產(chan)品(pin)名稱(cheng)：小(xiao)鼠Ⅰ型膠(jiao)原(yuan)交(jiao)聯氨基(ji)端肽(tai)(NTXⅠ)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)

                                                       96T       僅(jin)供(gong)體外(wai)研究(jiu)使用(yong)，不用(yong)於(yu)臨(lin)床診(zhen)斷!

小(xiao)鼠Ⅰ型膠(jiao)原(yuan)交(jiao)聯氨基(ji)端肽(tai)(NTXⅠ)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)

本(ben)試劑(ji)盒(he)運(yun)用(yong)雙(shuang)抗體夾(jia)心ELISA法(fa)定量(liang)測定小(xiao)鼠血清、血漿、組(zu)織(zhi)勻(yun)漿、細(xi)胞(bao)裂(lie)解液、細(xi)胞(bao)培(pei)養上清液和(he)其(qi)他(ta)生物(wu)液體中(zhong)小(xiao)鼠Ⅰ型膠(jiao)原(yuan)交(jiao)聯氨基(ji)端肽(tai)(NTXⅠ)含量(liang)。

 檢(jian)測範(fan)圍

2.47-200ng/mL

 *低(di)檢測(ce)限

0.96ng/mL

 實(shi)驗原(yuan)理

將(jiang)小(xiao)鼠Ⅰ型膠(jiao)原(yuan)交(jiao)聯氨基(ji)端肽(tai)(NTXⅠ)抗(kang)體包(bao)被(bei)於96孔微孔板中(zhong)，制(zhi)成固(gu)相載(zai)體，向(xiang)微孔中分(fen)別(bie)加入(ru)標準(zhun)品或(huo)標本，其(qi)中的(de)小(xiao)鼠Ⅰ型膠(jiao)原(yuan)交(jiao)聯氨基(ji)端肽(tai)(NTXⅠ)與連接於(yu)固(gu)相載(zai)體上(shang)的抗(kang)體結(jie)合，然(ran)後加入(ru)生物(wu)素化的(de)小(xiao)鼠Ⅰ型膠(jiao)原(yuan)交(jiao)聯氨基(ji)端肽(tai)(NTXⅠ)抗(kang)體，將(jiang)未結(jie)合的(de)生物素化抗(kang)體洗(xi)凈後，加入(ru)HRP標記的(de)親和素，再(zai)次(ci)徹(che)底洗(xi)滌(di)後加入(ru)TMB底物(wu)顯(xian)色。TMB在(zai)過(guo)氧化物(wu)酶的催化下(xia)轉(zhuan)化成(cheng)藍(lan)色，並(bing)在(zai)酸的作(zuo)用(yong)下(xia)轉(zhuan)化成(cheng)*終(zhong)的(de)黃色。顏(yan)色的(de)深(shen)淺和(he)樣品中(zhong)的(de)小(xiao)鼠Ⅰ型膠(jiao)原(yuan)交(jiao)聯氨基(ji)端肽(tai)(NTXⅠ)呈(cheng)正(zheng)相關。用(yong)酶(mei)標儀在(zai)450nm波(bo)長下測定吸(xi)光(guang)度(du)(O.D.值)，計(ji)算樣品濃(nong)度(du)。

 試(shi)劑盒(he)內容

小(xiao)鼠Ⅰ型膠(jiao)原(yuan)交(jiao)聯氨基(ji)端肽(tai)(NTXⅠ)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)需(xu)自(zi)備(bei)的(de)設備(bei)及(ji)試(shi)劑(ji)

1.         450±10nm濾(lv)光片的(de)酶(mei)標儀(建(jian)議(yi)儀(yi)器(qi)使用(yong)前(qian)提(ti)前(qian)預(yu)熱)

2.         單(dan)道或(huo)多道(dao)微量(liang)加液(ye)器(qi)及(ji)吸(xi)頭(tou)

3.         稀釋(shi)樣品的(de)EP管

4.         蒸(zheng)餾水(shui)或(huo)去(qu)離(li)子(zi)水(shui)

5.         吸(xi)水(shui)紙(zhi)

6.         盛(sheng)放洗(xi)液(ye)的(de)容器(qi)

 試(shi)劑盒(he)的儲存(cun)及(ji)有(you)效(xiao)期

1.         未開(kai)封的試(shi)劑(ji)盒(he)：所有試劑均(jun)按試劑(ji)瓶(ping)標簽上(shang)所示保(bao)存(cun)。請(qing)註(zhu)意，收到(dao)試劑(ji)盒(he)後請(qing)盡快(kuai)將TMB 洗(xi)滌(di)液(ye)，終(zhong)止(zhi)液保(bao)存(cun)於4℃，其他試(shi)劑(ji)保(bao)存(cun)於-20℃。

2.         使(shi)用(yong)後的試(shi)劑(ji)盒(he)：剩余試(shi)劑仍(reng)需(xu)按照(zhao)試(shi)劑瓶(ping)標簽所示的(de)溫(wen)度(du)保(bao)存(cun)，開(kai)封後的酶(mei)標板要(yao)加幹(gan)燥(zao)劑後密封保(bao)存(cun)於-20℃，避(bi)免潮(chao)濕(shi)。

註(zhu)意：

試(shi)劑盒(he)內酶(mei)標條可拆(chai)卸，按實驗(yan)需(xu)求(qiu)可分(fen)多(duo)次(ci)使用(yong)；使(shi)用(yong)後的剩余試(shi)劑盒(he)建議(yi)在(zai)**實驗後 1個月內使(shi)用(yong)完(wan)畢。產(chan)品(pin)過(guo)期時間以盒(he)子上(shang)的(de)標簽為(wei)準(zhun)，保(bao)質(zhi)期內所有組分都確(que)保(bao)是(shi)穩定的。

小(xiao)鼠Ⅰ型膠(jiao)原(yuan)交(jiao)聯氨基(ji)端肽(tai)(NTXⅠ)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)標本的(de)采集(ji)與保(bao)存(cun)

1.         血清：

將(jiang)收集(ji)於(yu)血清分(fen)離管的(de)全(quan)血標本在(zai)室溫(wen)放置 2 小(xiao)時或(huo) 4^oC 過(guo)夜(ye)，然(ran)後 1000×g 離心 20 分(fen)鐘(zhong)，取(qu)上清即(ji)可，或(huo)將(jiang)上清置於-20^oC 或-80^oC 保(bao)存(cun)，但應避(bi)免反(fan)復(fu)凍融。

2.         血漿：

用(yong) EDTA 或(huo)肝素(su)作(zuo)為(wei)抗凝劑(ji)采(cai)集(ji)標本，並(bing)將標本在(zai)采集(ji)後的 30 分(fen)鐘(zhong)內於(yu) 2-8^oC 1000×g 離心 15 分(fen)鐘(zhong)，取(qu)上清即(ji)可檢(jian)測(ce)，或將上清置於-20^oC 或-80^oC 保(bao)存(cun)，但應避(bi)免反(fan)復(fu)凍融。

3. 組(zu)織(zhi)勻(yun)漿：

1） 取(qu)適量(liang)組織(zhi)塊，於預(yu)冷PBS（0.01mol/L, pH 7.0-7.2）中(zhong)清洗(xi)去(qu)除(chu)血液，稱(cheng)重後備用(yong)（組(zu)織(zhi)塊較(jiao)大需(xu)先剪碎後再(zai)勻(yun)漿）；

2） 可同(tong)時(shi)選用(yong)多(duo)種(zhong)勻(yun)漿方法達到(dao)較(jiao)好的(de)破(po)碎(sui)效果(guo)：首(shou)先將組織(zhi)塊移入(ru)玻璃(li)勻(yun)漿器(qi)，加入(ru)5-10mL 預(yu)冷PBS 進(jin)行充(chong)分研(yan)磨(mo)，該(gai)過(guo)程(cheng)需(xu)在(zai)冰上進行（有條(tiao)件實驗(yan)室(shi)可選用(yong)機(ji)器(qi)勻(yun)漿）；得到(dao)的勻(yun)漿液(ye)可再(zai)利用(yong)超聲破(po)碎(sui)或反復(fu)凍融 進壹(yi)步處理（超聲破(po)碎(sui)過(guo)程(cheng)中(zhong)註(zhu)意冰浴(yu)降溫(wen)；反(fan)復(fu)凍融法可重(zhong)復(fu)2 次(ci)）。

3） 將(jiang)制備(bei)好的(de)勻(yun)漿液(ye)於(yu)5000×g 離(li)心5 分(fen)鐘(zhong)，留(liu)取(qu)上(shang)清(qing)即(ji)可檢(jian)測(ce)。

4. 細(xi)胞裂(lie)解液：

1）貼壁細胞(bao)需(xu)要(yao)先用(yong)胰酶(mei)消(xiao)化，離(li)心收(shou)集(ji)細(xi)胞（懸(xuan)浮(fu)細(xi)胞(bao)可直(zhi)接離(li)心收(shou)集(ji)）；

2）將(jiang)收集(ji)到(dao)的細(xi)胞用(yong)冷(leng)PBS 洗(xi)3 次(ci)；

3）物(wu)理方法裂(lie)解細胞(bao)（可先超聲破(po)碎(sui)細胞，再(zai)反(fan)復(fu)凍融）：

i 超聲破(po)碎(sui)：取適量(liang)PBS 重懸(xuan)細(xi)胞，用(yong)壹(yi)定功率(lv)的(de)超聲波(bo)處理細(xi)胞懸(xuan)液(ye)，使細(xi)胞急(ji)劇震(zhen)蕩(dang)破(po)裂(lie)。

ii 反(fan)復(fu)凍融：將待(dai)破(po)碎(sui)的細胞在(zai)-20 ^oC 以(yi)下冰(bing)凍，室溫(wen)融(rong)解，反復(fu)3 次(ci)，使細胞(bao)溶脹破(po)碎(sui)。

4）將(jiang)標本於(yu)2-8 ^oC 1500×g 離(li)心10 分(fen)鐘(zhong)，收(shou)集(ji)上(shang)清備用(yong)。

5. 細(xi)胞培(pei)養上清或其(qi)它(ta)生(sheng)物標本：

請(qing) 1000×g 離心 20 分(fen)鐘(zhong)，取(qu)上清即(ji)可檢(jian)測(ce)，或將上清置於-20^oC 或-80^oC 保(bao)存(cun)，但應避(bi)免反(fan)復(fu)凍融。

註(zhu)意：

1.         以(yi)上標本均(jun)需(xu)密(mi)封保(bao)存(cun)，4^oC保(bao)存(cun)應小(xiao)於1周(zhou)，-20^oC不應超過(guo)1個月，-80^oC不應超過(guo)2個月。

2.         標本使(shi)用(yong)前(qian)應(ying)緩(huan)慢(man)均(jun)衡至(zhi)室溫(wen)，不應加熱(re)使(shi)之融(rong)解。

3.         實(shi)驗前(qian)紅(hong)細(xi)胞(bao)裂(lie)解液必(bi)須用(yong)標準(zhun)品稀釋(shi)液稀釋(shi)。

小(xiao)鼠Ⅰ型膠(jiao)原(yuan)交(jiao)聯氨基(ji)端肽(tai)(NTXⅠ)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)試劑(ji)準(zhun)備

1.         使(shi)用(yong)前(qian)將(jiang)所有的試劑和(he)標本緩(huan)慢均(jun)衡至(zhi)室溫(wen)(18-25oC)，試(shi)劑不能直(zhi)接在(zai)37oC溶解。

2.         標準(zhun)品(凍幹品)：每(mei)瓶(ping)標準(zhun)品加入(ru)標準(zhun)品稀釋(shi)液1mL，蓋(gai)好後室溫(wen)靜(jing)置大約(yue)10分鐘(zhong)，同時(shi)反復(fu)顛(dian)倒/搓動以(yi)助溶解，其濃(nong)度(du)為(wei)200ng/mL。準(zhun)備7個稀釋(shi)標準(zhun)品的(de)EP管，每(mei)個EP管中(zhong)加入(ru)150μL的標準(zhun)品稀釋(shi)液，如圖所示依(yi)次(ci)倍(bei)比(bi)稀釋(shi)成不同的(de)梯(ti)度(du)， 標準(zhun)品稀釋(shi)液(0pg/mL)直(zhi)接作(zuo)為(wei)空(kong)白(bai)孔。為保(bao)證實(shi)驗結(jie)果(guo)有(you)效(xiao)性(xing)，每次(ci)實驗請(qing)使用(yong)新(xin)的(de)標準(zhun)品溶液。

3.         濃(nong)洗(xi)滌(di)液(ye)：用(yong)580mL蒸(zheng)餾水(shui)或(huo)去(qu)離(li)子(zi)水(shui)將(jiang)20mL濃(nong)洗(xi)滌(di)液(ye)稀釋(shi)至(zhi)600mL，進(jin)行30倍(bei)稀釋(shi)。

標本處理

1.         本(ben)公(gong)司(si)只(zhi)對試(shi)劑(ji)盒(he)本身(shen)負(fu)責(ze)，不對因(yin)使用(yong)該(gai)試(shi)劑(ji)盒(he)所造(zao)成(cheng)的(de)樣本消(xiao)耗負(fu)責(ze)，請(qing)使用(yong)者使用(yong)前(qian)充(chong)分考(kao)慮到(dao)樣本的(de)可能(neng)使(shi)用(yong)量(liang)，預(yu)留(liu)充(chong)足的樣本。

2.         實(shi)驗前(qian)應預(yu)測標本含量(liang)，如果(guo)標本濃(nong)度(du)過(guo)高，應對標本進(jin)行稀釋(shi)，使稀釋(shi)後的標本符合(he)試(shi)劑盒(he)的檢(jian)測(ce)範(fan)圍，計算時再(zai)乘(cheng)以(yi)相應的稀釋(shi)倍(bei)數。

3.         若所檢樣本不包含在(zai)說(shuo)明書所列樣本之(zhi)中(zhong)，建議(yi)進(jin)行(xing)預(yu)實驗(yan)驗證其(qi)有效性(xing)，並註(zhu)意留(liu)存(cun)樣本。

4.         使(shi)用(yong)化學(xue)裂(lie)解液制(zhi)備(bei)的(de)組織(zhi)勻(yun)漿或(huo)細(xi)胞(bao)提(ti)取(qu)液(ye)可能(neng)會(hui)由(you)於(yu)某些化學(xue)物質(zhi)的引(yin)入(ru)導(dao)致(zhi)  ELISA實驗結(jie)果(guo)偏(pian)差(cha)。

5.         若樣本為(wei)細(xi)胞培養上清，因(yin)該類(lei)樣本幹(gan)擾(rao)因(yin)素 較(jiao)多，如：細胞狀(zhuang)態(tai)、細(xi)胞(bao)數量(liang)、采樣時間等(deng)，所以可能(neng)存(cun)在(zai)檢測不出(chu)的(de)情(qing)況(kuang)。

6.         某(mou)些天(tian)然(ran)蛋白(bai)或重(zhong)組蛋白，包(bao)括(kuo)原(yuan)核(he)及(ji)真(zhen)核(he)重(zhong)組(zu)蛋(dan)白，可能(neng)因(yin)為與本產(chan)品(pin)所使用(yong)的(de)檢(jian)測(ce)抗(kang)體及(ji)捕獲抗(kang)體不匹(pi)配，而(er)不被(bei)檢測(ce)出(chu)。

7.         建(jian)議(yi)使(shi)用(yong)新(xin)鮮(xian)樣本，保(bao)存(cun)時間過(guo)長可能(neng)會(hui)存在(zai)蛋白降解或變(bian)性(xing)導(dao)致(zhi)實驗結(jie)果(guo)偏(pian)差(cha)。

小(xiao)鼠Ⅰ型膠(jiao)原(yuan)交(jiao)聯氨基(ji)端肽(tai)(NTXⅠ)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)操作(zuo)步驟(zhou)

1.         加樣：分別(bie)設(she)空白孔（空白(bai)對照(zhao)孔不加樣品及(ji)酶(mei)標試劑(ji)，其余(yu)各(ge)步操(cao)作相同）、標準(zhun)孔、待(dai)測(ce)樣品孔。在(zai)酶標包被(bei)板上(shang)標準(zhun)品準(zhun)確(que)加樣50μl，待(dai)測(ce)樣品孔中先加樣品稀釋(shi)液40μl，然(ran)後再(zai)加待(dai)測(ce)樣品10μl（樣品*終(zhong)稀釋(shi)度(du)為(wei)5倍(bei)）。加樣將樣品加於(yu)酶(mei)標板孔底部，盡量(liang)不觸及(ji)孔壁，輕(qing)輕(qing)晃(huang)動混(hun)勻(yun)。

2.         溫(wen)育(yu)：用(yong)封板膜(mo)封板後置37℃溫(wen)育(yu)30分鐘(zhong)。  

3.         配(pei)液：將(jiang)20倍(bei)濃(nong)縮洗(xi)滌(di)液(ye)用(yong)蒸(zheng)餾水(shui)20倍(bei)稀釋(shi)後備用(yong)

4.         洗(xi)滌(di)：小(xiao)心揭掉封板膜(mo)，棄(qi)去(qu)液(ye)體，甩(shuai)幹，每(mei)孔加滿(man)洗(xi)滌(di)液(ye)，靜置30秒後棄(qi)去(qu)，如此重(zhong)復(fu)5次(ci)，拍(pai)幹。

5.         加酶(mei)：每(mei)孔加入(ru)酶標試劑(ji)50μl，空白(bai)孔除外(wai)。

6.         溫(wen)育(yu)：操作(zuo)同(tong)3。

7.         洗(xi)滌(di)：操(cao)作同5。

8.         顯(xian)色：每(mei)孔先加入(ru)顯(xian)色劑(ji)A50μl，再(zai)加入(ru)顯(xian)色劑(ji)B50μl，輕(qing)輕(qing)震(zhen)蕩(dang)混(hun)勻(yun)，37℃避(bi)光顯(xian)色15分(fen)鐘(zhong).

9.         終(zhong)止(zhi)：每孔加終(zhong)止(zhi)液50μl，終(zhong)止(zhi)反應(ying)（此時(shi)藍(lan)色立(li)轉(zhuan)黃色）。

10.     測(ce)定：以空白(bai)空(kong)調(tiao)零，450nm波(bo)長依(yi)序測量(liang)各孔的吸(xi)光(guang)度(du)（OD值）。 測(ce)定應在(zai)加終(zhong)止(zhi)液後15分鐘(zhong)以(yi)內進(jin)行。

註(zhu)意：

1.         試(shi)劑準(zhun)備：準(zhun)備壹(yi)次(ci)實驗所需(xu)要(yao)的(de)酶(mei)標條，其(qi)它的(de)可從微孔板上(shang)拆(chai)下，密(mi)封，按照(zhao)說(shuo)明書要(yao)求(qiu)保(bao)存(cun)，以備下次(ci)使用(yong)。

2.         加樣：實(shi)驗操(cao)作中(zhong)請(qing)使用(yong)壹(yi)次(ci)性(xing)的吸(xi)頭(tou)，避(bi)免交(jiao)叉汙(wu)染(ran)。加樣時註(zhu)意不要有(you)氣泡，將(jiang)樣品加於(yu)酶(mei)標板底(di)部，盡量(liang)不觸及(ji)孔壁，輕(qing)輕(qing)晃(huang)動混(hun)勻(yun)。加樣或加試(shi)劑(ji)時，**個孔與*後壹個孔加樣之間的時(shi)間間隔如果(guo)太大(da)，將會導(dao)致(zhi)不同的(de)“預(yu)溫(wen)育(yu)”時間，從而(er)明顯(xian)地影響到(dao)測量(liang)值的(de)準(zhun)確(que)性(xing)及(ji)重(zhong)復(fu)性(xing)。因(yin)此，壹(yi)次(ci)加樣時間(包括(kuo)標準(zhun)品及(ji)所有樣品)*好(hao)控(kong)制在(zai)10分鐘內。推(tui)薦設置復(fu)孔進行(xing)實(shi)驗。

3.          溫(wen)育(yu)：為(wei)防(fang)止(zhi)樣品蒸(zheng)發，實(shi)驗時(shi)請(qing)將加上(shang)蓋(gai)或覆膜(mo)的酶(mei)標板置於濕盒(he)內，以(yi)避(bi)免液(ye)體蒸(zheng)發，洗(xi)板後應盡快(kuai)進行下(xia)步操(cao)作，任何(he)時(shi)侯都應(ying)避(bi)免酶(mei)標板處於幹燥(zao)狀(zhuang)態(tai)，同(tong)時(shi)應嚴(yan)格遵守給定的溫(wen)育(yu)時間和溫(wen)度(du)。

4.         洗(xi)滌(di)：充(chong)分的(de)洗(xi)滌(di)非(fei)常重要，在(zai)每次(ci)洗(xi)滌(di)過(guo)程(cheng)中(zhong)，都要(yao)將(jiang)洗(xi)滌(di)液(ye)完(wan)全(quan)甩幹。洗(xi)滌(di)過(guo)程(cheng)中(zhong)反(fan)應孔中殘(can)留(liu)的(de)洗(xi)滌(di)液(ye)應在(zai)濾(lv)紙上(shang)拍(pai)幹，勿(wu)將(jiang)濾(lv)紙直(zhi)接放入(ru)反應(ying)孔中吸(xi)水(shui)，同(tong)時(shi)要消(xiao)除(chu)板底(di)殘(can)留(liu)的(de)液(ye)體和(he)手指印，避(bi)免影響*後的酶(mei)標儀讀(du)數。如果(guo)有(you)自(zi)動洗(xi)板機(ji)，應(ying)在(zai)熟練使用(yong)後再(zai)用(yong)到(dao)正(zheng)式(shi)實(shi) 驗(yan)過(guo)程(cheng)中(zhong)。

5.         反(fan)應時(shi)間的控(kong)制：加入(ru)底物(wu)後請(qing)定時觀察反應(ying)孔的顏(yan)色變(bian)化(比(bi)如，每隔10分鐘(zhong)觀察壹次(ci))，如顏色較(jiao)深(shen)，請(qing)提(ti)前(qian)加入(ru)終(zhong)止(zhi)液終(zhong)止(zhi)反應(ying)，避(bi)免反(fan)應(ying)過(guo)強(qiang)從而(er)影響酶(mei)標儀光(guang)密度(du)讀(du)數(shu)。

6.         底(di)物：底(di)物請(qing)避(bi)光保(bao)存(cun)，在(zai)儲存(cun)和(he)溫(wen)育(yu)時避(bi)免強(qiang)光(guang)直(zhi)接照(zhao)射(she)。

7.         如果(guo)實(shi)驗(yan)室(shi)內濕(shi)度(du)低(di)於(yu)60%，推(tui)薦使用(yong)加濕(shi)器(qi)提(ti)高濕度(du)水(shui)平(ping)。

 實(shi)驗流程(cheng)

1.         實(shi)驗前(qian)標準(zhun)品、試(shi)劑及(ji)樣本的(de)準(zhun)備；

2.         加樣（標準(zhun)品及(ji)樣本）50μL，37℃孵(fu)育(yu)30分鐘(zhong)；

3.         洗(xi)板5次(ci)，加酶(mei)標試劑(ji)50ul，37℃孵(fu)育(yu)半(ban)小(xiao)時；

4.         洗(xi)板5次(ci)；加入(ru)顯(xian)色液(ye)A，B各(ge)50ul,37℃孵(fu)育(yu)顯(xian)色15分(fen)鐘(zhong)

5.         加終(zhong)止(zhi)液50μL，立(li)即450nm讀(du)數。

6.    計(ji)算

小(xiao)鼠Ⅰ型膠(jiao)原(yuan)交(jiao)聯氨基(ji)端肽(tai)(NTXⅠ)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)計算

各(ge)標準(zhun)品及(ji)樣本O.D.值扣(kou)除(chu)空白(bai)孔O.D.值後作圖(tu)(七(qi)點圖(tu))，如設置復(fu)孔，則應(ying)取(qu)其平(ping)均(jun)值計(ji)算。以標準(zhun)品的(de)濃(nong)度(du)為(wei)縱坐(zuo)標(或對數(shu)坐(zuo)標)，O.D.值為(wei)橫坐(zuo)標(或對數(shu)坐(zuo)標），繪出(chu)標準(zhun)曲線(xian)(*佳(jia)方程(cheng)式(shi)應(ying)依(yi)回(hui)歸方程(cheng)計(ji)算的R2值來(lai)定，以R2值越趨近於1為好(hao))。推薦使用(yong)專(zhuan)業(ye)制(zhi)作曲(qu)線(xian)軟(ruan)件進行(xing)分(fen)析，如curve expert 1.30，根(gen)據樣品O.D.值，由(you)標準(zhun)曲線(xian)查(zha)出(chu)相應的濃(nong)度(du)，乘(cheng)以(yi)稀釋(shi)倍(bei)數；或(huo)用(yong)標準(zhun)物的(de)濃(nong)度(du)與O.D.值計(ji)算出(chu)標準(zhun)曲線(xian)的(de)回歸方程(cheng)式(shi)，將(jiang)樣品的(de)O.D.值代入(ru)方程(cheng)式(shi)，計(ji)算出(chu)樣品濃(nong)度(du)，再(zai)乘(cheng)以(yi)稀釋(shi)倍(bei)數，即(ji)為樣品的(de)實(shi)際濃(nong)度(du)。

 特(te)異性(xing)

本(ben)試劑(ji)盒(he)用(yong)於(yu)檢(jian)測(ce)小(xiao)鼠Ⅰ型膠(jiao)原(yuan)交(jiao)聯氨基(ji)端肽(tai)(NTXⅠ)，經(jing)檢(jian)測(ce)與其它(ta)相似(si)物(wu)質(zhi)無(wu)明顯(xian)交(jiao)叉反(fan)應。

由(you)於(yu)受到(dao)技術(shu)及(ji)樣本來(lai)源(yuan)的(de)限制，不可能(neng)完(wan)成對所有相關或相似(si)物(wu)質(zhi)交(jiao)叉反(fan)應檢測，因(yin)此本(ben)試(shi)劑(ji)盒(he)有可能(neng)與未經(jing)檢(jian)測(ce)的(de)其它物質有(you)交(jiao)叉反(fan)應。

 精(jing)密度(du)

精(jing)密度(du)用(yong)樣品測(ce)定值的(de)變(bian)異系數CV表(biao)示。CV(%) = SD/mean×100

批(pi)內差(cha)：取同(tong)批(pi)次(ci)試劑盒(he)對低(di)、中(zhong)、高值定值樣本進(jin)行(xing)定量(liang)檢測,每(mei)份樣本連(lian)續(xu)測定20 次(ci)，分別計(ji)算不同濃(nong)度(du)樣本的(de)平(ping)均(jun)值及(ji)SD值。

批(pi)間差：選取3個不同批(pi)次(ci)的試劑(ji)盒(he)分別(bie)對低(di)、中(zhong)、高值定值樣本進(jin)行(xing)定量(liang)測定，每個樣本使(shi)用(yong)同(tong)壹(yi)試(shi)劑(ji)盒(he)重復(fu)測定8次(ci)，分別計(ji)算不同濃(nong)度(du)樣本的(de)平(ping)均(jun)值及(ji)SD值。

批(pi)內差(cha)： CV<10%

批(pi)間差： CV<12%

小(xiao)鼠Ⅰ型膠(jiao)原(yuan)交(jiao)聯氨基(ji)端肽(tai)(NTXⅠ)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)穩定性(xing)

經(jing)測(ce)定，試劑盒(he)在(zai)有效期內按推薦溫(wen)度(du)保(bao)存(cun)，其活(huo)性(xing)降低率(lv)小(xiao)於5%。

為(wei)減小(xiao)外部因(yin)素對試(shi)劑(ji)盒(he)破(po)壞前(qian)後檢測(ce)值的(de)影響，實(shi)驗(yan)室的(de)環境條件需(xu)盡量(liang)保(bao)持(chi)壹致，尤其是(shi)實(shi)驗(yan)室(shi)內溫(wen)度(du)、濕(shi)度(du)及(ji)溫(wen)育(yu)條件。其次(ci)由(you)同(tong)壹實驗員(yuan)來(lai)進(jin)行操(cao)作可減(jian)少人為(wei)誤差。