin)量不觸及孔(kong)壁(bi)，輕輕(qing)晃動混勻。

2.         溫(wen)育(yu)：用封板(ban)膜(mo)封(feng)板(ban)後(hou)置(zhi)37℃溫(wen)育(yu)30分(fen)鐘(zhong)。  

3.         配液：將20倍(bei)濃(nong)縮(suo)洗滌(di)液用蒸餾(liu)水20倍(bei)稀(xi)釋(shi)後(hou)備用

4.         洗滌(di)：小心揭(jie)掉封板(ban)膜(mo)，棄(qi)去(qu)液體，甩(shuai)幹，每孔(kong)加(jia)滿(man)洗滌(di)液，靜置(zhi)30秒後(hou)棄去(qu)，如(ru)此重(zhong)復(fu)5次(ci)，拍(pai)幹。

5.         加(jia)酶：每(mei)孔(kong)加(jia)入酶(mei)標試劑(ji)50μl，空(kong)白(bai)孔(kong)除(chu)外(wai)。

6.         溫(wen)育(yu)：操(cao)作(zuo)同(tong)3。

7.         洗滌(di)：操作同(tong)5。

8.         顯色(se)：每孔(kong)先(xian)加(jia)入顯色(se)劑(ji)A50μl，再加(jia)入顯色(se)劑(ji)B50μl，輕(qing)輕震蕩(dang)混勻，37℃避(bi)光顯色(se)15分鐘(zhong).

9.         終(zhong)止(zhi)：每(mei)孔(kong)加(jia)終(zhong)止(zhi)液50μl，終(zhong)止(zhi)反(fan)應(ying)（此時藍(lan)色(se)立(li)轉(zhuan)黃(huang)色(se)）。

10.     測(ce)定(ding)：以(yi)空(kong)白(bai)空(kong)調零，450nm波長(chang)依序(xu)測量(liang)各孔(kong)的(de)吸(xi)光(guang)度(du)（OD值）。 測(ce)定(ding)應(ying)在加(jia)終(zhong)止(zhi)液後(hou)15分鐘(zhong)以(yi)內(nei)進行(xing)。

註意(yi)：

1.         試劑(ji)準(zhun)備：準(zhun)備(bei)壹(yi)次(ci)實(shi)驗(yan)所需要(yao)的(de)酶標條(tiao)，其(qi)它的可從(cong)微(wei)孔(kong)板(ban)上(shang)拆下(xia)，密封，按(an)照(zhao)說明書要(yao)求保(bao)存，以(yi)備(bei)下次(ci)使(shi)用。

2.         加(jia)樣(yang)：實(shi)驗(yan)操作(zuo)中請(qing)使(shi)用壹(yi)次(ci)性(xing)的(de)吸(xi)頭，避(bi)免(mian)交(jiao)叉(cha)汙(wu)染。加(jia)樣(yang)時註意(yi)不要有(you)氣(qi)泡，將樣(yang)品(pin)加(jia)於(yu)酶(mei)標板(ban)底(di)部，盡(jin)量不觸及孔(kong)壁(bi)，輕輕(qing)晃動混勻。加(jia)樣(yang)或加(jia)試劑(ji)時，**個(ge)孔(kong)與(yu)*後(hou)壹(yi)個(ge)孔(kong)加(jia)樣(yang)之(zhi)間(jian)的(de)時間(jian)間(jian)隔如(ru)果太大，將會(hui)導致(zhi)不同(tong)的“預(yu)溫(wen)育(yu)”時間(jian)，從(cong)而明顯地影響(xiang)到(dao)測(ce)量(liang)值(zhi)的準確(que)性(xing)及重(zhong)復(fu)性。因此，壹(yi)次(ci)加(jia)樣(yang)時間(jian)(包(bao)括(kuo)標準品及所有樣(yang)品(pin))*好(hao)控(kong)制在10分鐘(zhong)內(nei)。推薦(jian)設置(zhi)復孔(kong)進行(xing)實驗。

3.          溫(wen)育(yu)：為(wei)防止(zhi)樣(yang)品(pin)蒸發(fa)，實(shi)驗時請(qing)將加(jia)上(shang)蓋或覆膜(mo)的(de)酶(mei)標板(ban)置(zhi)於(yu)濕(shi)盒內(nei)，以(yi)避(bi)免(mian)液體蒸發(fa)，洗板(ban)後(hou)應盡(jin)快(kuai)進行(xing)下步操(cao)作(zuo)，任何(he)時侯(hou)都(dou)應避(bi)免(mian)酶標板(ban)處於(yu)幹燥狀(zhuang)態(tai)，同(tong)時應(ying)嚴格(ge)遵守給(gei)定的(de)溫(wen)育(yu)時間(jian)和(he)溫(wen)度(du)。

4.         洗滌(di)：充(chong)分(fen)的洗滌(di)非常重(zhong)要(yao)，在每次(ci)洗滌(di)過程中，都(dou)要將洗滌(di)液完全(quan)甩(shuai)幹。洗滌(di)過程中反(fan)應(ying)孔(kong)中殘留(liu)的(de)洗滌(di)液應在濾紙上(shang)拍幹，勿將濾紙直(zhi)接放入反(fan)應(ying)孔(kong)中吸(xi)水，同(tong)時要(yao)消除(chu)板(ban)底(di)殘留(liu)的(de)液體和(he)手(shou)指(zhi)印，避(bi)免(mian)影響(xiang)*後(hou)的酶(mei)標儀(yi)讀數。如(ru)果有自(zi)動(dong)洗板(ban)機，應(ying)在熟練(lian)使(shi)用後(hou)再用到(dao)正(zheng)式實(shi) 驗(yan)過程中。

5.         反(fan)應(ying)時間(jian)的(de)控(kong)制：加(jia)入底(di)物後(hou)請(qing)定時觀(guan)察反(fan)應(ying)孔(kong)的(de)顏色(se)變(bian)化(比(bi)如(ru)，每隔10分(fen)鐘觀(guan)察壹(yi)次(ci))，如(ru)顏色(se)較深(shen)，請(qing)提前加(jia)入終(zhong)止(zhi)液終(zhong)止(zhi)反(fan)應(ying)，避(bi)免(mian)反(fan)應(ying)過(guo)強(qiang)從而影響(xiang)酶標儀(yi)光密度(du)讀數。

6.         底(di)物：底(di)物請(qing)避(bi)光保(bao)存(cun)，在儲存(cun)和(he)溫(wen)育(yu)時避(bi)免(mian)強光直接照射。

7.         如(ru)果實驗室(shi)內(nei)濕度(du)低於(yu)60%，推(tui)薦使(shi)用加(jia)濕器(qi)提高濕(shi)度(du)水平(ping)。

 實(shi)驗(yan)流(liu)程(cheng)

1.         實(shi)驗(yan)前標(biao)準(zhun)品、試劑(ji)及樣(yang)本的(de)準(zhun)備；

2.         加(jia)樣(yang)（標(biao)準(zhun)品(pin)及樣(yang)本）50μL，37℃孵育(yu)30分(fen)鐘；

3.         洗板(ban)5次(ci)，加(jia)酶標(biao)試劑(ji)50ul，37℃孵育(yu)半(ban)小(xiao)時；

4.         洗板(ban)5次(ci)；加(jia)入顯色(se)液A，B各50ul,37℃孵育(yu)顯色(se)15分鐘(zhong)

5.         加(jia)終(zhong)止(zhi)液50μL，立(li)即(ji)450nm讀數。

6.    計(ji)算(suan)

小(xiao)鼠(shu)1號染色(se)體開放閱讀框85(C1orf85)ELISA試劑(ji)盒(he)計算

各標準(zhun)品及樣(yang)本O.D.值(zhi)扣(kou)除空(kong)白(bai)孔(kong)O.D.值(zhi)後(hou)作圖(tu)(七點(dian)圖)，如(ru)設置(zhi)復孔(kong)，則應取(qu)其平(ping)均(jun)值(zhi)計算。以(yi)標(biao)準品的濃(nong)度(du)為縱(zong)坐(zuo)標(biao)(或對數坐(zuo)標)，O.D.值(zhi)為橫坐標(biao)(或對數坐(zuo)標），繪(hui)出標準(zhun)曲線(xian)(*佳(jia)方(fang)程(cheng)式應(ying)依(yi)回歸方(fang)程(cheng)計(ji)算(suan)的R2值(zhi)來定(ding)，以(yi)R2值(zhi)越趨(qu)近於(yu)1為(wei)好)。推薦使(shi)用專業制作曲線(xian)軟(ruan)件進行(xing)分析(xi)，如(ru)curve expert 1.30，根據(ju)樣(yang)品(pin)O.D.值(zhi)，由標(biao)準(zhun)曲線(xian)查出(chu)相(xiang)應(ying)的(de)濃(nong)度(du)，乘以(yi)稀(xi)釋(shi)倍(bei)數；或用標準物的(de)濃(nong)度(du)與O.D.值(zhi)計(ji)算(suan)出標(biao)準曲線(xian)的(de)回(hui)歸方(fang)程(cheng)式，將樣(yang)品(pin)的(de)O.D.值(zhi)代(dai)入方(fang)程(cheng)式，計(ji)算(suan)出樣(yang)品(pin)濃(nong)度(du)，再乘以(yi)稀(xi)釋(shi)倍(bei)數，即(ji)為樣(yang)品(pin)的(de)實(shi)際(ji)濃(nong)度(du)。

 特(te)異(yi)性

本試劑(ji)盒(he)用於(yu)檢測小鼠1號染色(se)體開放閱讀框85(C1orf85)，經檢測與其它相(xiang)似物質(zhi)無(wu)明(ming)顯交(jiao)叉(cha)反(fan)應(ying)。

由於(yu)受到(dao)技(ji)術(shu)及樣(yang)本來(lai)源的(de)限(xian)制，不可能完成(cheng)對所有相(xiang)關(guan)或相(xiang)似物質(zhi)交(jiao)叉(cha)反(fan)應(ying)檢測，因此本試劑(ji)盒(he)有可能與未(wei)經(jing)檢測的其它物質(zhi)有(you)交(jiao)叉(cha)反(fan)應(ying)。

 精密度(du)

精密度(du)用樣(yang)品(pin)測(ce)定(ding)值(zhi)的變(bian)異(yi)系數CV表(biao)示(shi)。CV(%) = SD/mean×100

批內(nei)差：取同(tong)批次(ci)試劑(ji)盒(he)對低、中、高值(zhi)定(ding)值樣(yang)本進行(xing)定量檢測,每份樣(yang)本連續測定20 次(ci)，分(fen)別(bie)計算(suan)不同(tong)濃(nong)度(du)樣(yang)本的(de)平(ping)均(jun)值(zhi)及SD值(zhi)。

批間(jian)差：選(xuan)取3個(ge)不同(tong)批次(ci)的(de)試劑(ji)盒(he)分別(bie)對低、中、高值(zhi)定(ding)值樣(yang)本進行(xing)定量測(ce)定(ding)，每個(ge)樣(yang)本使(shi)用同(tong)壹(yi)試劑(ji)盒(he)重(zhong)復(fu)測定8次(ci)，分(fen)別(bie)計算(suan)不同(tong)濃(nong)度(du)樣(yang)本的(de)平(ping)均(jun)值(zhi)及SD值(zhi)。

批內(nei)差： CV<10%

批間(jian)差： CV<12%

小(xiao)鼠(shu)1號染色(se)體開放閱讀框85(C1orf85)ELISA試劑(ji)盒(he)穩(wen)定性

經(jing)測(ce)定，試劑(ji)盒(he)在有效期(qi)內(nei)按(an)推(tui)薦溫(wen)度(du)保存(cun)，其(qi)活(huo)性降低率(lv)小(xiao)於(yu)5%。

為(wei)減小(xiao)外(wai)部因(yin)素(su)對(dui)試劑(ji)盒(he)破壞前後(hou)檢測值的影(ying)響(xiang)，實驗室(shi)的環境(jing)條件需盡(jin)量保(bao)持(chi)壹(yi)致(zhi)，尤其是實驗(yan)室(shi)內(nei)溫(wen)度(du)、濕度(du)及溫(wen)育(yu)條(tiao)件。其次(ci)由同(tong)壹(yi)實(shi)驗(yan)員(yuan)來進行(xing)操作可減少(shao)人(ren)為誤(wu)差。