產品(pin)名(ming)稱(cheng)：小(xiao)鼠Ⅲ組磷(lin)脂(zhi)酶A2(PLA2G3)ELISA試(shi)劑盒

                                                       96T       僅(jin)供(gong)體外研(yan)究(jiu)使(shi)用(yong)，不(bu)用於(yu)臨(lin)床(chuang)診(zhen)斷(duan)!

小(xiao)鼠Ⅲ組磷(lin)脂(zhi)酶A2(PLA2G3)ELISA試(shi)劑盒

本(ben)試(shi)劑盒運(yun)用(yong)雙(shuang)抗體夾心(xin)ELISA法(fa)定(ding)量測(ce)定小(xiao)鼠血(xue)清(qing)、血(xue)漿、組織勻漿、細胞(bao)裂(lie)解(jie)液、細胞(bao)培(pei)養上清液和其(qi)他(ta)生(sheng)物液體中(zhong)小(xiao)鼠Ⅲ組磷(lin)脂(zhi)酶A2(PLA2G3)含(han)量。

 檢測(ce)範圍(wei)

0.781-50ng/mL

 *低(di)檢測(ce)限(xian)

0.27ng/mL

 實驗原(yuan)理

將(jiang)小(xiao)鼠Ⅲ組磷(lin)脂(zhi)酶A2(PLA2G3)抗體包(bao)被(bei)於(yu)96孔微孔(kong)板中(zhong)，制(zhi)成(cheng)固相(xiang)載體，向(xiang)微孔(kong)中分(fen)別(bie)加(jia)入(ru)標(biao)準(zhun)品(pin)或(huo)標(biao)本，其(qi)中(zhong)的小(xiao)鼠Ⅲ組磷(lin)脂(zhi)酶A2(PLA2G3)與(yu)連接(jie)於(yu)固相(xiang)載體上的抗體結(jie)合(he)，然後(hou)加(jia)入(ru)生(sheng)物素(su)化的小(xiao)鼠Ⅲ組磷(lin)脂(zhi)酶A2(PLA2G3)抗體，將(jiang)未(wei)結(jie)合(he)的生(sheng)物素(su)化抗體洗凈後(hou)，加(jia)入(ru)HRP標(biao)記(ji)的親和素，再(zai)次徹(che)底洗(xi)滌後(hou)加(jia)入(ru)TMB底物(wu)顯色。TMB在過(guo)氧化物(wu)酶的催化下(xia)轉(zhuan)化成(cheng)藍(lan)色，並在酸的作用(yong)下轉化成(cheng)*終的黃(huang)色。顏色的深(shen)淺和(he)樣品中(zhong)的小(xiao)鼠Ⅲ組磷(lin)脂(zhi)酶A2(PLA2G3)呈(cheng)正相關(guan)。用酶標儀(yi)在(zai)450nm波(bo)長(chang)下(xia)測(ce)定吸(xi)光(guang)度(O.D.值(zhi))，計算(suan)樣品濃(nong)度。

 試(shi)劑盒內容

小(xiao)鼠Ⅲ組磷(lin)脂(zhi)酶A2(PLA2G3)ELISA試(shi)劑盒需(xu)自(zi)備的設(she)備及試(shi)劑

1.         450±10nm濾光(guang)片(pian)的酶標儀(yi)(建(jian)議(yi)儀(yi)器(qi)使用前提前預熱(re))

2.         單道(dao)或多(duo)道(dao)微量(liang)加(jia)液器及(ji)吸(xi)頭(tou)

3.         稀釋(shi)樣品的EP管

4.         蒸(zheng)餾(liu)水(shui)或去離子(zi)水(shui)

5.         吸(xi)水(shui)紙

6.         盛(sheng)放(fang)洗(xi)液的容(rong)器(qi)

 試(shi)劑盒的儲(chu)存(cun)及(ji)有(you)效期

1.         未(wei)開(kai)封(feng)的試(shi)劑盒：所(suo)有(you)試(shi)劑均(jun)按(an)試(shi)劑瓶標(biao)簽(qian)上所示(shi)保(bao)存(cun)。請註意(yi)，收(shou)到(dao)試(shi)劑盒後(hou)請盡(jin)快(kuai)將(jiang)TMB 洗滌液，終止液保存(cun)於(yu)4℃，其他(ta)試(shi)劑保存(cun)於(yu)-20℃。

2.         使(shi)用(yong)後(hou)的試(shi)劑盒：剩余試(shi)劑仍需(xu)按(an)照試(shi)劑瓶標(biao)簽(qian)所(suo)示的溫(wen)度保(bao)存(cun)，開(kai)封(feng)後(hou)的酶標板要(yao)加(jia)幹燥劑(ji)後(hou)密封(feng)保存(cun)於(yu)-20℃，避免(mian)潮(chao)濕(shi)。

註(zhu)意(yi)：

試(shi)劑盒內酶標條(tiao)可拆卸(xie)，按實驗需(xu)求(qiu)可分多(duo)次使用；使用(yong)後(hou)的剩余試(shi)劑盒建(jian)議(yi)在(zai)**實(shi)驗後(hou) 1個(ge)月(yue)內使用完畢。產品(pin)過(guo)期(qi)時(shi)間(jian)以(yi)盒(he)子(zi)上的標(biao)簽(qian)為(wei)準(zhun)，保(bao)質(zhi)期內所有(you)組(zu)分(fen)都(dou)確保(bao)是穩定的。

小(xiao)鼠Ⅲ組磷(lin)脂(zhi)酶A2(PLA2G3)ELISA試(shi)劑盒標(biao)本的采(cai)集與(yu)保存(cun)

1.         血(xue)清(qing)：

將(jiang)收(shou)集(ji)於(yu)血(xue)清(qing)分離(li)管的全血(xue)標(biao)本在(zai)室(shi)溫(wen)放(fang)置 2 小(xiao)時(shi)或(huo) 4^oC 過(guo)夜，然後(hou) 1000×g 離心(xin) 20 分鐘(zhong)，取(qu)上清即可，或將(jiang)上清置於(yu)-20^oC 或-80^oC 保(bao)存(cun)，但(dan)應避免(mian)反(fan)復(fu)凍融(rong)。

2.         血(xue)漿：

用 EDTA 或(huo)肝素(su)作為(wei)抗凝劑(ji)采(cai)集標(biao)本，並將(jiang)標本在采(cai)集後(hou)的 30 分(fen)鐘(zhong)內於(yu) 2-8^oC 1000×g 離心(xin) 15 分鐘(zhong)，取(qu)上清即可檢測(ce)，或將(jiang)上清置於(yu)-20^oC 或-80^oC 保(bao)存(cun)，但(dan)應避免(mian)反(fan)復(fu)凍融(rong)。

3. 組(zu)織勻漿：

1） 取(qu)適量(liang)組織塊，於(yu)預冷(leng)PBS（0.01mol/L, pH 7.0-7.2）中清(qing)洗去除血(xue)液，稱(cheng)重(zhong)後(hou)備用（組(zu)織塊較(jiao)大(da)需(xu)先(xian)剪碎後(hou)再(zai)勻漿）；

2） 可同(tong)時(shi)選(xuan)用(yong)多(duo)種勻漿方法(fa)達(da)到(dao)較好的破(po)碎效果：首先(xian)將(jiang)組織塊移(yi)入(ru)玻(bo)璃(li)勻漿器，加(jia)入(ru)5-10mL 預冷(leng)PBS 進行充分(fen)研(yan)磨(mo)，該(gai)過(guo)程(cheng)需(xu)在(zai)冰(bing)上進行（有(you)條(tiao)件(jian)實驗室(shi)可選用機器(qi)勻漿）；得(de)到(dao)的勻(yun)漿液可再(zai)利用(yong)超(chao)聲(sheng)破碎或反(fan)復(fu)凍融(rong) 進壹步(bu)處(chu)理（超(chao)聲(sheng)破碎過(guo)程(cheng)中(zhong)註意(yi)冰(bing)浴降溫(wen)；反復(fu)凍融(rong)法(fa)可重(zhong)復(fu)2 次(ci)）。

3） 將(jiang)制(zhi)備好的勻(yun)漿液於(yu)5000×g 離心(xin)5 分鐘(zhong)，留(liu)取(qu)上清即可檢測(ce)。

4. 細胞(bao)裂(lie)解(jie)液：

1）貼(tie)壁(bi)細胞(bao)需(xu)要(yao)先(xian)用胰(yi)酶消化，離(li)心(xin)收(shou)集(ji)細胞(bao)（懸(xuan)浮(fu)細胞(bao)可直接(jie)離(li)心(xin)收(shou)集(ji)）；

2）將(jiang)收(shou)集(ji)到(dao)的細胞(bao)用(yong)冷PBS 洗3 次；

3）物理(li)方法(fa)裂(lie)解(jie)細胞(bao)（可先(xian)超(chao)聲(sheng)破碎細胞(bao)，再(zai)反復(fu)凍融(rong)）：

i 超(chao)聲(sheng)破碎：取(qu)適量(liang)PBS 重(zhong)懸(xuan)細胞(bao)，用(yong)壹定(ding)功(gong)率的超(chao)聲(sheng)波(bo)處(chu)理(li)細胞(bao)懸(xuan)液，使細胞(bao)急(ji)劇(ju)震蕩破(po)裂(lie)。

ii 反復(fu)凍融(rong)：將(jiang)待破碎的細胞(bao)在(zai)-20 ^oC 以(yi)下(xia)冰(bing)凍，室(shi)溫(wen)融(rong)解(jie)，反復(fu)3 次(ci)，使細胞(bao)溶脹破(po)碎。

4）將(jiang)標本於(yu)2-8 ^oC 1500×g 離(li)心(xin)10 分鐘(zhong)，收(shou)集(ji)上清備用。

5. 細胞(bao)培(pei)養上清或(huo)其(qi)它生(sheng)物標(biao)本：

請 1000×g 離心(xin) 20 分鐘(zhong)，取(qu)上清即可檢測(ce)，或將(jiang)上清置於(yu)-20^oC 或-80^oC 保(bao)存(cun)，但(dan)應避免(mian)反(fan)復(fu)凍融(rong)。

註(zhu)意(yi)：

1.         以(yi)上標本(ben)均(jun)需(xu)密(mi)封(feng)保存(cun)，4^oC保存(cun)應(ying)小(xiao)於(yu)1周，-20^oC不(bu)應超(chao)過(guo)1個(ge)月(yue)，-80^oC不(bu)應超(chao)過(guo)2個(ge)月(yue)。

2.         標(biao)本(ben)使用(yong)前應緩(huan)慢均(jun)衡至(zhi)室(shi)溫(wen)，不(bu)應加(jia)熱(re)使(shi)之(zhi)融(rong)解(jie)。

3.         實(shi)驗前紅細胞(bao)裂(lie)解(jie)液必須(xu)用標(biao)準(zhun)品(pin)稀釋(shi)液稀釋(shi)。

小(xiao)鼠Ⅲ組磷(lin)脂(zhi)酶A2(PLA2G3)ELISA試(shi)劑盒試(shi)劑準(zhun)備

1.         使用(yong)前將(jiang)所有(you)的試(shi)劑和標(biao)本緩(huan)慢均(jun)衡至(zhi)室(shi)溫(wen)(18-25oC)，試(shi)劑不(bu)能(neng)直接(jie)在(zai)37oC溶解(jie)。

2.         標(biao)準(zhun)品(pin)(凍幹品)：每(mei)瓶(ping)標準(zhun)品(pin)加(jia)入(ru)標(biao)準(zhun)品(pin)稀釋(shi)液1mL，蓋好後(hou)室(shi)溫(wen)靜置大(da)約10分鐘(zhong)，同(tong)時(shi)反(fan)復(fu)顛(dian)倒/搓(cuo)動(dong)以(yi)助(zhu)溶解(jie)，其濃(nong)度為(wei)50ng/mL。準(zhun)備7個(ge)稀釋(shi)標(biao)準(zhun)品(pin)的EP管，每個(ge)EP管中加(jia)入(ru)150μL的標(biao)準(zhun)品(pin)稀釋(shi)液，如圖(tu)所示(shi)依(yi)次(ci)倍(bei)比稀釋(shi)成(cheng)不(bu)同(tong)的梯(ti)度， 標(biao)準(zhun)品(pin)稀釋(shi)液(0pg/mL)直接(jie)作為(wei)空白孔。為(wei)保證(zheng)實(shi)驗結(jie)果(guo)有(you)效性，每次實驗請使用新(xin)的標(biao)準(zhun)品(pin)溶液。

3.         濃(nong)洗滌液：用580mL蒸(zheng)餾(liu)水(shui)或去離子(zi)水(shui)將(jiang)20mL濃(nong)洗滌液稀釋(shi)至(zhi)600mL，進(jin)行30倍稀釋(shi)。

標(biao)本處理(li)

1.         本(ben)公司只(zhi)對試(shi)劑盒本(ben)身(shen)負(fu)責，不(bu)對因使(shi)用該試(shi)劑盒所(suo)造成(cheng)的樣本消耗負(fu)責，請使用者使(shi)用前充分考(kao)慮(lv)到(dao)樣本的可能(neng)使(shi)用(yong)量(liang)，預留(liu)充足(zu)的樣本。

2.         實驗前應預測(ce)標本(ben)含(han)量，如(ru)果標(biao)本濃(nong)度過(guo)高(gao)，應(ying)對標(biao)本(ben)進(jin)行稀釋(shi)，使(shi)稀釋(shi)後(hou)的標(biao)本(ben)符合試(shi)劑盒的檢(jian)測(ce)範圍(wei)，計算(suan)時再(zai)乘以(yi)相(xiang)應(ying)的稀釋(shi)倍(bei)數(shu)。

3.         若(ruo)所(suo)檢(jian)樣本不(bu)包(bao)含(han)在說(shuo)明書(shu)所(suo)列樣本之(zhi)中，建(jian)議(yi)進(jin)行預實(shi)驗驗證(zheng)其(qi)有(you)效性，並註意(yi)留(liu)存(cun)樣本。

4.         使用化學(xue)裂(lie)解(jie)液制(zhi)備的組(zu)織勻漿或細胞(bao)提取(qu)液可能(neng)會(hui)由(you)於(yu)某些(xie)化學(xue)物(wu)質(zhi)的引入導致  ELISA實驗結(jie)果(guo)偏差。

5.         若(ruo)樣本為(wei)細胞(bao)培(pei)養上清，因該(gai)類(lei)樣本幹擾因素(su) 較多(duo)，如：細胞(bao)狀(zhuang)態(tai)、細胞(bao)數(shu)量(liang)、采(cai)樣時間(jian)等，所(suo)以(yi)可能(neng)存(cun)在(zai)檢(jian)測(ce)不(bu)出(chu)的情(qing)況(kuang)。

6.         某些(xie)天然蛋(dan)白或重(zhong)組(zu)蛋(dan)白，包(bao)括(kuo)原(yuan)核(he)及真(zhen)核(he)重(zhong)組(zu)蛋(dan)白，可能(neng)因為(wei)與本產品(pin)所(suo)使用(yong)的檢(jian)測(ce)抗體及捕(bu)獲(huo)抗體不(bu)匹配(pei)，而(er)不(bu)被(bei)檢測(ce)出(chu)。

7.         建(jian)議(yi)使(shi)用(yong)新鮮樣本，保(bao)存(cun)時(shi)間(jian)過(guo)長(chang)可能(neng)會(hui)存(cun)在(zai)蛋(dan)白降解(jie)或變性導致實驗結(jie)果(guo)偏差。

小(xiao)鼠Ⅲ組磷(lin)脂(zhi)酶A2(PLA2G3)ELISA試(shi)劑盒操(cao)作步(bu)驟(zhou)

1.         加(jia)樣：分別(bie)設(she)空(kong)白孔（空(kong)白對照孔不(bu)加(jia)樣品及(ji)酶標試(shi)劑，其余各(ge)步(bu)操(cao)作相(xiang)同(tong)）、標(biao)準(zhun)孔(kong)、待測(ce)樣品孔(kong)。在(zai)酶標包(bao)被(bei)板上標準(zhun)品(pin)準(zhun)確加(jia)樣50μl，待測(ce)樣品孔(kong)中(zhong)先(xian)加(jia)樣品稀釋(shi)液40μl，然後(hou)再(zai)加(jia)待測(ce)樣品10μl（樣品*終稀釋(shi)度為(wei)5倍(bei)）。加(jia)樣將(jiang)樣品加(jia)於(yu)酶標板孔(kong)底部，盡(jin)量不(bu)觸及(ji)孔(kong)壁(bi)，輕輕(qing)晃動(dong)混勻。

2.         溫(wen)育(yu)：用封(feng)板膜(mo)封(feng)板後(hou)置37℃溫(wen)育(yu)30分鐘(zhong)。  

3.         配(pei)液：將(jiang)20倍濃(nong)縮(suo)洗(xi)滌液用蒸(zheng)餾(liu)水(shui)20倍稀釋(shi)後(hou)備用

4.         洗(xi)滌：小(xiao)心(xin)揭掉(diao)封(feng)板膜(mo)，棄去液體，甩幹，每孔(kong)加(jia)滿(man)洗(xi)滌液，靜置30秒後(hou)棄去，如此重(zhong)復(fu)5次(ci)，拍幹。

5.         加(jia)酶：每孔(kong)加(jia)入(ru)酶標試(shi)劑50μl，空白孔除(chu)外。

6.         溫(wen)育(yu)：操(cao)作同(tong)3。

7.         洗(xi)滌：操(cao)作同(tong)5。

8.         顯(xian)色：每孔先(xian)加(jia)入(ru)顯(xian)色劑A50μl，再(zai)加(jia)入(ru)顯(xian)色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯(xian)色15分鐘(zhong).

9.         終止：每(mei)孔(kong)加(jia)終止液50μl，終止反(fan)應(ying)（此時藍色立(li)轉(zhuan)黃(huang)色）。

10.     測(ce)定：以(yi)空(kong)白空調(tiao)零，450nm波(bo)長(chang)依(yi)序測(ce)量各(ge)孔(kong)的吸(xi)光(guang)度（OD值(zhi)）。 測(ce)定應(ying)在(zai)加(jia)終止液後(hou)15分鐘(zhong)以(yi)內進行。

註(zhu)意(yi)：

1.         試(shi)劑準(zhun)備：準(zhun)備壹次(ci)實驗所(suo)需(xu)要(yao)的酶標條(tiao)，其它(ta)的可從(cong)微孔(kong)板上拆下(xia)，密封(feng)，按照說明(ming)書(shu)要(yao)求保(bao)存(cun)，以(yi)備下次(ci)使用(yong)。

2.         加(jia)樣：實驗操(cao)作中(zhong)請使用壹次(ci)性的吸(xi)頭(tou)，避免(mian)交(jiao)叉汙染(ran)。加(jia)樣時註(zhu)意(yi)不(bu)要(yao)有(you)氣(qi)泡，將(jiang)樣品加(jia)於(yu)酶標板底部，盡(jin)量不(bu)觸及(ji)孔(kong)壁(bi)，輕輕(qing)晃動(dong)混勻。加(jia)樣或加(jia)試(shi)劑時，**個(ge)孔(kong)與*後(hou)壹個(ge)孔(kong)加(jia)樣之(zhi)間的時(shi)間(jian)間隔如果太(tai)大(da)，將(jiang)會(hui)導致不(bu)同(tong)的“預溫(wen)育(yu)”時間(jian)，從(cong)而(er)明顯(xian)地(di)影響(xiang)到(dao)測(ce)量值(zhi)的準(zhun)確性及重(zhong)復(fu)性。因此，壹次(ci)加(jia)樣時間(jian)(包(bao)括(kuo)標準(zhun)品(pin)及(ji)所(suo)有(you)樣品)*好控(kong)制(zhi)在(zai)10分鐘(zhong)內。推薦設(she)置復(fu)孔(kong)進行實驗。

3.          溫(wen)育(yu)：為防止樣品蒸(zheng)發(fa)，實(shi)驗時(shi)請將(jiang)加(jia)上蓋或(huo)覆膜(mo)的酶標板置於(yu)濕盒(he)內，以(yi)避免(mian)液體蒸(zheng)發(fa)，洗(xi)板後(hou)應盡(jin)快(kuai)進行下步(bu)操(cao)作，任(ren)何時侯都應(ying)避免(mian)酶標板處(chu)於(yu)幹燥狀(zhuang)態(tai)，同(tong)時(shi)應(ying)嚴格遵守(shou)給(gei)定(ding)的溫(wen)育(yu)時間(jian)和溫(wen)度。

4.         洗(xi)滌：充分的洗(xi)滌非(fei)常(chang)重(zhong)要(yao)，在每(mei)次(ci)洗滌過(guo)程(cheng)中(zhong)，都要(yao)將(jiang)洗滌液完全甩幹。洗滌過(guo)程(cheng)中(zhong)反應(ying)孔中殘(can)留的洗(xi)滌液應在(zai)濾紙上拍幹，勿將(jiang)濾紙直接(jie)放(fang)入(ru)反(fan)應(ying)孔(kong)中吸(xi)水(shui)，同(tong)時(shi)要(yao)消除板底殘(can)留的液體和(he)手指(zhi)印，避免(mian)影(ying)響(xiang)*後(hou)的酶標儀(yi)讀(du)數(shu)。如(ru)果有(you)自(zi)動(dong)洗板機，應(ying)在熟(shu)練使用(yong)後(hou)再(zai)用到(dao)正式實(shi) 驗過(guo)程(cheng)中(zhong)。

5.         反應時(shi)間(jian)的控(kong)制(zhi)：加(jia)入(ru)底物(wu)後(hou)請定時觀(guan)察反應孔的顏色變化(比如，每隔(ge)10分(fen)鐘(zhong)觀(guan)察壹次(ci))，如顏色較深，請提前加(jia)入(ru)終止液終止反(fan)應(ying)，避免(mian)反(fan)應(ying)過(guo)強(qiang)從(cong)而(er)影響(xiang)酶標儀(yi)光(guang)密度讀(du)數(shu)。

6.         底物(wu)：底物(wu)請避光保(bao)存(cun)，在(zai)儲(chu)存(cun)和(he)溫(wen)育(yu)時避免(mian)強(qiang)光(guang)直接(jie)照射(she)。

7.         如(ru)果(guo)實(shi)驗室(shi)內濕度低(di)於(yu)60%，推薦(jian)使(shi)用(yong)加(jia)濕(shi)器(qi)提高(gao)濕度水(shui)平。

 實驗流(liu)程(cheng)

1.         實(shi)驗前標準(zhun)品(pin)、試(shi)劑及樣本的準(zhun)備；

2.         加(jia)樣（標準(zhun)品(pin)及(ji)樣本）50μL，37℃孵(fu)育(yu)30分鐘(zhong)；

3.         洗板5次(ci)，加(jia)酶標試(shi)劑50ul，37℃孵(fu)育(yu)半小(xiao)時(shi)；

4.         洗(xi)板5次(ci)；加(jia)入(ru)顯(xian)色液A，B各50ul,37℃孵(fu)育(yu)顯色15分鐘(zhong)

5.         加(jia)終止液50μL，立(li)即450nm讀(du)數(shu)。

6.    計算(suan)

小(xiao)鼠Ⅲ組磷(lin)脂(zhi)酶A2(PLA2G3)ELISA試(shi)劑盒計(ji)算(suan)

各標(biao)準(zhun)品(pin)及(ji)樣本O.D.值(zhi)扣(kou)除空白孔O.D.值(zhi)後(hou)作圖(tu)(七點圖(tu))，如設(she)置復(fu)孔(kong)，則應(ying)取(qu)其平均(jun)值(zhi)計算(suan)。以(yi)標(biao)準(zhun)品(pin)的濃(nong)度為(wei)縱(zong)坐標(biao)(或(huo)對數(shu)坐(zuo)標)，O.D.值(zhi)為橫(heng)坐(zuo)標(或(huo)對數(shu)坐(zuo)標），繪(hui)出(chu)標準(zhun)曲線(*佳(jia)方程(cheng)式(shi)應依(yi)回歸(gui)方程(cheng)計(ji)算(suan)的R2值(zhi)來(lai)定，以(yi)R2值(zhi)越趨(qu)近(jin)於(yu)1為好)。推(tui)薦(jian)使(shi)用專業制(zhi)作曲線軟件(jian)進行分析(xi)，如curve expert 1.30，根(gen)據樣品O.D.值(zhi)，由標(biao)準(zhun)曲線查(zha)出(chu)相應的濃(nong)度，乘(cheng)以(yi)稀釋(shi)倍(bei)數(shu)；或(huo)用標(biao)準(zhun)物(wu)的濃(nong)度與(yu)O.D.值(zhi)計算(suan)出(chu)標準(zhun)曲線的回歸(gui)方程(cheng)式(shi)，將(jiang)樣品的O.D.值(zhi)代入(ru)方程(cheng)式(shi)，計算(suan)出(chu)樣品濃(nong)度，再(zai)乘以(yi)稀釋(shi)倍(bei)數(shu)，即為(wei)樣品的實(shi)際(ji)濃(nong)度。

 特(te)異性

本試(shi)劑盒用(yong)於(yu)檢測(ce)小(xiao)鼠Ⅲ組磷(lin)脂(zhi)酶A2(PLA2G3)，經檢(jian)測(ce)與其(qi)它(ta)相(xiang)似(si)物質(zhi)無明顯(xian)交(jiao)叉反(fan)應。

由於(yu)受到(dao)技術(shu)及樣本來(lai)源(yuan)的限(xian)制(zhi)，不(bu)可能(neng)完成(cheng)對所(suo)有(you)相(xiang)關(guan)或(huo)相似(si)物質(zhi)交叉反(fan)應檢(jian)測(ce)，因此本試(shi)劑盒有(you)可能(neng)與(yu)未(wei)經(jing)檢測(ce)的其(qi)它(ta)物質(zhi)有(you)交(jiao)叉反(fan)應。

 精密(mi)度

精密(mi)度用(yong)樣品測(ce)定值(zhi)的變異系數(shu)CV表(biao)示。CV(%) = SD/mean×100

批內差：取(qu)同(tong)批(pi)次(ci)試(shi)劑盒對低(di)、中、高(gao)值(zhi)定值(zhi)樣本進(jin)行定量(liang)檢(jian)測(ce),每份(fen)樣本連(lian)續(xu)測(ce)定20 次(ci)，分(fen)別(bie)計算(suan)不(bu)同(tong)濃(nong)度樣本的平均(jun)值(zhi)及SD值(zhi)。

批(pi)間(jian)差：選取(qu)3個(ge)不(bu)同(tong)批(pi)次(ci)的試(shi)劑盒分(fen)別對低(di)、中、高(gao)值(zhi)定值(zhi)樣本進(jin)行定量(liang)測(ce)定，每(mei)個(ge)樣本使(shi)用(yong)同(tong)壹試(shi)劑盒重(zhong)復(fu)測(ce)定8次(ci)，分(fen)別(bie)計算(suan)不(bu)同(tong)濃(nong)度樣本的平均(jun)值(zhi)及SD值(zhi)。

批(pi)內差： CV<10%

批(pi)間(jian)差(cha)： CV<12%

小(xiao)鼠Ⅲ組磷(lin)脂(zhi)酶A2(PLA2G3)ELISA試(shi)劑盒穩定性

經測(ce)定，試(shi)劑盒在(zai)有(you)效期內按推薦溫(wen)度保(bao)存(cun)，其(qi)活(huo)性降低(di)率小(xiao)於(yu)5%。

為(wei)減(jian)小(xiao)外部因素(su)對試(shi)劑盒破(po)壞前後(hou)檢測(ce)值(zhi)的影(ying)響(xiang)，實驗室(shi)的環(huan)境條(tiao)件(jian)需(xu)盡(jin)量保(bao)持(chi)壹致，尤其(qi)是實(shi)驗室(shi)內溫(wen)度、濕(shi)度及(ji)溫(wen)育(yu)條(tiao)件(jian)。其次(ci)由(you)同(tong)壹實(shi)驗員(yuan)來(lai)進行操(cao)作可減少人為(wei)誤差。