產(chan)品(pin)名(ming)稱(cheng)：豬補體(ti)成(cheng)分5a(C5a)ELISA試劑(ji)盒(he)

                                                       96T       僅(jin)供(gong)體(ti)外研究(jiu)使用，不用於臨(lin)床(chuang)診斷(duan)!

豬(zhu)補體(ti)成(cheng)分5a(C5a)ELISA試劑(ji)盒(he)

本(ben)試劑(ji)盒(he)運用雙(shuang)抗(kang)體夾心ELISA法定量(liang)測(ce)定豬血清、血漿(jiang)、組織(zhi)勻(yun)漿(jiang)、細(xi)胞(bao)裂解液、細(xi)胞(bao)培養上(shang)清(qing)液和(he)其(qi)他生物(wu)液體中(zhong)豬(zhu)補體(ti)成(cheng)分5a(C5a)含(han)量(liang)。

 檢測(ce)範(fan)圍(wei)

0.156-10ng/mL

 *低(di)檢測(ce)限

0.072ng/mL

 實驗原理(li)

將(jiang)豬(zhu)補體(ti)成(cheng)分5a(C5a)抗(kang)體(ti)包被於96孔微孔板中，制(zhi)成(cheng)固相載(zai)體，向(xiang)微(wei)孔中分別加(jia)入標(biao)準品或標(biao)本(ben)，其(qi)中(zhong)的豬(zhu)補體(ti)成(cheng)分5a(C5a)與(yu)連(lian)接於(yu)固相載(zai)體上(shang)的抗體(ti)結合，然後加(jia)入生物(wu)素化的豬(zhu)補體(ti)成(cheng)分5a(C5a)抗(kang)體(ti)，將(jiang)未(wei)結合的生物(wu)素化抗(kang)體(ti)洗凈(jing)後(hou)，加(jia)入HRP標(biao)記(ji)的親和(he)素(su)，再次(ci)徹底(di)洗滌後(hou)加(jia)入TMB底(di)物(wu)顯色。TMB在過氧(yang)化(hua)物(wu)酶(mei)的催化(hua)下(xia)轉(zhuan)化成(cheng)藍色(se)，並(bing)在酸(suan)的作(zuo)用下轉(zhuan)化成(cheng)*終(zhong)的黃(huang)色。顏色的深淺(qian)和(he)樣(yang)品中(zhong)的豬(zhu)補體(ti)成(cheng)分5a(C5a)呈(cheng)正相(xiang)關(guan)。用酶(mei)標(biao)儀(yi)在450nm波長(chang)下測(ce)定吸光度(du)(O.D.值(zhi))，計算(suan)樣(yang)品濃(nong)度(du)。

 試劑(ji)盒(he)內容

豬(zhu)補體(ti)成(cheng)分5a(C5a)ELISA試劑(ji)盒(he)需自(zi)備的設(she)備(bei)及試劑(ji)

1.         450±10nm濾(lv)光(guang)片(pian)的酶(mei)標(biao)儀(yi)(建(jian)議(yi)儀(yi)器(qi)使用前提(ti)前(qian)預(yu)熱)

2.         單道(dao)或多(duo)道(dao)微量(liang)加(jia)液器(qi)及吸頭

3.         稀(xi)釋樣(yang)品的EP管(guan)

4.         蒸(zheng)餾(liu)水或去離(li)子水(shui)

5.         吸水紙(zhi)

6.         盛(sheng)放(fang)洗液的容器(qi)

 試劑(ji)盒(he)的儲存及有(you)效期

1.         未(wei)開(kai)封(feng)的試劑(ji)盒(he)：所有(you)試劑(ji)均(jun)按(an)試劑(ji)瓶標(biao)簽(qian)上(shang)所(suo)示保(bao)存。請註(zhu)意，收(shou)到(dao)試劑(ji)盒(he)後請盡(jin)快將(jiang)TMB 洗滌液(ye)，終(zhong)止液保(bao)存於(yu)4℃，其他(ta)試劑(ji)保(bao)存於(yu)-20℃。

2.         使用後的試劑(ji)盒(he)：剩(sheng)余試劑(ji)仍(reng)需(xu)按(an)照試劑(ji)瓶標(biao)簽(qian)所(suo)示的溫度(du)保(bao)存，開(kai)封(feng)後的酶(mei)標(biao)板(ban)要(yao)加(jia)幹(gan)燥(zao)劑(ji)後(hou)密封(feng)保(bao)存於(yu)-20℃，避免(mian)潮(chao)濕。

註(zhu)意：

試劑(ji)盒(he)內酶(mei)標(biao)條(tiao)可(ke)拆(chai)卸，按(an)實驗需求(qiu)可(ke)分多(duo)次(ci)使用；使用後的剩(sheng)余試劑(ji)盒(he)建議(yi)在**實驗後 1個(ge)月(yue)內使用完畢。產(chan)品(pin)過期(qi)時間以盒(he)子上(shang)的標(biao)簽(qian)為(wei)準，保(bao)質(zhi)期(qi)內所有(you)組(zu)分都(dou)確保(bao)是穩定的。

豬(zhu)補體(ti)成(cheng)分5a(C5a)ELISA試劑(ji)盒(he)標(biao)本(ben)的采(cai)集(ji)與(yu)保(bao)存

1.         血清：

將(jiang)收集(ji)於(yu)血清分離(li)管(guan)的全血標(biao)本(ben)在室溫放置(zhi) 2 小(xiao)時或 4^oC 過夜(ye)，然後(hou) 1000×g 離(li)心 20 分鐘，取(qu)上(shang)清(qing)即可(ke)，或將(jiang)上(shang)清(qing)置(zhi)於(yu)-20^oC 或-80^oC 保(bao)存，但應(ying)避免反(fan)復(fu)凍融(rong)。

2.         血漿(jiang)：

用 EDTA 或肝素(su)作(zuo)為(wei)抗凝劑(ji)采(cai)集(ji)標(biao)本(ben)，並(bing)將(jiang)標(biao)本(ben)在采(cai)集(ji)後(hou)的 30 分鐘內於 2-8^oC 1000×g 離(li)心 15 分鐘，取(qu)上(shang)清(qing)即可(ke)檢測(ce)，或將(jiang)上(shang)清(qing)置(zhi)於(yu)-20^oC 或-80^oC 保(bao)存，但應(ying)避免反(fan)復(fu)凍融(rong)。

3. 組(zu)織(zhi)勻(yun)漿(jiang)：

1） 取(qu)適量(liang)組(zu)織(zhi)塊(kuai)，於預(yu)冷PBS（0.01mol/L, pH 7.0-7.2）中(zhong)清(qing)洗去除血液，稱(cheng)重後(hou)備(bei)用（組織(zhi)塊(kuai)較(jiao)大需先剪碎(sui)後再勻(yun)漿(jiang)）；

2） 可(ke)同時選用多(duo)種勻(yun)漿(jiang)方法(fa)達到(dao)較(jiao)好(hao)的破碎(sui)效果：首(shou)先(xian)將(jiang)組織(zhi)塊(kuai)移(yi)入玻璃勻(yun)漿(jiang)器(qi)，加(jia)入5-10mL 預(yu)冷PBS 進(jin)行充分研磨(mo)，該(gai)過程需在冰上(shang)進(jin)行（有(you)條件實驗室可(ke)選用機器(qi)勻(yun)漿(jiang)）；得(de)到(dao)的勻(yun)漿(jiang)液可(ke)再利用超(chao)聲(sheng)破(po)碎(sui)或反復(fu)凍融(rong) 進(jin)壹步(bu)處(chu)理(li)（超(chao)聲(sheng)破(po)碎(sui)過程中註(zhu)意冰(bing)浴降(jiang)溫；反(fan)復(fu)凍融(rong)法可(ke)重復(fu)2 次(ci)）。

3） 將(jiang)制(zhi)備(bei)好(hao)的勻(yun)漿(jiang)液於(yu)5000×g 離(li)心5 分鐘，留取(qu)上(shang)清(qing)即可(ke)檢測(ce)。

4. 細(xi)胞(bao)裂解液：

1）貼(tie)壁(bi)細(xi)胞(bao)需要先用胰酶(mei)消(xiao)化(hua)，離(li)心收集細(xi)胞(bao)（懸(xuan)浮(fu)細(xi)胞(bao)可(ke)直接離(li)心收集）；

2）將(jiang)收集(ji)到(dao)的細(xi)胞(bao)用冷PBS 洗3 次(ci)；

3）物(wu)理方法(fa)裂解細(xi)胞(bao)（可(ke)先超(chao)聲(sheng)破(po)碎(sui)細(xi)胞(bao)，再反復(fu)凍融(rong)）：

i 超(chao)聲(sheng)破(po)碎(sui)：取(qu)適量(liang)PBS 重(zhong)懸(xuan)細(xi)胞(bao)，用壹定功(gong)率的超(chao)聲(sheng)波(bo)處(chu)理(li)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液，使細(xi)胞(bao)急劇(ju)震(zhen)蕩破裂。

ii 反(fan)復(fu)凍融(rong)：將(jiang)待(dai)破(po)碎(sui)的細(xi)胞(bao)在-20 ^oC 以(yi)下(xia)冰(bing)凍，室溫融(rong)解，反復(fu)3 次(ci)，使細(xi)胞(bao)溶脹破碎(sui)。

4）將(jiang)標(biao)本(ben)於(yu)2-8 ^oC 1500×g 離(li)心10 分鐘，收集(ji)上(shang)清(qing)備用。

5. 細(xi)胞(bao)培養上(shang)清(qing)或其它(ta)生物(wu)標(biao)本(ben)：

請 1000×g 離(li)心 20 分鐘，取(qu)上(shang)清(qing)即可(ke)檢測(ce)，或將(jiang)上(shang)清(qing)置(zhi)於(yu)-20^oC 或-80^oC 保(bao)存，但應(ying)避免反(fan)復(fu)凍融(rong)。

註(zhu)意：

1.         以(yi)上(shang)標(biao)本(ben)均(jun)需(xu)密封(feng)保(bao)存，4^oC保(bao)存應(ying)小於(yu)1周，-20^oC不(bu)應(ying)超(chao)過1個(ge)月(yue)，-80^oC不應超(chao)過2個(ge)月(yue)。

2.         標(biao)本(ben)使用前應(ying)緩(huan)慢均(jun)衡(heng)至室溫，不應加(jia)熱使之融(rong)解。

3.         實驗前紅(hong)細(xi)胞(bao)裂解液必須(xu)用標(biao)準品稀(xi)釋液(ye)稀(xi)釋。

豬(zhu)補體(ti)成(cheng)分5a(C5a)ELISA試劑(ji)盒(he)試劑(ji)準備

1.         使用前將(jiang)所有(you)的試劑(ji)和(he)標(biao)本(ben)緩(huan)慢(man)均(jun)衡(heng)至室溫(18-25oC)，試劑(ji)不(bu)能直接在37oC溶解。

2.         標(biao)準品(凍(dong)幹(gan)品(pin))：每(mei)瓶標(biao)準品加(jia)入標(biao)準品稀(xi)釋液(ye)1mL，蓋好(hao)後(hou)室溫靜(jing)置(zhi)大約10分鐘，同時反復(fu)顛倒/搓動以助(zhu)溶解，其濃(nong)度(du)為(wei)10ng/mL。準備7個(ge)稀(xi)釋標(biao)準品的EP管(guan)，每(mei)個(ge)EP管(guan)中加(jia)入150μL的標(biao)準品稀(xi)釋液(ye)，如(ru)圖所(suo)示依次(ci)倍(bei)比(bi)稀(xi)釋成(cheng)不(bu)同(tong)的梯度(du)， 標(biao)準品稀(xi)釋液(ye)(0pg/mL)直接作(zuo)為(wei)空(kong)白孔。為(wei)保(bao)證(zheng)實驗結果有效性(xing)，每(mei)次(ci)實驗請使用新(xin)的標(biao)準品溶液(ye)。

3.         濃(nong)洗滌液(ye)：用580mL蒸(zheng)餾(liu)水或去離(li)子水(shui)將(jiang)20mL濃(nong)洗滌液(ye)稀(xi)釋至(zhi)600mL，進(jin)行30倍(bei)稀(xi)釋。

標(biao)本(ben)處(chu)理(li)

1.         本(ben)公(gong)司(si)只對試劑(ji)盒(he)本(ben)身(shen)負(fu)責(ze)，不(bu)對(dui)因使用該(gai)試劑(ji)盒(he)所造(zao)成的樣(yang)本(ben)消(xiao)耗(hao)負(fu)責(ze)，請使用者使用前充分考(kao)慮(lv)到(dao)樣(yang)本(ben)的可(ke)能使用量(liang)，預(yu)留充足的樣(yang)本(ben)。

2.         實驗前應(ying)預(yu)測(ce)標(biao)本(ben)含(han)量(liang)，如(ru)果(guo)標(biao)本(ben)濃(nong)度(du)過高，應(ying)對標(biao)本(ben)進(jin)行稀(xi)釋，使稀(xi)釋後(hou)的標(biao)本(ben)符(fu)合試劑(ji)盒(he)的檢測(ce)範(fan)圍(wei)，計算(suan)時再乘(cheng)以相應的稀(xi)釋倍(bei)數。

3.         若(ruo)所(suo)檢樣(yang)本(ben)不(bu)包含(han)在說明(ming)書所列樣(yang)本(ben)之中(zhong)，建議進(jin)行預(yu)實驗驗證(zheng)其(qi)有(you)效性，並(bing)註(zhu)意留(liu)存樣(yang)本(ben)。

4.         使用化學(xue)裂解液制(zhi)備(bei)的組織(zhi)勻(yun)漿(jiang)或細(xi)胞(bao)提取(qu)液可(ke)能會(hui)由(you)於(yu)某(mou)些(xie)化學(xue)物(wu)質(zhi)的引入導(dao)致(zhi)  ELISA實驗結果偏差。

5.         若(ruo)樣(yang)本(ben)為(wei)細(xi)胞(bao)培養上(shang)清(qing)，因該(gai)類(lei)樣(yang)本(ben)幹(gan)擾(rao)因素(su) 較(jiao)多(duo)，如(ru)：細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態(tai)、細(xi)胞(bao)數量(liang)、采(cai)樣(yang)時間等，所以可(ke)能存在檢測(ce)不出的情況(kuang)。

6.         某(mou)些(xie)天然(ran)蛋(dan)白或重組(zu)蛋(dan)白，包括(kuo)原(yuan)核及真(zhen)核重組(zu)蛋(dan)白，可(ke)能因(yin)為(wei)與本(ben)產(chan)品(pin)所使用的檢測(ce)抗體(ti)及捕(bu)獲抗(kang)體(ti)不(bu)匹(pi)配，而不被檢測(ce)出。

7.         建(jian)議(yi)使用新(xin)鮮樣(yang)本(ben)，保(bao)存時間過長(chang)可(ke)能會(hui)存在蛋(dan)白降(jiang)解或變性(xing)導(dao)致(zhi)實驗結果偏差。

豬(zhu)補體(ti)成(cheng)分5a(C5a)ELISA試劑(ji)盒(he)操(cao)作(zuo)步(bu)驟

1.         加(jia)樣(yang)：分別設(she)空(kong)白孔（空(kong)白對照孔不加(jia)樣(yang)品及酶(mei)標(biao)試劑(ji)，其(qi)余各步(bu)操(cao)作(zuo)相同(tong)）、標(biao)準孔、待(dai)測(ce)樣(yang)品孔。在酶(mei)標(biao)包被板上(shang)標(biao)準品準確加(jia)樣(yang)50μl，待(dai)測(ce)樣(yang)品孔中先加(jia)樣(yang)品稀(xi)釋液(ye)40μl，然(ran)後(hou)再加(jia)待(dai)測(ce)樣(yang)品10μl（樣(yang)品*終(zhong)稀(xi)釋度(du)為(wei)5倍(bei)）。加(jia)樣(yang)將(jiang)樣(yang)品加(jia)於酶(mei)標(biao)板(ban)孔底部，盡(jin)量(liang)不(bu)觸(chu)及孔壁，輕輕晃(huang)動混勻(yun)。

2.         溫(wen)育(yu)：用封(feng)板膜(mo)封(feng)板後置(zhi)37℃溫(wen)育(yu)30分鐘。  

3.         配(pei)液(ye)：將(jiang)20倍(bei)濃(nong)縮(suo)洗滌液(ye)用蒸餾(liu)水20倍(bei)稀(xi)釋後(hou)備(bei)用

4.         洗滌：小(xiao)心揭掉(diao)封(feng)板膜(mo)，棄(qi)去液體(ti)，甩(shuai)幹(gan)，每(mei)孔加(jia)滿洗滌液(ye)，靜(jing)置(zhi)30秒後棄(qi)去，如(ru)此(ci)重復(fu)5次(ci)，拍(pai)幹(gan)。

5.         加(jia)酶(mei)：每(mei)孔加(jia)入酶(mei)標(biao)試劑(ji)50μl，空(kong)白孔除外。

6.         溫(wen)育(yu)：操(cao)作(zuo)同3。

7.         洗滌：操(cao)作(zuo)同5。

8.         顯(xian)色(se)：每(mei)孔先加(jia)入顯(xian)色(se)劑(ji)A50μl，再(zai)加(jia)入顯(xian)色(se)劑(ji)B50μl，輕輕震蕩混勻(yun)，37℃避光(guang)顯色15分鐘.

9.         終(zhong)止：每(mei)孔加(jia)終(zhong)止液50μl，終(zhong)止反應（此時藍色立(li)轉(zhuan)黃(huang)色）。

10.     測(ce)定：以空(kong)白空(kong)調零(ling)，450nm波長(chang)依序(xu)測(ce)量(liang)各(ge)孔的吸光度(du)（OD值(zhi)）。 測(ce)定應在加(jia)終(zhong)止液後15分鐘以內進(jin)行。

註(zhu)意：

1.         試劑(ji)準備：準備壹次(ci)實驗所需(xu)要(yao)的酶(mei)標(biao)條(tiao)，其(qi)它(ta)的可(ke)從(cong)微(wei)孔板上(shang)拆(chai)下(xia)，密封(feng)，按(an)照說明(ming)書要求保(bao)存，以(yi)備下(xia)次(ci)使用。

2.         加(jia)樣(yang)：實驗操(cao)作(zuo)中請使用壹次(ci)性的吸頭，避免(mian)交(jiao)叉汙(wu)染。加(jia)樣(yang)時註(zhu)意不(bu)要(yao)有(you)氣(qi)泡(pao)，將(jiang)樣(yang)品加(jia)於酶(mei)標(biao)板(ban)底(di)部，盡(jin)量(liang)不(bu)觸(chu)及孔壁，輕輕晃(huang)動混勻(yun)。加(jia)樣(yang)或加(jia)試劑(ji)時，**個(ge)孔與*後壹個(ge)孔加(jia)樣(yang)之間(jian)的時間間隔如(ru)果(guo)太大，將(jiang)會導(dao)致(zhi)不(bu)同的“預(yu)溫育(yu)”時間，從(cong)而(er)明顯(xian)地(di)影(ying)響到測(ce)量(liang)值(zhi)的準確性及重(zhong)復(fu)性。因(yin)此，壹次(ci)加(jia)樣(yang)時間(包括(kuo)標(biao)準品及所(suo)有樣(yang)品)*好(hao)控(kong)制(zhi)在10分鐘內。推薦設(she)置(zhi)復(fu)孔進(jin)行實驗。

3.          溫(wen)育(yu)：為(wei)防(fang)止樣(yang)品蒸(zheng)發，實驗時請將(jiang)加(jia)上(shang)蓋或覆(fu)膜(mo)的酶(mei)標(biao)板(ban)置(zhi)於(yu)濕盒內，以避(bi)免(mian)液(ye)體蒸發(fa)，洗板後(hou)應盡(jin)快進(jin)行下(xia)步(bu)操(cao)作(zuo)，任何(he)時侯(hou)都(dou)應(ying)避(bi)免酶(mei)標(biao)板(ban)處(chu)於(yu)幹(gan)燥(zao)狀(zhuang)態(tai)，同時應嚴格遵守(shou)給定的溫育(yu)時間和(he)溫(wen)度。

4.         洗滌：充分的洗滌非(fei)常重要(yao)，在每(mei)次(ci)洗滌過程中，都要將(jiang)洗滌液(ye)完全(quan)甩(shuai)幹(gan)。洗滌過程中反應孔中殘留(liu)的洗滌液(ye)應在濾紙(zhi)上(shang)拍(pai)幹(gan)，勿(wu)將(jiang)濾紙(zhi)直接放入反(fan)應(ying)孔中吸水，同(tong)時要消(xiao)除(chu)板底殘留(liu)的液體(ti)和(he)手(shou)指印(yin)，避免影(ying)響(xiang)*後的酶(mei)標(biao)儀(yi)讀(du)數。如(ru)果(guo)有自(zi)動洗板機(ji)，應在熟練使用後再(zai)用到正式實 驗過程中。

5.         反(fan)應(ying)時間的控制(zhi)：加(jia)入底(di)物(wu)後請定時觀(guan)察反應(ying)孔的顏色變化(比(bi)如(ru)，每(mei)隔10分鐘觀(guan)察壹次(ci))，如(ru)顏色較(jiao)深(shen)，請提(ti)前(qian)加(jia)入終(zhong)止液終(zhong)止反應，避免(mian)反(fan)應(ying)過強從(cong)而(er)影響(xiang)酶(mei)標(biao)儀(yi)光(guang)密(mi)度(du)讀數。

6.         底(di)物(wu)：底(di)物(wu)請避(bi)光(guang)保(bao)存，在儲存和(he)溫(wen)育時避免強光直接照射(she)。

7.         如(ru)果(guo)實驗室內濕度低於60%，推薦使用加(jia)濕器(qi)提高濕度水平。

 實驗流(liu)程

1.         實驗前標(biao)準品、試劑(ji)及樣(yang)本(ben)的準備；

2.         加(jia)樣(yang)（標(biao)準品及樣(yang)本(ben)）50μL，37℃孵(fu)育(yu)30分鐘；

3.         洗板5次(ci)，加(jia)酶(mei)標(biao)試劑(ji)50ul，37℃孵(fu)育(yu)半(ban)小時；

4.         洗板5次(ci)；加(jia)入顯(xian)色(se)液A，B各50ul,37℃孵(fu)育(yu)顯(xian)色15分鐘

5.         加(jia)終(zhong)止液50μL，立即450nm讀(du)數。

6.    計算(suan)

豬(zhu)補體(ti)成(cheng)分5a(C5a)ELISA試劑(ji)盒(he)計算(suan)

各(ge)標(biao)準品及樣(yang)本(ben)O.D.值(zhi)扣(kou)除(chu)空(kong)白孔O.D.值後作(zuo)圖(七(qi)點圖)，如(ru)設(she)置(zhi)復(fu)孔，則應取(qu)其平(ping)均(jun)值(zhi)計算(suan)。以(yi)標(biao)準品的濃(nong)度(du)為(wei)縱坐(zuo)標(biao)(或對數坐(zuo)標(biao))，O.D.值(zhi)為(wei)橫(heng)坐(zuo)標(biao)(或對數坐(zuo)標(biao)），繪(hui)出標(biao)準曲(qu)線(xian)(*佳(jia)方(fang)程式應依回歸方(fang)程計算(suan)的R2值來(lai)定，以R2值越趨(qu)近(jin)於(yu)1為(wei)好(hao))。推薦使用專(zhuan)業(ye)制(zhi)作(zuo)曲(qu)線(xian)軟(ruan)件進(jin)行分析，如(ru)curve expert 1.30，根(gen)據樣(yang)品O.D.值(zhi)，由(you)標(biao)準曲(qu)線(xian)查(zha)出相(xiang)應(ying)的濃(nong)度(du)，乘(cheng)以稀(xi)釋倍(bei)數；或用標(biao)準物(wu)的濃(nong)度(du)與O.D.值(zhi)計算(suan)出標(biao)準曲(qu)線(xian)的回歸方(fang)程式，將(jiang)樣(yang)品的O.D.值代(dai)入方(fang)程式，計算(suan)出樣(yang)品濃(nong)度(du)，再乘(cheng)以稀(xi)釋倍(bei)數，即為(wei)樣(yang)品的實際(ji)濃(nong)度(du)。

 特異(yi)性(xing)

本(ben)試劑(ji)盒(he)用於檢測(ce)豬補體(ti)成(cheng)分5a(C5a)，經檢測(ce)與其(qi)它(ta)相似物(wu)質(zhi)無(wu)明(ming)顯(xian)交叉反(fan)應。

由(you)於(yu)受(shou)到(dao)技術及樣(yang)本(ben)來(lai)源(yuan)的限制(zhi)，不(bu)可(ke)能完(wan)成(cheng)對(dui)所有相關(guan)或相似物(wu)質(zhi)交(jiao)叉反(fan)應檢測(ce)，因此(ci)本(ben)試劑(ji)盒(he)有可(ke)能與(yu)未(wei)經檢測(ce)的其它(ta)物(wu)質(zhi)有(you)交(jiao)叉反(fan)應。

 精密度(du)

精密度(du)用樣(yang)品測(ce)定值的變異(yi)系(xi)數CV表(biao)示。CV(%) = SD/mean×100

批內差：取(qu)同批次(ci)試劑(ji)盒(he)對低(di)、中(zhong)、高值(zhi)定值樣(yang)本(ben)進(jin)行定量(liang)檢測(ce),每(mei)份樣(yang)本(ben)連(lian)續測(ce)定20 次(ci)，分別計算(suan)不(bu)同濃(nong)度(du)樣(yang)本(ben)的平均(jun)值(zhi)及SD值(zhi)。

批間差(cha)：選取(qu)3個(ge)不(bu)同(tong)批次(ci)的試劑(ji)盒(he)分別對低、中(zhong)、高值(zhi)定值樣(yang)本(ben)進(jin)行定量(liang)測(ce)定，每(mei)個(ge)樣(yang)本(ben)使用同壹試劑(ji)盒(he)重復(fu)測(ce)定8次(ci)，分別計算(suan)不(bu)同濃(nong)度(du)樣(yang)本(ben)的平均(jun)值(zhi)及SD值(zhi)。

批內差： CV<10%

批間差(cha)： CV<12%

豬(zhu)補體(ti)成(cheng)分5a(C5a)ELISA試劑(ji)盒(he)穩定性

經測(ce)定，試劑(ji)盒(he)在有效(xiao)期(qi)內按(an)推薦溫(wen)度(du)保(bao)存，其(qi)活性(xing)降(jiang)低率小(xiao)於5%。

為(wei)減小外部因素對(dui)試劑(ji)盒(he)破壞(huai)前(qian)後(hou)檢測(ce)值的影響(xiang)，實驗室的環(huan)境(jing)條件需盡(jin)量(liang)保(bao)持(chi)壹致，尤(you)其(qi)是實驗室內溫度(du)、濕度及溫(wen)育條件。其次(ci)由(you)同(tong)壹實驗員來(lai)進(jin)行操(cao)作(zuo)可(ke)減少(shao)人(ren)為(wei)誤(wu)差(cha)。