產品(pin)名稱：小鼠(shu)Ⅰ型(xing)前膠原羧基端原肽(PⅠCP)ELISA試(shi)劑盒(he)

                                                       96T       僅(jin)供體外(wai)研究使用，不用於(yu)臨(lin)床(chuang)診斷!

小(xiao)鼠(shu)Ⅰ型(xing)前膠原羧基端原肽(PⅠCP)ELISA試(shi)劑盒(he)

本(ben)試劑盒(he)運(yun)用(yong)雙抗體夾(jia)心(xin)ELISA法(fa)定量(liang)測定(ding)小鼠(shu)血清(qing)、血漿(jiang)、組(zu)織勻(yun)漿(jiang)、細(xi)胞裂解(jie)液、細(xi)胞培(pei)養上清(qing)液和(he)其他(ta)生物液體中(zhong)小鼠(shu)Ⅰ型(xing)前膠原羧基端原肽(PⅠCP)含(han)量(liang)。

 檢(jian)測範(fan)圍(wei)

0.625-40ng/mL

 *低(di)檢測限(xian)

0.249ng/mL

 實(shi)驗原理

將(jiang)小(xiao)鼠(shu)Ⅰ型(xing)前膠原羧基端原肽(PⅠCP)抗(kang)體包(bao)被於96孔(kong)微(wei)孔(kong)板(ban)中(zhong)，制(zhi)成(cheng)固相(xiang)載(zai)體，向(xiang)微(wei)孔(kong)中(zhong)分別(bie)加入標準品(pin)或標本(ben)，其中(zhong)的小(xiao)鼠(shu)Ⅰ型(xing)前膠原羧基端原肽(PⅠCP)與(yu)連接(jie)於固相(xiang)載(zai)體上的抗體結(jie)合，然(ran)後加入生物素(su)化的(de)小(xiao)鼠(shu)Ⅰ型(xing)前膠原羧基端原肽(PⅠCP)抗(kang)體，將(jiang)未(wei)結合(he)的生物素(su)化抗(kang)體洗(xi)凈後，加入HRP標記(ji)的(de)親和(he)素(su)，再(zai)次(ci)徹(che)底洗滌(di)後加入TMB底物顯(xian)色(se)。TMB在過氧化物酶(mei)的催(cui)化(hua)下(xia)轉化(hua)成藍(lan)色(se)，並在酸(suan)的(de)作(zuo)用(yong)下(xia)轉化(hua)成*終(zhong)的黃色(se)。顏(yan)色(se)的深淺(qian)和(he)樣品(pin)中(zhong)的小(xiao)鼠(shu)Ⅰ型(xing)前膠原羧基端原肽(PⅠCP)呈正相(xiang)關(guan)。用酶(mei)標儀(yi)在450nm波長(chang)下(xia)測定(ding)吸光(guang)度(du)(O.D.值(zhi))，計(ji)算樣品(pin)濃(nong)度(du)。

 試(shi)劑盒(he)內容

小(xiao)鼠(shu)Ⅰ型(xing)前膠原羧基端原肽(PⅠCP)ELISA試(shi)劑盒(he)需(xu)自(zi)備的(de)設(she)備(bei)及(ji)試(shi)劑

1.         450±10nm濾(lv)光(guang)片(pian)的酶(mei)標儀(yi)(建(jian)議儀(yi)器使用前提(ti)前預(yu)熱)

2.         單道或多道微(wei)量(liang)加(jia)液器及(ji)吸(xi)頭(tou)

3.         稀(xi)釋(shi)樣品(pin)的EP管(guan)

4.         蒸餾(liu)水(shui)或(huo)去離子(zi)水(shui)

5.         吸(xi)水(shui)紙

6.         盛(sheng)放(fang)洗液的(de)容器

 試(shi)劑盒(he)的儲(chu)存(cun)及(ji)有效(xiao)期(qi)

1.         未(wei)開封(feng)的(de)試(shi)劑盒(he)：所(suo)有試劑均(jun)按(an)試劑瓶(ping)標簽(qian)上所(suo)示(shi)保(bao)存(cun)。請(qing)註(zhu)意(yi)，收(shou)到試(shi)劑盒(he)後請(qing)盡(jin)快(kuai)將(jiang)TMB 洗滌液，終(zhong)止液保(bao)存(cun)於4℃，其他(ta)試劑保(bao)存(cun)於-20℃。

2.         使用後的試劑盒(he)：剩余(yu)試劑仍(reng)需(xu)按(an)照試(shi)劑瓶(ping)標簽(qian)所(suo)示(shi)的(de)溫(wen)度(du)保(bao)存(cun)，開封(feng)後的酶(mei)標板(ban)要(yao)加幹(gan)燥劑後密封(feng)保(bao)存(cun)於-20℃，避(bi)免潮濕。

註(zhu)意(yi)：

試(shi)劑盒(he)內酶(mei)標條可拆(chai)卸(xie)，按(an)實驗(yan)需(xu)求可(ke)分多次(ci)使用；使用後的剩余(yu)試劑盒(he)建議(yi)在**實(shi)驗後 1個月(yue)內使用完(wan)畢。產品(pin)過期時間以盒(he)子(zi)上的標簽(qian)為(wei)準，保(bao)質(zhi)期(qi)內所(suo)有組(zu)分都(dou)確保是穩(wen)定的。

小(xiao)鼠(shu)Ⅰ型(xing)前膠原羧基端原肽(PⅠCP)ELISA試(shi)劑盒(he)標本(ben)的采集(ji)與(yu)保存(cun)

1.         血清(qing)：

將(jiang)收(shou)集於(yu)血清(qing)分(fen)離(li)管(guan)的全(quan)血標本(ben)在室(shi)溫放(fang)置 2 小(xiao)時(shi)或 4^oC 過夜，然(ran)後 1000×g 離心 20 分鐘，取(qu)上清(qing)即(ji)可(ke)，或(huo)將上清(qing)置於(yu)-20^oC 或(huo)-80^oC 保存(cun)，但(dan)應(ying)避免(mian)反復凍(dong)融(rong)。

2.         血漿(jiang)：

用(yong) EDTA 或肝素(su)作(zuo)為(wei)抗凝劑采集(ji)標本(ben)，並將標本(ben)在采集(ji)後的 30 分鐘內於 2-8^oC 1000×g 離(li)心 15 分(fen)鐘，取(qu)上清(qing)即(ji)可(ke)檢(jian)測，或(huo)將上清(qing)置於(yu)-20^oC 或(huo)-80^oC 保存(cun)，但(dan)應(ying)避免(mian)反復凍(dong)融(rong)。

3. 組(zu)織勻(yun)漿(jiang)：

1） 取(qu)適(shi)量(liang)組(zu)織塊(kuai)，於預(yu)冷(leng)PBS（0.01mol/L, pH 7.0-7.2）中(zhong)清(qing)洗(xi)去(qu)除(chu)血液，稱重(zhong)後備用（組(zu)織塊(kuai)較大(da)需(xu)先剪(jian)碎後再(zai)勻(yun)漿(jiang)）；

2） 可(ke)同(tong)時(shi)選用(yong)多(duo)種(zhong)勻(yun)漿(jiang)方(fang)法(fa)達(da)到(dao)較好(hao)的破(po)碎效(xiao)果(guo)：首先將(jiang)組(zu)織塊(kuai)移入玻璃勻(yun)漿(jiang)器，加(jia)入5-10mL 預(yu)冷(leng)PBS 進行(xing)充分(fen)研磨，該過程需(xu)在冰(bing)上進行（有條件(jian)實驗(yan)室(shi)可選(xuan)用機器勻(yun)漿(jiang)）；得(de)到(dao)的(de)勻(yun)漿(jiang)液可(ke)再(zai)利(li)用超(chao)聲破碎或反復凍(dong)融(rong) 進(jin)壹步(bu)處理（超聲破碎過程中(zhong)註(zhu)意(yi)冰(bing)浴(yu)降溫；反復凍(dong)融(rong)法(fa)可重(zhong)復2 次(ci)）。

3） 將(jiang)制(zhi)備(bei)好(hao)的勻(yun)漿(jiang)液於(yu)5000×g 離心5 分(fen)鐘，留(liu)取(qu)上清(qing)即(ji)可(ke)檢(jian)測。

4. 細(xi)胞裂解(jie)液：

1）貼(tie)壁(bi)細(xi)胞需(xu)要先(xian)用胰酶(mei)消化(hua)，離(li)心(xin)收(shou)集細(xi)胞（懸浮細(xi)胞可直(zhi)接(jie)離心(xin)收(shou)集）；

2）將(jiang)收(shou)集到(dao)的細(xi)胞用冷(leng)PBS 洗3 次(ci)；

3）物理(li)方(fang)法(fa)裂解(jie)細(xi)胞（可先(xian)超聲破碎細(xi)胞，再(zai)反復凍(dong)融(rong)）：

i 超(chao)聲破碎：取(qu)適(shi)量(liang)PBS 重(zhong)懸細(xi)胞，用壹(yi)定功率的(de)超聲波處理細(xi)胞懸液，使細(xi)胞急劇(ju)震(zhen)蕩破(po)裂。

ii 反復凍(dong)融(rong)：將(jiang)待破(po)碎的細(xi)胞在-20 ^oC 以(yi)下(xia)冰(bing)凍(dong)，室(shi)溫融(rong)解(jie)，反復3 次(ci)，使細(xi)胞溶脹(zhang)破碎。

4）將(jiang)標本(ben)於2-8 ^oC 1500×g 離(li)心10 分鐘，收(shou)集上清(qing)備(bei)用(yong)。

5. 細(xi)胞培(pei)養上清(qing)或(huo)其它(ta)生物標本(ben)：

請(qing) 1000×g 離(li)心(xin) 20 分(fen)鐘，取(qu)上清(qing)即(ji)可(ke)檢(jian)測，或(huo)將上清(qing)置於(yu)-20^oC 或(huo)-80^oC 保存(cun)，但(dan)應(ying)避免(mian)反復凍(dong)融(rong)。

註(zhu)意(yi)：

1.         以(yi)上標本(ben)均(jun)需(xu)密封(feng)保(bao)存(cun)，4^oC保(bao)存(cun)應(ying)小於(yu)1周，-20^oC不應(ying)超過1個月(yue)，-80^oC不應(ying)超過2個月(yue)。

2.         標本(ben)使用前應(ying)緩(huan)慢均(jun)衡(heng)至室(shi)溫，不應(ying)加熱(re)使之融(rong)解(jie)。

3.         實(shi)驗前紅細(xi)胞裂解(jie)液必(bi)須用標準品(pin)稀(xi)釋(shi)液稀(xi)釋(shi)。

小(xiao)鼠(shu)Ⅰ型(xing)前膠原羧基端原肽(PⅠCP)ELISA試(shi)劑盒(he)試劑準備(bei)

1.         使用前將所(suo)有的試(shi)劑和(he)標本(ben)緩(huan)慢均(jun)衡(heng)至室(shi)溫(18-25oC)，試(shi)劑不能(neng)直(zhi)接(jie)在37oC溶(rong)解(jie)。

2.         標準品(pin)(凍(dong)幹(gan)品(pin))：每瓶標準品(pin)加入標準品(pin)稀(xi)釋(shi)液1mL，蓋(gai)好(hao)後室(shi)溫靜置大(da)約10分(fen)鐘，同(tong)時(shi)反復顛倒(dao)/搓(cuo)動(dong)以(yi)助溶(rong)解(jie)，其濃(nong)度(du)為(wei)40ng/mL。準備(bei)7個稀(xi)釋(shi)標準品(pin)的EP管(guan)，每個EP管(guan)中(zhong)加入(ru)150μL的標準品(pin)稀(xi)釋(shi)液，如(ru)圖所(suo)示(shi)依次(ci)倍(bei)比(bi)稀(xi)釋(shi)成(cheng)不同(tong)的(de)梯(ti)度(du)， 標準品(pin)稀(xi)釋(shi)液(0pg/mL)直(zhi)接(jie)作(zuo)為(wei)空白孔(kong)。為(wei)保(bao)證(zheng)實驗(yan)結(jie)果(guo)有效(xiao)性(xing)，每次(ci)實(shi)驗(yan)請(qing)使用新(xin)的標準品(pin)溶液。

3.         濃(nong)洗(xi)滌(di)液：用(yong)580mL蒸餾(liu)水(shui)或(huo)去離子(zi)水(shui)將(jiang)20mL濃(nong)洗(xi)滌(di)液稀(xi)釋(shi)至600mL，進(jin)行30倍稀(xi)釋(shi)。

標本(ben)處理

1.         本(ben)公司只對試(shi)劑盒(he)本(ben)身(shen)負責(ze)，不對因(yin)使用該試(shi)劑盒(he)所(suo)造(zao)成(cheng)的樣本(ben)消耗(hao)負責(ze)，請(qing)使用者使用前充分(fen)考(kao)慮到(dao)樣本(ben)的可能(neng)使用量(liang)，預(yu)留充(chong)足的樣本(ben)。

2.         實(shi)驗前應(ying)預(yu)測標本(ben)含量(liang)，如(ru)果(guo)標本(ben)濃(nong)度(du)過高，應(ying)對標本(ben)進行稀(xi)釋(shi)，使稀(xi)釋(shi)後的標本(ben)符(fu)合試劑盒(he)的檢(jian)測範(fan)圍(wei)，計(ji)算時(shi)再(zai)乘以(yi)相(xiang)應(ying)的稀(xi)釋(shi)倍(bei)數(shu)。

3.         若(ruo)所(suo)檢(jian)樣本(ben)不包含(han)在說(shuo)明(ming)書(shu)所(suo)列(lie)樣本(ben)之中(zhong)，建議(yi)進行預(yu)實驗(yan)驗證(zheng)其有效(xiao)性(xing)，並註(zhu)意(yi)留(liu)存(cun)樣本(ben)。

4.         使用化(hua)學裂解(jie)液制(zhi)備(bei)的(de)組(zu)織勻(yun)漿(jiang)或(huo)細(xi)胞提(ti)取(qu)液可(ke)能(neng)會(hui)由(you)於(yu)某(mou)些(xie)化學(xue)物質(zhi)的(de)引(yin)入(ru)導(dao)致(zhi)  ELISA實驗結果(guo)偏(pian)差。

5.         若(ruo)樣本(ben)為細(xi)胞培(pei)養上清(qing)，因(yin)該類(lei)樣本(ben)幹擾因(yin)素(su) 較多(duo)，如：細(xi)胞狀態、細(xi)胞數量(liang)、采樣時間等(deng)，所(suo)以(yi)可(ke)能(neng)存(cun)在檢(jian)測不出的(de)情(qing)況(kuang)。

6.         某(mou)些(xie)天然(ran)蛋(dan)白(bai)或(huo)重(zhong)組(zu)蛋白(bai)，包(bao)括(kuo)原核(he)及(ji)真核(he)重(zhong)組(zu)蛋白(bai)，可(ke)能(neng)因(yin)為與(yu)本(ben)產品(pin)所(suo)使用的(de)檢測抗(kang)體及(ji)捕獲抗(kang)體不匹配(pei)，而(er)不被檢(jian)測出(chu)。

7.         建(jian)議使用新(xin)鮮樣本(ben)，保存(cun)時間過長可能(neng)會(hui)存(cun)在蛋(dan)白降解(jie)或(huo)變性(xing)導(dao)致(zhi)實驗結(jie)果(guo)偏(pian)差。

小(xiao)鼠(shu)Ⅰ型(xing)前膠原羧基端原肽(PⅠCP)ELISA試(shi)劑盒(he)操作(zuo)步(bu)驟

1.         加(jia)樣：分別設(she)空(kong)白(bai)孔(kong)（空(kong)白(bai)對照孔(kong)不加樣品(pin)及(ji)酶(mei)標試(shi)劑，其余(yu)各(ge)步(bu)操(cao)作(zuo)相(xiang)同(tong)）、標準孔(kong)、待測樣品(pin)孔(kong)。在酶(mei)標包(bao)被(bei)板上標準品(pin)準確加樣50μl，待測樣品(pin)孔(kong)中(zhong)先加(jia)樣品(pin)稀(xi)釋(shi)液40μl，然(ran)後再(zai)加待測樣品(pin)10μl（樣品(pin)*終稀(xi)釋(shi)度(du)為(wei)5倍(bei)）。加(jia)樣將樣品(pin)加於酶(mei)標板(ban)孔(kong)底(di)部(bu)，盡(jin)量(liang)不觸及(ji)孔(kong)壁(bi)，輕輕晃(huang)動(dong)混勻(yun)。

2.         溫(wen)育(yu)：用(yong)封(feng)板(ban)膜封(feng)板(ban)後置37℃溫(wen)育(yu)30分(fen)鐘。  

3.         配(pei)液：將(jiang)20倍濃(nong)縮(suo)洗(xi)滌(di)液用(yong)蒸餾(liu)水(shui)20倍(bei)稀(xi)釋(shi)後備用

4.         洗(xi)滌：小心(xin)揭掉(diao)封(feng)板(ban)膜，棄去(qu)液體，甩(shuai)幹(gan)，每(mei)孔(kong)加(jia)滿(man)洗滌液，靜置30秒(miao)後棄去(qu)，如(ru)此重(zhong)復5次(ci)，拍(pai)幹(gan)。

5.         加(jia)酶(mei)：每孔(kong)加(jia)入(ru)酶(mei)標試(shi)劑50μl，空(kong)白(bai)孔(kong)除(chu)外(wai)。

6.         溫(wen)育(yu)：操(cao)作(zuo)同(tong)3。

7.         洗(xi)滌：操作(zuo)同(tong)5。

8.         顯(xian)色(se)：每孔(kong)先(xian)加(jia)入顯色(se)劑A50μl，再(zai)加入(ru)顯(xian)色(se)劑B50μl，輕輕震(zhen)蕩混勻(yun)，37℃避(bi)光(guang)顯(xian)色(se)15分鐘.

9.         終(zhong)止：每孔(kong)加(jia)終(zhong)止液50μl，終(zhong)止反應(ying)（此時藍(lan)色(se)立(li)轉黃色(se)）。

10.     測定(ding)：以空(kong)白(bai)空調零(ling)，450nm波長(chang)依序測量(liang)各(ge)孔(kong)的(de)吸(xi)光度(du)（OD值(zhi)）。 測定(ding)應(ying)在加(jia)終止液後15分鐘以(yi)內進行(xing)。

註(zhu)意(yi)：

1.         試(shi)劑準備(bei)：準備(bei)壹次(ci)實(shi)驗(yan)所(suo)需(xu)要的(de)酶(mei)標條，其它(ta)的可(ke)從(cong)微(wei)孔(kong)板(ban)上拆(chai)下(xia)，密封(feng)，按(an)照說(shuo)明(ming)書(shu)要(yao)求(qiu)保(bao)存(cun)，以備(bei)下(xia)次(ci)使用。

2.         加(jia)樣：實(shi)驗操作(zuo)中(zhong)請(qing)使用壹(yi)次(ci)性(xing)的(de)吸(xi)頭(tou)，避免(mian)交(jiao)叉(cha)汙染(ran)。加(jia)樣時註(zhu)意(yi)不要有氣泡(pao)，將(jiang)樣品(pin)加於酶(mei)標板(ban)底(di)部(bu)，盡(jin)量(liang)不觸及(ji)孔(kong)壁(bi)，輕輕晃(huang)動(dong)混勻(yun)。加(jia)樣或加試劑時(shi)，**個孔(kong)與(yu)*後壹個孔(kong)加(jia)樣之間的時(shi)間間隔如(ru)果(guo)太大(da)，將會(hui)導(dao)致(zhi)不同(tong)的(de)“預(yu)溫育(yu)”時(shi)間，從(cong)而(er)明(ming)顯地(di)影響到(dao)測量(liang)值(zhi)的(de)準確性及(ji)重(zhong)復性。因(yin)此，壹次(ci)加(jia)樣時間(包括(kuo)標準品(pin)及(ji)所(suo)有樣品(pin))*好(hao)控(kong)制(zhi)在10分(fen)鐘內。推(tui)薦設(she)置復孔(kong)進(jin)行(xing)實驗。

3.          溫(wen)育(yu)：為(wei)防止(zhi)樣品(pin)蒸發(fa)，實(shi)驗時(shi)請(qing)將(jiang)加(jia)上蓋或覆(fu)膜的酶(mei)標板(ban)置於(yu)濕(shi)盒(he)內，以避(bi)免液體蒸發(fa)，洗(xi)板後應(ying)盡快(kuai)進(jin)行下(xia)步(bu)操(cao)作(zuo)，任(ren)何時侯(hou)都(dou)應(ying)避免(mian)酶(mei)標板(ban)處於幹燥狀態，同(tong)時(shi)應(ying)嚴(yan)格(ge)遵(zun)守給定的溫(wen)育(yu)時(shi)間和(he)溫度(du)。

4.         洗(xi)滌：充(chong)分的洗(xi)滌非常(chang)重(zhong)要，在每(mei)次(ci)洗(xi)滌(di)過程中(zhong)，都要(yao)將洗滌液完(wan)全甩(shuai)幹(gan)。洗(xi)滌(di)過程中(zhong)反應(ying)孔(kong)中(zhong)殘(can)留(liu)的(de)洗滌液應(ying)在濾(lv)紙上拍幹，勿(wu)將濾(lv)紙直(zhi)接(jie)放(fang)入反應(ying)孔(kong)中(zhong)吸水(shui)，同(tong)時(shi)要消(xiao)除(chu)板底(di)殘(can)留(liu)的(de)液體和(he)手指印，避(bi)免(mian)影響*後的酶(mei)標儀(yi)讀(du)數(shu)。如(ru)果(guo)有自(zi)動(dong)洗(xi)板(ban)機(ji)，應(ying)在熟(shu)練使用後再(zai)用到(dao)正式實 驗過程中(zhong)。

5.         反應(ying)時間的控(kong)制(zhi)：加(jia)入底物後請(qing)定(ding)時(shi)觀(guan)察反應(ying)孔(kong)的(de)顏(yan)色(se)變化(hua)(比(bi)如，每(mei)隔10分鐘觀(guan)察(cha)壹(yi)次(ci))，如(ru)顏(yan)色(se)較深，請(qing)提(ti)前加入(ru)終(zhong)止液終(zhong)止反應(ying)，避免(mian)反應(ying)過強(qiang)從(cong)而(er)影響酶(mei)標儀(yi)光(guang)密度(du)讀(du)數(shu)。

6.         底(di)物：底(di)物請(qing)避(bi)光(guang)保(bao)存(cun)，在儲(chu)存(cun)和(he)溫育(yu)時(shi)避(bi)免(mian)強(qiang)光直(zhi)接(jie)照射(she)。

7.         如(ru)果(guo)實驗(yan)室(shi)內濕度(du)低(di)於(yu)60%，推(tui)薦使用加(jia)濕器提(ti)高濕(shi)度(du)水(shui)平(ping)。

 實(shi)驗流程

1.         實(shi)驗前標準品(pin)、試劑及(ji)樣本(ben)的準備(bei)；

2.         加(jia)樣（標準品(pin)及(ji)樣本(ben)）50μL，37℃孵(fu)育(yu)30分(fen)鐘；

3.         洗(xi)板5次(ci)，加(jia)酶(mei)標試(shi)劑50ul，37℃孵(fu)育(yu)半(ban)小(xiao)時(shi)；

4.         洗(xi)板5次(ci)；加(jia)入(ru)顯(xian)色(se)液A，B各(ge)50ul,37℃孵(fu)育(yu)顯(xian)色(se)15分鐘

5.         加(jia)終止液50μL，立(li)即450nm讀(du)數(shu)。

6.    計(ji)算

小(xiao)鼠(shu)Ⅰ型(xing)前膠原羧基端原肽(PⅠCP)ELISA試(shi)劑盒(he)計(ji)算

各(ge)標準品(pin)及(ji)樣本(ben)O.D.值扣除空(kong)白孔(kong)O.D.值(zhi)後作(zuo)圖(tu)(七點(dian)圖(tu))，如設(she)置復孔(kong)，則(ze)應(ying)取(qu)其平(ping)均(jun)值計(ji)算。以(yi)標準品(pin)的濃(nong)度(du)為(wei)縱(zong)坐(zuo)標(或(huo)對(dui)數坐(zuo)標)，O.D.值(zhi)為(wei)橫坐標(或(huo)對(dui)數坐(zuo)標），繪(hui)出(chu)標準曲(qu)線(*佳(jia)方(fang)程式(shi)應(ying)依回歸(gui)方(fang)程計(ji)算的(de)R2值來(lai)定，以R2值越(yue)趨(qu)近(jin)於1為(wei)好(hao))。推(tui)薦使用專(zhuan)業制(zhi)作(zuo)曲(qu)線軟(ruan)件(jian)進行(xing)分析，如curve expert 1.30，根(gen)據樣品(pin)O.D.值，由(you)標準曲(qu)線查出相(xiang)應(ying)的濃(nong)度(du)，乘(cheng)以(yi)稀(xi)釋(shi)倍(bei)數(shu)；或用標準物的(de)濃(nong)度(du)與(yu)O.D.值(zhi)計(ji)算出(chu)標準曲(qu)線的回歸(gui)方(fang)程式(shi)，將樣品(pin)的O.D.值代入(ru)方(fang)程式(shi)，計(ji)算出(chu)樣品(pin)濃(nong)度(du)，再(zai)乘以(yi)稀(xi)釋(shi)倍(bei)數(shu)，即為樣品(pin)的實際濃(nong)度(du)。

 特異(yi)性

本(ben)試劑盒(he)用於(yu)檢測小(xiao)鼠(shu)Ⅰ型(xing)前膠原羧基端原肽(PⅠCP)，經(jing)檢(jian)測與(yu)其它(ta)相(xiang)似(si)物質(zhi)無(wu)明(ming)顯交(jiao)叉(cha)反應(ying)。

由(you)於(yu)受到(dao)技術(shu)及(ji)樣本(ben)來源(yuan)的限(xian)制(zhi)，不可能(neng)完(wan)成(cheng)對(dui)所(suo)有相(xiang)關(guan)或相(xiang)似(si)物質(zhi)交(jiao)叉(cha)反應(ying)檢測，因(yin)此本(ben)試劑盒(he)有可能(neng)與(yu)未(wei)經檢(jian)測的(de)其它(ta)物質(zhi)有交(jiao)叉(cha)反應(ying)。

 精(jing)密度(du)

精(jing)密度(du)用(yong)樣品(pin)測定(ding)值的(de)變異(yi)系數(shu)CV表(biao)示(shi)。CV(%) = SD/mean×100

批(pi)內差：取(qu)同(tong)批(pi)次(ci)試(shi)劑盒(he)對低(di)、中(zhong)、高值(zhi)定值樣本(ben)進行定量(liang)檢(jian)測,每(mei)份(fen)樣本(ben)連續測定(ding)20 次(ci)，分(fen)別(bie)計(ji)算不同(tong)濃(nong)度(du)樣本(ben)的平(ping)均(jun)值及(ji)SD值(zhi)。

批(pi)間差：選(xuan)取(qu)3個不同(tong)批(pi)次(ci)的(de)試(shi)劑盒(he)分別(bie)對低(di)、中(zhong)、高值(zhi)定值樣本(ben)進行定量(liang)測定(ding)，每個樣本(ben)使用同(tong)壹(yi)試劑盒(he)重(zhong)復測定(ding)8次(ci)，分(fen)別(bie)計(ji)算不同(tong)濃(nong)度(du)樣本(ben)的平(ping)均(jun)值及(ji)SD值(zhi)。

批(pi)內差： CV<10%

批(pi)間差： CV<12%

小(xiao)鼠(shu)Ⅰ型(xing)前膠原羧基端原肽(PⅠCP)ELISA試(shi)劑盒(he)穩定(ding)性

經(jing)測定(ding)，試劑盒(he)在有效(xiao)期(qi)內按(an)推(tui)薦溫(wen)度(du)保(bao)存(cun)，其活(huo)性降(jiang)低(di)率小(xiao)於5%。

為(wei)減(jian)小(xiao)外部(bu)因(yin)素(su)對試(shi)劑盒(he)破壞(huai)前後檢測值(zhi)的影響，實(shi)驗(yan)室(shi)的環(huan)境條件(jian)需(xu)盡量(liang)保(bao)持壹致(zhi)，尤其是實(shi)驗室(shi)內溫度(du)、濕(shi)度(du)及(ji)溫(wen)育(yu)條件(jian)。其次(ci)由(you)同(tong)壹(yi)實驗(yan)員來(lai)進(jin)行(xing)操(cao)作(zuo)可(ke)減(jian)少(shao)人為誤差。