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授(shou)權代(dai)理(li)品(pin)牌(pai)
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ELISA試劑(ji)盒
- 農殘(can)檢測試劑(ji)盒
- 馬(ma)ELISA試劑(ji)盒
- 牛ELISA試劑(ji)盒
- 魚ELISA試劑(ji)盒
- 人ELISA試劑(ji)盒/Human
- 小鼠ELISA試劑(ji)盒/Mouse
- 大(da)鼠ELISA試劑(ji)盒/Rat
- 羊ELISA試劑(ji)盒/Sheep
- 兔(tu)ELISA試劑(ji)盒/ Rabbi...
- 豬ELISA試劑(ji)盒/Porcin...
- 豚(tun)鼠ELISA試劑(ji)盒/Guine...
- 狗ELISA試劑(ji)盒/ Canin...
- 雞(ji)ELISA試劑(ji)盒/Chicke...
- 鴨ELISA試劑(ji)盒
- 植(zhi)物ELISA試劑(ji)盒
- 猴(hou)ELISA試劑(ji)盒/ Monke...
- 其他(ta)ELISA試劑(ji)盒
- 抗體
- 蛋(dan)白(bai)
- CLIA試劑(ji)盒
- 細胞生(sheng)物學(xue)
- 分子(zi)生(sheng)物學(xue)/常(chang)用(yong)試劑(ji)
96T 僅供體(ti)外研(yan)究(jiu)使用(yong),不(bu)用(yong)於臨(lin)床(chuang)診斷(duan)!
豬(zhu)半乳凝素1(GAL1)ELISA試劑(ji)盒
本(ben)試劑(ji)盒運用(yong)雙(shuang)抗體(ti)夾心(xin)ELISA法(fa)定(ding)量(liang)測定豬(zhu)血(xue)清、血漿(jiang)、組(zu)織(zhi)勻(yun)漿(jiang)、細胞裂解液(ye)、細胞培(pei)養上(shang)清液(ye)和(he)其他(ta)生(sheng)物液(ye)體中(zhong)豬半乳凝素1(GAL1)含(han)量(liang)。
檢測範圍
0.625-40 ng/mL
*低檢測限
0.125 ng/mL
實(shi)驗原(yuan)理(li)
將(jiang)豬(zhu)半乳凝素1(GAL1)抗(kang)體(ti)包被於96孔微孔板(ban)中,制(zhi)成固(gu)相(xiang)載體(ti),向(xiang)微孔中分別(bie)加入(ru)標準(zhun)品(pin)或(huo)標本,其中(zhong)的(de)豬(zhu)半乳凝素1(GAL1)與連接(jie)於固(gu)相(xiang)載體(ti)上的(de)抗體(ti)結合(he),然後加入(ru)生(sheng)物素化(hua)的(de)豬(zhu)半乳凝素1(GAL1)抗(kang)體(ti),將(jiang)未結(jie)合(he)的(de)生(sheng)物素化(hua)抗體(ti)洗(xi)凈(jing)後,加入(ru)HRP標記的(de)親(qin)和(he)素,再(zai)次徹(che)底(di)洗(xi)滌(di)後加入(ru)TMB底(di)物顯(xian)色。TMB在(zai)過氧化(hua)物酶的(de)催(cui)化(hua)下(xia)轉化(hua)成藍(lan)色(se),並(bing)在(zai)酸(suan)的(de)作用(yong)下(xia)轉化(hua)成*終的(de)黃(huang)色(se)。顏(yan)色的(de)深淺(qian)和(he)樣品(pin)中(zhong)的(de)豬(zhu)半乳凝素1(GAL1)呈(cheng)正(zheng)相(xiang)關。用(yong)酶標儀(yi)在(zai)450nm波長(chang)下(xia)測定吸(xi)光(guang)度(du)(O.D.值(zhi)),計算樣品(pin)濃(nong)度。
試劑(ji)盒內容
|
試劑(ji)名(ming)稱(cheng) |
數(shu)量(liang) |
試劑(ji)名(ming)稱(cheng) |
數(shu)量(liang) |
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96孔(kong)板(ban)(預(yu)包被) |
1 |
96孔(kong)板(ban)覆(fu)膜 |
2 |
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標準(zhun)品(pin) |
0.5ml×1 |
標準(zhun)品(pin)稀釋(shi)液(ye) |
1.5ml×1瓶(ping) |
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顯(xian)色劑(ji)A液(ye) |
6ml×1瓶(ping) |
樣品(pin)稀釋(shi)液(ye) |
6ml×1瓶(ping) |
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顯(xian)色劑(ji)B液(ye) |
6ml×1瓶(ping) |
終止(zhi)液(ye) |
6ml×1瓶(ping) |
|
酶標試劑(ji) |
6ml×1瓶(ping) |
密封袋 |
1 |
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濃(nong)洗(xi)滌(di)液(ye)(30×) |
1×20mL |
使用(yong)說明(ming)書 |
1 |
豬(zhu)半乳凝素1(GAL1)ELISA試劑(ji)盒需自備的(de)設(she)備及(ji)試劑(ji)
1. 450±10nm濾(lv)光(guang)片的(de)酶標儀(yi)(建(jian)議儀(yi)器(qi)使用(yong)前(qian)提(ti)前(qian)預(yu)熱)
2. 單(dan)道或(huo)多(duo)道微量(liang)加液(ye)器(qi)及(ji)吸(xi)頭
3. 稀釋(shi)樣品(pin)的(de)EP管(guan)
4. 蒸(zheng)餾(liu)水或(huo)去離子(zi)水(shui)
5. 吸(xi)水(shui)紙(zhi)
6. 盛放(fang)洗(xi)液(ye)的(de)容器(qi)
試劑(ji)盒的(de)儲存(cun)及(ji)有效期
1. 未(wei)開(kai)封的(de)試劑(ji)盒:所有試劑(ji)均(jun)按試劑(ji)瓶(ping)標簽上(shang)所示保存(cun)。請(qing)註意,收到(dao)試劑(ji)盒後請(qing)盡快將(jiang)TMB 洗(xi)滌(di)液(ye),終止(zhi)液(ye)保存(cun)於4℃,其他(ta)試劑(ji)保存(cun)於-20℃。
2. 使用(yong)後的(de)試劑(ji)盒:剩余試劑(ji)仍(reng)需按照(zhao)試劑(ji)瓶(ping)標簽所(suo)示的(de)溫度(du)保存(cun),開(kai)封後的(de)酶標板(ban)要(yao)加幹(gan)燥(zao)劑(ji)後密封保存(cun)於-20℃,避(bi)免潮濕。
註(zhu)意:
試劑(ji)盒內酶標條可拆(chai)卸,按實(shi)驗需(xu)求(qiu)可(ke)分多(duo)次使用(yong);使用(yong)後的(de)剩余試劑(ji)盒建議在**實(shi)驗後 1個月內使用(yong)完畢。產品(pin)過期時間(jian)以(yi)盒子(zi)上(shang)的(de)標簽為準(zhun),保質期內所(suo)有組(zu)分都(dou)確(que)保是(shi)穩定的(de)。
豬(zhu)半乳凝素1(GAL1)ELISA試劑(ji)盒標本的(de)采(cai)集(ji)與保存(cun)
1. 血(xue)清(qing):
將(jiang)收集(ji)於血清分離管(guan)的(de)全血(xue)標本在(zai)室溫放(fang)置 2 小(xiao)時或(huo) 4oC 過夜,然後 1000×g 離心(xin) 20 分鐘(zhong),取(qu)上清即可,或將(jiang)上清(qing)置(zhi)於-20oC 或-80oC 保存(cun),但(dan)應避(bi)免反復(fu)凍(dong)融。
2. 血(xue)漿(jiang):
用(yong) EDTA 或肝(gan)素作(zuo)為抗凝劑采(cai)集(ji)標本,並(bing)將(jiang)標本在(zai)采(cai)集(ji)後的(de) 30 分鐘(zhong)內於 2-8oC 1000×g 離心(xin) 15 分鐘(zhong),取(qu)上清即可檢測,或將(jiang)上清(qing)置(zhi)於-20oC 或-80oC 保存(cun),但(dan)應避(bi)免反復(fu)凍(dong)融。
3. 組(zu)織(zhi)勻(yun)漿(jiang):
1) 取(qu)適(shi)量(liang)組(zu)織(zhi)塊,於預(yu)冷PBS(0.01mol/L, pH 7.0-7.2)中清洗(xi)去除血(xue)液(ye),稱重後備用(yong)(組(zu)織(zhi)塊較(jiao)大(da)需先(xian)剪碎(sui)後再勻(yun)漿(jiang));
2) 可(ke)同時選(xuan)用(yong)多(duo)種勻(yun)漿(jiang)方(fang)法(fa)達(da)到(dao)較(jiao)好(hao)的(de)破碎(sui)效果:首先(xian)將(jiang)組(zu)織(zhi)塊移(yi)入玻(bo)璃(li)勻(yun)漿(jiang)器(qi),加入(ru)5-10mL 預(yu)冷PBS 進(jin)行充(chong)分研(yan)磨(mo),該過程需(xu)在冰(bing)上(shang)進(jin)行(有條件實(shi)驗室(shi)可(ke)選用(yong)機(ji)器(qi)勻(yun)漿(jiang));得(de)到(dao)的(de)勻(yun)漿(jiang)液(ye)可再(zai)利(li)用(yong)超(chao)聲(sheng)破碎(sui)或反(fan)復(fu)凍(dong)融 進(jin)壹步(bu)處(chu)理(li)(超(chao)聲(sheng)破碎(sui)過程中(zhong)註意冰(bing)浴降溫;反(fan)復(fu)凍(dong)融法(fa)可(ke)重復(fu)2 次)。
3) 將(jiang)制(zhi)備好(hao)的(de)勻(yun)漿(jiang)液(ye)於5000×g 離心(xin)5 分鐘(zhong),留取上(shang)清(qing)即可檢測。
4. 細(xi)胞裂解液(ye):
1)貼壁細胞需要(yao)先(xian)用(yong)胰酶消化(hua),離心(xin)收集(ji)細胞(懸(xuan)浮細(xi)胞可直(zhi)接離心(xin)收集(ji));
2)將(jiang)收集(ji)到(dao)的(de)細胞用(yong)冷PBS 洗(xi)3 次;
3)物理(li)方(fang)法(fa)裂解細(xi)胞(可先(xian)超(chao)聲(sheng)破碎(sui)細胞,再反(fan)復(fu)凍(dong)融):
i 超(chao)聲(sheng)破碎(sui):取適(shi)量(liang)PBS 重懸(xuan)細胞,用(yong)壹定(ding)功(gong)率的(de)超(chao)聲(sheng)波處(chu)理(li)細胞懸(xuan)液(ye),使細胞急(ji)劇震(zhen)蕩(dang)破(po)裂。
ii 反(fan)復(fu)凍(dong)融:將(jiang)待破(po)碎(sui)的(de)細胞在-20 oC 以(yi)下(xia)冰(bing)凍(dong),室溫融解,反(fan)復(fu)3 次,使細胞溶脹(zhang)破碎(sui)。
4)將(jiang)標本於2-8 oC 1500×g 離心(xin)10 分鐘(zhong),收(shou)集上清備用(yong)。
5. 細(xi)胞培(pei)養上(shang)清或(huo)其它生(sheng)物標本:
請(qing) 1000×g 離心(xin) 20 分鐘(zhong),取(qu)上清即可檢測,或將(jiang)上清(qing)置(zhi)於-20oC 或-80oC 保存(cun),但(dan)應避(bi)免反復(fu)凍(dong)融。
註(zhu)意:
1. 以(yi)上(shang)標本均(jun)需密封保存(cun),4oC保存(cun)應(ying)小於1周,-20oC不(bu)應超(chao)過1個月,-80oC不(bu)應超(chao)過2個月。
2. 標本使用(yong)前(qian)應緩慢(man)均(jun)衡至(zhi)室(shi)溫,不(bu)應加(jia)熱使之融解。
3. 實(shi)驗前(qian)紅細胞裂解液(ye)必(bi)須用(yong)標準(zhun)品(pin)稀釋(shi)液(ye)稀釋(shi)。
豬(zhu)半乳凝素1(GAL1)ELISA試劑(ji)盒試劑(ji)準(zhun)備
1. 使用(yong)前(qian)將(jiang)所有的(de)試劑(ji)和(he)標本緩慢(man)均(jun)衡至(zhi)室(shi)溫(18-25oC),試劑(ji)不(bu)能直(zhi)接在37oC溶解(jie)。
2. 標準(zhun)品(pin)(凍(dong)幹品(pin)):每(mei)瓶標準(zhun)品(pin)加(jia)入(ru)標準(zhun)品(pin)稀釋(shi)液(ye)1mL,蓋好後室溫靜置(zhi)大(da)約(yue)10分鐘(zhong),同時反(fan)復(fu)顛(dian)倒/搓動(dong)以(yi)助(zhu)溶解(jie),其濃(nong)度為40 ng/mL。準(zhun)備7個稀釋(shi)標準(zhun)品(pin)的(de)EP管(guan),每(mei)個EP管(guan)中加(jia)入(ru)150μL的(de)標準(zhun)品(pin)稀釋(shi)液(ye),如圖(tu)所示(shi)依次倍(bei)比(bi)稀釋(shi)成不(bu)同的(de)梯(ti)度, 標準(zhun)品(pin)稀釋(shi)液(ye)(0pg/mL)直接(jie)作為空(kong)白(bai)孔。為保證(zheng)實驗結(jie)果有效性,每(mei)次實驗請(qing)使用(yong)新(xin)的(de)標準(zhun)品(pin)溶液(ye)。
3. 濃(nong)洗(xi)滌(di)液(ye):用(yong)580mL蒸(zheng)餾(liu)水或(huo)去離子(zi)水(shui)將(jiang)20mL濃(nong)洗(xi)滌(di)液(ye)稀釋(shi)至(zhi)600mL,進(jin)行30倍(bei)稀釋(shi)。
標本處(chu)理
1. 本(ben)公(gong)司只對試劑(ji)盒本身負(fu)責,不(bu)對因使用(yong)該試劑(ji)盒所造成的(de)樣本(ben)消耗負(fu)責,請(qing)使用(yong)者使用(yong)前(qian)充分考(kao)慮到(dao)樣本(ben)的(de)可能(neng)使用(yong)量(liang),預(yu)留充足的(de)樣本(ben)。
2. 實(shi)驗前(qian)應預(yu)測標本含(han)量(liang),如果標本濃(nong)度過高,應對標本進(jin)行稀釋(shi),使稀釋(shi)後的(de)標本符(fu)合試劑(ji)盒的(de)檢測範圍,計算時再(zai)乘(cheng)以相(xiang)應的(de)稀釋(shi)倍(bei)數(shu)。
3. 若(ruo)所(suo)檢樣本(ben)不(bu)包含(han)在說明(ming)書所列(lie)樣本(ben)之(zhi)中(zhong),建(jian)議進(jin)行預(yu)實驗驗證(zheng)其有效性,並(bing)註(zhu)意留存(cun)樣本(ben)。
4. 使用(yong)化(hua)學裂解液(ye)制(zhi)備的(de)組(zu)織(zhi)勻(yun)漿(jiang)或細(xi)胞提(ti)取(qu)液(ye)可能(neng)會由於某(mou)些化(hua)學物質的(de)引入導致(zhi) ELISA實(shi)驗結(jie)果偏(pian)差。
5. 若(ruo)樣本(ben)為細胞培(pei)養上(shang)清,因該類樣本(ben)幹(gan)擾(rao)因素 較(jiao)多(duo),如:細胞狀態(tai)、細胞數量(liang)、采(cai)樣時間(jian)等(deng),所以可(ke)能(neng)存(cun)在(zai)檢測不(bu)出的(de)情(qing)況。
6. 某(mou)些天(tian)然蛋白(bai)或重組(zu)蛋(dan)白(bai),包括原核(he)及(ji)真核(he)重組(zu)蛋(dan)白(bai),可能因為與本產品(pin)所(suo)使用(yong)的(de)檢測抗體(ti)及(ji)捕獲(huo)抗(kang)體不(bu)匹配,而不(bu)被檢測出。
7. 建(jian)議(yi)使用(yong)新(xin)鮮(xian)樣本(ben),保存(cun)時間(jian)過長(chang)可能(neng)會存(cun)在(zai)蛋白(bai)降解或變(bian)性導致(zhi)實(shi)驗結(jie)果偏(pian)差。
豬(zhu)半乳凝素1(GAL1)ELISA試劑(ji)盒操(cao)作步(bu)驟(zhou)
1. 加(jia)樣:分別(bie)設(she)空(kong)白(bai)孔(空(kong)白(bai)對照孔不(bu)加樣品(pin)及(ji)酶標試劑(ji),其余各(ge)步(bu)操(cao)作相(xiang)同)、標準(zhun)孔、待測樣品(pin)孔(kong)。在(zai)酶標包被板(ban)上標準(zhun)品(pin)準(zhun)確加樣50μl,待(dai)測樣品(pin)孔(kong)中(zhong)先(xian)加樣品(pin)稀釋(shi)液(ye)40μl,然後再加(jia)待(dai)測樣品(pin)10μl(樣品(pin)*終稀釋(shi)度(du)為5倍(bei))。加(jia)樣將(jiang)樣品(pin)加(jia)於酶標板(ban)孔底(di)部(bu),盡量(liang)不(bu)觸及(ji)孔壁,輕輕晃(huang)動(dong)混(hun)勻(yun)。
2. 溫育:用(yong)封板(ban)膜封(feng)板(ban)後置37℃溫育30分鐘(zhong)。
3. 配(pei)液(ye):將(jiang)20倍(bei)濃(nong)縮洗(xi)滌(di)液(ye)用(yong)蒸(zheng)餾(liu)水20倍(bei)稀釋(shi)後備用(yong)
4. 洗(xi)滌(di):小心(xin)揭掉封板(ban)膜,棄(qi)去液(ye)體,甩幹,每(mei)孔加(jia)滿洗(xi)滌(di)液(ye),靜置(zhi)30秒(miao)後棄去,如此重復(fu)5次,拍幹。
5. 加(jia)酶:每(mei)孔加(jia)入(ru)酶標試劑(ji)50μl,空(kong)白(bai)孔除外。
6. 溫育:操(cao)作同3。
7. 洗(xi)滌(di):操(cao)作同5。
8. 顯(xian)色:每(mei)孔先(xian)加入(ru)顯(xian)色劑(ji)A50μl,再加入(ru)顯(xian)色劑(ji)B50μl,輕輕震蕩(dang)混(hun)勻(yun),37℃避(bi)光顯(xian)色15分鐘(zhong).
9. 終止(zhi):每(mei)孔加(jia)終止(zhi)液(ye)50μl,終止(zhi)反(fan)應(ying)(此時藍(lan)色(se)立(li)轉黃(huang)色(se))。
10. 測定:以(yi)空(kong)白(bai)空(kong)調零(ling),450nm波長(chang)依序(xu)測量(liang)各(ge)孔的(de)吸(xi)光(guang)度(du)(OD值(zhi))。 測定應(ying)在(zai)加終止(zhi)液(ye)後15分鐘(zhong)以(yi)內進(jin)行。
註(zhu)意:
1. 試劑(ji)準(zhun)備:準(zhun)備壹次實驗所(suo)需(xu)要(yao)的(de)酶標條,其它的(de)可從(cong)微孔板(ban)上拆(chai)下(xia),密封,按照(zhao)說明(ming)書要(yao)求(qiu)保存(cun),以(yi)備下(xia)次使用(yong)。
2. 加(jia)樣:實(shi)驗操(cao)作中(zhong)請(qing)使用(yong)壹次性的(de)吸(xi)頭,避(bi)免交叉(cha)汙(wu)染。加樣時註(zhu)意不(bu)要(yao)有氣泡(pao),將(jiang)樣品(pin)加(jia)於酶標板(ban)底(di)部(bu),盡量(liang)不(bu)觸及(ji)孔壁,輕輕晃(huang)動(dong)混(hun)勻(yun)。加(jia)樣或(huo)加(jia)試劑(ji)時,**個孔與*後壹個孔加樣之(zhi)間(jian)的(de)時間(jian)間(jian)隔如果太大(da),將(jiang)會導致(zhi)不(bu)同的(de)“預(yu)溫育”時間(jian),從(cong)而明(ming)顯(xian)地影響(xiang)到(dao)測量(liang)值(zhi)的(de)準(zhun)確性及(ji)重復(fu)性(xing)。因此,壹次加樣時間(jian)(包(bao)括標準(zhun)品(pin)及(ji)所有樣品(pin))*好(hao)控(kong)制(zhi)在10分鐘(zhong)內。推(tui)薦(jian)設(she)置(zhi)復(fu)孔(kong)進(jin)行實(shi)驗。
3. 溫育:為防止(zhi)樣品(pin)蒸(zheng)發,實(shi)驗時請(qing)將(jiang)加上(shang)蓋或覆(fu)膜的(de)酶標板(ban)置於濕盒內,以(yi)避(bi)免液(ye)體蒸(zheng)發,洗(xi)板(ban)後應盡快進(jin)行下(xia)步(bu)操(cao)作,任何時侯(hou)都(dou)應(ying)避(bi)免酶標板(ban)處於幹燥狀態(tai),同時應(ying)嚴(yan)格遵守(shou)給定的(de)溫育時間(jian)和(he)溫度(du)。
4. 洗(xi)滌(di):充(chong)分的(de)洗(xi)滌(di)非常(chang)重要(yao),在每(mei)次洗(xi)滌(di)過程中(zhong),都(dou)要(yao)將(jiang)洗(xi)滌(di)液(ye)完全(quan)甩幹。洗(xi)滌(di)過程中(zhong)反應(ying)孔中殘(can)留的(de)洗(xi)滌(di)液(ye)應在(zai)濾紙(zhi)上拍幹,勿將(jiang)濾紙(zhi)直接(jie)放入(ru)反應孔中(zhong)吸(xi)水(shui),同時要(yao)消除板(ban)底(di)殘(can)留的(de)液(ye)體和(he)手指(zhi)印(yin),避(bi)免影響(xiang)*後的(de)酶標儀(yi)讀(du)數。如果有自動洗(xi)板(ban)機(ji),應(ying)在(zai)熟(shu)練(lian)使用(yong)後再用(yong)到正(zheng)式實 驗過程中(zhong)。
5. 反(fan)應(ying)時間(jian)的(de)控制(zhi):加(jia)入(ru)底(di)物後請(qing)定時觀察反應(ying)孔的(de)顏(yan)色變(bian)化(hua)(比如,每(mei)隔10分鐘(zhong)觀察壹次),如顏(yan)色較(jiao)深(shen),請(qing)提(ti)前(qian)加入終止(zhi)液(ye)終止(zhi)反(fan)應(ying),避(bi)免反應(ying)過強從(cong)而影響(xiang)酶標儀(yi)光(guang)密度讀(du)數。
6. 底(di)物:底(di)物請(qing)避(bi)光保存(cun),在(zai)儲存(cun)和(he)溫育時避(bi)免強光(guang)直(zhi)接照(zhao)射。
7. 如果實驗室(shi)內濕(shi)度(du)低於60%,推(tui)薦(jian)使用(yong)加濕(shi)器(qi)提(ti)高濕度水(shui)平。
實(shi)驗流(liu)程(cheng)
1. 實(shi)驗前(qian)標準(zhun)品(pin)、試劑(ji)及(ji)樣本(ben)的(de)準(zhun)備;
2. 加(jia)樣(標準(zhun)品(pin)及(ji)樣本(ben))50μL,37℃孵(fu)育30分鐘(zhong);
3. 洗(xi)板(ban)5次,加酶標試劑(ji)50ul,37℃孵(fu)育半小時;
4. 洗(xi)板(ban)5次;加入顯(xian)色液(ye)A,B各(ge)50ul,37℃孵(fu)育顯(xian)色15分鐘(zhong)
5. 加(jia)終止(zhi)液(ye)50μL,立即450nm讀(du)數。
6. 計算
豬(zhu)半乳凝素1(GAL1)ELISA試劑(ji)盒計算
各(ge)標準(zhun)品(pin)及(ji)樣本(ben)O.D.值(zhi)扣(kou)除空(kong)白(bai)孔O.D.值(zhi)後作圖(tu)(七點圖(tu)),如設(she)置(zhi)復(fu)孔(kong),則(ze)應取其平(ping)均(jun)值(zhi)計算。以標準(zhun)品(pin)的(de)濃(nong)度為縱(zong)坐(zuo)標(或對(dui)數坐(zuo)標),O.D.值(zhi)為橫(heng)坐(zuo)標(或對(dui)數坐(zuo)標),繪出標準(zhun)曲線(xian)(*佳(jia)方(fang)程(cheng)式應依回(hui)歸(gui)方(fang)程(cheng)計算的(de)R2值(zhi)來(lai)定,以(yi)R2值(zhi)越(yue)趨近於1為好)。推(tui)薦(jian)使用(yong)專(zhuan)業(ye)制(zhi)作曲線(xian)軟(ruan)件(jian)進(jin)行分析(xi),如curve expert 1.30,根據樣品(pin)O.D.值(zhi),由(you)標準(zhun)曲線(xian)查出相(xiang)應的(de)濃(nong)度,乘(cheng)以稀釋(shi)倍(bei)數(shu);或(huo)用(yong)標準(zhun)物的(de)濃(nong)度與O.D.值(zhi)計算出標準(zhun)曲線(xian)的(de)回歸(gui)方(fang)程(cheng)式,將(jiang)樣品(pin)的(de)O.D.值(zhi)代(dai)入(ru)方(fang)程(cheng)式,計算出樣品(pin)濃(nong)度,再(zai)乘以稀釋(shi)倍(bei)數(shu),即為樣品(pin)的(de)實際(ji)濃(nong)度。
特(te)異(yi)性
本(ben)試劑(ji)盒用(yong)於檢測豬半乳凝素1(GAL1),經(jing)檢測與其它相(xiang)似物質無明(ming)顯(xian)交叉(cha)反應。
由(you)於受到(dao)技(ji)術(shu)及(ji)樣本(ben)來(lai)源(yuan)的(de)限制(zhi),不(bu)可能(neng)完成對所(suo)有相(xiang)關或(huo)相(xiang)似物質交叉(cha)反(fan)應檢測,因此本(ben)試劑(ji)盒有可能與未經(jing)檢測的(de)其它物質有交叉反應(ying)。
精(jing)密度
精(jing)密度用(yong)樣品(pin)測定值(zhi)的(de)變異(yi)系(xi)數(shu)CV表示。CV(%) = SD/mean×100
批(pi)內差:取(qu)同批(pi)次試劑(ji)盒對低、中(zhong)、高值(zhi)定(ding)值(zhi)樣本(ben)進(jin)行定(ding)量(liang)檢測,每(mei)份樣本(ben)連(lian)續(xu)測定20 次,分別(bie)計算不(bu)同濃(nong)度樣本(ben)的(de)平均(jun)值(zhi)及(ji)SD值(zhi)。
批(pi)間差:選(xuan)取(qu)3個不(bu)同批(pi)次的(de)試劑(ji)盒分別(bie)對低、中(zhong)、高值(zhi)定(ding)值(zhi)樣本(ben)進(jin)行定(ding)量(liang)測定,每(mei)個樣本(ben)使用(yong)同壹試劑(ji)盒重復(fu)測定8次,分別(bie)計算不(bu)同濃(nong)度樣本(ben)的(de)平均(jun)值(zhi)及(ji)SD值(zhi)。
批(pi)內差: CV<10%
批(pi)間差: CV<12%
豬(zhu)半乳凝素1(GAL1)ELISA試劑(ji)盒穩定性
經(jing)測定,試劑(ji)盒在有效期內按推(tui)薦(jian)溫度(du)保存(cun),其活性(xing)降(jiang)低率小於5%。
為減(jian)小外部(bu)因素對(dui)試劑(ji)盒破壞前(qian)後檢測值(zhi)的(de)影響(xiang),實(shi)驗室(shi)的(de)環境條件需(xu)盡量(liang)保持壹致(zhi),尤(you)其是(shi)實驗室(shi)內溫度(du)、濕度(du)及(ji)溫育條件。其次由同壹實(shi)驗員來(lai)進(jin)行操(cao)作可(ke)減(jian)少人(ren)為誤差。



