產(chan)品(pin)名稱(cheng)：小(xiao)鼠25kDa突(tu)觸關聯蛋白(SNAP25)ELISA試劑(ji)盒

                                                       96T       僅(jin)供(gong)體外研(yan)究(jiu)使(shi)用，不用(yong)於(yu)臨床(chuang)診(zhen)斷!

小(xiao)鼠25kDa突(tu)觸關聯蛋白(SNAP25)ELISA試劑(ji)盒

本(ben)試(shi)劑盒運用(yong)雙(shuang)抗(kang)體(ti)夾(jia)心(xin)ELISA法定(ding)量測(ce)定(ding)小(xiao)鼠血(xue)清(qing)、血(xue)漿、組(zu)織(zhi)勻(yun)漿、細(xi)胞(bao)裂解液(ye)、細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)上(shang)清(qing)液(ye)和(he)其(qi)他(ta)生物液體中(zhong)小(xiao)鼠25kDa突(tu)觸關聯蛋白(SNAP25)含量。

 檢(jian)測(ce)範(fan)圍

0.313-20 ng/mL

 *低(di)檢(jian)測(ce)限(xian)

0.14 ng/mL

 實驗(yan)原(yuan)理

將(jiang)小(xiao)鼠25kDa突(tu)觸關聯蛋白(SNAP25)抗(kang)體(ti)包(bao)被於(yu)96孔(kong)微孔(kong)板(ban)中(zhong)，制(zhi)成(cheng)固相(xiang)載(zai)體(ti)，向微(wei)孔(kong)中(zhong)分別(bie)加入標準品或(huo)標(biao)本(ben)，其(qi)中(zhong)的(de)小(xiao)鼠25kDa突(tu)觸關聯蛋白(SNAP25)與連接於(yu)固相(xiang)載(zai)體(ti)上(shang)的(de)抗(kang)體(ti)結(jie)合，然後加入生物素(su)化(hua)的(de)小(xiao)鼠25kDa突(tu)觸關聯蛋白(SNAP25)抗(kang)體(ti)，將(jiang)未(wei)結合的(de)生物素(su)化(hua)抗(kang)體(ti)洗(xi)凈後，加入HRP標記(ji)的(de)親和(he)素(su)，再(zai)次(ci)徹底(di)洗(xi)滌(di)後(hou)加入TMB底(di)物(wu)顯色。TMB在過(guo)氧化(hua)物酶(mei)的(de)催化(hua)下轉化(hua)成(cheng)藍色，並在酸(suan)的(de)作用(yong)下轉化(hua)成(cheng)*終的(de)黃色。顏色的(de)深(shen)淺(qian)和(he)樣(yang)品(pin)中(zhong)的(de)小(xiao)鼠25kDa突(tu)觸關聯蛋白(SNAP25)呈(cheng)正相關。用酶(mei)標儀(yi)在450nm波(bo)長下測(ce)定(ding)吸(xi)光度(O.D.值(zhi))，計算樣(yang)品(pin)濃度。

 試(shi)劑(ji)盒內容(rong)

小(xiao)鼠25kDa突(tu)觸關聯蛋白(SNAP25)ELISA試劑(ji)盒需(xu)自(zi)備(bei)的(de)設(she)備(bei)及(ji)試(shi)劑(ji)

1.         450±10nm濾(lv)光片的(de)酶(mei)標儀(yi)(建(jian)議儀(yi)器使用(yong)前(qian)提前(qian)預(yu)熱)

2.         單(dan)道或(huo)多道微量加液(ye)器及吸(xi)頭

3.         稀(xi)釋(shi)樣(yang)品(pin)的(de)EP管

4.         蒸餾(liu)水(shui)或(huo)去(qu)離(li)子水(shui)

5.         吸(xi)水紙

6.         盛(sheng)放洗(xi)液(ye)的(de)容器

 試(shi)劑(ji)盒的(de)儲存(cun)及(ji)有效(xiao)期(qi)

1.         未(wei)開封(feng)的(de)試劑(ji)盒：所有試(shi)劑(ji)均按試劑瓶標(biao)簽上(shang)所(suo)示(shi)保(bao)存(cun)。請(qing)註意(yi)，收到(dao)試劑盒後請(qing)盡(jin)快(kuai)將(jiang)TMB 洗滌(di)液(ye)，終(zhong)止(zhi)液(ye)保存(cun)於(yu)4℃，其他(ta)試劑(ji)保存(cun)於(yu)-20℃。

2.         使(shi)用(yong)後的(de)試劑(ji)盒：剩余試劑仍(reng)需(xu)按(an)照(zhao)試劑瓶標(biao)簽所示的(de)溫度保(bao)存(cun)，開封(feng)後(hou)的(de)酶(mei)標板(ban)要(yao)加幹(gan)燥劑(ji)後密(mi)封(feng)保(bao)存(cun)於(yu)-20℃，避免(mian)潮濕(shi)。

註意(yi)：

試(shi)劑(ji)盒內酶(mei)標條(tiao)可拆(chai)卸(xie)，按(an)實驗(yan)需(xu)求可分(fen)多次(ci)使用(yong)；使(shi)用(yong)後的(de)剩余試劑盒建(jian)議在**實驗(yan)後(hou) 1個(ge)月內使(shi)用(yong)完畢(bi)。產(chan)品(pin)過期(qi)時(shi)間以(yi)盒子上(shang)的(de)標簽為準，保質(zhi)期(qi)內所(suo)有組(zu)分(fen)都(dou)確(que)保是(shi)穩定(ding)的(de)。

小(xiao)鼠25kDa突(tu)觸關聯蛋白(SNAP25)ELISA試劑(ji)盒標本(ben)的(de)采集(ji)與保存(cun)

1.         血(xue)清(qing)：

將(jiang)收集於(yu)血(xue)清(qing)分(fen)離(li)管的(de)全血(xue)標(biao)本(ben)在室(shi)溫放置 2 小(xiao)時或(huo) 4^oC 過(guo)夜(ye)，然後 1000×g 離(li)心(xin) 20 分鐘(zhong)，取上(shang)清(qing)即(ji)可，或(huo)將(jiang)上(shang)清(qing)置於(yu)-20^oC 或(huo)-80^oC 保(bao)存(cun)，但(dan)應避免(mian)反復凍(dong)融。

2.         血(xue)漿：

用(yong) EDTA 或(huo)肝(gan)素(su)作(zuo)為抗(kang)凝(ning)劑(ji)采集標(biao)本，並將(jiang)標本(ben)在采(cai)集(ji)後的(de) 30 分鐘(zhong)內於(yu) 2-8^oC 1000×g 離(li)心(xin) 15 分鐘(zhong)，取上(shang)清(qing)即(ji)可檢(jian)測(ce)，或(huo)將(jiang)上(shang)清(qing)置於(yu)-20^oC 或(huo)-80^oC 保(bao)存(cun)，但(dan)應避免(mian)反復凍(dong)融。

3. 組(zu)織(zhi)勻(yun)漿：

1） 取(qu)適(shi)量組(zu)織(zhi)塊(kuai)，於(yu)預冷(leng)PBS（0.01mol/L, pH 7.0-7.2）中(zhong)清洗(xi)去(qu)除血(xue)液(ye)，稱(cheng)重後備(bei)用(yong)（組(zu)織(zhi)塊(kuai)較大(da)需(xu)先(xian)剪碎後(hou)再(zai)勻漿）；

2） 可同(tong)時(shi)選(xuan)用(yong)多種勻(yun)漿方(fang)法達(da)到(dao)較好(hao)的(de)破(po)碎效(xiao)果(guo)：首先將(jiang)組(zu)織(zhi)塊(kuai)移(yi)入玻璃勻漿器，加入5-10mL 預冷(leng)PBS 進行充(chong)分(fen)研(yan)磨(mo)，該過(guo)程需(xu)在冰(bing)上(shang)進行（有條(tiao)件(jian)實驗(yan)室(shi)可選(xuan)用(yong)機(ji)器勻漿）；得到(dao)的(de)勻漿液(ye)可再(zai)利(li)用超(chao)聲(sheng)破(po)碎或(huo)反復凍(dong)融 進壹步處理（超(chao)聲(sheng)破(po)碎過(guo)程中(zhong)註意(yi)冰浴降(jiang)溫；反復凍(dong)融法可重復2 次(ci)）。

3） 將(jiang)制(zhi)備(bei)好(hao)的(de)勻漿液(ye)於(yu)5000×g 離(li)心(xin)5 分鐘(zhong)，留取上(shang)清(qing)即(ji)可檢(jian)測(ce)。

4. 細(xi)胞(bao)裂解液(ye)：

1）貼(tie)壁(bi)細(xi)胞(bao)需(xu)要(yao)先用胰(yi)酶(mei)消化(hua)，離(li)心(xin)收集細(xi)胞(bao)（懸(xuan)浮細(xi)胞(bao)可直(zhi)接離(li)心(xin)收集）；

2）將(jiang)收集到(dao)的(de)細(xi)胞(bao)用(yong)冷PBS 洗3 次(ci)；

3）物(wu)理方(fang)法(fa)裂解細(xi)胞(bao)（可先(xian)超(chao)聲(sheng)破(po)碎細(xi)胞(bao)，再(zai)反復凍(dong)融）：

i 超(chao)聲(sheng)破(po)碎：取(qu)適量PBS 重懸細(xi)胞(bao)，用(yong)壹定(ding)功率的(de)超(chao)聲(sheng)波(bo)處理細(xi)胞(bao)懸(xuan)液，使細(xi)胞(bao)急(ji)劇(ju)震(zhen)蕩破(po)裂。

ii 反復凍(dong)融：將(jiang)待破(po)碎的(de)細(xi)胞(bao)在-20 ^oC 以(yi)下冰凍(dong)，室(shi)溫融解(jie)，反復3 次(ci)，使細(xi)胞(bao)溶脹(zhang)破(po)碎。

4）將(jiang)標本(ben)於(yu)2-8 ^oC 1500×g 離(li)心(xin)10 分鐘(zhong)，收集上(shang)清(qing)備(bei)用(yong)。

5. 細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)上(shang)清(qing)或(huo)其(qi)它生物標本：

請(qing) 1000×g 離(li)心(xin) 20 分鐘(zhong)，取上(shang)清(qing)即(ji)可檢(jian)測(ce)，或(huo)將(jiang)上(shang)清(qing)置於(yu)-20^oC 或(huo)-80^oC 保(bao)存(cun)，但(dan)應避免(mian)反復凍(dong)融。

註意(yi)：

1.         以(yi)上(shang)標(biao)本(ben)均需(xu)密(mi)封(feng)保(bao)存(cun)，4^oC保(bao)存(cun)應小(xiao)於(yu)1周，-20^oC不(bu)應超(chao)過(guo)1個(ge)月，-80^oC不(bu)應超(chao)過(guo)2個(ge)月。

2.         標(biao)本(ben)使用前(qian)應緩(huan)慢(man)均衡至(zhi)室(shi)溫，不應加熱使之融(rong)解(jie)。

3.         實驗(yan)前(qian)紅(hong)細(xi)胞(bao)裂解液(ye)必(bi)須用標(biao)準品稀釋液(ye)稀(xi)釋(shi)。

小(xiao)鼠25kDa突(tu)觸關聯蛋白(SNAP25)ELISA試劑(ji)盒試劑(ji)準備(bei)

1.         使(shi)用(yong)前(qian)將(jiang)所有的(de)試劑(ji)和(he)標(biao)本緩慢均衡至(zhi)室(shi)溫(18-25oC)，試劑(ji)不(bu)能直(zhi)接在37oC溶解(jie)。

2.         標(biao)準品(凍(dong)幹(gan)品)：每瓶標(biao)準品加入標準品稀釋液(ye)1mL，蓋(gai)好(hao)後室(shi)溫靜置大(da)約10分(fen)鐘(zhong)，同(tong)時(shi)反復顛(dian)倒/搓動(dong)以(yi)助溶解(jie)，其濃度為(wei)20 ng/mL。準備(bei)7個(ge)稀釋(shi)標準品的(de)EP管，每個(ge)EP管中(zhong)加入150μL的(de)標準品稀釋液(ye)，如圖(tu)所(suo)示依次(ci)倍比稀(xi)釋成(cheng)不同(tong)的(de)梯度， 標(biao)準品稀釋液(ye)(0pg/mL)直(zhi)接作(zuo)為(wei)空白孔(kong)。為保(bao)證(zheng)實驗(yan)結(jie)果(guo)有效(xiao)性，每次(ci)實驗(yan)請(qing)使(shi)用新的(de)標準品溶液(ye)。

3.         濃洗滌(di)液(ye)：用(yong)580mL蒸餾(liu)水(shui)或(huo)去(qu)離(li)子水(shui)將(jiang)20mL濃洗滌(di)液(ye)稀(xi)釋(shi)至(zhi)600mL，進行30倍稀釋(shi)。

標(biao)本(ben)處理

1.         本(ben)公司(si)只(zhi)對試(shi)劑盒本身(shen)負責，不(bu)對(dui)因(yin)使用(yong)該試(shi)劑盒所造(zao)成(cheng)的(de)樣(yang)本(ben)消耗(hao)負責，請(qing)使(shi)用(yong)者(zhe)使(shi)用(yong)前(qian)充(chong)分(fen)考慮(lv)到(dao)樣(yang)本(ben)的(de)可能使用(yong)量，預(yu)留充(chong)足(zu)的(de)樣(yang)本(ben)。

2.         實驗(yan)前(qian)應預(yu)測(ce)標(biao)本(ben)含(han)量，如果(guo)標本濃度過(guo)高，應對(dui)標(biao)本進行稀釋，使稀(xi)釋(shi)後(hou)的(de)標本(ben)符合試劑盒的(de)檢測(ce)範(fan)圍，計(ji)算時再(zai)乘(cheng)以(yi)相應的(de)稀釋(shi)倍數(shu)。

3.         若(ruo)所(suo)檢樣(yang)本(ben)不包(bao)含(han)在說(shuo)明書(shu)所(suo)列(lie)樣(yang)本(ben)之中(zhong)，建(jian)議進行預實驗(yan)驗(yan)證(zheng)其有效(xiao)性，並(bing)註意(yi)留存(cun)樣(yang)本(ben)。

4.         使(shi)用(yong)化(hua)學裂解液(ye)制(zhi)備(bei)的(de)組(zu)織(zhi)勻(yun)漿或(huo)細(xi)胞(bao)提取(qu)液(ye)可能會由(you)於(yu)某(mou)些(xie)化(hua)學物質(zhi)的(de)引入導(dao)致  ELISA實驗(yan)結(jie)果(guo)偏(pian)差。

5.         若(ruo)樣(yang)本(ben)為細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)上(shang)清(qing)，因(yin)該類樣(yang)本(ben)幹(gan)擾(rao)因(yin)素(su) 較多，如：細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態、細(xi)胞(bao)數(shu)量、采(cai)樣(yang)時(shi)間等，所(suo)以(yi)可能存(cun)在檢(jian)測(ce)不(bu)出的(de)情(qing)況。

6.         某(mou)些(xie)天(tian)然蛋白或(huo)重組(zu)蛋白，包括(kuo)原核(he)及(ji)真核(he)重組(zu)蛋白，可能因(yin)為與本產(chan)品所使用(yong)的(de)檢測(ce)抗(kang)體(ti)及(ji)捕(bu)獲(huo)抗(kang)體(ti)不(bu)匹(pi)配(pei)，而(er)不被檢測(ce)出。

7.         建(jian)議使用(yong)新鮮(xian)樣(yang)本(ben)，保存(cun)時(shi)間過長可能會存(cun)在蛋白降解(jie)或(huo)變性導(dao)致實驗(yan)結(jie)果(guo)偏(pian)差。

小(xiao)鼠25kDa突(tu)觸關聯蛋白(SNAP25)ELISA試劑(ji)盒操作(zuo)步驟

1.         加樣(yang)：分(fen)別設(she)空白孔(kong)（空白對照(zhao)孔(kong)不加樣(yang)品(pin)及酶(mei)標試(shi)劑(ji)，其(qi)余各步操作(zuo)相(xiang)同(tong)）、標(biao)準孔(kong)、待測(ce)樣(yang)品(pin)孔(kong)。在酶(mei)標包(bao)被板(ban)上(shang)標(biao)準品準確(que)加樣(yang)50μl，待測(ce)樣(yang)品(pin)孔(kong)中(zhong)先加樣(yang)品(pin)稀釋(shi)液(ye)40μl，然後再(zai)加待測(ce)樣(yang)品(pin)10μl（樣(yang)品(pin)*終稀(xi)釋(shi)度為(wei)5倍）。加樣(yang)將(jiang)樣(yang)品(pin)加於(yu)酶(mei)標板(ban)孔(kong)底(di)部(bu)，盡(jin)量不(bu)觸及孔(kong)壁，輕(qing)輕(qing)晃動(dong)混勻(yun)。

2.         溫(wen)育(yu)：用封(feng)板(ban)膜(mo)封(feng)板(ban)後(hou)置37℃溫(wen)育(yu)30分鐘(zhong)。  

3.         配(pei)液(ye)：將(jiang)20倍濃縮(suo)洗滌(di)液(ye)用(yong)蒸餾(liu)水(shui)20倍稀釋(shi)後備(bei)用(yong)

4.         洗(xi)滌(di)：小(xiao)心(xin)揭掉封(feng)板(ban)膜(mo)，棄去(qu)液體(ti)，甩幹(gan)，每孔(kong)加滿洗滌(di)液(ye)，靜(jing)置30秒(miao)後(hou)棄去(qu)，如此重復5次(ci)，拍(pai)幹(gan)。

5.         加酶(mei)：每孔(kong)加入酶(mei)標試(shi)劑(ji)50μl，空白孔(kong)除外(wai)。

6.         溫(wen)育(yu)：操作同(tong)3。

7.         洗(xi)滌(di)：操(cao)作(zuo)同(tong)5。

8.         顯色：每孔(kong)先加入顯色劑A50μl，再(zai)加入顯色劑B50μl，輕(qing)輕(qing)震蕩混(hun)勻，37℃避光顯色15分鐘(zhong).

9.         終(zhong)止(zhi)：每孔(kong)加終(zhong)止液(ye)50μl，終(zhong)止反應（此時藍(lan)色立(li)轉黃色）。

10.     測(ce)定(ding)：以(yi)空白空調(tiao)零(ling)，450nm波(bo)長依序(xu)測(ce)量各(ge)孔(kong)的(de)吸(xi)光度（OD值(zhi)）。 測(ce)定(ding)應在加終(zhong)止液(ye)後(hou)15分鐘(zhong)以(yi)內進行。

註意(yi)：

1.         試(shi)劑(ji)準備(bei)：準備(bei)壹次(ci)實驗(yan)所(suo)需(xu)要(yao)的(de)酶(mei)標條(tiao)，其(qi)它的(de)可從(cong)微(wei)孔(kong)板(ban)上(shang)拆(chai)下，密(mi)封(feng)，按(an)照(zhao)說(shuo)明書(shu)要(yao)求保(bao)存(cun)，以(yi)備(bei)下次(ci)使用(yong)。

2.         加樣(yang)：實驗(yan)操(cao)作(zuo)中(zhong)請使(shi)用壹次(ci)性的(de)吸(xi)頭，避免(mian)交叉(cha)汙(wu)染(ran)。加樣(yang)時(shi)註意(yi)不要(yao)有氣泡，將(jiang)樣(yang)品(pin)加於(yu)酶(mei)標板(ban)底(di)部(bu)，盡(jin)量不(bu)觸及孔(kong)壁，輕(qing)輕(qing)晃動(dong)混勻(yun)。加樣(yang)或(huo)加試(shi)劑時(shi)，**個(ge)孔(kong)與*後壹個(ge)孔(kong)加樣(yang)之間的(de)時間間隔(ge)如果(guo)太大(da)，將(jiang)會導(dao)致不同(tong)的(de)“預溫(wen)育”時(shi)間，從而(er)明顯地影響(xiang)到(dao)測(ce)量值(zhi)的(de)準確(que)性及(ji)重復性。因(yin)此，壹次(ci)加樣(yang)時(shi)間(包括(kuo)標準品及所有樣(yang)品(pin))*好(hao)控(kong)制(zhi)在10分(fen)鐘(zhong)內。推(tui)薦(jian)設(she)置復(fu)孔(kong)進行實驗(yan)。

3.          溫(wen)育(yu)：為(wei)防(fang)止樣(yang)品(pin)蒸發(fa)，實驗(yan)時(shi)請(qing)將(jiang)加上(shang)蓋(gai)或(huo)覆(fu)膜(mo)的(de)酶(mei)標板(ban)置於(yu)濕(shi)盒內，以(yi)避免(mian)液(ye)體(ti)蒸發(fa)，洗板(ban)後(hou)應盡(jin)快(kuai)進行下步操作(zuo)，任何(he)時侯都應避免(mian)酶(mei)標板(ban)處(chu)於(yu)幹(gan)燥狀(zhuang)態，同(tong)時(shi)應嚴格遵守(shou)給(gei)定(ding)的(de)溫育(yu)時間和(he)溫(wen)度。

4.         洗(xi)滌(di)：充(chong)分(fen)的(de)洗滌(di)非(fei)常重要，在每次(ci)洗滌(di)過(guo)程中(zhong)，都要(yao)將(jiang)洗滌(di)液(ye)完全甩幹(gan)。洗滌(di)過(guo)程中(zhong)反應孔(kong)中(zhong)殘(can)留的(de)洗滌(di)液(ye)應在濾(lv)紙(zhi)上(shang)拍(pai)幹(gan)，勿將(jiang)濾(lv)紙(zhi)直(zhi)接放入反應孔(kong)中(zhong)吸(xi)水，同(tong)時(shi)要(yao)消(xiao)除板(ban)底(di)殘(can)留的(de)液體(ti)和(he)手(shou)指印，避免(mian)影(ying)響(xiang)*後的(de)酶(mei)標儀(yi)讀(du)數(shu)。如果(guo)有自(zi)動(dong)洗板(ban)機(ji)，應在熟練使(shi)用後(hou)再用到(dao)正式實 驗(yan)過(guo)程中(zhong)。

5.         反應時(shi)間的(de)控(kong)制(zhi)：加入底(di)物(wu)後(hou)請(qing)定(ding)時觀察(cha)反應孔(kong)的(de)顏色變化(hua)(比如，每隔(ge)10分(fen)鐘觀察(cha)壹次(ci))，如顏色較深(shen)，請(qing)提前(qian)加入終止(zhi)液終(zhong)止(zhi)反應，避免(mian)反應過(guo)強(qiang)從(cong)而(er)影(ying)響(xiang)酶(mei)標儀(yi)光密(mi)度讀(du)數(shu)。

6.         底(di)物(wu)：底(di)物(wu)請(qing)避光保(bao)存(cun)，在儲(chu)存(cun)和(he)溫(wen)育時避免(mian)強(qiang)光直(zhi)接照(zhao)射。

7.         如果(guo)實驗(yan)室(shi)內濕(shi)度低(di)於(yu)60%，推(tui)薦(jian)使(shi)用(yong)加濕(shi)器提高(gao)濕(shi)度水(shui)平(ping)。

 實驗(yan)流(liu)程

1.         實驗(yan)前(qian)標(biao)準品、試劑及(ji)樣(yang)本(ben)的(de)準備(bei)；

2.         加樣(yang)（標(biao)準品及樣(yang)本(ben)）50μL，37℃孵(fu)育(yu)30分鐘；

3.         洗(xi)板(ban)5次(ci)，加酶(mei)標試(shi)劑(ji)50ul，37℃孵(fu)育(yu)半小(xiao)時；

4.         洗(xi)板(ban)5次(ci)；加入顯色液A，B各(ge)50ul,37℃孵(fu)育(yu)顯色15分鐘(zhong)

5.         加終(zhong)止液(ye)50μL，立(li)即(ji)450nm讀數(shu)。

6.    計(ji)算(suan)

小(xiao)鼠25kDa突(tu)觸關聯蛋白(SNAP25)ELISA試劑(ji)盒計算(suan)

各(ge)標(biao)準品及樣(yang)本(ben)O.D.值(zhi)扣(kou)除空白孔(kong)O.D.值(zhi)後作圖(tu)(七點圖)，如設(she)置復(fu)孔(kong)，則(ze)應取(qu)其(qi)平(ping)均值(zhi)計算。以(yi)標準品的(de)濃度為(wei)縱坐(zuo)標(或(huo)對(dui)數(shu)坐標(biao))，O.D.值(zhi)為橫(heng)坐標(或(huo)對(dui)數(shu)坐標(biao)），繪(hui)出標(biao)準曲(qu)線(xian)(*佳方程式應依回歸(gui)方程計算的(de)R2值(zhi)來定(ding)，以(yi)R2值(zhi)越(yue)趨(qu)近於(yu)1為好(hao))。推(tui)薦(jian)使(shi)用(yong)專(zhuan)業制(zhi)作曲(qu)線(xian)軟(ruan)件(jian)進行分析，如curve expert 1.30，根(gen)據樣(yang)品(pin)O.D.值(zhi)，由標準曲(qu)線(xian)查(zha)出相(xiang)應的(de)濃度，乘(cheng)以(yi)稀釋倍數(shu)；或(huo)用(yong)標(biao)準物的(de)濃度與O.D.值(zhi)計算出標(biao)準曲(qu)線(xian)的(de)回歸(gui)方程式，將(jiang)樣(yang)品(pin)的(de)O.D.值(zhi)代(dai)入方程式，計算出樣(yang)品(pin)濃度，再(zai)乘以(yi)稀釋倍數(shu)，即(ji)為樣(yang)品(pin)的(de)實際(ji)濃度。

 特(te)異(yi)性

本(ben)試(shi)劑盒用於(yu)檢測(ce)小(xiao)鼠25kDa突(tu)觸關聯蛋白(SNAP25)，經(jing)檢測(ce)與其它相(xiang)似(si)物質(zhi)無明顯交叉(cha)反應。

由(you)於(yu)受到(dao)技術(shu)及(ji)樣(yang)本(ben)來源(yuan)的(de)限制(zhi)，不可能完成(cheng)對所(suo)有相(xiang)關或(huo)相(xiang)似(si)物(wu)質(zhi)交叉(cha)反應檢(jian)測(ce)，因(yin)此本試(shi)劑盒有可能與未(wei)經(jing)檢測(ce)的(de)其它物(wu)質(zhi)有交叉(cha)反應。

 精(jing)密(mi)度

精(jing)密(mi)度用(yong)樣(yang)品(pin)測(ce)定(ding)值(zhi)的(de)變異(yi)系(xi)數(shu)CV表示。CV(%) = SD/mean×100

批(pi)內差：取同(tong)批(pi)次(ci)試劑(ji)盒對低(di)、中(zhong)、高值(zhi)定(ding)值(zhi)樣(yang)本(ben)進行定(ding)量檢(jian)測(ce),每份(fen)樣(yang)本(ben)連續(xu)測(ce)定(ding)20 次(ci)，分別(bie)計(ji)算(suan)不同(tong)濃度樣(yang)本(ben)的(de)平(ping)均值(zhi)及SD值(zhi)。

批(pi)間差：選取3個(ge)不同(tong)批(pi)次(ci)的(de)試劑(ji)盒分別(bie)對(dui)低、中(zhong)、高值(zhi)定(ding)值(zhi)樣(yang)本(ben)進行定(ding)量測(ce)定(ding)，每個(ge)樣(yang)本(ben)使用(yong)同(tong)壹試(shi)劑(ji)盒重復測(ce)定(ding)8次(ci)，分別(bie)計(ji)算(suan)不同(tong)濃度樣(yang)本(ben)的(de)平(ping)均值(zhi)及SD值(zhi)。

批(pi)內差： CV<10%

批(pi)間差： CV<12%

小(xiao)鼠25kDa突(tu)觸關聯蛋白(SNAP25)ELISA試劑(ji)盒穩定(ding)性

經(jing)測(ce)定(ding)，試劑盒在有效(xiao)期(qi)內按(an)推(tui)薦(jian)溫(wen)度保(bao)存(cun)，其(qi)活性降(jiang)低(di)率小(xiao)於(yu)5%。

為(wei)減(jian)小(xiao)外部(bu)因(yin)素(su)對(dui)試劑盒破(po)壞前(qian)後(hou)檢測(ce)值(zhi)的(de)影響(xiang)，實驗(yan)室(shi)的(de)環境(jing)條(tiao)件(jian)需(xu)盡(jin)量保(bao)持壹致，尤其(qi)是(shi)實驗(yan)室(shi)內溫(wen)度、濕(shi)度及(ji)溫育(yu)條件(jian)。其次(ci)由同(tong)壹實驗(yan)員(yuan)來進行操作可減(jian)少(shao)人為(wei)誤差。