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96T 僅(jin)供體(ti)外(wai)研(yan)究使(shi)用,不用於臨(lin)床診(zhen)斷!
小(xiao)鼠Ⅰ型(xing)膠(jiao)原α1(COL1α1)ELISA試(shi)劑(ji)盒
本(ben)試劑(ji)盒運用雙抗(kang)體(ti)夾(jia)心(xin)ELISA法定(ding)量(liang)測定(ding)小鼠(shu)血(xue)清(qing)、血(xue)漿(jiang)、組織(zhi)勻漿(jiang)、細胞(bao)裂解液(ye)、細胞(bao)培(pei)養上清(qing)液(ye)和(he)其(qi)他(ta)生(sheng)物液(ye)體(ti)中(zhong)小(xiao)鼠Ⅰ型(xing)膠(jiao)原α1(COL1α1)含量(liang)。
檢(jian)測範(fan)圍(wei)
0.313-20ng/mL
*低(di)檢測限(xian)
0.137ng/mL
實驗(yan)原理
將(jiang)小(xiao)鼠Ⅰ型(xing)膠(jiao)原α1(COL1α1)抗(kang)體(ti)包(bao)被於96孔微孔(kong)板(ban)中(zhong),制(zhi)成固相(xiang)載體(ti),向(xiang)微孔中(zhong)分(fen)別(bie)加入標準品或(huo)標本(ben),其(qi)中(zhong)的(de)小(xiao)鼠Ⅰ型(xing)膠(jiao)原α1(COL1α1)與連接於固相載體(ti)上的(de)抗(kang)體(ti)結(jie)合(he),然後加入生物素化的(de)小(xiao)鼠Ⅰ型(xing)膠(jiao)原α1(COL1α1)抗(kang)體(ti),將(jiang)未結(jie)合(he)的(de)生(sheng)物素化抗(kang)體(ti)洗(xi)凈後,加入HRP標記的(de)親(qin)和(he)素(su),再次徹(che)底洗(xi)滌(di)後(hou)加入TMB底物顯(xian)色。TMB在(zai)過(guo)氧(yang)化物酶的(de)催(cui)化下(xia)轉(zhuan)化成藍(lan)色(se),並在(zai)酸(suan)的(de)作(zuo)用(yong)下(xia)轉(zhuan)化成*終的(de)黃(huang)色(se)。顏(yan)色(se)的(de)深(shen)淺和(he)樣(yang)品中(zhong)的(de)小(xiao)鼠Ⅰ型(xing)膠(jiao)原α1(COL1α1)呈正(zheng)相關(guan)。用(yong)酶標儀(yi)在(zai)450nm波長下(xia)測定(ding)吸(xi)光(guang)度(O.D.值(zhi)),計(ji)算(suan)樣品濃(nong)度。
試(shi)劑(ji)盒內容(rong)
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試(shi)劑(ji)名稱(cheng) |
數(shu)量(liang) |
試(shi)劑(ji)名稱(cheng) |
數(shu)量(liang) |
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96孔(kong)板(預包被) |
1 |
96孔(kong)板覆膜 |
2 |
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標(biao)準品 |
0.5ml×1 |
標(biao)準品稀釋(shi)液(ye) |
1.5ml×1瓶(ping) |
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顯(xian)色劑(ji)A液(ye) |
6ml×1瓶(ping) |
樣(yang)品稀釋(shi)液(ye) |
6ml×1瓶(ping) |
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顯(xian)色劑(ji)B液(ye) |
6ml×1瓶(ping) |
終止液(ye) |
6ml×1瓶(ping) |
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酶標試(shi)劑(ji) |
6ml×1瓶(ping) |
密(mi)封(feng)袋 |
1 |
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濃(nong)洗(xi)滌(di)液(ye)(30×) |
1×20mL |
使(shi)用說明書 |
1 |
小(xiao)鼠Ⅰ型(xing)膠(jiao)原α1(COL1α1)ELISA試(shi)劑(ji)盒需(xu)自備(bei)的(de)設備及試劑(ji)
1. 450±10nm濾(lv)光片的(de)酶標儀(yi)(建(jian)議儀(yi)器使用(yong)前提(ti)前(qian)預(yu)熱(re))
2. 單(dan)道或(huo)多道微(wei)量(liang)加液(ye)器及吸(xi)頭(tou)
3. 稀(xi)釋樣品的(de)EP管(guan)
4. 蒸(zheng)餾水(shui)或(huo)去離(li)子水
5. 吸(xi)水(shui)紙(zhi)
6. 盛放洗(xi)液(ye)的(de)容(rong)器
試(shi)劑(ji)盒的(de)儲(chu)存(cun)及有效(xiao)期(qi)
1. 未(wei)開封(feng)的(de)試(shi)劑(ji)盒:所有(you)試(shi)劑(ji)均按試(shi)劑(ji)瓶標(biao)簽上所示(shi)保(bao)存(cun)。請註意(yi),收到試(shi)劑(ji)盒後請盡快(kuai)將TMB 洗(xi)滌(di)液(ye),終止液(ye)保(bao)存(cun)於(yu)4℃,其(qi)他(ta)試(shi)劑(ji)保存(cun)於-20℃。
2. 使(shi)用後的(de)試(shi)劑(ji)盒:剩余試劑(ji)仍需(xu)按照試劑(ji)瓶標(biao)簽所示(shi)的(de)溫度保存,開封(feng)後(hou)的(de)酶標板(ban)要(yao)加幹燥劑(ji)後密(mi)封(feng)保(bao)存(cun)於(yu)-20℃,避免潮(chao)濕。
註(zhu)意:
試(shi)劑(ji)盒內酶標條(tiao)可拆(chai)卸,按實驗(yan)需(xu)求(qiu)可分多次使(shi)用;使(shi)用(yong)後的(de)剩(sheng)余(yu)試(shi)劑(ji)盒建(jian)議在(zai)**實驗(yan)後 1個(ge)月(yue)內使(shi)用完畢(bi)。產品過期(qi)時(shi)間以盒子上的(de)標(biao)簽(qian)為準,保(bao)質期(qi)內所有(you)組分都(dou)確(que)保(bao)是穩定的(de)。
小(xiao)鼠Ⅰ型(xing)膠(jiao)原α1(COL1α1)ELISA試(shi)劑(ji)盒標本(ben)的(de)采(cai)集與保存(cun)
1. 血(xue)清(qing):
將(jiang)收集於血(xue)清(qing)分離管(guan)的(de)全血(xue)標(biao)本(ben)在(zai)室(shi)溫放置(zhi) 2 小(xiao)時(shi)或(huo) 4oC 過夜(ye),然後 1000×g 離心(xin) 20 分鐘,取(qu)上清(qing)即可,或(huo)將上清(qing)置於-20oC 或(huo)-80oC 保存(cun),但應(ying)避免反復凍(dong)融。
2. 血(xue)漿(jiang):
用(yong) EDTA 或(huo)肝素(su)作為抗凝(ning)劑(ji)采集標本(ben),並將(jiang)標(biao)本(ben)在(zai)采(cai)集後的(de) 30 分(fen)鐘(zhong)內於(yu) 2-8oC 1000×g 離心(xin) 15 分鐘,取(qu)上清(qing)即可檢(jian)測,或(huo)將上清(qing)置於-20oC 或(huo)-80oC 保存(cun),但應(ying)避免反復凍(dong)融。
3. 組織(zhi)勻漿(jiang):
1) 取(qu)適量(liang)組織(zhi)塊,於預(yu)冷PBS(0.01mol/L, pH 7.0-7.2)中(zhong)清(qing)洗(xi)去(qu)除(chu)血(xue)液(ye),稱(cheng)重後(hou)備用(yong)(組織(zhi)塊較大(da)需(xu)先剪碎後(hou)再勻漿(jiang));
2) 可(ke)同時(shi)選用多種勻漿(jiang)方(fang)法達(da)到(dao)較(jiao)好(hao)的(de)破(po)碎(sui)效(xiao)果(guo):首先將組織(zhi)塊移入(ru)玻(bo)璃(li)勻漿(jiang)器,加入5-10mL 預冷PBS 進(jin)行充(chong)分(fen)研(yan)磨,該(gai)過(guo)程(cheng)需(xu)在(zai)冰(bing)上進行(有條(tiao)件實驗(yan)室(shi)可選用機(ji)器勻漿(jiang));得(de)到(dao)的(de)勻漿(jiang)液(ye)可(ke)再利用(yong)超(chao)聲破碎(sui)或(huo)反復凍(dong)融 進壹(yi)步處(chu)理(超聲破碎(sui)過(guo)程(cheng)中(zhong)註(zhu)意冰(bing)浴降(jiang)溫;反復凍(dong)融法可(ke)重(zhong)復2 次(ci))。
3) 將(jiang)制(zhi)備(bei)好(hao)的(de)勻漿(jiang)液(ye)於(yu)5000×g 離(li)心(xin)5 分鐘,留取(qu)上清(qing)即可檢(jian)測。
4. 細胞(bao)裂解液(ye):
1)貼壁細胞(bao)需(xu)要先用胰酶消化,離(li)心(xin)收集細胞(bao)(懸浮細胞(bao)可直(zhi)接離心(xin)收集);
2)將(jiang)收集到的(de)細胞(bao)用冷(leng)PBS 洗(xi)3 次(ci);
3)物理方(fang)法裂解細胞(bao)(可先超聲破(po)碎細胞(bao),再反復凍(dong)融):
i 超(chao)聲破碎:取適(shi)量(liang)PBS 重懸細胞(bao),用壹(yi)定(ding)功(gong)率的(de)超(chao)聲(sheng)波處理細胞(bao)懸液(ye),使(shi)細胞(bao)急劇(ju)震(zhen)蕩破(po)裂。
ii 反復凍(dong)融:將待破碎(sui)的(de)細胞(bao)在(zai)-20 oC 以下冰(bing)凍,室(shi)溫融解,反復3 次(ci),使(shi)細胞(bao)溶脹破碎。
4)將(jiang)標本(ben)於2-8 oC 1500×g 離(li)心(xin)10 分鐘,收集上清(qing)備用。
5. 細胞(bao)培(pei)養上清(qing)或(huo)其(qi)它(ta)生物標本(ben):
請 1000×g 離心(xin) 20 分鐘,取(qu)上清(qing)即可檢(jian)測,或(huo)將上清(qing)置於-20oC 或(huo)-80oC 保存(cun),但應(ying)避免反復凍(dong)融。
註(zhu)意:
1. 以上標本(ben)均需(xu)密封(feng)保(bao)存(cun),4oC保(bao)存應(ying)小(xiao)於1周,-20oC不應(ying)超(chao)過1個(ge)月(yue),-80oC不應(ying)超(chao)過2個(ge)月(yue)。
2. 標(biao)本(ben)使用(yong)前(qian)應(ying)緩(huan)慢均衡(heng)至(zhi)室(shi)溫,不應(ying)加熱使之融解。
3. 實驗(yan)前紅(hong)細胞(bao)裂解液(ye)必(bi)須(xu)用(yong)標(biao)準品稀釋(shi)液(ye)稀(xi)釋(shi)。
小(xiao)鼠Ⅰ型(xing)膠(jiao)原α1(COL1α1)ELISA試(shi)劑(ji)盒試劑(ji)準備(bei)
1. 使(shi)用前將所有(you)的(de)試(shi)劑(ji)和標(biao)本(ben)緩慢(man)均衡(heng)至(zhi)室(shi)溫(18-25oC),試(shi)劑(ji)不能直(zhi)接在(zai)37oC溶(rong)解。
2. 標(biao)準品(凍(dong)幹品):每(mei)瓶(ping)標準品加入標準品稀釋(shi)液(ye)1mL,蓋(gai)好(hao)後(hou)室(shi)溫靜(jing)置大(da)約10分(fen)鐘(zhong),同時(shi)反復顛(dian)倒/搓(cuo)動以助(zhu)溶解(jie),其(qi)濃(nong)度為20ng/mL。準備(bei)7個稀(xi)釋標準品的(de)EP管(guan),每(mei)個(ge)EP管(guan)中(zhong)加入150μL的(de)標(biao)準品稀釋(shi)液(ye),如(ru)圖(tu)所示(shi)依(yi)次(ci)倍(bei)比(bi)稀(xi)釋成不同的(de)梯(ti)度, 標準品稀釋(shi)液(ye)(0pg/mL)直(zhi)接作為空(kong)白(bai)孔(kong)。為保證(zheng)實驗(yan)結(jie)果有效(xiao)性,每(mei)次(ci)實驗(yan)請使用(yong)新(xin)的(de)標(biao)準品溶液(ye)。
3. 濃(nong)洗(xi)滌(di)液(ye):用(yong)580mL蒸(zheng)餾水(shui)或(huo)去離(li)子水將(jiang)20mL濃(nong)洗(xi)滌(di)液(ye)稀(xi)釋(shi)至(zhi)600mL,進(jin)行30倍(bei)稀(xi)釋(shi)。
標(biao)本(ben)處理
1. 本(ben)公司(si)只(zhi)對(dui)試(shi)劑(ji)盒本(ben)身負(fu)責,不對因使用(yong)該(gai)試(shi)劑(ji)盒所造成的(de)樣(yang)本(ben)消耗(hao)負責,請使用(yong)者(zhe)使用前(qian)充(chong)分(fen)考慮到樣(yang)本(ben)的(de)可(ke)能(neng)使(shi)用(yong)量(liang),預留充(chong)足的(de)樣(yang)本(ben)。
2. 實驗(yan)前應(ying)預(yu)測標(biao)本(ben)含量(liang),如(ru)果(guo)標(biao)本(ben)濃(nong)度過高,應(ying)對(dui)標本(ben)進行稀釋(shi),使(shi)稀釋(shi)後(hou)的(de)標(biao)本(ben)符(fu)合(he)試劑(ji)盒的(de)檢(jian)測範(fan)圍(wei),計(ji)算(suan)時再乘以相應(ying)的(de)稀(xi)釋(shi)倍(bei)數(shu)。
3. 若(ruo)所檢(jian)樣(yang)本(ben)不包含在(zai)說(shuo)明書所列(lie)樣(yang)本(ben)之中(zhong),建(jian)議進行預實驗(yan)驗(yan)證其(qi)有(you)效性,並註意留存(cun)樣(yang)本(ben)。
4. 使(shi)用化學(xue)裂解液(ye)制(zhi)備(bei)的(de)組織(zhi)勻漿(jiang)或(huo)細胞(bao)提(ti)取(qu)液(ye)可(ke)能(neng)會(hui)由於某(mou)些(xie)化學(xue)物質的(de)引入導致(zhi) ELISA實驗(yan)結(jie)果偏差(cha)。
5. 若(ruo)樣本(ben)為細胞(bao)培(pei)養上清(qing),因該(gai)類(lei)樣本(ben)幹擾(rao)因(yin)素(su) 較多,如(ru):細胞(bao)狀態、細胞(bao)數量(liang)、采樣(yang)時(shi)間等,所以可能(neng)存在(zai)檢(jian)測不出的(de)情況。
6. 某(mou)些(xie)天(tian)然蛋白(bai)或(huo)重組蛋白(bai),包(bao)括原核(he)及真(zhen)核(he)重(zhong)組蛋白(bai),可(ke)能因為與本(ben)產品所使(shi)用(yong)的(de)檢(jian)測抗(kang)體(ti)及捕(bu)獲抗(kang)體(ti)不匹配,而(er)不被檢測出(chu)。
7. 建(jian)議使用(yong)新(xin)鮮樣(yang)本(ben),保存(cun)時(shi)間過長可能(neng)會存(cun)在(zai)蛋(dan)白(bai)降(jiang)解或(huo)變性導致(zhi)實驗(yan)結(jie)果偏差(cha)。
小(xiao)鼠Ⅰ型(xing)膠(jiao)原α1(COL1α1)ELISA試(shi)劑(ji)盒操作步驟
1. 加樣:分別(bie)設空(kong)白(bai)孔(kong)(空(kong)白(bai)對(dui)照孔不加樣品及酶標試(shi)劑(ji),其(qi)余(yu)各步操(cao)作(zuo)相(xiang)同)、標(biao)準孔(kong)、待測樣(yang)品孔。在(zai)酶標包(bao)被(bei)板上標準品準確(que)加樣50μl,待測樣(yang)品孔中(zhong)先加樣品稀釋(shi)液(ye)40μl,然後再加待測樣(yang)品10μl(樣品*終稀釋(shi)度為5倍(bei))。加樣將樣品加於酶標板(ban)孔(kong)底部(bu),盡量(liang)不觸及孔壁(bi),輕輕晃動混勻。
2. 溫育(yu):用(yong)封(feng)板(ban)膜(mo)封(feng)板(ban)後(hou)置(zhi)37℃溫育(yu)30分(fen)鐘。
3. 配(pei)液(ye):將(jiang)20倍(bei)濃(nong)縮(suo)洗(xi)滌(di)液(ye)用(yong)蒸(zheng)餾水(shui)20倍(bei)稀(xi)釋(shi)後(hou)備用
4. 洗(xi)滌(di):小(xiao)心(xin)揭掉(diao)封(feng)板(ban)膜(mo),棄(qi)去(qu)液(ye)體(ti),甩幹,每(mei)孔(kong)加滿洗(xi)滌(di)液(ye),靜(jing)置30秒後(hou)棄去,如(ru)此(ci)重(zhong)復5次(ci),拍幹(gan)。
5. 加酶:每(mei)孔(kong)加入酶標試(shi)劑(ji)50μl,空(kong)白(bai)孔(kong)除(chu)外(wai)。
6. 溫育(yu):操(cao)作同3。
7. 洗(xi)滌(di):操(cao)作(zuo)同5。
8. 顯(xian)色:每(mei)孔(kong)先加入顯(xian)色劑(ji)A50μl,再加入顯(xian)色劑(ji)B50μl,輕輕震(zhen)蕩混(hun)勻,37℃避光(guang)顯(xian)色15分(fen)鐘.
9. 終止:每(mei)孔(kong)加終止液(ye)50μl,終止反應(ying)(此(ci)時藍(lan)色(se)立(li)轉黃(huang)色)。
10. 測定(ding):以空(kong)白(bai)空(kong)調零(ling),450nm波長依(yi)序(xu)測量(liang)各孔的(de)吸(xi)光(guang)度(OD值(zhi))。 測定(ding)應(ying)在(zai)加終止液(ye)後(hou)15分(fen)鐘(zhong)以內進(jin)行。
註(zhu)意:
1. 試(shi)劑(ji)準備(bei):準備(bei)壹次(ci)實驗(yan)所需(xu)要的(de)酶標條(tiao),其(qi)它(ta)的(de)可(ke)從(cong)微(wei)孔(kong)板上拆(chai)下,密(mi)封(feng),按(an)照說明書要(yao)求(qiu)保存,以備下(xia)次使(shi)用(yong)。
2. 加樣:實驗(yan)操作(zuo)中(zhong)請使用(yong)壹次(ci)性的(de)吸(xi)頭(tou),避免交(jiao)叉汙(wu)染。加樣時註意(yi)不要有氣(qi)泡,將樣(yang)品加於酶標板(ban)底部(bu),盡量(liang)不觸及孔壁(bi),輕輕晃動混勻。加樣或(huo)加試劑(ji)時,**個(ge)孔與*後壹(yi)個孔(kong)加樣之間的(de)時(shi)間間隔如(ru)果(guo)太(tai)大(da),將會(hui)導致(zhi)不同的(de)“預(yu)溫育(yu)”時(shi)間,從而(er)明顯(xian)地影(ying)響到(dao)測量(liang)值(zhi)的(de)準確(que)性及重復性。因此,壹次(ci)加樣時間(包括標準品及所有(you)樣(yang)品)*好控制(zhi)在(zai)10分(fen)鐘內。推(tui)薦設置復孔(kong)進(jin)行實驗(yan)。
3. 溫育(yu):為防(fang)止樣(yang)品蒸發(fa),實驗(yan)時請將加上蓋或(huo)覆膜(mo)的(de)酶標板(ban)置(zhi)於濕盒內,以避免液(ye)體(ti)蒸(zheng)發(fa),洗(xi)板(ban)後(hou)應(ying)盡(jin)快進(jin)行下步(bu)操(cao)作,任(ren)何時(shi)侯都(dou)應(ying)避免酶標板(ban)處(chu)於幹燥(zao)狀態,同時(shi)應(ying)嚴(yan)格(ge)遵(zun)守(shou)給(gei)定(ding)的(de)溫育(yu)時(shi)間和溫度。
4. 洗(xi)滌(di):充(chong)分(fen)的(de)洗(xi)滌(di)非(fei)常(chang)重要,在(zai)每(mei)次(ci)洗(xi)滌(di)過(guo)程(cheng)中(zhong),都(dou)要(yao)將(jiang)洗(xi)滌(di)液(ye)完全甩幹。洗(xi)滌(di)過(guo)程(cheng)中(zhong)反應(ying)孔(kong)中(zhong)殘(can)留的(de)洗(xi)滌(di)液(ye)應(ying)在(zai)濾(lv)紙(zhi)上拍幹(gan),勿(wu)將濾(lv)紙(zhi)直(zhi)接放入(ru)反應(ying)孔(kong)中(zhong)吸(xi)水(shui),同時(shi)要(yao)消除(chu)板(ban)底殘(can)留的(de)液(ye)體(ti)和(he)手(shou)指(zhi)印(yin),避免影(ying)響*後(hou)的(de)酶標儀(yi)讀(du)數。如(ru)果(guo)有(you)自(zi)動洗(xi)板(ban)機(ji),應(ying)在(zai)熟(shu)練使用(yong)後(hou)再用到(dao)正(zheng)式實 驗(yan)過程(cheng)中(zhong)。
5. 反應(ying)時(shi)間的(de)控制(zhi):加入底物後請定時(shi)觀(guan)察反應(ying)孔(kong)的(de)顏(yan)色(se)變(bian)化(比(bi)如(ru),每(mei)隔10分鐘觀(guan)察壹次(ci)),如(ru)顏(yan)色(se)較(jiao)深(shen),請提(ti)前(qian)加入終止液(ye)終止反應(ying),避免反應(ying)過(guo)強從(cong)而(er)影(ying)響酶標儀(yi)光密(mi)度讀(du)數。
6. 底物:底物請避光(guang)保存,在(zai)儲(chu)存(cun)和溫育(yu)時(shi)避免強光(guang)直(zhi)接照射。
7. 如(ru)果(guo)實驗(yan)室(shi)內濕度低於60%,推薦使用加濕器提(ti)高(gao)濕度水平。
實驗(yan)流程
1. 實驗(yan)前標(biao)準品、試劑(ji)及樣本(ben)的(de)準備(bei);
2. 加樣(標準品及樣本(ben))50μL,37℃孵育(yu)30分(fen)鐘;
3. 洗(xi)板(ban)5次(ci),加酶標試(shi)劑(ji)50ul,37℃孵育(yu)半小時;
4. 洗(xi)板(ban)5次(ci);加入顯(xian)色液(ye)A,B各50ul,37℃孵育(yu)顯(xian)色15分(fen)鐘
5. 加終止液(ye)50μL,立(li)即450nm讀(du)數。
6. 計(ji)算(suan)
小(xiao)鼠Ⅰ型(xing)膠(jiao)原α1(COL1α1)ELISA試(shi)劑(ji)盒計(ji)算(suan)
各標準品及樣本(ben)O.D.值(zhi)扣(kou)除(chu)空(kong)白(bai)孔(kong)O.D.值(zhi)後(hou)作圖(tu)(七(qi)點(dian)圖),如(ru)設置復孔(kong),則應(ying)取(qu)其(qi)平均值(zhi)計(ji)算(suan)。以標準品的(de)濃(nong)度為縱坐標(或(huo)對數(shu)坐標),O.D.值(zhi)為橫坐標(或(huo)對數(shu)坐標),繪(hui)出(chu)標(biao)準曲(qu)線(xian)(*佳(jia)方(fang)程(cheng)式應(ying)依(yi)回(hui)歸(gui)方(fang)程(cheng)計(ji)算(suan)的(de)R2值(zhi)來定(ding),以R2值(zhi)越趨近(jin)於1為好)。推(tui)薦使用專業(ye)制(zhi)作(zuo)曲(qu)線(xian)軟(ruan)件(jian)進(jin)行分析(xi),如(ru)curve expert 1.30,根(gen)據(ju)樣品O.D.值(zhi),由(you)標準曲(qu)線(xian)查(zha)出相應(ying)的(de)濃(nong)度,乘以稀釋(shi)倍(bei)數(shu);或(huo)用標(biao)準物的(de)濃(nong)度與O.D.值(zhi)計(ji)算(suan)出標(biao)準曲(qu)線(xian)的(de)回(hui)歸(gui)方(fang)程(cheng)式,將樣品的(de)O.D.值(zhi)代入方(fang)程(cheng)式,計(ji)算(suan)出樣(yang)品濃(nong)度,再乘以稀釋(shi)倍(bei)數(shu),即(ji)為樣品的(de)實際濃(nong)度。
特(te)異性
本(ben)試劑(ji)盒用於檢測小(xiao)鼠Ⅰ型(xing)膠(jiao)原α1(COL1α1),經(jing)檢測與其(qi)它(ta)相似物質無(wu)明顯(xian)交(jiao)叉反應(ying)。
由(you)於受(shou)到(dao)技術及樣本(ben)來源(yuan)的(de)限(xian)制(zhi),不可能完成對所有(you)相(xiang)關(guan)或(huo)相似物質交(jiao)叉反應(ying)檢(jian)測,因(yin)此本(ben)試劑(ji)盒有可能與未經(jing)檢測的(de)其(qi)它(ta)物質有交(jiao)叉反應(ying)。
精密度
精密度用樣品測定(ding)值(zhi)的(de)變(bian)異(yi)系(xi)數(shu)CV表示。CV(%) = SD/mean×100
批(pi)內差(cha):取(qu)同批(pi)次(ci)試劑(ji)盒對低、中(zhong)、高(gao)值(zhi)定(ding)值(zhi)樣(yang)本(ben)進行定量(liang)檢測,每(mei)份樣本(ben)連續測定(ding)20 次,分(fen)別(bie)計(ji)算(suan)不同濃(nong)度樣本(ben)的(de)平均值(zhi)及SD值(zhi)。
批(pi)間差(cha):選取3個不同批(pi)次(ci)的(de)試(shi)劑(ji)盒分別(bie)對低(di)、中(zhong)、高(gao)值(zhi)定(ding)值(zhi)樣(yang)本(ben)進行定量(liang)測定(ding),每(mei)個(ge)樣本(ben)使用(yong)同壹(yi)試(shi)劑(ji)盒重復測定(ding)8次,分(fen)別(bie)計(ji)算(suan)不同濃(nong)度樣本(ben)的(de)平均值(zhi)及SD值(zhi)。
批(pi)內差(cha): CV<10%
批(pi)間差(cha): CV<12%
小(xiao)鼠Ⅰ型(xing)膠(jiao)原α1(COL1α1)ELISA試(shi)劑(ji)盒穩定性
經(jing)測定(ding),試劑(ji)盒在(zai)有(you)效期(qi)內按(an)推薦溫度保存,其(qi)活性降(jiang)低率小於5%。
為減小(xiao)外(wai)部(bu)因素對試(shi)劑(ji)盒破壞前後(hou)檢測值(zhi)的(de)影(ying)響,實驗(yan)室(shi)的(de)環(huan)境條(tiao)件需(xu)盡量(liang)保持(chi)壹致(zhi),尤(you)其(qi)是(shi)實驗(yan)室(shi)內溫度、濕度及溫育(yu)條(tiao)件。其(qi)次(ci)由同壹(yi)實驗(yan)員(yuan)來進(jin)行操作(zuo)可(ke)減少人(ren)為誤(wu)差(cha)。



